INMUNOCROMATOGRAFÍA Helicobacter pylori

INTRODUCCIÓN

Helicobacter pylori (también conocida como

Campylobacter pylori) es una bacteria Gram negativa de
forma espiral con flagelo que infecta la mucosa gástrica.
Causa muchas enfermedades gastroentéricas como la
dispepsia no-ulcerosa, úlcera gástrica y duodenal,
gastritis activa, y puede incluso incrementar el riesgo de
adenocarcinoma estomacal.

Los métodos diagnósticos de la infección por H. pylori se dividen tradicionalmente en directos e

indirectos. Los primeros se basan en la demostración «directa» del microorganismo mediante el
estudio de muestras obtenidas por biopsia gástrica. Son, por tanto, técnicas que precisan una
endoscopia y, por ello, resultan agresivas para el enfermo.

Los métodos indirectos se basan en el estudio y la detección de ciertas características de la

bacteria (p. ej., la capacidad de hidrolizar la urea, propiedad en la que se basa la prueba del
aliento) o de la respuesta del sistema inmunitario del huésped frente a la infección (medición
de anticuerpos o antígenos específicos mediante diversas pruebas serológicas). Este tipo de
técnicas no precisan endoscopia y, por tanto, pueden considerarse poco agresivas para el
enfermo.

FUNDAMENTO

Dicho test es un ensayo inmunocromatográfico para detectar la presencia de antígenos de H.

pylori en muestras fecales.

El método se basa en el revelado de la reacción antígeno-anticuerpo por la acumulación del oro

coloidal del conjugado en zonas específicas del papel de nitrocelulosa donde se fijan
previamente anticuerpos de captura.

Se utiliza como conjugado anticuerpos unidos a partículas de oro coloidal. La suspensión de oro
coloidal consiste en pequeños gránulos de metal en una dispersión estable y uniforme. La
mayoría de los preparados consisten en partículas de oro que varían en diámetro desde 5 nm
hasta 150 nm. Estas partículas forman complejos muy estables (conjugados) al adsorber todo
tipo de proteínas, las cuales mantienen sus propiedades y actividad biológica.
 FUNDAMENTO

Zona de reacción Zona de test Zona de control

Ag

Movimiento por capilaridad

Oro Oro

Ag Ag
 PROTOCOLO TEST Helicobacter pylori
REACTIVOS
*Acondicionar las muestras y reactivos a temperatura ambiente.
Muestras: Heces de pacientes con/sin sospecha de Helicobacter pylori
Tubos de dilución y tiras reactivas proporcionados por el kit

EQUIPOS Y MATERIAL
Pañuelos de papel

PROTOCOLO

1.- Desenrosque y retire el aplicador del tubo de dilución. Tenga cuidado de no derramar o salpicar la solución
del tubo. Recoja las muestras de heces insertando el aplicador en al menos 3 sitios diferentes de las heces para
recoger aproximadamente 50 mg de muestra (equivalente a ¼ de un guisante).

2.- Introduzca el aplicador en el tubo y ciérrelo girando la tapa. Tenga cuidado de no romper la punta del tubo.

3.- Agite el tubo con la muestra enérgicamente para mezclar las heces con el tampón de extracción.

4.- Saque el cassette de su bolsa sellada y colóquela sobre una superficie limpia y plana. Etiquete la prueba con
el nombre del paciente.

5.- Utilizando un pañuelo de papel, rompa la punta del tubo de dilución. Mantenga el tubo vertical y dispense
dos gotas de la solución en la ventana (S) del cassette. Evite que queden atrapadas burbujas de aire en la
muestra. A medida que la muestra se desplace, podrá observar que el color de la membrana varía.

6.- Esperar 10 minutos para leer el resultado.

INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

Oro
o
Or

Ag

POSITIVO: Aparecen dos líneas. Una línea aparecerá en la región test

(T) y otra línea en la región control (C).

NEGATIVO: Aparecen sólo una línea en la región control (C). No

(+) T c aparecerá ninguna línea en la región test (T).

INVALIDADO: No aparece la línea de control (C) independientemente

de que aparezca una línea o no en la zona test. Un volumen de muestra
(-) T c insuficiente o un reactivo deteriorado son las causas mas frecuentes del
fallo en la línea control.

* El kit no proporciona un control positivo externo. Aquellos pacientes que se encuentren en tratamiento
antibiótico pueden presentar reducida la concentración de Ag de H. pylori, incluso por debajo del límite de
detección del test. Por ello, hay que tener precaución en la interpretación de resultados en estos pacientes.

* Como todas las pruebas de diagnóstico, nunca debe basarse un diagnóstico clínico definitivo en los
resultados de un único ensayo, sino que debe ser interpretado por el médico junto con los datos clínicos y de
laboratorio obtenidos.