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BOVINE ALBUMIN 30%

PRESENTACION
REF
3406010 Bovine Albumin 30% 10 mL

SAB
Albmina Bovina 30%
Ensayo cualitativo para la deteccin, identificacin y titulacin de anticuerpos.

Slo para uso diagnstico in vitro

PRUEBAS EN PORTA Y TUBO

FUNDAMENTO La Albmina Bovina 30% de Linear Chemicals es un reactivo complementario de gran utilidad en tcnicas inmunohematologicas diversas para potenciar la reaccin entre anticuerpos clase de IgG y sus antgenos correspondientes. La albmina acta disminuyendo el potencial zeta y aumentando la constante dielctrica del medio, con lo cual la fuerza de repulsin entre hemates se reduce facilitando su aglutinacin. Los anticuerpos del sistema Rh reaccionan muy bien en todos aquellos medios que contienen Seroalbmina bovina (SAB). APLICACIONES Deteccin de anticuerpos irregulares. Pruebas de compatibilidad. Identificacin y titulacin de anticuerpos (determina la tasa de anticuerpos resultante del embarazo y/o de reacciones transfusionales). Tipaje de antgenos. COMPOSICION DE LOS REACTIVOS El reactivo de Albmina Bovina 30% esta preparado a partir del fraccionamiento de suero bovino.
Bovine albumin 30% Solucin de Albmina Bovina al 30% en PBS. pH 6,5-7,4 zida sdica 0,95 g/L

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Estos reactivos deben ser claros y transparentes. La presencia de turbidez puede indicar contaminacin microbiana. Descartar el contenido del vial, en caso de turbidez, rotura o prdida de contenido. MUESTRAS

- Sangre anticoagulada reciente. Las muestras con signos evidente de hemlisis pueden dar resultados poco fiables. Conservar las muestras a 2-8C. - Suero de menos de 24 horas, mantenido a 2-8C desde la separacin del coagulo. EQUIPO ADICIONAL Prueba en porta - Portas de vidrio. - Palillos desechables. - Lmpara visualizadora (45-50C). Prueba en tubo - Tubos de vidrio (10x75 mm o 12x75 mm). - Pipetas Pasteur. - Bao a 37C. - Centrifuga Sero-fuge similar. REACTIVOS ADICIONALES - Tampn Fosfato (PBS): 8,5-9,0 g/L NaCl (0,145 mol/L0,154 mol/L) pH 7,0 0,2 a 22 1C. - Panel de Hemates (seguir las instrucciones dadas por la empresa suministradora). TECNICA I. 1. 2. Pruebas cruzadas. Prueba en porta Homogenizar la muestra de sangre total del donante (hematocrito aproximado 35-40%) con suavidad. Depositar en un porta: - 1 gota de hemates - 1 gota del suero del receptor - 2 gotas de Albmina Bovina al 30%. Mezclar bien, con un palillo desechable, y extender la mezcla sobre un porta. Colocar el porta sobre una lmpara visualizadora precalentada (45-50C) Mover la lmpara lentamente con movimientos pendulantes durante 2 minutos observando la aparicin de cualquier signo de aglutinacin. Lectura Examinar macroscpicamente la presencia de aglutinacin.

Precauciones: Aunque la Albmina bovina ha sido controlada frente a las enfermedades infecciosas ms frecuentes, dando resultados negativos, se aconseja manipular los reactivos y las muestras con las precauciones debidas.
Usar guantes y ropa protectora.

Aviso: Los reactivos contienen azida sdica. Evitar el contacto con la piel y mucosas.

PREPARACION DE LOS REACTIVOS Los reactivos estn listos para su uso. ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD 1. Todos estos reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen bien cerrados a 2-8C y se evita la contaminacin durante su uso. No usar los reactivos una vez caducados. No congelar o exponer el reactivo a altas temperaturas. La conservacin del producto a temperatura distinta de la recomendada acelera la perdida de reactividad de producto.

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Pruebas de la Antiglobulina humana indirecta. Prueba en tubo Preparar una suspensin al 3-5% de hemates en PBS. Los hemates comerciales estn listos para su uso. En un tubo de hemlisis aadir: - 1 gota de hemates - 2 gotas del suero del paciente - 3 gotas de Albmina Bovina Mezclar bien y centrifugar a 1000 f.c.r. durante 20 segundos o por una fuerza y tiempo equivalentes. Golpear suavemente el tubo para desprender el sedimento y examinar la presencia o ausencia de aglutinacin (Nota 1,2). Mezclar bien e incubar el tubo en un bao de agua 30 1. minutos a 37C. Centrifugar nuevamente segn lo indicado en el punto 3 y leer la presencia o ausencia de aglutinacin como en el punto 4. Lavar la mezcla 3 veces con abundante PBS. Lavado (Nota 3): llenar el tubo con PBS (aprox. 4 mL) y centrifugar los hemates el tiempo adecuado para que sedimenten bien los hemates, decantar el sobrenadante. Repetir la operacin 2 veces ms. Decantar completamente tras el ltimo lavado. Aadir 1 gota de ANTI-HUMAN GLOBULIN. Repetir los pasos 3 y 4 (Nota 4). Interpretacin Un resultado positivo o presencia de aglutinacin indica que en el suero del paciente existen anticuerpos dirigidos contra los antigenos de los hemates. CONTROL DE CALIDAD

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La Albmina bovina al 30% no potencia la aglutinacin de todo tipo de anticuerpos. Falsos resultados positivos o negativos pueden ser debidos al lavado inadecuado de los hemates, la contaminacin de los reactivos con trazas de suero, tiempos de incubacin y centrifugado incorrectos, mal control de la temperatura e inadecuada conservacin u omisin de los reactivos. Hemates sensibilizados con autoanticuerpos in vitro o in vivo pueden aglutinar espontneamente con albmina bovina en concentraciones inferiores a 6%. El suero usado no debe ser conservado mas de 24 h a 2-8C 1 mes a 20C ya que el anti-Complemento puede perder su actividad. Ningn test es capaz individualmente de detectar todos los anticuerpos clnicamente significativos. La validacin del reactivo con otras tcnicas deber determinarlas el usuario. El uso e interpretacin de los resultados debe llevarse a cabo por personal formado y cualificado, de acuerdo con la normativa de cada pas. REFERENCIAS 1. Diamond, l.k. y Denton, R.L. : J. Lab. Clin Med., 30 , 821 (1945) 2. Pollack, W.: Transfusion (Philadelphia), 4, 411 (1964)
G3406-2/0409 R1.cas

Se recomienda con cada procedimiento la inclusin de un autocontrol empleando los hemates del receptor y su propio suero. Nota 1. NOTAS Retrasos en la lectura pueden provocar disociacin del complejo antigeno-anticuerpo, dando falsos resultados negativos o reacciones dbiles. La hemlisis indica presencia de anticuerpos fijadores del Complemento. Complete el lavado de los hemates sin interrupcin. Para confirmar la validez de los resultados negativos aadir una gota (50 L) de hemates sensibilizados con anti D (Hemates Control de Coombs), centrifugar y leer en busca de aglutinacin (ver Apartado 3 y 4. Prueba en tubo). Si los hemates no aparecen aglutinados, el ensayo es invalido y debe repetirse. CARACTERISTICAS FUNCIONALES Los reactivos han sido ensayados, segn lo especificado en el apartado de TCNICA y demuestran una potenciacin de la aglutinacin con hemates sensibilizados con anti-IgG. Para asegurar su especificidad cada lote ha sido ensayado con hemates que poseen los antigenos ms frecuentes del grupo sanguneo y confirmar as que el reactivo esta libre de anticuerpos.

Nota 2. Nota 3. Nota 4.

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