TÉCNICAS BÁSICAS DE MICROBIOLOGÍA

LICENCIATURA EN QUÍMICA APICADA

INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA
INGENIERÍA EN ALIMENTOS

M en C. Araceli González Burgos

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 UNIDAD I
CULTIVO DE MICROORGANISMOS

M en C. Araceli González Burgos

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 Requerimientos nutricionales de
los microorganismos

N Macronutrientes (g/Lt, mg/Lt)

Carbono : azúcares, ácidos orgánicos, bases nitrogenadas
U Nitrógeno: NH3,NO3, N2 Necesidades especiales
T P, S,K, Mg, Na, Ca, Fe Morfología
R Medio ambiente
I Micronutrientes (µg/Lt)
Elementos traza
E Oligoelementos: Cr, Co, Cu, Mn, Mo, Ni,
N Se, Zn, Fe.
T
E Factores de crecimiento
Compuestos Orgánicos: vitaminas, aminoácidos
S

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 Medios de cultivo

Medio de cultivo. Material nutritivo en el

que se pueden recuperar, multiplicar y
aislar microorganismos, así como
efectuar pruebas de susceptibilidad.
NOM-065-SSA1-1993.

• Necesidades nutricionales específicas

Composición del medio
• Capacidad de cultivar y mantener el
microorganismo en el laboratorio

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 Medios de cultivo

Producción de grandes cantidades de

microorganismo o metabolito
Selección de un microorganismo o grupo de
Líquido. No contiene agar.
ellos.
Identificación del microorganismo mediante
pruebas bioquímicas.

Estado físico Semisólido. 7 g/L de agar. Pruebas bioquímicas

Movilidad del microorganismo

Sólido. 15-20 g agar/L

Obtención de
colonias aisladas

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 Medios de cultivo

•Fines generales. Mantienen el crecimiento de muchos

microorganismos.

•Selectivos de enriquecimiento. Estimulan la

multiplicación de algún microorganismo.

•Selectivos. Contienen sustancias que impiden el

Uso desarrollo de algunos microorganismos

•Diferenciales. Medios diseñados para detectar

diferencias bioquímicas o fisiológicos entre dos o más
microorganismos.
•Medios para medir la potencia de los antibióticos.

• Medios para cultivar microorganismos anaerobios.

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Ingredientes selectivos

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Medios de cultivo diferenciales

AGAR DESOXICHOLATE Escherichia coli

Enterobacter
Enterococcus aerogenes
faecalis

Shigella
flexneri
Leboffe, M. & Pierce, B. 2011. A Photographic Atlas for the
Microbiology Laboratory, Ed. Morton Publishing 4ed. 10
 Medios de cultivo

Medio definido o sintético. Se conocen todos los componentes.

Composición Medio no definidos o complejos. Medio rico que satisface las
necesidades de diversos organismos. Peptonas, extracto de
carne o de levadura.

Ejercicio 1. Tipo de medio de cultivo.

Ejercicio 2. Especificaciones de los medios

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 Ejercicio 1. Agar Bilis Rojo y Violeta (RVB)

Clasifique el siguiente medio de cultivo de acuerdo a los criterios señalados:

Estado Físico Justifique cada una de sus

Composición respuestas
Uso 12
 Ejercicio 2. Agar nutritivo

Clasifique el siguiente medio de cultivo de acuerdo a los criterios señalados:

Estado Físico Justifique cada una de sus

Composición respuestas
Uso 13
 Ejercicio 3. Agar Salmonella-Shigella

Clasifique el siguiente medio de cultivo de acuerdo a los criterios señalados:

Estado Físico Justifique cada una de sus

Composición respuestas
Uso 14
 Ejercicio 4. Caldo papa y dextrosa (PD)

Clasifique el siguiente medio de cultivo de acuerdo a los criterios señalados:

Estado Físico Justifique cada una de sus

Composición respuestas
Uso

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 Medio diferencial

Escherichia coli

Enterococcus
faecales Shigella
flexneri

Leboffe, M. & Pierce, B. 2011. A Photographic

Atlas for the Microbiology Laboratory, Ed.
Morton Publishing 4ed. Pp. 5, 6. 16
Salmonella typhimurium
Medios diferenciales

Leboffe, M. & Pierce, B. 2011. A Photographic

Atlas for the Microbiology Laboratory, Ed.
Morton Publishing 4ed. Pp. 5, 6. 17
 Medios definidos

Escherichia coli Leuconostoc Thiobacillus thioparus

mesenteroides

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 Preparación de medios de cultivo

Modificado de :
Vilchez Cáceda H. A. 2010. Manual de prácticas de
laboratorio. Universidad Inca Garcilaso de la Vega
Lima-Perú.
Soltero R., Portillo L. y Santacruz-Ruvalcaba. 2013.
Manual de Biotecnología Vegetal. Universidad de
Guadalajara. México. 22
 Control de microorganismos

Calor Seco (Horno, incineración)

Húmedo (Esterilización vs pasteurización)

Físicos
UV 220-330 nm
Radiación Rayos X
Métodos de Radiaciones gamma
Control
Microbiano Filtración
Sustancias químicas
Químicos
Agentes microbianos Bacteriostáticos
Bacteriocidas
Bacteriolíticos
24
 EJERCICIOS

1. Describir la preparación de 250mL de medio RBV (Rojo Bilis

Violeta)

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2. Preparar 5 cajas Petri con agar nutritivo. En el laboratorio
únicamente se cuenta con caldo nutritivo de manera comercial y
agar-agar.

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Estriado en placa

Leboffe, M. & Pierce, B. 2011. A Photographic

Atlas for the Microbiology Laboratory, Ed.
Morton Publishing 4ed. Pp. 5, 6. 33
 Morfología celular y características
coloniales

Características
Morfología

Leboffe, M. & Pierce, B. 2011. A Photographic Atlas

for the Microbiology Laboratory, Ed. Morton
Publishing 4ed. P. 20.
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Caracterización de colonias

Leboffe, M. & Pierce, B. 2011. A Photographic Atlas

for the Microbiology Laboratory, Ed. Morton
Publishing 4ed. P. 20. 35
Caracterización de colonias

Leboffe, M. & Pierce, B. 2011. A Photographic Atlas

for the Microbiology Laboratory, Ed. Morton
Publishing 4ed. P. 20. 36
Caracterización de colonias

Leboffe, M. & Pierce, B. 2011. A Photographic Atlas for the

Microbiology Laboratory, Ed. Morton Publishing 4ed. P. 23. 37