Machine Translated by Google
plantas
Artículo
Efecto de la inoculación con hongos micorrízicos arbusculares y
Aplicación de fungicidas sobre el metabolismo secundario de
Solanum tuberosum Hojas
Valentina Fritz 1,2, Gonzalo Tereucán 1,2, Christian Santander 1,2 , Boris Contreras
Paulo Ademar Avelar Ferreira 4 y Antonieta Ruiz 1,2,*
Cita: Fritz, V.; Tereucán, G.;
Santander, C.; Contreras, B.; cornejo,
PAG.; Ferreira, PAA; Ruiz, A. Efecto de
Inoculación con Arbuscular
Hongos micorrízicos y fungicidas
Solicitud en la Secundaria
Metabolismo de Solanum tuberosum
Hojas. Plantas 2022, 11 , 278. https://doi.org/
10.3390/plants11030278
Editores Académicos: Petronia Carillo
y Luigi De Bellis
Recibido: 21 de diciembre de 2021
Aceptado: 18 de enero de 2022
Publicado: 21 de enero de 2022
Nota del editor: MDPI se mantiene neutral
con respecto a reclamos jurisdiccionales en
mapas publicados y afiliaciones institucionales.
iaciones.
Copyright: © 2022 por los autores.
Licenciatario MDPI, Basilea, Suiza.
Este artículo es un artículo de acceso abierto.
distribuido bajo los términos y
condiciones de los Creative Commons
Licencia de atribución (CC BY) (https://
creativecommons.org/licenses/by/
4.0/).
Plantas 2022, 11, 278. https://doi.org/10.3390/plants11030278
3,
Pablo Cornejo 1,2 ,
1
Centro de Investigación en Micorrizas y Sustentabilidad Agroambiental, CIMYSA, Universidad de La
Frontera, Avda. Francisco Salazar 01145, Temuco 4811230, Chile; v.fritz02@ufromail.cl (VF);
g.tereucan01@ufromail.cl (GT); c.santander01@ufromail.cl (CS); pablo.cornejo@ufrontera.cl (PC)
2
Departamento de Ciencias Químicas y Recursos Naturales, Núcleo de Biorrecursos Científicos y Tecnológicos
BIOREN­UFRO, Universidad de La Frontera, Avda. Francisco Salazar 01145, Temuco 4811230, Chile
3 Novaseed Ltda. y Papas Arcoiris Ltda., Loteo Pozo de Ripio s/n, Parque Ivian II, Puerto
Varas 5550000, Chile; boriscontreras@novaseed.cl
4
Departamento de Solos, Universidade Federal de Santa Maria, Santa Maria 97105­900, RS, Brasil;
ferreira.aap@gmail.com
* Correspondencia: maria.ruiz@ufrontera.cl
Resumen: En cultivos de papa (Solanum tuberosum) está extendido el uso de fungicidas para controlar
algunas enfermedades; sin embargo, se ha reportado que esta práctica puede modificar el contenido de
polifenoles de la papa, siendo necesarias nuevas estrategias orientadas al sistema de defensa de la papa.
Una alternativa es el uso de hongos micorrízicos arbusculares (HMA) para mejorar los mecanismos de
defensa de las plantas. En este estudio, se evaluaron los perfiles fenólicos y las actividades antioxidantes
en hojas de tres genotipos de papa (CB2011­509, CB2011­104 y VR808) en cultivos inoculados con tres
cepas de HMA (Claroideoglomus claroideum, Claroideoglomus lamellosum y Fumneliformis mosseae) y
con HMA. en combinación con el uso de dos fungicidas comerciales (MONCUT [M] y ReflectXtra [R]). Se
detectaron ocho compuestos fenólicos , principalmente ácidos hidroxicinámicos (HCAD) y flavonoles, en
las muestras donde se obtuvieron las mayores concentraciones de HCAD, el ácido 5­cafeoilquínico fue el
fenólico más abundante. La actividad antioxidante fue mayor utilizando los métodos de capacidad
antioxidante reductora cúprica (CUPRAC) y poder antioxidante reductor férrico (FRAP). La asociación de
HMA con plantas tuvo beneficios sobre el metabolismo secundario; sin embargo, la respuesta difirió según
el genotipo. Las diferentes combinaciones de genotipos de papa, cepa de HMA y fungicida modificaron
de diferentes maneras el contenido de compuestos fenólicos en las hojas; el tratamiento con C. lamellosum
y ReflectXtra fue la combinación ideal para los genotipos aquí analizados, con la mayor respuesta
antioxidante, lo que respalda la evaluación tecnológica adicional de cepas de HMA y fungicidas eficientes en cultivo
Palabras clave: papa; micorrizas; metabolismo secundario; actividades antioxidantes; Compuestos fenólicos
1. Introducción
La papa (Solanum tuberosum L.) es una de las especies vegetales más cultivadas en todo
el mundo . Según el último informe de la Organización para la Alimentación y la Agricultura (FAO),
la producción total de patatas se estimó en 2014 en 381.682 mil toneladas [1] La calidad de los
tubérculos se ve afectada negativamente por sustancias como glicoalcaloides, nitratos y residuos
de herbicidas . , que no debe estar presente o debe estar presente sólo en pequeñas cantidades [2,3].
El valor nutricional de este cultivo está asociado a la composición química del tubérculo,
que incluye almidón, azúcares, azúcares reductores, proteínas ricas en aminoácidos
esenciales como leucina, lisina, fenilalanina y treonina, fibra dietética, vitaminas C, B1,
B2 y B6, y varios metabolitos secundarios con capacidad antioxidante [2]. Estos
antioxidantes incluyen predominantemente polifenoles, flavonoides, poliaminas y carotenoides [4].
https://www.mdpi.com/journal/plants
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, 278 2 de 15

Los estudios han demostrado que los tubérculos de papa son una fuente importante de polifenoles [5–7].
El contenido fenólico total también puede verse modificado por el medio ambiente y el manejo poscosecha
[4]. Sin embargo, la distribución de compuestos fenólicos varía en toda la planta. En las hojas, los
compuestos fenólicos están representados principalmente por ácidos hidroxicinámicos y sus conjugados
(HCAD), siendo el ácido trans­5­O­cafeoilquínico el más abundante [4,8]. También se han informado
flavonoles y flavonas en las hojas de papa, donde el 3',4'­dihidroxiflavonol inhibe significativamente la
generación de radicales superóxido en un sistema libre de células y protege el ácido ascórbico de la
autooxidación [9] . Sin embargo, a pesar de los importantes niveles de compuestos fenólicos en las hojas,
su contenido en glicoalcaloides impide su uso como alimento debido a su alta toxicidad con efectos nocivos
para el ser humano a pesar de su actividad protectora frente a diversos patógenos e insectos [10].

Investigaciones recientes se han centrado en la explotación de microorganismos beneficiosos en el

manejo de cultivos , incluidos los hongos micorrízicos arbusculares (HMA), que se distribuyen ampliamente
en los suelos y pueden colonizar las raíces de la mayoría de las especies de plantas [11]. Los hongos
micorrízicos arbusculares pertenecen al filo Glomeromycota [12], que es ampliamente reconocido por
mejorar el crecimiento de las plantas mediante el aumento de la absorción de nutrientes y agua por las
raíces de las plantas y también mediante la mejora de la estructura del suelo [11]. Uno de los beneficios
más importantes de los HMA para sus plantas hospedantes es la protección contra enfermedades causadas
por patógenos del suelo, incluidos hongos, bacterias y nematodos [13,14]. Se ha informado que los hongos
micorrízicos arbusculares inducen eficazmente la acumulación de fenoles y flavonoides, que son poderosos
antioxidantes que actúan como eliminadores de radicales libres y agentes reductores; Además, el AMF
también aumenta la expresión genética relacionada con el metabolismo secundario [15]. Los hongos
micorrízicos arbusculares también pueden aumentar la expresión de enzimas y compuestos antioxidantes
y disminuir la producción de malondialdehído (MDA), que es un indicador de daño a la membrana de la
planta por peroxidación lipídica [16].
En los cultivos de papa, el microorganismo del suelo Phytophthora infestans es una de las
enfermedades más destructivas [17], en la que los daños causados son extensos debido a las
dificultades para controlar la propagación de la enfermedad. El uso de fungicidas químicos para
reducir P. infestans puede proporcionar cierto nivel de control de la enfermedad [18]. Se pueden
utilizar múltiples fungicidas para este control. Entre ellos, ReflectXtra es un fungicida de acción
preventiva, sistémica y de contacto que combina dos principios activos diferentes (isopirazam y
azoxistrobina); ambos actúan a nivel de la respiración mitocondrial de los hongos pero en diferentes
partes del proceso, lo que representa una poderosa estrategia de resistencia. Por el contrario,
Rhizoctonia spp. son otro hongo patógeno importante de la papa, causando pérdidas económicas
debido a cancros del tallo y caspa negra [ 19], MONCUT 40 SC es un fungicida sistémico con
acción preventiva y curativa que controla eficientemente Rhizoctonia spp., impidiendo su
crecimiento y penetración en la raíz . y estructuras del tubérculo, lo que provoca el colapso de las hifas y de
Se pueden utilizar varios fungicidas para esta afección. Sin embargo, es importante considerar que el uso
de fungicidas también puede afectar negativamente a las poblaciones de HMA de la misma manera [20­22].
Por tanto, resulta de gran interés estudiar la respuesta de las plantas al ataque de patógenos o a cambios
abióticos a nivel metabólico y fisiológico. El uso de fungicidas es común y puede beneficiar o perjudicar a
la planta. Por tanto, este estudio tuvo como objetivo analizar el efecto de los fungicidas sobre la simbiosis
de HMA con plantas de papa y cómo esta interacción micorriza­fungicida puede afectar el sistema de
defensa y la respuesta antioxidante de la planta.

2.
Resultados 2.1. Identificación y Cuantificación de Compuestos Fenólicos
Se detectaron diferentes perfiles de compuestos fenólicos entre los genotipos. En
concreto , en VR808 solo se detectaron tres compuestos fenólicos (Figura 1A, Tabla 1), que
correspondieron a dos HCAD (ácido 5­cafeoilquínico (pico 1) e isómero del ácido
cafeoilquínico (pico 2)) y el flavonol quercetina­rutinósido. (pico 7). En CB2011­509, solo se
detectaron un HCAD ( ácido 5­cafeoilquínico) y tres flavonoles (3­glucosilrutinósido (pico 3),
dihexósido (pico 4) y rutinósido (pico 7) derivados de la quercetina) (Figura 1B, Tabla 1) . ).
Finalmente, para CB2011­104, se observó un perfil similar al VR808, pero otros tres compuestos fen
Machine Translated by Google

isómero ácido (pico 2)) y el flavonol quercetina­rutinósido (pico 7). En CB2011­509, solo se detectaron un HCAD (ácido 5­
cafeoilquínico) y tres flavonoles (3­glucosilrutinósido (pico 3), di­hexósido (pico 4) y rutinósido (pico 7) derivados de la
Plantas 2022, 11, 278 quercetina) (Figura 1B, Tabla 1). Finalmente, para CB2011­104 se observó un perfil similar al VR808, pero también se 3 de 15

detectaron otros tres compuestos fenólicos (quercetina­pentósido­rutinósido (pico 5), kaempferol­rutinósido (pico 8) y otro
compuesto fenólico no identificado (pico 6). )) también se detectaron libras (quercetina­pentósido­rutinósido (pico 5),
kaempferol­rutinósido
(pico1C,
(Figura 8) Tabla
y otro
1). compuesto fenólico no identificado (pico 6)) (Figura 1C, Tabla 1).

Figura
Figura 1.
1. Cromatograma
Cromatograma HPLC­DAD
HPLC­DAD aa 360
360 nm
nmde
dederivados
derivadosdel
delácido
ácidohidroxicinámico
hidroxicinámicoy yflavonoles
flavonoles en
hojas
hojasde
deSolanum
Solanumtuberosum
tuberosumbajo
bajotratamiento
tratamientode
defungicidas
fungicidasyyhongos
hongosmicorrízicos
micorrízicosarbusculares,
arbusculares,en
donde:
donde:(A)(A)Genotipo
GenotipoVR808
VR808(B)
(B)Genotipo
GenotipoCB2011­509
CB2011­509(C),
(C),genotipo
genotipoCB2011­104.
CB2011­104.Para
Paraidentificación,
identificación,
consulte
consultelos
losdetalles
detallesen
enla
laTabla
Tabla1.
1.

Tabla
Tabla1.
1.Identificaciones
Identificacionesde
decompuestos
compuestosfenólicos
fenólicosen
enhojas
hojasde
deSolanum
Solanumtuberosum
tuberosumpor
porHPLC­DAD­ESI­
HPLC­DAD­ESI­
MS/MS.
EM/EM.

TRTR
pico
pico(mín.)
(mín.) Identificaciones
Identificaciones Λmáx (nm) [MH]­
Λmáx (nm) [MH]­ Producto
Iones Iones
del producto

1 1 6,4 26.4
13,0 2 ácido 5­cafeoilquínico
5­cafeoilquínico ácido
ácido 324
324 353,0
353,0 190,9
190,9
13,0 3 13,3 4 cafeoilquínico ácido 327 353,9 191,0; 179,9; 173,0; 135.0
13,9 5 15,1 cafeoilquínico quercetin­3­
glucosilrutinósido quercetin­ 327
352 353,9
624,9
191,0; 179,9; 173,0;300.1
135,0 771,8
dihexósido 3 13.3 352 771,8 300.1
quercetin­3­glucosilrutinósido quercetin­pentósido­ 352
351
740,9
624,9 300.1
300.1
rutinósido no identificado
6 16,4 4 13,9 7
16,9 8
quercetin­ 351
352 609,0 300,1
dihexósido quercetin­ 740,9 300,1
rutinósido 5 15.1
19.6 345 351
353 592,9 300.1
284,9
quercetin­pentósido­rutinósido
no identificado
ka empferol­ rutinósido 6
16.4 351
7 16.9 quercetina­rutinósido 353 609.0 300.1
el genotipo CB2011­104, se encontraronPara
concentraciones más altas de flavonoles y HCAD.
8
observado19.6
en el tratamiento inoculado con HMC26 combinado con 345
kaempferol­rutinósido 592,9
el uso de ReflectXtra 284,9
fungicida (Figura 2A,B). En comparación, los tratamientos inoculados con HMC7 aumentaron la
concentraciones fenólicas
Para el genotipo tanto
CB2011­104, se en MONCUT
observaron como en ReflectXtra.
concentraciones Concentraciones
más altas de flavonoles máscafeoilquínico,
y HCAD ( ácido altas de 5­
con
quercetina­rutinósido,
el uso del ReflectX­kaempferol­rutinósido
rutinósido cuando el Las
y quercetina­pentósido)
plantas fueron inoculadas
en el tratamiento
con HMC26inoculado
combinado
concon
HMC26 combinado
tra fungicida (Figura 2A,B). En comparación, los tratamientos inoculados con HMC7 utilizaron el fungicida ReflectXtra
(Figura S1).
Machine Translated by Google

Aumentó las concentraciones de fenólicos tanto en MONCUT como en ReflectXtra. Se

observaron concentraciones más altas de ácido 5­cafeoilquínico, quercetina­rutinósido,
Plantas 2022, 11, 278 kaempferol­rutinósido y quercetina­pentósido­rutinósido cuando las plantas se inocularon4 de
con15

HMC26 combinado con el uso del fungicida ReflectXtra (Figura S1).

2000 2000 5000

A B C

Automóvil club británico

4000
1500 1500 Automóvil club británico
Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

abA
3000

tgoF
m k(t
egH
T
dk(

a­e
t­m
1gC o

)1ln
sesleo g
a
D)lA
aAB
Automóvil club británico abA
aAB
a­am
e)1vlg
selonso lF
tgok(t

Automóvil club británico

1000 1000 Automóvil club británico

AB
Automóvil club británico

AB
licenciado en Letras

Automóvil club británico Automóvil club británico

licenciado en Letras 2000

licenciado en Letras cama y desayuno

Automóvil club británico

licenciado en Letras tejido
aBC
CB
licenciado en Letras

500 500 bab

licenciado en Letras

CB
1000
cama y desayuno
cama y desayuno

CB cama y desayuno

cama y desayuno

0 0 0
Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA
Fungicidas Fungicidas Fungicidas

10 15 40
D mi F
Automóvil club británico

Automóvil club británico

8 Automóvil club británico

30
Automóvil club británico

AB

10 aAB
Automóvil club británico

Automóvil club británico

6
Automóvil club británico
Automóvil club británico

AB licenciado en Letras

antes de Cristo licenciado en Letras

Automóvil club británico

cama y desayuno
AB
bab
Automóvil club británico
abA
licenciado en Letras 20 tejido
Automóvil club británico

AB
dadivitcA

antes de Cristo
dadivitcA

4 cama y desayuno
antes de Cristo
bbc

dadivitcA
licenciado en Letras

5
California cama y desayuno
California

antes de Cristo
licenciado en Letras cama y desayuno

CB 10
2

0 0 0
Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA
Fungicidas Fungicidas Fungicidas

40
GRAMO

30

Automóvil club británico Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

aAB
abA
licenciado en Letras

20 abb bab
dadivitcA

CB
cama y desayuno

cama y desayuno
Sin AMF CC HMC26 HMC7
10

0
Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA
Fungicidas

Figura 2. Compuestos
bajo inoculación fenólicos
de hongos y actividad
micorrízicos antioxidantey de
arbusculares hojas de Solanum
tratamientos tuberosum
fungicidas. , tipo CB2011­104
(A) Flavonoles totales
genotipo bajo inoculación de hongos micorrízicos arbusculares y tratamientos fungicidas. (A) Flavonoles
totales
DAD, (B)por HPLC­DAD,
Ácidos (B) Ácidostotales
hidroxicinámicos hidroxicinámicos totales
por HPLC­DAD, (C)por HPLC­DAD,
Fenoles totales(C) Fenoles totales por HPLC­
determinados
determinado por el método de Folin­Ciocalteu, (D) AA determinado por el TEAC
Trolox) por el método de Folin­Ciocalteu, (D) AA determinado por el TEAC (antioxidante (antioxidante equivalente
equivalente de
de Trolox)
capacidad oxidante), (E) AA determinado mediante el método DPPH (capacidad
(E) AA determinado mediante el método DPPH (2,2­difenil­1­picrilhidrazilo), ( F) AA de 2,2­difenil­1­picrilhidrazilo),
método, (F) AA determinada por el método CUPRAC (capacidad antioxidante reductora del cobre) y
determinada por el método CUPRAC (capacidad antioxidante reductora del cobre) y (G) AA determinada
(G) AA determinado mediante el ensayo FRAP (poder antioxidante reductor férrico). Media seguida del ensayo
FRAP (poder antioxidante reductor férrico). Medios seguidos de la misma minúscula
misma letra minúscula compara inoculación para el mismo fungicida y letras mayúsculas compara letra
compara
fungicidasinoculación
dentro depara el mismo
la misma fungicida
condición y letras mayúsculas
de inoculación (Tukey 5%).compara
Donde: fungicidas
sin HMA,dentro
CC: Cla­ la misma
condición
rodeoglomusde inoculación
claroideum;(Tukey
HMC26: 5%). Donde: sin HMA,
Claroideoglomus CC: Claroideoglomus
lamellosum claroideum;mosseae.
y HMC7: Funneliformis
HMC26: Claroideoglomus lamellosum y HMC7: Funneliformis mosseae.
Contrario a las observaciones para CB2011­104, en el genotipo CB2011­509
(Figura
3A, B), 3A,B), concentraciones similares de HCAD y flavonoles en el tratamiento con
se observaron
CC.
con CC y HMC7 combinados con el uso del fungicida ReflectXtra (Figura 3A,B). y
HMC7 combinado con el uso del fungicida ReflectXtra (Figura 3A,B). Sin embargo,
Sin embargo, hubo una tendencia al aumento total de HCAD y flavanoles en presencia de
fungicidas en
fungicidas en las hojas de plantas inoculadas, principalmente con el uso de ReflecXtra. Se
utilizan hojas de plantas inoculadas, principalmente con el uso de ReflecXtra. El uso de MONCUT
de MONCUT no mostraron aumentos significativos en las concentraciones de compuestos fenólicos
no mostraron aumentos significativos en las concentraciones de compuestos fenólicos en las hojas
libras en las hojas de plantas inoculadas con HMA. El genotipo CB2011­509 mostró la propiedad
de plantas inoculadas con HMA. El genotipo CB2011­509 mostró las mayores concentraciones de
concentraciones más altas de ácido 5­cafeoilquínico, quercetin­3­glucosilrutinósido, quercetin
­ácido 5­caffeoilquínico, quercetin­3­glucosilrutinósido, quercetin­dihexósido y quercetin­
dihexósido, y quercetin­rutinósido cuando se inoculan con CC y HMC7 cuando el fun­
rutinósido cuando se inoculó con CC y HMC7 cuando se aplicó el fungicida ReflecXtra
Se aplicó el insecticida ReflecXtra (Figura S2).
(Figura S2).
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, x PARA REVISIÓN POR PARES 5 de 15 5

Plantas 2022, 11, 278 de 15

800 800 4000

A B C

Automóvil club británico

Automóvil club británico

600 600 3000 Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

tgoF
m
a­e k(t
gH
t­mTd
k(

g
)1ln
1gC e
o

sesleo
a
D)lA
o)1lvga­am
selonse lFk(t
tgo

aa aa
400 400 2000
Automóvil club británico Automóvil club británico

Automóvil club británico

abA Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

licenciado en Letras

Automóvil club británico Automóvil club británico

Automóvil club británico
aAB
Automóvil club británico

200 200 licenciado en Letras

1000
Automóvil club británico

aa aa
Automóvil club británico

AB
Automóvil club británico

Automóvil club británico

AB
Automóvil club británico

0 0 0
Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA
Fungicidas Fungicidas Fungicidas

10 8 25
D mi F
Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

8 20
6 Automóvil club británico

aa aa
Automóvil club británico

cama y desayuno
Automóvil club británico
abA
6 Automóvil club británico
abA
abA
15 aAB aA aAB
abb bca

aa ab 4 Automóvil club británico

Automóvil club británico

aB
licenciado en Letras

abA aAB
AB
dadivitcA

dadivitcA

4 bab AB tejido abAB bB

licenciado en Letras
10

dadivitcA
cama y desayuno

CB
cama y desayuno

2
2 5

0 0 0
Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA
Fungicidas Fungicidas Fungicidas

20
GRAMO

aa aa

Automóvil club británico

15 Automóvil club británico Automóvil club británico

Automóvil club británico Automóvil club británico

Automóvil club británico

aa aa
Automóvil club británico

10 Automóvil club británico

dadivitcA

Sin AMF CC HMC26 HMC7

5

0
Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA
Fungicidas

Figura
Figura3.3.Compuestos
Compuestosfenólicos
fenólicosyyactividad
actividadantioxidante
antioxidantededehojas
hojasde
deSolanum
Solanumtuberosum,
tuberosum tipo
, tipoCB2011­509
CB2011­509
bajo inoculación de hongos micorrízicos arbusculares y tratamientos fungicidas. (A) Flavonoles
genotipo bajo inoculación de hongos micorrízicos arbusculares y tratamientos fungicidas. (A) Total totales
por HPLC­
flavonoles
DAD, por HPLC­DAD,
(B) Ácidos (B) Ácidos
hidroxicinámicos hidroxicinámicos
totales por HPLC­DAD,totales por HPLC­DAD,
(C) Fenoles (C) Fenoles totales
totales determinados
determinados
anti­ por el
por el método demétodo de Folin­Ciocalteu,
Folin­Ciocalteu método, (D)(D)
AAAA determinados
determinado porpor el TEAC
el TEAC (equivalente
(antioxidante de Trolox Trolox
equivalente
capacidad oxidante), (E) AA determinado mediante el método DPPH (capacidad
(E) AA determinado mediante el método DPPH (2,2­difenil­1­picrilhidrazilo), ( F) AA de 2,2­difenil­1­picrilhidrazilo),
método, (F) AA determinada por el método CUPRAC (capacidad antioxidante reductora del cobre) y
determinada por el método CUPRAC (capacidad antioxidante reductora del cobre) y (G) AA determinada
(G) AA determinado mediante el ensayo FRAP (poder antioxidante reductor férrico). Media seguida del
ensayo FRAP (poder antioxidante reductor férrico). Medios seguidos de la misma minúscula
misma letra minúscula compara inoculación para el mismo fungicida y letras mayúsculas compara letra
compara inoculación para el mismo fungicida y letras mayúsculas compara fungicidas dentro
fungicidas dentro de la misma condición de inoculación (Tukey 5%). Donde: sin HMA, CC: Cla­ la misma
condición de inoculación
rodeoglomus claroideum;(Tukey
HMC26:5%). Donde: sin HMA,
Claroideoglomus CC: Claroideoglomus
lamellosum claroideum;mosseae.
y HMC7: Funneliformis
HMC26: Claroideoglomus lamellosum y HMC7: Funneliformis mosseae.
En el genotipo VR808 (Figura 4A,B), concentraciones similares de HCAD y flavonoles.
En el genotipo VR808 (Figura 4A,B), concentraciones similares de HCAD y flavonoles.
fueron observados. Se observó que el compuesto con mayor concentración fue quercetina­
rutinósido . El compuesto con mayor concentración fue quercetina­rutinósido,
alcanzando una concentración de 383,58 mg kg−1 cuando se inocula con HMC26 y con el
alcanzando una concentración de 383,58 mg kg−1 cuando se inocula con HMC26 y con el
uso de ReflectXtra (Figura S3). Por el contrario, no se observaron aumentos con el uso de
ReflectXtra (Figura S3). Por el contrario, no se observaron aumentos con el uso de
MONCUT comparado con niveles en el tratamiento sin fungicida.
MONCUT comparado con niveles en el tratamiento sin fungicida.
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, x PARA REVISIÓN POR PARES 6 de 15 6

Plantas 2022, 11, 278 de 15

750 800 5000

A B C

Automóvil club británico

Automóvil club británico

4000
600 Automóvil club británico

500
3000

tgoF
m k(t
gH
Td
k(

a­e
t­m
e
o

)1lg
n
1gC

sesleo
a
D)lA
Automóvil club británico

abA
Automóvil club británico
abA
se
selon a­am
o)1lvg lF
tgok(t

bcA
400 Automóvil club británico
Automóvil club británico

Automóvil club británico

AB
abAB
2000 bcAB
Automóvil club británico

abA
bcA
abA
250
CB CB
bcA
200
Automóvil club británico
licenciado en Letras

CB aB aB
aBC 1000
Automóvil club británico
cama y desayuno

CB CB AB

CC
cama y desayuno antes de Cristo CB

0 0 0
Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA
Fungicidas Fungicidas Fungicidas

8 6 20
D mi F

Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

6 Automóvil club británico

Automóvil club británico

15 Automóvil club británico

4
Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

Automóvil club británico

abA abA cama y desayuno

Automóvil club británico

Automóvil club británico

cama y desayuno

cama y desayuno
bbc cama y desayuno

4 cama y desayuno
cama y desayuno cama y desayuno

10 bab
CB
cama y desayuno cama y desayuno
cama y desayuno

bbc
dadivitcA

dadivitcA

cama y desayuno

cama y desayuno
cama y desayuno

CC

dadivitcA
cama y desayuno

2 CB
cama y desayuno

2 5

0 0 0
Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA
Fungicidas Fungicidas Fungicidas

20
GRAMO

15 Automóvil club británico

Automóvil club británico

bab
Automóvil club británico

10 licenciado en Letras

AB
AB
California
CB
dadivitcA

CB
Sin AMF CC HMC26 HMC7
cama y desayuno

dB

0
Sin aplicación MONCUT 40 SC REFLECT® XTRA
Fungicidas

Figura
Figura4.4.Compuestos
Compuestosfenólicos
fenólicosyyactividad
actividadantioxidante
antioxidantede delas hojas
hojas dede Solanum
Solanum tuberosum,
tuberosum genotipo VR808
, genoVR808 bajo
inoculación de hongosde
tipo bajo inoculación micorrízicos arbusculares
hongos micorrízicos y tratamientos
arbusculares fungicidas.fungicidas.
y tratamientos (A) Flavonoles totales
(A) Flavonoles totales
por HPLC­DAD,
HPLC­DAD, (B) Ácidos
(B) Ácidos hidroxicinámicos
hidroxicinámicos totales
totales por HPLC­DAD,
por HPLC­DAD, (C) Fenoles
(C) Fenoles totales
totales determinados por
determinado
por el método
método de Folin­Ciocalteu,
de Folin­Ciocalteu, (D) AA (D) AA determinado
determinado por el(antioxidante
por el TEAC TEAC (antioxidante equivalente
equivalente de Trolox) por el
de Trolox)
capacidad),(E)
capacidad), (E)AA
método AA determinado
determinado por elDPPH
por el método método DPPH (2,2­difenil­1­picrilhidrazilo),
(2,2­difenil­1­ (F) AA
método picrilhidrazilo), (F) método AA
determinado por el método CUPRAC (cobre reductor de capacidad antioxidante) y (G) AA determinado por
el método CUPRAC (cobre reductor de capacidad antioxidante) y (G) AA determinado
extraído mediante el ensayo FRAP (poder antioxidante reductor férrico). Media seguida del mismo ensayo
FRAP (poder antioxidante reductor férrico). Medios seguidos de la misma minúscula
letra caso compara inoculación para el mismo fungicida y letras mayúsculas compara fungicidas letra compara
inoculación para el mismo fungicida y letras mayúsculas compara fungicidas dentro
dentro de la misma condición de inoculación (Tukey 5%). Donde: sin HMA, CC: Claroideoglomus cla­ la
misma
rodeo;condición de inoculación (Tukey
HMC26: Claroideoglomus 5%). Donde:
lamellosum y HMC7: sinFunneliformis
HMA, CC: Claroideoglomus
mosseae. claroideum;
HMC26: Claroideoglomus lamellosum y HMC7: Funneliformis mosseae.
2.2. Concentraciones totales de fenoles
2.2. Concentraciones totales de fenoles
En el genotipo CB2011­104 (Figura 2C), la mayor concentración de fenoles totales En
el genotipo CB2011­104 (Figura 2C), la mayor concentración de fenoles totales
se observó en hojas de plantas con HMC26 y sin aplicación de fungicida, se observó en hojas de plantas con
HMC26 y sin aplicación de fungicida,
alcanzando 3756,8 mg kg­1. En ausencia de HMA, las concentraciones de fenol disminuyeron alcanzando 3756,8
mg kg­1 . En ausencia de HMA, las concentraciones de fenol disminuyeron
al aplicar el fungicida ReflectXtra, mientras que en presencia de HMA, el fenol total al aplicar el fungicida
ReflectXtra, mientras que en presencia de HMA, el fenol total
las concentraciones de nol tendieron a aumentar. Así, las concentraciones más altas de fenoles totales tendieron
a aumentar. Así, la mayor concentración de fenoles totales en las hojas
hojas fue en plantas inoculadas con HMC7 bajo el efecto de fungicida, independientemente de fue en plantas
inoculadas con HMC7 bajo el efecto de fungicida, independientemente de si
si el
fue fungicidaofue
MONCUT MONCUTEn
ReflectXtra. o ReflectXtra. En el genotipo
el genotipo CB2011­509 CB2011­509
(Figura 3C), (Figura el fungicida
3C), se observó
concentración; enuna tendencia
ausencia similar; en de
de inoculación ausencia deconcentración
HMA, la inoculación dedeHMA, se observó una tendencia similar en la
de fenoles disminuyó cuando se aplicaron fungicidas, mientras
cuando se aplicaron fungicidas, mientras que en presencia de HMA queyen presencia de HMA y los fenoles disminuyeron
En los tratamientos
tratamientos con fungicida
con fungicida se observó
se observó un aumento
un aumento en las concentraciones
en las concentraciones de totales.
de fenoles fenoles El
totales. En los

elElgenotipo
genotipoVR808
VR808(Figura
(Figura4C)
4C)mostró
mostrólas
lasconcentraciones
concentracionesmás
másaltas
altasde
defenoles
fenolestotales
totalesbajo
bajo
efecto
sin de ReflectXtra
inoculación de HMA,sinalcanzando
inoculaciónun
detotal
HMA,de alcanzando un total
3891,7 mg kg­1 . de 3891,7 mg kg­1. El alto efecto de ReflectXtra
La concentración más alta de fenólicos totales en las hojas de las plantasinoculadas
La concentración más alta de fenólicos totales en las hojas de las plantas inoculadasestaba
estababajo
bajoeleltratamiento.
tratamiento.
ment
con con de
el uso HMC7 y con el uso
ReflectXtra, de ReflectXtra,
alcanzando alcanzando
2589,4 mg kg−1 . 2589,4 mg kg−1. Bajo inocu­ el tratamiento con HMC7 y
En relación
Bajo con el CC, con
la inoculación la concentración de fenoles aumentó
CC, la concentración bajo el efecto
de fenoles de ambos
aumentó bajofungicidas.
el efecto de
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, 278 7 de 15

ambos fungicidas. Por el contrario, la inoculación con HMC26 aumentó las concentraciones de
compuestos fenólicos solo cuando se usó MONCUT como fungicida.

2.3. Actividad Antioxidante

Para el genotipo CB2011­104 hubo una disminución en la actividad antioxidante en los
tratamientos sin micorrizas al aplicar el fungicida ReflectXtra. En las hojas de plantas tratadas
con HMC26 bajo el efecto de ReflectXtra en comparación con los tratamientos sin fungicida, se
observó un aumento en la actividad antioxidante del 18 al 71% (Figura 2D­F).
Las actividades CUPRAC y FRAP presentaron menores incrementos respecto de las demás actividades;
sin embargo, ambos métodos exhibieron mayores actividades antioxidantes.
En el genotipo CB2011­509, la actividad antioxidante determinada mediante TEAC fue
mayor con la inoculación de CC combinada con la aplicación del fungicida MONCUT (Figura 3D).
La actividad de DPPH y CUPRAC fue mayor en plantas que fueron inoculadas con CC y
recibieron la aplicación del fungicida ReflectXtra. Para la actividad antioxidante de CUPRAC
(Figura 3F), se observó una tendencia creciente en todos los tratamientos, donde se observaron
valores más altos en las hojas de las plantas inoculadas con CC bajo el uso de ReflectXtra, con
un aumento del 75% sobre el tratamiento sin fungicida. La actividad antioxidante FRAP para este
genotipo (Figura 3G) también fue alta para todos los tratamientos, particularmente para las hojas
de plantas inoculadas con HMC7 y CC bajo el uso de ReflectXtra. El genotipo VR808 (Figura 4D­
G) mostró una tendencia similar al genotipo CB2011­104. En general, se observaron aumentos
en la actividad antioxidante en las hojas de plantas inoculadas con HMA, particularmente cuando
se aplicaron fungicidas. Para las actividades de CUPRAC (Figura 4F) y FRAP (Figura 4G), hubo
aumentos del 92% y 78% en comparación con las del control, respectivamente, cuando se aplicó
el fungicida ReflectXtra en presencia de HMC26.

2.4. Análisis multivariado

Se realizó un análisis de componentes principales (PC) por separado para cada genotipo
de papa (Figura 5). En el genotipo VR808 (Figura 5A), las variables más representativas de
PC1 fueron los flavonoles, los HCAD y las actividades antioxidantes, en las que la quercetina­
rutinósido fue el compuesto principal dentro de los flavonoles totales. Además, se observó una
alta correlación entre TEAC, CUPRAC, FRAP y DPPH. El conjunto de datos anterior se asoció
principalmente con los grupos que incluyen HMC26 y CC con el uso del fungicida ReflectXtra
(Figura 5B). Esto podría indicar que la interacción HMA­planta es beneficiosa para la respuesta
antioxidante en este genotipo, incluso cuando se utiliza un fungicida específico, ReflectXtra.
También se observó que las plantas inoculadas con CC en presencia del fungicida ReflectXtra
indujeron la mejor respuesta antioxidante, mayor rendimiento y mayor presencia de micorrizas
(datos no mostrados).
Para el genotipo CB2011­509, las variables más representativas de PC1 fueron el ácido 5­
cafeoilquínico, quercetin­3­glucosilrutinósido, quercetin­dihexósido y quercetin­ rutinósido, los
cuales se correlacionaron fuertemente con las actividades antioxidantes de DPPH, CUPRAC y
FRAP ( Figura 5C). Para las variables anteriores, generalmente se agruparon los tratamientos
con HMC26 y CC. Además, ReflectXtra mostró una alta asociación con plantas colonizadas por
HMC26 (Figura 5D). Finalmente, el genotipo CB2011­104 mostró similitudes entre las variables
más representativas de PC1, debido a que los flavonoles y los HCAD estaban fuertemente
correlacionados (Figura 5E). Además, hubo una alta correlación de estos compuestos con el
contenido fenólico total y las actividades antioxidantes de CUPRAC, TEAC, FRAP y DPPH.
En cuanto al agrupamiento de individuos experimentales, los tratamientos más representativos fueron las
micorrizas HMC26 y CC combinadas con el uso del fungicida ReflectXtra (Figura 5F).
Machine Translated by Google

, 278
Plantas Plantas2022 2022,, 1111, x PARA REVISIÓN POR PARES 8 de 15 8 de 15

Figura 5.
Figura 5. Puntajes
Puntajesdeldel
componente principal
componente (PC) para
principal (PC)las
paravariables experimentales
las variables (izquierda) (izquierda)
experimentales determinadasdeterminadas
en hojas
hojas de tres
de tres genotipos
genotipos de Solanum
de Solanum tuberosum
tuberosum y el yagrupamiento
el agrupamiento de muestras
de las las muestras
segúnsegún
la distribución de
la distribución
PC de las(A,B),
(derecha). VR808 PC (derecha).
CB2011­509 VR808(C,D),(A,B), CB2011­509
CB2011­104 (E,F). (C,D),
donde: CB2011­104
pico 1: 5­ (E,F). donde: pico 1:
ácido cafeoilquínico; pico
quer­5­cafeoilquínico; 2:2:
pico ácido cafeoilquínico;
ácido pico
cafeoilquínico; 3:3:
pico quercetina­3­glucosilrutinósido; pico
quercetina­3­glucosilrutinósido; 4:4:
pico ácido
cetina­dihexósido; pico 5:
quercetina­dihexósido; quercetina­pentósido­rutinósido;
pico pico 6:
5: quercetina­pentósido­rutinósido; no 6:
pico identificado; pico 7:
no identificado; quercetina­
pico 7: quercetina­
rutinósido; pico 8: kaempferol­rutinósido; TFLAV: flavanoles totales; THCAD: rutinósido hidroxicinámico total;
pico 8: kaempferol­rutinósido; TFLAV: flavanoles totales; THCAD: hidroxicinámico total
ácidos; TPHEN: concentración de fenólicos totales según método de Folin­Ciocalteu; TEAC: Ácidos trolox;
TPHEN: concentración de fenólicos totales según método de Folin­Ciocalteu; TEAC: Trolox
capacidad antioxidante equivalente; CUPRAC: reducción de la capacidad antioxidante del ion cúprico; DPPH:
capacidad antioxidante equivalente; CUPRAC: reducción de la capacidad antioxidante del ion cúprico; DPPH:
actividad antioxidante del radical DPPH; FRAP:, poder antioxidante reductor férrico; 0: sin FMA; actividad
antioxidante
CC: del radical
Claroideoglomus DPPH; FRAP:,
claroideum; poder
HMC26: antioxidante reductor
Claroideoglomus férrico;
lamellosum; 0: sin Funneliformis
HMC7: FMA; mosseae; CC:
Claroideoglomus
M: claroideum; HMC26: Claroideoglomus lamellosum; HMC7: Funneliformis mosseae; METRO:
MONCUT y R: ReflectXtra.
MONCUT y R: ReflectXtra.

Para el genotipo CB2011­509, las variables más representativas de PC1 fueron 5­

3. Discusión
ácido cafeoilquínico, quercetina­3­glucosilrutinósido, quercetina­dihexósido y quercetina. La simbiosis
micorrízica
que estaba arbuscular
fuertemente activa el mecanismo
correlacionado de defensa
con las actividades en las plantas
antioxidantes delhospedantes, el inrutinósido
DPPH, CU, aumentando la ,
actividad
PRAC antioxidante
y FRAP (Figura de losPara
5C). compuestos fenólicos.
las variables compuestos
anteriores, y mejorarcon
los tratamientos el crecimiento
HMC26 y de las plantas [23,24].
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, 278 9 de 15

La aplicación de fungicidas puede influir en la simbiosis AM, aunque los resultados son bastante
variados según el ingrediente activo, la dosis, el momento de la aplicación, el modo de aplicación y las
condiciones ambientales [19,20]. Además, está bien documentado que el genotipo de la planta puede
influir en la simbiosis AM [19,21], similar al uso de fungicidas comerciales como MONCUT o ReflectXtra
[22]. Según Hage­Ahmed et al., (2019) [21], algunas especies de HMA son más resistentes a ciertos
fungicidas, mientras que otras parecen tener un efecto neutral sobre la colonización de MA y otras
parecen influir en la simbiosis de MA de manera positiva.
Las plantas de papa inoculadas con HMA, principalmente C. claroideum, mostraron una tendencia
a tener mayores concentraciones de compuestos fenólicos tanto en MONCUT como en ReflectXtra. En
otros estudios similares, se detectaron mayores actividades antioxidantes y contenidos de fenol en
plantas de lechuga, alcachofa y tomate colonizadas con AM [23,25,26]. Es bien sabido que los HMA
estimulan la síntesis de compuestos fenólicos en las plantas hospedantes, lo que se vuelve más
importante cuando las plantas están sometidas a estrés abiótico o biótico [27]. Por el contrario,
Santander et al., (2020) [22] informaron una mayor concentración de compuestos fenólicos en plantas
de lechuga no inoculadas, lo que se asoció con altos niveles de estrés oxidativo en condiciones salinas.
De manera similar, no se reportaron diferencias significativas en la concentración total de polifenoles
en los frutos de plantas de Fragaria ananassa inoculadas o no inoculadas con el hongo C. claroideum [24].
Sin embargo, se han informado diferencias en el contenido de polifenoles dependiendo de la cepa de
HMA , ya que no todas las variedades parecen ser funcionalmente compatibles con el mismo hongo [28].
La mayoría de las especies de HMA pueden asociarse con muchas especies de plantas, y una sola planta
puede ser colonizada por varias especies diferentes de HMA. Sin embargo, las respuestas de las plantas y
sus HMA pueden ser diferentes, lo que sugiere diferentes grados de compatibilidad funcional entre cepas
específicas de HMA y especies de plantas [29]. En particular, los ácidos fenólicos y los flavonoides participan
en los mecanismos de defensa de las plantas, aumentando la resistencia de las plantas al ataque de hongos
e inhibiendo el desarrollo de las hifas [30]. En este contexto, en nuestro estudio, las concentraciones de
compuestos fenólicos también aumentaron, principalmente por simbiosis AM.
El compuesto activo de ReflectXtra es la azoxistrobina, que es un compuesto análogo de la
estrobilurina [31]. Se ha demostrado que el grupo de fungicidas estrobilurinas, además de sus
actividades antifúngicas, puede modular la fisiología y bioquímica de las plantas [32]. Según
Schiavon et al., (2021) [33], los efectos positivos en las plantas incluyen un aumento en el contenido
de clorofila, actividad fotosintética, apertura estomática, consumo de agua, actividad antioxidante
de las plantas, etc. En plantas de grosella negra bajo aplicaciones de piraclostrobina y estrobilurina. ,
se ha informado de un aumento en las concentraciones de compuestos fenólicos [34]. En nuestro
estudio, el uso de ReflectXtra mostró aumentos significativos en flavonoles totales y HCAD totales
en hojas, principalmente en los genotipos VR808 y CB2011­509.
La protección de la planta por los HMA se conoce como resistencia inducida por micorrizas (MIR).
Esta resistencia se ha asociado con el reordenamiento metabólico y genético que ocurre debido a la
colonización de las raíces por HMA, lo que afecta el metabolismo primario y secundario de la planta [35]. La
alteración del metabolismo vegetal causada por los HMA puede aumentar la síntesis de algunas enzimas
de defensa y es el mecanismo más importante de resistencia fisiológica y bioquímica de las plantas. Se ha
demostrado que varias vías metabólicas de las plantas se alteran después de la colonización de las raíces
de AM, particularmente los alcoholes fenólicos y los derivados de oxilipina [35]. Aparentemente, la simbiosis
planta­HMA afecta la expresión genética de raíces y hojas [36], provocando cambios metabólicos en las
plantas [37]. Este resultado es consistente con lo descrito en plantas de lechuga, donde se demostró
simbiosis de AM con C. lamellosum y F. mosseae , mejorando la absorción de nutrientes y la capacidad
fotosintética y aumentando el mecanismo de defensa en las hojas de las plantas [21,38,39]. Chen et al.
(2013) [15] sugirieron que los AMF inducen eficazmente la acumulación de fenoles y flavonoides porque
son poderosos antioxidantes que actúan como eliminadores de radicales libres y agentes reductores. En
este estudio, para todos los genotipos de papa, los métodos con mayor actividad antioxidante fueron
CUPRAC y FRAP. Estas actividades tienen un gran poder antioxidante, que podría verse incrementado por
la asociación con HMA para los diferentes genotipos [25]. En un estudio similar donde se evaluó la actividad
antioxidante por el método FRAP en hojas de plantas de alcachofa inoculadas con C. claroideum, se
observó que la actividad antioxidante fue
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, 278 10 de 15

aumentado [40]. Además, Ruiz et al. (2019) [41] observaron una mayor actividad antioxidante en
frutos de F. ananassa utilizando el método TEAC en comparación con nuestros resultados, pero
se detectaron niveles más altos de antocianinas. Este resultado podría explicarse porque este
método refleja mejor la actividad antioxidante basada en antocianinas que en flavonoles y HCAD [41].
Nuestros resultados concuerdan con otros estudios en los que se determinaron las actividades de TEAC, DPPH
y CUPRAC en F. ananassa inoculada con C. claroideum, donde se observó un aumento en estas actividades
antioxidantes [24]. Sin embargo, Santander et al. (2020) [22] mostraron una disminución en las actividades
antioxidantes en plantas de lechuga inoculadas con C. claroideum, y asociaron una mayor acumulación de
compuestos fenólicos y actividades antioxidantes con el amarillamiento y el oscurecimiento de las hojas como
resultado de la senescencia de las hojas en plantas no inoculadas.
Nuestros datos muestran claramente un aumento en los metabolitos secundarios en las hojas de papa bajo
el efecto de fungicidas, particularmente bajo la inoculación con HMC26 y el fungicida ReflectXtra, que fue el
tratamiento que mostró los efectos más fuertes sobre las concentraciones de compuestos fenólicos y las
actividades antioxidantes. Este aumento en la síntesis de compuestos fenólicos y la actividad antioxidante debido
a las interacciones de los HMA y los fungicidas puede proporcionar una mayor tolerancia de las plantas de
Solanum tuberosum a la infección por hongos patógenos como Phytophthora infestans y Rhizoctonia spp. Los
componentes activos de ReflectXtra (isopirazam y azoxistrobina) se caracterizan por afectar la transferencia de
electrones a nivel mitocondrial, influir en el metabolismo y reducir el estrés oxidativo [42]; la combinación de
ambos componentes podría potenciar estas características, mostrando finalmente una mayor eficacia que el uso
de MONCUT, que contiene únicamente flutolanil. El fungicida ReflectXtra mostró un efecto positivo en las hojas
de plantas de Solanum tuberosum inoculadas con HMA en la mayoría de los tratamientos. Sin embargo, sería
interesante evaluar otros fungicidas con características similares en esta planta y analizar otros mecanismos que
podrían beneficiarse de la inoculación con HMA bajo el efecto de fungicidas en plantas y también en tubérculos
[19].

4. Materiales y métodos
4.1. Muestras
de plantas de Solanum tuberosum se cultivaron en macetas en un área abierta sometida a
condiciones ambientales pero bajo sombra artificial utilizando una malla al 50% fuera del
invernadero del Departamento de Ciencias Químicas y Recursos Naturales, Universidad de la
Frontera, Temuco, Chile. Papas Arcoiris Ltd.a proporcionó tres genotipos (VR808, CB2011­509 y
CB2011­104) con diferentes colores de piel y pulpa. (Puerto Varas, Chile). Cada genotipo fue
examinado en un experimento separado. Para el estudio se realizó un diseño factorial 4 × 3
completamente al azar con tres repeticiones. Los tratamientos consistieron en la inoculación con
tres HMA (CC: Claroideoglomus claroideum; HMC26: Claroideoglomus lamellosum, y HMC7:
Funneliformis mosseae, y un control sin inoculación de HMA) y la aplicación de dos fungicidas
comerciales (MONCUT 40 SC [M] y REFLECT®
XTRA [R] y uno sin aplicación de fungicida). Se aislaron F. mosseae y C. lamellosum de la
rizosfera de plantas Baccharis scandens (Ruiz y Pav.) (Asteraceae) en el Valle de Camiña,
Desierto de Atacama (Región de Tarapacá, norte de Chile), y el hongo C. claroideum de cultivos
agrícolas. suelos de la Región de la Araucanía (Chile) y se asoció con la rizosfera de plantas de
trigo. Todos ellos fueron identificados mediante análisis de PCR realizados para el ARN ribosómico
de la subunidad pequeña parcial (SSU) utilizando los cebadores NS31 y AML2 [29]. En todos los
casos, la reproducción de todas las especies de hongos MA se realizó en macetas trampa
utilizando Bidens pilosa como planta hospedante durante seis meses, este sustrato se utilizó
como inóculo de HMA. El inóculo del hongo AM se colocó en el sustrato de crecimiento debajo
del tubérculo en cantidades de 5 g por maceta (aproximadamente 700 esporas por gramo). La
microbiota no micorrízica se reconstituyó mediante la aplicación de 10 mL de un filtrado que
contenía 50 g cada uno de inóculo y suelo en 2000 mL de agua destilada estéril que se filtró a
través de papel de filtro Whatman No 1. La siembra se realizó el 12 de septiembre de 2019. Como
sustrato para las 108 macetas de 11 L se utilizó turba esterilizada, la cual fue esterilizada en
autoclave durante 20 min a 121 ◦C y 1 atm de presión. Todos los genotipos de hojas de papa se
cosecharon del 14 al 15 de enero de 2020 y se almacenaron inmediatamente a ­80 ◦C hasta su análisis.
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, 278 11 de 15

4.2. Identificación y Cuantificación de Compuestos Fenólicos

La identificación de fenólicos se llevó a cabo según lo descrito por Aguilera et al. 2020 [43],
con modificaciones menores. Primero, las muestras de hojas se sumergieron en nitrógeno líquido,
se trituraron 0,3 g y se agregaron 5 ml de disolvente de extracción (metanol:ácido fórmico 95:5 v:v)
en oscuridad. Posteriormente, las muestras se sonicaron con un procesador ultrasónico a 130 W
(Sonics and Materials, Connecticut, EE. UU.) durante 60 s al 40% de amplitud, se agitaron durante
30 min a 200 × g y finalmente se centrifugaron (Lab Companion, Corea) durante 10 min a 4000 ×
g. Finalmente, el sobrenadante se transfirió a otro tubo, protegido de la luz y almacenado a −20 ◦C
hasta que se realizaron las mediciones de antioxidantes. Para las determinaciones por HPLC, el
extracto se filtró con filtros de poro de 0,45 µm y se inyectó en viales de color ámbar.
Los análisis de HPLC se realizaron según el método descrito por Santander et al. (2020)
[22] utilizando cromatografía líquida de alto rendimiento con detección de matriz de diodos
(HPLC­DAD) equipada con una bomba cuaternaria (LC­20AT), una unidad desgasificada
DGU­20A5R, un horno CTO­20A, un muestreador automático SIL­20a y un detector de matriz
de diodos UV­visible (SPD­M20A) (Shimadzu, Tokio, Japón). La recopilación de datos se llevó a
cabo utilizando el software Lab Solutions (Shimadzu, Duisburg, Alemania). Las asignaciones de
identidad se realizaron utilizando un sistema HPLC­DAD acoplado a un espectrómetro de masas
QTrap3200 LC/MS/MS del sistema Applied Biosystem MDS Sciex (Foster City, CA, EE. UU.).
Los datos se recopilaron utilizando el software Analyst (v.1.5.2) (SCIEX, Woodlands Central
Indus. Estate, Singapur) para el análisis MS/MS . El método de separación cromatográfica para
la determinación de fenólicos, principalmente ácidos hidroxicinámicos y flavonoles, se realizó
con base en los métodos de Santander et al. (2020) [22], con modificaciones menores, utilizando
una columna Kromasil Classic­Shell C18 (100 × 4,6 mm, 2,5 µm) y una precolumna Novapak Waters C18
Las muestras se inyectaron a una temperatura de 40 ◦C y un caudal de 0,55 mL min­1. Las . El
fases móviles utilizadas fueron 92:3:5 (v:v:v) agua:acetonitrilo:ácido fórmico (fase móvil A) y 45
:50:5 (v:v:v) agua:acetonitrilo:ácido fórmico (fase móvil B) con un gradiente de elución de 6 a 30%
B en 10 min, 30 a 50% B en 9 min y 50 a 6% B en 2 min, seguido de 10 min de estabilización.
Las longitudes de onda de detección fueron de 320 nm para HCAD y 360 nm para flavonoles
utilizando ácido clorogénico y quercetina como estándares para la calibración externa, respectivamente.

4.3. Determinación de fenoles totales mediante el método de Folin­Ciocalteu

Los reactivos se agregaron en el siguiente orden a un microtubo: 15 µL de estándar o
extracto, 750 µL de agua desionizada, 75 µL de reactivo de Folin­Ciocalteu, 300 µL de carbonato
de sodio al 20% m/v y 360 µL de agua desionizada. . Las soluciones se incubaron a 20 ◦C
durante 30 min en oscuridad; Luego se agregaron 250 µL de la solución a una placa de 96
pocillos y se leyó la absorbancia a 750 nm [24]. Las pruebas se realizaron utilizando como
estándar ácido clorogénico, en el que las concentraciones de la curva de calibración
correspondieron a 100, 200,. 300, 400 y 500 mg L­1.

4.4. Determinaciones de actividad antioxidante

La actividad antioxidante equivalente de Trolox (TEAC) se basa en la decoloración del
catión radical ABTS+ en presencia de moléculas donadoras de electrones. El cromóforo se
produce por oxidación del 2,2­azino­bis­(3­etil)­benzotiazolina­6­ sulfonato (ABTS) de amonio
con persulfato de potasio, lo que produce un color azul intenso. Antes de su uso, la solución
debe ajustarse a una absorbancia de 0,7 (734 nm) mediante dilución con etanol o agua [44].
Se mezclaron en pocillos de microplacas un total de 245 µl de reactivo ABTS+ 7,5 mM
(absorbancia 1) y 5 µl de muestra o estándar Trolox. Luego las muestras se incubaron a 30
◦C durante 30 min (absorbancia 2). Posteriormente, las mediciones se realizaron a una
longitud de onda de 734 nm y los resultados se expresaron como equivalentes de Trolox [24].
Para la actividad antioxidante reductora del ion cúprico (CUPRAC), se añadió la siguiente
mezcla: 50 µL de CuCl2 10 mM, 50 µL de neocuproína 7,5 mM y 50 µL de tampón de acetato de
amonio 1 M a pH 7, a una placa de 96 pocillos y se incubaron. a 27 ◦C durante 15 min. Luego se
agregaron 100 µL de patrón o muestra Trolox y se incubaron durante 30 min a 27 ◦C. Las
determinaciones se realizaron a 450 nm y los resultados se expresaron como equivalentes de Trolox [45].
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, 278 12 de 15

La determinación de la actividad antioxidante utilizando DPPH se basó en la metodología

descrita por Maldonado et al., (2005) [46], con algunas modificaciones. Brevemente, se agregaron
240 µL de radical DPPH 0,1 mM disuelto en metanol a una placa de 96 pocillos, donde se leyó la
primera absorbancia. Luego se agregaron 10 µL de muestra o estándar y se incubaron durante 30
min en la oscuridad y se leyó la segunda absorbancia. Las mediciones se realizaron a 517 nm y los
resultados se expresaron como equivalentes de Trolox.
La determinación de la capacidad antioxidante mediante el ensayo de poder antioxidante
reductor férrico (FRAP) se realizó según lo descrito por Jiménez­Aspee et al. (2014) [47], con
algunas modificaciones. Brevemente, la solución FRAP se preparó mezclando tampón acetato 300
mM, TPTZ 10 mM y FeCl3 20 mM en una proporción v:v:v de 10:1:1. Luego se transfirieron 285
µL de solución FRAP calentada a 37 ◦C a una placa de 96 pocillos seguido de 15 µL de muestra o
estándar Trolox con un tiempo de incubación de 30 min a la misma temperatura y en oscuridad.
La absorbancia se midió a 593 nm. Los resultados se expresaron como equivalentes de Trolox.

4.5. Análisis estadístico

Antes del análisis de varianza (ANOVA) y cuando fue necesario para cumplir con los supuestos
de normalidad y homocedasticidad, todos los datos se transformaron utilizando la función ln, pero los
resultados se presentan en su escala de medición original. Los tratamientos con diferencias
significativas se analizaron utilizando Tukey HSD como prueba post hoc para comparar las medias
entre tratamientos. Los datos también fueron sometidos a un análisis de componentes principales
(PCA) para evaluar el efecto multivariado de los tratamientos establecidos y la relación entre las
variables experimentales. Para todos los procedimientos se consideró estadísticamente significativo
p < 0,05. Para los análisis se utilizó el software SPSS 22.0 (IBM Corp.).

5. Conclusiones
Este trabajo tuvo como objetivo analizar la inoculación de hongos micorrízicos arbusculares
(HMA) en tres genotipos de Solanum tuberosum con base en respuestas fisiológicas y metabólicas y
establecer los efectos que los fungicidas comunes utilizados en este cultivo tienen sobre los HMA.
Nuestros resultados mostraron claros efectos beneficiosos sobre el metabolismo secundario de las
hojas de las plantas, que dependían principalmente de la cepa de HMA y del fungicida utilizado. Este
resultado es de interés tecnológico porque la respuesta metabólica está representada por actividades
antioxidantes y perfiles de metabolitos secundarios, y el potencial antioxidante ha surgido como una
herramienta para describir la compatibilidad entre cepas y fungicidas de HMA específicos. Además,
el uso de diferentes fungicidas mostró claras diferencias, siendo ReflectXtra la alternativa que
incrementó notablemente el metabolismo secundario, principalmente en los tratamientos inoculados
con HMA. Los diferentes resultados obtenidos estuvieron relacionados con las diferentes
combinaciones de hongos, genotipo de papa y fungicida, que afectaron el contenido de compuestos
antioxidantes en la planta; En nuestras condiciones, la interacción entre C. lamellosum y el fungicida
ReflecXtra, para generar un perfil de metabolito secundario deseable, fue el mejor tratamiento para todos los g

Materiales complementarios: la siguiente información de respaldo se puede descargar en: https: //

www.mdpi.com/article/10.3390/plants11030278/s1, Figura S1: Concentraciones de compuestos fenólicos
por HPLC­DAD en hojas de Solanum tuberosum, genotipo CB2011­104 bajo inoculación de hongos
micorrízicos arbusculares y tratamientos fungicidas. Las medias seguidas de la misma letra minúscula
comparan la inoculación para el mismo fungicida y las letras mayúsculas comparan fungicidas dentro
de la misma condición de inoculación (Tukey 5%). (A) ácido 5­cafeoilquínico (pico 1), (B) isómero del
ácido cafeoilquínico (pico 2), (C) quercetina­pentósido­rutinósido (pico 5), (D) no identificado (pico 6),
(E) quercetina ­ rutinósido (pico 7), (F) kaempferol­rutinósido (pico 8). Figura S2: Concentraciones de
compuestos fenólicos por HPLC­DAD en hojas de Solanum tuberosum, genotipo CB2011­509 bajo
inoculación de hongos micorrízicos arbusculares y tratamientos fungicidas. Las medias seguidas de la
misma letra minúscula comparan la inoculación para el mismo fungicida y las letras mayúsculas
comparan fungicidas dentro de la misma condición de inoculación (Tukey 5%). (A) ácido 5­cafeoilquínico
(pico 1), (B) quercetina­3 glucosil­ rutinósido (pico 3), (C) quercetina­dihexósido (pico 4), (D) quercetina­
rutinósido (pico 7). Figura S3: Compuestos fenólicos por HPLC­DAD en hojas de Solanum tuberosum,
genotipo VR808 bajo inoculación de hongos micorrízicos arbusculares y tratamientos fungicidas. Medios seguidos
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, 278 13 de 15

Las letras comparan la inoculación para el mismo fungicida y las letras mayúsculas comparan fungicidas
dentro de la misma condición de inoculación (Tukey 5%). (A) ácido 5­cafeoilquínico (pico 1), (B) isómero
cafeoilquínico (pico 2), (C) quercetina­rutinósido (pico 7).

Contribuciones de los autores: Conceptualización, RA; metodología, VF y GT; software, PC y

PAAF; validación, VF y GT; análisis formal, VF, AR, CS y PC; investigación, FV; recursos, RA;
curación de datos, PC y PAAF; redacción: preparación del borrador original, VF y AR; redacción:
revisión y edición, AR, PC, CS y PAAF; visualización, RA; supervisión, RA; administración de
proyectos, AR; adquisición de financiación, AR y BC Todos los autores han leído y aceptado la
versión publicada del manuscrito.
Financiamiento: Esta investigación fue financiada por la Agencia Nacional de Investigación y Desarrollo (ANID, Chile) a través de las
subvenciones ANID/FONDECYT/1190585 y ANID/FONDAP/15130015.

Declaración de la Junta de Revisión Institucional: No aplicable.

Declaración de Consentimiento Informado: No aplicable.

Declaración de disponibilidad de datos: Los datos presentados en este estudio están disponibles previa solicitud al autor correspondiente.

Conflictos de intereses: Los autores declaran no tener ningún conflicto de intereses.

Referencias
1. FAOSTAT. Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura [en línea]. 2019. Disponible en línea: http://www.fao.org/
faostat/es/#datos (consultado el 25 de octubre de 2021).
2. Zarzecka, K.; Gugala, M.; Sikorska, A.; Mystkowska, I.; Baranowska, A.; Niew ˛egłowski, M.; Doł ˛ega, H. El efecto de herbicidas y bioestimulantes sobre el contenido de
polifenoles de los tubérculos y hojas de papa (Solanum tuberosum L). J. Sociedad Saudita. Agrícola. Ciencia. 2019, 18, 102­106. [Referencia cruzada]

3. Koch, M.; Naumann, M.; Pawelzik, E.; Gransee, A.; Thiel, H. La importancia del manejo de nutrientes para la producción de papa Parte
I: Nutrición y rendimiento vegetal. Patata Res. 2020, 63, 97­119. [Referencia cruzada]
4. Akyol, H.; Riciputi, Y.; Capanoglu, E.; Caboni, MF; Verardo, V. Compuestos fenólicos en la papa y sus subproductos:
Una visión general. En t. J. Mol. Ciencia. 2016, 17, 835. [Referencia cruzada] [PubMed]
5. Agu, KC; Okolie, PN Composición aproximada, análisis fitoquímico y potencial antioxidante in vitro de extractos de Annona
muricata (guanábana). Ciencia de los alimentos. Nutrición. 2017, 5, 1029–1036. [Referencia cruzada]

6. Murniece, I.; Kruma, Z.; Skrabule, I.; Vaivode, A. Carotenoides y fenoles de variedades de papa cultivadas orgánica y convencionalmente . En t. J. química. Ing. Aplica. 2013, 4,
342–348. [Referencia cruzada]
7.Ruiz , A.; Aguilera, A.; Ercoli, S.; Parada, J.; Winterhalter, P.; Contreras, B.; Cornejo, P. Efecto del proceso de fritura sobre la composición de derivados del ácido hidroxicinámico
y actividad antioxidante en patatas de color carne. Química de los alimentos. 2018, 268, 577–584.
[Referencia cruzada]

8. André, CM; Hausman, JF; Guerriero, G. Cannabis sativa: La planta de las mil y una moléculas. Frente. Ciencia vegetal. 2016, 7, 19. [Referencia cruzada] [PubMed]

9. Mazur, J.; Roy, K.; Shigdar, S.; Kanwar, JR Eficacia de flavonoides prometedores de los géneros Festuca, Lonicera y Acacia contra el glioblastoma multiforme; potencial para las
Cordilleras Dandenong. En Avances y vías en el desarrollo de nuevos portadores de bioactivos y agentes biológicos; Elsevier: Ámsterdam, Países Bajos, 2020; págs. 383–
422. [Referencia cruzada]
10. Baur, S.; Frank, S.; Hauslader, H.; Huckelhoven, R.; Hofmann, T.; Eisenreich, W.; Dawid, C. Biosíntesis de α­solanina y α­chaconina en hojas de papa (Solanum tuberosum L.):
un estudio de 13CO2 . Química de los alimentos. 2021, 365, 130461. [CrossRef] [PubMed]
11. Nafady, NA; Hashem, M.; Hassan, EA; Ahmed, HA; Alamri, SA El efecto combinado de las micorrizas arbusculares y las levaduras promotoras del crecimiento de las plantas
mejora la defensa del girasol contra las enfermedades de Macrophomina Phaseolina. Biol. Control. 2019, 138, 104049.
[Referencia cruzada]

12. Fu, SF; Sol, PF; Lu, HY; Wei, JY; Xiao, SA; Colmillo, WT; Cheng, POR; Chou, JY Rasgos de levaduras que promueven el crecimiento vegetal aislados
de la filosfera y rizosfera de Drosera spatulata. Biol de hongos. 2016, 120, 433–448. [Referencia cruzada]
13. Shrivastava, G.; Ownley, BH; Auge, RM; Toler, H.; Dee, M.; Vu, A.; Kollner, TG; Chen, F. La colonización por micorrizas
arbusculares y hongos endófitos mejoró la producción de terpenos en plantas de tomate y su defensa contra un insecto herbívoro.
Simbiosis 2015, 65, 65–74. [Referencia cruzada]
14. Sharma, IP; Sharma, AK Cambios fisiológicos y bioquímicos en el cultivar de tomate PT­3 con inoculación dual de micorrizas
y PGPR contra el nematodo agallador. Simbiosis 2017, 71, 175–183. [Referencia cruzada]
15. Chen, S.; Jin, W.; Liu, A.; Zhang, S.; Liu, D.; Wang, F.; Él, C. Los hongos micorrízicos arbusculares (HMA) aumentan el crecimiento y la secundaria.
Metabolismo en pepino sometido a estrés por bajas temperaturas. Ciencia. Hortico. 2013, 160, 222–229. [Referencia cruzada]
16. Li, F.; Christensen, MJ; Gao, P.; Li, Y.; Duan, T. Un hongo micorrízico arbuscular y Epichloë festucae var. lolii reduce la incidencia de la enfermedad Bipolaris sorokiniana y
mejora el crecimiento del raigrás perenne. Micorrizas 2018, 28, 159–169. [Referencia cruzada] [PubMed]
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, 278 14 de 15

17. Cho, KS; Cheon, KS; Hong, SY; Cho, JH; Soy, JS; Mekapogu, M.; Park, TH Secuencias completas del genoma del cloroplasto de Solanum commersonii y su aplicación al genotipo del
cloroplasto en híbridos somáticos con Solanum tuberosum. Representante de células vegetales.
2016, 35, 2113–2123. [Referencia cruzada] [PubMed]
18. Tarwackaa, J.; Polkowska­Kowalczyka, L.; Kolano, B.; Sliwka, J.; Wielgat, B. Híbridos matic interespecíficos Solanum villosum (+) S. tuberosum, resistentes a Phytophthora infestans. J. Fisiol
vegetal. 2013, 170, 1541–1548. [Referencia cruzada]
19. Alarcón, S.; Tereucán, G.; Cornejo, P.; Contreras, B.; Ruiz, A. Efectos metabólicos y antioxidantes de la inoculación con hongos micorrízicos arbusculares en cultivos de Solanum tuberosum
color carne tratados con fungicidas. J. Ciencias. Agricultura alimentaria. 2021. [Referencia cruzada]
[PubMed]
20. Zocco, D.; Fuente, J.; Lozanova, E.; Renard, L.; Bivort, C.; Durand, R.; Grandmougin­Ferjani, A.; Declerck, S. Efectos de dos fungicidas inhibidores de la biosíntesis de esteroles (fenpropimorf
y fenhexamida) sobre el desarrollo de un hongo micorrízico arbuscular.
Micol. Res. 2008, 112, 592–601. [Referencia cruzada]
21. Hage­Ahmed, K.; Rosner, K.; Steinkellner, S. Hongos micorrízicos arbusculares y su respuesta a los pesticidas. Manejo de plagas. Ciencia. 2019,
75, 583–590. [Referencia cruzada]

22. Santander, C.; Ruíz, A.; García, S.; Aroca, R.; Cumming, J.; Cornejo, P. Eficiencia de dos inóculos de hongos micorrízicos arbusculares para mejorar la tolerancia al estrés salino en plantas de
lechuga mediante cambios en los mecanismos de defensa antioxidantes. J. Ciencias. Agricultura alimentaria. 2020, 100, 1577–1587. [Referencia cruzada]

23. Rivero, J.; Álvarez, D.; Flores, V.; Azcón­Aguilar, C.; Pozo, MJ La plasticidad metabólica de la raíz subyace a la diversidad funcional en la tolerancia al estrés mejorada por micorrizas en el
tomate. Nuevo fitol. 2018, 220, 1322–1336. [Referencia cruzada]
24. Parada, J.; Valenzuela, T.; Gómez, F.; Tereucán, G.; García, S.; Cornejo, P.; Winterhalter, P.; Ruiz, A. Efecto de la fertilización y la inoculación de hongos micorrízicos arbusculares sobre los
perfiles y actividades antioxidantes en el fruto de Fragaria ananassa. J. Ciencias. Agricultura alimentaria. 2019, 99, 1397–1404. [Referencia cruzada] [PubMed]

25. Avio, L.; Sbrana, C.; Giovannetti, M.; Frassinetti, S. Los hongos micorrízicos arbusculares afectan el contenido de fenólicos totales y los antioxidantes.
Actividad en hojas de variedades de lechuga hoja de roble. Ciencia. Hortico. 2017, 224, 265–271. [Referencia cruzada]
26. Pandino, G.; Lombardo, S.; Antonio, LM; Ruta, C.; Mauromicale, G. La micropropagación in vitro y el tratamiento con micorrizas influyen en el perfil del contenido de polifenoles de la alcachofa
en condiciones de campo. En t. Res. alimentaria. J. 2017, 99, 385–392. [Referencia cruzada]
[PubMed]

27. Chen, J.; Zhang, H.; Zhang, X.; Tang, M. La simbiosis de micorrizas arbusculares alivia el estrés salino en la langosta negra mediante la mejora de la fotosíntesis, el estado hídrico y la
homeostasis de K+/Na+. Frente. Ciencia vegetal. 2017, 8, 1739. [Referencia cruzada] [PubMed]
28. Sbrana, C.; Avio, L.; Giovannetti, M. Simbiontes de micorrizas beneficiosos que afectan la producción de fitoquímicos que promueven la salud.
cal. Electroforesis 2014, 35, 1535­1546. [Referencia cruzada]
29. Santander, C.; Aroca, R.; Cartes, P.; Vidal, G.; Cornejo, P. Las acuaporinas y los transportadores de cationes están regulados diferencialmente por dos cepas de hongos micorrízicos
arbusculares en cultivares de lechuga que crecen en condiciones de salinidad. Fisiol vegetal. Bioquímica. 2021, 158, 396–409. [Referencia cruzada]

30. Río, JA; Gómez, P.; Báidez, A.; Fuster, MD; Ortuño, A.; Frias, V. Los compuestos fenólicos desempeñan un papel en el mecanismo de defensa que protege a la vid contra los hongos implicados
en la enfermedad de Petri. Fitopatol. Mediterr. 2004, 43, 87–94. [Referencia cruzada]
31. Clough, JM Las estrobilurinas, oudemansinas y mixotiazoles, derivados fungicidas del ácido beta­metoxiacrílico. Nat. Pinchar. Reps.
1993, 10, 565–574. [Referencia cruzada]

32. Bartlett, DW; Clough, JM; Godwin, JR; Salón, AA; Hamer, M.; Parr­Dobrzanski, B. Los fungicidas de estrobilurina. Manejo de plagas. Ciencia.
2002, 58, 649–662. [Referencia cruzada]

33. Schiavon, M.; Petelewicz, P.; Orlinski, PM; Baird, JH Efectos de los fungicidas sobre la salud del bentgrass rastrero y las características de enraizamiento bajo estrés abiótico. En t. Sociedad
de césped. Res. J. 2021, 1–9.
34. Nwankno, AJ; Gordon, SL; Verrall, SR; Brennan, RM; Hancock, RD El tratamiento con fungicidas influye en los fitoquímicos
Calidad del jugo de grosella negra. Ana. Aplica. Biol. 2012, 160, 86–96. [Referencia cruzada]
35. Rivero, J.; Gamir, J.; Aroca, R.; Pozo, MJ; Flors, V. Transición metabólica en raíces de tomate micorrizadas. Frente. Microbiol. 2015, 6, 598.
[Referencia cruzada] [PubMed]

36. López­Ráez, JA; Verhage, A.; Fernández, I.; García, JM; Azcón­Aguilar, C.; Flores, V.; Pozo, MJ Los perfiles hormonales y transcripcionales resaltan las respuestas comunes y diferenciales
del huésped a los hongos micorrízicos arbusculares y la regulación de la vía de la oxilipina. J. Exp. Bot. 2010, 61, 2589–2601. [Referencia cruzada] [PubMed]

37. Schweiger, R.; Baier, MC; Persicke, M.; Müller, C. Alta especificidad en las respuestas metabólicas de las hojas de las plantas a las micorrizas arbusculares.
Nat. Comunitario. 2014, 5, 3886. [Referencia cruzada]

38. Aroca, R.; Ruiz­Lozano, JM; Zamarreño, AM; Paz, JA; García­Mina, JM; Pozo, MJ; López­Ráez, J. M; La simbiosis de micorrizas arbusculares influye en la producción de estrigolactona en
condiciones de salinidad y alivia el estrés salino en las plantas de lechuga. J. Integral. Biol vegetal. 2013, 170, 47–55. [Referencia cruzada]

39. Santander, C.; Sanhueza, M.; Olave, J.; Borie, F.; Valentín, A.; Cornejo, P. La colonización de micorrizas arbusculares promueve la tolerancia al estrés salino en plantas de lechuga mediante
una modificación eficiente del equilibrio iónico. J. Ciencia del suelo. Nutrición vegetal. 2019, 19, 321–331.
[Referencia cruzada]

40. Avio, L.; Maggini, R.; Ujvári, G.; Incrocci, L.; Giovannetti, M.; Turrini, A. El contenido de fenol y la actividad antioxidante en las hojas de dos cultivares de alcachofa se ven afectados de manera
diferencial por seis simbiontes micorrícicos. Ciencia. Hortico. 2020, 264, 109153. [Referencia cruzada]
Machine Translated by Google

Plantas 2022, 11, 278 15 de 15

41. Ruiz, A.; Sanhueza, M.; Gómez, F.; Tereucán, G.; Valenzuela, T.; García, S.; Hermosín­Gutiérrez, I. Cambios en el contenido de antocianinas, flavonoles y
actividad antioxidante en Fragaria ananassa var. Frutos de Camarosa bajo fertilización tradicional y orgánica. J. Ciencias. Agricultura alimentaria. 2019, 99,
2404–2410. [PubMed]
42. Ajigboye, OO; Murchie, E.; Ray, RV La aplicación foliar de isopirazam y epoxiconazol mejora la eficiencia del fotosistema II.
biomasa y rendimiento en trigo de invierno. Bioquímica pesticida. Fisiol. 2014, 114, 52–60. [Referencia cruzada] [PubMed]
43. Aguilera, A.; Tereucán, G.; Ercoli, S.; Cornejo, P.; Gómez, MR; Uhlmann, L.; Ruiz, A. Influencia de la fertilización orgánica y química en los perfiles y actividades
de los compuestos antioxidantes en frutos de Fragaria ananassa var. Camarosa. J. Ciencia del suelo. Nutrición vegetal.
2020, 1–10. [Referencia cruzada]

44. Huang, D.; Oh, B.; Anterior, RL La química detrás de los ensayos de capacidad antioxidante. J. Agrícola. Química de los alimentos. 2005, 53, 1841–1856.
[Referencia cruzada] [PubMed]

45. Ribeiro, JP; Magalhaes, LM; Reis, S.; Lima, JL; Segundo, MA Ión cúprico total de alto rendimiento que reduce la capacidad antioxidante de muestras biológicas
determinada mediante análisis de inyección de flujo y métodos basados en microplacas. Anal. Ciencia. 2011, 27, 483. [Referencia cruzada]
[PubMed]
46. Maldonado, PD; Rivero­Cruz, I.; Mata, R.; Pedraza­Chaverrí, J. Actividad antioxidante de proantocianidinas tipo A de Geranium niveum (Geraniaceae). J. Agrícola.
Química de los alimentos. 2005, 53, 1996–2001. [Referencia cruzada] [PubMed]
47. Jiménez­Aspee, F.; Quispe, C.; Soriano, M.; del Pilar, M.; Fuentes González, J.; Hüneke, E.; Teoduloz, C.; Schmeda­Hirschmann, G.
Actividad antioxidante y caracterización de constituyentes en frutos de copao (Eulychnia acida Phil., Cactaceae) mediante HPLC–DAD–MS/MSn.
En t. Res. alimentaria. J. 2014, 62, 286–298. [Referencia cruzada]