ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

¡La Universidad de los Emprendedores!

BIOQUÍMICA II

CUANTIFICACIÓN DE UREA EN SUERO

Q.F. Deybbis Rosario Ayala Baez
PROTEÍNAS
HORMONAS
 DESTINO CATABÓLICO DEL GRUPO AMINO

Se requiere los siguientes 4 pasos previos:

1. Transaminación

2. Desaminación oxidativa del glutamato

3. Transporte del amoniaco (glutamina)

3. Desaminación por acción de la glutaminasa (hígado)

 TRANSDESAMINACIÓN

TRANSAMINACIÓN

DESAMINACIÓN
OXIDATIVA
DESTINO CATABÓLICO DEL GRUPO AMINO

..

REACCIONES DE TRANSAMINACIÓN

REACCIONES DE DESAMINACIÓN OXIDATIVA

 TRANSPORTE Y DESTINO DEL AMONIACO
TEJIDO HÍGADO MÚSCULO
EXTRAHEPÁTICO

Urea
NH4+
NH4+ NH4+
ATP Glutamina Glutaminasa Glutamato
sintetasa deshidrogenasa
H2O H2O
ADP + Pi

Glutamina Glutamina Glu KG KG Glu

TRANSAMINASA TRANSAMINASA

TRANSAMINACIÓN Piruvato Alanina Alanina Piruvato

CICLO
GLUCOSA - ALANINA
DESAMINACIÓN
Glucosa Glucosa
 En el riñón la glutamina
se comporta como un
buffer.
LA GLUTAMINA

❑ Modula la respuesta
inflamatoria
❑ Reduce citoquinas
proinflamatarias
❑ Incrementa niveles de
glutatión en los tejidos.

ENTEROCITO

❑ Protege la integridad de la
mucosa intestinal.
❑ La glutamina es el
nutriente obligado del
enterocito.
EL CICLO DE LA UREA
 EL CICLO DE LA UREA

CICLO DE LA UREA

Ruta metabólica que transforma el

amoniaco de los aminoácidos en urea.

HÍGADO

Ureotélicos
 EL CICLO DE LA UREA

Formación de la urea

a. Formación del carbamil fosfato

b. Formación de Citrulina

c. Formación de Argininasuccinato

d. Formación de Arginina

e. Formación de Ornitina
EL CICLO DE LA UREA
EL CICLO
DE LA
UREA
INTERCONEXIÓN CON
EL CICLO DE KREBS
 IMPORTANCIA DEL CICLO DE LA UREA

BAJA TOXICIDAD

PATOLOGÍAS

Retención en la sangre de productos nitrogenados derivados del

catabolismo proteico. Estos productos son urea, creatinina, ácido úrico.

Acumulación en la sangre de sustancias nitrogenadas que normalmente

se eliminan por la orina y que se produce a causa de insuficiencia renal.
 PARTE EXPERIMENTAL

DETERMINACIÓN DE UREA EN SUERO

 CUANTIFICACIÓN DE UREA EN SUERO

Competencias

❑ Determinar los niveles de urea en suero.

❑ Conocer los métodos para la detección de urea.

MATERIALES Y REACTIVOS

✓ Gradillas.
✓ Tubos de ensayo.
✓ pipetas de 1ml.
✓ Micropipetas de 10µl, 200 µl y 1000 µl.
✓ Tips de 10µl, 200 µl y 1000 µl.
✓ Kit para la determinación de urea.
✓ Muestra de suero problema
✓ Espectrofotómetro.
✓ Baño maría 37°C.
 DETERMINACIÓN DE UREA
Faucet y Scott
Fundamento
1. La ureasa descompone específicamente la urea produciendo dióxido de carbono y amoníaco. Este
reacciona en medio alcalino con salicilato e hipoclorito para dar indofenol color verde.

UREASA
(NH2)2CO + 2H2O ----------------→ 2NH3 + CO2 + H2O

La intensidad del color producido es directamente proporcional a la cantidad de Urea presente en la muestra.
 CUANTIFICACIÓN DE UREA EN SUERO
Guía de práctica
Disponer de tres tubos de ensayo rotulados como blanco, estándar y muestra.
Pipetear los componentes indicados en la tabla:

Blanco Stándar MP Mezclar. Incubar 5 minutos

Agua destilada - - - a 37C o 10 minutos a
temperatura ambiente.
Suero / calibrador - 0.01 mL 0.01 mL
Reactivo reconstituido 1 mL 1 mL 1 mL
Mezclar. Incubar 5 minutos a 37C o 10 minutos a temperatura  570 nm.
ambiente. Luego agregar:
Reactivo B 1 mL 1mL 1mL

El color de la reacción es
estable durante 2 horas .
 CUANTIFICACIÓN DE UREA EN SUERO

Abs. stándar = 0.241 Conc. Estándar = 60 mg/dL

Abs. muestra = 0.138 Conc. Estándar = 50 mg/dL
Ejemplo de cálculo

Urea mg/dL = A. muestra x Conc. estándar

A estandard

FC = St/absorbancia del calibrador

Urea mg/dL = FC x Abs. muestra
VALORES NORMALES DE UREA SÉRICA