T.M.

Adolfo Ríos Alcorta

Mg. Ed (c)
Coordinador Nacional de Histotecas UDALBA
 BIOPSIA

Procedimiento médico de examen

macro y microscópico de fragmentos de
un tejido u órgano o de parte de fluidos
orgánicos extraídos de un ser vivo,
realizado por especialistas médicos. Observación Macroscópica y Microscópica de Hidatidosis pulmonar

Propósito:
• Orientación de conducta quirúrgica
INTRAOPERATORIA (Suturar a paciente o ampliar bordes
O RÁPIDA de resección quirúrgica)
• Aproximación inicial a diagnóstico de
benignidad o malignidad de lesión
BIOPSIA

Propósito:
• Diagnóstico de confirmación
DIFERIDA • Orientación de conducta terapéutica
(tratamiento)
• Prognosis
BIOPSIA INTRAOPERATORIA O RÁPIDA: ETAPAS

Análisis macroscópico de la muestra

Congelación de muestra y generación de corte en: a) Crióstato; b) Crióstato portátil o; c) Micrótomo de congelación

Generación de preparado Tinción y preparación de corte obtenido

Análisis microscópico e informe a citohistológico y entrega a patólogo
equipo quirúrgico
 BIOPSIA DIFERIDA: ETAPAS (Parte 1)
Propósitos: Tejidos blandos: 12-24 hrs
• Detener autólisis (según tamaño)
• Prevenir contaminación microbiana de la muestra
• Estabilizar la cito-histoarquitectura para los procedimientos
diagnósticos que se realizarán
• Uso de Formalina 10% neutralizada o tamponada (aunque existen Tejidos mineralizados: 5-6 días (Se hace
otros fijadores) macroscopía en las primeras 24 hrs)
Fijación de la muestra

Ác. Nítrico: 6 días app (sacrifica morfología;

sólo tinción H-E)

TEJIDOS Ác. Fórmico-Citrato de Sodio (Anna-Morse):

8-10 días, muestras medianas y pequeñas TEJIDOS
DUROS DUROS
Mejor morfología, H-E y otras técnicas
EDTA (Quelante): 2-3 meses en muestras
Descalcificación grandes; < 3 semanas en muestras pequeñas
(ej biopsia Core mamaria, punción médula
ósea)). Mejor morfología, permite mayoría
de técnicas, incluidas inmunohistoquímica y
biología molecular.

TEJIDOS BLANDOS (No descalcificar)

Análisis macroscópico (mapeo pieza y encassettaimiento Histoprocesadores de tejidos: a)
fragmentos) Tipo Carrrousel ; b) De pedestal
tipo lavadora
BIOPSIA DIFERIDA: ETAPAS (Parte 2)

Inclusión del molde histológico

Histoprocesadores de tejidos: a) Tipo
Carrrousel ; b) De pedestal tipo Corte, estiramiento, adhesión y secado del preparado
lavadora histológico

Observación y diagnóstico Montaje muestras

(Anatomopatólogo) Desparafinación, hidratación,
tinción, deshidratación y
aclaramiento post-tinción
PROCESAMIENTO HISTOLÓGICO: ESQUEMA DERIVACIONES
ETAPAS DEL HISTOPROCESAMIENTO DE BIOPSIA Y/O NECROPSIA DIFERIDA
1. Obtención de la muestra: Durante el acto quirúrgico
2. Derivación a análisis:
I. Análisis macro y microscópico intraoperatorio (biopsia rápida o intraoperatoria)
II. Macroscópico diferido: Observación y descripción pieza anatómica, mapeo y obtención de fragmentos para
histoprocesamiento. En esta etapa se inicia la fijación
III. Microscópico diferido: Procesamiento de segmentos representativos de la muestra o pieza operatoria, en secuencia
de:
a. Fijación (para muestras blandas no mineralizadas 12 a 24 hrs; para tejidos mineralizados, sobrefijar por 5 a 6 días)
b. Descalcificación (sólo para muestras duras calcificadas o mineralizadas, incluyendo tumores calcificados, hueso,
cartílago; puede ser en ácidos; en solución o mezcla ácido-sal, o en quelantes, específicamente EDTA)
c. Deshidratación
d. Aclaramiento
e. Impregnación e Inclusión en parafina
f. Corte y montaje en láminas portaobjetos
g. Secado
h. Desparafinación
i. Rehidratación
j. Tinción (incluye técnicas rutinarias, especiales, histoquímicas, inmunohistoquímicas o de biología molecular)
k. Deshidratación y aclaramiento
l. Montaje de cubreobjetos en medio hidrófobo
m. Observación
3. Análisis microscópico e informe diagnóstico
PROCESAMIENTO HISTOLÓGICO: ESQUEMA DE PROCESO
PROCESAMIENTO HISTOLÓGICO: RESUMEN
MICROSCOPIA Y APLICACIONES
MICROSCOPIO ÓPTICO DE CAMPO CLARO

Microscopio Monocular. Genérico

Ganglio raquídeo (corte de

segmento vertebral. Arteta)

Microscopio Binocular o
stereoscópico. Leica DM500
MICROSCOPIO ÓPTICO DE CAMPO CLARO

Microscopio Binocular invertido Fertilización in vitro. Microscopio Binocular invertido

 MICROSCOPIO ÓPTICO DE CAMPO OSCURO

Cocaceas. Microscopio de Campo oscuro.

Microscopio de Campo oscuro.
MICROSCOPIO ÓPTICO DE CAMPO OSCURO

Amiloidosis renal. Tinción Rojo Congo. Microscopía óptica convencional. (Arkana Laboratories)

Microscopio de polarización

Amiloidosis renal. Tinción Rojo Congo. Microscopía de polarización

 MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES

Microscopio de Contraste de
fases Microscopio de Interferencia
Diferencial de Nomarski.

Fagocitosis. Microscopio de Contraste de fases

Microscopio de Fluorescencia

Fibras nerviosas de ratón. Microscopía de Fluorescencia

Microscopio Confocal

Citoesqueleto y núcleo de fibroblastos.

Microscopio Confocal
Microscopio Electrónico de
Transmisión

Mitocondria. MET
Microscopio Electrónico de Barrido

Diatomeas. MEB

Gloméruos renales. MEB

TINCIONES Y APLICACIONES
 Piel Fina. Epitelio estratificado plano no queratinizado. H-E
Células exfoliativas de mucosa oral. Azul de metileno
 Glomérulo renal. Tinción tricrómica Arteta
Mastocitos. Tinción metacromática con Azul de toluidina.
Hígado, acúmulos de glicógeno en hepatocitos. P.A.S. Hígado, Fibras reticulares. Impregnación argéntica de Gomori.
Frotis de sangre. May-Grünwald Giemsa.
Citología exfoliativa de cuello uterino. Tinción Papanicolaou
Aorta. Orceína para visualización de fibras elásticas Glomérulo renal y túbulos renales. Riñón, P.A.S.-Metenamina de
plata para identificación de lámina y membrana basal
 Glomérulo renal y túbulos renales. Riñón, P.A.S.-para Amiloidosis renal. Tinción Rojo Congo. Microscopía de polarización
identificación de carbohidratos de glicoproteínas de lámina y
membrana basal
Tinción negativa con tinta china. Cryptococcus neoformans. Depósitos lipídicos. Tinción con Sudan IV
Glomérulo renal y túbulos renales. Riñón, Inmunofluorescencia
Marcadores tumorales. Inmunohistoquímica
BIBLIOGRAFÍA

• https://mmegias.webs.uvigo.es/6-tecnicas/ampliaciones/artefactos.php

• https://www.huvn.es/asistencia_sanitaria/anatomia_patologica/cartera_de_servicios/biopsias_intraoperator
ias_y_de_ganglio_centinela#:~:text=Las%20biopsias%20intraoperatorias%20son%20aquellas,durante%20el
%20mismo%20acto%20quirúrgico.

• https://www.sciencephoto.com

• Dey, P (2022). Basic and Advanced Laboratory Techniques in Histopathology.2nd Ed. Springer.