Obtención de Biocombustible a partir de Zea Mays con aplicación

de Alfa-Amilasa
Miryam Madeleine Lopatinsky Prado
MBA. Mariela Reyes
Facultad de Ingeniería Mecánica y Ciencias de la Producción (FIMCP)
Escuela Superior Politécnica del Litoral (ESPOL)
Campus Gustavo Galindo, Km 30.5 Vía Perimetral
Apartado 09-01-5863. Guayaquil, Ecuador
madeleine_lopatinsky@hotmail.com

Resumen
Los biocombustibles son una nueva alternativa energética que se está usando a nivel mundial ya que
representan una alternativa que ayuda a los problemas de medio-ambiente que el mundo está enfrentando,
además de presentar una única oportunidad para nosotros para mejorar el acceso a la energía en algunos de los
países más pobres del planeta. Se usan diversas materias primas para la elaboración de los mismos, el maíz es
una de ellas.

El proceso de elaboración consiste en degradar el almidón a azúcares más simples en un proceso de aplicación
enzimática para luego someterse a un proceso de aplicación microbiológica como es la fermentación. Se
destila y rectifica el mosto obtenido para obtener un alcohol con las características requeridas.

El objetivo principal de este artículo es obtener biocombustible con un diagrama de flujo que optimice el
proceso de elaboración, usando materias primas con el menor costo posible y que a su vez sea una alternativa
de solución más acorde con la realidad nacional.

Palabras Claves: degradas, proceso enzimático, rectificación, mosto.

Abstract
Biofuels are a new energy alternative being used worldwide as a way to help solve the environmental
problems that the world is facing nowadays. It also provides us with a unique opportunity to improve energy
access in some of the poorest countries on the planet. Various raw materials have been used for its production,
maize being one of them.

The manufacturing process consists on degrading the starch to simple sugars in an enzymatic implementation
process that then undergoes a process of microbiological implementation such as fermentation. It is distilled
and the must obtained is rectified in order to obtain alcohol with the required characteristics.

The main purpose of this article is to get biofuel with a flow diagram that optimizes the process of
developing, using raw materials at the lowest possible cost and at the same time to provide an alternative
solution more in line with the national reality.

Key words: degraded, enzymatic process, rectify, must.

1. Introducción
El cultivo de maíz tiene especial
importancia en el país ya que constituye
un elemento esencial para la base de la
alimentación actual. En Ecuador las
mejores épocas para su producción están
comprendidas entre el 15 de diciembre al
15 de enero (estación lluviosa) y del 15
de mayo al 15 de junio (estación seca).
La variedad de maíz conocida como Zea
Mays es producida en su mayoría en la
costa ecuatoriana, el objetivo de este
trabajo es el aprovechamiento de este
maíz para la obtención de alcohol etílico
y para su posterior uso en
biocombustible. A continuación se
detalla el proceso que se seguirá para
producir un biocombustible y los
parámetros que se controlan en cada
etapa.
2. Proceso de Sacarificación
Es un proceso en el cual se degrada el
almidón a azúcares más simples. Primero
se procede a hidrolizar el almidón de
maíz para luego ser calentado en forma
de leche, en el cual se hidrolizará a
dextrina mediante licuación enzimática
(amilasa) la cual deberá darse a 60°C
debido a los parámetros óptimos para el
funcionamiento de la enzima.
El jarabe de glucosa resultante es
tamizado por filtración para eliminar
impurezas que se le hayan pegado en el
proceso.
2.1 Producción de Azúcares Fermentables
Al romper las cadenas de almidón se
producen monosacáridos que serán
esenciales para servir de alimento para
las levaduras en el proceso de
fermentación. A continuación se muestra
el gráfico que relaciona la producción de
Grados Brix con respecto al tiempo.
10
Grados Brix
5 Grad
os
0 Brix
0 10 20
Horas
Figura 1 Producción de Azúcares
Fermentables.
2.2. Cantidad añadida de Cloruro de Sodio
Al añadir Cloruro de Sodio en 20 ppm se
facilita la acción de la enzima en esta
parte del proceso. A continuación los
cálculos realizados.
20 ppm = 0.02 g/1000 g
Peso de la muestra = 912 g
Cantidad de ClNa agregado = 20 ppm
(912 g * 0.02 g) / 1000 g = 0.018 g
2.3. Variación de Densidad
En esta etapa existe una variación de
densidad debido a que al principio se
tenía una solución en estado sólido y
denso a un estado líquido y fluido. A
continuación los valores obtenidos en
esta variación.
ρ1 = m/v ρ1 = 912 g /572 ml = 1.59 g/ml
ρ2 = m/v ρ2=357.46 g/250ml = 1.42 g/ml
3. Proceso de Fermentación
La glucólisis es la primera etapa de la
fermentación, lo mismo que en la
respiración celular, y al igual que ésta
necesita de enzimas para su completo
funcionamiento. A pesar de la
complejidad de los procesos bioquímicos
una forma esquemática de la reacción
química de la fermentación alcohólica
puede describirse como una glicólisis (en
la denominada vía Embden-Meyerhof-
Parnes) de tal forma que puede verse
como participa inicialmente una molécula
de hexosa:
C6H12O6 + 2 Pi + 2 ADP → 2 CH3-
CH2OH + 2 CO2 + 2 ATP + 25.5 kcal
Se puede ver que la fermentación
alcohólica es desde el punto de vista
energético una reacción exotérmica, se
libera una cierta cantidad de energía. La
fermentación alcohólica produce gran
cantidad de CO2, que es la que provoca
que el Champagne y algunos vinos
tengan burbujas. Este CO2 pesa más que
el aire, y puede llegar a crear bolsas que
desplazan el oxígeno de los recipientes
donde se produce la fermentación. Por
ello es necesario ventilar bien los
espacios dedicados a tal fin.
El producto es un piruvato tal y como se
describe a continuación:
C6H12O6 → 2 CH3COCOO− + 2 H2O
+ 2H+
La reacción química se describe como la
reducción de dos moléculas de
Nicotinamida adenina dinucleótido
(NAD+) de NADH (forma reducida del
NAD+) con un balance final de dos
moléculas de ADP que finalmente por la
reacción general mostrada anteriormente
se convierten en ATP (adenosín
trifosfato). Otros compuestos trazados en
menores proporciones que se encuentran
presentes tras la fermentación son: el
ácido succínico, el glicerol, el ácido
fumárico.
En primer lugar el piruvato se
descarboxila mediante la acción de la
piruvato descarboxilasa para dar como
producto final acetaldehído liberando por
ello dióxido de carbono (CO2) a partir de
iones del hidrógeno (H+) y electrones del
NADH.
Tras esta operación el NADH sintetizado
en la reacción bioquímica catalizada por
el GADHP se vuelve a oxidar por el
alcohol deshidrogenasa, regenerando
NAD+ para la continuación de la
glucólisis y sintetizando al mismo tiempo
etanol. Se debe considerar que el etanol
va aumentando de concentración durante
el proceso de fermentación y debido a
que es un compuesto tóxico, cuando su
concentración alcanza aproximadamente
un 12% de volumen las levaduras tienden
a morir. Esta es una de las razones
fundamentales por las que las bebidas
alcohólicas (no destiladas) no alcanzan
valores superiores a los 20% de
concentración de etanol.
Los grados Brix (símbolo °Bx) miden el
cociente total de sacarosa disuelta en un
líquido. Una solución de 25 °Bx tiene 25
g de azúcar (sacarosa) por 100 g de
líquido o, dicho de otro modo, hay 25 g
de sacarosa y 75 g de agua en los 100 g
de la solución. Los grados Brix se miden
con un, refractómetro que mide la
gravedad específica de un líquido. Estos
son muy importantes ya que las levaduras
se alimentaran del porcentaje de azúcares
presentes en el jarabe.
La levadura previamente hidratada se la
agrega al jarabe obtenido en el proceso
de sacarificación. Luego se coloca en el
bioreactor la mezcla en botellas cerradas
herméticamente pero con salidas de
evacuación para gases y tomas de
muestras.
3.1. Hidratación de Levadura
Para la hidratación de la Sacharomices
Cereviciae se utilizo el 2% de la cantidad
de jarabe obtenido hidrolizada a una
temperatura que oscilo entre 40-45 °C.
Levadura = (250*2) /100 = 5 g
3.2. Grado Alcohólico Obtenido
Una vez transcurrido el proceso de
fermentación se obtuvieron los
siguientes resultados.
Tiempo utilizado = 25 horas
°GL = 8.1
Temperatura = 20 °C
3.3. Producción de Dióxido de Carbono
A medida que transcurren los días de
fermentación el dióxido de carbono va
ganando espacio en la botella de agua
que se encuentra conectada al
bioreactor en forma experimental. Por
diferencia de pesos se conoce la
cantidad de dióxido de carbono
producido durante la fermentación.
Peso 1 = envase + agua
Peso 1 = 412.10 + 250 ml
Peso 2 = envase
Peso 2 = 662.73 g
Peso CO2 = (Peso 2 – Peso 1) = 662.73
- 662.1 = 0.63 gr de CO2
4. Proceso de Destilación
Es un proceso que consiste en calentar un
líquido hasta que sus componentes más
volátiles pasan a la fase de vapor y, a
continuación, enfriar el vapor para
recuperar dichos componentes en forma
líquida por medio de la condensación. El
objetivo principal de la destilación es
separar una mezcla de varios
componentes aprovechando sus distintas
volatilidades, o bien separar los
materiales volátiles de los no volátiles.
La finalidad principal de la destilación es
obtener el componente más volátil en
forma pura. Por ejemplo, la eliminación
del agua del alcohol evaporando el
alcohol se llama destilación, aunque se
usan mecanismos similares en ambos
casos.
4.1. Rendimiento Etánolico
 Se aplica la siguiente fórmula tanto para
destilación en el laboratorio como para
destilación industrial
Rendimiento etánolico = (volumen inicial
del mosto * °GL inicial) / (°GL final *
eficiencia destilación * 0.9 de fracción
etánolica)
RE = (249*0.081) / (0.96*0.95*0.9) =
24.57 ml. de alcohol etílico al 96%
5. Proceso de Purificación
Es un proceso que consiste en calentar un
líquido hasta que sus componentes más
volátiles pasan a la fase de vapor y, a
continuación, enfriar el vapor para
recuperar dichos componentes en forma
líquida por medio de la condensación. El
objetivo principal de la destilación es
separar una mezcla de varios
componentes aprovechando sus distintas
volatilidades, o bien separar los
materiales volátiles de los no volátiles.
La finalidad principal de la destilación es
obtener el componente más volátil en
forma pura. Por ejemplo, la eliminación
del agua de la glicerina evaporando el
agua, se llama evaporación, pero la
eliminación del agua del alcohol
evaporando el alcohol se llama
destilación, aunque se usan mecanismos
similares en ambos casos.
5.1. Variación de Densidad
En esta etapa existe una variación de
densidad debido a que el alcohol ha sido
purificado con carbón activado y los
sólidos suspendidos han sido retenidos
por el mismo. A continuación los valores
obtenidos en esta variación.
ρ1 = m/v ρ1 = 357.46g/250 ml=1.42 g/ml
ρ2 = m/v ρ2 = 33.43g/24.57ml=1.36 g/ml
6. Factores que inciden durante el
Proceso
Oxígeno.- El contacto con el aire se
refiere a una intervención de oxígeno
(por mínima que sea) en el proceso lo
detiene por completo (es el denominado
Efecto Pasteur). Esta es la razón por la
que los recipientes fermentadores se
cierren herméticamente.
pH.- es un factor limitante en varias
etapas del proceso de obtención de jarabe
y luego en el de obtención de alcohol.
Para que la alfa-amilasa función el pH
óptimo debe ser de 5.3 siendo tolerable
hasta 7. Las levaduras se encuentran
afectadas claramente por el ambiente,
bien sea alcalino o ácido. Por regla
general el funcionamiento de las
levaduras está en un rango que va
aproximadamente desde 3.5 a 5.5 pH
Temperatura.- es un factor importante
durante la obtención de jarabe debido a
que la enzima trabaja óptimamente a
60°C si esta llegara a 70°C se inactivaría.
En la obtención de alcohol influye en el
rendimiento de la producción de alcohol
por medio de las levaduras debido a que
deben ser hidrolizadas a 40-45 °C. El
proceso de fermentación es exotérmico, y
las levaduras tienen un régimen de
funcionamiento en unos rangos de
temperatura óptimos, se debe entender
además que las levaduras son seres
mesófilos. Si se expone cualquier
levadura a una temperatura cercana o
superior a 55 ºC por un tiempo de 5
minutos se produce su muerte. La
mayoría cumple su misión a temperaturas
de 30ºC.
Nutrientes.- la concentración de azúcares
o también llamados hidratos de carbono
en forma de monosacáridos y disacáridos
puede frenar la actividad bacteriana. De
la misma forma la baja concentración
puede frenar el proceso. Las
concentraciones límite dependen del tipo
de azúcar así como de la levadura
responsable de la fermentación. Las
concentraciones de azúcares afectan a los
procesos de osmosis dentro de la
membrana celular.
7. Análisis de Costos
El costo de producción es de 2485.7
dólares americanos diarios, 74048
dólares americanos mensuales y de
888389.9 dólares americanos anuales,
estos cálculos son envase a una
producción diaria de 1000 litros de
alcohol etílico.
8. Conclusiones
El 80% de la producción de maíz en el
país no se adecuada para consumo
humano y se destina para elaboración de
balanceados.
El biocombustible es el término con el
cual se denomina a cualquier tipo de
combustible que derive de la biomasa Es
una fuente renovable de energía, a
diferencia de otros recursos naturales
como el petróleo, carbón y los
combustibles nucleares. Aunque se puede
hablar de muchos tipos de
biocombustible, por su importancia,
aplicación y volumen de producción,
básicamente hay dos: el bioetanol y el
biodiesel. Se cree que pueden sustituir a
los combustibles fósiles más
tradicionales, en virtud de su bajo o nulo
deterioro ambiental y sus características
de renovación.
Se debe recordar que los biocombustibles
se encuentran en un estado de desarrollo
tecnológico aún muy joven. Esto nos
indica que en un corto o mediano plazo
abra una reducción significativa de los
costos de producción debido a la
optimación materias primas y mejor uso
de los productos residuales.
Mantener las condiciones de acacia
durante todo el proceso debido a que se
puede dar una contaminación y tanto el
proceso de sacarifican como el de
fermentación podrían verse seriamente
afectados.
Una de las formas para disminuir los
costos de inversión inicial es comprando
equipos usados y en buen estado.

10. Referencias
El costo de producción de un litro de
alcohol etílico al 96% es de 2.48 dólares
americanos. [1]García Mariano, López Munguía,
Biotecnología alimentaria, 1996
Para que los resultados del proceso se
den de forma adecuada se debe de [2]Wiseman Albert, Manual de
controlar las temperaturas ya pre- Biotecnologías de las Enzimas, Editorial
establecida ya que si existe variación la Acribia, 1998, España.
enzima y la levadura no actuaran con la
capacidad deseada. [3]es.wikipedia.org/wiki/Jarabe_de_maíz

Los resultados obtenidos [4]es.wikipedia.org/wiki/Cerveza

experimentalmente en este proyecto se
pueden llevar a procesos a gran escala y
servirán como guía para la creación de
una planta de biocombustible.

En la realización de este estudio se

mezclaron técnicas investigativas y
métodos de análisis en el laboratorio que
fueron adquiridos durante el período de
formación universitaria.

9. Recomendaciones
Se recomienda usar buenas prácticas de
manufactura durante todo el proceso.

Para abaratar costos se debería empezar

con maíz como materia prima y el
proceso empezaría con la etapa de
molienda.