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Wa0044.
Wa0044.
DOCENTE
AUTORES
CICLO
II
PIURA-PERÚ
2024
PRÁCTICA N° 5. DETERMINACIÓN DE GLUCOSA PRE Y POST PRANDIAL
I. OBJETIVOS
Evaluar la concentración de glucosa en la sangre pre y postprandial, por el método
de Glucosa oxidasa.
II. INTRODUCCIÓN
Los niveles de azúcar en la sangre están cuidadosamente controlados por
mecanismos en el cuerpo. En ayunas, la mayoría de la glucosa proviene del
hígado, y los niveles deben mantenerse entre 70 y 100 mg/dl después de 8 horas
de no comer. Cuando alguien consume una comida rica en carbohidratos, la
glucosa se absorbe en el intestino delgado y estimula la liberación de insulina
desde el páncreas. La insulina facilita la absorción de glucosa en las células del
hígado, tejido adiposo y músculos, lo que vuelve los niveles de glucosa a la
normalidad. Después de 2 horas de tomar una carga de 75 gramos de glucosa, los
niveles de glucosa en sangre deben estar entre 70 y 140 mg/dl para considerarse
normales. La Prueba de Tolerancia Oral a la Glucosa (PTOG) es un procedimiento
utilizado para evaluar cómo el cuerpo regula los niveles de azúcar en sangre y se
emplea para diagnosticar prediabetes, diabetes mellitus e hipoglucemia reactiva.
Para llevar a cabo la PTOG, después de un ayuno de 8 horas, se toma una muestra
de sangre en ayunas y luego se consume una solución de 75 gramos de glucosa
disuelta en agua en 5 minutos. Después de dos horas, se toma otra muestra de
sangre para evaluar los niveles de azúcar después de la carga. Sin embargo, esta
prueba tiene limitaciones, ya que no siempre está disponible, es invasiva, costosa
y requiere tiempo.
III. MATERIALES
➢ Jeringas descartables de 5 ml,
➢ Algodón
➢ Alcohol medicinal
➢ Lancetas (POR MESA)
➢ Tubos BD Vacutainer sin anticoagulante
➢ Vasos de precipitado,
➢ Tubos de ensayo,
➢ gradillas,
➢ pipetas graduadas,
➢ Micropipetas 1 POR MESA
➢ Baño María,
➢ centrífuga,
➢ espectrofotómetro,
➢ glucómetro
Kit para Glucosa Wiener Lab.:
Reactivo A: Solución conteniendo glucosaoxidasa, peroxidasa, aminofenazona,
hidroxibenzoato y buffer fosfato pH: 7
Estándar: solución de glucosa 1g/l. (100 mg/dl)
Estándar -- 10 ul -- --
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
Observar los resultados en cada uno de los tubos (considerar cambio de color).
V. CONCLUSIONES
● El método Glucosa oxidasa es efectivo para evaluar la concentración de
glucosa, pudiendo observar un aumento significativo en los niveles de glucosa
en la sangre después de la ingesta de alimentos (postprandial) en comparación
con los niveles antes de comer (preprandial).
● Los niveles de azúcar en la sangre son rigurosamente regulados por
mecanismos del cuerpo para mantenerse dentro de un rango específico.
VI. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VII. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición,
Editorial Omega, España, 2011
VIII. ANEXOS
PRÁCTICA N° 6. DETERMINACIÓN DE TRIGLICERIDEMIA
I. OBJETIVOS
Evaluar la concentración sérica de triglicéridos por el método enzimático.
II. INTRODUCCION
Los triglicéridos son lípidos simples formados por esteres de glicerol con tres
ácidos grasos. Estos pueden ser saturados, monoinsaturados o poliinsaturados.
Según ATP III son considerados factores de riesgo coronario; asimismo es un
constituyente del síndrome metabólico (>= 150 mg/dL). Pueden tener origen
exógeno (dieta) o endógeno (síntesis en hígado, tejido adiposo u otros tejidos).
Las hipertrigliceridemias (>=200 mg/dL) pueden ser primarias o secundarias
(obesidad, diabetes)
III. MATERIALES
➢ Gradillas 2 POR MESA
➢ Material de vidrio: vasos
➢ tubos de ensayo
➢ pipetas milimétricas.
Equipo de extracción de muestra:
➢ guantes
➢ alcohol
➢ algodón
➢ agujas N° 20
➢ jeringas x 5 cc.(POR CADA MESA)
Equipos:
➢ centrífuga
➢ baño maría
➢ espectrofotómetro.
➢ Micropipetas x 10 ul 1 POR LABORATORIO
Kit para Triglicéridos Wiener Lab.:
Sol. Estándar: solución de glicerol 2.26 mmol/l (equivale a 2 g/l de trioleína).
Reactivo A: solución conteniendo buffer Good (pH 6.8), clorofenol,
lipoproteinlipasa (LPL), glicerol kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa (GPO),
peroxidasa (POD), adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF).
IV. DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
Determinación de Triglicéridos.
La técnica empleada en la determinación de triglicéridos en sangre, es una técnica
enzimática basada en la siguiente reacción:
Lipoprotein
Triglicéridos lipasa
glicerol + ácidos grasos;
Glicerol kinasa
glicerol + ATP glicerol-1-P + ADP;
Glicerolfosfato
Glicerol-1-P + O2 oxidasa H2O2 + dihidroxiacetonafosfato;
POD
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol quinonimina roja
B S D
Estándar (ul) -- 10 --
𝑭 = 𝟏𝟖. 𝟖𝟔 𝒈/𝒍
V. CONCLUSIONES
Se evaluó la concentración sérica de los triglicéridos por el método enzimático.
VI. EVALUACIÓN
Según rúbrica de evaluación (Anexos)
VII. BIBLIOGRAFÍA
1) Murray R. Harper Bioquímica Ilustrada. 31° edición, México 2019.
2) Nelson D, Cox M. Lehninger. Principios de Bioquímica. 6ta Edición,
Editorial Omega, España, 2011
VIII. ANEXOS