Materia: Histología.

Docente: Dr.C.B. Víctor Hugo Fuentes Delgado.

Grupo: 1D

Actividad: Microscopio de Campo Oscuro

Integrantes: Bernal Hermosillo Efrén

Buenrostro Lagos Giovana Paola
Díaz Marín Nataly Marlene
Sánchez Salazar Adriana
Saldaña Badillo Arfaxad

Fecha: 20 de agosto de 2023.

 I. Introducción

De acuerdo con la Real Academia Españolal (RAE) la significación de la palabra

micoscopía es: técnica de construcción de miscroscopis e investigación mediante el
miscrscopio.

En el campo de la histología lo que le interesa no es la construcción del microscopio

sino los tipos de detalles que se pueden observar y que el ojo humano no puede captar,
siendo la resolución una capacidad de los aumentos de una lente para ver lal
separatividad de objetos que a simple vista se ven cercanos unos a otros (Ross, M.H., &
Pawlina, W.(2020).

La base de todo microscopio es el tipo de luz, el condensador y su diafragma ya que de

ello dependerá la manera en la cual la luz se disperse dando la proyección de lo que se
quiere observar. (Del Mazo, V.,A.(2019)).

Entre los microscopios más empleados para el análisis histológico se encuentra el

electrónico de transmisión (MET), electrónico de barrido (MEB), de fuerza
atómica(MFA), campo oscuro y Fluorescente, entre otros no menos importantes.

Los avances de las lentes y las diversas inclusiones como la refracción y tipo de luz son
lo que le ha dado la evolución en buena medida a la ciencia médica.
 II. Antecedentes de la Microscopia

Es importante comenzar por definir qué es un microscopio, de acuerdo cono Ross,

M.H. & Pawlina, W. (2020) es un instrumento con una o varias lentes que sirve para
amplificar una imgen y que permite ver más detalles de lo que es posible a simple vista.

Sin embargo la microscopia nace del interés por observar lo que no se puede ver a
simple vista. El físico Ernest Abbe aporta un condensador con excelente resolución a y
se convierte en accionista de Carl Zeiss quién era mecánico y comerciante trabajaron
juntos para la elaboración del instrumento óptico.

Sin embargo se requería observar de manera más específica y con mayor contraste
entonces el médico Paul Ehrlich quién era conocido por su inclinación por las
vestigaciones inmunológicas a través de tinciones de tejidos así como reacciones
celulares, aporta el colorante fluorescente a través de una luz de onda corta obteniendo
una molécula fluorescente emitiendo luz con onda larga naciendo la microscopía de
fluorescencia.

August Kölher cubría una amplia gama de conocimientos sobre física, química,
zoología, botánica y minerología, como profesor, después de su docotorado Zeiss
Optical Works company lo invita a trabajar hasta ese entonces los microscopios se
iluminaban con lamparas de gas, espejos y fuentes primarias todas ellas insuficientes
para la toma de fotomicrografía, durante su doctorado inventó una lente colectora para
la lampara que le permitía enfocar la fuente de luz en la apertura frontal del
condensador, permitiéndo que este se enfocara en la muestra utilizando un diafragma de
campo y un control de enfoque del condensador.Desarrollando la técnica de
iluminación microscópica, haciendo observaciones de autofluorescencia y aplicación de
luz ultravioleta.
Henry Wilhelm Friedrich Siedenhoff inventa el condensador de campo oscuro junto
con Richard Adolf Zsigmondy y en 1903 desarrollan el microscopio de Campo Oscuro
o también llamado Ultramiscroscopio, para 1912 se modifica en un ultramicroscopio de
inmersión permitiendo la observación de nanopartículas en solución (acuosa).

Fig.1. Ultramicroscopio. Imagen tomada de Ultramicroscopio

de Zsigmondy (2020).

III. Microscopio de Campo oscuro

a) Partes de un Microscopio de Campo Oscuro

 Fig.2. Partes del Microscopio de campo oscuro. Tomada de Página web. Perfil.

De forma general los elementos que integran a este tipo de microscopio es casi idéntica
a otros microscopios básicos, la diferencia se basa en la modificación del condensador
antes de que llegue la luz a la muestra.

condensador

Fig.3. Condensador colocado en Microscopio de

Campo oscuro moderno. Tomada de

Existen dos tipos de condensadores que se emplean en microscopía de campo oscuro:

 Paraboloide que tiene una superficie espejada. El cristal parabólico está
contenido en un cilindro de latón de 3,7cm de diámetro y 2,8 cm de altura,
solidario aun anillo moleteado de 4cm de diámetro. En el centro existe un disco
de 8mm de diámetro que puede elevarse mediante un tornillo que atraviesa el
cristal.

 Cardioide con dos superficies espejadas. Tiene la misma función que el

paraboloide, pero este condensador de tipo cardioide es de mayor aplicabilidad
para la investigación con Treponemas y Espiroquetas Gram. La variación que
presenta es la adición de una lente tórica
 Fig.4. Tipos de condensadores paraboloide y Cardioide tomada
de: Kalstein (2022).

b) Campo de utilización.
Se emplea cuando se desea revelar bordes o contornos, bacterias sin tinción,
protozoarios, cabellos, diatomeas, particulas coloidales, los cristales y minerales
(por tener alto índice de refracción) entre otros. Se recomienda muestras
transparentes o con poco contraste con el fondo (células vivas u organismos
pequeños).

c) Tipo de iluminación y objetivos.

 Transluminación.- Permite observar partículas o estructuras muy delgadas se
requiere impedir o bloquear los rayos de la luz antes de llegar al
condensador. El resultado es observar imágenes brillantes sobre un fondo
negro.
 Fig.5 a la izquierda bacterias, Fig. 6 ejemplar microscópico, ambas figuras
Vistas a través de microscopio de campo oscuro: Tomadas de Microscopio
De campo oscuro.

 Epi-iluminación.- Sirve para apreciar los bordes de las partículas de forma

correcta. Se emplea luz oblicua, de tal forma que los microscopios de campo
oscuro requieren equiparse con un filtro.
d) Aumentos.
Por su tipo de condensadores los aumentos van de 4.5X hasta 100X, con la
utilización de un diafragma tipo iris para visualizar mejor el objetivo.

e) Resolución.
Debido a que la apertura numércia es quien da la resolución no es la mejor, así
que se recomienda reducir la apertura.

f) Ventajas y desventajas.
 Ventajas.
1. Se puede usar para observar muestras sin tintura o coloración.
2. Permite analizar emementos transparentes, que de otro modo sería difícil
ver.
3. Es ideal para observar el movimiento browniano de partículas.
4. Es la técnica más recomendable para el estudio de organismos como las
espiroquetas.
5. Permite hacer el estudio con la célula viva sin necesidad de fijarla
(matarla).

 Desventajas.
1. Dificultades en la preparación de la muestra a estudiar.
 2. Alto costo en los accesorios que son necesarios para el
funcionamiento del equipo.
3. No es posible ver células específicas, solo bordes o contornos de las
mismas.
4. Baja resolución en las imágenes.

IV. Concluisón

El microscopio de campo oscuro es una herramienta invaluable en la

investigación científica y médica.

Su diseño único permite la observación de miestras que son difíciles de

visualizar bajo la iluminación tradicional.

Al bloquear directamente la luz transmitida, el microscopio de campo

oscira crea un fonde oscuro que realza los detalles de las muestras
transpartentes o refractivas como las células vivas, bacterias y tejidos,
proporcionando una visión detallada de estructuras que de otra manera
serían difíciles de conseguir.

El poder observar muestras de organismos vivos sin tener que fijar o

teñir nulificando la alteración de su comportamiento o morfología a
través de estos mecanismos.
Por último el Microscopio de Campo Oscuro ha revolucionado nuestra
comprensión de la biología celular y ha desempeñado un papel
fundamenta en la investigación médica.

V. Referencias bibliográficas.

1. Del Mazo, A. (2019) Microscopio simple: mucho más que una simple
lupa. Revista Eureka sobre Enseñanza y Divulgación de las Ciencias
16(2), 2401. doi: 10.25267/
Rev_Eureka_ensen_divulg_cienc.2019.v16.i2.2401
2. Ross, M.H., & Pawlina, W.(2020). Histología: texto y atlas. Correlación
con biología molecular y celular. Wolters Kluwer.

Revistas electrónicas

3. Wimmer, W. (2017). Carl Zeiss, Ernst Abbe, and Advances in the Light
Microscope. Microscopy Today, 25(4),50-57.

Páginas Web

Kalstein. (2022, octubre 4). ¿Qué es un microscopio de campo

oscuro? Kalstein. https://kalstein.co.cr/que-es-un-microscopio-de-campo-

oscuro/
Perfil, V. (2017, octubre 30). Microscopio de Campo Oscuro. Blogspot.com.

http://microscopiooscuro.blogspot.com/2017/10/introduccion-enel-presente-

blog-se.htm

The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1908. (s/f). Nobelprize.org. Recuperado el

20 de agosto de 2023, de
https://www.nobelprize.org/prizes/medicine/1908/ehrlich/biographical/

Ultramicroscopio de Zsigmondy. (2020). Quimicafacil.net.

https://quimicafacil.net/infografias/material-de-laboratorio/ultramicroscopio-de-
zsigmondy/

MICROSCOPIO DE ZSIGMONDI – Patrimonio – Universidad de Granada. (s/f).

Ugr.es. Recuperado el 20 de agosto de 2023, de https://patrimonio.ugr.es/obra-
del-mes/microscopio-de-zsigmondi/