INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL

HGZ 20 LA MARGARTIA
RESIDENCIA DE PATOLOGÍA CLÍNICA

Estancia formaBva en BIOLOGÍA MOLECULAR Y

CITOGENÉTICO, en el HOSPITAL UNIVERSITARIO
RAMÓN Y CAJAL, en MADRID, ESPAÑA, del 03 DE
OCTUBRE AL 30 DE NOVIEMBRE DEL 2023.

Resumen de acBvidades:

Asesoramiento genéBco a pacientes con patología de con riesgo de variantes en genes o

alteraciones cromosómicas de importancia clínica, asesoría y reporte de resultados de
estudios con evidencia de variantes patogénicas o posiblemente patogénicas a pacientes
referidos.

Asesoría genéBca a pacientes gestantes del primer y segundo trimestre con alto riesgo de
aneuploidias para estudio de DNA fetal.

Procedimiento para el cul0vo de linfocitos en SP

1.- Preparar el medio de culBvo enriquecido:
- 100ml de RPMI
- 10ml de suero fetal
- 1,5ml de Penicilina/Streptomicina
- 1,5ml de Hepes
- 1,5ml de Glutamina

2.- Añadir en un frasco de culBvo:

- 5ml de medio de culBvo enriquecido
- 6 gotas de PhitohemagluBnina
- 12 gotas de sangre

3.- Mezclar e incubar a 37 grados Celsius por 72 horas.

Proceso de sacrificio de muestra:

Añadir 0.20ml de Colchicina y dejar actuar durante 1hora.

1. Pasar la sangre a un tubo de centrifuga y centrifugar 10min a 1500rpm.

2. Quitar el sobrenadante y añadir primero 1ml de CIK 0,075M mezclar con cuidado y
después añadir 4ml de CIK y volver a mezclar con cuidado.
3. Dejar actuar durante 20-25min en un baño a 37°C. Al acabar se añade 1 ml de
Carnoy.
4. Centrifugar 10min a 1500rpm.
5. Quitar el sobrenadante y añadir primero 1ml de Carnoy (3:1 metanol/acéBco) y mezclar
con cuidado y después añadir otros 4ml de Carnoy volviendo a mezclar

MEDICO RESIDENTE RAQUEL TRINIDAD GUTIERREZ RENAUD

 INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL
HGZ 20 LA MARGARTIA
RESIDENCIA DE PATOLOGÍA CLÍNICA
con cuidado.
6. Centrifugar 10min a 1500rpm.
7. Quitar el sobrenadante y añadir 1+4 ml de Carnoy mezclando bien y con cuidado.
8. Centrifugar 10min a 1500rpm.
9. RepeBr los pasos 7 y 8 3 o 4 veces más.
10. Extender el culBvo en un porta (previamente limpio con etanol) añadiendo una
gota de acéBco al 45% y 3 o 4 gotas de culBvo.
11. Visualización al microscopio para corroborar que hay metafases adecuadas.

Proceso para la Bnción:

1. Tinción 12 min en Giemsa (2,5ml de Giemsa y el resto de agua desBlada en una coplin de
50ml).

2.- Tinción con bandas G:

- Dejar el porta a temperatura ambiente durante una semana aproximadamente para que
envejezca o en estufa a 65°C durante 24 horas.
- Una vez envejecido ponerle tripsina 1:3 (1tripsina/3PBS).
⁃ El Bempo de exposición varía según el Bpo de preparación (sangre periférica, médula
ósea, líquido amnióBco).
- Lavar con agua desBlada
- Teñir con Leishman 1:3 (1 Leishman/3 Buffer pH6.8) dejándolo 3min.

MEDICO RESIDENTE RAQUEL TRINIDAD GUTIERREZ RENAUD

 INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL
HGZ 20 LA MARGARTIA
RESIDENCIA DE PATOLOGÍA CLÍNICA
Observación de metafases en microscopio.

Exposición en sesión academica del servicio

MEDICO RESIDENTE RAQUEL TRINIDAD GUTIERREZ RENAUD

 INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL
HGZ 20 LA MARGARTIA
RESIDENCIA DE PATOLOGÍA CLÍNICA
Analisis manual y en carioBpador de pacientes con riesgo de alteraciones cromosomicas

MEDICO RESIDENTE RAQUEL TRINIDAD GUTIERREZ RENAUD

 INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL
HGZ 20 LA MARGARTIA
RESIDENCIA DE PATOLOGÍA CLÍNICA

MEDICO RESIDENTE RAQUEL TRINIDAD GUTIERREZ RENAUD

 INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL
HGZ 20 LA MARGARTIA
RESIDENCIA DE PATOLOGÍA CLÍNICA

MEDICO RESIDENTE RAQUEL TRINIDAD GUTIERREZ RENAUD

 INSTITUTO MEXICANO DEL SEGURO SOCIAL
HGZ 20 LA MARGARTIA
RESIDENCIA DE PATOLOGÍA CLÍNICA
Evaluación de acBvidades

MEDICO RESIDENTE RAQUEL TRINIDAD GUTIERREZ RENAUD