UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA

CENTRO UNIVERSITARIO DEL SUR –CUNSUR-

INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
ING. HUGO MONTENEGRO
MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL

ACTIVIDAD PRÁCTICA #2
“FERMENTACIÓN ALCOHOLICA”

GRUPO

KARLA VICTORIA URÍAS AVILA 202142211

ASTRID SOFÍA MORÁN HERNÁNDEZ 202144226

MIRIAM KIARA VALERIA URRUTIA VELIZ 202144641

HÉCTOR EDUARDO AGUILAR GONZALEZ 202045334

ANA BEVERLY BEATRIZ MOYA REYES 202041710

JOSÉ JAVIER MAZARIEGOS MALTEZ 202145908

AMELIA SUCELY RAGUAY GARCÍA 202143619

ESCUINTLA, ABRIL 2024

 HOJA DE TRABAJO ACTIVIDAD PRACTICA No 2 FERMENTACION
ALCOHOLICA

1. https://www.educaplay.com/printablegame/4144058-
fermentacion_alcoholica.html

2. Que caldo de cultivo se puede utilizar para el cultivo de levaduras en el

laboratorio? Melaza, jugo de remolacha, jugo de frutas.
3. La fermentación alcohólica es aeróbica o anaeróbica.
Aeróbica
4. Escriba la ecuación química con la cual se puede representar la
fermentación alcohólica.
C6H12O6 (glucosa) → 2 C2H5OH (etanol) + 2 CO2 (dióxido de carbono)
5. Dos microorganismos usados para la fermentación alcohólica.
Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces pastorianus
6. Cuatro hexosas fermentables.
Las hexosas son monosacáridos con seis átomos de carbono, y muchas de
ellas son fermentables, es decir, pueden ser utilizadas por microorganismos
para producir energía a través de la fermentación. Aquí hay cuatro ejemplos
de hexosas fermentables:

1. Glucosa: La glucosa es el monosacárido más común y ampliamente

utilizado por los microorganismos para la fermentación. Es una fuente de
energía esencial para muchos tipos de células, incluyendo las bacterias,
levaduras y células humanas. La fermentación de la glucosa es un proceso
fundamental en la producción de productos como el alcohol etílico
(fermentación alcohólica) y ácido láctico (fermentación láctica).

2. Fructosa: La fructosa es otro monosacárido comúnmente encontrado en

frutas, miel y jarabes de maíz. También es fermentable por ciertas cepas de
levaduras y bacterias. La fermentación de la fructosa puede resultar en la
producción de alcohol etílico, ácido láctico u otros productos, dependiendo
de los microorganismos involucrados y las condiciones del proceso.

3. Galactosa: La galactosa es un monosacárido que forma parte de la lactosa,

el azúcar presente en la leche. Aunque menos común que la glucosa y la
fructosa, la galactosa también puede ser fermentada por ciertos
microorganismos. La fermentación de la galactosa puede ocurrir en entornos
donde haya disponibilidad de lactosa, como en la fermentación láctica
realizada por bacterias lácticas.

4. Manosa: La manosa es otra hexosa fermentable que se encuentra en

ciertos alimentos y materiales vegetales. Al igual que la glucosa, la fructosa
y la galactosa, la manosa puede ser utilizada por microorganismos para la
fermentación bajo las condiciones adecuadas. La fermentación de la manosa
puede conducir a la producción de varios productos metabólicos,
dependiendo de los microorganismos involucrados.
7. Nutrimientos y factores físicos y químicos a controlar para el
crecimiento de levaduras en la fermentación alcohólica.
Para un crecimiento óptimo de las levaduras durante la fermentación
alcohólica, es crucial controlar una serie de nutrientes y factores físicos y
químicos en el medio de fermentación. Aquí hay algunos de los más
importantes:

1. Fuente de carbono: La fuente de carbono principal para la fermentación

alcohólica es la glucosa, aunque otras hexosas como la fructosa y la
sacarosa también pueden ser utilizadas por algunas cepas de levaduras. Es
importante asegurar que la concentración de la fuente de carbono sea
adecuada para permitir un crecimiento óptimo de las levaduras.

2. Nutrientes nitrogenados: Las levaduras necesitan una fuente de nitrógeno

para sintetizar proteínas y otros compuestos celulares. El nitrógeno en forma
de amonio (NH4+) y aminoácidos esenciales como la glutamina y la arginina
es importante para el crecimiento de las levaduras. Además, algunos
micronutrientes como zinc, hierro, manganeso y vitaminas también son
esenciales y deben estar presentes en cantidades adecuadas.

3. Oxígeno: Aunque la fermentación alcohólica es un proceso anaeróbico, las

levaduras necesitan oxígeno durante las primeras etapas de la fermentación
para sintetizar compuestos necesarios, como esteroles y ácidos grasos
insaturados. Sin embargo, una vez que la fermentación está en marcha, el
oxígeno debe ser limitado para favorecer la producción de alcohol.

4. pH: El pH del medio de fermentación es crítico para el crecimiento de las

levaduras. Generalmente, un pH ligeramente ácido, alrededor de 4-5, es
óptimo para la mayoría de las cepas de levaduras utilizadas en la
fermentación alcohólica. Esto ayuda a prevenir la contaminación microbiana
y proporciona un entorno favorable para el crecimiento de las levaduras.
 5. Temperatura: La temperatura es un factor importante que afecta el
crecimiento y la actividad metabólica de las levaduras. La mayoría de las
cepas de levaduras utilizadas en la fermentación alcohólica tienen un rango
de temperatura óptimo de alrededor de 20-30°C, aunque esto puede variar
según la cepa específica. Es importante controlar la temperatura del medio
de fermentación para evitar temperaturas extremas que puedan inhibir el
crecimiento de las levaduras o promover el crecimiento de microorganismos
no deseados.

6. Concentración de alcohol: A medida que avanza la fermentación, la

concentración de alcohol en el medio aumenta. Este aumento puede tener
un efecto inhibitorio en el crecimiento de las levaduras y en la actividad
enzimática. Es importante controlar la concentración de alcohol para evitar la
inhibición del crecimiento de las levaduras y para garantizar una fermentación
completa y eficiente.

Controlar estos nutrientes y factores físicos y químicos es fundamental para

garantizar un crecimiento óptimo de las levaduras y una fermentación
alcohólica exitosa y eficiente.

8. Ejemplos de sustratos usados para la fermentación alcohólica

• Melazas obtenidas en la cristalización del azúcar
• Jugos de remolacha
• Jugo de frutas
• Productos de desechos de maderas procesadas
9. Diagrama de flujo (en bloques) del proceso de fermentación alcohólica.

10. Que se logra con esterilizar el jugo 15 minutos, 15 libras a 121 C, que
equipo se utiliza para realizar la esterilización.
La esterilización del jugo tiene como objetivo eliminar microorganismos presentes
en el jugo, como bacterias, levaduras y mohos, para evitar interferencias en el
proceso de fermentación alcohólica. Este proceso se lleva a cabo utilizando un
autoclave, que utiliza vapor de agua bajo presión para crear un ambiente de alta
temperatura y presión que garantiza la eliminación efectiva de los microorganismos
no deseados. Esto asegura la pureza del jugo y facilita una fermentación controlada
y exitosa
11. Si en el caldo de medio de cultivo de levaduras Saccharomyces
cerevisieae se han contabilizado 109 levaduras/ml y estas se van a inocular en
250 ml de jugo de tal forma que su concentración sea 104 levaduras/ml
¿Cuántos militros del caldo de cultivo de levaduras se tienen que añadir a los
250 ml de jugo de fruta?

C1V1 = C2V2

Donde:
C1 = Concentración inicial de levaduras = 10^9 levaduras/ml
V1 = Volumen del caldo de cultivo que se va a añadir (lo que queremos
encontrar)
C2 = Concentración final deseada = 10^4 levaduras/ml
V2 = Volumen total final = 250 ml

Despejando V1, obtenemos:

V1 = (C2 * V2) / C1
V1 = (10^4 * 250) / 10^9
V1 = 0.25 ml

Por lo tanto, se necesitaría añadir 0.25 ml del caldo de cultivo de levaduras

al jugo de fruta para alcanzar la concentración deseada de 10^4
levaduras/ml.

12. Que es la cámara de Neubauer y como se usa?

Esta cámara sirve para realizar recuentos de algunos tipos celulares como
hematíes, glóbulos blancos y plaquetas, aunque puede ser usado para
recuento de esporas. Presenta unas características muy peculiares, pues
consta de 3 zonas, una central para el recuento y dos zonas de soporte. Cada
 cámara posee dos zonas de recuento o retículos, una en la parte superior y
otra en la parte inferior.

13. Si una dilución 1/20 de medio de cultivo de levaduras produce un

numero de levaduras contadas= 5625 (volumen de la cámara = 0.4 mm3) .
Determine la concentración de levaduras en el medio de cultivo en
levaduras/ml.

Concentración = (Número de levaduras contadas) / (Volumen de la cámara

de conteo)

En este caso, el número de levaduras contadas es 5625 y el volumen de la

cámara de conteo es 0.4 mm^3.

Concentración = 5625 / 0.4

Concentración ≈ 14062.5 levaduras/mm^3

Dado que queremos expresar la concentración en levaduras/ml, necesitamos

convertir el volumen de la cámara de conteo a mililitros. Dado que 1 mm^3
es igual a 0.001 ml, podemos realizar la conversión:

Concentración ≈ 14062.5 / 0.4 * 0.001

Concentración ≈ 35,156.25 levaduras/ml

Por lo tanto, la concentración del medio de cultivo de levaduras es

aproximadamente 35,156.25 levaduras/ml.
14. Hacer un diagrama de un fermentador a nivel de laboratorio indicando
sus partes y componentes y como se opera para una fermentación
alcohólica? Indicar cuales técnicas asépticas se pueden implementar en la
operación del fermentador.

El recipiente o fermentador, debe tener un calibre de “boca” suficiente para que

pueda enroscarse un tapón de fermentación con un agujero sobre el que se pueda
introducir un airlock. Este tapón debe garantizar la estanqueidad del proceso,
permitiendo tan sólo acceso a través del airlock. La misión del airlock, es permitir la
salida del dióxido de carbono generado mientras que al mismo tiempo se evita la
entrada de aire en el fermentador y evitar así la contaminación del proceso (que
oxidaría el alcohol etílico en ácido acético). Técnicas asépticas utilizadas en el
fermentador, puede mencionarse le uso de altas temperaturas para mantener estéril
el proceso.
15. Como se puede hacer para que el fermentador trabaje en condiciones
anaerobias y al mismo tiempo el CO2 que se esta produciendo en la
fermentación alcohólica sea eliminado del fermentador. Realice un esquema
grafico para mejorar su explicación.

Las condiciones que se deben tener en cuenta para la realización de un

procedimiento en el cual se contenga una fermentación anaerobia, son el pH,
temperatura, oxígeno, luz, productos metabólicos que ayuden al proceso, mientras
que se libera el CO2, en casos a la atmósfera y en otros recluido para la formación
de energía que puede ser utilizado en el mismo.