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PRACTICA Nº 09
I. GENERALIDADES
La glucosa es el hidrato de carbono más importante que se utiliza como combustible
energético para todas las células, cuando se encuentra en exceso se almacena (en el hombre)
como un polisacárido el glucógeno o se convierte en grasa para ser utilizados en el momento
oportuno. La patología clínica más común relacionada con el metabolismo de los hidratos de
carbono es la Diabetes Mellitus, síndrome caracterizado por una secreción anormal de insulina
que se refleja en una tendencia a la Hiperglicemia (asociada con glucosuria) y
secundariamente en una variedad de manifestaciones patológicas metabólicas y vasculares
(cetoacidosis, alteraciones vasculares, coma diabético).
El diagnóstico precoz y el control de los pacientes diabéticos tiene por objeto evitar la
Cetoacidosis y las complicaciones de la Hiperglicemia, mediante el tratamiento adecuado.
Los estados de estrés, cólera, ira, provocan un aumento de glucosa en sangre de 10 a 20 mg.
Los valores de glucosa en niños son bajos y en ancianos estos aumentan. La sangre arterial
posee mayor cantidad de glucosa que la sangre venosa.
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OBJETIVOS
Determinación de glucosa en la sangre mediante el método de glucosa-oxidasa.
Aplicación del Espectronic para obtener el grado de absorbancia de la muestra.
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2. OBTENSION DE LA MUESTRA:
a. Extraer la muestra de sangre a dos alumnos voluntarios previamente desinfectados.
b. Luego la sangre extraída se le lleva a centrifugar para lo cual se debe de en un casquete de
la centrifuga la sangre extraída y en el extremo opuesto se coloca otro tubo de ensayo
conteniendo agua en la misma cantidad que la muestra de sangre para contrapesar ambos
tubos, el centrifugado se lleva a cabo por 20 minutos a 1000 rpm.
c. Luego de este tiempo obtendremos en el tubo de la muestra un precipitado y una parte
sobrenadante este último es el suero con el que vamos a trabajar para determinar la
concentración de Glucosa en suero.
d. El suero obtenido debe de estar libre de hemólisis.
3. DETERMINACION DE LA GLUCOSA EN SUERO:
a. Preparar el siguiente sistema. Previamente es necesario recordarle que para proceder a
extraer el suero se debe de realizar con mucho cuidado usando una pipeta graduada y tratando
de que no absorba la parte de la sangre coagulada.
MUESTRA (1) ESTÁNDAR (2) BASAL (3)
REACTIVO 1ml 1ml 1ml
MUESTRA 10ul -------- ---------
STANDAR ------ 10ul --------
b. Mezclar y después llevar a baño maría todos los tubos por espacio de 5 minutos a
temperatura de incubación (37°C).
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c. Leer la densidad óptica con un espectrofotómetro a una Longitud de Onda de 500 nm, con
filtro verde, utilizando cubeta de 1 cm paso de luz.
CALCULOS
TRAMITANCIA = % de luz que pasa
ABSORBANCIA = % de luz que es absorbida A= 2 – log T
[Glucosa] mg/dl = D.O.des. X f
mg Glucosa standar
f = si mg Glucosa standar = 1g/L = 100mg/dl
D.O. Standard
=> reemplazando:
DO Muestra Desconocida
[Glucosa] mg/dl = X 100mg/dl
DO Standard
IV. RESULTADOS
V. DISCUSION
VI. CONCLUSIONES
VII. RECOMENDACIÓN
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I. GENERALIDADES
El glucógeno es una forma de almacenamiento de glucosa fácilmente movilizable. La mayoría
de los residuos de glucosa en el glucógeno están ligados por enlaces glucosídicos alfa 1,4, las
ramificaciones se forman por enlaces glucosídicos alfa 1,6 los cuales se presentan con una
frecuencia aproximada de uno por cada diez residuos.
La cantidad de glucógeno varía según los distintos tejidos y dicha cantidad es afectada por la
dieta y el estado fisiológico. Los 02 lugares principales de almacenamiento de glucógeno son
el hígado y el músculo esquelético. La concentración en el hígado es de un 5% del peso
húmedo (pudiendo alcanzar hasta 10%) y en el músculo es de 1% a 2%. Sin embargo, su
almacenamiento es mayor en el músculo esquelético debido a su mayor masa.
OBJETIVOS
El objetivo de la presente práctica es cuantificar el glucógeno hepático en ayunas y después
de ingerir alimentos
Evaluar los valores encontrados relacionándolos con los factores que determinan su síntesis
y degradación
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3. CALCULOS
mg% de glucógeno = (Lec. TUBO I - Lect. TUBO II) x FACTOR
IV. RESULTADOS
V. DISCUSION
VI. CONCLUSIONES
VII. RECOMENDACION
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