Manzanilla
La manzanilla se compone de capítulos florales secos de L, Matricaria chamomilla L.var.
Courrantiana, Matricaria chamomilla recutita (L) Rauschter (fam.Asteracea
alt.compuestos). Contiene no menos de 0.4% de aceite volátil azul, no menos de
0.3%por ciento de apigenia-7glucosido y no menos de 0.15% de derivados de
bisabolano, calculado como levomenol.
Envasado y almacenamiento
Conservar en embaces bien cerradas, proteger de la luz
Etiquetado
La etiqueta indica el nombre científico en latín y después de la denominación oficial, la
parte de la planta contenida en el artículo.
Estándares de referencia
ER. Apigenina-7-glucosido usp
ER. Levomenol usp
Características botánicas
Macroscópicas: La cabezuela floral es semiesférica aproximadamente de 6mm de
diámetro, compuesto de varias florecillas perimetrales dispuestos en forma radial, y
numerosas florecillas centrales dispuestos en discos que se encuentran sobre un
receptáculo rodeado por un involucro (la matricaria discoidea se diferencia por tener
florecillas solamente en el disco central). El involucro es verde formado por dos o tres
filas de brácteas lanceoladas, glabras imbricadas con ápices redondeadas y bordes
membranosos blanquesinos.Las florecillas perimetrales, que haitualmente se caen,
tienen entre 10-20 pistilos la corola es ligulada y blanca y si bien se oscurece a una
longitud de 6mm y un grosor de 2 mm, tiene 3 dientes y está atravesada por cuatro
nervaduras principales. Las florecillas del disco central son amarillas perfectas
aproximadamente de 2mm de longitud, la corola es tubular con cinco dientes 5
estambres son epipetalos y singenésicos. El receptáculo es hueco aferico en las
cabezuelas florales jóvenes y cónico en las más viejas, tiene de 3-10 mm de ancho y
carece de paleas. El aquenio es ovoide y tiene de 3-5 nervios longitudinales.
Microscópicas:
Separar el capítulo en sus partes y examinar al microscopio, la epidermis externa abaxial
de las brácteas del involucro presenta un margen membranoso con una capa simple de
células alongadas radialmente y una parte central formado por tejidos clorofílicos
cubierto de células epidérmicos alongadas con paredes laterales sinuosas , estomas y
tricomas secretores. Los haces vasculares están rodeadas de numerosas esclereidas
alongadas y punteadas con lúmenes bastante grandes. En vista superficial las corolas
liguladas y tubulares muestran células isodiametricas y alongados con paredes más o
menos onduladas y algunos tricomas glandulares. La parte externa de la epidermis de
los capítulos ligulados se compones de células papilares con cutícula estriada desde
los extremos. En el mesofilo algunas veces se observan agrupaciones muy pequeños
de oxalato de calcio. A lo largo de todo el mesofilo discurren 4 nervaduras principales
algunas veces acompañados por ralelas por nervaduras principales de una de las
nervaduras se anastomosan de dos en dos con la nervaduras laterales para formar tres
arcos en los tres dientes terminales de la lígula. Los ovarios de ambos tipos de florecillas
son de ovales a esféricos y tienen en su base un anillo esclerótico formado por una fila
de ovarios contienen numerosas agrupaciones muy pequeñas de oxalato de calcio. En
la florecillas tubulares la parte inferior de cada filamento estaminal está rodeado por
células de paredes gruesas. Los extremos de los dos estigmas poseen células
epidérmicas papilosas. Los granos de polen son redondeados con tres poros germinales
y una exina espinosa.
Identificación:
A. Prueba de identificación por cromatografía en capa delgada
Adsorbente: Capa de gel sílice para cromatografía de 0.25mm de espesor.
Solución de prueba: Reducir aproximadamente1.0g de manzanilla a polvo grueso
usando un mortero de porcelana transferir a una columna cromatografía de 1.5cm x
15cm y apisionar suavemente con un manguito corto de goma. Enjuagar la mano del
mortero y el mortero dos veces con 10ml de cloruro de metileno cada vez. Verter los
enjuagues en la columna, recoger el percolado en un matraz y evaporar el extracto hasta
sequedad disolver el residuo en 0.5 ml de tolueno.
Solución estándar: Preparar una solución de borneol, acetato de bornilo y guaiazuleno
en tolueno que contenga 1.0mg por mL, 2.0mg por mL y 0.4mg por mL respectivamente.
Fase móvil: Cloroformo.
Reactivo para rociado: Mezclar 0.5ml anisaldehido y 10ml de ácido acético glacial,
agregar 85ml de metanol mezclar luego agregar cuidadosamente 5ml de ácido sulfúrico
a esta solución y mezclar.
Procedimiento:
Aplicar por separado en forma de bandas de 3mm x 20mm, volúmenes iguales
aproximadamente 10 micro litros de la solución de prueba y de la solución estándar y
proceder según se indica en el capítulo. Examinar la placa bajo la luz uv de longitud de
onda corta: L cromatograma de la solución de prueba presenta diversas zonas de
extinción, la mayor de la cuales se debe al en –in –dicicloeter y tiene el mismo valor de
Rf que la banda de debida al acetato de bornilo del cromatograma de la solución
estándar, además hay otra banda debida a la marina cerca de la línea de aplicación.
Rociar la placa uniformemente con el reactivo para el rociado. Examinar la placa a la luz
del día mientras se calienta de 100° a 105°durante 5-10 minutos. El cromatograma
obtenido a partir de la solución estándar presenta en el tercio inferior una zona marrón
amarillenta que se toma gris violáceo después de algunas horas, lo cual se debe al
borneol; en el medio, una zona marrón amarillenta a gris de vida al acetato de bornilo, y
en tercio superior una zona de color rojo intenso con un borde azul debido al
guaiazuleno. El cromatograma de solución de prueba presenta una zona azul debida a
la matricina cerca del punto de partida, varias zonas violáceas, una de las cuales se
debe al bisabolol a valores Rf entre los del borneol y los del acetato de bornilo, una zona
amarronada debido al en –in-dicicloeter a un valor Rf correspondiente al acetato de
bornilo, zonas rojas debido a terpenos debido al valor Rf similares a los del guaiazuleno
y otra zonas que aparecen en las partes media e inferior del cromatograma.
B: Disolver 0.25g de dimetilaminobenzaldehido en una mezcla de 5ml de ácido fosfórico
,45ml de ácido acético y 45ml de agua. Transferir 2.5ml de esta solución y 0.1ml de la
solución de prueba, preparada según se indica en la prueba de identificación A, a un
tubo de ensayo. Calentar en un baño de agua durante 2 minutos y dejar enfriar. Agregar
5ml de éter de petróleo y agitar. La capa acuosa tiene un color azul verdoso o azul nítido.
Flores partidos: No más del 25% pasa atraves de un tamiz de malla estándar N°25
(ver el cálculo de la distribución del tamaño de partícula mediante tamizado analítico.
Materia orgánica extraña: No más del 2.0%
Cenizas totales: No más de 13.0% determinado en 1.0g de manzanilla en polvo.
Recuento microbiano: El recuento bacteriano total no excede de 105 ufc por g, el
recuento total combinado de hongos filamentosos y levaduras do excede de 103 ufc por
g y el recuento de bacterias Gram negativas tolerante a la bilis no excede de 103 ufc por
g.
Ausencia de microorganismos específicos: Cumple con los requisitos de la pruebas
para la ausencia de salmonella spp, escherichia coli.
Residuos de plaguicidas: Cumple con los requisitos.
Contenido de aceites volátiles: Proceder según se indica, excepto que se debe usar
60g de manzanilla reducida a polvo grueso como muestra de prueba, en un matraz de
fondo redondo de 2L, 300ml de agua como liquido de destilación y 0.5ml de xileno en
un tubo graduado. Destilar durante 4 horas a una velocidad de 3-4ml por minuto. No se
encuentra menos de 0.4% de aceite volátil azul.
NOTA- Conservar los aceites volátiles para usar en la prueba de contenido de derivados
de bisabolano.
Contenido de apigenina-7glucosido-
Ácido fosfórico diluido- transferir 5.0ml de ácido fosfórico aumente 30ml de agua diluir
a volumen con agua y mezclar.
Solución A- Prepara una solución de fosfato monobásico de potasio 0.005M.Ajustar
con ácido fosfórico diluido a un pH de 2.55+-0.05.
Solución B- Preparar una solución de acetonitrilo y metanol (65:35)
Fase móvil- Usar mezclas variables de la solución A y de la solución B según se indica
en el sistema cromatografico.
Solución estándar- Disolver en metanol y agua (1:1) cantidades, pesadas con exactitud
de ER apigenia-7 glucósido usp y 7-metoxicumarina para obtener una solución con
concentraciones conocidas de aproximadamente 25 microgramos por ml de ER
apigenia-7-glucosido usp y 10.0 microgramos por ml de 7 metoxicumarina.
Solución de prueba: Transferir aproximadamente 1.0g de manzanilla, pesado con
exactitud, a un matraz adecuado provisto de un condensador de reflujo y un mezclador,
agregar 80.0 ml de metanol, calentar la mezcla a reflujo con agitación durante 1 hora.
Enfriar el matraz hasta temperatura ambiente pasar el extracto a través del papel filtro y
recoger el filtrado en un matraz volumétrico de 100 ml.Emjuagar el matraz con
extracción con 3ml de metanol y verter los enjuagues metanolicos a través del papel de
filtro y agregar el filtrado al matraz volumétrico. Diluir a volumen con metanol y mezclar.
Transferir 25.0 ml de la solución a un matraz adecuado provisto de un condensador de
reflujo y un mezclador, agregar5.0 ml de agua y calentar la mezcla reflujo durante 25
minutos. Enfriar el matraz y ajustar la solución con ácido clorhídrico a un pH de 5.0 a
6.2. Transferir cuantitativamente la solución a un matraz volumétrico de 50ml, diluir a
volumen con metanol, mezclar y filtrar, desechando los primeros 10ml del filtrado.
Sistema cromatografico: Equipar un cromatografo de líquidos con un detector a
335nm y una columna de 4nm x15.5cm rellena con material L1.La velocidad de flujo es
de aproximadamente 1ml por minuto, programar el cromatografo del siguiente modo.
Tiempo (minutos) Solución A (%) Solución B Elución
0-3 74 26 Isocratica
3-22 74-15 26-28 Gradiente lineal
22-27 15-74 85-26 Gradiente lineal
27-30 74 26 Isocratica
Hacer ajustes, si fuera necesario, para obtener tiempo de retención relativos de
aproximadamente 0.63 y 1.0 para apigenina 7-glucosidoy 7-metoxicumarina
respectivamente. Inyectar en el cromatografo la solución estándar y registrar al
cromatograma según se indica en el procedimiento: La resolución entre apigenia-7-
glucosido y 7-metoxicumarina no es menor de 3.5 y la desviación estándar relativa para
inyecciones repetidas del pico de apigenia-7-glucosido no es más de 2.0%.
Procedimientos:
Inyectar por separado en el cromatografo volúmenes iguales (aproximadamente 15 µL)
de la solución estándar y de la solución de prueba y dejar que la solución de prueba
eluya durante no menos de seis veces el tiempo de retención de apigenina-7-
glucosido.Registrar los cromatogramas y medir las respuestas de todos los picos
observado en el cromatograma de la solución de prueba : los tiempos de retención
relativos aproximados son 0.63;1,0;1;2;1.6;1.8 para apigenia -7 glucosido,7-
metoxicumarina, apigenina ,trans –espiro-éter y diespiro-eter respectivamente. Calcular
el porcentaje de apigenina-7glucosido en la porción de manzanilla tomada por la formula
20(C/W)(ru/rs)
En donde C es la concentración en mg por mL de ER apigenina-7-glucosido usp en la
solución estándar; W es el peso en g de la manzanilla tomada para la solución de prueba
y (ru y rs) son las respuestas de los picos de apigenina-7-glucosido obtenido a partir de
a solución de prueba y la solución estándar respectivamente: no se encuentra menos
de 0.3%.
Contenido de derivados del bisabolano-
Solución estándar: preparar una solución ER, levomenol usp en ciclo hexano con una
concentración conocida de aproximadamente 1mg por ml.
Solución de prueba: Transferir los aceites volátiles obtenidos en la prueba de
contenido de aceites volátiles en un matraz volumétrico de 25ml, enjuagar el tubo
graduado de aparato con una pequeña porción de ciclo hexano, transferir y enjuague al
matraz volumétrico de 25ml, agregar ciclo hexano a volumen y mezclar.
Sistema cromatografía: Equipar un cromatografo de gases con un detector de
ionización a llama y una columna capilar de sílice fundida de 0.32nm x 30cm recubierta
de una película de 0.25µm de fase G16. El gas transportador es el helio que fluye a una
velocidad aproximadamente 1.0mL por minuto. Programar el cromatografo del siguiente
modo. Mantener la temperatura de la columna inicialmente a 70° y luego aumentar a
una velocidad de 4° por minuto hasta 230° y mantenerla a 230° durante 10 minutos.
Mantener la temperatura del detector a 250° y la del inyector a 220° inyectar en el
cromatografo la solución estándar y registrar las áreas de los picos según se indican en
el procedimiento: el factor de simetría para levomenol no es mayor de 1.8, y la
desviación estándar relativa para inyecciones repetidas no es más de 2.0%.
Procedimiento: Inyectar por separado en el cromatografo volúmenes iguales
aproximadamente (1µL) de la solución estándar y de la solución a prueba registrar los
cromatogramas y medir las áreas de los picos. Identificar los picos debidos al
levomenol, oxido de bisabolol B, oxido de bisabolol y oxido bisabolol A en la solución de
prueba usando el tiempo retención de levomenol en la solución estándar en los tiempos
de retención relativa de aproximados de 0.89; 0.97y 1.1 para oxido bisabolol B, oxido
bisabolol y oxido de bisabolol A, respectivamente, con respecto al pico de levomenol.
Calcular el porcentaje de los derivados de bisabolano en la porción de manzanilla
tomada.
Ortiga
La ortiga está constituido por las raíces y rizomas secos de urtica dioica spp (Familia
urticáceae) y puede contener como un componente menor. Contiene no menos de 0.8%
de aminoácidos totales no menos de 0.05% de β-sitosterol y no menos de 3µg de
escopoletina, calculado con respecto a las sustancia seca.
Envasado y almacenamiento:
Conservar en envases impermeables, proteger de la luz almacenar a temperatura
ambiente controlado.
Etiquetado: Indica el nombre científico en latín y después de la denominación oficial,
las partes de la planta contenidas en el artículo.
Estándares de referencia usp
ER. Acido aspártico usp
ER. Acido glutámico usp
ER. Escopoletina usp
ER. β-sitosterol usp
Características botánicas
Macroscópicas: El rizoma tiene una forma torcida irregular tiene un grosor
aproximadamente 3-10mm y la parte externa es de color Marrón grisáceo claro,
presenta un surco longitudinal con protuberancias tortuosas de las que nacen los raíces
finas. Un corte transversal de rizomas muestra que es fibroso de color blanco amarillento
claro y por lo general tiene una cavidad medular pequeña. Las raíces son a menudo
muy largas por lo general de un grosor de 0.5-2mm, su parte externa es de color amarillo
Marrón y tienen algunos surcos longitudinales profundos. En corte transversal, la raíz
muestra un color blanco pálido casi puro.
Histología: La sección transversal del rizoma y la raíz muestra las siguientes
características. El rizoma tiene un súber estrecho formado por células marrones de
pared delgada, algunas hileras de parénquimas cortical elongadas de manera
tangencial y una región periciclica con numerosas fibras que se presentan de forma
individual o más frecuentemente en grupos pequeños. Las fibras están muy elongadas,
con paredes gruesas y lignificadas. Algunas células del periciclo y la parte externa del
floema secundario contienen grandes cristales de oxalato de calcio. L a región cambial
vascular es visible y continuo con grupos radiales estrechos de tejidos vasculares
separados por anchos rayos medulares. El floema secundario es principalmente
parenquimatoso con tejidos cribosos de pared delgada. Xilema es denso y totalmente
lignificado contiene vasos dispersos en grupos pequeños y está asociado con células
del parénquima del xilema moderadamente engrosado y numerosas fibras ce xilema
de paredes gruesas.
Identificación: Prueba de identificación por cromatografía en capa delgada
Adsorbente: una capa de mezcla de gel de sílice para cromatografía de 0.50mm de
espesor.
Solución de prueba: Extraer 1g de polvo mediante reflujo con 10ml de una solución
compuesto por tolueno, acetato de etilo, y metanol (7:2:1) durante 15 minutos, enfriar y
filtrar. Evapora el filtrado bajo presión reducida a menos de 40° hasta sequedad y
disolver el residuo en 2ml de solución de tolueno, acetato de etilo y metanol.
Solución estándar: Disolver una cantidad pesada con exactitud de ER escopoletina
usp y ER β-sitosterol usp en metanol para obtener una solución que contenga una
concentración conocida de 0.05kg por mL, respectivamente.
Volumen de aplicación: 20µL para la solución de prueba ,10 µL para la solución
estándar.
Fase móvil: Dietil éter y metanol (9:1).
Procedimiento: Proceder según se indica en el capítulo. Examinar las placas bajo la
luz uv a 365nm.Rociar la placa con con aproximadamente 10ml de una mezcla de agua,
ácido fosfórico al 85% y vainillina al 10% en etanol al 96% (4.5:4.5:1) calentar entre
100°y105° durante 10 minutos y examinar la placa con la luz diurna. El cromatograma
en el mismo valor RF que la zona de B-sitosterol en la cromatograma estándar son
visibles zonas con un color rojo violáceo débil por encima y por debajo del β-sitosterol
correspondiente al β-sitosterol-glucósido.
Contenido de β-sitosterol
Reactivo de derivatizacion: Prepara una solución que contenga volúmenes iguales
(1:1:1) de trimetilsilil, acetamida y Ntrimetilsililimidazol.
Solución de estándar interno: Disolver en cloroformo una cantidad de colesterol
pesada con exactitud para obtener una solución con una concentración conocida de
aprox 10mg por mL.
Solución estándar: Disolver en 2.0ml de cloroformo 50mg de sitosterol usp ,agregar
una solución de estándar interno y diluir con cloroformo a 5ml, transferir 0.5ml de esta
solución en un matraz de fondo redondo de 10ml y secar el disolvente a presión reducida
y agregar 1ml de reactivo de derivatizacion y mezclar.
Solución de prueba: Reducir a polvo fino una cantidad de ortiga y transferir 50.5g a un
aparato soxhlet tratar con cloroformo y de volumen del dedal con un matraz de tamaño
adecuado. Evaporar el disolvente a presión reducida y agregar 1.0ml de la solución
estándar interno y diluir con cloroformo a 10ml.Transferir 0.5ml evaporar el disolvente
a presión reducida y agregar 0.5ml de reactivo de derivatizacion.
Sistema cromatografico: Equipar un cromatografo de gases con un detector de
ionización a la llama y una columna capilar de sílice fundida de 0.20mm x 25cm
recubierta con una película de 0.35µm de fase G2 el gas transportador es el helio que
fluye a una velocidad aprox 0.5ml por minuto. Mantener las temperaturas del inyector y
del detector a 325° fijar inicialmente la temperatura de la columna a 300° mantener esa
temperatura durante 60 minutos. Inyectar en el cromatografo la solución estándar y el
factor de asimetría para cada pico de esterol no es mayor de 2.0 y la desviación
estándar relativa para inyecciones repetidas determinada partir de cada pico de esterol
no es mayor de 5.0
Procedimiento- Inyectar volúmenes iguales por separado aproximadamente 1µL de la
solución estándar y de la solución de prueba en el cromatografo, registrar los
cromatogramas y medir las respuestas correspondientes a los picos de los esteroles
Extracto de polvo de ortiga
El extracto de polvo de ortiga se prepara a partir de la ortiga triturada con alcohol de 60
por ciento u otros disolventes adecuados. Contiene no menos de 5.0% de aminoácidos
totales, no menos de 0.1% de B- sitosterol ( C29H50O) y no menos de 30 microgramos
de escopoletina ( C10H8O4). La relación entre el material vegetal crudo inicial y el
extracto en polvo es de 10:1.
Envasado y almacenamiento
Conservar en envases impermeables, proteger de la luz almacenar a temperatura
ambiente controlado.
Etiquetado
La etiqueta declara la denominación oficial del artículo, el nombre científico en latín y
después de la denominación oficial, la parte de la planta a partir de la cual se preparó el
artículo .Etiquetar indicando el contenido de aminoácidos totales, B-sitosterol,
escopoletina el disolvente de extracción usado para prepararlo y la relación entre el
material vegetal crudo inicial y el extracto en polvo.
Estándares de referencia usp
ER. Acido aspártico
ER. Acido glutámico usp
ER. Escopoletina usp
ER. B-sitosterol usp
Identificación
A. Prueba de identificación por cromatografía en capa delgada (201),
Adsorbente solución estándar-volumen de aplicación fase móvil y procedimiento,
proceder como se indica en la prueba de identificación en la ortiga. Solución de
prueba- Disolver 0.6g de extracto en polvo pesados con exactitud en una mezcla
de tolueno, acetato de etilo y metanol (7:2:19), filtrar y secar a presión reducida
a una temperatura inferior a 40°.
B. El tiempo de retención de B-sitosterol en el cromatograma de la solución de
prueba se corresponde con el del cromatograma de la solución estándar según
se obtienen en la prueba de contenido de B-sitosterol.
C. El tiempo de retención de escopoletina en el cromatograma de la solución de
prueba se corresponde con el del cromatograma de la solución estándar según
se obtienen en la prueba de contenido de escopoletina.
Recuento microbiano
El recuento total de microorganismos no excede de
Perdida por secado
Secar aproximadamente 1.0g de extracto en polvo, pesado con exactitud a 105° durante
2 horas, no pierde más de 8.0% de su peso.
Cenizas totales no más de 20.0%
