Protocolo de Química Sanguínea

PROTOCOLO DE QUIMICA SANGUINEA
DELIA ROSA HERRERA HERNÁNDEZ

Bacterióloga
BLANCA LUZ SALDARRIAGA GAVIRIA

Bacterióloga
REVISADO POR APROBADO POR

NOMBRE Delia Rosa Herrera Hernández Paulo Andres Gutierrez
CARGO Bacterióloga Representante de la Dirección
FIRMA
FECHA Septiembre de 2010 Septiembre de 2010
C0NTENIDO
SECCIÓN DE QUÍMICA SANGUÍNEA

EQUIPO DE QUIMICA
PRUEBA DE GLUCOSA
CURVAS
PRUEBA DE TRIGLICERIDOS
PRUEBA DE COLESTEROL
PRUEBA DE COLESTEROL HDL
PRUEBA DE UREA
PRUEBA DE CREATININA
DEPURACION DE CREATININA EN ORINA DE 24 HORAS
PRUEBA DE ALANINA AMINOTRANSFERASA ALT – GPT
PRUEBA DE ASPARTATO AMINOTRANSFERASA AST/GOT
PRUEBA DE BILIRRUBINA TOTAL SERA – PAK PLUS
PRUEBA DE BILIRUBINA DIRECTA SERA – PAK PLUS
PRUEBA DE ACIDO URICO
GARANTÍA DE LA CALIDAD
CONTROL DE CALIDAD INTERNO
CONTROL DE CALIDAD EXTERNO
BIBLIOGRAFIA
SECCIÓN DE QUÍMICA SANGUÍNEA
Comprendida por el análisis y procesamiento de las pruebas de:
1. Glicemia
2. Colesterol
3. Triglicéridos
4. Ácido úrico
5. Colesterol HDL
6. Urea
7. Creatinina
8. GOT
9. GPT
10. Bilirrubina Total
11. Bilirrubina Directa
El Procesamiento de las muestras se divide en tres fases:
1. Fase Pre Analítica: Es la recepción de la orden médica, toma y recepción de muestras.
2. Fase Analítica: Determinación del analito cuantitativamente (Procesamiento de las muestras, según
prueba a analizar).
3. Fase Post Analítica: Cálculos correspondientes, elaboración, interpretación y emisión de informes y

trascripción de hallazgos en el FADX05 - Resultados de Química Sanguínea.
En todo análisis se deben tener en cuenta las posibles variabilidades que pueden afectar un resultado en un
momento determinado, tales como:
- Biológico o factor fisiológico de cada individuo: Ciclos hormonales, estrés, actividad física, ayuno,
ingesta de alimentos, drogas, etc.
- Momento de extracción: Efecto postural, torniquetes, tubos con tapones o aditivos anticoagulantes.
- Factor de la muestra o procesamiento: Hemólisis, lipemia, fibrina, medicamentos.
- Estabilidad de los constituyentes en la muestra: Tiempo en el que se hace la determinación y/o
modo como se conserva dicha muestra.
- Reporte y emisión de resultados: Deben ser sometidos a varios filtros antes de salir del laboratorio
EQUIPO DE QUIMICA
En la actualidad el laboratorio cuenta con un equipo automatizado Metrolab 2300 plus, para el análisis de la
química Sanguínea.
El equipo tiene montado un programa de control y calidad interno, donde el mismo va recogiendo los datos,
saca las medias y realiza las gráficas respectivas que son analizadas diariamente por el bacteriólogo (a), antes
de procesar las muestras del día.
Sí los datos de los controles no cumplen con las reglas de Westgard, se realizan las acciones correctivas
correspondientes.
Para su manejo ver el - Guía rápida para manejo del Metrolab 2300 plus.
CUIDADO Y MANTENIMIENTO DEL EQUIPO
El programa de mantenimiento incluye los siguientes procedimientos:
RUTINA DIARIA: En el equipo ingreso por la opción movimientos y se dan los siguientes pasos:
1. Llenado de bomba: Se deben realizar tres llenados de bomba e inspeccionar que las mangueras no
tengan burbujas.
2. Lavado de aguja
3. Purga de jeringa
4. Purga de lavador
Además de lo anterior diariamente se debe:
- Vaciar y limpiar el botellón de residuos, incluyendo el tapón y la tubuladura
-Limpiar la bandeja de reactivos/muestras pasándole un trapo con detergente suave y agua.
Nota importante: se debe remover los sólidos de la aguja con un hisopo de algodón embebido en
solución y secar con un papel tissue sin pelusa.
Mantenimiento según necesidad: Se debe realizar cuando el instrumento indica la necesidad de una
acción correctiva, o cuando se encuentran problemas de funcionamiento anormal, relacionado con el
mantenimiento:
-Fallas hidráulicas: aparecen gotas en la punta de la aguja o burbujas en el sistema.
- Mensaje que solicita el recambio de la tubuladura de bomba. Reemplazarla y confirmar con si en la

pantalla correspondiente.
- Mensaje que solicita el reemplazo de jeringa. Reemplazar la jeringa y colocar si en la pantalla. Si se

reemplaza la jeringa fuera del menú correspondiente, el contador de jeringa se debe reponer a cero.
- Mensaje que solicita el reemplazo de la bomba de lavado. Reemplazar la bomba cuanto antes.
- Secado deficiente de la cubeta, o acción de limpieza. Reemplazar el bloque de secado. Efectuar el

mantenimiento de la unidad de lavado.
PRUEBA DE GLUCOSA
Enzimática - espectrofotométrica
Glucosa oxidasa / peroxidasa
Fundamento del método
La glucosa presente en la muestra origina, según las reacciones acopladas descritas, un complejo coloreado
que se cuantifica por espectrofotometría.
Materia adicional
Baño de a 37º C.
Espectrofotómetro para lecturas a 500nm.
Procedimiento
- Dejar atemperar el reactivo durante unos minutos.

- Pipetear en tubos de ensayo.
BLANCO PATRON MUESTRA

Patrón Glucosa 10 µl
Muestra 10 µl
Reactivo 1ml 1ml 1ml
- Agitar bien e incubar los tubos durante 30 minutos a temperatura ambiente o durante 5 minutos a 37º C.
- Leer absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco a 500nm. El color es estable durante 2
horas.
Valores normales
Hombres y Mujeres: 70 – 100 mg/dl
Valores Críticos
Lineabilidad Deterioro del Reactivo

500 mg/dl > 0.15 abs
Si el resultado da mayor al rango establecido en la lineabilidad, se diluye la muestra y se procesa nuevamente.

Después de la dilusión se obtiene un resultado real, el cual es el verdadero valor de la prueba.
Característica
- No interfiere el ácido ascórbico, la hemoglobina, la bilirrubina ni la lipemia moderada.

CURVAS
Una curva de glicemia es solicitada por el médico cuando un paciente presenta glicemia en ayunas superior o
inferior a los valores normales.
Cuando se ordena un Test de Sullivan la paciente no necesariamente debe estar en ayunas. Se le da una carga
de 50gr de glucosa y a la hora se sangra.
En caso tal que el resultado se superior a 135mg/dl, el médico ordena curva de glicemia de 3 horas con 100gr
de glucosa, entonces inicialmente se sangra la paciente en ayunas, luego de la carga se sangra a la primera
hora, segunda hora y tercera hora.
A pacientes no embarazadas la carga de glucosa es de 75gr. El procedimiento es igual, sangrar en ayunas,

pero antes de la carga hacer al paciente un dextrometer y analizar si se puede dar la carga o no.
Si se obtiene un valor de dextrometer mayor o igual a 126 mg/dl, la curva se cancela o se continua según
criterio del médico.
Si se puede continuar la curva, se sigue con la toma de muestras cada hora por el tiempo que se ordenó la
curva.
Si el paciente que se va a realizar la curva de tolerancia a la glucosa es un niño, se debe hacer un

cálculo para darle la carga de glucosa. Se debe multiplicar el peso del niño por 1.75 gr.
PRUEBA DE TRIGLICERIDOS
Enzimático – espectrofotométrica
Glicerol fosfato oxidasa / peroxidasa
Fundamento
Los triglicéridos presentes en la muestra originan un complejo coloreado que se cuantifica por espectrometría.
Material adicional
- Baño de agua a 37º C.

- Opcional: espectrofotómetro para lecturas 500nm (490 – 510).
Procedimiento
- Dejar atemperar el reactivo durante minutos.

- Pipetear.

Patrón 10 µl
Muestra 10 µl
- Agitar e incubar durante 15 minutos a temperatura ambiente (16 – 25º) o durante 5 minutos a 37º C.
- Leer frente al blanco de reactivos a 500 nm. El color es estable por 2 horas.
Valores normales
Hombre y Mujeres: 60 – 150 mg/dl
Valores Críticos

600 mg/dl > 0.15 abs

Características
- Interferencias: Acido ascórbico, hemoglobina, bilirrubina. No interfiere la lipemia.

PRUEBA DE COLESTEROL
Enzimática – espectrofotométrica
Colesterol oxidasa / peroxidasa
Tanto el colesterol libre como el esterificado, presentes en la muestra originan un complejo coloreado.
Materiales

- Espectrofotómetro a 500nm (490 - 510).
Procedimiento
- Dejar atemperar el reactivo de trabajo.


Patrón Colesterol 10 µl
Muestra 10 µl
- Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente o durante 5 minutos a 37ºC.
- Leer frente al blanco. El color es estable por 2 horas.
Valores normales
Hombre: 123 – 270 mg/dl

Mujeres: 123 – 243 mg/dl
Valores Críticos

1000 mg/dl > 0.20 abs

Características
- Interferencias: El ácido ascórbico, la hemoglobina, la bilirrubina interfieren.

- La lipemia no afecta los resultados.
PRUEBA DE COLESTEROL HDL
Precipitación / enzimática – espectrofotométrica
Los quilomicrones y las lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL) y de baja densidad (LDL) presentes en la
muestra precipitan en presencia de fosfotungstato y iones magnesio.
El sobrenadante de la centrifugación contiene las lipoproteínas de elevada densidad (HDL), cuyo colesterol se
cuantifica espectrofotométricamente.
Materiales
- centrífuga.
- Baño maría.
- Espectrofotómetro.
Procedimiento
- Pipetear en tubo de centrífuga.

Muestra 0.2 ml
Reactivo B o precipitante 0.5 ml
- Agitar y dejar durante 10 minutos a temperatura ambiente.
- Centrifugar durante 10 minutos a un mínimo de 4.000 R. P. M (todas las revoluciones).
- Dejar atemperar el reactivo A durante unos minutos.

Patrón Colesterol HDL 50 λ
Sobrenadante muestra 50 λ
Reactivo A 1ml 1ml 1ml
- Agitar bien e incubar durante 30 minutos a temperatura ambiente ó durante 10 minutos a 37º C.
- Leer luego a 500 nm. El color es estable por 30 minutos.
Valores normales
Hombres: 30 – 60 mg/dl
Mujeres: 40 – 70 mg/dl
Valores Críticos

150 mg/dl > 0.10 abs

Características
- Interferencias: El ácido ascórbico, la hemoglobina y la bilirrubina.
Notas:
- Se puede modificar los volúmenes de muestra y reactivo B manteniendo la misma proporción.
- El sobrenadante debe ser completamente claro. En caso de persistir la turbidez adicionar otros 0.5 ml
de reactivos B, mezclar bien y centrifugar de nuevo. Multiplicar el resultado obtenido por 1.7 para
corregir la dilución afectada.
PRUEBA DE UREA
Enzimática / espectrofotométrica
Código 115 2x250ml
Fundamento
La urea presente en la muestra, origina un indofenol coloreado que se cuantifica espetrofotométricamente.
Reactivos
- Vaciar el contenido de un vial de reactivos A2 en un frasco de reactivo A1.

- Homogenizar estable 2 meses a 2 – 8º C.
- Si desea preparar volúmenes menores, mezclar en la proporción 1ml reactivo A2 + 24ml reactivo A1.
Material adicional

- Espectrofotómetro a 600nm (590 – 610).
Muestras
- Suero – plasma u orina.

- Se recomienda la heparina como anticoagulante.
- Diluir la orina fresca 1/50 con agua destilada.
- Multiplicar el resultado obtenido por 50.
Procedimiento
- Dejar atemperar durante unos minutos.


Patrón urea 10 λ
Muestra 10 λ
Reactivo A 1ml 1ml 1ml
Reactivo B 1ml 1ml 1ml
- Leer frente al blanco a 600nm. El color es estable por 2 horas.

Valores normales
Suero o plasma: 10 – 50 mg/dl

Orina: 20 – 35 g/24 horas
Valores Críticos

300 mg/dl > 0.10 abs

Características
- Interferencias: No debe utilizarse sales amoniacas como anticoagulantes, ya que interfiere en la

reacción.
- El reactivo A líquido es muy sensible a la temperatura, por lo que se recomienda conservarlo
estrictamente a 2 – 8º C, la estabilidad indicada se reduce si se mantiene durante periodos
prolongados a temperatura ambiente.
PRUEBA DE CREATININA
Cinética / espectrofotométrica
Picrato alcalino
La creatinina presente en la muestra reacciona con el picrato en medio alcalino originando un complejo
coloreado.
Composición
Reactivo A: Acido picrico 25mmol/1

Reactivo B: Hidróxido sódico 0.2mol/l detergente
Patrón de glucosa/urea/creatinina
Reactivo de trabajo: Mezclar volúmenes iguales de reactivo A y de reactivo B. Estable 2 meses de 2 – 8º C.
Muestras
Suero – plasma u orina.

Diluir la orina fresca 1/50 con agua destilada.
Multiplicar el resultado obtenido por 50.
Procedimiento
- Precalentar el reactivo de trabajo y la muestra a 37º C durante unos minutos. Longitud de onda 500nm
(490- 510).
- Pipetear en una cubeta precalentada a 37º C. Pipetear patrón o muestra 1ml - 100 λ o 0.5ml o 50 λ.
- Mezclar y hundir analice.
Valores normales
Hombre y Mujeres: 0.8 – 1.4 mg/dl
Valores Críticos

20 mg/dl > 0.35 abs

DEPURACION DE CREATININA EN ORINA DE 24 HORAS
El paciente debe cumplir con unas condiciones especiales, como son:
- No ingerir carne y café durante el periodo de recolección y tomar abundante líquido.

- Recolectar la orina durante 24 horas, el paciente debe fijar una hora cero y a partir de entonces recoger
todo el volumen de orina y llevarlo al laboratorio donde se mide y filtra un poco de orina para la
determinación de creatinina en orina (diluir la orina 1:10 con agua destilada).
- En el laboratorio se sangra al paciente para la determinación de creatinina en suero.
- Para la obtención del resultado de la depuración se debe hacer un cálculo con base en los datos
anteriores.
Cálculo
Depuración de creatinina sin corregir:
Dc sin corregir = Creatinina en orina x dilución x volumen

Creatinina sérica x 1.440 (min. en 24 horas)
Depuración de creatinina corregida:
Dc corregida = Depuración de creatinina sin corregir x 1.73

Superficie del paciente
Superficie corporal (mts2) = Peso del paciente x 4 x 7

Peso + 90
Valores normales
Depuración sin corregir:
Hombres: 72 -141 ml / min x 105.4

Mujeres: 74 – 130 ml / min x 95.4
Depuración corregida:
Hombres: 85 – 185 ml / min

Mujeres: 75 – 133 ml / min
PRUEBA DE ALANINA AMINOTRANSFERASA ALT – GPT
Muestras
Suero
La alanina aminotransferasa en suero es estable al menos 3 días a 2 – 8º C.
Procedimiento
- Precalentar el reactivo de trabajo a 37º C durante unos minutos

- Pipetear en una cubeta
Reactivo de trabajo 1.0ml

Muestra 50µl
- Mezclar e insertar en la porta cubetas termostatizado a 37º C, poner el cronómetro en marcha.

- A los 2 minutos anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto, durante 3 minutos.
- Comprobar que diferencias entre absorbancia sean sensiblemente iguales, calcular el incremento de
absorbancia por minuto promedio.
Nota: El RA 50 tiene la ventaja de dar el valor total.
Valores normales
Sin fosfato de piridoxal hasta 41 U/L

Con fosfato de piridoxal hasta 65 U/L
Valores Críticos

500 mg/dl > 1.2 abs

Temperatura de incubación
La determinación también puede efectuarse a 30º C. el factor que relaciona las concentraciones obtenidas en
sueros humanos a las dos temperaturas es el siguiente:
37º C/30º C: 1 .39.
PRUEBA DE ASPARTATO AMINOTRANSFERASA AST/GOT
Muestra
Suero
La aspartato aminotransferasa en sueros es estable al menos 7 días a 2 – 8º C.
Procedimiento
- Precalentar el reactivo de trabajo a 37º C durante unos minutos.

- Pipetear en una cubeta.
Reactivo de trabajo 1.0ml

Muestra 50µl
- Mezclar e insertarla en el porta cubetas termostatizado a 37º C. Poner el cronómetro en marcha.

- A los 2 minutos anotar absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto, durante 3 minutos.
Nota: El RA 50 nos reporta un solo dato final.
Valores normales
Sin fosfato de piridoxal hasta 42 U/L

Con fosfato de piridoxal hasta 50 U/L
Valores Críticos

500 mg/dl > 1.1 abs

PRUEBA DE BILIRRUBINA TOTAL SERA – PAK PLUS
Principio
El ácido sulfanilico reacciona con el nitrito sódico para formar un ácido sulfanilico diazotizado. En presencia de
dimetilsulfoxido, la bilirrubina total reacciona con ácido sulfanilico diazotizado para formar azobilirrubina que
presenta una absorción máxima a 555nm en un medio ácido.
Composición del reactivo
Reactivo 1: Ácido sulfanilico 28.9 mmol/L

Ácido clohidrico 165mmol/L
Dimetilsulfoxido 7mmol/L
Reactivo 2: Nitrito sódico 43mmol/L

Azida sódica 0.09%
Calibrador: Usar calibrador de bilirrubina (B03-4593-54)
Estabilidad del reactivo
- Si se almacenan protegidos de la luz a una temperatura entre 2º C y 8º C, los reactivos permanecen

estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
- Desechar los turbios y evitar la exposición a la luz directa.
Muestra
- Suero sin hemólisis.

- Plasma hepatizado o plasma EDTA.
Precauciones
Contiene azida Sódica. La azida Sódica puede reaccionar con las tuberías de cobre y plomo y formar ácidas
metálicas explosivas al eliminar desechos por un desagüe sanitario.
Si este método de eliminación cumple con los requisitos locales y nacionales vigentes, eliminar los reactivos con
gran volumen de agua para evitar la acumulación de azidas.
Procedimiento
Longitud de onda: 555nm (530 – 580)

Temperatura: 37º C
Cubeta: 1cm de paso de luz
BLANCO DE MUESTRA BLANCO DE CALIBRADOR

MUESTRA CALIBRADOR
Reactivo 1 1.5ml 1.5ml 1.5ml 1.5ml
Reactivo 2 50µl
Muestra 1 00µl 100µl - -
Calibrador - - 100µl 100µl
- Mezclar y tras una incubación de 5min, leer la densidad óptica (D.O).

- El color final se mantiene estable durante un mínimo de una hora.
Nota: Enjuagando con una solución de hidróxido de sodio 0.1 N, pueden evitarse algunas interferencias,
cuando los tubos están recubiertos con proteínas.
Cálculo
Con factor: (muestra D. O Blanco de muestra D. O) x F.
Bilirrubina total
Mg/dl F: 21.6
Mg/L F: 216
Umol/L F: 367
Con calibrador
Muestra D.O – Blanco de muestra D.O x n

Calibrador D.O - Blanco del calibrador D.O
Donde n: es la concentración del calibrador
Valores de referencia
Bilirrubina total: < 10mg/L

< 1.0mg/L
< 17umol/L
Valores Críticos

20 mg/dl -

PRUEBA DE BILIRUBINA DIRECTA SERA – PAK PLUS
Principio
El ácido sulfanilico reacciona con el nitrito sódico para formar un ácido sulfanilico diazotizado.
Sólo la bilirrubina directa reacciona con el ácido sulfanilico diazotizado para formar azobilirrubina que presenta
una absorción máxima a 555nm en un medio ácido.
Composición del reactivo
Reactivo 1: Ácido sulfanilico 28.9nmol/L

Ácido clorhídrico 165mmol/L
Reactivo 2: Nitrito sódico 43mmol/L

Azida sódica 0.09%
Calibrador: Usar calibrador de bilirrubina (B03-4593-54).
Estabilidad del reactivo
Si se almacena protegidos de la luz a una temperatura de 2º C y 8º C los reactivos permanecen estables hasta
la fecha de caducidad indicada en la etiqueta.
Desechar los reactivos turbios y evitar la exposición a la luz directa.
Muestra
Suero sin hemólisis.

Plasma heparinizado o plasma EDTA.
Precauciones
Contiene azida sódica, la azida sódica puede reaccionar con las tuberías de cobre y plomo y formar ácidas
metálicas explosivas. Al eliminar desechos por un desagüe sanitario, si este método de eliminación cumple los
requisitos locales y nacionales vigentes, eliminar los reactivos con gran volumen de agua para evitar la
acumulación de azidas.
Procedimiento
Longitud de onda: 555nm (530 – 580)

Temperatura: 37º C
Cubeta: Ruta de luz de 1cm.
BLANCO DE BLANCO DE
MUESTRA CALIBRADOR
MUESTRA CALIBRADOR
Reactivo 1 1.5ml 1.5ml 1.5ml 1.5ml
Reactivo 2 - 50µl - 50µl
Muestra 1 00µl 100µl - -
Calibrador - - 100µl 100µl
- Mezclar y tras una incubación de 5min leer la densidad óptica (D.O).
- El color final se mantiene estable durante un mínimo de una hora.
Calculo
Con factor: (muestra D.O. Blanco de muestra D.O) x F.
Bilirrubina directa:
Mg/dl F: 16.8
Mg/l F: 168
Umol F: 286
Con calibrador:
Muestra D.O – Blanco de muestra D.O x n_
Calibrador D.O - Blanco del calibrador D.O
Donde n: concentración del calibrador.
Valores de referencia
Bilirrubina total: < 3mg/L

< 0.3mg/dl
< 5.1umol/L
Valores Críticos

18 mg/dl -

PRUEBA DE ACIDO URICO
Enzimática – espectrofotométrica
Uricasa / peroxidasa
El ácido úrico en la muestra origina un complejo coloreado que se cuantifica por espectrofotometría.
Material adicional
- Baño de agua a 37º C (opcional)

- Espectrofotómetro a 520 nm (510 – 530)
Procedimiento
- Dejar atemperar el reactivo.


Patrón A.U 25 λ
Muestra 25 λ
- Agitar e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente (16 – 25) o durante 5 minutos a
37º C.
Valores normales
Hombres: 3.4 – 7.0 mg/dl

Mujeres: 2.4 – 5.7 mg/dl
Valores Críticos

25 mg/dl > 0.20 abs

Características del método
- Interferencia: La lipemia afecta los resultados.

- No afecta el ácido ascórbico – la hemoglobina – la bilirrubina.
GARANTÍA DE LA CALIDAD
La Garantía de la Calidad en el laboratorio inicia desde el mismo momento en que el médico ordena un análisis
y finaliza cuando se entregan los resultados que fueron reportados.
En esta Sección se tiene un Sistema de Control de Calidad Interno y Externo, el cual esta diseñado para
incrementar la probabilidad de que cada resultado reportado por el laboratorio es valido y pueda ser usado con
confianza por el médico para hacer un diagnóstico o para tomar una decisión en un tratamiento.
La confiabilidad en los resultados se logra cuando se cumplen los parámetros de exactitud y precisión en todos
los procesos del laboratorio.
CONTROL DE CALIDAD INTERNO
Este control se realiza diariamente en el laboratorio de la siguiente manera:
Se montan dos sueros control valorados Nivel I y Nivel II, cuyos resultados se comparan con el inserto que
traen los sueros control valorado o suero control y no deben pasar de +2DS -2DS. Con este procedimiento
medimos la exactitud y la precisión del equipo.
Se registran los valores una vez comparados con el Inserto en el FADX27 – Seguimiento a la calibración de
Técnicas – Química y la aceptación o rechazo del control de analito se registra en el FADX28 – Control Diario
de Calibración de Técnicas - Química
Exactitud
Se mide con estándares o calibradores de concentraciones exactas de casas comerciales. El calibrador se

monta un día específico de la semana, determinado previamente.
La exactitud nos ayuda a detectar errores sistémicos como:
- Funcionamiento del equipo (filtros y lámparas).

- Calibración de la pipeta.
- Lavado de la vidriería.
- Degradación del reactivo.
- Mala calibración de los métodos.
Precisión
Se mide con sueros control valorados de casas comerciales, estos sueros son liofilizados y se deben
reconstituir con 5 ml de agua destilada, dejar reposar 30 min. Y mezclar suavemente, luego se deben repartir en
alícuotas y congelar a 20º C, para usar diariamente con cada serie de determinaciones.
La precisión nos ayuda a detectar errores aleatorios, los cuales son inherentes a la misma muestra, donde los
valores se están dando por encima y por debajo del valor conocido.
 Exceso de tiempo y temperatura.

 Falta de tiempo y temperatura.
 Exceso de muestra (pipeteo).
 Muestra incompleta (pipeteo).
Nota: El agua destilada para reconstituir el suero control debe ser medida con una pipeta de 5ml y no secarla al
calor; utilizar siempre la misma pipeta.
Cuando hay cambio de lote del suero control se programa nuevamente el equipo y se calibra nuevamente.
Obtención de los Cálculos de Control de Calidad Interna
Completar un mínimo de 20 datos y calcular la media, desviación estándar y coeficiente de variación.
Dibujar la gráfica de Levey Jennings.
Cada vez que se procese un control; pasar los resultados a la gráfica, esta gráfica se realiza en un papel
cuadriculado, se dibuja una línea en la mitad del papel y se coloca el valor de la media obtenido, se asigna un
número de cuadros para cada desviación estándar, luego se dibujan tres líneas por encima de la media para
+1DS, +2DS, +3DS y tres líneas por debajo para -1DS, -2DS, -3DS.
Los valores obtenidos nunca deben pasar de +2DS y -2DS.
Exámenes que deben ser sometidos a control de calidad interna en química sanguínea:
1. Glicemia.
2. Colesterol.
3. Triglicéridos.
4. Urea.
5. Creatinina.
6. Ácido úrico.
7. Colesterol HDL.
8. Bilirrubina total.
9. Bilirrubina directa.
10. GOT.
11. GPT.
CONTROL DE CALIDAD EXTERNO
Este control de calidad se debe realizar cada mes y es enviado por el laboratorio departamental.
Es un control de calidad más específico ya que participan varios laboratorios del Departamento de Antioquia.
Cada caja de control de calidad externo es enviado cada año y contiene doce frascos de suero liofilizado, uno
para cada mes.
Procedimiento Manual
El suero control externo se reconstituye con 5 ml de agua destilada y se deja en reposo por 30 minutos, luego
se monta 4 tubos: El blanco, el calibrador, el suero control interno y el suero control externo, junto con las
muestras; al día siguiente se monta nuevamente el suero control externo, se comparan los dos valores
obtenidos y el resultado final se envía por internet a la página: www.prevecal.net
Entrada de resultados:
-Elegir español
-Elegir química clínica
-Login: 030097 (codigo del laboratorio)
-Password: 036708
Procedimiento en el equipo
El suero control externo se reconstituye con 5 ml de agua destilada y se deja en reposo por 30 minutos, luego
se monta el suero control externo correspondiente al mes, junto con las muestras; al día siguiente se monta
nuevamente el suero control externo, se comparan los dos valores obtenidos y el resultado se envía por
internet a la página: www.prevecal.net.
Entrada de resultados:
-Elegir español
-Elegir química clínica
-Login: 030097 (codigo del laboratorio)
-Password: 036708
Cada mes el Programa de Control de Calidad Externo PREVECAL envía al correo del Hospital los resultados
de los diferentes analitos y las gráficas correspondientes, las cuales permiten detectar errores en el instrumento
o en el operador y así asegurar un reporte de resultados correctos y reproducibles.
Además cuando llega un resultado se evalúa cada uno de los analitos, si alguno no entra en los rangos
establecidos, se toman las medidas correctivas necesarias como:
-Calibración de la técnica
-Revisión de controles internos
-Revisión de reactivos
-Reconstitución de controles
-Revisión de controles internos
-Llamar al ingeniero de la casa comercial
Este análisis se reporta en la carpeta de controles de calidad externa.
Exámenes sometidos a control de calidad externo:
1. Glicemia.
2. Colesterol.
3. Triglicéridos.
4. Ácido úrico.
5. Urea.
6. Creatinina.
7. GOT.
8. GPT.
9. Bilirrubina total.
BIBLIOGRAFIA
-Manual de usuario, Wiener Lab. Metrolab 2300 plus, Randol Access Clinical analyser.
-Insertos de las diferentes técnicas de laboratorio.
-Rodríguez RMA y col. Las variables preanaliticas y su influencia en los resultados de laboratorio Clinico.
-Normas de wetsgard.
-Exámenes de laboratorio en la práctica corriente / Zoraida Torregroza F.
-Guías para laboratorio Química Clínica I, Universidad de Antioquia. Escuela de Bacteriología y Laboratorio
Clinico. Departamento de Química Clínica y Citología.

Protocolo de Química Sanguínea

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PROTOCOLO DE QUIMICA SANGUINEA

DELIA ROSA HERRERA HERNÁNDEZ

BLANCA LUZ SALDARRIAGA GAVIRIA

REVISADO POR APROBADO POR

SECCIÓN DE QUÍMICA SANGUÍNEA

SECCIÓN DE QUÍMICA SANGUÍNEA

Comprendida por el análisis y procesamiento de las pruebas de:

El Procesamiento de las muestras se divide en tres fases:

1. Fase Pre Analítica: Es la recepción de la orden médica, toma y recepción de muestras.

3. Fase Post Analítica: Cálculos correspondientes, elaboración, interpretación y emisión de informes y

CUIDADO Y MANTENIMIENTO DEL EQUIPO

El programa de mantenimiento incluye los siguientes procedimientos:

Además de lo anterior diariamente se debe:

- Vaciar y limpiar el botellón de residuos, incluyendo el tapón y la tubuladura

-Limpiar la bandeja de reactivos/muestras pasándole un trapo con detergente suave y agua.

-Fallas hidráulicas: aparecen gotas en la punta de la aguja o burbujas en el sistema.

- Mensaje que solicita el recambio de la tubuladura de bomba. Reemplazarla y confirmar con si en la

- Mensaje que solicita el reemplazo de jeringa. Reemplazar la jeringa y colocar si en la pantalla. Si se

- Secado deficiente de la cubeta, o acción de limpieza. Reemplazar el bloque de secado. Efectuar el

Fundamento del método

- Dejar atemperar el reactivo durante unos minutos.

BLANCO PATRON MUESTRA

Hombres y Mujeres: 70 – 100 mg/dl

Lineabilidad Deterioro del Reactivo

Si el resultado da mayor al rango establecido en la lineabilidad, se diluye la muestra y se procesa nuevamente.

- No interfiere el ácido ascórbico, la hemoglobina, la bilirrubina ni la lipemia moderada.

A pacientes no embarazadas la carga de glucosa es de 75gr. El procedimiento es igual, sangrar en ayunas,

Si el paciente que se va a realizar la curva de tolerancia a la glucosa es un niño, se debe hacer un

- Baño de agua a 37º C.

- Dejar atemperar el reactivo durante minutos.

BLANCO PATRON MUESTRA

Hombre y Mujeres: 60 – 150 mg/dl

Lineabilidad Deterioro del Reactivo

Si el resultado da mayor al rango establecido en la lineabilidad, se diluye la muestra y se procesa nuevamente.

- Interferencias: Acido ascórbico, hemoglobina, bilirrubina. No interfiere la lipemia.

Fundamento del método

- Baño de agua a 37º C.

- Dejar atemperar el reactivo de trabajo.

BLANCO PATRON MUESTRA

Hombre: 123 – 270 mg/dl

Lineabilidad Deterioro del Reactivo

Si el resultado da mayor al rango establecido en la lineabilidad, se diluye la muestra y se procesa nuevamente.

- Interferencias: El ácido ascórbico, la hemoglobina, la bilirrubina interfieren.

PRUEBA DE COLESTEROL HDL

Precipitación / enzimática – espectrofotométrica

Fundamento del método

- Pipetear en tubo de centrífuga.

BLANCO PATRON MUESTRA

Lineabilidad Deterioro del Reactivo

Si el resultado da mayor al rango establecido en la lineabilidad, se diluye la muestra y se procesa nuevamente.

- Interferencias: El ácido ascórbico, la hemoglobina y la bilirrubina.

La urea presente en la muestra, origina un indofenol coloreado que se cuantifica espetrofotométricamente.

- Vaciar el contenido de un vial de reactivos A2 en un frasco de reactivo A1.

- Baño de agua a 37º C.

- Suero – plasma u orina.

- Dejar atemperar durante unos minutos.

BLANCO PATRON MUESTRA

Reactivo B 1ml 1ml 1ml

- Leer frente al blanco a 600nm. El color es estable por 2 horas.

Suero o plasma: 10 – 50 mg/dl

Lineabilidad Deterioro del Reactivo

Si el resultado da mayor al rango establecido en la lineabilidad, se diluye la muestra y se procesa nuevamente.

- Interferencias: No debe utilizarse sales amoniacas como anticoagulantes, ya que interfiere en la