UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

DEPARTAMENTO DE MORFOLOGÍA HUMANA

BIOLOGÍA MOLECULAR Y CELULAR

CARIOTIPO. BANDEO CROMOSÓMICO.

NOMENCLATURA CROMOSÓMICA. POLIMORFISMOS.
CITOGENÉTICA MOLECULAR.
 QUE ES CARIOTIPO
• Ordenamiento de los cromosomas de una célula metafásica de
acuerdo a su morfología, tales como el tamaño, la relación de los
brazos dependiendo de la constricción primaria, presencia de
constricciones secundarias.
 CRITERIOS DE
Denver 1960:
CLASIFICACION
• Tamaño
• Posición del centrómero
• Presencia o ausencia de satélites

Paris 1971:
• Patrón especifico de bandas
 TIPOS DE CROMOSOMAS:

El centrómero se Un brazo es muy Solo se observa un

La longitud de un
localiza a la mitad del corto (p) y el otro brazo del
brazo del
cromosoma y de los mas largo (q). cromosoma.
cromosoma es un
2 brazos. p = q poco mayor al otro.
P>>>Q
P>Q
 CLASIFICACION DE LOS CROMOSOMAS HUMANOS
❑ CROMOSOMAS GRANDES
✓ Grupo A, (cromosomas 1, 2 y 3), 1 y 3 meta; 2 submetacéntrico
✓ Grupo B, (cromosomas 4 y 5), submetacéntricos

❑ CROMOSOMAS MEDIANOS
✓ Grupo C, (cromosomas 7, 8, 9, 10, 11, 12 y además los cromosomas X),
submetacéntricos
✓ Grupo D, (cromosomas 13, 14 y 15) acrocéntricos

❑ CROMOSOMAS PEQUEÑOS
✓ Grupo E, (cromosomas 16, 17 y 18) 16 meta; 17 y 18 submetacéntricos
✓ Grupo F, (cromosomas 19 y 20) metacéntricos
✓ Grupo G, (cromosomas 21, 22 y Y) acrocéntricos
 METODOS DE ESTUDIO DE CROMOSOMAS

METODO DIRECTO METODO INDIRECTO

Cultivo de linfocitos
Medula ósea

Células amnióticas

Células neoplásicas
ELABORACION DE CARIOTIPO

Formato para el ordenamento de

cromosomas
Sexuales
Cromosomas metafásicos

• Analizar al menos 2
cultivos primários
(independientes) con
técnicas de bandas.

• Contar 15 a 20 metafases.
De esas al menos 6 han
de ser analizados y 2 de
ser cariotipadas.

• Recomendado realizar
por 2 personas.
 IDIOGRAMA

Conocido como “Cariograma”, patron de bandas de cada

cromosoma es especifico y se puede representar en un
cariotipo de forma ideal y estilizada.

Representación gráfica de un cariotipo. Útil para resaltar

alguna característica importante del cariotipo
 POLIMORFISMOS CROMOSÓMICOS
Variante cuya frecuencia en población es + elevada de lo que se espera por tasa mutacional

Polimorfismos mas importantes:

1. Tamaño:
Cromosoma Y polimorfismos en segmento heterocromático distal de brazos largos

Aproximadamente el 10 de varones tiene el cromosoma Y con región

heterocromatina variable
Visible con bandas C
 2. Satélites: Variaciones en regiones: brazos, satélites y tallos acrocéntricos.

También en cromosomas 17 e Y si repercusión clínica

Variación debe a repeticiones de ADN y al número de genes ribosomales.

3. Constricciones secundarias:
Regiones se tiñen pálidamente, pero bandas C revela localización. Polimorfismos se localizan en:

•Región proximal de brazo largo de cromosomas 1,9 y 16

•Porción distal de brazo q de Cromosoma Y
•Brazos cortos y satélites de cromosomas acrocéntricos
• Relación a grupos étnicos
 PAUTAS PARA LA NOMENCLATURA

Se registra el número de cromosomas

(incluidos los sexuales)
46 , XX se escriben los
cromosomas sexuales.
seguido de una coma

Se registra el número de
cromosomas (incluidos los
sexuales)
47 , XX , +21 se escriben el
cromosoma afectado.

seguido de una coma seguido de una coma

 NOMENCLATURA BASICA EN CITOGENETICA
Facilita: estudio y descripción de cromosomas y anormalidades
Se estableció un sistema común de nomenclatura, resultado de varias reuniones iniciadas desde 1960
hasta actualidad

Sistema de códigos: reglas básicas y abreviaturas para nombrar cromosomas son de uso universal
Nomenclatura: pasos
1° Número de cromosomas
2° Coloca COMA ( , )
3° Coloca el complemento gonosómico : XX (mujeres) ó XY (varones).

Por ejemplo: 46 , XX mujer normal

46 , XY varón normal

Nomenclatura de polimorfismo
•46, XX, 16 qh+ designa a mujer con incremento en longitud de heterocromatina del cromosoma 16.

•46, XX, 13s+ Incremento en la longitud de la región satélite del cromosoma 13

 NOMENCLATURA BASICA EN CITOGENETICA

▪ Sexo masculino: 46,XY . Sexo femenino: 46,XX

46, XY Cariotipo normal de un individuo con 46, XX Cariotipo correspondiente a una persona

46 cromosomas con un cromosoma sexual X y uno Y. con 46 cromosomas y dos cromosomas sexuales X.
 ABERRACIONES NUMÉRICAS EUPLOIDES

• 69, XXY: cariotipo anormal, con 69 cromosomas, 2 cromosomas X y 1 cromosoma Y

(triploide).

• 92, XXXX: cariotipo anormal, con 92 cromosomas y 4 cromosomas X (tetraploide).

ABERRACIONES NUMÉRICAS ANEUPLOIDES

• 47, XXY: cariotipo anormal, con cuarenta y siete cromosomas, dos cromosomas X y un cromosoma Y.

• 45, X: cariotipo anormal, con 45 cromosomas y un cromosoma X.

• 47, XY,+21: el signo (+) o (-), colocado delante del nº del autosoma, indica ganancia o pérdida de ese
cromosoma completo.
¿Qué es una banda cromosómica?

Es una parte del cromosoma que se distingue por

presentar regiones mas claras y oscuras.

Una banda cromosómica no es un gen.

Las bandas estan localizadas en regiones de los cromosomas, las cuales
estan delimitadas por marcas “Landmarks”.

Las marcas son características morfológicas importantes en la

identificación de los cromosomas delimitan las regiones cromosómicas.

Una región del cromosoma puede contener varias bandas localizadas

en los brazos del cromosoma.
PARTES DE UN CROMOSOMA POR CONVENCIÓN INTERNACIONAL
NOMENCLATURA PARA LA UBICACIÓN DE UN GEN
 Técnicas de bandeo

Tratamiento con Quinacrina

Bandas Q: Regiones ricas en AT, cromosoma Y
(Casperson y cols., 1970)

Tratamiento con tripsina + Giemsa

Bandas G: Regiones ricas en AT (bandas oscuras)
(Seabright, 1971)

Patrón reverso al de bandas Q y G

Bandas R: Regiones ricas en CG (bandas oscuras)
(Dutrillaux y Lejeune, 1971)

Bandas C: Heterocromatina constitutiva

(Arrighi y Hsu, 1971)

Bandas NOR: Regiones organizadoras del nucleolo

(Matsui y Sasaki, 1973)
 BANDAS G

Xp21
6p21.3

Claras osc uras

▪Comparativamente ricas en GC ▪Comparativamente ricas en AT

▪Sensibles a la DNAsa ▪Insensibles a la DNAsa
▪Condensación tardía en el ciclo celular ▪Condensación temprana
▪Replicación temprana ▪Replicación tardía
▪Alta densidad génica ▪Baja densidad génica
▪Pobres en secuencias repetidas ▪Ricas en secuencias repetidas
 CITOGENETICA CONVENCIONAL
Requiere células en metafase
No siempre la calidad de las metafase es
optima
Resolución limitada (en el mejor de los casos 2
– 5 Mb).
CITOGENETICA MOLECULAR
Se fundamenta en la capacidad que poseen los
acidos nucleicos para hibridicarse entres si.
Permite la detección y localización de
secuencias especificas de ADN.
FISH - Hibridación in situ fluroscente.
Presenta tipos de sondas.
SKY – Cariotipo espectral multicolor
CGH – Hibridacion genómica comparada.
HIBRIDACION IN SITU FLURESCENTE “FISH”

Este método se basa en la capacidad especifica de una secuencia

de ADN monocatenario ( una sonda) para hibridarse con su
secuencia diana complementaria en un cromosoma en metafase,
un núcleo en interfase o una fibra de cromatina extendida.

METODO DIRECTO METODO INDIRECTO

Utiliza marcadores con sustancias Utiliza sondas unidas a moléculas como

fluorescentes puede observarse la señal la biotina o dioxigenina marcadas con
inmediatamente después del FISH sondas fluorescentes.

Hibridación in situ cromogénica (CISH)

 TIPOS DE SONDAS DE FISH

SONDAS CENTROMERICAS: Están sondas consisten en secuencias

de ADN repetitivas localizadas en el centromero de un cromosoma
específicos.

Fueron las sondas originales empeladas para el diagnostico por FISH en

interfase rápida de síndromes de aenuploidias comunes (Trisomias 13, 18,
21), a partir de muestras diagnosticadas prenatales de vellosidades
coriónicas.

SONDAS DE SECUENCIA UNICA ESPECIFICAS DE UN

CROMOSOMA: Estas sondas son especificas de un locus particular y se usan
para identificar deleciones y duplicaciones submicroscópicas.

Otra aplicación para identificar la sobreexpresión de HER2 en tumores de mama,

para dar un buen tratamiento con Trastuzumab.
SONDAS DE PINTADO DEL CROMOSOMA COMPLETO: Consiste en una combinación de sondas
obtenidas de diversas partes de un cromosoma.
Cuando se mezcla en una sola hibridación, todo el cromosoma emite fluorescencia.
Detectar translocaciones, identificar el origen del material cromosomico adiconal.
 HIBRIDACION GENOMICA COMPARADA (CGH)

Identifica las ganancias o perdidas cromosómicas por rastreo del genoma completo en una simple etapa.

Realiza una búsqueda de anomalías a lo largo de todo el genoma sin necesidad de disponer de información previa
acerca de la anomalia cromosómica.

Es una técnica combinada de citogenética e hibridación in situ fluorescente que ha permitido realizar un analisi
global del genoma.
Requiere solo ADN tumoral

Se aplica en tejido fresco o

congelados
No detecta inversiones
 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

Solari J. Genética Humana. Fundamentos y Aplicaciones en Medicina. Cuarta Edición. Editorial. Médica. Panamericana.
Madrid. Buenos Aires. 2011.
Thompson MD y MW Thompson. Genética Médica. Quinta edición. Edit. Masson S.A. Barcelona. España. 2008