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BIOLOGÍA GENERAL

Licenciatura en Genética

TRABAJO PRÁCTICO Nº 5
CÉLULA EUCARIOTA: ESTRUCTURA Y ORGANIZACIÓN

OBJETIVOS
● Reconocer la organización celular eucariota.
● Identificar la morfología y estructuras celulares en observaciones microscópicas,
considerando las técnicas citológicas para su obtención.
● Observar diferentes formas celulares en eucariotas autótrofos y heterótrofos.
● Relacionar estructuras celulares con adaptaciones y funciones.

INTRODUCCIÓN
Todos los organismos del Dominio Eukarya (protistas, hongos, plantas y
animales) tienen en común estar formados por células eucariotas que presentan gran
variedad de formas, tamaños y estructuras. Dado que la célula es la unidad de
organización de la materia viva, en ella pueden identificarse las propiedades o
características de los seres vivos. Este tipo celular eucarionte, además de la membrana
externa, presenta numerosas organelas membranosas que organizan a la célula en
compartimentos.
En una célula eucariota se distingue el núcleo separado del citoplasma por una
envoltura nuclear. En el fluido que compone el citoplasma (citosol), se encuentran las
organelas, algunas están presentes solo en células especializadas, por ejemplo los
cloroplastos en células que realizan la fotosíntesis, otras componen el sistema de
endomembranas formado por el retículo endoplasmático (que es continuación de la
envoltura nuclear), el complejo de Golgi, los lisosomas, las vesículas y vacuolas.
Cada organela cumple una función particular y su estructura, disposición y
número se relaciona con la función. Por ejemplo, en células con altos requerimientos
energéticos, el número de mitocondrias puede ser elevado.
Las células eucariotas tienen en el citoplasma una red de varios tipos de estructuras
proteicas fibrosas: microtúbulos, microfilamentos, filamentos intermedios y septinas, que
en conjunto se denomina citoesqueleto. Esta estructura dinámica contribuye a dar forma
a la célula, sirve de anclaje a las organelas y permite el tránsito de vesículas, además de
intervenir en el movimiento celular y el de los cromosomas durante la división celular.
Uno de sus componentes, los microtúbulos, también forman parte de cilios y flagelos,

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estructuras especializadas, relacionadas con movimientos celulares, presentes en algunas


células.
Las células eucariotas de hongos y plantas están rodeadas por una pared celular,
compuestas por quitina en los hongos y celulosa en las plantas. Esta estructura
proporciona apoyo estructural, protección e impide la acumulación excesiva de agua
evitando que la célula estalle.
Los organismos constituidos por células eucariotas pueden ser unicelulares,
multicelulares o pluricelulares. En los organismos pluricelulares, grupos de células
similares se organizan en una unidad estructural, funcional y de origen común,
denominado tejido. Estos tejidos llevan a cabo diferentes funciones como: protección,
absorción, excreción, transporte, sostén, entre otras. En cada tipo de tejido, las células que
lo forman presentan una morfología característica de acuerdo a la función que
desempeñan. Por ejemplo las neuronas, células del tejido nervioso, están especializadas
en la transmisión del impulso nervioso.
Desde el punto de vista de la nutrición, los organismos del Dominio Eukarya
pueden presentar un modelo nutricional autótrofo o heterótrofo. La presencia de
pigmentos fotosintéticos organizados en fotosistemas, ubicados en organelas llamadas
cloroplastos, determina la capacidad de sintetizar compuestos orgánicos, lo cual
caracteriza a las células de organismos autótrofos. Por su parte, los heterótrofos obtienen
energía a partir de las sustancias orgánicas sintetizadas por otros organismos.

A continuación, se presentan actividades relacionadas con el reconocimiento de células


eucariotas. Lea atentamente las descripciones teóricas y metodológicas para desarrollar
las actividades propuestas.

ACTIVIDAD 1. Reconocimiento de la estructura celular eucariota en organismos


unicelulares

1. Unicelulares autótrofos
Diatomeas
Las diatomeas integran un grupo de algas unicelulares que incluye unas 20.000
especies, que son importantes productores en la cadena alimenticia.

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La célula presenta pared celular silícea transparente y perforada, que permite la


entrada de luz y la adecuada difusión y excreción de los diferentes materiales de desecho.
La pared está formada por dos valvas que se complementan como las partes de una caja
de Petri. Además de la pared celular con estriaciones, se puede reconocer el surco de
unión entre las valvas y el núcleo.
La figura 1 muestra imágenes de diatomeas tomadas a partir de preparados
temporarios, utilizando el microscopio óptico. Las imágenes A, B y C corresponden a tres
organismos. El material biológico para observar diatomeas al microscopio óptico es agua
de charca y para elaborar el preparado, con una pipeta Pasteur se toma una gota del
material biológico, se coloca sobre un portaobjetos y se cubre con un cubreobjetos. A
continuación, se procede a la observación utilizando el objetivo de 40x.

Figura 1. Ejemplares de diatomeas.

1) Observe las tres imágenes y, teniendo en cuenta las características de las diatomeas,
indique cuatro similitudes.
2) Considerando que las diatomeas son seres vivos, indique tres funciones que se
realizan en la única célula que constituye a los individuos de las imágenes.
3) Teniendo en cuenta que en las imágenes A, B y C, la línea de la observación indica
10 µm, escriba una conclusión sobre el tamaño y la forma de las diatomeas
observadas.
4) Investigue la importancia ecológica de estos organismos.

2. Unicelulares heterótrofos
a) Levaduras
Se denomina levadura de manera general a diferentes hongos microscópicos y
unicelulares, con células redondas u ovales que pueden medir hasta 30 µm de diámetro,
que se reproducen por gemación, y que producen enzimas que generan la fermentación
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de los hidratos de carbono produciendo diferentes sustancias que en muchos casos son
utilizadas en la producción de bebidas y alimentos.
Para observación de levaduras (Saccharomyces cerevisiae) al MO, se realiza una
suspensión, adicionando 1 g de levadura comercial a 100 mL de agua destilada y agitando
para homogeneizar. Luego para realizar el preparado se coloca una gota de la suspensión
sobre un portaobjetos y se cubre con un cubreobjetos.
La siguiente figura corresponde a una observación microscópica realizada a 400X.
1) Complete el protocolo de observación correspondiente.

Material biológico: ……………………..


Observación: …………………………..
Preparado: ……………………………..
Coloración: …………………………….
Aumento total: …………………………

2) En la figura señale una célula, un individuo y un organismo.


3) Las levaduras son organismos eucariotas heterótrofos. Nombre tres características que
fundamenten esta afirmación.
4) Retome las figuras del trabajo práctico célula procariota y compare el tamaño de las
bacterias con el tamaño de las levaduras. Considere el aumento de ambas
observaciones.

b) Paramecios
Los paramecios son organismos microscópicos unicelulares de forma ovalada, de
tamaño comprendido entre 50 y 330 µm, con cilios que le permiten desplazarse, además
de generar corrientes de agua que acercan bacterias o levaduras de las que se alimenta;
habitan en aguas dulces estancadas.
Para la observación de paramecio se puede tomar como material biológico una
gota de agua de charca o un cultivo de paramecios, y realizar un preparado temporario.

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La figura 2 muestra la estructura interna de un paramecio (A) y su imagen al


microscopio óptico (B).

Figura 2. A) Morfología y estructura interna de un paramecio (organismo unicelular


ciliado)*. B) Paramecio visto al microscopio 400X.
*Fuente: https://www.coladaweb.com/biologia/reinos/protozoarios

1) Compare la estructura y la movilidad de paramecios y levaduras. ¿Qué estructuras


celulares se relacionan con las diferencias?
2) Fundamente la afirmación “Los paramecios son organismos unicelulares eucariotas”.

ACTIVIDAD 2. Reconocimiento de la estructura celular eucariota en organismos


pluricelulares

A) Organismos pluricelulares autótrofos


A.1) Células eucariotas en tejido epidérmico de protección
Para la observación de células eucariotas dispuestas en un tejido, una opción es
utilizar como material biológico las catáfilas internas del “bulbo de cebolla”. El bulbo es
una estructura que corresponde al tallo modificado de la cebolla, las catáfilas internas son
hojas modificadas para almacenamiento de nutrientes. En la observación microscópica de
un preparado, se reconocen células con forma hexaédrica y alargadas, unidas por las
paredes celulares. El interior traslúcido es el citoplasma, en el que se puede observar un
núcleo esférico coloreado, y en su interior el nucléolo, como una pequeña mancha clara
o más oscura dependiendo del colorante usado.

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Para obtener un preparado temporario primero se eliminan las catáfilas de


protección, son las marrones que cubren superficialmente y luego se realiza la siguiente
secuencia de pasos:
- Con un bisturí se realiza un corte muy superficial en forma de V y con la ayuda de
una pinza se toma el vértice del corte y se tira para desprenderlo. Este es el tejido
epidérmico que se observa como una película delgada y transparente. Esta forma de
obtener la muestra constituye una técnica denomina desgarrado.
- En un vidrio de reloj se fija la muestra con Farmer durante 5 min.
- Se retira el fijador y se realiza la coloración con el colorante safranina durante 5 min.
- Luego de coloreada la muestra, se monta sobre un portaobjetos y se cubre con el
cubreobjetos. De esta manera queda listo el material para ser observado al
microscopio óptico.
La siguiente imagen corresponde a la observación microscópica del preparado a
400X. Se pueden observar las células de forma más o menos rectangular delimitadas por
una pared celular, con núcleo coloreado de rojo y en ellos, uno o dos nucléolos
refringentes.
1) Complete el protocolo de observación.

Material biológico: ………….…………...


Observación: ……………….……….……
Preparado: ……………………….….….....
Coloración: ……………………....……….
Aumento total: ……………………………

2) En la imagen señale el núcleo, citoplasma y pared celular.


3) Investigue la composición química de la pared celular y el nombre de las organelas
características de estas células.

A.2) Células eucariotas modificadas en tejido epidérmico: tricomas vegetales


Los tricomas son pelos que recubren la superficie de las hojas, los pétalos e incluso
las raíces de los vegetales, están formados por una o más células especializadas de la

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epidermis, presentan paredes celulósicas recubiertas de cutícula o paredes secundarias


lignificadas.
La imagen que se muestra a continuación, corresponde a un preparado temporario
realizado a partir de hoja de “malvón” cuya superficie está cubierta de pelos o tricomas
finos y suaves (pubescente).
Este preparado se consigue realizando los siguientes pasos, que integran la técnica
del desgarrado:
- Se realiza la técnica de desgarrado, del modo explicado anteriormente para la
observación de células en tejido de protección.
- Se coloca el corte sobre un portaobjetos y con una gota de agua se realiza un
preparado temporario. Se cubre con un cubreobjetos y el preparado está listo para la
observación microscópica.
Los pelos o tricomas, aumentados unas 400 veces, se pueden distinguir como estructuras
cónicas alargadas, que pueden estar formados por una o varias células que presentan
núcleo y pared celular.
1) Complete el protocolo de observación correspondiente.

Material biológico: …………………..


Observación: …………………………
Preparado: ……………………………
Coloración: ………………….……….
Aumento total: ……………….………

2) Investigue la función de los pelos o tricomas y relacione con la estructura de los


mismos.

A.3) Células eucariotas modificadas en tejido epidérmico: estomas vegetales


Los estomas son grupos de dos o más células epidérmicas especializadas que se
encuentran en las partes verdes aéreas de las plantas, particularmente en las hojas, donde
pueden hallarse en una o ambas epidermis, más frecuentemente en la inferior. Su número
oscila entre 22 y 2.230 por mm2 y miden cerca de 50 µm. Cada estoma está formado por

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dos células especializadas llamadas oclusivas que dejan entre sí una abertura llamada
ostíolo o poro. En muchas plantas hay dos o más células adyacentes a las oclusivas y
asociadas funcionalmente a ellas (células acompañantes).
Para observar estomas, a partir de la cara inferior de la hoja, se realiza un
preparado temporario. Para ello se aplica la técnica de desgarrado y luego se observa al
microscopio óptico.
La siguiente figura corresponde a la observación de un preparado temporario de
epidermis de la cara inferior de una hoja de Tradescantia sp., realizada a 400X.
Es posible identificar los componentes del aparato estomático: células oclusivas y
células acompañantes y el poro u ostíolo. En las células oclusivas, se distinguen
claramente estructuras como los cloroplastos.
1) Complete el protocolo de observación.

Material biológico: …………..…


Observación: ……………….…..
Preparado: ……………………...
Coloración: …………………….
Aumento total: …………………

2) En la figura señale las estructuras celulares reconocidas y los componentes del aparato
estomático.
3) Investigue la función de los estomas y relacione con la estructura de las células que
componen el aparato estomático.

A.4) Células eucariotas en tejido parenquimático asimilador


Para observar células eucariotas en tejido parenquimático asimilador se puede
realizar un preparado temporario realizando los siguientes pasos:
- Se toma una hoja de Elodea sp. y se la coloca sobre un portaobjetos, sobre ella se
agrega una gota de agua y se cubre con un cubreobjetos.

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- Una vez montado el material, se lleva al MO y se inicia la observación con el menor


aumento. Se pueden observar células alargadas, rectangulares, todas de similar forma
y tamaño, que pertenecen a un tejido llamado parenquimático, en este caso es
parénquima asimilador o fotosintético. En la hoja (órgano), se puede apreciar la
disposición del tejido con células rectangulares.
- Girando el revólver del microscopio se ubica el objetivo de mayor aumento. En esta
observación se pueden identificar un espacio traslúcido, ocupado por la gran vacuola
y los cloroplastos que se presentan como pequeñas esferas de color verde brillante.
En la “elodea”, los cloroplastos son estructuras discoidales o elipsoidales que miden
entre 5 a 6 µm de diámetro y 1 a 2 µm de ancho. Cada célula puede presentar varios
cloroplastos.
La siguiente imagen muestra una observación realizada a 400 aumentos.
1) Complete el protocolo de observación.

Material biológico: ……………


Observación: …………………..
Preparado: ……………………..
Coloración: …………………….
Aumento total: …………………

2) Investigue la función de los cloroplastos, identifique el tejido y órganos en los que se


dispone y relacione con la función que desempeñan.
3) Dibuje un cloroplasto y señale: membrana interna y externa, membrana tilacoide,
ADN y granas tilacoides.

b) Organismos pluricelulares heterótrofos


Células eucariotas en tejido epitelial de protección
El epitelio (tejido de revestimiento) de la mucosa bucal está constituido por células
planas y poligonales, de contorno irregular, e incoloras, por lo que para su observación es
preciso colorearlas previamente, en este caso con azul de metileno, que permitirá observar

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un citoplasma granulado y un núcleo claramente diferenciado. Con la tinción se aprecia


muy claramente el núcleo.
El preparado temporario para observar células eucariotas de mucosa bucal se
realiza siguiendo los pasos que integran una técnica denominada hisopado:
- Previo a la toma de muestra es necesario enjuagar la boca con agua varias veces.
- Se coloca sobre un portaobjetos una gota de agua para realizar un extendido.
- Se toma una muestra de las paredes internas de la boca (mucosa), haciendo girar el
hisopo hacia arriba y hacia abajo unas cinco veces.
- Con el hisopo se extiende la muestra sobre el portaobjetos y se deja secar al aire cerca
del mechero.
- Se pasa el preparado por encima de la llama del mechero para fijarlo, esta acción
permite evaporar el agua y fijar el material celular antes de ser coloreado.
- Se cubre el preparado con azul de metileno durante 5 min. Se elimina el exceso de
colorante con agua utilizando una pipeta Pasteur e inclinando el portaobjetos. Se deja
secar la preparación.
La siguiente imagen corresponde a una observación al microscopio óptico a 400
aumentos. Se puede distinguir la morfología poligonal e irregular de las células.
1) Complete el protocolo de observación.

Material biológico: ……….……


Observación: ……………….…..
Preparado: ………………….…..
Coloración: ……………….…….
Aumento total: ………….………

2) Nombre las estructuras celulares observadas.


3) Mencione los niveles biológicos de organización referidos implícita o explícitamente
en el desarrollo de la actividad.

Bibliografía sugerida:
Campbell, N.A., Reece, J.B. (2007). Biología. Ed. Médica Panamericana. 7º Edición. Capítulo
6: Un viaje por la célula.

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