Garcia Reyes Ian Darett Grupo: 2652 Equipo 5 Microbiología General Laboratorio - I

Práctica 7: Morfología microscópica (Tinciones)

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Tinción de Gram:
Las bacterias Gram negativas pierden un colorante (el cristal violeta) con mayor facilidad
que las Gram positivas. La razón es la menor cantidad de mucopéptido de las paredes de
las bacterias Gram negativas.
El cristal violeta es básico (se une a componentes celulares de carga negativa). Atraviesa
la envuelta celular y se acumula en el citoplasma. Para facilitar la diferenciación se mezcla
Lugol con cristal violeta: el complejo cristal-violeta-Lugol precipita. Así el Lugol dificulta la
salida del cristal violeta de ambos tipos de células, pero es más fácil de extraerlo de las
Gram negativas que de las Gram positivas. La diferenciación se hace añadiendo
pequeñas cantidades de etanol a las células teñidas con cristal violeta. El citoplasma de
las células que han perdido el cristal violeta se tiñen con otro colorante (safranina). La
diferencia de color se relaciona con el tipo de pared bacteriano: células de color violeta
(bacterias de pared Gram positivas) y células de color rosa (bacterias de pared Gram
negativa).

Gram positivas | Gram negativas

Bacillus Haemophilus
Listeria Klebsiella
Staphylococcus Legionella
Streptococcus Pseudomonas
Enterococcus Echerichia
Clostridium Proteus
Mycoplasmas Enterobacter
Mycobacterias Salmonella
Tilosina Pasteurella
Corynebacterium equi Bordetella

Tinción de Ziehl Neelsen

El fundamento de esta técnica de tinción se basa en las propiedades de la pared celular
de
estos microorganismos, la pared está formada por un tipo de ácidos grasos llamados
ácidos
micólicos; estos se caracterizan por presentar cadenas muy largas
En la tinción de Ziehl-Neelsen se utiliza el compuesto fenólico carbol fucsina, un colorante
básico, este tiene la capacidad de interactuar con los ácidos grasos de la pared celular, la
cual es de textura cerosa a temperatura ambiente.
La tinción con carbol fucsina es mejorada en presencia de calor, debido a que la cera se
derrite y las moléculas de colorante se mueven con mayor rapidez hacia el interior de la
pared celular, el acido que se use posteriormente sirve para decolorar las células que no
fueron teñidas porque su pared celular no era lo suficientemente afín al colorante; por lo
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tanto, la fuerza del colorante ácido es capaz de eliminar el colorante ácido. Las células
que resisten esta decoloración se llaman ácido-resistentes.
Las bacterias acido-resistentes comunes de importancia medica son:
Mycobacterium tuberculosis
Mycobacterium leprae
Mycobacterium avium-intracellulare complez
Especies de Nocardia.

Tinción de Schaeffer-Fulton
La envuelta de la endospora es más compleja e impermeable que la envuelta de las
células vegetativas en las que se forma. Solo se puede teñir el contenido de la espora
alterando su envuelta. La impermeabilidad de las cubiertas dificulta que las endosporas se
decoloren una vez teñidas.
El verde de malaquita es un colorante débilmente básico (tiene una carga positiva débil) y
por tanto, se une débilmente a la bacteria. Penetra en las células vegetativa. Cuando se
calienta la preparación también penetra las endosporas. Durante el lavado con agua, el
verde de malaquita se elimina de las células vegetativas, pero no de la endospora. El
colorante de contraste (la safranina) solo puede teñir a las células vegetativas
(decoloradas por el agua)
Amyloliquefaciens (Bacillus amyloliquefaciens pertenece al Filo Firmicutes, orden
Bacillales, familia Bacillaceae, genero Bacillus (Bacillus subtilis, Bacillus anthracis)
Clorstridium botulimun : es una bacteria patógena del género Clostridium, bacilo
anaerobio Gram positivo, que forma esporas altamente resistentes y produces una
neurotoxina muy potente.
Lysinibacillus spp: es un genero de bacterias Gram positivas, pertenece a la familia
Bacillaceae.
Tinción de Rojo de Congo
El Rojo Congo es un colorante azoico para proteínas, de color rojo intenso, formado por el
acoplamiento de una sal de diazonio y un anillo aromático activo. Esta sustancia es capaz
de absorber la radiación electromagnética en el espectro visible, motivo por el cual
presenta un color intenso.
La tinción de Rojo Congo se realiza sobre la base de enlaces por puente de hidrógeno
con el componente de carbohidrato del sustrato. El Rojo Congo es un colorante aniónico y
puede depositarse en fibrillas de amiloide, las cuales presentarán en este caso un
destacado dicroísmo bajo luz polarizada. Al trasluz, el tejido teñido con Rojo Congo
aparece en color naranja-rojo, mientras que, si se mira bajo luz polarizada, los depósitos
de amiloide se presentan en forma de doble refracción de color verde intenso sobre fondo
oscuro.
Streptococcus pneumoniae es un genero de bacterias Gram positivas, Streptococcaceae,
normalmente anaerobia faciltativa, catalasa negativa, inmóvil, con forma ovalada, roeada
de una capsula y se suele agrupar formando cadenas de diplococcus
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Neisseria meningitidis es una de las especies que constituyen el género Neisseria , que
pernetence junto con los géneros Branhamella, Acinetobacter y Kingella a la familia
Neisseriaceae, especie de bacterias aerobias Gram negativas.
Bacillus anthracis es una especie del genero de bacterias Gram positivas Bacillus.

Referencias:

1. Bacterias esporuladas [Internet]. prezi.com. [citado el 21 de febrero de

2024]. Disponible en: https://prezi.com/tlg0udx-vczv/bacterias-esporuladas/
2. Barceloux D. Clostridium botulinum (Botulism). 2008 [citado el 21 de febrero
de 2024];103–13. Disponible en:
https://acsa.gencat.cat/es/detall/article/Clostridium-botulinum---Botulismo
3. Merckmillipore.com. [citado el 21 de febrero de 2024]. Disponible en:
https://www.merckmillipore.com/INTERSHOP/web/WFS/Merck-BR-Site/pt_
BR/-/BRL/ShowDocument-File?ProductSKU=MDA_CHEM-
101641&DocumentId=200612.072.ProNet&DocumentType=PI&Language=
ES&Country=NF&Origin=PDP
4. Métodos Tinciones [Internet]. Ugr.es. [citado el 21 de febrero de 2024].
Disponible en: https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iii/pb-iii-3-gram.htm
5. Métodos Tinciones [Internet]. Ugr.es. [citado el 21 de febrero de 2024].
Disponible en: https://www.ugr.es/~pomif/pom-bac/pb-iii/pb-iii-3-
esporas.htm
6. Rojo Congo [Internet]. Adbaquim.com. [citado el 21 de febrero de 2024].
Disponible en: https://adbaquim.com/productos/reactivos/rojo/rojo-congo
7. 2.5A: Glicocáliz (Cápsulas) y Biofilms [Internet]. LibreTexts Español.
Libretexts; 2022 [citado el 21 de febrero de 2024]. Disponible en:
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