UNIVERSIDAD NACIONAL DE

CHIMBORAZO
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
CARRERA DE LABORATORIO CLÌNICO E
HISTOPATOLÒGICO
Asignatura:
BIOQUIMICA I
Tema:
Docente:
MSC. ADRIANA MONGE
Curso:
Tercer Semestre “A”
Integrantes:
Mishel Erazo
Marco Lema
 Proteína c reactiva
 La proteína C reactiva (PCR) es producida
por el hígado. El nivel de PCR se eleva
cuando hay inflamación en todo el cuerpo.
Esta es una de un grupo de proteínas
llamadas "reaccionantes de fase aguda" que
aumentan en respuesta a la inflamación.
RESULTADOS NORMALES
 Los valores normales de la PCR varían de un
laboratorio a otro. Generalmente, se detectan
niveles bajos de PCR en la sangre. Los niveles
suben levemente según la edad en mujeres y en
personas afroamericanas.
 Posibles afecciones
 Cáncer
 Enfermedad del tejido conectivo
 Ataque cardíaco
 Infección
 Enfermedad intestinal inflamatoria
 Lupus
 Neumonía neumocócica
 Artritis reumatoidea
 PCT
La PCT es una prohormona, un polipéptido formado por 116
aminoácidos (aa), conocida como el precursor de la calcitonina,
una hormona hipocalcemiante. Esta hormona de 32 aa, implicada
en la homeostasis del calcio, es sintetizada en las células C
neuroendócrinas medulares de la glándula tiroides, a partir de un
precursor polipeptídico, la preprocalcitonina
 En individuos sanos, los niveles de PCT son indetectables en circulación.
Sin embargo, se ha evidenciado un gran aumento de una PCT diferente, de
114 aa, que carece de actividad hormonal, en pacientes que sufren sepsis
generalizada.
 Entre las funciones conocidas hasta el momento, se sabe que la PCT
interviene en la modulación de la respuesta inflamatoria y que induce la
producción de óxido nítrico en el endotelio vascular, hecho que le confiere
un papel protector durante el episodio.
LA PCT COMO MARCADOR DE SEPSIS
La PCT es un polipéptido estable en plasma
refrigerado. Tiene una vida media plasmática de unas
24-30 horas, y de 30-45 horas en pacientes con
graves disfunciones renales. Las concentraciones de
PCT circulante en individuos sanos permanece por
debajo de 0.05 ng/ml.
 En infecciones localizadas, puede alcanzar los 0.5 ng/ml. En un estado de
sepsis con repercusión sistémica de origen bacteriano, la PCT comienza a
aumentar a las 4-6 horas de producido el estímulo, alcanza su
concentración máxima entre las 12 y 36 horas siguientes, con valores
incluso mayores de 10 ng/ml y luego, cuando dicho estímulo desaparece,
comienza a decaer. Cuando la sepsis no es de origen bacteriano, los
niveles se mantienen en el rango inferior (< 1ng/ml
 . Cuando se tienen niveles entre 0.5 y 2 ng/ml, no puede ser excluida la
sepsis y se recomienda otra determinación dentro de las 6-24 horas,
observando los signos y síntomas clínicos. Es conveniente repetir la
prueba cada 24 horas en pacientes con riesgo de desarrollar sepsis para su
monitoreo
 INCREMENTO DE PCT NO RELACIONADA A INFECCIÓN
 Existen unas pocas situaciones en las cuales la PCT puede estar
elevada por causas no infecciosas.
 Determinación cuantitativa de PCR

La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) es una técnica de

laboratorio que permite amplificar pequeños fragmentos de ADN
para identificar gérmenes microscópicos que causan
enfermedades. La proteína C reactiva es producida por el hígado y
su nivel se eleva cuando hay inflamación en todo el cuerpo.
Método que se usa en la práctica de PCR
La Proteína C-Reactiva humana (PCR) en muestras de pacientes, estándar o controles
reacciona con los anticuerpos anti-PCR humanos en presencia de un buffer
acelerador. El complejo inmune así formado causa turbidez en la mezcla de reacción
la cual es directamente proporcional a la concentración de PCR y se mide por
turbidimetría.

Los resultados se calculan por medio del estándar de PCR el cual se usa en cada
serie.
Muestras
 Suero, Plasma-EDTA o Heparina.
 La bilirrubina hasta 10 mg/dl, la hemoglobina
hasta 250 mg/dl
 muestras turbias no interfieren en el resultado.
Ensayo
 Longitud de onda: 340 nm
 Paso de luz: 1 cm
 Temperatura: 25°C
 Medición: Frente a un blanco de reactivo (RB). Sólo se requiere un
blanco de reactivo por serie.
ESQUEMA DE PIPETEO
Materiales:
 muestra ( suero)
 kit de reactivo para pcr
 micropipetas de 1000 microlitros
 puntas de pipetas
 Gradillas
 Espectrofotometro
Procedimiento:
 Se rotula 3 tubos con los nombres de blanco , estándar y la muestra
 como todos los reactivos están listos para usarse tomaremos 50 microlitros del estándar y
lo colocaremos en el tubo rotulado como estándar
 colocamos 50 microlitros de la muestra y lo colocaremos en el tubo rotulado como
muestra
 Del buffer colocaremos 1000 microlitros en los tres tubos

Terminado el proceso se homeginizara los tubos y se deja incubar durante 5 minutos

temperatura ambiente para luego medir la absorbancia de la muestra y el estándar y esa sera la
primera absorbancia medida ( A1)
Terminado el proceso se homeginizara los tubos y se deja incubar durante 5 minutos
temperatura ambiente para luego medir la absorbancia de la muestra y el estándar y esa sera
la primera absorbancia medida ( A1)
ahora colocaremos 100 microlitros del frasco AS que es el Antisuero monoespecífico anti-
PCR humana

Terminado el proceso se homogenizará los tubos y se deja incubar durante 5 minutos

temperatura ambiente para luego medir la absorbancia de la muestra y el estándar y esa
será la segunda absorbancia medida (A2)
Cálculos
VALORES DE REFERENCIA
hasta [mg/dl] [mg/l]

Recién nacidos hasta 3 días 1,5 15

Niños desde el cuarto día 1,0 10

Adultos 0,5 5