PRÁCTICA SOBRE REPRODUCCIÓN IN VITRO DE SEMILLAS DE PIMENTÓN.

JHON ALEXANDER QUINTERO TOLEDO – 111004229

LUIS ENRIQUE MORENO TORRENEGRA – 111004323

CURSO DE REPRODUCCIÓN VEGETAL

PROGRAMA DE INGENIERÍA AGRONÓMICA.

UNIVERSIDAD DE LOS LLANOS

VILLAVICENCIO
2022
 INTRODUCCIÓN

La propagación in vitro se refiere a cultivar plantas dentro de un frasco de vidrio en

un ambiente artificial o controlado. Dentro de esta práctica existen 2 características
muy importantes los cuales determinan el resultado al que se quiere llegar; La
asepsia (esterilización del material, muestra, etc) y el control de los factores que
afectan el crecimiento y desarrollo de la planta. Los avances que se han realizado
en los últimos años han permitido el estudio detallado del funcionamiento de las
plantas tanto a nivel celular como molecular, y en un área controlada como lo es el
laboratorio es posible mantener las condiciones adecuadas para las especies de
plantas.

La reproducción plantas en condiciones que se pueden controlar en un laboratorio

es algo complejo, debido a que los factores que conforman el ambiente natural no
son sencillos de suministrar a la planta, sino solamente algunos de ellos tales
como; ambientes químico (pH, composición del medio de cultivo) y ambientes
físicos (Temperatura, luz, fotoperiodo, humedad).

Los cultivos in vitro realizados en el laboratorio de la Universidad de los Llanos

permiten a los estudiantes adquirir conocimientos sobre los procedimientos y
requerimientos para realizar las prácticas de siembra de cultivos en medio in vitro
con condiciones controladas; esto permite entender la importancia que pueden
llegar a ser estos experimentos para la agricultura. En esta práctica se buscó
conocer los procedimientos y protocolos más importantes a tener en cuenta para la
propagación de especies vegetales de interés agronómico.
 OBJETIVOS

● Reconocer y establecer los procedimientos y protocolos de propagación in

vitro en especies vegetales de interés agronómico.

● Aplicar los procedimientos adecuados de asepsia y reproducción in vitro de

semillas de pimentón en laboratorio bajo condiciones controladas.
 METODOLOGÍA

Para el inicio de esta práctica los materiales a trabajar deben estar previamente
esterilizados y autoclavados con el fin de evitar posibles contaminaciones.

1. En un Baeker se adicionan 200 ml de agua destilada y 5 ml de Extran

(Agente de limpieza), esto para esterilizar las semillas de pimentón que se
depositaron en un paño, se procede a sumergir 4 veces en la solución.

2. Posteriormente en un vaso de precipitado con etanol al 70% se le adicionan

las semillas y se dejándolas por 2 minutos, seguido a esto en una solución de
hipoclorito al 15% se le añaden las semillas por 25 minutos y se coloca el
vaso de precipitado con la barra de agitación en un agitador magnético.

3. Por último para finalizar el proceso de desinfección de las semillas se

procede a realizar 4 enjuagues con agua destilada. Teniendo las semillas
desinfectadas se llevaron a la cámara de flujo laminar previamente
desinfectada, junto con los vasos de vidrio que contiene el medio de cultivo
de Murashige y Skoog preparados con anterioridad por la docente a cargo del
laboratorio.

4. Una vez con todos los materiales en la cámara de flujo laminar, con un
mechero y pinzas previamente desinfectados con alcohol, se procede a
prender el mechero y esterilizar las pinzas, estas se llevan al rojo vivo y se
enfría introduciendolas en el medio para evitar una posible lesión en la
semilla por la temperatura de las pinzas; posteriormente se agregaron 4
semillas de pimentón al vaso de vidrio con el medio, se procedió a taparlo y
envolverlo con papel vinipel. Por último se rotula con la información más
importante como lo son: Código, nombres, fecha y especie vegetal utilizada.
 ANÁLISIS Y RESULTADOS.

Foto N°1. Muestra de semillas de pimentón a los 8 días después de la siembra.

En la foto N°1 se observa que no se contaminaron las semillas, lo cuál permite

entender que los procedimientos realizados en la asepsia fueron exitosos. Por otro
lado, durante la realización de la práctica se aprendieron y aplicaron los protocolos
de propagación in vitro dado en la bibliografía, como la preparación de los diferentes
medios de cultivo y las diferencias entre estos, por ejemplo; el medio de cultivo de
Murashige y Skoog, es una alternativa estándar para casi todas las especies
vegetales, sin embargo, es recomendable adaptar dichos medios de cultivo a lo que
serían los requerimientos nutricionales de cada especie en específico, lo cual llevan
a tener que añadir o modificar las sustancias y/o dosis que llevan cada medio de
cultivo.
Foto N°2. Medio de cultivo Murashige y Skoog sin y con carbón activado respectivamente.

En la foto N°2 se observa que en la práctica se utilizaron el mismo medio de cultivo

pero con 2 tonalidades de colores distintos, los cuales son el color negro que
contenía carbon activado y el color traslucido sin carbon activado. Teniendo en
cuenta que las diferencias son que el carbón activado actúa como un inhibidor de
microorganismos que pueden contaminar la muestra, ayudando así con la asepsia.
CONCLUSIONES.

Para finalizar el presente informe se puede afirmar que las prácticas llevadas a cabo
fueron las adecuadas para la propagación in vitro de las semillas de pimentón,
logrando una adecuada asepsia que se vio reflejada en ausencia de contaminantes
en el medio de cultivo. Por tanto, se recomienda que para la propagación in vitro de
especies vegetales se tenga en cuenta los procedimientos, la asepsia y tanto la
especie vegetal como el tejido desde el cual se quiere realizar dicha propagación.

REFERENCIAS.
● Castillo, Alicia. "Propagación de plantas por cultivo in vitro: una biotecnología
que nos acompaña hace mucho tiempo." INIA, Uruguay (2004).