INFORME DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

Nombre: Irene Martín.

Curso: 2º Laboratorio clínico.

Introducción:

En esta práctica de laboratorio se va a realizar una tinción de levaduras con nigrosina. La

Nigrosina es un colorante utilizado como una tinción ácida negativa que permite visualizar
las cápsulas y esporas de muchos organismos como protozoos, hongos y espiroquetas. La
tinción negativa de Nigrosina es una técnica rápida y sencilla para determinar la morfología
celular de un organismo. Proporciona un fondo oscuro contra formas claras de la célula que
aparecen manifiestamente visibles y con un buen contraste. Un conjunto diverso de hongos,
por lo general microscópicos y unicelulares, capaces de iniciar los procesos de
descomposición (fermentación) de distintas sustancias orgánicas, particularmente los
azúcares y los carbohidratos, y obtener como subproducto otras sustancias específicas
(como alcoholes).

Objetivo:

● Realizar una correcta tinción de la levadura.

● Realizar dilución de la tinción.

Materiales:

● Balanza
● Guantes
● Vidrio de reloj
● Gradillas eppendorf
● Vaso de precipitado
● Tubos eppendorf
● Micropipeta 1000
● Puntas de pipeta
● Cucharita
● Nigrosina en polvo
● Asa de siembra
● Levadura
● H20dd
● Vela
● Placa calefactora
● Eppendorfs
● Portas
● Cubres
● Varilla
● Microscopio óptico
 ● Filtro
● Formaldehido 37%.
● Papel de filtro

Procedimientos:

1. Preparamos material.
2. Realizamos cálculos.
3. Vamos a pesar 2,5 g de nigrosina en 25ml de H20dd.
4. Diluimos la nigrosina en H20dd.
5. Preparamos la placa calefactora y ponemos la nigrosina a 150º hasta que hierva.
6. Cuando hierva echamos 0,5 ml de formaldehído.
7. Mezclamos y filtramos.
8. En un eppendorf echamos 1000 microlitros de agua.
9. Cogemos levadura con el asa de siembra previamente esterilizada.
10. Resuspendemos.
11. Echamos una gota de nigrosina y con el asa de siembra lo mezclamos con la
levadura.
12. Lo expandimos por todo el porta y lo ponemos encima de la llama para secarlo.
13. Ponemos el cubre.

Resultados:

Observamos lo siguiente:
Imagen 1. Levadura en fresco 100x.

Vistas desde mas lejos se observaban muy bien.

Imagen 2. Levaduras en fresco 100x.

Interpretación de los resultados:

Se realizaron otras dos muestras añadiendo más cantidad de levadura porque en el centro
se veían totalmente negras. En los extremos si se han podido visualizar bastantes. En la
primera muestra al secarla en el fuego se ha cuarteado y hemos puesto un cubre encima.
Bibliografía:

https://www.merckmillipore.com/INTERSHOP/web/WFS/Merck-CO-Site/es_ES/-/COP/Show
Document-File?ProductSKU=MDA_CHEM-115924&DocumentId=200703.187.ProNet&Docu
mentType=PI&Language=ES&Country=NF&Origin=PDP#:~:text=La%20Nigrosina%20es%2
0utilizada%20como,biología%20de%20las%20células%20madre.

https://concepto.de/levadura/