PCR en

teniasis
Bovina
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Presentado Por:
Oscar Ivan Ramos
 Que es el PCR
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Es una técnica molecular utilizada para realizar una
ampliación especifica de algún segmento del ADN que
se desea analizar a fondo, mediante un termociclador.
 Introducción
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 La teniasis Bovina por Taenia solium es una
enfermedad con importantes consecuencias para la
salud pública, la cual causa una perdida económica
de producción.
 se realizan pruebas de PCR anidada tso301 con el fin
de diagnosticar e iniciar un tratamiento adecuado
 Objetivo
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 El objetivo de este estudio fue desarrollar un rápido
y sensible de PCR basado en la técnica para la
detección específica y el diagnóstico de la teniasis
debido a T. solium directamente a partir de muestras
fecales
 Materiales y métodos
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 Las tenias de los individuos infectados.
Las tenias se obtuvieron de pacientes infectados de forma natural. los
proglótidos fueron identificados como
 T. solium  o T. saginata por PCR-REA

 Las muestras positivas en heces.

Un total de 35 muestras fecales recogidas de pacientes con teniasis; 32
pacientes fueron identificados como T. solium transportistas y
3, T. saginata transportistas.

 Primers.
Los cebadores se diseñaron basándose en la secuencia del gen que
codifica publicado recientemente la T. solium oncosfera proteína
específica Tso31
 Condiciones de la PCR.
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Amplificación por PCR se realizó en un termociclador MJ Research
PTC200, El exterior de amplificación de PCR consistió en una
etapa de desnaturalización inicial a 95 ° C durante 3 min, seguido
por 25 ciclos de amplificación, cada uno que consta de un paso de
desnaturalización a 95 ° C durante 30 s, hibridación a 55 ° C
durante 30 s, y extensión a 72 ° C durante 1 min.
La sensibilidad analítica de
la Tso31 PCR anidada
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Una muestra fecal, determinado a ser negativo tanto
por microscopía y una prueba de coproantígenos, se
utilizó para evaluar el límite de detección de la PCR
anidada Tso31. 
 Pruebas de campo
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A fin de probar la Tso31 nested-PCR ensayo y para
confirmar los resultados de la PCR en muestras
archivadas, se realizó un estudio de casos y controles
utilizando muestras obtenidas antes del tratamiento de
una población en un área de endemicidad en Puno,
Perú. 
Amplificación anidada Tso31-PCR usando ADN extraído de diferentes fuentes. La
electroforesis se realizó utilizando 5 l de producto de amplificación. Los carriles 1 y 13,
escaleras 100 pb; carriles 2 a 8, ADN de una muestra contaminada con 100, 50, 20, 10,
5, 2, 1 y T. solium huevos, respectivamente; carril 9, ADN de
una T. solium proglótide; carril 10, el ADN de una T. saginata proglótide; carril 11, el
ADN de una T. solium muestra de heces -positivo; carril 12, el ADN de
una T. saginata muestra de heces -positivo.
 Resultados
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 Todas las 25 muestras de ADN extraídas
de T. solium proglótidos fueron positivos por PCR
anidada Tso31. 
 Ninguna de las 17 muestras de ADN extraídas
de T. saginata proglótidos amplificado por PCR
anidada Tso31. 
 Tso31 PCR anidada con muestras
definidas en condiciones de laboratorio
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Un total de 31 muestras fecales de los 32
conocida como positiva para T. solium se
amplificaron utilizando la PCR anidada Tso31
descrito anteriormente. 

Usando T. solium muestras positivas que se identificaron previamente

después del tratamiento (archivados muestras de heces), la sensibilidad y
especificidad de la PCR anidada fueron Tso31 97% y 100%, respectivamente
 Discusión
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 Informes sobre la detección específica de T. solium o la
diferenciacion de T. solium de T. saginatadirectamente a
partir de muestras de heces son escasos, probablemente
debido a las dificultades encontradas en la extracción de
ADN a partir de huevos de parásitos y la presencia de
inhibidores de la PCR, que afecta a la sensibilidad de los
ensayos de PCR. 
La sensibilidad analítica de la PCR anidada Tso31. Los carriles 1 y 10,
escaleras 100 pb. ADN extraído de T. solium quistes se cuantificaron
espectrofotométricamente y se diluyeron. PCR se llevó a cabo utilizando
diferentes concentraciones de ADN de la siguiente manera; carriles 2 a 9, 10
ng, 1 ng, 100 pg, 10 pg, 1 pg, 100 fg, 10 fg, y 1 fg, respectivamente.
 conclusiones
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 La PCR anidada Tso31 aquí descrita podría ser una
herramienta útil para el diagnóstico precoz y la
prevención de la teniasis / cisticercosis.

 En los seres humanos, la etapa larval ( T. solium ) a

menudo se localizan en el sistema nervioso central,
causando un trastorno clínico conocido como
neurocisticercosis, una de las principales causas de
convulsiones y epilepsia en la mayor parte del
mundo en desarrollo.
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 https://www.youtube.com/watch?v=TalHTjA5gKU