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ESTRUCTURA BACTERIANA

ESTRUCTURA CITOPLASMICA
NUCLEOIDE
• En las células procariotas el ADN es una molécula única, generalmente circular y
filiforme, multiforme (cerrada) y de doble filamento.
• No implica la presencia de membrana nuclear.
• Este sistema sirve para guardar la información genética, contrasta con el sistema
existente en células eucariotas, donde el ADN se almacena dentro de un orgánulo con
doble membrana llamado núcleo
• El ADN del cromosoma no solo se condensa sino que también se organiza
funcionalmente de manera compatible con todos los procesos del ADN: la
replicación, la recombinación, la segregación y la transcripción.
• Las bacterias poseen un grupo de proteínas que se unen al ADN, conocidas como
proteínas asociadas a nucleoides (NAP en inglés) que son análogas en su función, a las
histonas de los eucariotas.
• Las poliaminas se encuentran asociadas con ribosomas y membranas. Las principales
son: Putrescina y Espermidina, ejercen un efecto antimutagénico, impiden la
disociación de los ribosomas 70S en sus componentes 30S y 50S y aumentan la
resistencia de los protoplastos a la lisis osmótica.
• Proteínas simil Histonas se ha encontrado en pequeña cantidad en asociación con el
ADN de E. coli
Citoplasma Bacteriano

• Esta limitado por la membrana citoplasmática, y en


el se encuentran las inclusiones celulares. En un
principio considerado una "solución" homogénea
de proteínas, los métodos de fraccionamiento
acoplados a los estudios bioquímicos y de
microscopía electrónica mostraron la complejidad
del sistema. En realidad esta atravesado por
numerosas membranas que lo
compartimentalizan, si bien esta
compartimentalización no es tan desarrollada
como en eucariotas.
Membranas
intracitoplasmática
• En muchas bacterias la membrana rodea al citoplasma sin
pliegues ni invaginaciones, en otras está invaginada y atraviesa
el citoplasma (bacterias fototrofas como Chromatium o
Rhodospirillum).
• El crecimiento e invaginación de la membrana citoplasmática
rellena la luz de las bacterias fotosintetizadoras originando
tubos y vesículas (cuando se rompen las bacterias aparecen
como vesículas aisladas que reciben el nombre de
"cromatóforos"). En otras bacterias fotosintetizadoras las
vesículas están aplanadas y se apilan ordenadamente y, al igual
que en las vesículas de los cloroplastos de las plantas verdes, se
denominan tilacoides.
• Las membranas fotosintetizadoras son similares a la
citoplasmática y en ella se encuentran las bacterioclorofilas y
los carotenoides que intervienen en la fotosíntesis. También se
encuentran aquí los componentes del sistema fotosintético de
transportes de electrones y de la fosforilación.
RIBOSOMA
BACTERIANO
• Son las estructuras celulares donde se sintetizan las proteínas.
• Se encuentran en el citoplasma bacteriano y al microscopio electrónico se
presentan como partículas de unos 16 x 18 nm.
• Los ribosomas pueden disociarse en una subunidad grande (50S) y
una subunidad pequeña (30S)que unidas forman el ribosoma 70 S.
• Los 20,000 ribosomas de una célula bacteriana constituyen cerca de una
cuarta parte de todo su volumen.
• Los ribosomas pueden disociarse en una subunidad grande (50S) y una
subunidad pequeña (30S)que unidas forman el ribosoma 70 S.
• En la constitución del ribosoma intervienen proteínas y ARNr (r por
ribosómico), del 80 al 85% del ARN bacteriano está en los ribosomas.
• Son la parte principal ("core" ) de los ribosomas y posiblemente la clave
del mecanismo de traducción de las proteínas.
• Se conocen tres tipos : 5S y 23S pertenecientes a la unidad 50S y el 16S
de la unidad 30S , su estudio comparativo llevó a postulación de un Árbol
Filogenético Universal.
• Durante la síntesis proteica en las microfotografías electrónicas se
observan cadenas de ribosomas ordenados regularmente. Se trata de
ribosomas alineados a lo largo del filamento de ARNm ( m por mensajero,
los polirribosomas o polisomas
• Diferente Eucariotes S(40, 60) 80S
PLASMIDOS
Son moléculas extracromosomicas
circulares mas corta de ADN.
Gramnegativos.
No son esenciales para la supervivencia.
R antibióticos.
ESTRUCTURA membrana CITOPLASMICA
• La estructura de la membrana bacteriana es similar a la de plantas y animales, es por ello que se habla para ellas de una "me mbrana elemental ".
Puede aislarse utilizando lisozima mediante shock osmótico.
• Esta compuesta primariamente de proteínas y fosfolípidos (cerca de 3:1). Realiza numerosas funciones que incluyen las de tran sporte, biosíntesis
y transducción de energía
• Las membranas procarióticas, a diferencia de las de eucariotas, carecen de esteroles (excepto Oxyphotobacteria, ciertas bact erias metilotrofas y
los Mollicutes). Pero en cambio, en muchas bacterias existe una peculiar clase de compuestos policíclicos, denominados hopanoides
(triterpenoides pentacíclico) que parecen condicionar parte de la rigidez de las membranas citoplásmicas.
• En arqueobacterias, que presentan en lugar de los habituales lípidos a base de ésteres de ácidos grasos con glicerol, existe n lípidos a base de
éteres de alcoholes de cadena larga con glicerol (p. ej., difitanil-glicerol-diéteres).Los alcoholes suelen ser derivados poliisoprenoides. Este tipo de
membranas son más rígidas que las de eubacterias.
• No esteroides(colesterol)excepto Micoplasma
• Es la barrera osmótica de la célula
• Es sede de los sistemas de transporte activo y de las permeasas específicas
• En la membrana (o junto a ella) se encuentran las enzimas y componentes del
transporte de electrones y fosforilación oxidativa (recordemos que en eucariotas las
mismas están en las mitocondrias)
• Allí se realiza la síntesis de componentes de la pared celular y de las cápsulas
• Lugar de excreción de exoenzimas
• Sede del centro de replicación del ADN
• Punto de anclaje de los flagelos
• Transporte y producción de E (mitocondrias)
• Las proteínas de transporte que permite la captación de metabolitos y liberación de La membrana están compuestas aproximadamente por 60 -
70% de proteínas, 30 - 40% de lípidos y pequeñas
otras sustancias. cantidades de hidratos de carbono. Los constituyente
• Cara interna Membrana tapizada de filamentos proteicos tipo actina (forma bacteria) principales son las fosfatidiletanolaminas 75%,
y el lugar formación del tabique en división celular. fosfatidilglicerol 20% y glucolípidos. La colina, esfingolípidos,
• Filamentos (espiroquetas: Treponema) ácidos grasos poliinsaturados y esteroides son raros.
ESTRUCTURA PARED BACTERIANA
PARED
GRAMPOSITIVA
Está constituida
principalmente por cadenas
de peptidoglucano, a
menudo unidas por puentes
peptídicos .
Contienen gran cantidad de
ácidos teicocos (polímeros
de glicerol y ribitol unidos
por grupos fosfato y
aminoácidos como D-
alanina o azúcares como
glucosa
Estructura del ácido teicoco
Esta constituido por fosfato glicerol y una
cadena lateral, R.
Donde R puede representar
D-alanina, Glucosa u otras moléculas.
PARED GRAM-
NEGATIVA

A. La membrana externa
Sirve como membrana de permeabilidad selectiva, mantiene afuera a sustancias hidrófobas y hidrófilas. Por encima de cierto
tamaño y retiene las proteínas periplásmicas.
La membrana exterior es una típica capa doble de fosfolípidos en la cual los fosfolípidos de la capa más externa han sido
sustituidos por moléculas de LPS.

B. Porinas
Halladas en la membrana externa, con PM 35,000
Forman los poros transmembrana o canales de difusión que permite el pasaje de pequeñas moléculas hidrófilas a través de la
membrana externa.
C. Lipoproteína
Proteína más abundante en las células Gramnegativas
Función: estabiliza la membrana externa y anclarla a la capa de
peptidoglucano.
D. LPS
Conocido como lípido A, consiste en unidades del disacárido de glucosamina fosforilada que tiene
unidos varios ácidos grasos de cadena larga.
Es termoestable, letalmente tóxico, pirogénico.
E. Protoplasto y Esferoplasto
La capa de glucopéptidos de la pared celular puede
eliminarse mediante hidrólisis con lisozimas, pero es
estabilizada en soluciones hipertónicas de sacarosa.
- Protoplasto, cuando se libera un cuerpo esférico sin
pared osmóticamente sensible, Grampositivas.
- Esferoplasto, cuando hay retención de la cubierta
celular se denomina esferoplasto (Gramnegativas).

F. Periplasma o espacio periplásmico


Es el espacio que aparece entre la membrana plasmática y la membrana externa, se observa fácilmente en
(Gramnegativas), con dificultad en Grampositivas., debido a las altas presiones osmóticas internas de las
bacterias Grampositivas 8 - 20 atm en comparación con la Gramnegativas 3 a 5 atm.
DIFERENCIAS ENTRE GRAMPOSITIVAS Y
GRAMNEGATIVAS
GRAMPOSITIVAS
Producción de polisacáridos
conocidos como ácidos teicocos,
una capa de la pared celular
relativamente gruesa, contigua y
que recubre la membrana
plasmática.

GRAMNEGATIVAS
Presentan 3 capas de envoltura distintas, dispuestas de manera laxa, estas incluyen
• La membrana externa (ME), convoluta, arrugada con surcos u ondulante, que contiene el
antígeno O somático conocido como lipopolisacárido LPS,
• Una capa densa intermedia, y
• La membrana plasmática interna. Un espesor de 0.0075 um.
DIFERENCIAS DE LA PARED CELULAR DE
GRAMPOSITIVAS, GRAMNEGATIVAS Y MICOPLASMA

Grampositiva Gramnegativa Micoplasma


PARED CELULAR
Encontrada en todas las bacterias. Excepto en Micoplasmas
Protege a la célula de los medios de baja presión osmótica y mantiene la forma.
Esta compuesta por un glucopéptido único para las bacterias.
El espesor oscila 0.150 um y 0.500 um de espesor, pudiendo incluso alcanzar 0.8 um (Lactobacillus). Las paredes
de las células jóvenes son más delgadas que las células de cultivo antiguo.
PARED CELULAR MYCOBACTERIUM
PARED CELULAR MYCOBACTERIUM
Otras estructuras diferenciales
Corpusculos metacromaticos
(granulos citoplasmaticos)
El glucógeno es el principal material de almacenamiento de las
bacterias entéricas y constituye el 40% del peso.
Mientras que algunas especies de Bacillus y Pseudomonas acumulan
un 30% como poli--hidroxibutarato
Los polímeros de alto peso molecular (polifosfatos) como el
polihexametafosfato conocidos como granulos metacromáticos o
volutina se producen en especies de Corynebacterium, Yersinia
pestis y especies de Mycobacteria. Estos gránulos de volutina se ven
rojo rosáceo cuando se tiñen con azul de metileno.
Los gránulos identificados por procedimientos de tinción adecuados
indican la acumulación de reservas de alimentos, incluyendo
polisacáridos, lípidos o polifosfatos.
El número y el tipo de gránulos de almacenamiento varía con el
medio y el estado funcional de las células.
COLORACION DE
LOEFFER
Reactivos
• Azul metileno alcalino de Loeffer

Procedimiento
• Hacer el frotis y fijar a la llama
• Colorear con reactivo de Loeffer por 30 seg
• Lavar con agua
• Secar suavemente a la llama
• Observar 100X
• Los gránulos metacromáticos son coloreados por el azul de metileno
• Y se ve azul intenso
• El cuerpo bacteriano se ve azul claro
COLORACION DE ALBERT
Reactivos
• Albert (azul toluidina, verde malaquita)

Procedimiento
• Hacer el frotis y fijar a la llama
• Colorear con reactivo de Albert por 5 min
• Lavar con agua
• Colocar Lugol por 1 min
• Lavar con agua
• Secar suavemente a la llama
• Observar 100X
• Los gránulos metacromáticos son coloreados por el colorante Albert y se ven Verde oscuro
• El cuerpo bacteriano se ve verde claro
Esporas

FUNCIONES
• Protege el ADN del genoma
bacteriano del calor intenso, la
irradiación y la acción de la mayoría
de enzimas y sustancias químicas.
• Son tan resistentes a los factores
ambientales que pueden
mantener su viabilidad
• las esporas son difíciles de
descontaminar con los
desinfectantes convencionales
• Es una estructura deshidratada formada por
múltiples capas que protege a la bacteria y le
permite vivir en un «estado de latencia»
• Contiene una copia completa del
cromosoma bacteriano,
• Concentraciones mínimas ribosomas y
proteínas esenciales
• Elevada concentración de calcio unido a
ácido dipicolínico.
• Posee una membrana interna
• Dos capas de peptidoglucano
• Una capa proteica semejante a la queratina
externa.
La formación de endosporas es un rasgo distintivo de la familia
Bacillaceae, que incluye al género aerobio, Bacillus y el género
anaerobio Clostridium.
Bacterias de suelos son capaces de formar esporas.

En condiciones ambientales adversas, como la desaparición de un


nutriente, estas bacterias pasan de un estado vegetativo
a un estado de latencia o de espora.

Cuando la endospora es colocada en condiciones ambientales favorables en


presencia de algún estímulo particular (presencia de una aminoácido particular,
hidrato de carbono o agua) se produce su germinación.
• El agotamiento de nutrientes • Los ARNm de la espora comienzan a
específicos (p. Ej., Alanina) en el transcribirse al tiempo que otros
medio de crecimiento desencadena ARNm dejan de hacerlo.
una cascada de procesos genéticos • Se produce ácido dipicolínico y se
que ocasiona la producción de una eliminan antibióticos y toxinas.
espora.

Transformación de las esporas en el estado


El proceso de germinación ocurre vegetativo
en tres etapas
se estimula por alteración de la continuidad de la capa
externa´por factores mecánicos, pH, calor, agua y un
activación nutriente desencadenante (alanina). El proceso clasificación,
estructura y replicación de bacterias dura 90 min

iniciación Se degrada la corteza de la espora y liberan material peptidoglicano, Calcio y el


ácido dipicolínico. Comienza la síntesis del RNA, luego síntesis de proteínas y,
finalmente, la síntesis de DNA. El resultado es una nueva célula vegetativa.

La espora capta agua, se hincha, pierde sus capas y produce una nueva
célula vegetativa que es idéntica a la célula original, finaliza todo el ciclo.
excrecencia
• Duplicación del cromosoma, una copia de ADN y los contenidos
citoplásmicos (región central o núcleo) son rodeados por la
membrana citoplásmica, el peptidoglucano y la membrana del
tabique.
• El ADN queda recubierto por las dos capas de membrana y el
peptidoglucano que normalmente dividiría a la célula.

• Estas dos capas están rodeadas por la corteza formada por una capa delgada
interna de peptidoglucano rígido entrecruzado que rodea membrana
citoplásmica (laxa) y capa externa de peptidoglucano.
• La corteza se rodea de una dura capa proteica semejante a la queratina que
protege a la espora. La duración del proceso es de 6 a 8 h

La espora capta agua, se hincha, pierde sus capas y


produce una nueva célula vegetativa idéntica a la célula
original, finaliza todo el ciclo.

Iniciada la germinación, deterioro de la envoltura, la espora


se debilita, se hace vulnerable y se puede inactivar de forma
semejante a cualquier otra bacteria
Bajo ciertas condiciones ambientales como: Agotamiento de nutrientes (glucosa,
nitrógeno o fosfato) o temperaturas o potenciales redox subóptimos, el material
nuclear se divide en dos nucleoides, y uno se separa del otro por un septo
membranoso.
El septo crece y el centro de la espora termina rodeado por una doble membrana.
Entre las dos membranas, una capa cortical se deposita sobre ellas.
Esta corteza consta principalmente de material peptidoglicano.
La capa cortical se endurece y acumula iones calcio debido a la actividad quelante de
una molécula singular llamada ácido dipicolínico.
ENDOSPORAS
El centro queda protegido por la alta concentraciónBACTERIANAS
de iones calcio que entrecruzan fuertemente el material
peptidoglicano y toda el agua contenida en la espora es expulsada.
Varias capas de la cubierta de la espora (una sustancia de tipo queratina que es rica en enlaces disulfuro) se
depositan y la espora es liberada en el momento en que muere y se lisa la célula madre vegetativa. Las
endoporas pueden permanecer por durante períodos prolongados.
El tamaño, la forma y la localización de las esporas incipientes en células en fase estacionaria de
especies Clostridium y Bacillus es útil para la caracterización e identificación ciertas especies

FORMA
Las endosporas pueden ser esféricas u ovales y
pueden o no hinchar la célula.

Según su localización en la célula,


se distinguen tres tipos de esporas

Subterminales Terminales

Centrales
Las endosporas generalmente no se tiñen por el método de Gram
y aparecen cuerpos refractarios, no teñidos en los extendidos.
A. ENDOSPORAS CENTRALES
Están situadas en el centro de la célula.
B. ENDOSPORAS SUBTERMINALES
Se encuentran próximas al extremo. Bacilos grampositivos
sobrecoloreados con endosporas subterminales.
Característico del Bacillus y Clostridium.
La diferencia se realiza en base a que el Bacillus es aerobio o
anaerobio facultativo y el Clostridium es anaerobio obligado.
C. ENDOSPORAS TERMINALES
Se encuentran situadas en el extremo. Clostridium tetani
MORFOLOGIA MICROSCOPICA Y
REACCIONES TINTORIALES
TINCION DE LAS ESPORAS
Las esporas son la forma de resistencia de las bacterias. Tienen forma
esférica u oval. Al microscopio, las esporas sin teñir se observan como
gránulos brillantes.
Se tiñen con verde malaquita o carbolfucsina y en suspensiones de bacterias
sin teñir se observan como cuerpos refringentes intracelulares.
Ej: Clostridium
BACTERIAS
A. TINCION DE GRAM:
Las bacterias se tiñen de color
violeta, mientras que las esporas no se
colorean dejando espacios vacíos.

B. TINCION DE WIRTZ CONKLIN


Las esporas se habrán teñido de
verde y las células bacterias de color rojo
BACTERIAS

C. TINCION DE MOELLER
Las esporas se habrán teñido de rojo o
rosado y las bacterias azules.
PROCEDIMIENTO
1.- Frotis. Secar
2.- Fijar con alcohol absoluto, escurrir el alcohol
y arder el resto.
3.- Lavar. Tratar con ác. Crómico 5 min. Lavar.
4.- Cubrir con fuscina fenicada de Ziehl. Calentar 10 min.
5.- Decolorar con ác. Sulfúrico 5/100 Alcohol.
6.- Lavar. Colorear con azul de metileno dil. 1 min.
7.- Lavar. Secar y observar.

ESPORAS: ROJAS OTRAS EST


Flagelos
PROTEUS
• Son unos propulsores en forma de cuerda que están formados por E.COLI
unas subunidades proteicas enrolladas helicoidalmente (flagelina);
• Se unen a las membranas de las bacterias mediante unas estructuras
(gancho y cuerpo basal) y se impulsan por el potencial de membrana
• Están compuestos de un motor de proteínas activado por ATP SHIGELLA
conectado con un propulsor en forma de látigo compuesto de MIO
múltiples subunidades de flagelina.
SIM

FUNCIONES
• Proporcionan flagelar determina si las bacterias continúan nadando o bien giran.
• Motilidad a las bacterias y permiten que la célula se dirija hacia los nutrientes y
evite las sustancias tóxicas (quimio-Taxis).
• Las bacterias se acercan a sus nutrientes nadando en línea recta para girar luego
bruscamente y continuar en una nueva dirección.
• Este período de desplazamiento aumenta a medida que se incrementa la
concentración de la sustancia quimio-atrayente.
• Portan factores antigénicos y determinantes de la cepa bacteriana
Los flagelos bacterianos son:
• Largos apéndices filiformes
• Compuestos en su totalidad por proteína, Miden
de 12 a 30 nm de diámetro.
• Estan constituidos por una sola clase de
proteínas denominada FLAGELINA.

El flagelo está formado por la agregación de


subunidads que forman una estructura cilindrica
hueca.

Los flagelos pueden variar desde unos pocos (E.


coli) hasta varios cientos (Proteus).

Son los órganos de locomoción para las formas que


lo poseen
Esta compuesto de tres partes:
1. EL FILAMENTO Es externo con respecto
a la célula y se une al gancho en la superficie
celular. Está constituido por varias membranas
proteínicas que forman una hélice con un
centro hueco.
2. EL GANCHO Esta fijado al cuerpo basal,
que a su vez esta anclado en la membrana
plasmática.
3. CUERPO BASAL Esta constituido por:
➢ Un cilindro y
➢ Dos o más juegos de anillos contiguos a
la membrana plasmática, el glicopéptido
y en las bacterias Gramnegativas, la
membrana externa de la envoltura
celular.
o El anillo M está integrado por la
membrana celular.
o El anillo S en la capa de peptidoglicanos.
o Los anillos P y L en la membrana
externa.
Clasificación De Los Flagelos

Los flagelos se diferencian por su número y disposición en la célula.


1.- Monotricas: Bacterias con un flagelo único en posición polar.
2.- Lofotricas : dos o mas Flagelos que se originan en un polo o en un punto de la célula.
3.- Anfitricas: un solo flagelo en dos puntos o polos diferentes de la célula
4.- Anfilotricas: Dos o mas flagelos (penacho) en dos puntos o polos de la célula
5.- Peritricos: Poseen flagelos sobre toda su superficie
6.- Atrica: Sin flagelo
COLOCAR LOS NOMBRES
SEGÚN SU CLASIFICACION
METODO DE LEIFSON
Reactivos:
•Colorante de Leifson (Fucsina básica, alcohol
•Acido tánico, cloruro de sodio)
Técnica:
•Cubrir la preparación con el colorante Leifson,
dejar por 10 a 15 min, hasta que el alcohol se
evapore.
•Se lava con agua, sin volcar el colorante.
•Secar a temperatura ambiente. Observar 100X.
Observación
Los flagelos se observan de color rojo oscuro.
Cuerpo bacteria rojizo

LEIFSON CON CONTRASTE


Puede contracolorear con azul metileno o
Fucsina fenicada
Dejar actuar por 2 minutos.
METODO DE LEIFSON

Fundamento:
Los flagelos son estructuras demasiado finas para ser visible al microscopio óptico,
en presencia de ácido tánico puede evidenciarse su presencia y disposición en las
células, por medio de un precipitado grueso que se deposita sobre la pared celular y
flagelos.
El diámetro aumenta con la tinción de fucsina se les hace visibles. Los flagelos se
tiñen con soluciones alcohólicas de colorantes de anilina, forman un precipitado al
evaporarse el alcohol en el proceso de tinción.
La fucsina básica es el colorante primario y el ácido tánico añadido a la solución
actúa como un mordiente.
Se puede usar un contracolor como el azul de metileno, para visualizar mejor la
bacteria en los casos en que el colorante primario es débil o no reacciona del todo
con la pared celular bacteriana.
METODO DE RHODES
Reactivos:
•Mordiente de Rhodes (contiene una solución
acuosa de tanino, alumbre potásico, aceite de
anilina y cloruro férrico).
•Nitrato de plata amoniacal.

Técnica:
•Se cubre la preparación con el mordiente de
Rhodes durante 3 a 5 minutos.
•Se lava cuidadosamente con agua, mejor por
inmersión.
•Se cubre con la solución de nitrato de plata Observación
amoniacal, calentándolo hasta casi ebullición y Los flagelos se observan por el
dejándolo actuar por 3 a 5 minutos. precipitado de nitrato de plata que se ha
•Se lava con agua destilada. depositado en torno suyo.
•Se seca a temperatura ambiente.
•Observar a 100X.
METODO DE GRAY

Reactivos:
•Mordiente de GRAY.(contiene solución alumbre potásico, tanino y
Cl3Hg).
•Fucsina fenicada Ziehl-Neelsen.

Técnica:
•La lámina se deja secar a t. ambiente-
•Colocar Mordiente GRAY por 10 min.
•Lavar agua+Colorear con Fucsina fenicada Ziehl Neelsen por 10 min-
•Lavar Observación
•Secar al aire Los flagelos se
•Observar 100X observan oscuros
Cuerpo bacteria: rojo
oscuro
METODO DE TRIBONDEAU

Reactivos:
•Mordiente de Tribondeau.(contiene solución alumbre potásico y tanino).
•Solución de cristal violeta.

Técnica:
•Se fija el frotis con alcohol.
•Se cubre la preparación con la mezcla formada por 5 ml del mordiente y
0.5 ml de cristal violeta previamente sometida a ebullición.
•Se deja actuar la mezcla unos veinte segundos.
•Se lava rapidamente con agua, sin volcar previamente el colorante para Observación
evitar que se forme una película sobre la preparación. Los flagelos se
•Se seca a temperatura ambiente. observan de color
•Observar a 100X. violeta oscuro a
negruzco
FILAMENTOS AXIALES O
ENDOFLAGELOS
Espiroquetas: estructura y movilidad característica
• Treponema pallidium: sífilis
• Leptospiras
• Borrelia bugdorferi: Enfermedad de Lyme
Estructura similar a los flagelos
Estos filamentos están ubicados en el espacio periplásmico entre las membranas interna y
externa de la célula.
Formados por proteínas fibrilares alrededor de los microorganismos adheridos a ambos polos
de la célula.
Fibrilla que nacen en los extremos de la célula y siguen un trayecto helicoidal alrededor de la
célula.

.
FUNCIONES
Desplazamiento sobre filamentos axiales en torno
de los cuales se arrolla la célula.
Se mueven desplazándose por una onda helicoidal,
permite penetrar en medios viscosos.
Movimiento en tirabuzón.
Movimiento flexión y giro producido por el
filamento axial.
Da movimiento rápido a las espiroquetas

El Treponema microdentium produce dos filamentos por célula, el T. reiteri produce 6 a 8


FImbrias

Son estructuras piliformes se localizan en la parte


externa de las bacterias.
Están formadas por unas subunidades proteicas
(pilina).
No todos los microorganismos poseen fimbrias y la
capacidad para fabricarlas es un rasgo hereditario.
• Las fimbrias y los pili presentan una estructura
similar a la de los flagelos pero no participan en la
motilidad.
• Las fimbrias son bastante más cortas que los
flagelos
• Las fimbrias se diferencian de los flagelos por su
menor diámetro (3-8 nm frente a 15-20 nm) y
carecen de una estructura helicoidal.
• En la superficie de la bacteria existen varios
centenares de fimbrias dispuestas de forma
uniforme.
FUNCIONES
Favorecen su fijación o adhesión a las superficies de otras bacterias del
organismo hospedador (nombres alternativos: adhesinas, lectinas,
evasinas y agresinas).
Formación de películas o la fijación a las superficies líquidas.

Como factor de adherencia (adhesina),


Las fimbrias favorecen la adhesión
Las fimbrias son determinantes de virulencia en la colonización e infección (Ej: ITU por E. coli,
gonorrea por Neisseria gonorrhoeae.

Lectinas
Los extremos de las fimbrias pueden contener unas proteínas (lectinas) que se fijan a azúcares
específicos (ej., manosa).
Pilis
• Los pili (pelos) estructuralmente similares a las fimbrias.
• Son más largos
• Existe uno o unos pocos pili sobre la superficie, en una proporción de 1 a 4 pili por
100 a 200 fimbrias.
• Los pili pueden verse (microscopio electrónico) al funcionar como receptores
específicos para determinadas partículas víricas, pueden observarse con facilidad
cuando están recubiertos con virus.
tamaño
cantidad

MAYOR
MAYOR FLAGELO
FLAGELO

PILI PILI
MENOR

FIMBRIAS
MENOR FIMBRIAS
FUNCIONES
• Los pili son proyecciones tipo fibroso de las
células.
• Están relacionados con la conjugación sexual
conjugación (transferencia del material genético
plasmido, de una célula a otra)
• Permiten la adherencia de la bacteria a las
superficies epiteliales del huésped que infecta.
Los pili F (pili sexuales)
Se unen a otras bacterias y configuran una estructura tubuliforme
para la transferencia horizontal de grandes segmentos de los
cromosomas bacterianos.
Pelo sexual: unión a celula receptora durante la
Estos pilis están codificados por un plásmido F
Capsula y
glicocalix
• La formación de estas estructuras extracelulares depende del
sistema de secreción bacteriano.
• Este sistema transfiere proteínas desde el citoplasma al
periplasma o al espacio que rodea a la célula.
• Los sistemas de secreción son esenciales para la virulencia de los
patógenos

El material capsular pueden ser polímeros de un monosacárido


(glucosa, dextrano, levano) o heteropolisacáridos que contienen
tanto hexosas como pentosas, más ribitol, glicerol o alcoholes
azúcar. Los fosfatos con frecuencia también están presentes. KLEBSIELLA
NEISSERIA
BACILLUS
En Bacillus es naturaleza polipeptídica. La cápsula es sintetizada a 1.Capsula STREPTOCOCCUS
CRYPTOCOCCUS
nivel de la membrana celular, sus componentes son sintetizados y
2.Glicocalix
exportados fuera de la célula por un sistema transportador para
lípidos isoprenoides, los componentes se unen al material capsular 3.Biopelicula
• Muchas bacterias son capaces de acumular material en el exterior
para recubrir su superficie.
• Algunas bacterias se encuentran rodeadas por unas capas laxas de
proteínas o polisacáridos denominadas cápsulas.

• La cápsula, es una estructura rígida, bien definida que rodea la célula CAPSULA
y se une firmemente a la superficie bacteriana. Bacillus megaterium.

• Si la adhesión es muy débil y el grosor o densidad no son uniformes, “


capa de limusina “ (capa de limo).

• Las cápsulas y la capa de limo se conocen como glucocálix.


Excepto Bacillus anthracis, que produce una cápsula polipeptídica.

• El glucocálix, es flexible y se une de forma laxa, el polímero forma una GLUCOCALIX


maraña de fibras que se extiende fuera de la célula.. Ej: Klebsiella
FUNCIONES
• Las cápsulas y las capas de limo hijo son innecesarias para el crecimiento de las bacterias
• Gran importancia para su supervivencia en el organismo hospedador.

• Protege a la célula de la desecación y de materiales tóxicos del medio ambiente (metales pesados y
radicales libres)
• Promueve la concentración de nutrientes en la superficie de la bacteria debido a su naturaleza
polianiónica.
• La cápsula actúa barrera frente a moléculas hidrófobas tóxicas (p. ej., detergentes)

• La cápsula ofrece resistencia a la acción bactericida del complemento y de los anticuerpos séricos.
• Estas estructuras protegen a las bacterias y evita que sean fagocitadas por los macrofagos
• Actuán como antígenos y estar implicadas en el reconocimiento bacteriano
FUNCIONES

• La cápsula es poco antigénica y es antifagocítica; constituye un factor de


virulencia (ej.,Estreptococo pneumoniae).
• Facilita la adherencia a otras bacterias a las células y mucosas superficies de los tejidos del hospedador. Ej:
Streptocococus mutans, las cápsulas de dextrano y levano posibilitan su fi jación y adhesión al esmalte
dental.
• Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus producen una biopelícula polisacárida cuando hay un
número suficiente de bacterias (quórum) y favorece la creación cimiento, se establece una comunidad
bacteriana y protege a sus miembros de la acción de los antibióticos y las defensas del organismo
hospedador.
• Otra biopelícula es la placa dental causada por S. mutans
• Esta adherencia permite que los microorganismos establezcan infecciones y la formación de biopelículas
TINCIÓN DE CAPSULAS
• La cápsula es una capa mucosa, más o menos gruesa, que envuelve la pared celular de algunas bacterias.
• Está compuesta de polisacáridos, mucopolisacáridos o polipéptidos.
• Por su elevado contenido en agua, se tiñen débilmente por los colorantes.
• Algunas técnicas colorean el fondo de la preparación, destacando sobre él las cápsulas sin teñir.
• Nota: Preparación de los frotis: debe realizarse un frotis espeso a partir de una suspensión de los gérmenes
en suero sanguíneo a 1/3 en suero fisiológico.

Fundamento
La cápsula es una estructura fuerte de naturaleza polisacárida. Esta protege a los microorganismos de la
fagocitosis, y por tanto es una estructura difícil de penetrar.
Las tinciones de cápsulas se fundamentan en el contraste. Los colorantes tiñen el fondo de la preparación
mientras que la cápsula queda incolora y reconocible.
Si el microorganismo no posee cápsula no será distinguible con este tipo de coloración, porque todo se teñirá
del mismo color.
Todas las técnicas que se utilizan para colorear la cápsula poseen el mismo fundamento a pesar de que
utilizan colorantes y procedimientos diferentes.
COLORACION ANTHONY WELCH

Reactivos:
• Cristal violeta 1%.
•Solución acuosa de sulfato de cobre 20%.

Técnica:
• Hacer la extensión y secar al aire
•No fijar al calor
• Se cubre la preparación Cristal violeta
durante 1 minuto. No calor
•Se lava con sulfato de cobre.
•Se seca a temperatura ambiente.
•Observar a 100X.

Cápsula: azul violeta


Cuerpo bacteria: azul oscuro
METODO DE HISS
(cristal violeta)

Reactivos:
•Solución Cristal violeta 0.1%.
•Solución acuosa de sulfato de cobre 20%.

Técnica:
•Se fija el frotis al calor.
•Se cubre la preparación cristal violeta se
calienta a vapor fluente durante 1 minuto.
•Se lava con sulfato de cobre.
•Se seca a temperatura ambiente.
•Observar a 100X.

Las cápsulas: azul pálido,


Cuerpo bacteria: granate o púrpura.
METODO DE HISS
(FUCSINA)

Reactivos:
•Solución Fucsina básica 0.15%.
•Solución acuosa de sulfato de cobre 20%.

Técnica:
•Se fija el frotis al calor.
•Se cubre la preparación Fucsina básica se
calienta a vapor fluente durante 1 minuto.
•Se lava con sulfato de cobre.
•Se seca a temperatura ambiente.
•Observar a 100X.

Las cápsulas: ROSADO O ROJO CLARO


Cuerpo bacteria: ROJO INTENSO.
NIGROSINA (tinta india)

Reactivos:
(Nigrosina al 10% + formol0.5%)
Azul metileno de Loeffer o Safranina

Técnica:
•Mezclar una gota de nigrosina al 10% que esta
conservado con formol 0.5% y dejar 1 minuto
• Se seca y fija el frotis al calor.
•Agregar el contracolor: safranina o azul metileno
Loeffer durante 2 minuto.
•Se lava con agua destilada
•Se seca a temperatura ambiente.

Cápsula: transparente
Fondo: oscuro
Cuerpo bacteriano no azul o rojizo
TINCION NEGATIVA (TINTA CHINA)

Reactivos:
• Tinta china Pelikan

Técnica: (Preparación húmeda)


•1 a 2 gotas de la tinta china y mezclar con el cultivo
En una lámina colocar Se fija el frotis al calor.
• Colocar la laminilla
• Observar

Cápsula: transparente
Fondo oscuro
TINCIÓN DE CAPSULAS

COLORACION WRIGHT
Wright
Lavar Sorensen
Lavar agua
Cápsula: transparente
Fondo: celeste
Cuerpo bacteriano: azul
LIBROS TEORIA
• INGRAHAM I
• KONEMAN
• TELLO
• MC FADDIN MADDIN
• PRESKOTT
COCOS GRAMPOSITIVOS EN CADENAS

Streptococcus
COCOS GRAMPOSITIVOS EN TETRADAS

Micrococcus
COCOS GRAMPOSITIVOS EN RACIMOS

Staphylococcus
COCOS GRAMPOSITIVOS EN PAREJAS
DIPLOCOCOS GRAMPOSITIVOS

Diplococcus pneumoniae
BACILOS GRAMPOSITIVOS SIN ESPORA

Lactobacillus
BACILOS GRAMPOSITIVOS CON ESPORA

Bacillus anthracis
BACILOS GRAMPOSITIVOS CON ESPORA

Clostridium
COCOS GRAMNEGATIVOS EN PAREJAS
DIPLOCOCOS GRAMNEGATIVOS

Neisseria
BACILOS GRAMNEGATIVOS

Escherichia coli
Enterobacter
Pseudomona
COCOBACILOS GRAMNEGATIVOS

ACINETOBACTER
BRUCELLA
BACILO GRAMNEGATIVO ESPIRAL

Campylobacter
ESPIRILOS GRAMNEGATIVOS

Helycobacter pylori
ESPIROQUETAS GRAMNEGATIVAS

Treponema
BACILOS GRAMNEGATIVOS EN FORMA DE HUSO

Fusobacterium
BACILOS GRAMNEGATIVOS
PLEOMORFICOS

BACTEROIDES
ESPORAS E HIFAS GRAMPOSITIVAS

Candida

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