UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE BAJA CALIFORNIA

FACULTAD DE CIENCIAS

LICENCIATURA EN BIOLOGÍA

FICOLOGÍA Y BRIOFITAS

PRÁCTICA 3

MÉTODOS DE CONTEO y CULTIVOS DE FITOPLANCTON (Primer parte)

MAESTRA:

Dra. Socorro Jiménez Valera

PRESENTAN:

Ontiveros López Andrea Gyssel (368330)

Romero Rico Jessica Yazbel (365194)

ENSENADA, BAJA CALIFORNIA, 16 DE MARZO DE 2023.

Introducción
En algunas áreas científicas es común encontrarse con la tarea de realizar algún tipo
de conteo de células (o bien de algún microorganismo en específico) para algún tipo de
experimento, al tratarse de tamaños muy pequeños y que suelen presentar grandes cantidades
es necesario de recurrir de instrumentos que faciliten ese tipo de tareas, un ejemplo de ello es
la cámara Neubauer.

La cámara de Neubauer o también conocida como hemocitómetro es un aparato de

vidrio con dos superficies reticuladas que son utilizadas para el conteo de células, el retículo
de la cámara está subdividida en 9 cuadrantes, pero se suelen utilizar solamente los 4
cuadrantes de cada retículo que se encuentran en cada una de las esquinas y el cuadrante
central (Oliveira, 2020).

El fitoplancton es un microorganismo autótrofo el cuál tiene como función la de

realizar fotosíntesis´proceso el cual termina con la producción de de oxígeno y la formación
de diversos compuestos orgánicos, de hecho más del 50% del oxígeno que hay en el planeta
es producido en el mar por el fitoplancton, debido a esto su función es fundamental para la
vida del planeta (López, 2019).

Objetivo
Aprender a utilizar la cámara de Neubauer de manera correcta.

Materiales
● Microscopio compuesto ● 1 Pipeta graduada de 1 ml
● Cámara de Neubauer ● 1 Pipeta de 5 ml
● Gradilla ● 2 Tubos de ensayo
● 1 Pipeta Pasteur con bulbo ● Piseta de alcohol
● Papel seda ● Piseta de agua
● Lugol ● Contador
Metodología
Se tomó 1 ml del cultivo inicial que se nos fue proporcionado por la profesora con una
pipeta de 1 ml, este fue colocado en un tubo de ensayo, después de ese tubo se recolectó
solamente .1 ml y se depositó en otro tubo de ensaye al cual se le agregaron 3.9 ml de agua
destilada los cuales fueron tomados con una pipeta de 5 ml para hacer una dilución del
cultivo, mezclamos hasta homogeneizar, una vez homogenizado agregamos varias gotas de
lugol porque no estaba muy pigmentado. Se colocó el cubreobjetos sobre la cámara y con una
pipeta Pasteur con bulbo tomamos unas gotas del tubo de ensayo con la dilución previamente
agitada y colocamos una gota en cada área correspondiente de la cámara, pasados 5 minutos
se colocó la cámara en el microscopio compuesto para proceder con el conteo. Se utilizó el
objeto de 10 para enfocar la gradilla y con ayuda al contador se fueron contando fácilmente
las células que estaban dentro de los cuadrantes correspondientes, una vez con el conteo
realizado se hicieron los cálculos pertinentes.

Resultados

Figura I. Primer conteo cámara Neubauer Figura II. Segundo conteo cámara Neubauer

Aplicación de fórmula:
4
((𝑆𝑢𝑚𝑎𝑟 𝑡𝑜𝑑𝑎𝑠 𝑙𝑎𝑠 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠)/8) * 10 * 𝐹𝑎𝑐𝑡𝑜𝑟 𝑑𝑒 𝑑𝑖𝑙𝑢𝑐𝑖ó𝑛 = 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠/𝑚𝑙
4
(597/8)* 10 * 40 = 29 850 000 𝑐𝑒𝑙/𝑚𝑙.
 Figura III. Conteo celular en uno de los cuadrantes.

Discusión
Los conteos realizados en los 8 cuadrantes de la cámara Neubauer no tuvieron
resultados tan parecidos como se esperaba, algunos conteos van desde las 35 células y otros
hasta los 112 (Fig. II), es un rango bastante amplio para tratarse de la misma muestra por lo
que dichos conteos se realizaron por duplicado para tener certeza. No obstante, en los conteos
donde se obtuvieron números más altos se encontraban una gran cantidad de células
encimadas una con otra o pegadas, en tales casos se tomaron las medidas para analizar su
profundidad y evaluar cuales eran aptas para contarlas como organismo.

En consecuencia, los cuadrantes donde había pocos o nulos conglomerados de células

(Fig. III) la cantidad fue notablemente menor, sin embargo, la mayoría se mantiene en un
rango de 70 a 115 con excepción de dos donde no hubo este padecimiento en las células. Se
cree que el lugol al ser un estresor para el fitoplancton y un método de conservación a largo
plazo (Samanez et al., 2012) podría haber causado tal acomodo o también deberse a un
simple comportamiento que siguen las células del fitoplancton; cual fuera el caso se prosiguió
con el conteo.
 El haber utilizado la cámara Neubauer dio facilidad para realizar el conteo, el hecho
que esté dividida en cuadrantes hace más fácil el llevar un control de en qué parte se está
ubicando, además de tener un buen arreglo espacial facilitando aún más haciendo uso del
contador, poniendo en blanco cada que se proseguía con algún cuadrante sin dejar de anotar
los resultados.

Conclusión
Aprendí nuevamente a utilizar la cámara de Neubauer pues en 2do semestre ya había
tenido la oportunidad de conocerla como instrumento de laboratorio, pero solo conocí como
utilizarla de manera teórica, en esta ocasión ya puede manipularla y aprender a utilizarla
correctamente, dándome cuenta que en sí es muy sencilla de utilizar solo que al momento de
querer agregar la muestra dentro de la cámara puede ser algo complicado pues no debe de
excederse ni debe de faltarle, de ahí en fuera todo fue muy sencillo. Andrea Gyssel Ontiveros
López.

El método de conteo es ampliamente utilizado para trabajar con microalgas, el utilizar

técnicas de dilución, contador y soluciones de conservación junto con la cámara Neubauer
puede parecer una alternativa cansada además de estar muy ligada con el error humano, por
lo tanto los resultados varían de acuerdo a quién realizó la prueba y qué parámetros siguió
como el hecho de contar las células que estaban sobre una línea o no. Con todo el método
continúa siendo efectivo. Jessica Yazbel Romero Rico .

Referencias
López, R. (2019, 7 enero). El fitoplancton, básico para la vida en la Tierra. Gaceta UNAM.

https://www.gaceta.unam.mx/el-fitoplancton-basico-para-la-vida-en-la-tierra/

Oliveira, R. A. G. (2020). Hemograma Cómo hacer e interpretar. 2a edición (2a Edición).

Amolca.

Samanez, I., Universidad Nacional Mayor de San Marcos, & Museo de Historia Natural.

(2012). Plancton. Métodos de Colecta, Identificación y Análisis de Comunidades

Biológicas: Plancton, Perifiton, Bentos (Macroinvertebrados) y Necton (Peces) En

Aguas Continentales Del Perú, 13-25.

https://www.minam.gob.pe/diversidadbiologica/wp-content/uploads/sites/21/2014/02/

M%C3%A9todos-de-Colecta-identificaci%C3%B3n-y-an%C3%A1lisis-de-comunida

des-biol%C3%B3gicas.compressed.pdf