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Practica 12

Microorganismos
productores de auxinas y
siderforos
Objetivo
El alumno aislara de diferentes muestras de suelos bacterias con
carctersticas como promotores de crecimiento vegetal (productores de cido
indol-actico y siderforos)
Siderforos

Medio agar nutritivo con cromo azurol S


(CAS)
Bacillus atrophaeus

Colonias de 2 a 4mm de dimetro, beta hemolticas con


hemolisis completa, que pueden se de aspecto liso, mucoide o
rugoso.
Los bordes pueden ser ondulados o extendidos en el medio y
ocasionalmente dan la apariencia de cultivos mixtos.

Bacillis drentensis

Colonias Grandes, planas, blanquecinas, forma


irregular, bordes lobulados, dan la apariencia de estar
secas, tambin se observa una protuberancia en el
centro de las colonias lo cual les da una apariencia de
huevo estrellado
Azospirillum brasilense,
La prueba positiva para la produccin de siderforos fue
el vire del medio de azul a anaranjado (Neilands y
Leong, 1986; Alexander y Zuberer, 1991).

Pseudomonas mohnii

Centro ms denso y borde irregular, podemos


encontrar otros tipos de colonias, con forma redonda,
pequeas, convexas y lisas o colonias mucosas, opacas
viscosas y convexas.
Cromo-Azurol S
Este mtodo esta basado en cambio de color del compuesto cromo azurol S siendo este
azul al estar unido al hierro, y naranja en su forma libre.
Resultados cido Indol Acetico

Presencia de Acido Indol actico Presencia de Acido Indol actico


++++ ++
Resultados cido Indol Acetico

Presencia de Acido Indol actico


++
cido Indol Acetico (AIA)

La presencia de Indol es directamente proporcional a la intensidad del color


(rosa-morado) el cambio de color es debido al resultado de una reaccin
oxidativa a partir de cido sulfrico donde por medio de una transaminacin es
sustitudo un grupo amino por el cloro proveniente del FeCl3.

-cido indol actico


-Indol
-5-Hidroxi indol actico: 5 OHIAA
-Indol acetamida: IAM
-Triptamina : IPyA
SIMBIOSIS
Anabaena
azolla
Pinas

Raquis

Rizoide

Azolla Frond
a
Microsimbionte (Anabaena spp)

Pelo de
transferenci
a

Heterocisto
Nombre de Estructura Medio de cultivo
Macrosimbionte Microsimbionte Funciones Esquemas
la practica caracteristica empleado
La cavidad foliar se forma para
proteger a Anabaena del medio
externo y formar la asociacin
simbiotica, el pelo de
transferencia es utilizado para
Cavidad foliar y
transportar el amonio producido
Simbiosis pelos de tranferencia
por la cianobacteria. Mientras
Anabaena- Azolla Anabaena (macrosimbionte) y BG11
Azolla heterocisto que el heterocisto es una
(microsimbionte) estructura cuya funcin es
especialmente la fijacin del
nitrgeno, ya que aqu se protege
a la nitrogenaa del oxgeno.
SIMBIOSIS DE RIZOBIOS CON
PLANTAS LEGUMINOSAS
Prctica 14
M A C R O S I M B I ON TE
Familia Leguminosae

Macrosimbionte
Orden Fabales

Cesalpinoideas

Subfamilias Mimosoideas

Papilionoideas

Distribucin Cosmopolita
M I C R O S I M B I O N T E

Rhizobium
Bradyrhizobium
Rhizobium

Bacilo corto gram Acidifican el medio y Colonias blancas o


Crecimiento rpido
negativo liberan polisacridos beige

circulares, convexas
3 a 4 horas y mucilaginosas
Bacilo corto gram
negativo

Aerobio
No esporulado
Hetertrofos
Requieren de
vitaminas y
aminocidos
Bradyrhizobium circulares, rara vez
Colonias translcidas, blancas y
convexas

Crecimiento lento 6 a 8 horas

Alcalinizan el medio
S I M B I O S I S
Proceso de
infeccin
1. Reconocimiento (planta y bacteria) y
adherencia de la bacteria a los pelos
radicales.
2. Invasin del pelo radical y formacin de un
canal (o hilo) de infeccin.
3. Desplazamiento de las bacterias hacia la
raz principal a travs del canal de infeccin.
4. Diferenciacin de las bacterias a
bacteroides.
5. Divisin de las clulas bacterianas y
vegetales y formacin del ndulo radical
maduro.
Ndulos
Resultados esperados
Morfologa microscpica

Bacilo corto gram


negativo
Morfologa
colonial
Morfologa colonial

Bradyrhizobium Rhizobium
Modificacin
del pH original
Resultados de la
prctica
Observacin de
bacteroides

Bacteroide
Los bacteroides son las
formas diferenciadas
que fijan nitrgeno,
pueden llegar a ser
hasta 40 veces ms
grandes que los bacilos
a partir de los que se
desarrollan.
Morfologa colonial
Caracteristicas

Tamao 3-4mm
Forma Circular
Color Blancas
Elevacin Convexa
Superficie Lisa
Aspecto Hmedo
Borde Entero
L. Transmitida Opaca
L. Reflejada Brillante
Consitencia Mucoide
Pigmento
No
difusible

Medio de cultivo ELMA - RC


Metabolitos producidos:
cidos orgnicos

Agar-Levadura-Manitol
(ELMA)
con Azul de Bromotimol
Prctica 15
Simbiosis Frankia-plantas
actinorrzicas
Objetivos
Conocer y describir dos plantas actinorrzicas con uso potencial en Mxico: Alnus acuminata y
Casuarina equisetifolia

Describir los ndulos actinorrzicos de Alnus acuminata y/o Casuarina equisetifolia y compararlos
con los nduos de las leguminosas asociadas a rizobios

Identificar a la actinobacteria Frankia dentro de las clulas corticales de los ndulos


Clulas de la Endodermis
corteza

Cilindro
vascular
Clulas
de la
corteza

Micelio
de
Frankia
MEDIO DE CULTIVO
NOMBRE O FORMA DE ESTRUCTURAS CARACTERISTICAS FUNCIN
OBSERVACIN
Tamao entre 15 y 30
m de altura, copa
angosta irregular y
Macroscpicas abierta, corteza de
Tronco color pardo, lisa, raz
Hoja sistema radicular Proteccin,
Alnus acuminata
Macrosimbionte Estrobilo masculino y femenino y amplio, se extiende proporcin de
Casuarina equisetifolia
Semillas cerca de la siperficie Mo, Ca, Na, Fe,
del suelo; hojas de
Ndulos multilobulados color verde oscuro y
brillante en el haz,
dispuestas en espiral,
Ndulos y elipticas.
preparaciones fijas Endosimbionte;
Bacterias fijadoras de
nitrogeno; Gram
positivas, con
Microscpicas hifas,forma nodulos
fijadores de nitrogeno,
Provee P, N
Microsimbionte Frankia sp Micelio microsifonado crecimiento lento,
fijado.
Vescula pleomrfico; crecen en
Esporas forma de filamentos y,
como la mayora de
los actinomicetos, las
hifas se diferencian en
esporangios
Hoja de Casuarina
equisetifolia
Ramas de 3 a 5 mm de
dimetro.
Hojas en forma de aguja.
Son articuladas, es decir que
estn formadas de piezas
iguales ensambladas.
Superficie estriada.
Brotan en verticilos y
permanecen colgantes.
Las puntas de las hojillas
aparecen como dientes.
Hoja de Alnus
acuminata
Alternas
Simples
Ovoideas
pice acuminado
Borde aserrado.
Practica16.
ECTOMICORRIZAS
Junipierus
chinensis
Fagus
grandifolia

Pinada
irregular
Aterciopelada
Pinus sp.

No
ramificada
Fibrosa
Clula
Haz
s de la
vascular
cortez
a

Manto
Red de Fngico
Harting

Corte transversal de ectomicorriza


Esporas de Pisolithus
tinctorius
Esporas de Sleroderma
fexense
Micorriza arbuscular
Hifa interna

Hifa externa
Vesculas endfitas
Vescula endfita

Clulas vegetales
Arbsculo
Nombre de la Macrosimbion Microsimbiont Estructuras Funciones Esquemas Medio de
prctica te e caracterstica cultivo
s empleado
Micorriza Hongos del Arbsculos Captura de No aplica
arbuscular Phylum Vesculas nutrientes:
Glomeromycota, fsforo, azufre,
de las familias nitrgeno y
Gigasporaceae, micronutrientes
Acaulosporaceae del suelo.
y Glomeraceae.