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CENTRO DE BACHILLERATO

TECNOLOGICO
industrial y de servicios No. 13

ESPECIALIDAD: LABORATORISTA CLINICO

MANUAL DE PRACTICAS: REALIZA ANALISIS HEMATOLOGICOS

DE SERIE ROJA

QC. MILADY MORENO GARCIA1

FEBRERO – JULIO 2023

Competencia a desarrollar: CD4.- Lleva a la práctica procesos de enseñanza aprendizaje de manera


efectiva, creativa e innovadora a su contexto institucional.
Competencia a desarrollar: CD2.- Domina y estructura los saberes para facilitar experiencias de aprendizaje
significativo. Competencia a desarrollar: CD6.- Construye ambientes para el aprendizaje autónomo y
colaborativo.

CP1 Realizar operaciones básicas de laboratorio clínico (NOM-007-SSA3-2011).


CP2 Aplicar los procedimientos para el manejo de reactivos, materiales y equipos de laboratorio (ISO-
1589:2003).
CP3 Procesar muestras biológicas con técnicas cuantitativas.
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íNDICE

INTRODUCCION
3
GENERALIDADES
4

PRACTICA 1 Reconocimiento de células rojas.


14
PRACTICA 2 Cuantificación de hemoglobina
18
PRACTICA 3 Determinación de hematocrito
21
PRACTICA 4 Recuento total de eritrocitos
23
PRACTICA 5 Cálculos de los índices eritrocitarios
26
PRACTICA 6 Determinación de la velocidad de sedimentación globular
27
PRACTICA 7 Identificación de reticulocitos
28

CONCLUSIONES
35

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INTRODUCCION

El submódulo realiza análisis hematológicos de serie roja se tiene que ver desde un punto de vista
teórico – practico para lograr un técnico que emita resultados confiables.

Para conseguir lo anterior se requiere que el estudiante este bien capacitado y que comprenda su
papel. el adiestramiento consiste en el conocimiento y aplicación de las técnicas y el reconocimiento
morfológico y funcional de los elementos de la sangre y del plasma, con esto se logra optimizar
reactivos y usar correctamente los aparatos y materiales que posteriormente permitan emitir
resultados claros y precisos.

Para proyectar al alumno hacia el dominio de este submodulo profesional se fomentara su


habilidad y destreza en el manejo de equipo y material de laboratorio mediante la ejecución de
practicas, para que posteriormente pueda integrarse en el campo laboral, en el sector salud publico
o privado, o continuar en el enriquecimiento de los mismos en estudios superiores en el área de
salud.

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PRACTICA 12

RECONOCIMIENTO DE CÉLULAS ROJAS EN


UN FROTIS TEÑIDO CON WRIGHT

INTRODUCCION:

Un examen de extendido en sangre periférica es parte del hemograma y representa el análisis morfológico de

los elementos celulares de la sangre. Constituye un examen rutinario que cuando es debidamente interpretado

tiene una enorme utilidad diagnóstica para el médico y puede considerarse el paso más importante en la

identificación del mecanismo responsable de una anemia.

MATERIAL

Portaobjetos

Pipeta pasteur con bulbo

TECNICA:

I. Para hacer un frotis sanguíneo realiza los siguientes pasos

1. Coloca en un extremo de un portaobjetos con ayuda de una pipeta Pasteur una pequeña gota de sangre

de dos a tres mm de diámetro, el tamaño de la gota es muy importante, ya que, si es demasiado grande

crea un frotis largo y grueso, por el contrario, si es demasiado pequeña el extendido será corto y muy

delgado.

CG4 Escucha, interpreta y emite mensajes pertinentes en distintos contextos mediante la utilización de medios, códigos y
herramientas apropiadas.
CG5 Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.

CP1 Realizar operaciones básicas de laboratorio clínico (NOM-007-SSA3-2011).


CP2 Aplicar los procedimientos para el manejo de reactivos, materiales y equipos de laboratorio (ISO-1589:2003).
CP3 Procesar muestras biológicas con técnicas cuantitativas.

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2. Sostén con la mano dominante otro portaobjetos (extensor) en ángulo de treinta a cuarenta y cinco

grados y llévalo hacia atrás hasta tocar la gota de sangre, dejando que ésta por capilaridad se esparza en

todo lo ancho del portaobjetos.

3. Empuja con rapidez y suavidad hacia delante hasta el final del portaobjetos para crear el extendido. Es

importante que toda la gota se incluya en el extendido.

4. Seca rápidamente con el aire el extendido tal como se muestra en la siguiente figura

Técnica para realiza un frotis sanguíneo.

II. Para teñir un frotis sanguíneo con la técnica de Wright realiza los siguientes pasos

1. Coloca sobre un puente de tinción el extendido sanguíneo.

2. Cubre toda la extensión del frotis con unas gotas de colorante de Wright, no deberá derramarse por

los bordes, evita la desecación y deja actuar por tres minutos.

3. Cubre todo el frotis con el amortiguador de Wright, espera la formación de brillo metálico (puede

usarse agua destilada), dejar actuar por diez minutos.

4. Lava con agua corriente la preparación, hasta que se arrastre todo el colorante.

5. Limpia el dorso del portaobjetos con una gasa o algodón humedecido en alcohol para eliminar el

resto de colorante.

6. Toma el frotis por el extremo y sécalo aireándolo.

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7. Observa el frotis al microscopio con los objetivos: seco débil, seco fuerte e inmersión.

8. Anota tus resultados en el reporte correspondiente.

VALORES DE REFERENCIA:

Valor de Anormalidades de forma Anormalidades de tamaño Anormalidades de color


referencia

Hipocromia
Esferocito

Macrocito

Hipercromia
Eliptocito

Microcito

Punteado
basófilo
Anisocitosis
Crenocito

de Howell
Crenocito

Cuerpos
Normocito

– Jolly
Dianocito

Anisocromia
Drepanocito
crenocito

Poiquilocitosis

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INTERPRETACION CLINICA:
Anota por lo menos 2 cusas de cada anormalidad
Valor de referencia Anormalidades
Esferocitocis
Eliptocitocis

Normocito Crenocitos

Forma Dianocito
Drepanocito
Poiquilocitocis
Macrocito

Tamaño Microcito
Anisocitocis
Hipocromia
Punteado

Color basofilo
Cuerpos de
Howell-Jolly

REPORTE DE RESULTADOS.- RECONOCIMIENTO DE CELULAS ROJAS


EN UN FROTIS SANGUÍNEO TEÑIDO CON WRIGHT

Nombre del paciente: Fecha:


Análisis Valor de Resultado
referencia SELLO

Evaluación de células rojas Normocito


en un frotis sanguíneo

Realizó:

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PRACTICA 23

CUANTIFICACION DE HEMOGLOBINA

INTRODUCCION:

El elemento más importante en el eritrocito es la hemoglobina. la parte proteínica se llama globina; es incolora
y consta de cuatro cadenas peptídicas forman asas complicadas. en la molécula de hemoglobina, el grupo heme
esta rodeado por dos pares de cadenas polipeptidicas. la hemoglobina normal del adulto (HbA) tiene dos pares
de cadenas alfa y beta. la cadena alfa posee 141 aminoácidos, en un orden bien conocido, que empiezan con la
valina y terminan con arginina. la cadena beta posee 146 aminoácidos; también hay valina en un extremo pero
histidina en otro.

MATERIAL:
4 tubos de ensaye de 13 x100
1 pipeta serológica de 5ml.
1 gradilla
1 pipeta de Sahli con boquilla
celdas de reacción

CG4 Escucha, interpreta y emite mensajes pertinentes en distintos contextos mediante la utilización de medios, códigos y
herramientas apropiadas.
CG5 Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.

CP1 Realizar operaciones básicas de laboratorio clínico (NOM-007-SSA3-2011).


CP2 Aplicar los procedimientos para el manejo de reactivos, materiales y equipos de laboratorio (ISO-1589:2003).
CP3 Procesar muestras biológicas con técnicas cuantitativas.

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TECNICA

1. Conecta el aparato de medición (espectrofotómetro, fotómetro o colorímetro) 30 minutos antes de realizar

las mediciones analíticas.

2. Homogeniza la sangre a través de métodos automatizados (rotación o rodillos) o por métodos manuales

(inversión), por lo menos 3 minutos.

3. Etiqueta como blanco, muestra y patrón tres tubos de ensaye de 13 X100.

4. Mide exactamente con una pipeta serológica o con una propipeta 5 ml de solución de Drabkin

(cianometa).

5. Añade exactamente mediante una pipeta de Shali o una pipeta automática, 0.02 ml (20 µL) de sangre

total homogenizada. Si estas utilizando una pipeta de Shali, asegúrate de aforarla a la marca 0.02, de

limpiarla por la parte exterior y de eliminar por enjuague la sangre que se pueda adherir a las paredes internas

del capilar de la pipeta. En caso de emplear una pipeta automática, debes limpiar la parte exterior de la

puntilla.

6. Mezcla los tubos problema y patrón por inversión (4 o 5 veces), y déjalos reposar por espacio de 5

minutos.

7. Mide la absorbancia del patrón y de la muestra a 540 nm llevando el aparato a cero con blanco de reactivo.

8. Realiza tus cálculos y anota tus resultados en el reporte correspondiente.

VALORES DE REFERENCIA:

Hombres 14 – 18 g/dl
Mujeres 12 –16 g/dl

INTERPRETACION CLINICA:
VALORES AUMENTADOS VALORES DISMINUIDOS

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REPORTE DE RESULTADOS.- CUANTIFICACION DE HEMOGLOBINA

Nombre del paciente: Fecha:

Análisis Valor de Cálculos Resultado


referencia SELLO

Hombres
Cuantificación 14 – 18 g/dl
de hemoglobina
Mujeres
12 –16 g/dl Realizó:

Nombre del paciente: Fecha:

Análisis Valor de Cálculos Resultado


referencia SELLO

Hombres
Cuantificación 14 – 18 g/dl
de hemoglobina
Mujeres
12 –16 g/dl Realizó:

Nombre del paciente: Fecha:

Análisis Valor de Cálculos Resultado


referencia SELLO

Hombres
Cuantificación 14 – 18 g/dl
de hemoglobina
Mujeres
12 –16 g/dl Realizó:

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PRACTICA 34
DETERMINACION DE HEMATOCRITO

INTRODUCCION:
El hematocrito de una muestra de sangre es la relación del volumen de eritrocitos con el de sangre total. Existen
micro y macro métodos para la determinación de hto., esta determinación es mucho mas útil y de confianza que
el recuento de eritrocitos. asimismo por medio de él; así como por medio de una medición de hemoglobina y
recuento eritrocitario adecuados pueden ser calculados los índices absolutos. Además la columna de células
blancas resultantes, proporciona una idea aproximada del recuento de leucocitos, es decir, una columna células
blancas de 1 mm de altura corresponde aproximadamente a 10 000 leucocitos por mm3 aunque los leucocitos
cuando se encuentran por encima de estas cifras tienen a concentrarse mas.

MATERIAL
Tubos capilares sin heparina

TECNICA

1. Llenar el tubo capilar hasta tres cuartas partes de su capacidad (aproximadamente 50 µL), el

llenado se realiza por capilaridad, así que deberás inclinarlo hacia abajo a medida que se va

llenando.

2. Limpiar con papel secante el extremo a través del cual se llenó el capilar.

3. Sellar el capilar por el extremo contrario al que ha entrado la sangre, con plastilina o con la

llama del mechero de bunsen.

CG4 Escucha, interpreta y emite mensajes pertinentes en distintos contextos mediante la utilización de medios, códigos y
herramientas apropiadas.
CG5 Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.

CP1 Realizar operaciones básicas de laboratorio clínico (NOM-007-SSA3-2011).


CP2 Aplicar los procedimientos para el manejo de reactivos, materiales y equipos de laboratorio (ISO-1589:2003).
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4. Centrifugar a 12,000 – 15,000 rpm, por 5 minutos a 40 ºC con el extremo sellado dirigido hacia

fuera, asegúrate de equilibrar perfectamente la microcentrifuga.

5. Realiza tus cálculos tal como se muestra a continuación

VALORES DE REFERENCIA

Valor de referencia
Hombres 42 – 52 %
Mujeres 37 – 47 %

INTERPRETACION CLINICA:

VALORES AUMENTADOS VALORES DISMINUIDOS

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REPORTE DE RESULTADOS. - DETERMINACION DE HEMATOCRITO

Nombre del paciente: Fecha:


Análisis Valor de Cálculos Resultado
referencia SELLO

Determinación de Hombres
hematocrito 42 – 52 %
Realizó:
Mujeres
37 – 47 %

Nombre del paciente: Fecha:


Análisis Valor de Cálculos Resultado
referencia SELLO

Determinación de Hombres
hematocrito 42 – 52 %
Realizó:
Mujeres
37 – 47 %

Nombre del paciente: Fecha:


Análisis Valor de Cálculos Resultado
referencia SELLO

Determinación de Hombres
hematocrito 42 – 52 %
Realizó:
Mujeres
37 – 47 %

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PRACTICA 45
RECUENTO TOTAL DE ERITROCITOS

INTRODUCCION
El recuento de eritrocitos preciso permite el cálculo del volumen corpuscular medio (VCM) y la hemoglobina
corpuscular media (HCM); la importancia clínica de los resultados se basa en la clasificación de la anemia, la
confirmación del diagnóstico de policitemia y de eritroleucemia.

MATERIAL
Tubos de ensaye
Pipeta de Thoma para glóbulos rojos
Cámara de Neubauer con cubrehematímetro
Boquilla
Pipeta serológica de 2 ml.

TECNICA
Recuento de eritrocitos de forma manual en cámara de Neubauer.

1. Realiza una dilución de la muestra de sangre, puedes hacerla hasta la marca 0.5 (dilución 1:200) o hasta

la marca 1 (dilución 1:100), utilizando una boquilla y una pipeta para glóbulos rojos, aspira la sangre hasta

la marca y la punta con gasa o papel absorbente; si la sangre se pasa de la marca, se puede absorber con

gasa el excedente.

2. Aspira el líquido diluyente hasta la marca 101, con ello se obtiene la dilución deseada.

3. Agita de 2 a 3 minutos la pipeta sellada con papel parafilm por ambos extremos haciendo girar la cuenta

en su interior, este procedimiento puede ser manual o con la ayuda de un agitador mecánico.

4. Se desechan las dos primeras gotas y se carga una cámara de Neubauer.

CG4 Escucha, interpreta y emite mensajes pertinentes en distintos contextos mediante la utilización de medios, códigos y
herramientas apropiadas.
CG5 Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.

CP1 Realizar operaciones básicas de laboratorio clínico (NOM-007-SSA3-2011).


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CP3 Procesar muestras biológicas con técnicas cuantitativas.

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6. Se coloca la cámara de Neubauer en el microscopio óptico y ubica la zona para el recuento de eritrocitos

con el objetivo de 40 X, puedes apoyarte de la siguiente figura.

7. Cuenta los eritrocitos presentes en los cuadros de los extremos y en el central, cinco cuadros con

16 cuadros pequeños para hacer un total 80, y realiza el siguiente cálculo:

N° de hematíes x mm3 = Hematíes contados en 80 cuadros x 10 000

VALORES DE REFERENCIA:

Valores normales Hombres Mujeres

Eritrocitos 4,5-5,6 mill./µl 4,2-5,4 mill./µl

INTERPRETACION CLINICA:

VALORES AUMENTADOS VALORES DISMINUIDOS

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REPORTE DE RESULTADOS. - RECUENTO TOTAL DE ERITROCITOS

Nombre del paciente: Fecha:


Análisis Valor de Cálculo Resultado
referencia SELLO
Hombres
Recuento 4,5-5,6 mill./µl
Total de
eritrocitos Mujeres
4,2-5,4 mill./µl
Realizó:

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PRACTICA 5
CALCULO DE INDICES ERITROCITARIOS

INTRODUCCION
Wintrobe introdujo los cálculos para la determinación del tamaño contenido y concentración
de hb. en los glóbulos rojos; estos índices de los eritrocitos han resultado útiles para la
caracterización morfológica de las anemias y pueden calcularse a partir del recuento de
glóbulos rojos, de la concentración de hb. y el hto.

Volumen corpuscular medio (vcm):


Es el volumen medio de los eritrocitos y se calcula a partir del hto. y del numero de
eritrocitos:
VCM = hto. ÷ num. de eritrocitos x 10

Hemoglobina corpuscular media:


La HCM es el contenido (peso) de Hb. en el promedio de eritrocitos; se calcula a partir de la
concentración de Hb. y el recuento de eritrocitos:
HCM = Hb. ÷ num. de eritrocitos x 10

Concentración corpuscular media de hemoglobina:


La CMHC es la concentración media de hb. en el volumen determinado de concentrado de
eritrocitos. se calcula a partir de la concentración de Hb. y del Hto.
CMHC = Hb ÷ Hto. x 10

INTERPRETACION CLINICA

Índice VR A N-N A MICRO-H A MACRO-N


Hb
Hto
Num.eritrocitos
VCM
HCM
CMHC

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REPORTE DE RESULTADOS. - CALCULO DE INDICES ERITROCITARIOS

Nombre del paciente: Fecha:


Índices Valor de Cálculo Resultado
eritrocitarios referencia
VCM
HCM
CMHC

SELLO Realizó:

Nombre del paciente: Fecha:


Índices Valor de Cálculo Resultado
eritrocitarios referencia
VCM
HCM
CMHC

SELLO Realizó:

Nombre del paciente: Fecha:


Índices Valor de Cálculo Resultado
eritrocitarios referencia
VCM
HCM
CMHC

SELLO Realizó:

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PRACTICA 6
DETERMINACION DE LA VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR

INTRODUCCION
La determinación de la velocidad de sedimentación globular (VSG) es una técnica no muy sensible e
inespecífica, por sí sola tiene poco valor y se debe asociar a otros análisis para poder orientar el diagnóstico. En
la actualidad no existe un método de referencia para la determinación de la VSG, habitualmente se emplean dos
procedimientos

MATERIAL
Tubos de Wintrobe
Gradilla de Wintrobe
Pipeta pasteur de talle largo con bulbo

TECNICA

1. Llena con la ayuda de una pipeta Pasteur el tubo hasta la marca 10, presiona el bulbo al mismo tiempo

que retiras la pipeta, procura que no existan burbujas en la columna, en caso contrario, repite la

operación tantas veces sea necesario.

2. Coloca el tubo en una gradilla de Wintrobe y mantenlo en posición vertical durante una hora.

3. Después de ese tiempo leer el descenso de los eritrocitos.

4. Reporta tus resultados

VALORES DE REFERENCIA

Valor de referencia
Hombres 3-15 mm
Mujeres 6-20 mm

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INTERPRETACION CLINICA:

VALORES AUMENTADOS VALORES DISMINUIDOS

REPORTE DE RESULTADOS. - DETERMINACION DE VELOCIDAD DE


SEDIMENTACION GLOBULAR

Nombre del paciente: Fecha:


Análisis Valor de Resultado
referencia SELLO

Hombres
Determinación de la 3-15 mm
VSG Mujeres
6-20 mm
Realizó:

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PRACTICA 76
IDENTIFICACION DE RETICULOCITOS

INTRODUCCION
La identificación de reticulocitos reporta datos sobre la eficacia de la eritropoyesis en la médula ósea, nos
permite conocer su capacidad reactiva y orientar el origen de la anemia, cuando existe reticulocitosis (aumento
en el número de reticulocitos en sangre periférica), consideramos que hay una buena respuesta medular, por lo
que en caso de presentarse la anemia será regenerativa; por el contrario si se observa reticulopenia (reticulocitos
con valores bajos en sangre periférica), se trata de una anemia hiporregenerativa.

MATERIAL
Tubo de ensaye
Pipeta pasteur con bulbo
Gradilla
Portaobjetos

TECNICA

Tinción de reticulocitos

1. Coloca en un tubo de ensayo, 3 gotas de colorante azul de cresil brillante y otras 3 gotas de sangre

total previamente homogenizada, si lo prefieres lo puedes hacer con pipetas automáticas respetando

la proporción 1:1.

2. Mezcla suavemente y cubre con papel parafilm.

CG4 Escucha, interpreta y emite mensajes pertinentes en distintos contextos mediante la utilización de medios, códigos y
herramientas apropiadas.
CG5 Desarrolla innovaciones y propone soluciones a problemas a partir de métodos establecidos.

CP1 Realizar operaciones básicas de laboratorio clínico (NOM-007-SSA3-2011).


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3. Incuba en baño maría a 37 ºC por 15 minutos.

4. Homogeniza suavemente la suspensión, toma una gota y realiza un extendido.

5. Deja secar al aire el extendido, coloca una gota de aceite de inmersión y obsérvalo con el

microscopio óptico con el objetivo de inmersión.

6. Reporta tus resultados.

VALORES DE REFERENCIA

El rango normal en adultos y niños es de 0,2 a 2%, en el recién nacido, los valores de referencia oscilan entre
2-6%.

INTERPRETACION CLINICA:

VALORES AUMENTADOS VALORES DISMINUIDOS

REPORTE DE RESULTADOS.- IDENTIFICACION DE RETICULOCITOS

Nombre del paciente: Fecha:


Análisis Valor de Cálculos Resultado
referencia SELLO
Identificación de

Reticulocitos Corregidos(%)
reticulocitos

Reticulocitos Pacientes (%) x Hto del Paciente


Hto Normal para el paciente

Realizó:

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CONCLUSIONES:

En el área de hematología se realizan estudios cualitativos, cuantitativos y morfológicos. En esta área, el


hemograma o cuadro hemático es una de las pruebas más solicitadas y realizadas, la alta frecuencia con la que
se solicita y se realiza este estudio, hace olvidar en ocasiones la gran cantidad de información que se puede
obtener de él, las determinaciones cuantitativas obtenidas en una biometría hemática son:

• Hemoglobina en g/dL (Hb),


• Hematócrito (Ht);
• Núm. de eritrocitos/µL,
• Volumen globular medio (VGM) en fl,
• Concentración media de hemoglobina corpuscular (CMHC) en (g de Hb) /dL de eritrocitos),
• Hemoglobina corpuscular media (HCM) en pg de Hb/eritrocito,
• % de reticulocitos y núm. absoluto de reticulocitos /µL,
• Núm. de leucocitos totales/µL,
• % y núm. absoluto de cada tipo de leucocito/µL y
• Núm. de plaquetas/µL.

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