Coloración Wright

En la mayoría de laboratorios. se somete a un proceso de fijación y posteriormente a una tinción mediante un colorante adecuado.Coloración Wright  El frotis sanguíneo una vez seco. los colorantes más empleados para la tinción hematológica se basan en el de Romanowsky ya que puede obtenerse mayor información a partir del examen de un frotis de sangre periférica bien teñido.  .

La amplia variación en los colores y sombras observadas con la tinción de Romanowsky permiten distinciones sutiles de las características celulares. La acción combinada de estos colorantes produce el efecto de Romanowsky y da una coloración purpúrica a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrófilos y de color rosado a los eritrocitos. .Coloración Wright     Una tinción de Romanowsky consiste en azul de metileno y sus productos de oxidación. Los componentes principales causantes de este efecto son el azul B (un producto de oxidación del azul de metileno) y la eosina Y. así como eosina Y.

es así como los ácidos nucleicos se tiñen con azul B que es el básico y la hemoglobina con la eosina Y que es ácida. Otras estructuras se tiñen por una combinación de ambos y se denominan neutrófilas.   .Coloración Wright Fundamento La naturaleza ácida o básica de las estructuras celulares determina su avidez por los componentes del colorante policromático de Wright.

Agua corriente. Cubetas para tinción.4). Colorante de Wright.Coloración Wright Procedimiento  Materiales Extendidos de sangre en lámina o laminilla. Buffer de fosfatos (pH 6. .

Cubrir toda la superficie de la preparación con Wright. Un modelo es el siguiente: Teñir las extensiones de sangre una vez se hayan secado al aire libre. Colocar los extendidos en un plano horizontal y con la extensión de sangre hacia arriba y en las cubetas respectivas. Si se desea dejar por más de una hora sin colorear es necesario fijarlas con metanol absoluto.  Método Coloración Wright Fundamento Es variable y debe estandarizarse en cada laboratorio. (15 segundos aproximadamente).    . Esperar 2 -3 minutos (el tiempo óptimo es determinado por ensayo y error).

Esperar 7 minutos.   . La cantidad de agua o buffer debe ser suficiente para cubrir la lámina completamente. pero no en exceso que caiga a la cubeta. Soplar suavemente el extendido para mezclar hasta obtener una película uniforme de apariencia metálica .5 ml para láminas y 0. (2.Coloración Wright Procedimiento  Agregar un volumen igual de solución amortiguadora (pH 6.4) o en su defecto agua de grifo con resultados igualmente buenos.verdosa.5 ml para laminillas aproximadamente).

el colorante que queda adherido al dorso de la lamina o laminilla. teniendo cuidado de que el alcohol no tenga contacto con la superficie coloreada Coloración Wright Procedimiento    Los extendidos en laminilla se pueden montar para uso temporal colocándolos con la película de sangre hacia abajo y sobre una lámina en la que se ha depositado una gota de aceite de inmersión. El lavado debe ser rápido (5 . . Quitar con una gasa humedecida en alcohol. Dejar secar al aire. Remover el colorante con agua corriente manteniendo los extendidos en posición horizontal.30 segundos) para evitar precipitación del colorante sobre la superficie del extendido..

habitualmente rica en monocitos. . Coloración Wright Control de calidad Preanalitico   El núcleo debe tener una estructura vesicular fina. El criterio más confiable sobre la calidad de la tinción es la forma en que se tiñen los monocitos. La tinción es comprobada en una extensión fina preparada con sangre de lactante. Control de calidad La tinción de Wright bien preparada y cronometrada funcionará correctamente si la extensión fue realizada en forma correcta ya que extensiones gruesas no permiten juzgar la calidad de la tinción. y en el citoplasma han de verse los característicos gránulos rosados muy finos.

Coloración Wright Control de calidad Preanalitico Neutrófilos: cromatina púrpura oscuro. citoplasma azul grisáceo y gránulos lila Plaquetas: centrómero violeta o púrpura. citoplasma azul pálido y gránulos rojo brillante. Basófilos: cromatina púrpura oscuro.   Una tinción satisfactoria debe dar los siguientes resultados: Glóbulos Rojos: rojo amarillento.     Monocitos: cromatina púrpura medio. hialómero azul claro . citoplasma azul cielo. gránulos azul oscuro. Eosinófilos: cromatina púrpura oscuro. Linfocitos: cromatina púrpura oscuro. citoplasma rosa pálido y gránulos lila.

.

Empleo de colorante excesivamente alcalino Una coloración excesivamente rosada (acidófila). Extensión delgada. Empleo de colorante excesivamente ácido. Exceso de buffer. Extensión gruesa. Lavado insuficiente.Coloración Wright  Causas de error en la tinción del frotis sanguíneo. Una extensión excesivamente azul (basófila).   . Tiempo tinción excesivamente prolongado.

Coloración Wright  Finalmente : Presencia de precipitados. es muy importante no esperar más de 2 horas de la extracción. ya que pueden aparecer alteraciones morfológicas imprevisibles de las células sanguíneas .   Apreciación de artefactos morfológicos debido al anticoagulante. Puede evitarse mediante filtración del colorante antes de su empleo. Cuando el frotis se realiza con sangre recolectada con EDTA.

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