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GLUCOSA

FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas


 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
La glucosa es oxidada a D-gluconato por la glucosa oxidasa, con formación de peróxido de
hidrógeno. Con presencia de la peroxidasa y 4 aminoantipirina forma una quinonaimina roja
proporcional a la concentración de glucosa en la muestra.
Reactivos: Monoreactivo (glucosa oxidasa, peroxidasa antipirina y formol) y patrón de glucosa
Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Rotular tres tubos: Blanco, muestra y patrón
 En el tubo del blanco colocar 1ml del reactivo
 En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo y 10 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 10ul del patrón.
 Incubar 5 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia a 500nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: 70 a 110 mg/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles de orina valorados
(normales y elevados).
Pruebas de apoyo: glucosa aleatoria, tolerancia oral a la glucosa, microalbuminuria, hemoglobina
glicosilada.
Significación clínica:
La glucosa es la mayor fuente de energía del cuerpo humano derivada de la degradación de los
carbohidratos, incorporados a través de la dieta y regulada a través de los procesos de
gluconeogénesis y glucogenolisis. Un aumento anormal en la tasa de glucosa sanguínea, conocida
como hiperglucemia, puede estar asociado con la diabetes mellitus y con la tiroides. La
hipoglucemia se observa en casos de sobredosis de insulina, tumores secretores de insulina.

UREA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas


 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos.

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
La urea es hidrolizada por la ureasa convirtiéndose en amoníaco y anhídrido carbónico. El amoníaco
reacciona con el hipoclorito y el salicilato sódico en presencia de nitroprusiato, formando un cromógeno
proporcional la urea en la muestra

Reactivos:
 Reactivo 1 enzimático: Ureasa
 R2 Cromógeno tamponado: salicilato sódico, nitroprusiato sódico,
 R3 Hipoclorito alcalino
 Patrón de Urea.

Materiales y equipos
 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Diluir los reactivos 1 y 2 de 1/24
 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Rotular tres tubos: Blanco, muestra y patrón
 En el tubo del blanco colocar 1ml del reactivo diluido y el 3
 En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo diluido y 10 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo diluido, 3 y 10ul del patrón.
 Incubar 5 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia a 600nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: 15 - 40 mg/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles de orina valorados
(normales y elevados).
Pruebas de apoyo: proteinuria en 24 horas, depuración de la creatinina, aumenta conjuntamente
con la creatinina
Significación clínica:
La urea es el principal producto final del metabolismo proteico en el cuerpo. Indicador de la
función renal. La azotemia se halla presente en desórdenes renales, insuficiencia renal nefrolitiasis,
prostatismo, y tumores del tracto genitourinario. Una disminución de urea puede estar asociada
con una deshidratación, malnutrición o embarazo.

CREATININA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas


 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos.

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
A través de la reacción con el ácido pícrico en medio alcalino, se obtiene un complejo de color
amarillo rojizo que es proporcional a la concentración de creatinina en la muestra.
Reactivos: Acido pícrico y calibrador de la creatinina
Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Cubetas
 Baño maría
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Encerar el espectrofotómetro con agua destilada.
 En una cubeta pipetear 1ml del reactivo de trabajo y 100ul del patrón.
 En otra cubeta pipetear 1ml del reactivo y 100ul de la muestra
 Insertar la cubeta en el baño maría y poner el cronómetro en marcha. Anotar la
absorbancia a 510 nm a los 30 segundos, y a los 90 segundos de la adición de la muestra o
patrón.
Cálculos:
A2 – A1 Muestra x C Patrón/ A2 – A1 patrón
Valores de referencia: Hombres (0,70 - 1,20 mg/dl), Mujeres (0,50 - 0,90 mg/dl)
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles de orina valorados
(normales y elevados).
Pruebas de apoyo: proteinuria en 24 horas, depuración de la creatinina.
Significación clínica:
Valoración renal sin posibilidad de reabsorción. La creatinina es sintetizada en el cuerpo durante
las contracciones musculares a partir de la creatina fosfato. La creatinina es excretada por la orina.
La prueba de depuración es sensible para diagnosticar la función renal relacionada a la velocidad
de filtración glomerular. Los niveles elevados de creatinina sérica están asociados a trastornos
renales como nefritis glomerular.
.

ÁCIDO ÚRICO
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas


 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
El ácido úrico es oxidado por la uricasa, en alantoina y peróxido de hidrógeno. En presencia de peroxidasa la
mezcla de diclorofenol sulfonato (DCBS) y 4-aminoantipirina (4- AA) se condensan por acción del peróxido
de hidrógeno, formando una quinonaimina coloreada proporcional a la concentración de ácido úrico en la
muestra

Reactivos: monoreactivo (uricasa, peroxidasa) y patrón.


Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Rotular tres tubos: Blanco, muestra y patrón
 En el tubo del blanco colocar 1ml del reactivo
 En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo y 20 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 20ul del patrón.
 Incubar 5 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia frente al blanco
Cálculos:
A Muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: Hombres: 3,5 – 7,2mg/dl Mujeres: 2,6 – 6mg/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles de orina valorados
(normales y elevados).
Pruebas de apoyo: proteinuria en 24 horas, depuración de la creatinina, aumenta conjuntamente
con la creatinina
Significación clínica:
El aumento anormal de ácido úrico se conoce como hiperuricemia siendo la gota la expresión
mayor de la dolencia debido a la saturación de ácido úrico en los fluidos corporales y la
consiguiente deposición de uratos en las articulaciones. También se relaciona a leucemias, y fallo
renal severo. La hipouricemia, se debe a una enfermedad hepatocelular, defectos de reabsorción
renal.

COLESTEROL
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Nuestro paciente debe mantener su dieta habitual, generalmente al saber que se va a


determinar grasas el paciente tiende a alimentarse de mejor manera haciendo que los
resultados no reflejen la realidad.
 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas
 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
Se basa en el uso de tres enzimas: colesterol esterasa, colesterol oxidasa y peroxidasa. Que en presencia de
fenol y 4-aminoantipirina se condensan por acción del peróxido de hidrógeno, formando una quinonaimina
coloreada proporcional a la concentración de colesterol en la muestra.

Reactivos: colesterol esterasa, colesterol oxidasa y peroxidasa y patrón.


Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Rotular tres tubos: Blanco, muestra y patrón
 En el tubo del blanco colocar 1ml del reactivo
 En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo y 10 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 10ul del patrón.
 Incubar 5 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia a 500nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: <200mg/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
- Colesterol LDL (lipoproteína de baja densidad): se acumula y obstruya en las arterias.
- Colesterol HDL (lipoproteína de alta densidad): extrae el colesterol de las arterias y lo lleva al
hígado para su eliminación en la vía biliar.
- Colesterol total: se refiere a la cantidad total de colesterol que hay en la sangre. Incluye al
colesterol LDL y HDL.
- Colesterol VLDL (lipoproteína de muy baja densidad): transporta triglicéridos y acumula grasa en
las arterias .
El colesterol junto con HDL y LDL son de gran ayuda en la detección a alteraciones metabólicas. El
desequilibrio afecta los niveles de lípidos séricos causando la enfermedad cardíaca coronaria y la
arterioesclerosis. La diabetes, el hipotiroidismo y ciertas enfermedades renales exhiben el mismo
tipo de desequilibrio. Valores bajos se hallan en el hipertiroidismo y casos de malnutrición.

TRIGLICÉRIDOS
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Nuestro paciente debe mantener su dieta habitual, generalmente al saber que se va a


determinar grasas el paciente tiende a alimentarse de mejor manera haciendo que los
resultados no reflejen la realidad.
 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas
 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
El método está basado en la hidrólisis enzimática de los triglicéridos séricos a glicerol y ácidos grasos libres
por acción de la lipasa. En presencia de peroxidasa el fenol y la 4-aminoantipirina se condensan por acción
del peróxido de hidrógeno formándose un cromógeno proporcional a la concentración de triglicéridos
presentes en la muestra.

Reactivos: monoreactivo y patrón.


Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Rotular tres tubos: Blanco, muestra y patrón
 En el tubo del blanco colocar 1ml del reactivo
 En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo y 10 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 10ul del patrón.
 Incubar 5 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia a 500nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: <150mg/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
Tienen la función de almacenar las calorías no utilizadas proporcionando energía al cuerpo.
El colesterol junto con HDL y LDL son de gran ayuda en la detección a alteraciones metabólicas. El
desequilibrio afecta los niveles de lípidos séricos causando la enfermedad cardíaca coronaria y la
arterioesclerosis. La diabetes, el hipotiroidismo y ciertas enfermedades renales exhiben el mismo
tipo de desequilibrio. Valores bajos se hallan en el hipertiroidismo y casos de malnutrición.

HDL
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Nuestro paciente debe mantener su dieta habitual, generalmente al saber que se va a


determinar grasas el paciente tiende a alimentarse de mejor manera haciendo que los
resultados no reflejen la realidad.
 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas
 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
Las HDL se separan precipitando selectivamente las lipoproteínas de baja y muy baja densidad
mediante el agregado de sulfato de dextrán (reactivo de precipitación). En el sobrenadante
separado por centrifugación, quedan las HDL y se realiza la determinación del colesterol.
Reactivos:

 Reactivo precipitante
 Reactivo del colesterol
 Patrón del colesterol
Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Centrífuga
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos para separar el suero.
 En el tubo de la muestra colocar 400ul del reactivo precipitante y 200ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 400ul del reactivo precipitante y 200ul del patrón.
 Mezclar y dejar reposar por 10 minutos a temperatura ambiente.
 Centrifugar 10 minutos a 4000rpm
 En el tubo del blanco colocar 1ml del reactivo de colesterol
 En el tubo del sobrenadante de la muestra colocar 1ml del reactivo de colesterol y 50ul del
sobrenadante de la muestra
 En el tubo del sobrenadante del patrón colocar 1ml del reactivo de colesterol y 50ul del
patrón.
 Incubar 5 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia a 500nm frente al blanco
Cálculos:
A sobrenadante x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: hombres: 35-55mg/dl; mujeres: 45-65mg/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
Ayuda en la detección a alteraciones metabólicas. El desequilibrio afecta los niveles de lípidos
séricos causando la enfermedad cardíaca coronaria y la arterioesclerosis. La diabetes, el
hipotiroidismo y ciertas enfermedades renales exhiben el mismo tipo de desequilibrio. Valores
bajos se hallan en el hipertiroidismo y casos de malnutrición.

LDL
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Nuestro paciente debe mantener su dieta habitual, generalmente al saber que se va a


determinar grasas el paciente tiende a alimentarse de mejor manera haciendo que los
resultados no reflejen la realidad.
 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas
 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
Las LDL se separan del suero precipitándolas selectivamente mediante el sulfato de polivinilo
molecular. Luego de centrifugar, quedan las demás lipoproteínas (HDL y VLDL); el colesterol ligado
a las mismas se determina empleando el sistema enzimático Colesterol oxidasa/ Peroxidasa.
Reactivos:
 Reactivo precipitante: sulfato de polivinilo
 Reactivo del colesterol
 Patrón del colesterol

Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Centrífuga
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos para separar el suero.
 En el tubo de la muestra colocar 100ul del reactivo precipitante y 200ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 100ul del reactivo precipitante y 200ul del patrón.
 Mezclar y dejar reposar por 10 minutos a temperatura ambiente.
 Centrifugar 10 minutos a 6000rpm
 En el tubo del blanco colocar 1ml del reactivo de colesterol
 En el tubo del sobrenadante de la muestra colocar 1ml del reactivo de colesterol y 50ul del
sobrenadante de la muestra
 En el tubo del sobrenadante del patrón colocar 1ml del reactivo de colesterol y 50ul del
patrón.
 Incubar 5 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia a 500nm frente al blanco
Cálculos:
A sobrenadante x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: 100 – 159mg/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
Ayuda en la detección a alteraciones metabólicas. El desequilibrio afecta los niveles de lípidos
séricos causando la enfermedad cardíaca coronaria y la arterioesclerosis. La diabetes, el
hipotiroidismo y ciertas enfermedades renales exhiben el mismo tipo de desequilibrio. Valores
bajos se hallan en el hipertiroidismo y casos de malnutrición.

VLDL
Cálculos
TAG/5
Valores de referencia: 2 – 30 mg/dL
LÍPIDOS TOTALES
Cálculos
colesterolx800/200
Valores de referencia: 450 – 800 mg/dL

PROTEÍNAS TOTALES
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Nuestro paciente debe mantener su dieta habitual, generalmente al saber que se va a


determinar grasas el paciente tiende a alimentarse de mejor manera haciendo que los
resultados no reflejen la realidad.
 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas
 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión cúprico en medio alcalino, para dar un
complejo que es proporcional a la concentración de proteínas totales en la muestra.
Reactivos: reactivo de biuret (sulfato cúprico) y patrón
Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra
Procedimiento:
 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.
 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Rotular tres tubos: Blanco, muestra y patrón
 En el tubo del blanco colocar 1ml del reactivo
 En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo y 20 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 20ul del patrón.
 Incubar 5 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia a 500nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: 6,6 a 8,7g/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
Las proteínas son responsables de la regularización de la presión oncóntica del plasma, transporte de
muchas sustancias. La hiperproteinemia ocurre en el mieloma múltiple, deshidratación por vómitos severos,
diarrea, enfermedad de Addison y diabetes acidósica. La hipoproteinemia se presenta en casos de
malnutrición, edema, síndrome nefrótico, malaabsorción y cirrosis hepática severa.

ALBÚMINA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Nuestro paciente debe mantener su dieta habitual, generalmente al saber que se va a


determinar grasas el paciente tiende a alimentarse de mejor manera haciendo que los
resultados no reflejen la realidad.
 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas
 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
La albúmina reacciona con el bromocresol. Forma un complejo que es proporcional a la cantidad de
albúmina presente en la muestra.

Reactivos: reactivo de la albumina y patrón


Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Rotular tres tubos: Blanco, muestra y patrón
 En el tubo del blanco colocar 2ml del reactivo
 En el tubo de la muestra colocar 2ml del reactivo y 10 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 2ml del reactivo y 10ul del patrón.
 Incubar 1 minuto a temperatura ambiente
 Leer la absorbancia a 630nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: 3,8 a 4,6g/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
Las proteínas son responsables de la regularización de la presión oncóntica del plasma, transporte de
muchas sustancias. La hiperproteinemia ocurre en el mieloma múltiple, deshidratación por vómitos severos,
diarrea, enfermedad de Addison y diabetes acidósica. La hipoproteinemia se presenta en casos de
malnutrición, edema, síndrome nefrótico, malaabsorción y cirrosis hepática severa.

GLOBULINAS

ÍNDICE A/G
ÁCIDO LÁCTICO
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Nuestro paciente debe mantener su dieta habitual, generalmente al saber que se va a


determinar grasas el paciente tiende a alimentarse de mejor manera haciendo que los
resultados no reflejen la realidad.
 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas
 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas
FASE ANALÍTICA
Fundamento:
El lactato de la muestra es oxidado por el lactato oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado en
esta reacción es luego utilizado por la peroxidasa para generar un cromógeno.
Reactivos:
R1. Ascorbato oxidasa
R2: 4 aminoantipirina, lactato oxidasa, peroxidasa.
Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 cubetas
 Baño maría
 Muestra
Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 En una cubeta colocar 2ul del calibrador y 175 ul del reactivo 1
 En otra cubeta colocar 2ul de la muestra y 175 ul del reactivo 1
 Incubar 2 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia a 540nm
Valores de referencia: 4,5 a 19,8mg/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
El ácido láctico proviene principalmente del músculo esquelético, cerebro, piel, médula renal y
eritrocitos. El aumento de lactato en sangre asociado a una disminución del pH arterial recibe el
nombre de acidosis láctica. La hipoxia es la causa más común de acidosis láctica a diferentes
condiciones clínicas como shock, neumonía, hemorragia aguda, edema pulmonar e insuficiencia
cardíaca congestiva. También se han registrado casos de acidosis láctica en necrosis hepática,
neoplasmas, linfomas, varias formas de leucemia, la deficiencia de tiamina y en la cetoacidosis
diabética.

BILIRRUBINA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas


 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
La bilirrubina se convierte en azobilirrubina mediante el ácido sulfanílico diazotado midiéndose
fotométricamente. De las dos fracciones presentes en suero, bilirrubin-glucurónido y bilirrubina
libre ligada a la albúmina, sólo la primera reacciona en medio acuoso (bilirrubina directa)
precisando la segunda la solubilización con cafeína para que reaccione (bilirrubina indirecta). En la
determinación de la bilirrubina indirecta se determina también la directa, correspondiendo el
resultado a la bilirrubina total.
Reactivos: reactivo total, reactivo directa, reactivo de trabajo: nitrito sódico más reactivo total/directa en
1/4 (ácido sulfanílico) y patrón.

Materiales y equipos
 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra
 Agua destilada

Procedimiento:
Bilirrubina total

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Rotular cuatro tubos: Blanco del reactivo, blanco de la muestra, muestra y patrón
 En el tubo del blanco del reactivo colocar 1ml del reactivo de trabajo y 100ul de agua
destilada
 En el tubo del blanco de la muestra colocar 1ml del reactivo de bilirrubina total y 100ul de
la muestra
 En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo de trabajo y 100 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 100ul del patrón.
 Incubar 2 minutos a temperatura ambiente
 Leer la absorbancia a 540nm frente al blanco

Bilirrubina directa
 Rotular cuatro tubos: Blanco del reactivo, blanco de la muestra, muestra y patrón
 En el tubo del blanco del reactivo colocar 1ml del reactivo de trabajo y 100ul de agua
destilada
 En el tubo del blanco de la muestra colocar 1ml del reactivo de bilirrubina directa y 100ul
de la muestra
 En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo de trabajo y 100 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 100ul del patrón.
 Incubar 5 minutos a 37ºC
 Leer la absorbancia a 540nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra- A del blanco de la muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: Total: <1mg/dl; Directa: <0,2mg/dl.
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:

 Bilirrubina directa o conjugada: es la bilirrubina unida con el ácido glucurónico. Es


hidrosoluble. Se elimina por la orina.
 Bilirrubina indirecta, libre o no conjugada: comprende la bilirrubina unida a la albúmina.
La hiperbilirrubinemia se debe a una destrucción rápida de los hematíes como la anemia
hemolítica, alteración del metabolismo causada por una deficiencia enzimática o por una
obstrucción física en el conducto biliar. La hiperbilirrubinemia ocasiona kernicterus e ictericia.

HIERRO SÉRICO
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas


 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas


 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
El hierro se libera de la transferrina, con el cloruro de guadinio y es reducido por la hidroxilamina formando
un cromógeno que es proporciona a la muestra
Reactivos:
 R1. Reductor: cloruro de guadinio e hidroxilamina
 R2. Cromógeno
 Patrón
 Reactivo de trabajo: reductor más cromógeno 4/1

Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Tubos
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra
 Agua destilada

Procedimiento:

 Los reactivos deben estar a temperatura ambiente.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Rotular cuatro tubos: Blanco del reactivo, blanco de la muestra, muestra y patrón
 En el tubo del blanco del reactivo colocar 1ml del reactivo de trabajo y 200ul de agua
destilada
 En el tubo del blanco de la muestra colocar 1ml del reductor (R1) y 200ul de la muestra
 En el tubo de la muestra colocar 1ml del reactivo de trabajo y 200 ul de la muestra
 Y en el tubo del patrón, colocar 1ml del reactivo y 200ul del patrón.
 Incubar 5 minutos a temperatura ambiente
 Leer la absorbancia a 560nm frente al blanco
Cálculos:
A Muestra- A del blanco de la muestra x C Patrón/ A patrón
Valores de referencia: 60 a 170 ug/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
Tras la absorción intestinal de hierro o como resultado de la destrucción eritrocitaria, los iones
férricos se liberan en el plasma combinándose con la apotransferrina o apoferritina formándose
transferrina y ferritina, respectivamente.
 La transferrina transporta el hierro a la médula ósea para la eritropoyesis
 La ferritina almacena el hierro en los tejidos, como el hepático, hasta su posterior
utilización.
Un aumento en el nivel plasmático de hierro puede ser destrucción rápida de eritrocitos o por una
ingesta excesiva de hierro originando alteraciones en la deposición de hierro en los tejidos
conocidas como hemosiderosis. Por otro lado, una disminución en el nivel de hierro plasmático
debida a malnutrición o malabsorción puede conducir a una anemia por déficit de hierro.

TRANSFERRINA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas


 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
Los anticuerpos anti-TRF del reactvo forman inmunocomplejos con la TRF presente en la muestra del
paciente, ocasionando una dispersión de luz proporcional a la concentración de TRF y que puede
cuantificarse con una curva de calibración.

Reactivos: reactivo y patrón


Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Cubetas
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra

Procedimiento:

 Precalentar el reactivo a 37ºC.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Encerar el espectrofotómetro con agua destilada
 En una cubeta colocar 1ml del reactivo y 10ul de la muestra
 En una cubeta colocar 1ml del reactivo y 10ul del calibrador.
 Leer la absorbancia a 540nm frente al blanco y luego a los 2 minutos
Valores de referencia: 200 a 360mg/dl
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
Tras la absorción intestinal de hierro o como resultado de la destrucción eritrocitaria, los iones
férricos se liberan en el plasma combinándose con la apotransferrina o apoferritina formándose
transferrina y ferritina, respectivamente.

 La transferrina transporta el hierro a la médula ósea para la eritropoyesis. Se sintetiza en el


hígado
 La ferritina almacena el hierro en los tejidos, como el hepático, hasta su posterior
utilización.
Un aumento en el nivel plasmático de hierro puede ser destrucción rápida de eritrocitos o por una
ingesta excesiva de hierro originando alteraciones en la deposición de hierro en los tejidos
conocidas como hemosiderosis. Por otro lado, una disminución en el nivel de hierro plasmático
debida a malnutrición o malabsorción puede conducir a una anemia por déficit de hierro.

FERRITINA
FASE PREANALÍTICA
Toma de muestra:

 Se le indica al paciente que debe ayunar de 8 a 12 horas


 No debe realizar actividad física
 No debe fumar
 Tomar la muestra con un tubo rojo (activador de la coagulación) o si es en plasma que sea
heparinizado.
 Evitar la hemolisis de la muestra.
 Preguntar sobre la ingesta de medicamentos y evitarse antes de las 12 horas

FASE ANALÍTICA
Fundamento:
La ferritina presente en la muestra reacciona con las partículas de látex con anticuerpos anti-ferritina
humana produciendo aglutinación.

Reactivos:

 R1. Diluyente
 R2. Latex
 Calibrador
Materiales y equipos

 Espectrofotómetro
 Cubetas
 Pipetas
 Baño maría
 Muestra

Procedimiento:

 Precalentar el reactivo a 37C.


 Centrifugar la muestra de 3000 a 4000rpm durante 10 minutos.
 Encerar el espectrofotómetro con agua destilada a 650nm
 En una cubeta colocar 800ul del R1, 100ul del patrón y 200ul del R2
 En otra cubeta colocar 800ul del R1, 100ul de la muestra y 200ul del R2
 Leer la absorbancia a 560nm frente al blanco y luego a los 8 minutos
Valores de referencia: 20 a 200ug/L
FASE POSANALÍTICA
Para un control de calidad adecuado, se incluirán en cada serie controles valorados (normales y
elevados).
Significación clínica:
Tras la absorción intestinal de hierro o como resultado de la destrucción eritrocitaria, los iones
férricos se liberan en el plasma combinándose con la apotransferrina o apoferritina formándose
transferrina y ferritina, respectivamente.

 La transferrina transporta el hierro a la médula ósea para la eritropoyesis. Se sintetiza en el


hígado
 La ferritina almacena el hierro en los tejidos, como el hepático, hasta su posterior
utilización. (mayor indicador de hierro)
Un aumento en el nivel plasmático de hierro puede ser destrucción rápida de eritrocitos o
por una ingesta excesiva de hierro originando alteraciones en la deposición de hierro en
los tejidos conocidas como hemosiderosis. Por otro lado, una disminución en el nivel de
hierro plasmático debida a malnutrición o malabsorción puede conducir a una anemia por
déficit de hierro.

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