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Lima­Júnior EM et al.

Artículo original

Uso de piel de tilapia (Oreochromis niloticus) como apósito

biológico oclusivo en el tratamiento de quemaduras
El uso de piel de tilapia (Oreochromis niloticus), como apósito biológico oclusivo, en el
tratamiento de heridas por quemadura

El uso de la piel de tilapia (Oreochromis niloticus), como apósito biológico oclusivo, en el

tratamiento de quemaduras

Edmar Maciel Lima­Junior, Nelson Sarto Picollo, Marcelo José Borges de Miranda, Wesley Lyeverton Correia Ribeiro,
Ana Paula Negreiros Nunes Alves, Guilherme Emilio Ferreira, Ezequiel Aguiar Parente, Manoel Odorico Moraes­Filho

RESUMEN

Objetivo: Evaluar el uso de piel de tilapia del Nilo como vendaje oclusivo temporal para quemaduras de segundo grado superficiales y profundas en ratas. Método: Estudio prospectivo, cualitativo
y cuantitativo, en el que se utilizaron 40 ratas Wistar macho sometidas a cirugía para producir una quemadura, divididas aleatoriamente en cuatro grupos: C1, en el que se lavaron las heridas con
solución salina; C2, en el que el apósito abierto se trató con sulfadiazina de plata al 1%; T1, quemadura superficial de segundo grado, tratada con vendaje oclusivo con piel de tilapia; y T2,
quemadura profunda de segundo grado, también tratada con piel de tilapia. Los animales fueron tratados y seguidos durante 22 días. El último día, los animales fueron anestesiados para biopsia,
extracción de sangre y eutanasia.
Resultados: El día 21, los grupos T1 y T2 mostraron una mejor delimitación de los bordes de la herida. El examen microscópico reveló que las muestras de los grupos T1 y T2 estaban
representadas por tejido conectivo fibroso desprovisto de revestimiento epitelial, exhibiendo infiltrado inflamatorio histiolinfoplasmocitario, con diversos grados de intensidad, y permeado por
granulocitos polimorfonucleares de neutrófilos ocasionales restringidos a la región superficial. En los grupos C2, T1 y T2 se observó que el tejido conectivo profundo estaba libre de inflamación.
Los análisis de sangre no mostraron cambios significativos (p<0,05). Conclusión: La piel de tilapia presentó buena adherencia al lecho de heridas inducidas por quemaduras en ratas, interfiriendo
positivamente en el proceso de cicatrización. Estos resultados permiten continuar con las investigaciones para la investigación en seres humanos, para confirmar su seguridad y eficacia como
curativo biológico.
TÍTULOS: Quemaduras. Materiales biocompatibles. Cicatrización. Tilapia. Heridas y Lesiones.

RESUMEN

Objetivo: Evaluar el uso de piel de tilapia como vendaje oclusivo temporal en quemaduras de segundo grado superficiales y profundas en ratas. Métodos: Estudio prospectivo, cualitativo y
cuantitativo, en el que 40 ratas Wistar se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos y se sometieron a cirugía para la producción de quemaduras: C1, las heridas se lavaron con solución salina;
C2, apósito abierto tratado con sulfadiazina de plata al 1%; T1, quemadura superficial de segundo grado tratada con vendaje oclusivo de piel de tilapia; y T2, quemadura profunda de segundo
grado también tratada con piel de tilapia. Los animales fueron tratados durante 22 días consecutivos. Se recolectó sangre para pruebas hematológicas y bioquímicas el último día y los animales
fueron sacrificados para el análisis histológico de la herida. Resultados: El día 21, los grupos T1 y T2 mostraron una mejor delimitación de los bordes de la herida. El examen microscópico reveló
que las muestras de los grupos T1 y T2 estaban representadas por tejido conectivo fibroso desprovisto de revestimiento epitelial, que mostraba un infiltrado inflamatorio linfoplasmocitario, con
diversos grados de intensidad, y permeado por granulocitos polimorfonucleares ocasionales, neutrófilos restringidos al área superficial. En los grupos C2, T1 y T2 el tejido conectivo profundo no
presentó inflamación. Los análisis de sangre no presentaron cambios significativos (p<0,05). Conclusión: La piel de tilapia mostró buen agarre sobre las heridas causadas por quemaduras en las
ratas probadas, interfiriendo positivamente en el proceso de cicatrización y no provocando cambios significativos en los parámetros hematológicos y bioquímicos. Estos resultados permiten
continuar las investigaciones a ensayos clínicos para confirmar la seguridad y eficacia de su uso como apósito biológico.

PALABRAS CLAVE: Quemaduras. Materiales biocompatibles. Cicatrización de la herida. Tilapia. Heridas y Lesiones.

RESUMEN

Objetivo: Evaluar el uso de piel de tilapia del Nilo como vendaje oclusivo temporal para quemaduras de segundo grado superficiales y profundas en ratas. Método: Estudio prospectivo, cualitativo
y cuantitativo, en el que se utilizaron 40 ratas Wistar macho sometidas a cirugía para producir quemaduras, las cuales se dividieron aleatoriamente en cuatro grupos: C1, los animales se lavaron
con solución salina; C2, tratado con sulfadiazina de platino al 1%; T1, quemadura superficial de segundo grado tratada con piel de tilapia; y T2, quemadura profunda de segundo grado tratada con
piel de tilapia. Los animales fueron tratados y monitoreados durante 22 días. El último día fueron anestesiados para biopsia, extracción de sangre y eutanasia. Resultados: El día 21, los grupos
T1 y T2 mostraron una mejor delimitación de los bordes de la herida. El examen microscópico reveló que los grupos T1 y T2 estaban representados por tejido conectivo fibroso de revestimiento
epitelial, mostrando infiltrado inflamatorio histiolinfoplasmocitario, con diferentes grados de intensidad, y permeado ocasionalmente por granulocitos polimorfonucleares neutrófilos restringidos a la
región superficial. En los grupos C2, T1 y T2 se observó que el tejido conectivo profundo estaba libre de inflamación. Conclusión: La piel de tilapia presentó una buena adherencia al lecho de las
heridas inducidas por quemaduras en las ratas, interfiriendo positivamente en el proceso de cicatrización. Estos resultados permiten continuar las investigaciones para el estudio en humanos,
para confirmar su seguridad y eficacia como depósito biológico.

PALABRAS CLAVE: Quemaduras. Materiales biocompatibles. Cicatrización de Heridas. Tilapia. Lesiones y Lesiones.

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Piel de tilapia como apósito biológico en el tratamiento de quemaduras
INTRODUCCIÓN
Una quemadura es una lesión de los tejidos orgánicos, resultante
de un traumatismo de origen térmico, que varía desde una pequeña
ampolla hasta formas graves, capaces de desencadenar respuestas
sistémicas proporcionales a la extensión y profundidad. Pueden provocar
desfiguración, discapacidad e incluso la muerte1 .
Se han realizado innumerables estudios tratando de encontrar
apósitos que reduzcan los efectos de la contaminación en las lesiones,
favorezcan el proceso de cicatrización y ofrezcan mejores resultados
estéticos. Los apósitos, materiales o productos utilizados para tratar u
ocluir la herida, impregnados o no con agentes tópicos, pueden ser
primarios, cuando se colocan directamente sobre la lesión, o secundarios,
cuando su función es cubrir los apósitos primarios2 .
Los sustitutos temporales de piel pueden utilizarse en apósitos
oclusivos, que son materiales efectivos en el tratamiento de quemaduras
duras superficiales recientes y también para cubrir la piel, en espera del
injerto definitivo. Pueden cambiarse a intervalos regulares o mantenerse
hasta la cicatrización o el injerto, si la adherencia es buena o no hay
infección2 .
Los sustitutos de piel se han considerado útiles en el tratamiento de
quemaduras superficiales, ya que reducen la frecuencia de cambios de
apósitos. Sin embargo, estos materiales son caros y no efectivos para el
tratamiento de quemaduras profundas. Debido a los altos costos de los
apósitos oclusivos sintéticos o biosintéticos, se han buscado materiales
biológicos alternativos para el tratamiento local de heridas por
quemaduras3 .
La piel de tilapia del Nilo (Oreochromis niloticus) aparece como un
posible subproducto, con aplicabilidad clínica de nuevos biomateriales
utilizables para bioingeniería. Perteneciente a la familia de los cíclidos,
es originario de la cuenca del río Nilo, en el este de África, y está muy
difundido en las regiones tropicales y subtropicales. La piel de este
pescado es un producto noble y de gran calidad, ya que posee una
resistencia peculiar como el cuero, sin embargo, no existen estudios que
demuestren su resistencia como piel no sometida a curtido4 .
La literatura reporta pocos trabajos en los que la piel de tilapia haya
sido sometida al proceso de curtido para la confección de guantes y
prendas de vestir. Se describen ensayos mecánicos de tracción,
confirmando el uso de este material, a pesar de su fino espesor para
este fin; sin embargo, aún no existen trabajos publicados sobre la
posibilidad de utilizar esta piel como biomaterial para cubrir heridas en la
piel humana causadas por quemaduras4 .
La caracterización de la piel de la tilapia del Nilo, a partir de sus
propiedades histomorfológicas, clasificación del colágeno y características
físicas (resistencia a la tracción), fue realizada por investigadores del
Núcleo de Investigación y Desarrollo de Medicamentos de la Universidad
Federal de Ceará5 . Se concluyó que las características microscópicas
de la piel de tilapia son similares a la estructura morfológica de la piel
humana, con una dermis compuesta por haces de colágeno compactos,
largos y organizados, en disposición paralelo/horizontal y transversal/
vertical, predominantemente tipo I. hide también demostró una alta
resistencia a la tracción y extensión en la rotura.
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Estos resultados podrían señalar la posibilidad de aplicar piel de
tilapia del Nilo como vendaje biológico temporal para quemaduras. La
realización de estudios preclínicos in vitro e in vivo debe proporcionar
información preliminar sobre seguridad y eficacia para que, posteriormente,
se puedan realizar estudios en humanos que demuestren los beneficios
de su uso en pacientes con lesiones por quemaduras.
Insertado en este contexto, el presente estudio tuvo como objetivo
evaluar el uso de piel de tilapia del Nilo como vendaje oclusivo temporal
en quemaduras de segundo grado superficiales y profundas en ratas. El
método de procesamiento, descontaminación y esterilización de piel de
tilapia y su aplicación en quemaduras y heridas fue registrado en el INPI
con el número BR1020150214359.
MÉTODO
Tipo de Estudio y Lugar de la Investigación
Se trata de un estudio prospectivo, cualitativo y cuantitativo, realizado
en el laboratorio del Núcleo de Investigación y Desarrollo de
Medicamentos (NPDM) de la Universidad Federal de Ceará (UFC),
Fortaleza, CE, Brasil, en el período de julio de 2015 a enero de 2016.
Aspectos Éticos Se
siguieron todas las reglas de la Nomenclatura Anatómica Veterinaria
(1983) y los principios éticos de experimentación animal del Consejo
Internacional para la Ciencia de los Animales de Laboratorio .
El estudio fue aprobado por el Comité de Ética para el Uso Animal
(CEUA) de la Universidad Federal de Ceará, bajo el protocolo número
48/2016.
Obtención y Procesamiento de las Muestras Las
pieles para los apósitos oclusivos fueron obtenidas de tilapia del Nilo
(Oreochromis niloticus), de la piscicultura Casta nhão (Jaguaribara, CE),
cultivadas en tanque de red, desde juveniles hasta peso de sacrificio,
entre 800 a 1000 g , recibiendo alimento comercial que oscila entre 28 y
38% de proteína cruda. Los peces fueron aturdidos por choque térmico
(cajas isotérmicas con hielo molido y agua, proporción 1:1) y luego se
realizó el sangrado.
Después del sacrificio, las pieles se retiraron con una herramienta
turquesa (herramienta) y, posteriormente, se quitaron las escamas, se
lavaron con agua corriente para eliminar cualquier rastro de sangre y
otras impurezas, y se colocaron en solución salina (solución de NaCl al
0,9%) estéril. , previamente enfriado a 4ºC, para limpieza final. Luego, los
excesos de músculo, que aún permanecían adheridos a la piel, fueron
removidos y cortados en trozos de 10,0 cm x 5,0 cm, lavados con
solución salina y siguiendo los pasos de esterilización, para su transporte
entre los municipios de Jaguaribara y Fortaleza (Recolección Inicial y
condicionamiento):
1er Paso ­ las pieles se colocaron en un recipiente estéril que
contenía gluconato de clorhexidina al 2% (solución de surfactante), donde
permanecieron durante 30 minutos.
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2° Paso ­ después de la operación anterior, las pieles se lavaron con
solución salina estéril y se retiraron para otro recipiente que contenía otra
solución de gluconato de clorhexidina al 2%, donde permanecieron
durante 30 minutos.
3° Paso ­ las pieles fueron enjuagadas en solución salina estéril y
colocadas en un contenedor que contenía glicerol al 50% y solución salina
al 50% y empaquetadas para el transporte (tramo Jaguaribara­Fortaleza),
en una caja isotérmica que contenía hielo.
Los siguientes pasos se realizaron en la UFC NPDM, en ambiente
estéril, con flujo laminar horizontal. 4°
Paso ­ Antes de 24 horas, las pieles fueron removidas de la solución
anterior, lavadas con solución salina estéril y colocadas en un recipiente
estéril y hermético que contenía 75% de glicerol, 25% de solución salina
(masajear las pieles por 5 minutos en esta solución) y se mantuvo durante
3 horas en baño maría con agitador a una velocidad constante de 15
revoluciones por minuto ya una temperatura de 37°C.
5° Paso ­ Se quitaron las pieles, se lavaron nuevamente con solución
salina estéril y se colocaron en otro recipiente estéril y hermético que
contenía glicerol al 100% (masajear las pieles por 5 minutos en esta
solución) y se mantuvieron en baño maría a una temperatura de 37ºC y 15
revoluciones por minuto durante otras 3 horas.
6ª Etapa ­ Al final de la última etapa de glicerol, las pieles fueron
reacondicionadas en sobres plásticos doblemente estériles, con doble
sellado y almacenados a 4ºC. Después de esa etapa, las pieles fueron
enviadas para radioesterilización complementaria, en el Instituto de
Investigaciones en Energía Nuclear (IPEN­SP), en gamma cobalto a 30
KG. Cuando se iban a utilizar las pieles, se extraían del sobre y se lavaban
tres veces, en diferentes soluciones de solución salina estéril, durante
cinco minutos cada una. Después de este procedimiento, las pieles se
cortaron al tamaño de la herida y se aplicaron como vendaje oclusivo.
Se realizaron siete ensayos microbiológicos, para bacterias gram+,
gram­ y hongos, partiendo de la piel in natura (antes de la primera etapa) y
en las seis etapas descritas anteriormente.
Grupos de Tratamiento
Cuarenta ratas macho adultas jóvenes del linaje Wistar (Rattus
norvegicus) del vivero de NPDM, con un peso corporal promedio de 200 g,
que se observaron previamente para las condiciones generales de salud,
recibieron comida estándar para ratas y agua ad libitum.
Los animales se dividieron igualmente aleatoria y probabilísticamente
en cuatro grupos de 10 animales cada uno, según el esquema terapéutico
previamente determinado:
Grupo C1 (control 1; n=10) ­ las heridas se lavaron con una solución
de NaCl al 0,9 %; Grupo C2 (control 2; n=10) ­ se aplicó un vendaje
abierto con sulfadiazina de plata al 1%; Grupo T1 (tratamiento 1; n=10;
quemadura superficial de segundo grado) ­ se aplicó vendaje oclusivo con
piel de tilapia, suturada con hilo de nylon 5­0; Grupo T2 (tratamiento 2;
n=10; quemadura profunda de segundo grado) ­ se utilizó vendaje oclusivo
con piel de tilapia, con sutura de nylon 5­0.
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Procedimiento quirúrgico para la producción de heridas
Las ratas se sacaron de las jaulas, una a la vez, y se pesaron para
calcular la dosis de anestésico. Luego, previa anestesia con administración
intraperitoneal de ketamina (90 mg/kg) y xilazina (10 mg/kg), los animales
fueron inmovilizados en decúbito ventral, realizándose tricotomía digital de
los pelos del dorso, en un área de aproximadamente 16,0 cm2 (4,0 cm x
4,0 cm). A continuación, se utilizó una plantilla de acetato de celulosa para
demarcar un cuadrado de 3,0 x 3,0 cm en la región dorsal (con un
marcador permanente).
Posteriormente, se realizó una quemadura superficial y profunda de 2°
grado mediante una placa de aluminio de 9,0 cm2 (3,0 cm x 3,0 cm),
calentada a 100°C, presionada sobre la piel de la espalda durante 6 y 9
segundos, según el grupo. Después de la cirugía, los animales fueron
identificados del 1 al 10 dentro de sus respectivos grupos y mantenidos en
jaulas individuales sin aserrín, a una temperatura promedio de 24°C.
El patrón de heridas en los grupos C1, C2, T1 (quemadura a 100ºC
durante 6 segundos) resultó en una quemadura de segundo grado
superficial. En el grupo T2 (quemadura a 100ºC durante 9 segundos), el
resultado fue una quemadura profunda de segundo grado.
Tratamiento de Heridas con Apósitos Abiertos (Grupos C1 y C2)
Desde el primer día postoperatorio, las heridas se limpiaron diariamente
con solución salina isotónica de NaCl (grupos C1 y C2), seguido, solo en
el grupo C2, de la aplicación de una capa de sulfadiazina de plata
antimicrobiana tópica al 1%, suficiente para cubrir la herida. heridas por
completo.
Tratamiento de Heridas con Vendajes Oclusivos (Grupos T1 y T2)
En el postoperatorio, las heridas fueron limpiadas con solución salina
isotónica de NaCl, seguido en los grupos T1 y T2 por la aplicación de piel
de tilapia, fijada con hilo de nylon, en las cuatro extremidades, evaluadas
cada cuatro días, por un período de 22 días . Si la piel estaba suelta, se
reemplazó con una piel nueva. Todos estos procedimientos se realizaron
con las ratas bajo el nivel anestésico recomendado.
Evaluación macroscópica Los
animales se mantuvieron vivos y evaluados hasta el día 22. Las
evaluaciones se realizaron los días D0, D5, D9, D12, D16, D19 y D21. El
grupo control C1 no contaba con apósito, lo que permitía la visualización y
evaluación diaria de la herida; el grupo C2 realizó cambios diarios de
apósitos de sulfadiazina de plata; los grupos T1 y T2, por presentar piel de
tilapia cubriendo la herida, fueron evaluados cada cuatro días con el
apósito abierto, el cual se renovaba cuando era necesario.
Recolección de sangre y evaluación de parámetros hematológicos y
bioquímicos
Después del tratamiento, los animales fueron anestesiados con una
combinación de clorhidrato de xilazina (10 mg/kg) y clorhidrato de ketamina
(90 mg/kg) por vía intraperitoneal, para la extracción de sangre por punción.
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Piel de tilapia como apósito biológico en el tratamiento de quemaduras
de la vena cava abdominal para evaluar los parámetros hematológicos
y bioquímicos de los grupos.
Eliminación de piezas
Todos los animales fueron sacrificados por sobredosis de anestésico
(30 mg/kg de xilazina + 270 mg/kg de ketamina). Luego, en los grupos
con apósitos abiertos, se retiró un colgajo de piel y tejido subcutáneo
que contenía la herida cicatrizada, en condiciones asépticas. En los
grupos de apósitos oclusivos, se retiró la piel de tilapia y se trató la herida
de la misma manera.
Análisis histológico de piel de rata
Las piezas fueron identificadas y fijadas en formaldehído al 10%.
Después de la inclusión en parafina, el material se cortó a 5 µm y se tiñó
con la técnica de hematoxilina y eosina. Los portaobjetos fueron
analizados bajo microscopía óptica, considerando la presencia o
ausencia de úlceras, disposición de haces de fibras de colágeno, fenotipo
e intensidad del infiltrado inflamatorio y necrosis.
Análisis estadístico
Los resultados de las evaluaciones hematológicas y bioquímicas
fueron sometidos a análisis de varianza (ANOVA) y comparados por la
prueba de Tukey utilizando el programa GraphPad Prism® (GraphPad
Software, Inc., California, EE. UU.), considerándose un valor de p <
0,05 como tasa significativa.
RESULTADOS
En la evaluación macroscópica en los cuatro grupos en estudio, en
los días D0, D5, D9, D12, D16, D19 y D21, se observaron las siguientes
diferencias:
En los grupos T1 y T2 no fueron necesarios cambios diarios de
apósito, como en los grupos C1 y C2, en los que la piel de la tilapia
Figura 1 ­ Evolución de la cicatrización observada durante los 22 días de seguimiento en las ratas de los 4 grupos C1, C2, T1 y T2.
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permaneció adherido al lecho de la herida. La piel solo se renueva
cuando las ratas retiran el vendaje y destruyen la piel, lo que ocurre en
ocho ocasiones, de un total de 120 valoraciones en los grupos T1 y T2
(Figura 1).
En el grupo T1 y, especialmente, en T2, se observó la presencia de
exudado y costras, especialmente después de D12, como se muestra en
las fotos de estos grupos en D12, D16, D19 y D21 (Figura 1).
En D21, los grupos de control, C1 y C2, todavía tenían costras y
alguna presencia de tejido de granulación.
Se observó una mejor delimitación de los bordes de la herida en el
proceso de cicatrización, en los grupos tratados con piel de tilapia.
Con respecto a los parámetros hematológicos y bioquímicos
(Cuadro 1), no se observaron cambios significativos en los parámetros
bioquímicos de los animales tratados en los diferentes grupos (p<0,05),
a excepción de la urea, que se incrementó ligeramente en los grupos T1
y T2 en relación a los grupos de control, pero sin significancia. Además,
se observó que los valores de glucosa estaban por encima del valor
establecido para esta especie de animal en todos los grupos, hecho
justificado por las dosis anestésicas.
En el análisis histológico, el grupo control negativo (quemadura a
100ºC, 6 segundos, tratada con solución salina) presentó una dermis
constituida por tejido conectivo fibroso desprovista de epitelio, recubierta
por una membrana fibrinogranulocítica, mostrando un intenso infiltrado
inflamatorio neutrofílico en la mayoría de los casos. región superficial.
También se visualizaron células inflamatorias linfoplasmocíticas en medio
de la proliferación de células fusiformes, además de glóbulos rojos
extravasados. En profundidad se observó tejido muscular esquelético sin
cambios histológicos (Figura 2A).
Los animales del Grupo C2, con quemaduras a 100ºC durante 6
segundos y tratados con sulfadiazina de plata al 1%, presentaban tejido
conectivo fibroso desprovisto de recubrimiento epitelial mostrando en
superficie una membrana fibrinolítica asociada a un intenso infiltrado
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TABLA 1
Parámetros hematológicos y bioquímicos de ratas (Rattus norvergicus) después
de la quema a 100oC, en diferentes tratamientos.

Parámetro (unidad) C1 C2 T1 T2

Leucocitos (109/l) 9,02±1,01 10,64±1,11 8,9±0,7 9,1±1,17

Linfocitos (109/l) 6,33±0,82 7,4±0,77 5,3±0,29 5,7±0,68

Monocitos (109/l) 0,73±0,07 0,45±0,11 0,77±0,1 0,71±0,12

Granulocitos (109/l) 2,29±0,25 2,69±0,32 2,75±0,49 2,68±0,43

RBC (1012/l) 8,66±0,11 7,93±0,20 7,63±0,25 8,02±0,13

HGB (g/dl) 15,18±0,11 14,34±0,28 14,03±0,34 14,38±0,22

HCT (%) 50,67±0,35 48,53±0,61 45,53±1 47,48±0,72

PLT (109/l) 903,7±22,69 856,3±28,32 916,6±33,62 944,8±37,18

BT (mg/dL) 0,038±0,00 0,034±0,00 0,031±0,00 0,037±0,00

DB (mg/dL) 0,02±0,01 0,01±0,00 0,01±0,00 0,01±0,00

ALTERNATIVA (U/L) 91,0±3,84 111±6,97 97,3±6,89 100,5±4,67

AST (U/L) 134,3±7,75 165,1±15,06 164±7,51 138,8±4,9

Creatinina (mg/dL) 0,47±0,02 0,37±0,01 0,44±0,02 0,46±0,03

Urea (mg/dL) 52,78±1,24 A 60±2,21 A 67,1±3,25 B 73,9±2,27B

Glucosa (mg/dL) 196,3±13,05 216,6±14,66 173,1±8,28 193,5±12,01

Figura 2 ­ A: Grupo C1 ­ úlcera e infiltrado inflamatorio leucocitario mixto denso; B: Grupo C2 ­ úlcera cubierta por una membrana fibrinolítica e infiltrado inflamatorio
de leucocitos mixtos densos; C: Grupo T1 ­ dermis desprovista de revestimiento epitelial y con un discreto infiltrado inflamatorio mononuclear; D: Grupo T2 ­ dermis
sin epitelio de revestimiento y con discreto infiltrado inflamatorio mononuclear. ÉL; A ­ 100x; B ­ 200x; C ­ 200x; D ­ 200x.

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Piel de tilapia como apósito biológico en el tratamiento de quemaduras
leucocito mixto, con granulocitos polimorfonucleares (neutrófilos) y glóbulos
rojos extravasados. En el fondo se observaron gruesos haces de colágeno
libres de inflamación (Figura 2B).
En el grupo T1, con quemaduras a 100ºC durante 6 segundos y tratado
con apósito biológico de tilapia, se observó en las muestras tejido conectivo
fibroso sin recubrimiento epitelial con intenso infiltrado inflamatorio
histiolinfoplasmocitario en nidos, que se extendía entre los haces de colágeno.
En los cortes se observaron granulocitos polimorfonucleares neutrófilos, de
predominio en la región superficial. Solo en dos muestras se visualizó un
infiltrado intensamente agudo (Figura 2C).
En el Grupo T2, en el que la quemadura también fue a 100°C, pero
durante 9 segundos, el análisis microscópico reveló tejido conjuntivo fibroso
sin epitelio de revestimiento, con infiltrado inflamatorio mononuclear de leve
a moderado (histiolinfoplasmocítico), con ocasionales granulocitos
polimorfonucleares neutrófilos restringidos al región superficial. En el fondo,
el corion fibroso estaba libre de inflamación (Figura 2D).
DISCUSIÓN
Las heridas por quemaduras se caracterizan por la ruptura de la
continuidad que se produce en un tejido, dando lugar a un espacio anormal,
interrupción del riego sanguíneo, alteración de la sensibilidad, acumulación
de elementos celulares muertos y mayor o menor grado de contaminación,
con o sin infección. . Una vez que se establece el daño tisular, el organismo
desencadena una secuencia compleja de eventos en un intento de restaurar
morfofisiológicamente el mismo. Se inicia un proceso inflamatorio agudo
inducido por la propia lesión, seguido de regeneración de las células
parenquimatosas, migración, proliferación y remodelación del tejido conjuntivo,
síntesis de proteínas, colagenización y adquisición de resistencia a la
tracción6 .
Numerosos factores, sistémicos y locales, pueden interferir en el
proceso de reparación tisular. Se requiere un buen flujo de sangre para una
curación efectiva. Aunque el gradiente de hipoxia es esencial para algunos
eventos de curación, las fases inflamatoria y de síntesis de colágeno
dependen de una perfusión adecuada.
Las infecciones retrasan la regeneración de los tejidos7 .
En lesiones de 2° y 3° grado, con gran superficie corporal afectada, el
tratamiento clínico incluye reposición adecuada de líquidos, a través de una
vena de gran calibre, control de la diuresis (a través de un catéter urinario),
soporte enteral (a través de una sonda nasogástrica o enteral), para evitar
sangrado gastrointestinal y traslocación bacteriana, buena analgesia horaria
y, en algunos casos, antibioticoterapia. El tratamiento quirúrgico abarca
desde curativos, pasando por escarotomías y fasciotomías, desbridamientos,
amputaciones, injertos, colgajos fasciocutáneos, incluso colgajos libres7 .
El tratamiento de las heridas por quemaduras representa un desafío
diario para el equipo multidisciplinario de salud hospitalario. Numerosos tipos
de apósitos están disponibles para el
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tratamiento de quemaduras Entre ellos se encuentran el alginato de plata, los
hidrogeles, los apósitos húmedos y la sulfadiazina de plata, una crema muy
utilizada en la actualidad en los servicios públicos para el tratamiento de las
quemaduras1 .
En nuestro país, en la mayoría de los centros de tratamiento de
quemados de la red pública, se adopta el siguiente comportamiento en
relación a los apósitos: las quemaduras de segundo grado se bañan
diariamente con clorhexidina al 2% y se aplica el apósito con antimicrobiano
tópico de sulfadiazina de plata al 1%, hasta reparación completa de la lesión
(superficial de 2° grado alrededor de los 12 días y profunda entre los 21 y 25
días); en lesiones de tercer grado, el desbridamiento del tejido necrótico se
realiza en varias etapas (desbridamiento secuencial), con un apósito
elaborado con sulfadiazina de plata al 1%, hasta preparar el lecho de la
herida para el injerto.
En la red privada, en nuestro país, este escenario cambia y, según el
tipo de seguro o las condiciones económicas del paciente, se utilizan apósitos
biosintéticos y piel artificial, todo importado y de alto costo. En Europa y
Estados Unidos de América se utilizan pieles homólogas en estas lesiones
de 2º y 3er grado (a través de los numerosos bancos de piel), pieles
heterólogas, apósitos biosintéticos y dermis artificiales para mejorar la
supervivencia y tener una buena recuperación funcional. Desafortunadamente,
en un país del tamaño de Brasil, solo hay tres bancos de piel en operación,
uno en São Paulo (Hospital das Clínicas), uno en Paraná (Hospital Evangélico)
y otro en Porto Alegre (Santa Casa de Misericórdia), ya que el único banco
del Nordeste, ubicado en Recife (IMIP), está desactivado1 .
Sin embargo, publicaciones más recientes demuestran que los apósitos
biológicos y sólidos tienen una eficacia superior, especialmente en términos
de: menor tiempo de cierre de la herida, mayor tasa de reepitelización y
reducción del dolor, y que no hay suficientes datos para respaldar el uso y la
eficacia de la plata. sulfadiazina 1%8,9.
Tal información corrobora los resultados del presente estudio, en el que
no fue posible observar beneficios del uso de esta formulación en la
cicatrización de heridas en comparación con el grupo control que utilizó solo
solución salina al 0,9%, estimulando un intenso infiltrado inflamatorio
leucocitario mixto, con presencia de Granulocitos polimorfonucleares de
neutrófilos.
En la búsqueda de nuevas alternativas terapéuticas para las quemaduras
se han destacado los apósitos biocompatibles y/o biológicos.
Ya se utilizan saco amniótico, pericardio y piel de cerdo, mostrando
adecuada biocompatibilidad y eficacia10. En este contexto, existe la
posibilidad de aprovechar la piel de tilapia, que sería un producto de desecho,
para ayudar a este tratamiento sintomático, que podría convertirse en una
opción asequible de biomaterial.
En la investigación realizada por el equipo de investigadores de NPDM,
se observó que la piel de tilapia, al ser sometida a procesos de esterilización
química e irradiación complementaria, no presenta variaciones en cuanto a
su estructura microscópica y métrica de tensión, recuperando su consistencia
in natura luego de tratamiento proceso de
Machine Translated by Google
Lima­Júnior EM et al.
rehidratación5 . También se ha informado en la literatura que la
glicerolización y la irradiación en apósitos biológicos en dosis
moderadas tienen la capacidad de fijar tejidos al reducir el líquido
intersticial sin, sin embargo, causar degeneración11.
Los estudios histológicos de la piel de tilapia demostraron una
epidermis cubierta por un epitelio escamoso estratificado, seguido de
extensas capas de colágeno12. El colágeno es uno de los principales
componentes de los biomateriales, por su característica de guiar y
definir la mayoría de los tejidos, además de posibilitar la
biodegradabilidad y biocompatibilidad, que favorecen su aplicación13.
Así, detallar la cantidad y el tipo de colágeno presente constituye una
de las formas de caracterizar los biomateriales.
Tang y Saito14 demostraron que el colágeno tipo I en la piel de
tilapia estimula los factores de crecimiento de fibroblastos (FGF), que
expresan y liberan el factor de crecimiento de queratinocitos (KGF),
dos citoquinas importantes y esenciales para el cierre de heridas.
El patrón de cicatrización observado en los grupos tratados con
piel de tilapia fue superior debido a su capacidad para obstruir la
herida, minimizando los exudados y la formación de costras. En el
presente estudio se encontraron reacciones inflamatorias de intensidad
leve a moderada en las heridas cubiertas por pieles de tilapia, con
fenotipo mononuclear (histiolinfoplasmacítico), a diferencia de la
respuesta aguda intensa observada en los grupos control, interfiriendo
positivamente en el proceso de cicatrización, confirmando la beneficio
de su uso.
En particular, la inflamación crónica se caracteriza por una
respuesta proliferativa, en la que los macrófagos desempeñan un
papel importante en el proceso de curación asociado con el depósito
de colágeno y la neoformación vascular. Los macrófagos de tipo M2
expresan importantes citocinas y factores de crecimiento para la
reparación de tejidos.
En cuanto a los parámetros hematológicos y bioquímicos, se
mantuvieron dentro del rango normal para las especies estudiadas,
con excepción de la urea, que se encontraba elevada en los grupos
tratados en comparación con los resultados observados en los grupos
control. Variaciones de este parámetro también han sido descritas por
otros autores15.
Se debe hacer otra excepción con los valores de glucosa, que
fueron superiores a los valores de referencia establecidos en todos
los grupos estudiados. Este hallazgo puede ser explicado por la acción
hiperglucemiante del anestésico clorhidrato de ketamina utilizado en
la inducción anestésica de animales16.
El apósito ideal es aquel que sea de fácil obtención, bajo costo,
fácil de almacenar, de estabilidad prolongada, que no presente
antigenicidad, pero sí buena flexibilidad, resistencia al estiramiento,
adherencia al lecho, buena adaptación al contorno de las heridas y
facilitación de los movimientos de las articulaciones. También se
agrega que el material debe aplicarse en un solo acto quirúrgico, que
sea de fácil manipulación, suprima el dolor, acompañe el crecimiento
corporal y mantenga la temperatura corporal.
Rev Bras Queimaduras. 2017;16(1):10­7
16
Los apósitos biológicos deben prevenir las pérdidas
hidroelectrolíticas, evitando la contaminación bacteriana y promoviendo
la epitelización en quemaduras de segundo grado superficiales y
profundas y propiciando la formación de tejido de granulación
adecuado para el injerto en lesiones de tercer grado1 .
Estamos muy lejos de tener el sustituto de piel temporal ideal.
Algunos apósitos heterólogos ya han sido probados y utilizados en
Brasil, pero abandonados con el tiempo, ya sea por el alto costo de
importación, como la piel de cerdo, o por la falta de estudios científicos
adecuados, como la piel de rana o la transmisión de enfermedades
animales. , que todos pueden provocar, excepto cuando se irradia la
piel, aumentando los costes. Tejidos biológicos de origen animal,
como piel de perro, piel de cerdo, piel de rana, pericardio bovino y la
capa submucosa de intestinos de cerdo, han sido utilizados en
apósitos oclusivos biológicos (heteroinjertos) en lesiones causadas
por quemaduras17­20. Sin embargo, para la liberación y uso de estos
materiales, deben someterse a estrictos protocolos, para la
identificación de su real aporte, seguridad, eficacia y biocompatibilidad1 .
Los resultados obtenidos en el presente estudio permiten
continuar con las investigaciones para Ensayos Clínicos de Fase I en
seres humanos sanos y, posteriormente, para estudios de Fase II y III
en pacientes quemados, para confirmar la seguridad y eficacia de su
uso, como alternativa biológica. apósito para el tratamiento de estas
heridas.
CONCLUSIÓN
La piel de tilapia se adhirió bien a las heridas inducidas por
quemaduras en las ratas probadas, interfiriendo positivamente en el
proceso de cicatrización y no provocando cambios relevantes en los
parámetros hematológicos y bioquímicos de función renal y hepática,
siendo un potencial curativo biológico para el tratamiento de esta
enfermedad. naturaleza.
RECONOCIMIENTO
Los autores agradecen a los investigadores y al personal de
apoyo técnico del Núcleo de Investigación y Desarrollo de
Medicamentos de la Universidad Federal de Ceará y del IPEN­SP; a
ENEL, la empresa de financiación de la investigación; al Instituto de
Apoio ao Queimado, la ONG que gestiona y coordina la investigación.
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Títulos de los autores Edmar Maciel Lima­

Junior ­ Universidad Federal de Ceará, Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (NPDM); instituto dr. José Frota, Centro de Tratamiento de Quemados, Fortaleza, CE, Brasil.

Nelson Sarto Picollo ­ Sala de Urgencias de Quemados, Centro de Servicios, Goiânia, GO, Brasil.
Marcelo José Borges de Miranda ­ Hospital São Marcos/Rede Dor, SOS Quemados y Heridas, Recife, PE, Brasil.
Wesley Lyeverton Correia Ribeiro ­ Universidad Federal de Ceará, Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (NPDM), Fortaleza, CE, Brasil.
Ana Paula Negreiros Nunes Alves ­ Universidad Federal de Ceará, Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (NPDM), Fortaleza, CE, Brasil.
Guilherme Emilio Ferreira ­ Universidad Christus ­ Unichristus, Curso de Medicina – Fortaleza, CE, Brasil.
Ezequiel Aguiar Parente ­ Universidad Christus ­ Unichristus, Curso de Medicina – Fortaleza, CE, Brasil.
Manoel Odorico Moraes­Filho ­ Universidad Federal de Ceará, Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (NPDM), Fortaleza, CE, Brasil.

Correspondencia: Edmar Maciel Lima­Junior Rua Visconde

de Mauá, 1650/801 – Aldeota – Fortaleza, CE, Brasil – CEP 60125­160 – E­mail: edmarmaciel@gmail.com

Artículo recibido: 06/05/2017 • Artículo aceptado: 01/06/2017 Lugar de

trabajo: Universidad Federal de Ceará, Centro de Investigación y Desarrollo de Medicamentos (NPDM), Fortaleza, CE, Brasil.

Conflicto de intereses: Los autores declaran que no existe.

Fuente de financiación: La investigación fue financiada por ENEL a través de un convenio con el Instituto de Apoio ao Queimado.

Rev Bras Queimaduras. 2017;16(1):10­7

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