@vicky27_vicky Enzimas
En los seres vivos se producen constantemente muchas
reacciones químicas, algunas transforman los alimentos en
nutrientes para poder obtener energía y sustratos (materia
prima) para formar nuevas estructuras.
En condiciones de temperatura alrededor de 37 ºC, un pH
cercano a 7 y una presión constante, las reacciones químicas
serían muy lentas o quizás no se producirían. Sin embargo,
existen los catalizadores biológicos, que le dan velocidad a
estas reacciones.
Las enzimas son catalizadores biológicos. Es un agente
capaz de acelerar una reacción química sin formar parte
de los productos (los resultados) ni consumirse en el
proceso.
Para que dos sustratos reaccionen entre sí para luego formar
un producto, es necesario que reaccionen con la energía
suficiente. Si la energía es lo suficientemente grande, se llega
igualmente a los productos.
Esta energía que hay que suministrarle/darles a los reactivos
para que inicie la reacción y pasar a un estadío de transición
se llama energía de activación (Ea).
Las enzimas aceleran las reacciones químicas porque lo que
hacen es disminuir la Ea necesaria (o sea, hace que las
reacciones químicas requieran menor Ea que si no hubiese
enzima).
La mayoría de las enzimas son proteicas à si en el examen
les ponen “TODAS las enzimas son proteicas” o “NINGUNA
enzima es proteica” DUDEN… La respuesta es falsa, ya que
la MAYORÍA son proteicas, es decir, hay excepciones.
Las enzimas ofrecen a los reactivos un sitio activo (nichos)
para que estos se ubiquen en él y, de esta forma, se ahorra
parte de la Ea y se llega más fácil al estado de transición.
Esto es una ventaja, ya que, se evita un exceso de energía
que podría servir en un futuro para compensar una mal
adecuada reacción entre los reactivos.
Nomenclatura y clasificación
Las enzimas se nombran agregando el sufijo -asa al nombre
del sustrato sobre el cual actúan. Por ejemplo: la enzima
amilasa cataliza la reacción sobre el almidón.
También suelen denominarse según el tipo de reacción
catalizada. Por ejemplo: las deshidrogenasas y
descarboxilasas catalizan la sustracción (quitan) de
hidrógenos y carboxilos del sustrato.
Se clasifican en seis familias según el tipo de reacción
catalizada:
1. Oxidorreductasas: catalizan reacciones de óxido-
reducción (transferencia de e- e hidrógenos)
necesitando la presencia de coenzimas FADH2 o
NADH. Lactato deshidrogenasa, que cataliza la
oxidación de lactato a piruvato con reducción de
NADH a NAD+.
2. Transferasas: catalizan la transferencia de un
grupo de átomos desde una molécula a otra.
Transaminasa o aminotransferasa cataliza la
transferencia del grupo amino desde un aminoácido
a un ⲁ-cetoácido.
3. Hidrolasas: catalizan la ruptura de enlaces C-N, C-
O, C-S, O-P por adición de H2O (o sea, se produce
una hidrólisis). La arginasa cataliza la hidrólisis de
la arginina formando urea y ornitina.
4. Liasas: catalizan la ruptura de enlaces C-C, C-N, C-S
mediante un mecanismo distinto a la hidrólisis.
Algunas eliminan grupos del sustrato y forman
enlaces dobles o ciclos; también pueden agregar
grupos a enlaces dobles. Descarboxilasas cuando
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eliminan CO2, deshidratasas cuando eliminan H2O,
aldolasas cuando eliminan aldehído.
5. Isomerasas: catalizan la interconversión de
cualquier tipo de isómeros. Triosafosfato isomerasa
cataliza la conversión de gliceraldehído 3 fosfato en
dihidroxiacetona fosfato y viceversa.
6. Ligasas: catalizan la unión de 2 moléculas, acoplada
con la ruptura de un enlace de alta energía del ATP.
La glutamina sintetasa actúa en la reacción entre el
ácido glutámico y el amoníaco para formar
glutamina. La energía necesaria que necesitan para
la síntesis es ATP.
NATURALEZA QUÍMICA
Algunas están constituidas exclusivamente por aa, otras
están formadas por asociación de varias subunidades (son
oligómeros).
Coenzimas
Muchas enzimas realizan su función en presencia de
coenzimas, que son moléculas más pequeñas y no
proteicas. También se denominan grupos prostéticos si la
asociación entre las coenzimas con la enzima es de
carácter covalente à dando como resultado a una
holoenzima cuya parte proteica se llama apoenzima
(termolábil y no dializable) y la parte no proteica llamada
coenzima (termoestable) en caso de ser una molécula
orgánica. Si es de naturaleza inorgánica se llama cofactor.
Las coenzimas participan de manera activa en la reacción,
por ejemplo, en las redox aceptan o ceden H+ y e-, en las
transferasas aceptan o ceden grupos químicos.
Muchas coenzimas derivan de vitaminas (como las del
grupo B) à de ahí la importancia de ingerir vitaminas.
En las holoenzimas, ni la coenzima ni el cofactor son
responsables de la especificidad de la reacción à la
especificidad de la reacción queda a cargo de la
apoenzima. Por ejemplo, las enzimas lactato
deshidrogenasas, malato deshidrogenasas y glutamato
deshidrogenasas utilizan NAD+ como coenzima (acepta
hidruros). Las oxidorreductasas, isomerasas y ligasas
requieren de coenzimas.
Metaloenzimas
Algunas enzimas precisan de iones metálicos para la acción
catalítica. Los iones metálicos actúan como cofactor por su
capacidad de atraer o donar e-. En otras ocasiones los iones
contribuyen al mantenimiento de las estructuras terciarias y
cuaternarias de la enzima.
Algunos ejemplos:
• Fe: presente en catalasa, peroxidasa, citocromos y
hemoglobina. Tenemos hierro hemínico y no
hemínico.
• Cu: presente en la tirosinasa, ácido ascórbico
oxidasa y citocromo oxidasa. Se presenta como
catión mono o divalente.
• Zn: presente en las enzimas
alcohol deshidrogenasa y anhidrasa
carbónica. Se presenta como un catión
divalente.
• Mo: parte de la xantino oxidasa,
otras oxidasas y deshidrogenasas.
• Mg: se requiere en enzimas que
utilizan ATP, como por ejemplo las
quinasas. La forma activa del ATP se encuentra
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unida al magnesio. El Mg se coordina con las cargas
negativas de los grupos fosfatos del ATP.
• Mn: indispensable en la acción de la acetil-CoA
carboxilasa, desoxirribonucleasa y otras.
• Se: forma parte de la glutatión peroxidasa.
• Ca: indispensable en múltiples enzimas. Se presenta
como catión divalente.
En todas las metaloenzimas, la eliminación del
componente metálico determina la pérdida de la actividad
biológica.
¿Por qué los metales pesados y metaloides (Hg2+, Pb2+
y As2+) son tóxicos para los sistemas biológicos?
Esto es debido a que dichos metales y metaloides compiten
con los cofactores normales (iones metálicos) en las
metaloenzimas y los desplazan. Además, porque los metales
pesados tienen gran afinidad por los grupos -SH de las
proteínas.
Catálisis enzimática
Gracias a que las enzimas aumentan la velocidad de reacción
disminuyendo la Ea, gran número de moléculas alcanzan el
estadío de transición y la transformación química se acelera.
Si una enzima E cataliza la transformación de los sustratos S
en productos P, primero los S se unen a las E para formar el
complejo ES (enzima-sustrato), el cual después de disocia
(se desasocia, se separa) en E y P.
E + S à EA à E + P
Hay que recordar, que la enzima no se altera, no muestra
cambio alguno y puede unirse nuevamente a otros sustratos.
Esto también explica el por qué poquitas cantidades de
enzimas aceleran mucho las reacciones, porque la misma
enzima se reutiliza varias veces.
Sitio activo
Para formar el complejo ES, el sustrato se fija al sitio activo o
catalítico (un lugar ya definido en la enzima) donde se lleva
a cabo la acción catalítica.
El sitio activo posee residuos de unión al sustrato y residuos
catalíticos. Cuando el sustrato se fija a los residuos de unión,
el sustrato de ubica de forma tal que el enlace que se va a
modificar en la reacción quede cercano al residuo catalítico.
Tanto la unión del S, como la acción catalizadora exigen una
conformación tridimensional muy específica a nivel del sitio
activo, en donde las cadenas laterales de los restos aa
aportan grupos funcionales esenciales.
El sitio activo es una agrupación de un número no muy
grande de residuos aminoacídicos, que se distribuyen de
manera precisa en el espacio. Esta disposición se mantiene
gracias a la contribución de las estructuras de la proteína.
La unión entre S + sitio activo genera enlaces no covalentes
como puentes de hidrógeno, enlaces iónicos e interacciones
hidrofóbicas.
El reconocimiento del sitio activo con el sustrato requiere, no
solo de compatibilidad geométrica, sino también de
complementariedad de cargas.
El S fijado al sitio activo sufre una deformación en los enlaces
y adquiere un estadío de alta energía (estado de transición)
cuya existencia es efímera (es corta) y a partir del cual se
forman rápidamente los productos.
En casos donde en una reacción química participen 2 o más
sustratos diferentes, el sitio activo ofrece un nicho en el cual
cada sustrato es ubicado en la posición y orientación más
favorable para reaccionar; de esta forma se promueve la
formación del estadío de transición, la reducción de la Ea y el
incremento de la velocidad de reacción.
Factores que modifican la actividad enzimática
A. Concentración de enzima: cuanta más cantidad de
enzima haya, mayor cantidad de producto final
habrá.
B. Concentración de sustrato: a concentraciones de
enzima constante y a concentración muy baja de
sustrato, van a quedar enzimas libres. En esta
etapa, a mayor cantidad de S, obtenemos más
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formación de producto (reacción de primer orden). Regulación de la actividad enzimática
Si el sustrato sigue aumentando, las enzimas están
La actividad de las enzimas no es constante, se ajusta a los
todas ocupadas (están saturadas) y la velocidad de
requerimientos del organismo. El sistema neuroendocrino
reacción no varía. Si sigue aumentando la cantidad
libera mediadores químicos (hormonas y neurotransmisores)
de sustrato, no se va a producir un incremento de la
que, al unirse a sus respectivos receptores, generan una
velocidad de reacción (reacción de orden cero).
cascada de señalización para modificar la actividad de las
La Km enzimática hace referencia a la concentración de
enzimas, de esta forma, se modifica la velocidad de una vía
sustrato con la cual la velocidad de reacción alcanza un
metabólica.
valor igual a la mitad de la máxima.
- Alosterismo (regulación rápida y reversible)
Este valor sirve para caracterizar a las enzimas:
- Modificación covalente (regulación rápida y
- Un valor bajo de Km hace referencia a que el sitio
reversible)
activo es muy específico al sustrato (está diseñado
- Inhibición (inhibidores competitivos)
perfectamente para reconocer a X sustrato), con lo
- Proteólisis
cual la afinidad que exista entre la enzima y el
Una enzima puede responder a más de 1 tipo de regulación.
sustrato va a ser alta.
Alosterismo o regulación alostérica
- Un valor alto de Km hace referencia a que el sitio
Este tipo de regulación se ve mayormente en enzimas que
activo no es muy específico al sustrato, es decir, no
están constituidas por varias cadenas polipeptídicas entre las
está muy bien hecho para reconocer a X sustrato,
cuales hay alguna comunicación. Cuando un regulador
por ende, la afinidad que tenga la enzima por el
alostérico se une a un sitio de regulación alostérica (que
sustrato es baja.
NO ES EL MISMO QUE EL SITIO ACTIVO) ubicado en una
C. Temperatura: para las enzimas de animales
subunidad, se genera un cambio conformacional que se
homeotermos, la temperatura óptima está en 37 ºC
transmite a las otras subunidades y modifica la capacidad
aproximadamente. La actividad disminuye de
del sitio activo para reconocer al sustrato.
manera brusca por encima y por debajo de este
• Regulador alostérico positivo à genera un
valor. El calor produce cambios conformacionales de
aumento de afinidad del sitio activo por el sustrato
la enzima que puede terminar con la
(recordemos que cuando aumentaba la afinidad,
desnaturalización de esta.
disminuía el Km y se acelera la velocidad de
D. pH: la actividad óptima de las enzimas se encuentra,
reacción).
en la mayoría, en un pH de entre 6 a 8. Por debajo
o encima de estos valores, la velocidad de reacción
decae. Los cambios de pH afectan el grado de
ionización de los grupos funcionales de los aa de la
enzima, como también del sustrato. Existen enzimas
que tienen un pH óptimo a 2 (la pepsina) y a un pH
de 5 (las hidrolasas lisosomales).
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• Regulador alostérico negativo à disminuye la • Desfosforilación: se remueve el grupo ortofosfórico
afinidad del sitio activo por el sustrato, aumenta la por medio de una hidrólisis sin consumo de ATP,
Km y la velocidad de reacción es más lenta o no catalizado por una fosfatasa.
ocurre. Dependiendo de la enzima en cuestión, ésta puede estar
activa en su forma fosforilada o desfosforilada.
Por ejemplo, las principales enzimas que intervienen en el
metabolismo del glucógeno están reguladas por mecanismos
de fosforilación y desfosforilación.
Cuando la glucógeno sintetasa está activa (desfosforilada),
se promueve la síntesis del glucógeno y la glucógeno
fosforilasa está inactiva (desfosforilada).
Si ATP/ADP y NADH/NAD+ están bajas, la célula está Cuando la glucógeno sintetasa está inactiva (fosforilada) se
pidiendo de energía y busca activar las vías catabólicas (que inhibe la síntesis de glucógeno, mientras que la glucógeno
es la degradación de moléculas complejas a moléculas fosforilasa está activa (fosforilada) se promueve la
simples). Los cocientes mencionados son indicativos de la degradación del glucógeno.
cantidad de energía a nivel celular. Si esas relaciones están
altas, quiere decir que la célula ya dispone de la energía
necesaria, por ende, se frenan las vías catabólicas.
Entonces… podemos decir que el ATP y el NADH actúan
como un regulador alostérico negativo en varias vías
metabólicas.
Un ejemplo, la fructosa 2,6-bifosfato es un regulador
alostérico positivo de la fosfofructoquinasa 1, como también
Hay enzimas cuya actividad está regulada por la unión
es un regulador alostérico negativo de la fructosa 1,6
covalente à metilación, acetilación, ubiquitinación, etc.
bifosfatasa.
Inhibición
Entonces, si tenemos moléculas de fructosa 2,6-bifosfato, se
Tenemos reversibles e irreversibles.
promueve la glucólisis y se enlentece la gluconeogénesis.
Los inhibidores reversibles pueden actuar de forma:
Si estamos en ausencia de la fructosa 2,6-bifosfato, se
competitiva, no competitiva y anticompetitiva.
promueve la gluconeogénesis y se enlentece la glucólisis.
- Inhibidores competitivos: poseen una estructura
Modificación covalente
similar al sustrato, por lo que tanto el sustrato como
Muchas enzimas se pueden regular por medio de la adición
el inhibidor compiten por el sitio activo de la
o supresión de grupos que estén unidos de forma covalente.
enzima. Podemos revertir este tipo de inhibición à
• Fosforilación: consiste en agregar un grupo
aumentando la concentración del sustrato y/o
ortofosfórico, por medio de una quinasa, a residuos
disminuyendo la concentración del inhibidor
de serina, treonina y tirosina, consumiendo ATP.
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competitivo. Si hacemos esto, el sustrato le “gana”
al inhibidor y lo desplaza del sitio activo.
Ejemplo: la citrato sintasa tiene como reactivos al acetil-CoA
y al oxalacetato, esta enzima puede ser inhibida
competitivamente por el producto de la reacción, el citrato.
Los inhibidores irreversibles producen cambios
permanentes en la enzima con un deterioro definitivo de su
capacidad catalítica. En este grupo se incluyen moléculas que
se asemejan estructuralmente al sustrato, por lo que, pueden
ocupar el sitio activo de la enzima y transformarse en
productos, los cuales generan uniones covalentes con la
enzima y bloquean el sitio activo.
Proteólisis
Hace referencia a la hidrólisis (la ruptura de un enlace
covalente por medio de la adición de una molécula de H2O)
de un enlace peptídico catalizado por una proteasa.
Es un mecanismo irreversible, ya que, una vez que se
degrada o rompe la enzima, se pierde la funcionalidad.
Acá, la única forma de volver a tener actividad enzimática
es fabricando una nueva enzima à pero es un mecanismo
lento ya que actúa a nivel genético y consume mucha energía.
ALGUNAS PROTEINAS NO PIERDEN LA ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA, SINO QUE SE ACTIVAN GRACIAS A LA
PROTEÓLISIS à LLAMADAS ZIMÓGENOS.
Zimógenos
Son precursores inactivos de enzimas. En la mayoría de los
casos, son proteínas simples que se activan una vez que
pasan por el proceso de proteólisis.
- Procaspasas (están en células eucariotas, por
medio de la proteólisis se activan a caspasa, la cual
genera la apoptosis o muerte celular programada
à este estímulo puede ser fisiológico o patológico)
- Angiotensinógeno
- Tripsinógeno
- Pepsinógeno
- Mayoría de las proteínas de la coagulación
- Algunas proteínas del sistema del complemento
(sistema inmune)
Representan una regulación irreversible de la actividad
enzimática.
Isoenzimas
Son enzimas distintas que catalizan una misma reacción. La
existencia de estas isoenzimas le da al organismo gran
flexibilidad fisiológica.
Por ejemplo, las isoenzimas hexoquinasa y glucoquinasa
catalizan la reacción de transferencia de un grupo fosfato
desde el ATP a la glucosa para formar glucosa-6-fosfato.
Glucoquinasa Hexoquinasa
Exclusiva del hígado En tejidos extrahepáticos
Distinto código genético Distinto código genético
Km alto Km bajo
Posee como regulador
Posee otro mecanismo alostérico negativo al
regulatorio producto de la reacción
glucosa 6-fosfato
Reacciones enzimáticas reversibles e irreversibles
Muchas reacciones metabólicas son reversibles, por
ejemplo, la anhidrasa carbónica cataliza la reacción entre el
CO2 y el H20 dando como resultado al ácido carbónico. A su
vez, esa misma enzima convierte al ácido carbónico en CO2
y H2O.
Cuando hay reactivos en exceso, la reacción va de izquierda
a derecha hasta que llega un momento que ese exceso se
transforma en productos y se alcanza un equilibrio.
Por otro lado, cuando hay mucho producto la reacción tiende
a ir en sentido inverso, para convertir a ese exceso de
productos en reactivos.
Las enzimas que participan en las reacciones reversibles
tienden a actuar con rapidez para regresar a un estado de
equilibrio y las velocidades de estas reacciones dependen
exclusivamente de las concentraciones relativas que haya de
sustratos y productos.
@vicky27_vicky Enzimas
En las reacciones irreversibles la enzima transforma los Enzimas anormales por alteraciones genéticas
reactivos en productos y no puede volver a generar los
Los errores congénitos del metabolismo (también llamados
reactivos. Este tipo de enzimas es insensible a la
tabolopatías o enzimopatías) se deben, en general, a una
concentración de productos, no responde a la concentración
falla en la vía metabólica de un determinado compuesto. Si
que exista de producto, es decir, por más que aumente la
hay una mutación, podría generar una falta o disminución de
cantidad de productos, éste nunca va a ser transformado de
la actividad de una enzima. En consecuencia, se acumulan
nuevo en reactivo à entonces no se reestablece el
reactivos y los productos no se forman.
equilibrio.
El desarrollo de la enfermedad puede estar dado por la
Los cambios en las concentraciones de los sustratos tienen
acumulación de reactivos, por falta de productos o por ambas
un efecto relativamente pequeño sobre la velocidad de una
cosas.
reacción irreversible. Únicamente los cambios en la actividad
de la enzima, por medio de reguladores alostéricos y/o
modificación covalente, pueden alterar la velocidad en gran
magnitud.
Las enzimas suelen estar ubicadas de manera estratégica en
las vías metabólicas, generalmente son las primeras. Existen
vías metabólicas con múltiples reacciones irreversibles en su
mayoría, todas regulables y determinantes de la dirección de
la ruta.

Sistema multienzimático
Las enzimas pueden ubicarse libres en el citosol, en
organelas o integradas en estructuras. En ciertas ocasiones,
se forman complejos organizados que están formados por
varias enzimas diferentes pero que sus acciones se
complementan à complejos o sistemas multienzimáticos.
Están organizados de tal forma que, el producto de la
reacción catalizada por la primera enzima funciona como
sustrato de la segunda enzima y así sucesivamente.
La ventaja de estos es el aumento en las velocidades de
reacción, se evitan reacciones cruzadas y son fácilmente
regulables.
Ejemplos: los componentes de la cadena de transporte de
electrones y la piruvato deshidrogenasa, etc.