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FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
La glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa oxidasa, con formación de peróxido de
hidrógeno. Con presencia de la peroxidasa y 4 aminoantipirina forma una quinonaimina roja
proporcional a la concentración de glucosa en la muestra.
Reactivos: Monoreactivo (glucosa oxidasa, peroxidasa antipirina y formol) y patrón de glucosa
Materiales y equipos
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
UREA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
La urea es hidrolizada por la ureasa convirtiéndose en amoníaco y anhídrido carbónico. El amoníaco
reacciona con el hipoclorito y el salicilato sódico en presencia de nitroprusiato, formando un cromógeno
proporcional la urea en la muestra
Reactivos:
Reactivo 1 enzimático: Ureasa
R2 Cromógeno tamponado: salicilato sódico, nitroprusiato sódico,
R3 Hipoclorito alcalino
Patrón de Urea.
Materiales y equipos
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
CREATININA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
A través de la reacción con el ácido pícrico en medio alcalino, se obtiene un complejo de color
amarillo rojizo que es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.
Reactivos: Acido pícrico y calibrador de la creatinina
Materiales y equipos
Espectrofotómetro
Tubos
Cubetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
ÁCIDO ÚRICO
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
El ácido úrico es oxidado por la uricasa, en alantoina y peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa la
mezcla de diclorofenol sulfonato (DCBS) y 4-aminoantipirina (4- AA) se condensan por acción del peróxido
de hidrógeno, formando una quinonaimina coloreada proporcional a la concentración de ácido úrico en la
muestra
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
COLESTEROL
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
TRIGLICÉRIDOS
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
El método está basado en la hidrólisis enzimática de los triglicéridos séricos a glicerol y ácidos grasos libres
por acción de la lipasa. En presencia de peroxidasa el fenol y la 4-aminoantipirina se condensan por acción
del peróxido de hidrógeno formándose un cromógeno proporcional a la concentración de triglicéridos
presentes en la muestra.
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
HDL
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
Reactivo precipitante
Reactivo del colesterol
Patrón del colesterol
Materiales y equipos
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Centrífuga
Muestra
Procedimiento:
LDL
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
Las LDL se separan del suero precipitándolas selectivamente mediante el sulfato de polivinilo
molecular. Luego de centrifugar, quedan las demás lipoproteínas (HDL y VLDL); el colesterol ligado
a las mismas se determina empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa/ Peroxidasa.
Reactivos:
Reactivo precipitante: sulfato de polivinilo
Reactivo del colesterol
Patrón del colesterol
Materiales y equipos
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Centrífuga
Muestra
Procedimiento:
VLDL
Cálculos
TAG/5
Valores de referencia: 2 – 30 mg/dL
LÍPIDOS TOTALES
Cálculos
colesterolx800/200
Valores de referencia: 450 – 800 mg/dL
PROTEÍNAS TOTALES
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.
Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
Rotular tres tubos: Blanco, muestra y patrón
En el tubo del blanco colocar 1ml del reactivo
En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo y 20 ul de la muestra
Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 20ul del patrón.
Incubar 5 minutos a 37ºC
Leer la absorbancia a 500nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: 6,6 a 8,7g/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
Las proteínas son responsables de la regularización de la presión oncóntica del plasma, transporte de
muchas sustancias. La hiperproteinemia ocurre en el mieloma múltiple, deshidratación por vómitos severos,
diarrea, enfermedad de Addison y diabetes acidósica. La hipoproteinemia se presenta en casos de
malnutrición, edema, síndrome nefrótico, malaabsorción y cirrosis hepática severa.
ALBÚMINA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
GLOBULINAS
ÍNDICE A/G
ÁCIDO LÁCTICO
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
Espectrofotómetro
Tubos
cubetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
BILIRRUBINA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el ácido sulfanílico diazotado midiéndose
fotométricamente. De las dos fracciones presentes en suero, bilirrubin-glucurónido y bilirrubina
libre ligada a la albúmina, sólo la primera reacciona en medio acuoso (bilirrubina directa)
precisando la segunda la solubilización con cafeína para que reaccione (bilirrubina indirecta). En la
determinación de la bilirrubina indirecta se determina también la directa, correspondiendo el
resultado a la bilirrubina total.
Reactivos: reactivo total, reactivo directa, reactivo de trabajo: nitrito sódico más reactivo total/directa en
1/4 (ácido sulfanílico) y patrón.
Materiales y equipos
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Muestra
Agua destilada
Procedimiento:
Bilirrubina total
Bilirrubina directa
Rotular cuatro tubos: Blanco del reactivo, blanco de la muestra, muestra y patrón
En el tubo del blanco del reactivo colocar 1ml del reactivo de trabajo y 100ul de agua
destilada
En el tubo del blanco de la muestra colocar 1ml del reactivo de bilirrubina directa y 100ul
de la muestra
En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo de trabajo y 100 ul de la muestra
Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 100ul del patrón.
Incubar 5 minutos a 37ºC
Leer la absorbancia a 540nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra- A del blanco de la muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: Total: <1mg/dl; Directa: <0,2mg/dl.
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
HIERRO SÉRICO
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
El hierro se libera de la transferrina, con el cloruro de guadinio y es reducido por la hidroxilamina formando
un cromógeno que es proporciona a la muestra
Reactivos:
R1. Reductor: cloruro de guadinio e hidroxilamina
R2. Cromógeno
Patrón
Reactivo de trabajo: reductor más cromógeno 4/1
Materiales y equipos
Espectrofotómetro
Tubos
Pipetas
Baño maría
Muestra
Agua destilada
Procedimiento:
TRANSFERRINA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
Los anticuerpos anti-TRF del reactvo forman inmunocomplejos con la TRF presente en la muestra del
paciente, ocasionando una dispersión de luz proporcional a la concentración de TRF y que puede
cuantificarse con una curva de calibración.
Espectrofotómetro
Cubetas
Pipetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento:
FERRITINA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
La ferritina presente en la muestra reacciona con las partículas de látex con anticuerpos anti-ferritina
humana produciendo aglutinación.
Reactivos:
R1. Diluyente
R2. Latex
Calibrador
Materiales y equipos
Espectrofotómetro
Cubetas
Pipetas
Baño maría
Muestra
Procedimiento: