Regulación

de la
expresión
genética
La TRANSCRIPCION es la síntesis de RNA dirigida por DNA. Síntesis de
una molécula de RNA, cuya secuencia es complementaria a la cadena
templete de una molécula de DNA.

3’ 5’

5’ 3’

TRADUCCION:
Es la síntesis de
un polipéptido
dirigida por un
RNA
 RNA polimerasa bacteriana
En bacterias una sola RNA pol se encarga de toda la transcripción.
El complejo core y el factor sigma se le llama holoenzima.

Factor sigma: Es la subunidad de la RNA pol bacteriana que

reconoce al promotor e inicia la transcripción . Este factor es
usado por la RNA pol bacteriana para reconocer al promotor .
Diferentes factores sigma regulan la expresión de genes por
reconocimiento de distintos promotores.
Enzimas encargadas de la Transcripción:

RNA polimerasas dependientes de DNA ó simplemente RNA

polimerasas (Eucariontes o procariontes)
FUNCIÓN: Ensamblan una cadena de nucleótidos cuya secuencia es
complementaria a una de las cadenas de DNA que le sirve de plantilla.
CARACTERISTICAS GENERALES: Asociación de la polimerasa con la
plantilla de DNA (interacción de proteínas y ácidos nucléicos), en la región
del promotor.
•La polimerasa cataliza la reacción: RNAn + NPPP→RNAn+1 + PPi
(2Pi), puede incorporar unos 50 nucleótidos/segundo a una molécula
de RNA en crecimiento
•La polimerasa se desplaza en dirección 3’ a 5’ a lo largo de la
plantilla, al mismo tiempo que va formando la cadena complementaria
antiparalela de RNA.
•La cadena de RNA crece desde su extremo 5’ en dirección 3’
hasta finalizar la transcripción de su gen respectivo.
HOLOENZIMA; término que se usa para describir al complejo de la RNA pol
solo cuando se encuentra asociado el factor sigma se asocia con el factor
core.
El factor sigma es liberado una vez que la transcripción ha iniciado y
solamente el núcleo de la enzima continúa polimerizando el transcrito de RNA.
CAJA PRIBNOW: Ayuda a identificar las secuencias de DNA requeridas para la
función del promotor, regiones adyacentes a muchos genes pueden ser
comparadas por similitudes.
Principios de la regulación
genética
Promotores y sus secuencias consenso:
Las secuencias que flanquean a los sitios de inicio de la transcripción pueden
ser alineadas y comparadas para identificar las secuencias de reconocimiento
de la RNA polimerasa.
Una RNA polimerasa en acción (Procariontes): La RNA pol se une al DNA y una
vez que localiza la secuencia promotora, el reconocimiento es a través de la
subunidad sigma. El DNA se desenrolla para formar el complejo abierto y pueda
iniciar la transcripción.
ALARGAMIENTO DURANTE LA TRANSCRIPCIÓN
El inicio de la transcripción está regulado por proteínas
que se unen a los promotores o cerca de ellos: Cambios
afinidad
3 proteínas que regulan la transcripción:
•Factores de especificidad: especificidad por un promotor
• Factor s70: Reconocimiento y unión
• Factor s32: Bacterias, estrés por calor, otros consenso (HSPs)
•Represores: Impiden el acceso de RNA pol al promotor
•Activadores: Aumentan interacción RNA pol-Promotor
TRANSCRIPCIÓN EN PROCARIONTES:
•Un solo tipo de RNA polimerasa: 5 subunidades.
•El factor s: aumenta la afinidad de la enzima por los sitios promotores
del DNA, cuando la transcripción inicia, este factor se separa de la
enzima.
•Los elementos básicos de una región promotora, necesarios para el
inicio de la transcripción son regiones localizadas en (secuencias río arriba
del sitio de inicio de la Transcripción) :

-35 pb.- TTGACA, reconocida por el factor s

-10 pb.- TATAAT, segmento Pribnow, identifica el nucleótido
preciso que iniciará la transcripción.
•La Transcripción termina cuando se alcanza una secuencia específica
de nucleótidos, en algunos casos se requiere del factor rho.
•Promotores independientes de rho, el sitio de terminación: contiene 2
tramos de pares G-C, dispuestos en forma de un par repetido invertido
seguido por una hilera de adeninas en la cadena transcrita, en
consecuencia el extremo 3’ de RNA nasciente forma un asa y la
polimerasa se detiene.
Terminación Independiente de Rho:
de la
transcripción

Dependiente de
Rho:
Moléculas señal
pueden
aumentar o
disminuir la
transcripción,
dependiendo de
cómo afecten al
activador
 Las proteínas reguladoras tienen
dominios de unión al ADN discretos:
Afinidad 104-106X > otros sitios
 Alta especificidad de unión
Proteína-DNA

• El represor tetramérico Lac se une a sus secuencias operadoras in

vivo con una constante de disociación aprox 10-10 M

El represor discrimina entre los operadores y otras secuencias por un

factor de aproximadamente 106, se une a estos pocos pares de bases
entre los aproximadamente 4,6 millones del cromosoma de E. coli
Las proteínas reguladoras también tienen dominios
de interacción proteína-proteína
 Principios de regulación
genética
• Regulación de la Expresión genética:
Síntesis y Degradación por Proteínas reguladoras,
represoras o activadoras de promotores específicos
• Bacterias: Operones
Proteína represora bloquea la transcripción por unión al
Operador, se disocia por un Inductor (alolactosa en
operon lac)
Proteínas Reguladoras: Unión especifica por sitios al
DNA, dominios de unión al DNA y dominios para
interacción Proteína-Proteína (dimerizar o activar la
transcripción)
 Regulación de la expresión genética
en procariotas
• Otros factores además de lac afectan expresión expresión
de genes lac: Disponibilidad de Glu
• Mecanismo regulador: Represión de catabolito
cAMP receptor protein, or CRP
 Regulación de la expresión genética
en procariotas
Alta
transcripción
del operón
lac
Alta [cAMP y
Lac]:
Aumento de
Glu

CRP-cAMP: Regulan varios operones

Regulones: Operones con un regulador común, coordinan cambios en
funciones celulares, 100´s de genes
 Regulación de la expresión
genética en procariotas

• Regulación positiva del operón lac (E. coli): CRP

Glucosa elevada: deprime [cAMP], disminuye
expresión de lac y otros operones de metabolismo de
azúcares secundarios
Este gen de E. coli está siendo transcrito y traducido
simultáneamente.
Características de los promotores de Procariontes y
Eucariontes:
 TRANSCRIPCIÓN Y PROCESAMIENTO DEL RNA EN
CÉLULAS EUCARIOTAS
Poseen 3 polimerasas distintas, que se distinguen por su
sensibilidad a la a-amanitina (tóxico, hongo Amanita phalloides).
Contienen de 8-14 subunidades distintas, cada una se auxilia de
los TF’s
TF’s: generales y tejido específico. Determinan la tasa de
transcripción de un gen o grupo de genes determinados,
intervienen en la regulación fina de la expresión de un gen.
La molécula de RNA recién sintetizada: transcrito primario ó
pre-mRNA. En seguida pueden ser procesados para formar
RNA funcional más pequeño.
El procesamiento del RNA requiere varios RNAs pequeños
(RNAnp) y proteínas relacionadas que funcionan dentro del
núcleo.
En Procariontes, 1 sola RNA polimerasa cataliza la síntesis de las 3
cadenas de RNA de E. coli.

RNA polimerasa en Eucariontes:

RNA polimerasa II: Transcripción de los genes estructurales (productos

protéicos) de la célula Eucarionte.
RNA pol II: Enzima compleja de múltiples subunidades, sin
embargo deben intervenir al menos 7 proteínas accesorias como
(TFII-A, -B, -D, -E, -F, -H, -J) en el complejo de transcripción.
Primeramente TFIID se une a la secuencia TATA (-20 a -30pb,
equivalente a la región -10, caja Pribnow en procariontes).
TBP: Proteína de unión a la caja TATA.

“La transcripción de estos genes requiere un alto grado

de regulación, su expresión depende del tipo de célula,
tejido, tiempo específico del desarrollo y metabolismo de
la misma célula, del órgano y del organismo”.
Factores que actúan en trans: Proteínas sintetizadas en otros
genes pueden potenciar o reprimir la transcripción de un gen.
Secuencias potenciadoras: Unen factores que actúan en trans,
son secuencias muy alejadas ( varios kbp), es probable que
influencien la transcripción por la formación de bucles de DNA.
Ensamblaje de un complejo
MÍNIMO DE INICIACIÓN de la
transcripción funcional
(eucariontes):
La transcripción puede modificarse mediante la unión de factores
que actúan en trans, ya sea en el promotor, o potenciadores (a
grandes distancias).
Terminación de la Transcripción:
La RNA pol II eucarionte sigue transcribiendo más allá del final del gen,
hasta encontrarse con una secuencia en forma: AAUAAA, terminando la
transcripción.
Se adiciona una cola de ácido polirriboadenílico poli (A), de hasta 200
bases, esta polimerasa no está dirigida por el molde de DNA.
No todos los mRNA’s la tienen.

Procesamiento del mRNA:

Formación de la Caperuza.-
Primera modificación que se lleva a cabo en el extremo 5’ del pre
m-RNA, es la adición de un residuo GTP metilado.
Coloca al mRNA en el ribosoma para la Traducción.
TERMINACION DE LA TRANSCRIPCION EN
EUCARIONTES: Adición de colas de poli (A).

PROCESAMIENTO del mRNA:

formación de caperuza, corte,
empalme y edición.
CAPERUZA: Sirve para colocar al
mRNA en el ribosoma para la
traducción.
Corte y Empalme:
El pre m-RNA con la caperuza, puede formar complejos con
partículas ribonucleoprotéicas nucleares pequeñas (snRNP),
formadas por complejos de RNA nucleares pequeños (snRNA) y
enzimas de corte y emplame especiales.
El complejo snRNP-pre-mRNA se denomina espliceosoma
(splicing).
En este proceso se eliminan los intrones del pre-mRNA.
 PROCESAMIENTO DEL RNA (núcleo)
CORTE Y EMPALME

El mRNA debe
ser exportado al
citoplasma para
su
TRADUCCIÓN.
El mRNA puede
incluir intrones,
los cuales
deben
eliminarse
POLISOMA: Consiste de varios
ribosomas simultáneamente
que traducen a la misma
molécula de RNA