Manejo y uso del

Microscopio óptico
Práctica #2 del laboratorio de
parasitología
 02
MICROSCOPIO
ÓPTICO
¿Qué es?
Historia
 Tipos de microscopio
Microscopio
compuesto
Microscopio
Estereomicroscopios
electronico
➢
Microscopio ➢ De luz ultravioleta,
fluorescente,
siemple polarizada
➢ De campo oscuro, por
luz reflejada

• Barrido
• Transmisión.
Partes del microscopio
óptico
 Sistema
mecánico

Sistema óptico Sistema de

iluminación

https://3dwarehouse.sketchup.com/model/6370384abcf226a72
18a519212ed7c98/microscópio?login=true#
Sistéma de
iluminación
Condensador de luz
● Su función es captar
la mayor cantidad
Diafragma
posible de rayos ● Permite regular la
luminosos, que cantidad de luz
proceden del foco que incide sobre la
del microscopio. muestra
 Sistema óptico
Ocular
Objetivos

ACEITE DE INMERSIÓN
 http://ww
w.ncbione
twork.org/
iet/micros
cope/
 Tubo de microscopio

Revolver
Columna o brazo

Platina
Sistéma
mecánico Base o pie

Pinzas
Tornillo macrométrico
y micrométrico
Carro móvil
Tornillos del
carro móvil
 ¿Qué tipo de imagen?

Virtual
aumentada

¿Cómo calcular el
aumento total?
 Enfoque adecuado
Control
1st interpupilar

2nd iluminación

Enfoque de la
3rd placa
Manejo y uso del microscopio óptico
Por su atención
 Bibliografía
● Fuertes, María de los Ángeles Gama. Biologia 1-Sep" un Enfoque Constructivista". Pearson
Educación, 2007.
● Bueno, Juan M. Introducción a la óptica instrumental. EDITUM, 1999.
● Donnersberger, A. B., & Lesak, A. E. (2002). Libro de laboratorio de anatomía y fisiología.
Editorial Paidotribo.
● Rodak, B. F. (2005). Hematología. Fundamentos y Aplicaciones Clínicas. Ed. Médica
Panamericana.
● Arraiza, N., Viguria, P. M., Navarro, J., & Ainciburu, A. (2001). Manual de microscopia. Auxilab,
SL, 2, 1-56.
 Examen
Coprológico I
Análisis macroscópico
Laboratorio de parasitología
 Conocer el proceso y los
parámetros para realizar el 1
examen macroscópico de una 2
muestra de heces.
3
Objetivo
4
 Formación
01.
1
2
de heces 3
4
Digestión
 02.
Examen coprología
1
2

directo 3
4
 Examen coprológico

Capacidad gástrica del Diagnóstico de

intestino infecciones
intestinales 1
causadas por
Identificación de infecciones
virus, bacterias y
causadas por parásitos
hongos.
2
intestinales
3
Análisis Analisis 4
macroscópico microscópico
Obtención de la muestra fecal
Frascos de cierre hermético,
limpios y secos

Se debe llevar cuanto

antes al laboratorio
 Conservación de la muestra fecal
1. Putrefacción
2. Incubación de algunos helmintos

Refrigeración Formol
✓ 3 g en 10 ml de formol
✓ Par de horas o un ✓ Disminuye el mal olor y
día fija los parásitos
✓ 4° C

Reactivo de MIF Reactivo de PVA

✓ Fija los parásitos y
los colorea. ✓ Preservar trofozoítos
✓ Solución madre y y quistes
lugol
 03. 1

Exámen 2
3
macrocópico 4
Consiste

1
2
3
pH ELEMNTOS 4
SOBREAÑADIDOS
 OLOR

1. Dependiendo del microbiota

2. Hábitos alimenticios

https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/17314143/
 ASPECTO
✓ Homogénea
✓ Heterogénea.

pH
COLOR
 Anaranjada
0-5 Meses

Rojo oscuro
Consistencia
Normales, pastosas, blandas
puré o líquidas
Elementos sobreañadidos
Moco o pus Sangre
Parásitos Restos alimenticios

Creatorrea

Amilorrea

Esteatorrea
04.Exámenes
bioquímicos
1
2
3
4
 Determinación
de azucares
reductores
diarrea por infección por
bacterias.
Se utiliza reactivo de
Benedict 1
SUDAN III 2
Sangre oculta Sudan negro
en heces 3

Sustancias que reaccionen 4

con la hemoglobina
Gracias por su atención
Bibliografía
1. Botero, D., & Restrepo, M. (2012). Parasitosis humanas. Corporación para
investigaciones Biológicas CIB.
2. Martinez, E., 2021. Escala Bristol. Agapap.org. Recuperado de:
<http://agapap.org/datos/BRISTOL_Escala.pdf>
3. Garner, C. E., Smith, S., de Lacy Costello, B., White, P., Spencer, R., Probert, C. S., &
Ratcliffem, N. M. (2007). Volatile organic compounds from feces and their potential
for diagnosis of gastrointestinal disease. The FASEB Journal, 21(8), 1675-1688.
4. Irene, I., 2021. Heces, lo que podemos averiguar sobre nosotros a través de ellas.
Cubacas Extracciones. Recuperado de:
<https://www.desatascoscubacas.es/noticias-desatascos/heces-lo-que-podemos-
averiguar-sobre-nosotros-a-traves-de-ellas>
5. Statements, F, 2021. AARP herramienta de salud. Color de las heces. Disponible en:
<https://healthtools.aarp.org/es/health/heces-con-sangre-o-alquitranosas>
 Cuestionario 3

1. Describir el método con reactivo de MIF (mertiolate,

iodo, formol)
2. Describe el método con reactivo PVA (Alcohol
polivinílico)
3. En que consiste la prueba de sangre oculta.
4. Razones por las cuales puede existir pus en las heces.
5. Describa la prueba de azucares reductores en heces.
 Examen
Coprológico II
Análisis microscópico-
elementos normales de
las heces
Laboratorio de parasitología- práctica 4
❖Conocer el proceso de análisis microscópico
de una muestra de heces
❖Familiarizarse con los distintos elementos 1
normales, no patológicos y no parasitarios de
una muestra de heces observada al
microscopio.
2

Objetivos 3
 Frotis
01.
1

fecal 2

3
 SOLUCIONES
Suero fisiológico Lugol

❖ Cloruro de sodio 8.5 g ❖ lodo en cristales 2.5 g

❖ Agua destilada 1000 mL ❖ loduro de potasio 5.0 g
❖ Agua destilada 50.0 mL
✓ Trofozoítos y larvas
móviles
✓ FLORA BACTERIANA ✓ Quistes de protozoos
✓ Glóbulos rojos ✓ Almidón
✓ Leucocitos ✓ Grasas
✓ Cristales de
Charcot‒Leyden
CORRECTO FROTIS
Se debe evitar
MÉTODOS DE CONCENTRACIÓN
❖ Examen físico
❑ Sedimentación
❑ Flotación
❖ Examen fisicoquímico
https://apps.who.int/iris/handle/10665/37331
 02.
Análisis 1

2
microscópico 3
 RESTO DE ALIMENTOS
Almidón

No digerido Bien digerido

+++
RESTO DE ALIMENTOS
Fibras Vegetales

Pelo Vegetal
Fibra de celulosa

Grano de polen
 Fibra Vegetal

Epitelio vegetal
Hongos
 Fibras animales

Fibra muscular sin digerir

Fibras animales
RESTO DE ALIMENTOS
Grasas

Grasas neutras

10x
Lugol
Controversia
¿Un nuevo parásito o grasa?

❖ https://www.scielosp.org/article/rpmesp/2016.v33n3/593-595/#
❖ http://ve.scielo.org/scielo.php?pid=S0075-52222016000100001&script=sci_arttext
Ácidos grasos
Jabones
CRISTALES

Oxalatos de calcio
 CRISTALES

Charcot Leyden Fosfato amorfo

FLORA BACTERIANA
Flora bacteriana
 LEUCOCITOS Y ERITROCITOS

Azul de
metileno
leucocito
Eritrocito
LEVADURA
CELULAS EPITELIALES
ARTEFACTOS

Burbuja de aire
MOCO
 03. 1

2
EJERCICIO
3
Gracias por su atención
 Cuestionario 4

1. Qué diferencia encuentra entre la preparación con

solución salina y la preparación con lugol.
2. Cuales considera que pueden ser algunas de las causas
de error para dar resultados erróneos o poco
satisfactorios.
3. Describa un método de concentración de heces.
 BIBLIOGRAFÍA
1. Botero, D., & Restrepo, M. (2012). Parasitosis
humanas. Corporación para investigaciones
Biológicas CIB.
2. Medios auxiliares para el diagnóstico de las
parasitosis intestinales. Washington, D.C.:
Organización Panamericana de la Salud; 2020.
Licencia: CC BY-NC-SA 3.0 IGO.
3. https://udelar.edu.uy/eduper/wp-
content/uploads/sites/29/2017/09/DEH_17.pdf
Coproparasitario I
Protozoos
intestinales
Rizopodario
Practica #5
 OBJETIVO
Conocer las distintas formas
parasitarias de amebas patógenas y no
patógenas que pueden presentarse en una
muestra de heces observada al
microscopio.
 Clasificación

Rizópodos Flagelos

PROTOZOOS

Ciliados Esporozoarios
 AMEBAS PATÓGENAS
✓ Entamoeba histolityca
✓ Dientamoeba fragilis
❑ Rizopodos: Son ✓ Entamoeba polecki
protistas ✓ Entamoeba moshkovskii
unicelulares
❑ Género: Amoeba NO
PATÓGENAS
✓ Entamoeba dispar
✓ Entamoeba coli
✓ Iodameba butschllii
✓ Endolimax nana
Género Entamoeba

✓ Cariosoma compacto y
pequeño
✓ Cromatina
distribuida por la
parte interna de la
membrana nuclear
 TINCIONES Lugol
Suero fisiológico/ Sin
coloración/ En fresco
 Fijadores
Schaudinn
•Cloruro de mercurio 11.40 g
•Agua destilada 200.0 ml
•Etanol 95% 100.0 ml
PVA
✓ PVA (polvo) 10 g
✓ Etanol 95% 62.5 ml
✓ Cloruro de mercurio, sol.acuosa
saturada 125 ml (ver fijador de
Schaudinn)
✓ Acido acético glacial 10 ml
✓ Glicerina 3 ml
60 min o toda la noche
Tinciones más comunes
Coloración tricromica

https://youtu.be/fM7BhkApjW8
Hematoxilina férrica
Recomendación

✓ Realizar 3 exámenes
en un periodo de 10
días
✓ Trofozoítos: Muestras
líquidas
✓ Quistes: Muestras
sólidas
 Prueba ELISA PCR
Ensayo de inmunoadsorción ❑ Identifica ADN o ARN
ligado a enzima ❑ Más sensibilidad que ELISA

❑ Identifica de antígenos.
 Entamoeba Trofozoíto
histolityca/dispar 20-40 μm

➢ Se debe hacer una

determinación de antígenos
para saber cual de los dos
es, ya que no se diferencia
en el examen fresco
 Quiste
10-15 μm
Entamoeba polecki Entamoeba moshkovskii
Dientamoeba fragilis

● NO tiene quiste
Trofozoíto:
● 6-12μm
● 2 núcleos
● NO se observa en
fresco
● Tiene 4-8 granos de
cromatina
 Entamoeba coli
Quiste
❑ 15-30 μm
❑ MÁS de 4 núcleos, promedio 8.
 Trofozoíto
20-30μm
 Endolimax nana
Quiste
❑ 6-8 μm
❑ 4 núcleos, ovalados o redondos
Trofozoito
❑ 8 a 10 μm
 Iodamoeba butschlii
Quiste ❑ 10 a 12 μm
❑ UN núcleo
❑ Gran vacuola de glucógeno
 Trofozoíto
❑ 12 a 15 μm
Examen macroscópico:
Color: Marrón
Consistencia: Blanda
Aspecto: Homogénea
Sangre: NO
Restos alimenticios: NO
Vermes (parásitos): NO
Examen macroscópico
Color: Marrón
Consistencia: Pastosa
Aspecto: Homogénea
Sangre: NO
Restos alimenticios: NO
Vermes (parásitos): NO
Examen macroscópico:
Color: Café
Consistencia: Blanda
Aspecto: Homogenea
Sangre: NO
Restos alimenticios: NO
Vermes (parásitos): NO
GRACIAS
 CUESTIONARIO

1. Realizar un gráfico de los trofozoítos y quistes de las

amebas vistas en esta practica, se debe considerar el
tamaño e indicar sus partes
 Examen
Coproparasitario II:
FLAGELADOS
Práctica del laboratorio de
parasitología #6
OBJETIVO
Conocer las distintas formas parasitarias
de flagelados patógenos y no
patógenos de una muestra de heces
observada al microscopio.
 CLASIFIACIÓN

Rizópodos Flagelos

PROTOZOOS

Ciliados Esporozoarios
Giardia intestinalis
Patógena
 DIAGNOSTICO

Suero fisiológico, Lugol y tinción tricromica

Muestras en fresco
Recomienda: varios exámenes

En líquido duodenal
 Antígenos en materia
fecal

ELISA

Pruebas rápida/
inmunocromatografía
 Inmunofluorescencia directa

Método inmunológico PCR

 QUISTE Núcleos

✓ Forma ovoide.
✓ Doble membrana
✓ Pared mide: 0,3-0,5 μm
✓ 2 a 4 núcleos
✓ Mide de 8-12 μm de
longitud Pared celular
✓ 7 a 10 μm de ancho

Cuerpos parabasales
Axostilo
 TROFOZOÍTO

✓ Forma piriforme
✓ Mide: 15 μm de
longitud x 7 μm de
ancho
✓ DOS núcleos
✓ 8 Flagelos: 1 par
anterior, 2 pares
laterales y 1 par
posterior
En la escala de Giardia Lamblia
¿Cómo te sientes hoy?
Chilomastix mesnili
NO patógeno
 QUISTE

✓ Piriforme (forma de
limón)
✓ Mide 6 a 9 μm
✓ Un núcleo
✓ Doble membrana
 TROFOZOÍTO

✓ Piriforme
✓ Mide 10 a 15 μm
de largo x 3 a 10
μm ancho
✓ 3 FLAGELOS
anteriores + 1
posterior
Tricomoniasis
T. tenax

T. hominis
Trichomona tenax
Comensal
Diagnóstico

Cavidad bucal

Se asocia en lesiones de la
cavidad bucal y pulmonar

MUESTRAS PRUEBAS

✓ Expectoración ✓ Cultivos.
✓ Por lavado bronquial ✓ Observación
✓ Fluido pleural directa de las
✓ Parénquima muestras.
pulmonar
 TROFOZOÍTO

✓ Forma oval o piriforme

✓ 5 a 16 μm de largo y 6 a 12
μm de diámetro
✓ 5 flagelos: 4 anteriores y 1 en
el borde de la membrana
ondulante.
✓ UN núcleo
Trichomonas hominis
NO patogena
 TROFOZOÍTO

✓ Piriforme u ovalado
✓ 5 a 14μm
✓ 3 a 5 flagelos anteriores y
1 que se extiende por la
membrana ondulante
✓ UN núcleo ovoide
Trichomonas vaginalis
Patógena
 Mujeres: vagina y uretra

DIAGNÓSTICO Hombres: Próstata,

vesícula seminales y uretra

✓ Contacto sexual
✓ Fómites
✓ Durante el parto

MUESTRA PRUEBAS

MUJERES ❑ Cultivos o centrifugación.

✓ Exudado vaginal ❑ Examen directo en fresco.
✓ Orina. ❑ Tinciones hematoxilina
férrica o Giemsa.
HOMBRES ❑ ELISA
✓ Líquido seminal prostático ❑ Inmunofluorescencia
✓ Orina ❑ Test rápidos
✓ Secreción transuretral ❑ PCR
 TROFOZOÍTO
✓ Ovoide o piriforme.
✓ 10 a 30 de longitud y 10 a 18 de
ancho.
✓ 5 flagelos: 4 anteriores y 1 a lo
largo de la membrana
ondulante
EJERCICIOS
SALA 1
SALA 2
SALA 3
SALA 4
SALA 5
 SALA 6

Paciente de 26 años hombre

Muestra: heces diarreicas
Consistencia: líquidas
Color: verde
Olor: fétido
SOH: positivo
Azucares reductores: Positivo
Leucocitos: 4-6
Levadura: +
SALA 7
SALA 8
SALA 9
Great job!
GRACIAS POR SU
ATENCIÓN
TROFOZOÍTO CUESTIONARIO

Parásito Tamaño Forma Movilidad N° de núcleos N° de Otras

flagelos características

Giardia
intestinalis

Chilomastix
mesnili
Trichomona
hominis

Parásito Tamaño Forma N° de núcleos Otras

Quiste características
 Examen
Coproparasitario III:
Ciliados intestinales y
otros protozoarios de
importancia clínica
Práctica # 7
Objetivo
Conocer las distintas formas
parasitarias que se observan al
microscopio de los ciliados y
coccidios intestinales

2
 Clasificación
Rizópodos Flagelos

PROTOZOOS

Ciliados Esporozoarios

3
1
Balantidium coli
Ciliado patógeno
 TROFOZOÍTO

• Ovalado

• 50 a 200 μm de
largo
• 40 a 50 μm de
ancho

• 2 núcleo:

5
 Movilidad

6
 Corte histológico con eosina

Solución salina 40x

7
 QUISTE

▪ Esférico
▪ 40 a 60 μm
de diámetro

8
8
9
9
10
10
“ Coccidiosis humana

Crypstosporidium spp
Cyclospora spp
Isosora spp

11
 Esporozoito

⦁ Complejo apical
Merozoito

⦁ Carecen de medios definidos de

locomoción

GENERALIDADES
12
2
Crypstosporidium
Coccidio patógeno
Crypstosporidium spp
 1:0:4

Pared
gruesa
DIAGNOSTICO
E INFECTACNTE

15
15
DIAGNÓSTICO
⦁ Examen microscópico

Lugol

Suero
fisiológico 16
 Lavar por 2’

Metanol 10’
Fucsina básica: 1 g;
etanol: 10 ml y fenol
al 5%: 90 ml

20’

Lavar por 1’

O verde de malaquita al 5% por 2’ 17

18
19
19
DIAGNÓSTICO

⦁ ELISA

⦁ PCR

⦁ Biopsias

20
OOQUISTE
MADURO
⦁ 4 a 5 μm

100x
Azul de metileno

21
22
3
Cyclospora
cayetanensis
Coccidio patógeno
 (esporoquistes)

1:2:2

(esporozoitos)

Ooquiste inmaduro/NO Ooquiste maduro/Esporulado

esporulado INFECTANTE
DIAGNOSTICO
1 a 2 semanas en el
medio ambiente 24
DIAGNÓSTICO
NO se tiñen con Lugol
⦁ Examen coprológico
Sin calentar
Zienhl-Neelssen Kiyonyoun

⦁ Esporulación (esporoquistes)
1:2:2

Se incuba
(esporozoitos)

Ooquiste
5 a 15 días
maduro
DIAGNÓSTICO
⦁ Microscopio de fluorescencia

la amplificación del
⦁ PCR gen de la pequeña
subunidad del RNA
ribosoma

26
OOQUISTE NO ESPORULADO
⦁ 8 y 10 μm

100x
40x Azul de metileno
Azul de metileno
27
28
3
Isospora belli
Coccidio patógeno
 Oquiste inmaduro Oquiste maduro

Esporoquiste

1:2:4

Esporoblasto

DIAGNOSTICO Esporozoito
INFECTANTE
Esporulación o esporogonia
En el medio dura 1 a 3 días
 DIAGNÓSTICO Se observan más cristales
⦁ Examen coprológico Charcot Leyden
(heces o líquido
Se utiliza ZN
duodenal)

⦁ Diagnostico clínico
diferencialdiferencial

⦁ PCR

31
 23 a 13 um de
longitud y 10 a Ovoide
20 μm de ancho

Esporoblastos

Ooquiste inmaduro o no esporulado

33
33
34
34
35
35
EJERCICIOS DE
IDENTIFIACIÓN
36
 SALA 1

100x

37
SALA 2

38
SALA 3

39
Lente de 100x

SALA 4

40
SALA 5

41
SALA 6

42
SALA 7

43
 SALA 8

100x

44
 SALA 9

100x

45
Thanks!

46
1. Dibuje el quiste y trofozoíto de Balantidium coli. Realice
un gráfico esquemático en donde se visualice el tamaño
relativo.

2. Completar la siguiente tabla

Cryptosporidium spp Cyclospora Isospora spp

Localización

Forma
infectante
Tamaño

Forma
Morfología
Imagen de la
estructura AAR

CUESTIONARIO
Práctica # 7 47
FLEBOTOMÍA
Y FROSTIS
SANGUINEO
Práctica #8 del laboratorio
de parasitología
COMPONENTES
DE LA SANGRE
 Plasma Componente
Ca, Na, K, Mg, H… mayor

55% del
volumen
sanguíneo
Células sanguíneas

1% del volumen
sanguíneo

45% del volumen

sanguíneo
FLEBOTOMIA
Método de extracción sanguíneo
Vena basílica

Existe una piel

fina, las venas
Vena son de calibre
mediana grueso y
cubital relativamente
superficiales

Vena cefálica
 Materiales
Algodón Tubos
Guantes de quirúrgicos

Torniquete Alcohol EDTA

Anticoagulante
 Materiales
Jeringas para extracción
Vacutainer Jeringuillas
Procedimiento 1
Confianza con el
paciente

2
Todo Listo
Procedimiento

3
Colocar el
torniquete

Elegir una vena

4
apropiada
Procedimiento
5
Limpiar

NO pasar por el
mismo lugar 2 veces
Procedimiento 6

Colocar la aguja a 45°

Bisel hacia
arriba
Procedimiento
7
Extraer la
sangre y
quitar el
torniquete

8
Sacar la aguja,
colocando un
algodón en la
zona de punción
 Colocar la sangre en un
tubo
Procedimiento 9
 FROTIS SANGUÍNEO
1 Depositar una
gota de sangre

2
Colocar otro
cubreobjeto a
45°
4 Secar al aire

3 Deslizar
 TINCIÓN DE WRIGHT
Eosina (ácida) Rosa

Es policromática
Azul de metileno
Purpura o lila
(básico)

Solución alcohólica

Solución
amortiguadora o
buffer
PROCEDIMIENTO 1 Colocamos el colorante de 2 a 3 min
PROCEDIMIENTO 2 Colocamos agua destilada SIN que se derrame por 1min
PROCEDIMIENTO 3 Lavamos en forma de cascada y dejamos secar
OBSERVACIÓN AL
MICROSCÓPIO
El objetivo de 100x
 ERITROCITOS
45% del volumen sanguíneo

Más abundante

Transportan la
hemoglobina

Se pintan de
color rosa a
salmón
 Eritrocito normal
Tiene una forma
oval bicóncava
aplanada

Exceso de eritrocitos: Policitemia

Déficit de eritrocitos: Anemia

Destrucción de eritrocitos:
Hemólisis
 Anisocitosis Microcitosis

Alteraciones
del tamaño

Macrocitosis
Alteraciones
en la forma
Esferocitos
Eliptocitos
 Esquistocitos
Dacriocitos
Equinocitos
 Plaquetas
Tienen forma ovalada o redonda

Son pequeñas

Color lila o morado

Contribuir a la coagulación
sanguínea
 LEUCOCITOS

Linfocito Monocito
 NEUTRÓFILO
Leucocito más abundante
50 al 70%

Mide 10 y 15 mm

Tienen un núcleo
multilobulado (2 a 5),
Azul o purpura intenso

Los gránulos son muy

pequeños
Neutrófilo en cayado
 BASÓFILO
Menos abundantes 0 a 1%

Difícil de encontrar

Presente en respuestas
inflamatorias e
hipersensibilidad.

Granulaciones grandes
irregulares (purpura)
cubren el núcleo
 EOSINÓFILO

1 al 3% de los leucocitos

Se multiplican frente a alergias

o infecciones parasitarias

2 lóbulos generalmente

Granulaciones gruesas de
color rosa
LINFOCITOS
Depende de la edad
Al nacer: 30%
Jóvenes: 34%
Adultos: 20 a 40%

Produce anticuerpos
contra las sustancias
extrañas

Posee un solo núcleo

SIN lóbulos (azul o lila)

Son de varios tamaños

MONOCITO

Miden de 15 a 20 mm
Leucocitos más grandes
4 a 10 %

Núcleo en forma de
herradura, oval o redondo
(generalmente doblado)
color azul o lila
 RECUENTO LEUCOCITARIO
● Contar 100 leucocitos
● Comparar con los
valores normales

100 leucocitos=100%

Valores normales:
Neutrófilo: 50-70%
Linfocito: 20-40%
Monocito: 4-10 %
Eosinófilos: 1-3%
Basófilos: 0-1%
 Identificar el estado del
paciente Recuento alto de
granulocitos sanguíneos

Niveles leucocitarios Normales Recuento bajo de

granulocitos sanguíneos
● Granulocitosis
● Granulocitopenia
Recuento alto de linfocitos
● Linfocitosis
● Lifocitopenia Recuento bajo de linfocitos
● Neutrofilia
● Neutropenia Recuento alto de neutrófilos
● Monocitosis Recuento bajo de neutrófilos
● Monocitopenia
Recuento alto de Monocitos

Recuento bajo de monocitos

HemaCount
 CUESTIONARIO
1. Consultar 2 tipos de alteraciones en la forma de los eritrocitos
2. Realizar el siguiente recuento leucocitario

● http://www.ehu.eus/immunologia/cells
/leucocitos/

62 leucocitos
GRACIAS POR
SU ATENCIÓN
Diagnóstico directo
de Leishmania spp.
y Tripanosoma spp.
Práctica 9
 OBJETIVOS
1. Reconocer al microscopio protozoos tisulares del género
Leishmania spp. y Tripanosoma spp.
2. Familiarizarse con las pruebas diagnósticas de laboratorio para la
investigación de Leishmania spp. y Tripanosoma spp.

2
 Tripanosoma spp
Protozoo flagelado con cineotplasto

3
ESTADIOS

4
Heces del
triatoma

Tripomastigote
metaciclico

Entra al organismo humano por la

deyección 5
Entra al organismo
humano por la 2 a 2.5 μm
deyección
6
20 y 25 μm

20 y 25 μm

TRIPOMASTIGOTSE
SANGUINEOS

7 EN EL TRIATOMA
8
 Probóscide

CABEZA

Ojo compuesto Patas

TORAX

ABDOMEN

Hemiélitros
9
 TRIPANOSOMIASIS TRIPANOSOMIASIS
AMERICANA AFRICANA

Enfermedad de Chagas Enfermedad del sueño

Trypanosoma brucei
Tripanosoma cruzi gambiense y Trypanosoma
brucei rhodesiense

insectos triatominos
hematófagos , género Moscas tse-tsé, del género
Rhodnius, Triatoma y Glossina
Panstrongylus

Deyección Mediante la saliva

10
11
12
 DIAGNÓSTICO
Varia de
acuerdo a la
fase clínica

13
 DIRECTOS
Punción con lanceta

✓ FASE AGUDA:
Examen en fresco Parasitemia
✓ FASE CRÓNICA:
Menor sensibilidad

Gota gruesa

✓ Favorece a la
fase crónica

COLOREADO Giemsa

✓ Frotis sanguíneos
✓ Cortes histológicos
✓ Otro tipo de muestras biológicas
14
Giemsa

15
16
 Método de
concentración

Recuento de Evaluar el grado de

tripanosomas parasitosis por 𝑚𝑚3

17
Biopsia

PCR Fase aguda, intermitente y cónica

18
 INDIRECTOS
Xenodiagnóstico

Pican a pacientes sospechosos

Triatoma SANO

Masaje o
con pinzas

19
 SEROLÓGICOS

ELISA

20
Inmunofluorescencia indirecta (IFI)

21
Hemaglutinación
indirecta (HAI)

Si en el suero del paciente existen

anticuerpos contra el antígeno del
parasito, los glóbulos rojos se
aglutinan.
22
PRUEBAS RÁPIDAS

23
 Leishmania spp
Protozoo flagelado con cinetoplasto
ESTADIOS

25
Promastigote
✓ Infectante
✓ 12 y 20 μm

26
27
Amastigote
✓ Intracelular, replicativo
✓ 2.5 a 3.5 μm

28
29
 Vector
Flebótomos hembra
Por
picadura
Lutzomyia spp

Especies
L. donovani L. mexicana L. brziliensis
L. Infantum L. amazonensis L. panamensis
L. chagasi L. venezuelensis L. peruviana
L. equatorensis

30
 Para identificar las
diferentes cepas
Caracterización
isoenzimática

Análisis por DNA del

cinetoplasto

hibridación con sondas

de ADN

Anticuerpos
monoclonales

PCR
31
 DIAGÓSTICO
Toma de
muestra

32
 Observación microscópica

✓ Método directo
✓ Se observa amastigotes

33
Biopsia

Biopsia de médula ósea

✓ Se ven amastigotes

https://iris.paho.org/ha
ndle/10665.2/52645

PCR
34
Cultivo

35
 Intradermorreacción
de Montenegro
1. Método indirecto

2. Inyecta 0,1 ml de
suspensión de
promastigotes
fijados en fenol

3. Evalua el eritema
desde 5 mm o mayor

POSITIVO

36
 Método serológico
inmunofluorescencia indirecta

Hemaglutinación

ELISA

Promastigotes teñidos
de verde
37
Tipomastigote de T. cruzi
38
Amastigote Leshmania spp
39
 CUESTIONARIO

Dibujar todos los estadios morfológicos de Leishmania

spp. y Tripanosoma spp. con sus elementos rotulados
y su señalar su forma diagnóstica en un examen
directo de microscopia.

40
Diagnóstico directo de
Plasmodium spp
Práctica #10
 Objetivos
✓ Reconocer al microscopio protozoos tisulares del
género Plasmodium spp.

✓ Diferenciar al microscopio las distintas especies de

Plamodium spp: P. falciparum, P. vivax, P. ovale, P.
malariae.
Planta nacional del ecuador

cinchona , cascarilla, quina

Quinina Cloroquinina
 VECTOR
Depende de
las condiciones
climáticas

Pican al
anochecer y
amanecer

500 especies,
40 son
importantes
 Anopheles
Anopheles albimanus pseudopunctipennis
CICLO DE VIDA
 DIAGNOSTICO
Examen Recomienda en
periodo febril
microscópico
Destreza y
experiencia

Ciclo eritrocitario Gota gruesa Extensión fina

4 especies principales
que afectan al hombre
Más P. falciparum
común P. vivax
P. ovale
P. malariae
 Gota gruesa Extensión fina

Sangre con 10 a 20 parásitos

anticoagulante o por mililitro Los eritrocitos permanecen intactos
gotas obtenidas después de la fijación y la tinción
por punción.
Se lisan los
eritrocitos Interacción entre los
eritrocitos y el parásito

Se tiñe con Aumenta la posibilidad de

colorante Giemsa detectar infecciones con Parasitemia bajas el examen
parasitemias bajas puede ser negativo

200 campos
NEGATIVO
microscópicos
Gota gruesa
 RECUENTO DE PARÁSITOS
Recuento por mililitro, determinar el concentraciones constantes
grado de infección y seguir la evaluación como 8000 leucocitos/μl
del paciente

Se cuentas leucocitos y
parásitos al mismo tiempo

Se detiene cuando se llega a 100 leucocitos

y se han identificado dos o más parásitos

Si se encuentra 1 parasito,
se debe seguir contando
hasta encontrar 2

Se detiene en 500 leucocitos

10 parásitos en
200 leucocitos 8000 𝑙𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠/𝜇𝐿 40 40 𝑝𝑎𝑟á𝑠𝑖𝑡𝑜𝑠
= 𝑥 10 𝑝𝑎𝑟á𝑠𝑖𝑡𝑜𝑠 = 400
200 𝑙𝑒𝑢𝑐𝑜𝑐𝑖𝑡𝑜𝑠 𝜇𝐿 𝜇𝐿 𝜇𝐿

Fuente: Fox E and GT Strickland. The interrelationship of Plasmodium falciparum and P. vivax in the
Punjab. Transactions of the Royal Society of Tropical M edicine and Hygiene 1989; 83: 471-3.

40 parásitos en 100
leucocitos 3200 parásitos/ 𝜇𝐿 de sangre.
 Prueba de diagnóstico rápido (PDR)
Detectan: HRP2 (P. falciparum), pLDH
(todos los Plasmodium spp.)

Tiempo: según las instrucciones

de las instrucciones

Desempeño:
• Puntaje de detección ≥75% para las dos
especies en bajas parasitemias.
• Tasa de falsos positivos: <10%
• Tasa de resultados inválidos: <5%
 técnica fluorescente:
Fluorocromo naranja Tiene una sensibilidad
de acridina que tiñe de 88% -98% y
los ácidos nucleicos especificidad 58 a 90%

Sensibilidad y especificidad
PCR del 100%

reacción serológica
Inmunofluorescencia directa, Elisa,
FAST-ELISA y hemaglutinación
indirecta.
Parasito P. vivax P. falciparum P. malariae P. ovale

Agrandado, Normal, rara vez Normal o Agrandado,

redondo u ovalado, se observan disminuido, redondo u
Eritrocito puede estar granulaciones de ocasionalmente se ovalado, algunos
Distorsionado. Maurer observan fimbriados,
A menudo se granulaciones de granulaciones de
observa Zieman Jame
granulaciones de
Schuffner
 Parasito P. vivax P. falciparum P. malariae P. ovale

Trofozoítos jóvenes y
Estadios que Todos los estadios gametocitos. Todos los estadios. Todos los
se puede En infecciones estadios.
observar en severas: trofozoítos
sangre maduros y
periférica esquizontes.
Trofozoíto maduro: Trofozoítos maduros: Trofozoíto maduro:
citoplasma del con Citoplasma como un citoplasma con una Tinte amarillo en
una coloración que tinte amarillo. coloración que varía el citoplasma.
Pigmento varía del amarillo a Esquizontes: se del amarillo al negro. En las formas
malárico. café. agrupa formando una Gametocito: maduras, puede
Gametocito: finas masa negra. abundante y formar una masa
granulaciones Gametocitos: disperso, color única de color
oscuras dispersas en bastones gruesos, de amarillo café oscuro.
el citoplasma color café oscuro a Esquizonte: Una
Esquizonte: Una negro rodeando la sola masa de color
sola masa de color cromatina café.
café oscuro
Esquizontes
Trofozoíto inmaduro, joven o en forma de anillo
P. vivax P. falciparum
 Trofozoíto maduro

infecciones
severas
Trofozoíto maduro
Trofozoíto maduro
 Esquizontes

infecciones
severas
 Merozoito

Miden 1,5 u de longitud y 1u

de diámetro
Gametocitos
P. falciparum
P. vivax
P. ovale P. malariae
 Fotos para comparar
https://www.cdc.gov/dpdx/resources/pdf/benchAids/malaria/
P. falciparum Pfalciparum_benchaidV2.pdf

https://www.cdc.gov/dpdx/resources/pdf/benchAids/malaria/
P. vivax Pvivax_benchaidV2.pdf

P. ovale https://www.cdc.gov/dpdx/resources/pdf/benchAids/malaria/
Povale_benchaidV2.pdf

P. malariae https://www.cdc.gov/dpdx/resources/pdf/benchAids/malaria/
Pmalariae_benchaidV2.pdf

https://game.malariaspot.org
IDENTIFICACIÓN
Grupo 1
Grupo 2
 Grupo 3

RESULTADOS
 Grupo 4
RESULTADOS
Grupo 5
RESULTADOS

Grupo 6
Grupo 7
Grupo 8
Grupo 9
 Cuestionario #8
1. ¿Cuál de las siguientes técnicas es más eficaz para el
diagnóstico de la malaria: gota gruesa o extendido (frotis de
sangre periférica)? Justifique su respuesta (máximo 5 líneas).
2. Dibujar los principales estadios de P. vivax y P. falciparum
durante el ciclo eritrocítico.
OBJETIVOS
 PLATELMINTOS

CESTODOS TREMATODOS

En forma de cinta En forma de hoja

SIN aparato digestivo Aparato digestivo muy

Pero con aparato reproductor muy rudimentario.
desarrollado
Cuerpo segmentado Cuerpo NO segmentado

•Céstodos grandes: Taenia solium, • Schístosoma son: S. mansoni, S.

Taenia saginata y Diphyüobothrium latum. haematobium y S. japonícum.
•Céstodos medianos y pequeños: • Fasciola hepática
Hymenolepis nana, Hymenolepis diminuta • Paragonimus westermani
y Dipylidium caninum
 01
Platelmintos
CESTODOS
 Taenia solium
Tamaño: Cabeza
de alfiler: 1-2 mm
de diámetro

4 ventosas y un
rostelo (Coronas
Longitud: hasta 5 m de gancho)

Diagnostico
Sumamente raro encontrarla en
una observación macroscópica
 Taenia saginata

4 ventosas y SIN
rostelo, ni
ganchos.

Longitud: hasta 10 m

Diagnostico
Sumamente raro encontrarla en
una observación macroscópica
Taenia solium Taenia saginata

Hasta 1000 proglótides Hasta 2000 proglótides

Diagnostico Observación
macroscópica
Tinta china: 5-13 ramas Tinta china: 15-30 ramas
uterinas en aspecto dendrítico. uterinas en aspecto dicotómico.

Proglótides grávidos Proglótides grávidos

de T. solium de T. saginata
Diagnostico Observación
microscópica Huevos

NO SE puede ✓ 30 a 40 μ de diámetro
distinguir el ✓ Doble membrana
tipo de Taenia gruesa.
Hexacanto
u oncosfera
Cisticercosis

Larvas enquistadas: libera la

oncosfera
 Hymenolepis nana
Tamaño:
300 μm

4 ventosas y un
rostelo protráctil y
retráctil y corona
Longitud: 2 a 6 cm de ganchos

Diagnostico: NO
frecuente
 Hymenolepis diminuta

4 ventosas y un
rostelo, SIN
Longitud: 20 a 60 cm ganchos

Diagnostico: NO
frecuente
Hymenolepis
200 proglótides Hymenolepis
nana
diminuta
Diagnostico
OVALADO REDONDO

40 a 50 μm 60 a 50 μm

Blancos o transparentes Amarillos

Hymenolepis
diminuta
Hymenolepis
diminuta
Hymenolepis
nana
 Dipylidium caninum

4 ventosas y un
Longitud: 20 a 65 rostelo retráctil,
cm con varios
ganchos

Diagnostico: NO
frecuente
 proglótide son más largos
grávidos que anchos
✓ Poro genital bilateral
✓ Doble órganos
reproductores
 Cápsula ovígera

25 a 40 μm
 ?
¿
 ?
¿
 02
Platelmintos
TREMATODOS
Forma adulta
 Fasciola hepática 150 μ de
longitud

Diagnostico
Huevos en heces, bilis o
contenido de duodeno Tiene color café
 Parásito
adulto

Mide 3 cm
 Paragonimus westermani

Diagnostico
Expectoración y
materia fecal
1 a 2 cm de longitud
y 0,5 cm de ancho
 Schistosomas
Los adultos machos
miden 6-12 mm

Las hembras
miden de 7 a 17
mm
Técnica del Kato-Katz
 Orina Schistosoma
mansoni

Schistosoma
japunicum

Schistosoma
hematobium
Materia fecal
 ?
¿
OBJETIVOS
 Sexos
separados

pseudocela

Sistema digestivo completo,

aparato reproductor muy
desarrollado
Fase adulta
Ascaris lumbricoides

20 a 30 cm

15 a 20 cm

Diagnostico
Huevo fecundado

60 μm
Decorticado
Huevo fecundado
(eclosión)
 Huevo NO fecundado

85 a 90 μm de longitud
por 30 a 40 μm de ancho
 Trichuris trichiura
Fase adulta Macho

3 a 4,5 cm
Fase adulta Trichuris trichiura
Hembra

3,5 a 5 cm
 Huevos de Trichuris trichiura
20-25 μm de
ancho y 50 μm
de largo

Tapón
mucoso
Cigoto

Membrana Membrana
interna externa
 Macho
Ancylostoma
duodenale
8 a 11 mm
Uncinaria
de longitud,
0.4 a 0.5 mm Necator americanus
de diámetro 10 a 13 mm de
longitud por 0.4
mm de diámetro

Necator
americanus
7 a 9 mm de Ancylostoma
duodenale
largo por 0.3 10 a 13 mm
mm de de largo por
diámetro 0.6 mm de
diámetro

Hembra
 Huevos de Uncinaria
60 a 40 μm
Strongyloides stercoralis
Hallar larvas
rabdiformes en
la materia fecal

2 mm de
largo x 50 μ
de diámetro
250 μ de longitud
por 15 μ de
diámetro
 Enterobius vermicularis
1 cm de
largo

0,5 cm de
largo

Macho

Hembra
Método de Graham

Encontramos
huevos
Huevos de Enterobius vermicularis
 ?
¿
 ?
¿
 ?

¿
Cuestionario