Microscopía

electrónica de
criofractura
FFEM (Freeze Fracturing Electronic
Microscopic)

EQUIPO 6
RAMÍREZ RODRÍGUEZ ALAN
RODEA CHÁVEZ KAREN DANIELA
Historia
 La técnica de la criofractura fue desarrollada de manera temprana en la década
de 1950 por el científico Russell Steere.

 No fue hasta 1960, cuando Daniel Branton comienza investigar mediante

criofractura y a exhibir las imágenes obtenidas.

 Esta técnica llegó a su auge como fuente de investigación celular en las décadas
de los 70 y 80.

 Ahora se usa en todo el mundo para estudios topográficos, siendo el único

método disponible para producir una imagen directa de alta resolución de
grandes áreas de superficies de membrana y caras de fracturas internas.
Uso
 Visualizar la estructura molecular de las superficies internas de las membranas.
 Es de gran utilidad para observar la organización lipídica que no se encuentra en
forma de bicapas.
 Esta técnica de observación es considerada como el procedimiento más aplicado
para la visualización de estructuras lipídicas macromoleculares.
 Ha contribuido considerablemente a la comprensión de la forma celular para la
función celular relacionada.
Técnica

 Congelación rápida de muestra

(criopreservadores).

 Corte o fractura física de la misma

(navaja enfriada).

 Planos de segmentación.
Replica de metal-carbono sobre la
superficie.

Platino u oro.

Depositan oblicuamente (gránulos)

un metal pesado seguido de una capa
fortalecedora de carbono.
 La capa de carbono
es traslúcida para el
haz de electrones
del microscopio
electrónico.
 El tejido orgánico se
elimina con
detergentes
 Detectores
electrónicos
 Electrones de
retrodispersión
 Electrones
secundarios
Investigación
Referencias
 Ascaso, C., & Rapsch, S. (1). ESTUDIO ULTRAESTRUCTURAL POR CRIOFRACTURA DE
LOBARIA PULMONARIA (L.) HOFFM. Anales De Biología, (1), 135-143. Recuperado a partir
de https://revistas.um.es/analesbio/article/view/33391
 Mühlethaler K. (1982). Técnicas de congelación-fractura aplicadas a las membranas
biológicas. En: Martonosi AN (eds) Membranas y transporte. Springer, Boston, MA
 Portillo, S.A.(1994).Uso de criofractura para observación de la ultraestructura en Candida
albicans con microscopía electrónica de barrido . Rev. Lat. Amer. Microbiol. 36(1). 1-7
 Steere, R.L. (1957). Electron microscopy of structural detail in frozen biological specimens.
J. Biophys. Biochem. Cytol. 3, 45–60
 Sternberg, Brigitte , Sorgi, Frank L. y Huang, Leaf ( 1994 ), Nuevas estructuras en
formación compleja entre ADN y liposomas catiónicos visualizados por microscopía
electrónica de congelación y fractura ,  FEBS Letters , 356 , doi: 10.1016 / 0014-5793 (94)
01315-2
  Wehrli, E., Mühlethaler, K. & Moor, H. (1970).Membrane structure as seen with a double
replica method for freeze-fracturing. Exp. Cell Res. 59, 336–339