Facultad de Ciencias Naturales, Matemática y del Medioambiente

Departamento de Biotecnología

Cuantificación de la
capacidad de formar biofilms a
diferentes condiciones de pH y H O . 2 2

Alondra Cornejo- Valeria Guajardo – Constanza Rivera - Jonathan Parra.

27/04/2023

RESUMEN

En el presente estudio se cuantificó la producción de biopelículas de las cepas Escherichia Coli,

Klebsiella Pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa para evaluar el efecto que produce el pH y el
peróxido de hidrógeno en la capacidad de formación de biofilms. Se realizó un ensayo cualitativo en
tubos y un ensayo cuantitativo en microplacas.

Palabras Claves: Mencionar cuatro palabras o conceptos importantes en este informe (texto 1,
texto 2, texto 3, texto 4).
1 Introducción
Escriba la introducción utilizando diferentes
párrafos para exponer diferentes ideas apoyado con
bibliografía. Recuerde insertar el número de la
referencia utilizada (1). La introducción no debe
superar una página en su extensión. Por favor, no
cambie los tipos de letra, espaciado o márgenes de
esta plantilla. La introducción debe contener la
información necesaria para poder comprender el
contexto dentro del cual se enmarca el trabajo
realizado (marco teórico) Siempre debe ir desde lo
más general a lo más particular. En esta sección
también debe explicarse la relevancia del
trabajo.Texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto.
Al final de la introducción debe dejar en claro cuál
es el objetivo principal y cuáles son el/los objetivos
secundarios perseguidos por el trabajo
experimental. Plantee el o los objetivos como un
párrafo, sin utilizar listas numeradas o hacer un
punteo. Evitar el “copiar y pegar” textual.
2 Materiales y Métodos
2.1 Materiales
Contábamos con tres cepas de diferentes bacterias;
Escherichia Coli, Klebsiella Pneumoniae y
Pseudomonas Aeuroginosa. Tubos de ensayo con
diferentes porcentajes de glucosa y pH, tubos de
ensayo con diferentes cantidades de peróxido de
hidrogeno, metanol, mechero, asas de argolla,
cristal violeta, vortex, micropipeta, puntas de
micropipeta, tubos eppendorf, gradilla, Parafilm y
una microplaca.
2.2 Escherichia Coli y Klebsiella
Pneumoniae (método cualitativo)
Comenzamos tomando un asa de argolla la cual se
ocupó para tomar la muestra de nuestra cepa este
paso es el más importante ya que depende de la
manera en que se realiza nuestra toma de muestra el
cómo serán los resultados más adelante. Luego la
esterilizamos en nuestro mechero el cual se
encontraba encendido y debemos pasar nuestra asa
por encima del fuego logrando esterilizar la misma
y así asegurarnos de que no se encuentra
contaminada con ningún tipo de cepa en la que
pudo estar anteriormente, dejamos enfriar un poco
nuestra asa a temperatura ambiente un momento
intentando ser lo más prolijos posible ya que si esta
se encuentra muy caliente puede quemar nuestra
cepa y en ese caso esta muere, luego la sumergimos
sobre nuestra muestra que se encontraba dentro de
nuestro tubo de ensayo Escherichia Coli la cual se
ocupó para más adelante ver si esta genera biofilm a
distintos niveles de pH y glucosa. Comenzamos a
sembrar sobre nuestros tubos nuevos comenzando
por el blanco que en nuestro caso se encontraría
como caldo de Lb el blanco nos sirve de control,
luego de la misma manera y con ayuda de nuestra
asa nuevamente sembramos en el segundo tubo que
contenía caldo de Lb +2% glucosa, luego en el
tercer tubo caldo de Lb +2% glucosa pH 4.5, en el
cuarto tubo caldo de Lb +2% glucosa pH 7.0 y el
ultimo tubo de ensayo caldo de Lb +2% de glucosa
pH 9.0 teniendo en cuenta que cada vez que
sembramos en nuestro tubo de ensayo se realizo
vortex a nuestra muestra para homogenizar y sacar
lo mismo de nuestra muestra en cada tubo que fue
sembrado. Esta misma aplicación fue realizada en
nuestra muestra de Klebsiella Pneumoniae. Al
terminar de sembrar comenzamos a cubrir nuestros
tubos de ensayo con papel Parafilm que como se
menciona anteriormente nos sirve para cubrir
nuestros tubos de ensayo de otros microorganismos
o de una posible contaminación y rotulamos los
tubos para luego poder distinguir nuestro trabajo
con el de nuestros compañeros de los distintos
mesones lo cual es importante ya que si por alguna
razón se llegan a mezclar no se sabrá de que
estudiantes corresponden y considerando también
que todos contábamos con muestras de cepas
diferentes.
 2.3 Método 2 (Ejemplo: Extracción de ADN
de Bacterias Gram positivas, negativas
y levaduras, sin incluir el “Método 2”)
Como ya se mencionó anteriormente…

Escriba los materiales y métodos utilizados en el

experimento como párrafos continuos, no utilice
listas numeradas o punteos para indicar los
materiales aparte del método, en forma detallada.
Describa la metodología desarrollada para llevar a
cabo los experimentos que contribuirán a logar el
objetivo del práctico. Responder a preguntas como
¿Cómo, Por qué y para que se hizo esa etapa
(Finalidad de esta etapa)? ¿Qué material se ocupó
en esta etapa?, ¿Para qué sirve este material?,
¿Cuál es la función de esta material?
¿Cómo se llama este material?, ¿Qué, porqué y
para que ocupó estas cepas? Al nombrar una
bacteria, se nombra con sus dos nombres en latín,
el primero, su primera letra en mayúscula
Detalle los resultados obtenidos de los
experimentos y discuta los valores numéricos
utilizando para esto bibliografía acorde al tema del
laboratorio. Para cada informe se exigirá un mínimo
de cinco referencias (libros o revistas científicas).
NO se aceptarán referencias de internet (Wikipedia,
páginas web, etc.). Texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
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texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto.
 Tabla 1 Utilice este formato de letra y
espaciado para las tablas. Si es posible, use
solo líneas horizontales en sus tablas.
Identifique las columnas colocando su nombre
(y unidades si es necesario) en la primera fila
de la tabla.

Peso
Distanc molecul
Muestr
ia ar (bp)
a
(cm)
1 0 150
2 , 100
3 5 70
4 0 50
,
6
1
,
5
2
y el segundo en minúscula completo, en
formato cursiva ejemplo: Escherichia coli. No es texto texto texto texto texto texto texto texto texto
obligación incluir imágenes ni diagramas. Y si se texto texto texto texto texto texto texto texto texto
usa una foto, lo hace como ya se mencionó. Texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto.

3 Resultados y Discusiones

Escriba un párrafo inicial introductorio de los

resultados obtenidos en la experiencia de
laboratorio. Texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto.

3.1 Resultados y discusiones experimento

1
3.2 Resultados y discusiones experimento 2
Refiérase en el texto a las figuras (Fig. 1) y Tablas
(Tabla 1) utilizando frases como “como se aprecia
en la Fig. 1” o “ver valores en Tabla 1”. Texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
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texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto Escriba lo que concluyó de su trabajo, en relación al objetivo
texto texto texto texto texto texto texto texto texto propuesto al inicio de éste. Las conclusiones deben escribirse
texto. como uno o más párrafos dependiendo del número de
objetivos del laboratorio. Texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto texto
texto texto texto texto texto texto texto texto texto. Para
escribir las referencias, utilice el formato entregado abajo.

4 Conclusiones

Referencias

En esta sección, debe ir una lista enumerada de las referencias bibliográficas utilizadas en formato APA. No
olvidar que el número de la referencia debe insertarse como superíndice en el texto donde corresponda.

Para artículos y publicaciones científicas:

Apellido, Inicial del primer nombre, Apellido, Inicial del primer nombre, …..& Apellido, Inicial del primer
nombre. (año) Título de la Publicación. Revista, Volúmen, páginas.

Ejemplo:

Tafur, J. D., Torres, J. A., & Villegas, M. V. (2008). Mecanismos de resistencia a los antibióticos en bacterias
Gram negativas. Infectio, 12(3), 227-232.

Para libros:

Apellido, Inicial del primer nombre, Apellido, Inicial del primer nombre, …..& Apellido, Inicial del primer
nombre. (año) Título del Libro. Edición, Editorial

Ejemplo:

Möser, M., & Barros, J.L. (2009). Ingeniería acústica: Teoría y aplicaciones (2da ed.). Springer.

Para capítulos de libros:

Apellido, Inicial del primer nombre, Apellido, Inicial del primer nombre, …..& Apellido, (Año). Título del
capítulo. Editor del libro Abreviatura de editor (Ed.) o editores (Eds.), Título del libro (páginas del capítulo
pp.). Editorial.

Ejemplo:
Bird, M. (2016). Economic aspects of entrepreneurship: The case of Peru. En C. C. Williams & A. Gurtoo (Eds.),
Handbook of entrepreneurship in developing economies (pp. 113–130). Routledge.

Para manuales:

Apellido, Inicial del primer nombre, Apellido, Inicial del primer nombre, …..& Apellido, (Año). Título del
manual, Edición, páginas.

Ejemplo:

Zavala J. 2005. Manual de técnicas básicas de biología molecular, Ediciones de la Universidad Autónoma de
Yucataán, 46.

5 Anexos

Incluya en esta sección los cálculos intermedios, así como tablas y gráficos que respalden los resultados
principales.

6 Preguntas

a) ¿Cuál es la principal función del biofilm bacteriano?

- La principal función del biofilm bacteriano es la sobrevivencia a las condiciones externas del ambiente
permitiendo la formación de distintas colonias bacterianas las cuales conviven entre sí de manera comparativa
y competitiva dentro del biofilm.

b) ¿Cuál es la importancia desde el punto de vista clínico de un biofilm bacteriano?

- La importancia de los biofilm desde el punto de vista clínico es que estos son muy resistentes a los
antibióticos debido a que pueden generar alguna enfermedad en los pacientes.

c) ¿Qué es el quorum sensing y cuál es su relación con los biofilms bacterianos?

- El quorum sensing es una comunicación electroquímica entre los microorganismos que se encuentran
presentes en el biofilm y lo usan para regular la densidad bacteriana.