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Este documento describe tres métodos de secuenciación de ácidos nucleicos:
1. El método químico de Maxam y Gilbert que modifica las bases nitrogenadas mediante reacciones químicas específicas y genera fragmentos de distintos tamaños que se separan por electroforesis en gel para determinar la secuencia.
2. Un método de secuenciación química de un oligonucleótido que proporciona una imagen autorradiográfica cuya secuencia se debe determinar.
3. El método original de Sanger de secuenciación
Este documento describe tres métodos de secuenciación de ácidos nucleicos:
1. El método químico de Maxam y Gilbert que modifica las bases nitrogenadas mediante reacciones químicas específicas y genera fragmentos de distintos tamaños que se separan por electroforesis en gel para determinar la secuencia.
2. Un método de secuenciación química de un oligonucleótido que proporciona una imagen autorradiográfica cuya secuencia se debe determinar.
3. El método original de Sanger de secuenciación
Este documento describe tres métodos de secuenciación de ácidos nucleicos:
1. El método químico de Maxam y Gilbert que modifica las bases nitrogenadas mediante reacciones químicas específicas y genera fragmentos de distintos tamaños que se separan por electroforesis en gel para determinar la secuencia.
2. Un método de secuenciación química de un oligonucleótido que proporciona una imagen autorradiográfica cuya secuencia se debe determinar.
3. El método original de Sanger de secuenciación
1. Respecto del método químico de secuenciación de Maxam y Gilbert, responde si son
verdaderas o falsas las siguientes afirmaciones. Justifica las afirmaciones que te parezcan falsas. a. Se basa en la modificación de las bases nitrogenadas mediante reacciones químicas específicas. b. Es un método que requiere marcaje radiactivo con 32P. El marcaje se introduce en cada base nitrogenada durante la reacción química de modificación. c. La muestra se divide en cuatro tubos y en cada uno de ellos se realiza una reacción química específica que modifica una de las cuatro bases. d. Las reacciones químicas generan fragmentos de distintas longitudes que se separan mediante electroforesis en gel de poliacrilamida en condiciones desnaturalizantes. Los productos de las cuatro reacciones químicas se corren en paralelo en calles adyacentes del mismo gel. e. La lectura del gel se realiza iluminándolo con luz UV y obteniendo una fotografía.
2. En la secuenciación química de un oligonucleótido de ADN se ha obtenido la siguiente
imagen autorradiográfica. ¿Cuál es la secuencia del oligonucleótido? 3. Mediante secuenciación enzimática por el método original de Sanger de un oligonucleótido de ADN se ha obtenido la siguiente imagen autorradiográfica.