SESIÓN 4. Regulación alostérica y cooperatividad.

Sebastián González Catrilelbún

Bioquímico y Dr. Microbiología
sgonzalezc@docente.uss.cl
Regulación alostérica de función proteica.
Ejemplo de la hemoglobina.

Descripción de la cooperatividad y
alosterismo que presenta la Hemoglobina.

Comparación de la curva de saturación de

mioglobina y hemoglobina.
 Conceptos importantes

Dominio funcional: término más DE

ORGANIZACIÓN genérico
LAS que designa unaDEFINICIONES
PROTEÍNAS: región de una proteína con
interés biológico funcional.

Dominios funcionales de DnaK

(chaperona) de E.Coli
Regulación alostérica de proteínas
allos: otro
steros: espacio, sitio

• proteína alostérica
• modulador o efector alostérico
• centro o sitio alostérico
• centro activo o sitio catalítico
 Regulación alostérica de proteínas

Regulación alostérica: cambio en la funcionalidad de una proteína debido a

la unión no covalente de una molécula (generalmente un metabolito) en un
lugar distinto a aquel donde la proteína cumple su función "sitio funcional".

Proteína activa Proteína menos activa

Interconversión muy rápida

 Mioglobina y Hemoglobina
modelos de relación entre
estructura, regulación y función
biológica de proteínas.
 Hemoproteínas

Mioglobina:
• Proteína que capta el O2 que ingresa desde
la sangre y lo retiene en el músculo.
• Proteína monomérica.
• Posee un grupo prostético, grupo Hemo, que
es el que fija el O2.
Hemoglobina:
• Proteína que transporta O2 en la sangre,
en el interior de los glóbulos rojos.
• Es un tetrámero (αβ)2
• Posee un grupo Hemo por cada
subunidad => 4 grupo Hemo.
 Hemoproteínas Hemoglobina

Mioglobina
Grupo prostético hemo

- Tiene estructura terciaria

- Proteína típica globular
-Compuesta por un 75% de estructuras α-helice.
- Los grupos R de los aminoácidos empaquetados en
el interior de la molécula son predominantemente
de carácter hidrofóbico mientras que los de la
superficie son generalmente hidrofílicos
- Molécula relativamente soluble en agua.
-Se encuentra presente en el músculo.
-Tiene estructura cuaternaria
- heterotetramétrica [α(2):β(2)]
- se encuentra en los eritrocitos, donde es la responsable
de unir al oxígeno en los pulmones y de transportar el
oxígeno al cuerpo, donde es utilizado en los
procesos metabólicos aeróbicos.
 Grupo Hemo

El átomo de Hierro está unido

coordinadamente con 4 átomos de
nitrógeno de los grupos pirrólicos Anillo
del anillo porfirínico plano, el pirrólico
quinto enlace coordinado de cada
átomo de Hierro está dirigido
perpendicularmente al plano del
anillo porfirínico y se establece con
un nitrógeno imidazólico de un
resto de histidina, la sexta posición
queda disponible para su
coordinación con una molécula de
oxígeno
 Mioglobina y hemoglobina poseen Curva de saturación de Hb
diferente afinidad por el O2 por O2 o de disociación de O2

Mioglobina
- Gran afinidad por O2.
=> Capta rápidamente el O2 que difunde de la sangre
a los tejidos.
=> Libera lentamente el oxígeno dentro de la célula.
Hemoglobina
- Afinidad varía según pO2.
- Poca afinidad por O2 (> P50) cuando la pO2 es baja. =>
Si hay poco O2 disuelto, libera más fácilmente el que
tiene unido.

Mioglobina: curva hiperbólica

Hemoglobina: curva sigmoídea
la afinidad varía
 ¿para qué nos conviene que varíe la afinidad por oxígeno?

O2 + Hemoglobina
O2 libre, para ingresar a las células.

Hemoglobina-O2
O2 unido, para ser transportado.

¿Cómo cambia la afinidad si la Hb es la misma molécula?

• Cooperatividad
• Regulación alostérica
 Cooperatividad
La Hemoglobina tiene dos estructuras nativas diferentes:

- Desoxihemoglobina (Estructura Tensa)

- Oxihemoglobina (Estructura Relajada)

Estas estructuras nativas diferentes tienen distinta funcionalidad:

- La estructura Tensa (T) tiene baja afinidad por el O2.

- La estructura Relajada (R) tiene gran afinidad por el O2

Los cambios en la conformación de la superficie de

la subunidad (donde se une el O2) conduce a un
nuevo sistema de interacciones entre las
subunidades adyacentes.
 Cooperatividad
Definición: Es la influencia que tienen más subunidades sobre otras en una
proteína oligomérica, en lo que se refiere a su afinidad por su ligando.

Estado Tenso (T) Estado relajado (R)

 Cooperatividad en la unión de oxígeno
La hemoglobina exhibe una cooperatividad positiva en la unión a oxígeno molecular de sus
subunidades.
A baja presión de oxígeno, la hemoglobina se
encuentra en conformación tensa y lo une con
baja avidez

Cuando una molécula de oxígeno molecular

se une a una subunidad, se produce una
transición a la conformación relajada, y
modifica las subunidades vecinas

Esto provoca que la hemoglobina aumente su

avidez por oxígeno molecular
 Fenómeno de alosterismo
Alosterismo es la propiedad de algunas proteínas de cambiar la conformación y actividad (cambia de una
conformación nativa a otra diferente conformación nativa), cuando interactúa específicamente con algunos
ligandos

La estructura cuaternaria de una proteína está íntimamente relacionada al fenómeno de Alosterismo.

Características de las proteínas alostéricas.

• La gran mayoría poseen estructura cuaternaria.

• Tienen dos estructuras o conformaciones nativas diferentes
• Cada conformación tiene diferente comportamiento funcional.
• Las dos estructuras nativas están en equilibrio
• El equilibrio entre las dos se desplaza cuando la proteína interactúa con ligandos específicos.
• La interacción con el ligando se realiza en sitios específicos de la proteína conocidos como sitios
alostéricos

La Hemoglobina, mencionada anteriormente, es un típico ejemplo de proteína con estructura cuaternaria

que presenta alosterismo.
 Regulación alostérica de la hemoglobina

Efectores alostéricos negativos:

ü CO2 : Hb-O2. Hb-carbamato no une O2.

efecto
ü H+ : Hb-O2. HHb posee menor afinidad por O2. Böhr
ü 2,3 bisfosfoglicerato (2,3-BPG): Hb-O2

Efecto positivo indirecto:

Alta pO2 disminuye unión de H+ a Hb => Hb-O2.

Recordar equilibrio
Aproximadamente el 80% del CO2 producido
CO2 + H2O <——> H2CO3 <——> H+ + HCO3– en el metabolismo celular se transporta a los
pulmones como ión bicarbonato.
 Curvas de saturación de oxígeno
para la mioglobina y hemoglobina.

La curva de saturación para la mioglobina

muestra la típica saturación dependiente de la
concentración de oxígeno.
Las curvas de saturación para la Hemoglobina,
muestran la típica sigmoidal saturación de
oxígeno para la unión cooperativa exhibida
por fetal hemoglobina (HbF) y adultos
hemoglobina (HbA).
¿Cuál de las siguientes proteínas presenta mayor afinidad por oxígeno? ¿Qué simboliza el P50?
El pH modula la afinidad de la hemoglobina por el
oxígeno

pH 7,4: Sangre
pH 7,2: Tejidos
pH 7,6: Pulmones
El BPG modula la afinidad de la hemoglobina por el
oxígeno

R-state
T-state
 Resumen
allos: otro
Proteína activa Proteína menos activa o inactiva steros: forma

En la hemoglobina, para optimizar transporte y entrega de gases

Hemoglobina
Moduladores
alostéricos
- 2,3-BPG
⃝
Afinidad
Hb-O2 -
⃝
CO2
-
+ ⃝
⃝
O2 pH ácido
Cooperatividad
Noticia: muerte por H2S
 Midamos el aprendizaje:

¿Qué efecto producen las altas concentraciones de oxígeno a nivel

pulmonar sobre la interacción de la hemoglobina por su ligando
(oxígeno)?
a) El alosterismo positivo por el oxígeno produce un aumento en la afinidad por el ligando
b) El alosterismo negativo por el oxígeno produce una disminución en la afinidad por el ligando
c) La cooperatividad positiva por el oxígeno produce que la curva de saturación tome forma
hiperbólica.
d) La cooperatividad positiva por el oxígeno produce un aumento en la afinidad por el ligando.
 Midamos el aprendizaje:

¿Qué efecto sobre la interacción de la hemoglobina por el oxígeno se produce

en los tejidos periféricos, al encontrarse en presencia de 2,3
bisfosfoglicerato?
a) El alosterismo positivo genera un desplazamiento de la curva de saturación hacia la izquierda
b) El alosterismo negativo genera un desplazamiento de la curva de saturación hacia la derecha
c) La cooperatividad negativa produce que la curva de saturación tome forma hiperbólica
d) La cooperatividad negativa produce que la curva de saturación se desplace a la izquierda