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Artículo
Influencia del dopaje con luminol de poli(o-fenilendiamina) en las

propiedades espectrales, morfológicas y fluorescentes: un
biomarcador potencial para el parásito Leishmania Ufana Riaz, Sapana
Jadoun, Prabhat Kumar, Mohd. Arish, Abdur Rub y Syed Marghoob Ashraf ACS Appl. Mate.
Interfaces, manuscrito recién aceptado • DOI: 10.1021/acsami.7b10325 • Fecha de publicación (web):
6 de septiembre de 2017 Descargado de http://pubs.acs.org el 8 de septiembre de 2
recién aceptado
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Página 1 de 34 Interfaces y materiales aplicados de ACS
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Influencia del dopaje con luminol de poli(o)
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12 fenilendiamina) en el espectro, morfológico
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y propiedades fluorescentes: un biomarcador potencial
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20 para el parásito Leishmania
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Ufaná Riaza*, Sapana Jadouna , prabhat kumarc , Mohd.Arishb , Abdur Rubbd y SMAshrafa†
26
27
28 a
29 Laboratorio de Investigación de Materiales Departamento de Química, Jamia Millia Islamia, Nueva Delhi
30
31 b
110025, India, Departamento de Biotecnología, Jamia Millia Islamia, Nueva Delhi-110025
32
33
34
35 cCentro de Investigación de Instrumentación Avanzada, Universidad Jawaharlal Nehru, Nueva Delhi- 110067
36
37
d
38 Departamento de Ciencias de Laboratorio Médico, Facultad de Ciencias Médicas Aplicadas, Majmaah
39
40
Universidad, Al Majmaah, Reino de Arabia Saudita (KSA)
41
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43
† ahora jubilado
* Correo electrónico del autor correspondiente: ufana2002@yahoo.co.in,
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47 PALABRAS CLAVE: dopaje; polímero conjugado; fluorescencia; brecha de banda; citotoxicidad; bioimagen
48
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50 RESUMEN
51
52
53
54 Ha habido un progreso constante en el desarrollo de polímeros conjugados dopados para
55
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mejoran notablemente sus propiedades fotofísicas para su aplicación como biomarcadores. Con un
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Entorno ACS Paragon Plus

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Interfaces y materiales aplicados de ACS Página 2 de 34
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para mejorar las propiedades espectrales, morfológicas y fotofísicas de poli(o
4
5
6 fenilendiamina) (POPD), el presente trabajo reporta la síntesis de poli(o-fenilendiamina)
7
8 y dopaje de este polímero usando luminol. Se confirmó la formación de POPD dopado con luminol.
9
10
mediante espectroscopias infrarrojas, ultravioleta-visible (UV-vis) y estudios de difracción de rayos X (XRD). los
11
12
13 valores de banda prohibida de energía y fuerza del oscilador de luminol en medios ácidos, básicos y neutros
14
15 se calcularon mediante cálculos de la teoría funcional de la densidad (DFT) utilizando el B3LYP/6-31G (d)
dieciséis
17
18 conjunto de base y se compararon con los datos experimentales. La viabilidad celular se investigó utilizando
19
20 el ensayo de metil tetrazolio (MTT) mientras se determinaba la actividad antileishmanial in vitro
21
22
utilizando la concentración inhibidora (IC50) y la concentración citotóxica (CC50) respectivamente. Los resultados
23
24
25 reveló que los POPD dopados con luminol eran potencialmente no citotóxicos y exhibían una inmensa
26
27 potencial para ser utilizado como biomarcador de Leishmania donovani.
28
29
30
31 INTRODUCCIÓN
32
33
34 La identificación y caracterización de eventos intracelulares es de inmensa importancia.
35
36
particularmente para aplicaciones terapéuticas1-5. El análisis óptico basado en el marcaje de fluorescencia ha
37
38
39 se ha utilizado ampliamente para estudiar varios mecanismos biológicos y puntos cuánticos como
40
41 seleniuro de cadmio (CdSe) telururo de cadmio (CdTe), grupos de nanopartículas de plata y oro como
42
43
44 así como las nanopartículas de sílice mesoporosas son las más utilizadas en estos casos4-7. Aunque estos
45
46 Los fluoróforos tienen un alto rendimiento cuántico, suelen sufrir fotoblanqueo y presentan un
47
48
cierto nivel de toxicidad que dificulta su aplicación en bioimagen8 .
49
50
51 Últimamente, ha habido un progreso constante en el desarrollo de conjugados altamente fluorescentes.
52
53 polímeros como polianilina (PANI) 9, polipirrol (Ppy) 10, poli(1-naftilamina) (PNA)11 que
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puede encapsularse y funcionalizarse mediante dopaje12. Entre los varios PANI procesables
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derivados, se sabe que la poli(o-fenilendiamina) (POPD) posee una alta aromaticidad debido a la
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6 presencia de unidades repetitivas de quinoxalina13. Exhibe una fuerte capacidad de adsorción y se ha utilizado
7
8 para el diseño de sondas de fluorescencia, sensores químicos y biológicos14-15 .
9
10
El dopaje es una de las técnicas fáciles que se ha utilizado ampliamente para alterar la estructura
11
12
13 propiedades de los materiales y el uso de polímeros conjugados confiere ventajas útiles, tales como la
14
15 introducción de funcionalidad y portadores de carga en la superficie de estos polímeros16-17 .
dieciséis
17
La mejora de las propiedades fisicoquímicas se puede lograr fácilmente mediante el ajuste de
18
19
20 banda prohibida de estos polímeros mediante la introducción de dopantes18-19. Sistemas de polímeros dopados con colorantes
21
22 mostrar efectos fluorescentes mediante el uso de altas concentraciones de las moléculas activas mientras se previene
23
24
25 la agregación de las moléculas en la matriz polimérica20. intermolecular no covalente
26
27 Las interacciones ayudan a unir moléculas funcionales a la columna vertebral del polímero y son ampliamente
28
29
explotado en química supramolecular para preparar materiales poliméricos autoensamblados. A pesar de que
30
31
32 la influencia de las interacciones intermoleculares colorante a colorante en el rendimiento de los sistemas poliméricos ha
33
34 sido investigado a fondo, menos esfuerzo se ha dirigido hacia el estudio del efecto de
35
36
interacciones covalentes entre otras moléculas activas funcionalizadas en el polímero conjugado
37
38
como material huésped18-20 .
39
40
41 El luminol (5-amino-2,3-dihidro-1,4 ftalazindiona) es un conocido quimioluminiscente
42
43
reactivo muy utilizado en biología molecular y química analítica. Se ha utilizado como base
44
45
46 para una multitud de métodos de detección sensibles y selectivos, incluido líquido de alto rendimiento
47
48 cromatografía (HPLC), inmunoensayo, sondas de ADN, tipificación de ADN y como sustrato en western
49
50
51 detección de manchas21-25. Debido a la relevancia de algunas de sus aplicaciones quimioluminiscentes, varios
52
53 grupos han buscado algunos derivados de luminol para maximizar el cuanto de quimioluminiscencia
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rendimiento de este compuesto y extender el rango de longitudes de onda de emisión hacia la región visible
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3
del espectro electromagnético26-29. Aunque algunos de los experimentos han sido bastante
4
5
6 exitoso, el estudio de este fenómeno está lejos de agotarse, pues la variable
7
8 los estados oxidativos del luminol en medios ácidos y básicos no están completamente establecidos. los
9
10
Las reacciones de oxidación del luminol pueden ocurrir de varias maneras dependiendo del pH del
11
12
13 medio18. En este trabajo, hemos intentado investigar la influencia de las interacciones covalentes
14
15 entre luminol (Lum) y POPD en medios ácidos, básicos y neutros. Los sistemas eran
dieciséis
17
estudiado por espectroscopía ultravioleta-visible (UV-Vis) e infrarroja (IR), difracción de rayos X
18
19
20 mediciones y técnicas de microscopía electrónica de transmisión. Los resultados mostraron que
21
22 Las interacciones intermoleculares entre luminol y POPD podrían mejorarse cambiando el
23
24
25 estado de oxidación del primero. Se observó que la tendencia de agregación se minimizaba y
26
27 El dopaje con luminol mejoró considerablemente la emisión de fluorescencia de POPD proporcionando así un
28
29
nuevo método para sintetizar polímeros funcionales hechos a medida sin necesidad de compuestos orgánicos complejos
30
31
32 síntesis. Esto podría abrir nuevas vías para el diseño de materiales adecuados para diversos biológicos
33
34 y aplicaciones optoelectrónicas. Se eligió la tinción de Leishmania donovani para investigar
35
36
la citotoxicidad y la actividad anti-leshmania in vitro. La leishmaniasis es una enfermedad transmitida por vectores
37
38
39 causada por un protozoario que puede provocar leishmaniasis visceral letal y ha infectado a unas 12
40
41 millones de personas en todo el mundo30. Hasta la fecha, la única quimioterapia de intervención de control contra
42
43
44 leishmaniasis implica el uso de antimoniales pentavalentes altamente tóxicos, para los cuales se ha desarrollado resistencia.
45
46 ha sido ampliamente reportada31. Por lo tanto, se espera que el uso de POPD de luminol como biomarcador ayude en
47
48 la detección y diagnóstico precoz de este parásito. La viabilidad celular se determinó utilizando
49
50
51 el ensayo de viabilidad de células MTT, mientras que la actividad antileishmanial in vitro se expresó como inhibidora
52
53 valor de concentración (IC50) y valores de concentración citotóxica (CC50) respectivamente, por lineal
54
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análisis de regresión.
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6 MATERIALES Y MÉTODOS
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9 o-fenilendiamina (Sigma Aldrich, EE. UU.), luminol (Sigma Aldrich, EE. UU.), férrico
10
11
12
cloruro (Merck, India), hidróxido de sodio (NaOH) (Merck, India), tetrahidrofurano
13
14 (THF) (Sigma Aldrich, EE. UU.), N-metil-2-pirrolidona (NMP) (Sigma Aldrich, EE. UU.),
15
dieciséis
Peróxido de hidrógeno (H2O2) (50 % en peso en H2O, estabilizado) (Sigma Aldrich, EE. UU.), Potasio
17
18
19 ferrocianuro (K4Fe(CN)6) (Merck, India) sin purificación adicional.
20
21 Síntesis ultrasónica de poli(o-fenilendiamina) (POPD)
22
23
Se añadió monómero de O-fenilendiamina (4 g, 0,037 mol) a un matraz Erlenmeyer de 250 ml.
24
25
26 que contiene agua desionizada (100 ml). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 15
27
28 mín. Cloruro férrico (5,99 g, 0,036) utilizado como iniciador disuelto en agua destilada (150 ml)
29
30
se añadió a la mezcla de reacción gota a gota con la ayuda de una bureta manteniendo la
31
32
33 relación monómero:iniciador como 1:1. Luego, el matraz se sonicó durante 3 h, se mantuvo entre
34
35 25-30 ºC utilizando un ultrasonicador. El color de la mezcla de reacción cambió de transparente.
36
37
38 marrón a marrón verdoso que indica polimerización de o-fenilendiamina11. Lo mismo
39
40 Se mantuvo en un congelador profundo durante 24 horas a -5 ºC. El polímero sintetizado se lavó varias
41
42
veces con agua destilada con la ayuda de una centrífuga de laboratorio R-8C para confirmar la
43
44
45 eliminación del exceso de cloruro férrico que se probó con ferrocianuro de potasio. Poli(o
46
47 fenilendiamina) se secó en un horno de vacío a 100 oC durante 72 h para asegurar
48
49
50
Eliminación completa de monómero sin reaccionar, impurezas y agua. El polímero fue
51
52 designado como POPD y el rendimiento porcentual se calculó en 89,81%.
53
54 Preparación de polímeros POPD dopados con Luminol
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Se prepararon soluciones de luminol en medios neutros, ácidos y básicos disolviendo
4
5
6 luminol (2,1 g) en agua desionizada (250 ml), solución de hidróxido de sodio (NaOH) 0,1 M
7
8 (250 ml) y solución de peróxido de hidrógeno (H2O2) 0,1 M (50 % en peso en H2O) (250 ml). finamente
9
10
Luego se dispersó polvo de POPD molido (500 mg) en las soluciones de luminol anteriores
11
12
13 por separado y se sometieron a sonicación durante un período de 8 h a 25 ÿC. Las soluciones fueron
14
15 mantuvo sin perturbar durante la noche. Luego, los polímeros dopados se separaron de las soluciones a través de
dieciséis
17
18 centrifugado y secado en estufa de vacío durante 72 h a 100 oC para asegurar la eliminación completa de
19
20 agua y otras impurezas. Las soluciones de luminol preparadas en neutro, ácido y básico
21
22
los medios fueron designados como Lum-H2O, Lum-H2O2 y Lum-NaOH respectivamente, mientras que los
23
24
25 los polímeros dopados se designaron como POPD-Lum-H2O, POPD-Lum-H2O2 y POPD-Lum
26
27 NaOH, respectivamente.
28
29 CARACTERIZACIÓN
30
31
32 Los cálculos de DFT y TD-DFT se realizaron utilizando el software GAUSSIAN 09; los resultados fueron
33
34 analizado con el software Gauss View. Las geometrías optimizadas del luminol en diferentes medios.
35
36
37 se determinaron mediante minimización de gradiente en DFT con funciones de correlación B3LYP/ a 6-31G
38
39 (d) base establecida al ignorar las simetrías. Las optimizaciones de la geometría se consideraron completas.
40
41
cuando un punto estacionario estaba ubicado en la Superficie de Energía Potencial (PES). Los espectros UV-vis
42
43
44 de estructuras geométricas optimizadas de luminol en soluciones neutras, ácidas y básicas fueron
45
46 simulado en el nivel TD-DFT/B3LY, UB3LYP-6-31+G(d, p). El orbital molecular frontera
47
48
simulaciones tales como energías de los orbitales moleculares ocupados más altos (HOMO), energías de los orbitales moleculares más bajos
49
50
51 Los cálculos de orbitales moleculares desocupados (LUMO) y de banda prohibida se realizaron utilizando
52
53 Nivel DFT/B3LY/6-31G. El peso molecular promedio de viscosidad se calculó tomando la
54
55
Constantes de Mark-Houwink (K y a), como primera aproximación, donde [K = 2.0 x 10-2 y a =
56
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6
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3
0,3176] (0,2 % en peso) en medio NMP usando el viscosímetro Ubbelhode, como se informa en nuestro
4
5
6 estudios anteriores18-19. Los espectros FT-IR de polímeros y polímeros dopados se tomaron en KBr
7
8 pellets en espectrómetro FT-IR modelo Shimadzu IRA Affinity-1. La absorción integrada
9
10 ÿ v
coeficiente, ,
anuncio
11 se determinó usando el software IRA Affinity-1 a través de Gaussian

12
13 Ajustes de la curva lorentziana como se muestra en la Tabla.1. Los espectros UV-visible se tomaron en UV
14
15
espectrofotómetro visible modelo Shimadzu UV-1800 usando NMP como solvente. el molar
dieciséis
17
18 coeficiente de extinción y la fuerza del oscilador se calcularon como se informó en nuestro anterior
19
20 estudios32. Se registraron los patrones de difracción de rayos X de los polímeros y los polímeros dopados.
21
22
en difractómetro de polvo Philips PW 3710 (radiación K-ÿ de cobre filtrada con níquel). El d
23
24
25 el espaciamiento (D) se determinó utilizando la relación de Bragg32. Transmisión de alta resolución
26
27 Se tomaron micrografías electrónicas (HRTEM) en TECNAI 200 Kv TEM (Fei, Electron Optics).
28
29
30
Los espectros de emisión de fluorescencia se registraron en un espectrofotómetro de fluorescencia.
31
32 Fluorolog@3-11 en medio de solución usando NMP como solvente. El rendimiento cuántico (ÿ) fue
33
34 calculado se calculó usando la Rodamina B como material de referencia como se menciona en
35
36
37 nuestro trabajo anterior11. Las micrografías confocales se obtuvieron usando un Laser Confocal
38
39 Microscopio con espectroscopia de correlación de fluorescencia (FCS) - Olympus FluoView™
40
41
FV1000 equipado con láser He-Ne y objetivo de inmersión en aceite. ÿmax para excitación láser
42
43
44
fue de 410nm.
45
46 Cultivo celular y actividad anti-leishmania: evaluación dependiente de la dosis de anti-promastigote
47
48
actividad y determinación de IC50
49
50
51 Se cultivaron promasigotos de Leishmania donovani (MHOM/IN/1980/AG83) en medio M199
52
53 (Gibco) complementado con suero bovino fetal (FBS) inactivado por calor al 10% (Gibco) y al 1%
54
55
56
Solución de penicilina estreptomicina (Gibco) a 22°C. Promastigotes a una densidad de 2 × 106 células/ml
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3
se incubaron en ausencia y/o presencia de los compuestos 1-4 en diluciones en serie a partir de
4
5
6 100 µg/ml (100, 50, 25, 12,5, 6,25, 3,125 µg/ml) durante 48 h a 22 °C. Se utilizó hidrato de miltefosina
7
8 como un fármaco estándar contra la leishmania. Las células THP-1 se mantuvieron en un 5% de CO2 humidificado
9
10
incubadora a 37°C en medio RPMI (Gibco) suplementado con 10% de suero fetal inactivado por calor
11
12
13 suero bovino (FBS) (Gibco) y solución de penicilina estreptomicina al 1% (Gibco). Las células THP-1 fueron
14
15 diferenciados usando forbol 12-miristato 13-acetato (PMA) a 5 ng/ml. Dependiente de la dosis
dieciséis
17
18 evaluación de la actividad anti-promastigotes y determinación de promastigotes IC50 a una densidad de 2
19
20 × 106 células/ml se incubaron en ausencia y/o presencia de POPD dopados con luminol en series
21
22
diluciones a partir de 100 µg/ml (100, 50, 25, 12,5, 6,25, 3,125 µg/ml) durante 48 h a 22 °C.
23
24
25 El hidrato de miltefosina se utilizó como fármaco estándar contra la leishmania. Las células se contaron utilizando
26
27 hemocitómetro. Para el ensayo MTT, se sembraron 1 × 105 células por pocillo en una placa de 96 pocillos y se
28
29
tratados con PMA para la diferenciación durante 24 h. Al día siguiente se lavaron las células y se
30
31
32 reemplazado con medio fresco y cultivado durante 24 h adicionales en presencia de compuestos 1-4 (1000-
33
34 31,25 µg/ml). La viabilidad celular se determinó utilizando el ensayo de viabilidad celular MTT. 3-(4,5-Dimetil
35
36
Se aplicó bromuro de 2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazolio, MTT (Sigma-Aldrich) en la oscuridad
37
38
39 después de una incubación de 4 horas a 37°C. El medio que contenía MTT se reemplazó con 100 µl de
40
41 isopropanol-HCl (0,1 N) y se mantuvo a 37 °C durante 10 min para solubilizar los cristales de formazán. los
42
43
44 Las muestras se transfirieron a placas de 96 pocillos y la absorbancia del tinte convertido se
45
46 medida a 570 nm. El porcentaje de viabilidad celular de las células de control (no tratadas) se tomó como
47
48
100%. La actividad antileishmanial y de citotoxicidad in vitro se expresó como IC50 y CC50
49
50
51 respectivamente, por análisis de regresión lineal. Los valores son la media ± SD de las muestras por triplicado de
52
53 dos experimentos independientes.
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5
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8 RESULTADOS Y DISCUSIÓN
9
10
Determinación teórica de las estructuras químicas del luminol en medios ácidos, básicos y neutros.
11
12
13 Las estructuras optimizadas y la distribución de carga de las estructuras de luminol en ácidos, básicos y
14
15 los medios neutrales se dan en la información de apoyo, Figuras S1 y S2 y Tablas S1, S2 y S3.
dieciséis
17
18 Las estructuras optimizadas así como las coordenadas cartesianas correspondientes del Lum-H2O
19
20 dado en la Figura S1 (a), la Tabla S1 revela que se notó que las longitudes de los enlaces C = C y CC eran
21
22
1,33 Å y 1,51 Å respectivamente, mientras que se encontró que la longitud del enlace C=O estaba en el rango de 1,24
23
24
25 Å ÿ 1,27 Å. Se encontró que la longitud del enlace CÿN era de 1,42 Å y la longitud del enlace NN era
26
27 calculado en 1,41 Å. Las estructuras optimizadas así como el cartesiano correspondiente
28
29
coordenadas del Lum-H2O2, Figura S1 (b), Tabla S2 mostró que el enlace C=C y CC
30
31
32 Se observó que las longitudes de enlace eran de 1,45 Å y 1,47 Å respectivamente, mientras que las longitudes de enlace CO y C=O
33
34 se encontró que eran 1,41 Å y 1,25 Å. Se encontró que la longitud del enlace CÿN era de 1,50 Å. los
35
36
estructuras optimizadas así como las correspondientes coordenadas cartesianas del Lum-NaOH,
37
38
39 Figura S1 (c), Tabla S3 reveló que se notó que las longitudes de enlace C = C y CC eran 1.39 Å y
40
41 1,48 Å respectivamente, mientras que la longitud del enlace CÿN resultó ser de 1,48 Å y el enlace N=N
42
43
44 se observó que la longitud era de 1,27 Å. Se observó que la longitud del enlace C=O era de 1,27 Å. Análisis de
45
46 los parámetros optimizados indican que la distorsión geométrica tiene lugar mientras se mueve de
47
48
especies neutras a básicas, porque la longitud del enlace CÿN reveló una ligera variación que aumenta
49
50
51 en aproximadamente 0,08 Å para el luminol ácido y 0,06 Å para el luminol básico. Se observó una tendencia similar
52
53 en la variación de los ángulos diédricos que podrían estar correlacionados con la existencia de varias formas
54
55
de luminol en medios neutros, ácidos y básicos. En medio neutro, se encuentra que el luminol existe en
56
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1
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3
forma completamente protonada, Figura S1 (a), mientras que en medio ácido sufre oxidación para producir 3-
4
5
6 aminoftalato, Figura S2(b). La forma básica conduce a la formación de una 5 aminoftalazina 1,
7
8 4-diona, Figura S1(c).
9
10
Se muestra la distribución de las cargas en estructuras de luminol obtenidas bajo diferentes medios.
11
12
13 en la figura S2. Lum-H2O , Figura S2(b), exhibió una mayor distribución de carga negativa en el
14
15 átomos de carbono del anillo de anilina, mientras que los átomos de carbono unidos al oxígeno mostraron menor
dieciséis
17
18 cobrar. Se observó que el átomo de nitrógeno del anillo de anilina era más electronegativo que el
19
20 átomos de nitrógeno que estaban adyacentes al grupo carbonilo. La distribución de carga en caso de Lum
21
22
Se observó que el H2O2, Figura 2(b), era bastante diferente. Los átomos de oxígeno adyacentes al carbonilo
23
24
25 Se notó que los grupos eran menos electronegativos en comparación con el oxígeno de los grupos carbonilo.
26
27 El átomo de nitrógeno del anillo de anilina, así como los átomos de carbono ubicados en el meta y para
28
29
Se notó que las posiciones con respecto al grupo amino tenían una carga negativa más alta, mientras que
30
31
32 para Lum-NaOH, Figura 2(c), los átomos de nitrógeno que estaban adyacentes al grupo carbonilo eran
33
34 encontrado para tener cargas negativas similares a los átomos de oxígeno presentes en la misma posición en caso
35
36
de Lum-H2O2, Figura 2(b). Por lo tanto, se puede concluir que se encontró que la distribución de carga era
37
38
39 varían para el luminol dopado en diferentes medios. El DFT/B3LYP calculó los espectros UV-vis del
40
41 tres formas de luminol se dan en la Figura S3 de información de apoyo. La luz ultravioleta experimental
42
43
44 espectros visibles de luminol, Figura 1, revelaron 3 picos a 260 nm, 350 nm y 410 nm
45
46 respectivamente. Los dos primeros picos se correlacionaron con la transición ÿÿÿ* del bencenoide mientras que
47
48
el tercer pico estaba relacionado con la transición nÿÿ*. La intensidad del pico correspondiente a nÿÿ*
49
50
51 Se observó que la transición era más alta para Lum-NaOH mientras que las intensidades máximas de Lum-H2O y
52
53 Se observó que Lum-H2O2 estaba cerca uno del otro.
54
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11
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13
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15
16
17
18
19
20
21 Figura 1 Espectros UV-visible de luminol en soluciones de luminol ácidas, básicas y neutras
22
23
24
25 Los espectros UV-vis simulados revelaron un pico alrededor de 420 nm en neutro, ácido y básico.
26
27
media y coincidió bien con los valores informados por otros autores para luminol33. El pico posterior
28
29
30 estaba estrechamente relacionado con el pico determinado experimentalmente en nuestro caso y los espectros simulados
31
32 podría correlacionarse con las estructuras propuestas. Las simulaciones de orbitales moleculares de frontera en DFT
33
34
35 El nivel de teoría B3LYP/6-31G produce energías del orbital molecular ocupado más alto (HOMO) y
36
37 orbital molecular desocupado más bajo (LUMO) de formas neutras, ácidas y básicas de luminol. los
38
39
Los orbitales HOMOÿLUMO para estructuras neutras, ácidas y básicas se representan en la Figura S4 en el
40
41
42 Información de soporte. La brecha de banda de energía HOMOÿLUMO se calculó en 0,087 eV,
43
40 0.043 eV y 0.40 eV, respectivamente para estructuras de luminol neutras, ácidas y básicas, Tabla 1. El
44
4
Se observó que la brecha de banda era mayor en medios neutros, mientras que en medios ácidos y básicos, la banda
75
5
51 Se notó que los valores de brecha eran casi similares, lo que también podría estar correlacionado con la carga
52
53
54
55 56 57 58 59 60

11
1
2
3
estructuras de distribución de luminol, Figura S2. Los valores de fuerza del oscilador determinados por el
4
5
6 También se observó que los datos experimentales, así como los espectros simulados, coincidían estrechamente.
7
8
Tabla 1 HOMO, LUMO y energías de banda prohibida del luminol en medios neutros, ácidos y básicos
9
10
11
12 Especies HOMO LUMO banda prohibida Fuerza del oscilador
13
14
15 Calculado Teórico
(eV) (eV) (eV)
dieciséis
17
18
19 ÿmáx (400 nm) ÿmáx(400 nm)
20
21
22 Lum-H2O -0,2721 -0,1847 0,087 0.0052 0.0060
23
24
25 Luminol-H2O2 -0,2586 -0,2160 0,043 0.1500 0.1200
26
27
28 Luminol-NaOH -0,2707 -0,2303 0,040 0.0530 0.0580
29
30
31
32
Viscosidad intrínseca y molaridad de polímeros POPD dopados con luminol
33
34
35 Para estimar el peso molecular de los polímeros sintetizados, la viscosidad de la solución diluida
36
37
se utilizó el método y con la ayuda de la viscosidad intrínseca, la viscosidad molecular promedio
38
39
40 peso medido usando la ecuación de Mark-Houwink: [ÿ] = 2.0 × 10-2 Mv0.3176 tomando
41
42 PANI como referencia, Tabla 2. El POPD puro mostró un aumento en la viscosidad intrínseca al
43
44
dopaje Entre todos los polímeros dopados, se observó la mayor viscosidad para POPD-Lum
45
46
47 H2O mientras que la viscosidad más baja fue mostrada por POPD-Lum-NaOH. El aumento en el
48
49 viscosidades y las masas molares promedio de viscosidad confirmaron el dopaje de POPD por
50
51
luminol.
52
53
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12
1
2
3
4
5
6 Tabla 2 Viscosidad intrínseca y masa molar de POPD y POPD dopado con luminol
7
8
9 Muestra C % H % N% Intrínseco Viscosidad Empírico Molecular
10
11
Viscosidad molar promedio fórmula fórmula
12
13
14 masa
15 (ÿ)
dieciséis
17 (MV)
18
19
20 POPD 46,59 4,95 16,47 0,37 8922 C272H347N82
C3.29H4.20N
21
22
23
POPD-Lum-H2O 64,16 4,55 22,31 0,49 21528 C3.35H2.85N C667H568N199
24
25
26
27 POPD-Lum-H2O2 62,43 4,46 21,83 0,47 18906 C3.33H2.85N C583H499N174
28
29
30 POPD-Lum-NaOH 51,54 3,57 17,43 0,41 12328 C3.44H2.86N C393H326N114
31
32
33
34
35
36
37
Confirmación del dopaje de POPD por luminol a través de análisis UV-visible y FTIR
38
39 El espectro UV-Visible de POPD y POPD dopado con luminol en THF reveló picos en
40
41 256 nm y a 420 nm, Figura 2. El pico a 256 nm se asoció con el ÿ-ÿ*
42
43
44 transición de anillos bencenoides. El pico a 420 nm se asoció con la transición n-ÿ*
45
46 Se observó que la fuerza del oscilador para este pico era de 0,14. Tras el dopaje de POPD con
47
48
luminol en varios medios, la intensidad del pico asociado con la transición polarónica de
49
50
51 POPD reveló un aumento en la intensidad que conformó el dopaje de POPD por luminol
52
53 18-19. La fuerza del oscilador se calculó en 0,26 para POPD-Lum-H2O, mientras que fue
54
55
56
resultó ser 0,25 para POPD-Lum-NaOH. POPD-Lum-H2O2 mostró una fuerza de oscilador
57
58
59
60

13
1
2
3
valor de 0,19, Tabla 3. Los valores más altos de la fuerza del oscilador confirmaron mayor
4
5
6 capacidad de transición de electrones en los polímeros dopados en comparación con POPD puro.
7
8
9
10
3.0 POPD
11
2.8 POPD-Lum-NaOH
12
13 2.6 POPD-Lum-H2 O2
14 2.4
POPD- Lum-H2 0
15 2.2
dieciséis 2.0
17 1.8
18 Absorbancia
1.6
19 1.4
20 1.2
21 1.0
22 0.8
23 0.6
24 0.4
25 0.2
26 0.0
27 -0.2
28
29 210 240 270 300 330 360 390 420 450 480 510 540 570 600
30 Longitud de onda (nm)
31
32
33
34 Figura 2 Espectros UV-visible de POPD y POPD dopado con Luminol en estado ácido, básico y neutro
35
36 medios de comunicación
37
38
39 Tabla 3 Datos UV de luminol y POPD dopado con luminol
40
41
42 Oscilador
Muestra pH ÿmax(nm) ÿadÿÿ
43
44
45
(cmÿ2) fuerza
46
47 POPD - 418 907.94 0.14
48
49
POPD- Lum-H2O 7.30 414 1700.00 0.26
50
51
52 POPD-Lum-NaOH 10,95 415 1619.36 0.25
53
54 POPD-Lum-H2O2 3,12 414 1244.63 0.19
55
56
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58
59
60

14
1
2
3
Los datos del espectro IR de POPD puro, Tabla 4, revelaron una vibración de estiramiento NH
4
5
6 pico a 3418 cm-1 debido a la presencia de amina secundaria (-NH-)18-19. El área debajo de la
7
8 el pico se calculó en 610 cm-2. Los picos de 1573 cm-1 y 1381 cm-1 fueron asignados
9
10
fruncir los anillos de los anillos quinonoide y bencenoide respectivamente y el área de
11
12
13 el pico de quinonoide fue mayor que el de bencenoide y la relación B/Q fue de 0,15. el CN
14
15 El pico de vibración de estiramiento se observó a 1240 cm-1. El pico de 865 cm-1 se asoció
dieciséis
17 -1
18 con benceno para-sustituido mientras que el pico a 744 cm fue el pico característico de C
19
20 H vibraciones de flexión fuera del plano presentes en los núcleos de benceno en el esqueleto de fenaceno.
21
22 La presencia de los picos anteriores confirmó la polimerización de POPD11,18-19. al doparse
23
24
25 de POPD con Lum-NaOH, se encontró que el pico de estiramiento de NH cambiaba de 3418 cm-1 a
26
27 3541 cm-1 mientras que el área integrada bajo el pico NH aumentó hasta 967 cm-2 lo que
28
29
dopaje indicado de POPD por luminol. El pico de estiramiento de imina apareció en 1643 cm-1
30
31
32 que estaba ausente en la POPD prístina. Se encontró que los picos de quinonoide y bencenoide
33
34 cambio de 1573 cm-1 y 1381 cm-1 observado en caso de POPD puro a 1505 cm-1 y
35
36
1350 cm-1. Se encontró que la relación B/Q en este caso era de 0,70, lo que confirma la formación de
37
38
39 mayor número de unidades bencenoides. El área integrada del pico de estiramiento de CN en 1233 cm-1
40
41 también aumentó indicando el dopaje de POPD por luminol. El benceno sustituido en para
42
43
44 y también se observó que los picos del esqueleto de fenaceno cambiaron de 865 cm-1 y 744 cm-1 a
45
46 880 cm-1 y 771 cm-1. Del mismo modo, en POPD-Lum-H2O2, el pico vibratorio de estiramiento de NH
47
48
se observó a 3428 cm-1, lo que reveló un cambio de aproximadamente 10 cm-1 en comparación con la prístina
49
50
51 Se encontró que la POPD y el área bajo el pico de NH eran 902 cm-2. En POPD-Lum-H2O, el NH
52
53 el pico se notó en 3450 cm-1 con el ÿadÿ siendo 1081 cm-2 que fue un notable
54
55
aumento que muestra el dopaje de POPD en medio neutral mientras que el pico en 1658 cm-1
56
57
58
59
60

15
1
2
3
correspondiente al estiramiento de imina y la proporción de pico bencenoide y quinonoide es 1.05
4
5
6 mostrando más unidades bencenoides en la estructura.
7
8
Tabla 4 Datos espectrales FTIR de POPD y POPD dopado con luminol en medios ácidos, básicos y neutros
9
10
11
12 Cima ÿadÿ
Muestra Grupo funcional Absorción
13
14
15 posición Intensidad (cm-1)
dieciséis
17 POPD NH-estiramiento 3418 1.61 610

18
19
Estiramiento CC (quinonoide) 1573 1.28 209
20
21
22 Estiramiento CC (bencenoide) 1381 0.72 32
23
24 0,69 29
Estiramiento CN (bencenoide) 1240
25
26
benceno p-sustituido 864 0.56 37
27
28
29 esqueleto de fenazina 744 0.57 25
30
31 3541 0.79 967
POPD- Lum-NaOH NH- estiramiento
32
33
34 Estiramiento de imina 1643 0,68 59
35
36 Estiramiento CC (quinonoide) 1505 0,67 78
37
38
Estiramiento CC (bencenoide) 1350 0,62 55
39
40
41 Estiramiento CN (bencenoide) 1233 0,60 90
42
43 benceno p-sustituido 880 0.52 38
44
45
esqueleto de fenazina 771 0.56 41
46
47
48 POPD -Lum-H2O2 NH- estiramiento 3428 2.33 902
49
50 1.55 446
Estiramiento CC (quinonoide) 1583
51
52
esqueleto de fenazina 799 1.06 94
53
54
55 POPD- Lum-H2O NH- estiramiento 3450 1.46 1081
56
57
58
59
60

dieciséis
1
2
3
4 Estiramiento de imina 1658 0.97 143
5
6 Estiramiento CC (quinonoide) 1496 0.93 73
7
8 0.80 77
Estiramiento CC (bencenoide) 1353
9
10
11 Estiramiento CN (bencenoide) 1220 0.71 92
12
13 esqueleto de fenazina 777 0,62 42
14
15
dieciséis
17
18 Naturaleza de la cristalinidad y morfología de POPD y POPD dopado con Luminol
19
20
XRD de POPD prístino, Figura 3 (recuadro), reveló tres picos intensos en 2ÿ = 9.14o , 10.58o ,
21
22
23 18.13o correspondiente a los planos (010), (200) y (110). La nitidez de los picos reflejados
24
25 la disposición ordenada de las cadenas POPD a lo largo de diferentes planos11,18-19. Entre
26
27 los otros planos, la nitidez, así como el área de pico del plano (110) fue el más alto
28
29
30 teniendo una distancia entre cadenas de 6.1 Aÿ. Tras el dopaje de POPD con desplazamiento de luminol de
31
o
32 se observaron los picos. POPD-Lum-H2O reveló cuatro picos intensos en 2ÿ = 10.07 ,
33
34
12.60o , 15.11o , y 15,96o . Se encontró que la intensidad del pico alrededor de 18o era apreciablemente
35
36
37 disminuir. POPD-Lum-NaOH y POPD-Lum-H2O2 también revelaron picos similares pero el pico
38
39 se observó que las intensidades eran más bajas que las de POPD-Lum-H2O2.
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50
51
52
53
54
55
56
57
58
59
60

17
1
2
160000
3 POPD-Lum-NaOH
70000 POPD
4
140000 POPD-Lum-H2 O2
5 60000
6 POPD- Lum-H2 O 50000
7 120000 Intensidad
40000
8
9 30000
10 100000
20000
11
10000
12 Intensidad
80000
13 0
6 8 10 12 14 dieciséis 18 20
14 2-theta
15 60000
dieciséis
17 40000
18
19
20000
20
21
22 0
23 6 8 10 12 14 dieciséis 18 20
24
25 2-theta
26
27
28
29 Figura 3 XRD de POPD y POPD dopado con luminol en medios ácidos, básicos y neutros
30
31
32 Se observó que el área bajo el pico notado a las 15.11o era la más alta para POPD-Lum-H2O ad
33
34 más bajo para POPD-Lum-NaOH. El aumento en el área del pico podría estar correlacionado con la
35
36
37 aumento en la tensión de la red producida al dopar POPD con luminol (Tabla S4). los
38
39 La presencia de picos bien formados reflejaba la naturaleza cristalina de POPD que se encontró que
40
41
permanecen intactos incluso después del dopaje. El ligero desplazamiento de los picos, así como el aumento de su
42
43
44 intensidades confirmaron claramente el dopaje con luminol.
45
46 El HRTEM de POPD, Figura 4 (a), reveló una morfología mixta de aguja y distorsionada.
47
48
agregados esféricos. La morfología de POPD-Lum-H2O, Figura 4(b), exhibió la formación
49
50
51 de tubos huecos fusionados que consisten en partículas densas y ligeras mientras que la morfología de POPD
52
53 Lum-H2O2, Figura 4(c), exhibió la formación de partículas esféricas de capa central. Partículas pequeñas
54
55
fueron vistos rodeando un enorme aglomerado esférico distorsionado que se asemeja al observado
56
57
58
59
60

18
Machine
Página Translated
2 para POPD puro. Parecía como si pequeñas partículas esféricas de luminol rodearan el sentido POPD
grupo. Asimismo, el HRTEM de POPD-Lum-NaOH, Figura 4(d), mostró la formación de un
estructura similar a una capa de núcleo fusionado en la que se notó una fina capa de luminol para rodear el denso
3
4 partícula esférica distorsionada del núcleo de POPD. Las morfologías podrían estar bien correlacionadas con la
5
6 observaciones realizadas en nuestros estudios previos confirmando así el dopaje de POPD con luminol.
7
8
9
10
(a) (b)
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
(C) (d)
30
31
32
33
34
35
36 \
37
38
39
40
41
42
(C) (d)
43
40
Figura 4 TEM de (a) POPD, (b) POPD-Lum-H2O, (c) POPD-Lum-H2O2 , (d) POPD-Lum
44
NaOH
4
75
5
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55 56 57 58 59 60
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2
Estudios de fluorescencia de POPD y POPD dopado con luminol
3
4
5
6
7
8
POPD
9 POPD-Lum-NaOH
5000
10 POPD-Lum-H2 O2
11 POPD-Lum-H2 O
4000
12
13 3000
14 Intensidad
(CPS)
15 2000
16
17 1000
18
0
19
20 0 2 4 6 8 10
21 Tiempo (ns)
22
23
24
25
26
27
28
Figura 5 Espectros de fluorescencia de POPD y POPD dopado con luminol en medios ácidos, básicos y
29
neutros (el recuadro muestra los espectros de resolución temporal de POPD y POPD dopado con luminol)
30
31
32
33
34 El espectro de emisión de POPD y POPD dopado con luminol en THF se obtuvo al
35
36
excitación de las soluciones a 500 nm y se muestran en la Figura 5. La emisión
37
38
39
El espectro de POPD reveló un pico a 620 nm correspondiente a la transición S1ÿS0 . los
40
41 Se encontró que la intensidad de esta transición estaba influenciada por la naturaleza del dopante. la emisión
42
43
El espectro de POPD-Lum-H2O , Figura 5, mostró un ligero desplazamiento hacia el azul y se encontró a 613 nm.
40
44
4 Se notó que la intensidad del pico era la más alta (14000 CPS) entre todos los demás dopados
75
5 POPD. Asimismo, el pico de emisión de fluorescencia de POPD-Lum-NaOH también reveló un azul
51
52
se desplaza hacia 618 nm pero se observa que la intensidad es menor que en el caso anterior. POPD
53
54
55 56 57 58 59 60

20
1
2
3
Lum-H2O2 reveló un cambio azul a 613 nm con una intensidad de hasta 890 CPS, que fue el más bajo entre
4
5
6 todos los POPD dopados. Se encontró que las intensidades de emisión de fluorescencia eran más altas en todos los
7
8 tres casos en comparación con el POPD prístino. Los valores de rendimiento cuántico (ÿ) fueron
9
10
calculado en 0,13 para POPD, 0,19 para POPD-Lum-H2O, 0,18 para POPD-Lum-H2O2, 0,16 para
11
12
13 POPD-Lum-NaOH. Se encontró que el tiempo de decaimiento de la fluorescencia (ÿ) era inversamente proporcional
14
15 al ÿ, es decir, cuanto menor sea el tiempo de decaimiento, mayor será el rendimiento cuántico. El tiempo de desintegración se determinó
dieciséis
17
18 de las curvas leyendo el tiempo a una intensidad de fluorescencia del 36,8 %. El tiempo de descomposición fue
19
20 Se observó que es similar para POPD dopado con luminol dopado en varios medios, Tabla 5 .
21
22
Tabla 5 Datos de fluorescencia de POPD y POPD dopados con Luminol
23
24
25
26 Muestra ÿmáx Una muestra integrada Cuántico Decadencia
27
28
29 Área
(Nuevo Méjico) Rendimiento (ÿ) ÿ(ns)
30
31
32
POPD 621 0,018 4,74 x 107 0,13 4.75
33
34
35
36 POPD-Lum-NaOH 618 0,013 4,82 x 107 0,16 4.74
37
38
39 POPD-Lum-H2O2 615 0,011 4,41 x 107 0,18 4.74
40
41
42 POPD-Lum-H2O 613 0,016 5,42 x 107 0,19 4.73
43
44
45
46
47
48 La micrografía confocal de POPD, Figura 6(a), en estado sólido reveló emisión en la región roja
49
50
que se correlacionó con un pico fuerte a 521 nm que muestra partículas diminutas dispersas. el confocal
51
52
53 micrografía de POPD-Lum-H2O, Figura 6 (b), mostró partículas rojas más brillantes en comparación con puro
54
55 POPD mientras que POPD-Lum-NaOH, Figura 6(c), también reveló partículas fusionadas de color rojo intenso. POPD
56
57
58 Lum-H2O2, Figura 6(d), exhibió partículas de color rojo brillante que formaron aglomerados densos. los
59
60

21
2 la intensidad de la emisión roja en todos los casos podría combinarse bien con el alto rendimiento cuántico
mostrada por los polímeros dopados.
3
4
(a) (b)
5
6
7
8
9
10
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55 56 57 58 59 60
22
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1 (C) (d)
3
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7
8
9
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11
12
13
14
15
16
17
18
19
20 Figura 6 Micrografías confocales de (a) POPD, (b) POPD-Lum-H2O, (c) POPD-Lum-NaOH, (d)
21 POPD-Lum-H2O2
22
23 Evaluación dependiente de la dosis de actividad anti-promastigote y determinación de IC50
24
25
La actividad leishmanicida in vitro de POPD y POPDS dopadas con luminol contra el promastigote L.
26
27
28 donovani, se muestran en la Tabla 6, Figura 7 en comparación con Miltefosine Hydrate como anti
29
30 Medicamento de referencia para leishmania. POPD-Lum-NaOH exhibió la mayor toxicidad para intracelular
31
32
parásitos L.donovani persistentes con valores de CC50 de 636,35 ± 41,4. Actividades leishmaniacas de otros
33
34
35 También se encontró que los polímeros dopados mostraban valores CC50 más altos en comparación con el luminol puro.
36
37
como reactivo de referencia. Posiblemente, elementos de la cadena respiratoria mitocondrial fueron objetivos
38
39
40 para estos polímeros.
41
42
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40
44
4
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5
51
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55 56 57 58 59 60

23
2
Tabla 6 Actividad antileishmania in vitro de POPD y POPD dopados con Luminol
Compuestos Promedio CI50 ± DE Promedio CC50 ±DE
3
(µg/ml) (µg/ml)
4
5
6
7
Hidrato de miltefosina 17,2 ± 3,5 37,4 ± 7,5
8
9
10 POPD-Lum-NaOH 41,46 ± 3,76 636,35 ± 41,4
11
12 607,1 ± 15,95
POPD-Lum-H2O2 47,3 ± 11,6
13
14
15 POPD-Lum-H2O 38,8 ± 1,4 624,6 ± 28,25
16
17 Luminol-H2O2 447 ± 77 582,3 ± 4,35
18
19
20
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23
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37
38
39
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41
42
43
40
44
4
75
5 Figura 7 Actividad antileishmanial in vitro de POPD dopado con Luminol
51
52
53
54
55 56 57 58 59 60

24
3
4
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16
17
18
19
20
21 Figura 8 Actividades citotóxicas in vitro de POPD dopado con luminol contra la línea celular THP-1 humana
22
23
24 El efecto citotóxico de POPD dopado con luminol en promastigotes de L. donovani, contra humanos
25
26
27
La línea celular THP-1 se muestra en la Figura 8. La concentración de 1000 µg/ml de POPD mostró
28
29 máximo efecto citotóxico sobre promastigotes de L. donovani. El resultado reveló claramente que por
30
31
aumentando la concentración de POPD dopados con luminol, se encontró la viabilidad de los promastigotes
32
33
34 disminuir. Incluso a la concentración máxima de 1000 µg/ml, aproximadamente el 48 % de las células seguían vivas.
35
36 Se encontró que la viabilidad era superior al 50 % para POPD-Lum-NaOH y POPD-Lum-H2O2
37
38
cuando la concentración se tomó como 500 µg/ml mientras que a concentraciones de 62,5 µg/ml y 31,25
39
40
41 µg/ml, se observó que la viabilidad era superior al 80%. Por lo tanto, se puede especular que la
42
43 Los polímeros dopados no son tóxicos y se pueden usar de manera segura para la obtención de imágenes biológicas, así como para otras aplicaciones biomédicas.
40
44
aplicaciones
4
75
5
51
52
53
54
55 56 57 58 59 60

25
Imágenes de células vivas de células de Leishmania

2
3
4
5
6
7
8
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10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23 Figura 9 Imágenes de células vivas de Leishmaina L. donovani utilizando POPD dopado con luminol como
24 biomarcador
25
26
27 Dado que POPD-Lum-NaOH mostró una buena actividad contra la leishmania, se eligió como
28
29
30
biomarcador fluorescente para dirigirse a las células de leishmania (Video proporcionado en apoyo
31
32 información). La imagen de células vivas de POPD-Lum-NaOH, Figura 9, reveló que estos
33
34
podría usarse para etiquetar el parásito para realizar imágenes y análisis biológicos. los
35
36
37 Se observó que los orgánulos de L. donovani interactuaban intensamente con el polímero (Video
38
39 dado en la información de apoyo). El porcentaje de parásitos fluorescentes que contienen
40
41
Se notó que los orgánulos emitían fluorescencia tanto en láseres rojos como verdes. POPD-Lum-NaOH fue
42
43
40 encontrado para estar localizado en el lumen de los orgánulos (Video dado en apoyo
44
4 información).
75
5
51
52
53
54
55 56 57 58 59 60

26
1
2
3
CONCLUSIÓN
4
5
6 POPD y POPD dopados con luminol se sintetizaron con éxito usando luminol en ácido
7
8 , medios básicos y neutros. La modificación de POPD fue confirmada por análisis UV.
9
10
que reveló un cambio en la intensidad del pico de transición polarónica de POPD.POPD y
11
12
13 Se encontró que los POPD modificados con colorantes exhiben fluorescencia en la región NIR y la
14
15 la intensidad de la emisión se rigió por el tipo de luminol utilizado. Microscopía confocal de
dieciséis
17
18 Los POPD dopados con luminol revelaron una emisión intensa en la región roja. Los polímeros dopados
19
20 también fueron evaluados por su actividad contra la leshmania. Los estudios de citotoxicidad revelaron que
21
22
los polímeros eran potencialmente no tóxicos en dosis más bajas, mientras que las imágenes de células vivas de
23
24
25 La leshmania teñida con POPD-Lum-NaOH dio una emisión intensa en la región roja. dopado con luminol
26
27 Por lo tanto, los POPD podrían usarse como un biomarcador fluorescente para etiquetar el parásito para que realice
28
29
imágenes y análisis biológicos.
30
31
32
33
34 CONTENIDO ASOCIADO
35
36
37 información de soporte
38
39 Cálculos de la teoría funcional de la densidad (DFT) de luminol en medios neutros, ácidos y básicos utilizando
40
41
método B3LYP/6-31G; geometrías optimizadas; distribución cargada; orbitales moleculares; oscilador
42
43
44 fuerza; espectros UV teóricos; datos XRD de POPD y POPD dopado con luminol; videos de en vivo
45
46 imágenes de células de leishmania usando el biomarcador POPD-Lum-NaOH.
47
48
49
50 INFORMACIÓN DEL AUTOR
51
52
53 Autor para correspondencia *E-mail: ufana2002@yahoo.co.in
54
55 Teléfono: +91-9810776242
56
57
ID ORCID: 0000-0001-7485-4103
58
59
60

27
1
2
3 notas
4
5
6 Los autores declaran no tener ningún interés financiero en competencia.
7
8
9 Reconocimiento
10
11
12 El autor correspondiente Dr.Ufana Riaz también desea agradecer al DST-SERB por
13
14
15 otorgamiento de gran proyecto de investigación vide sanción número SB/S1-PC-070/2013. La coautora Sra.
dieciséis
17 Sapana Jadoun agradece a DST-SERB por otorgar una beca de investigación senior bajo dicho
18
19 proyecto. Los autores también agradecen a la instalación SAIF en el All India Institute of Medical
20
21
22 Sciences (AIIMS), Nueva Delhi, India para análisis TEM y también Instrumentación avanzada
23
24 Research Facility en JNU para los estudios confocales y el análisis de resolución temporal de fluorescencia.
25
26
27 Referencias
28
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53
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Propiedades de los electrodos modificados con película híbrida de poli(luminol) y polioxometalato.
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Biomarcadores de resistencia al antimonio: necesidad de análisis de expresión de genes múltiples
47
48
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50
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52
53
54
55
56
57
58
59
60

32
Machine
Página Translated
2
(31) Rafati, S.; Hassani, N.; Taslimi, Y.; Movassagh, H.; Rochette, A.; Papadopoulou, B.
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15 la reacción del luminol como prueba presuntiva para la detección de sangre latente. Talanta, 2007,
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