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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

ELABORADO POR: CAROLINA HOYOS VELASQUEZ BACTERIOLOGA COOPERATIVA COOMAN

LABORATORIO CLINICO EMPRESA SOCIAL DEL ERSTADO HOSPITAL SAN RAFAEL DE YOLOMBO YOLOMBO 2008

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ACIDO URICO

1. Metodo Análisis enzimático colorimétrico por ácido urico con factor aclarante de lípidos (LCF) (PAP) 2. Fundamento Determinación del Acido Urico por la reacción con la uricasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona por la acción catalítica de la peroxidasa con ácido 3,5-dicloro-2-hydroxybenzenesulfónico (DCHBS) y 4-aminofenazona (PAP) para producir un complejo rojo-violeta de quinonemina como indicador. 3. Muestras Suero o plasma con heparina o EDTA, orina. Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. 4. Condiciones del paciente Para determinación en suero. Antes: • Explicar el procedimiento al paciente. • Llevar estrictamente los siguientes puntos. • Suspender la medicación de drogas como: alopurinol, salicilatos, fenilbutazona, calmantes o analgésicos, ácido ascórbico (vitamina C), buscapina, diuréticos de la trazida, tioles libres, purinas metiladas, ácido homogentístico y altas cantidades de glucosa. • Dos días antes del examen evitar ejercicios violentos.

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24 horas antes del examen, el paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas, mariscos y frijoles ya que contienen altos contenidos de purina. 48 horas antes de la venoclisis suspender el consumo de alcohol. Durante: Recoger 5 - 7 ml de sangre venosa en un tubo de tapón rojo. • Retomar nuevamente la ingesta de cualquier medicamento que pueda alterar los resultados. Después: • Aplicar presión en el sitio de punción. Para determinación en Orina: • Orina de 24 horas, teniendo en cuenta las indicaciones anteriores. Nota Las muestras lipémicas generalmente generan turbidez en la mezcla del reactivo con la muestra, lo que lleva a resultados elevados falsos. El LCF aclara completamente la turbidez causada por muestras lipémicas. Los valores en sangre total varían con la proporción de células en la sangre debido a que las células también contienen muchas más sustancias que interfieren en la reacción. 5. Condición de la muestra La sangre debe recogerse en tubos limpios, libres de metales pesados, ya que estos y los cianuros son inhibidores enzimáticos. La prueba no se ve influenciada por valores hasta 100mg/dl de hemoglobina o por valores de bilirrubina hasta 20mg/dl. La estabilidad de la muestra es: Temperatura ambiente  3 días Refrigerado  2 - 8°C por 5 días. Congelado  20°C, seis meses. En orina de 24 horas con preservativos y a temperatura ambiente → 2 días. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: 520nm, Hg 546 nm. Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20 - 25 °C ó 37°C Medir: frente a blanco de reactivos

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7. Tecnica Pipetear: Blanco Estándar Muestra Blanco ---------Muestra ------25λ Estándar ------25λ Solución Reactiva 1000λ 1000λ 1000λ Mezclar, incubar a 20-25°C durante 20-50 minutos, leer las extinciones frente a blanco de reactivos. Límite de dilución 15 mg/dl, con concentraciones superiores diluir la muestra 1 + 1 con solución de cloruro sódico al 0.9% y repetir la determinación, el resultado multiplicarlo por 2. 8. Valores de referencia Hombres: 3.7 - 7.0 mg/dl. Mujeres: 2.4 - 5.7 mg/dl. 9. Interferentes de la prueba El ácido ascórbico en concentraciones terapéuticas no interfiere en la prueba, pero en cantidades excesivas puede dar resultados elevados. Sustancias químicas con efecto antiuricosúrico. Acido etacrínico, furosemida, diuréticos de la benzotiacida. Sustancias que inhiben competitivamente la secreción tubular del urato. El p- aminohipurato, lactato, acetoacetato y B. hidroxibutírico. Por otra parte, ciertos fármacos como los salicilatos, fenilbutazona entre otros, inhiben la secreción de ácido úrico a dosis bajas, pero causan un efecto urosúrico intenso a dosis altas, debido a que estos fármacos pueden inhibir reabsorción tubular a niveles altos. El exceso del lactato también se asocia con la hiperuricemia en los casos de ejercicio fuerte y toxemia del embarazo.

Notas El etanol altera el metabolismo del ácido úrico aumentando la producción de urato y por la supresión de la excreción renal de ácido úrico. Esta última es el resultado

Ataques clínicos recidivantes de artritis.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. la cetoácidosis. En los pacientes hipertensos la reducción del flujo sanguíneo renal y el aumento de la resistencia vascular pueden ser responsables de la disminución de la fracción de filtración del urato. Las reservas de ácido úrico pueden superar los 30 g. por ejemplo carnes. aunque presenta predilecciones por articulaciones. La ingestión de alimentos ricos en purinas. • Almacenamiento adecuado de los cartuchos reactivos. obesidad. • Asegurarse que la lectura del blanco esté dentro del rango permitido. La hiperuricemia tiene también una relación positiva con la hiperlipidemia. cambios bioquímicos e incluso factores sociales y de comportamiento se asocian a modificaciones de la concentración de ácido úrico en el plasma. . Control de calidad • Cada vez que se determine ácido úrico correr con las muestras un estándar acuoso y dos suero control liofilizado. • Evaluación permanente de resultados. Correlacion clinico patologica Numerosas enfermedades. 10. excepto por el SNC. alteraciones fisiológicas. hipertensión. Precipitación de urato monosódico en forma de depósitos (tofos) por todo el cuerpo. el exceso de lactato y el uso de diuréticos. diabetes mellitus. Entre las etiologías más comunes de hiperuricemia se cuentan el fallo renal.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 5 de 83 del exceso de lactato producido por la oxidación del etanol a acetaldehído. Es de mucha importancia la determinación de ácido úrico. que inhibe competitivamente la secreción tubular renal del urato. tejido subcutáneo y bolsas sinoviales. El aumento del ácido úrico es mucho más frecuente y clínicamente más significativo que su disminución. aterosclerosis. pues los valores altos son diagnóstico de “gota”. • Adecuada extracción y manipulación de muestras límites aceptables en los controles. La gota es un trastorno del metabolismo de purinas o de la excreción renal de ácido úrico caracterizado por: Hiperuricemia. Nefropatía y a menudo nefrolitiasis. vísceras y levaduras producen una hiperuricemia leve.

.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. anticoagulantes o agua destilada aumentan los valores. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 8 horas y durante este periódo no hacer esfuerzoz corporales intensos. despues de abierto debe evitarse la contaminación.fosforrobosil transferasa. Metodo Prueba fotometrica colorimetrica para Albumina Metodo BCG 2. 3.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentracion de albumina en la muestra. El verde de bromocresol forma con la albumina en buffer de citrata un complejo coloreado.fosfato La presencia de amonio en cualquiera de los reactivos. 5. Patron de albúmina y el RGT son estables hasta la fecha de vencimiento cuando se almacenan de 2 a 25 grados centigrados. Condiciones de la muestra No usar plasma heparinizado porque se puede alterar el valor. Muestras Suero ó plasma con EDTA ó heparina. ya que esto puede aumentar la concentración de proteínas. Fundamento. Una hiperactividad de fosforribosil . El uso del torniquete no ha de execeder los 30 segundos.0 Página 6 de 83 Se han identificado dos defectos enzimáticos ligados al cromosoma sexual como etiología de la gota primaria: Una deficiencia de (H 6 PRT) hipoxantin guanin . ALBUMINA 1. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero. Estable 1 mes a 2-8 grados y 1 semana entre 15 y 25 grados 4.

7. 9. Interferencias La prueba no es influenciada por valores de Bilirrubina hasta 20mg/d.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Otras proteinas reaccionan lentamente. Hemoglobina (1 g/L). Hay 3 factores que pueden disminuir su concentración: . Correlacion clinicopatologica. La reacción de la albúmina con el verde de bromocresol es inmediata. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Patrón albúmina Muestra Reactivo blanco ---------1. 10.0 ml Mezclar bien y dejar los tubos durante 5 minutos a temperatura ambiente.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Leer la absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco de reactivo. ABS muestra ____________ X 4 g/dl albúmina ABS patrón 8. 578 nm 1 cm 20 a 25 frente a blanco de reactivo por serie.0 ml muestra ---10 ul 1.0 ml patrón 10 ul ---1.1 g/dl en hombres y mujeres.8 – 5. por lo que es conveniente no demorar la lectura. Valores normales 3. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Hg 546 nm. El color es estable durante al menos 30 minutos.0 Página 7 de 83 6.

0 Página 8 de 83 1) Pérdidas cuantiosas o frecuentes. Es estable por 7 días cuando se le añade azida sódica para prevenir posibles contaminaciones. El proceso de aglutinación provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentración de uALB de la muestra. albúminuria persistente. MICROALBUMINURIA 1. 3. paracentesis. Fundamento Las partículas de látex con anticuerpos anti-albúmina humana. (hemorragias.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Muestra Orina fresca. Condiciones de la muestra La orina debe ser lo más fresca posible. son aglutinadas por uALB presente en la muestra del paciente. La manifestacion clínica mas llamativa es el edema. Edemas carenciales. y se debe ajustar su pH a 7. 5. 2) Por síntesis defectuosa como ocurre en la mayor parte de las hepatopatías. catabolismo excesivo). Anemia persistente Neoplasia nefrosis lipoidea. 3) Por carencia de materia prima como en la hipoalimentacion.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Otras: Trastornos pulmonares. Metodo Prueba de turbidimetría para la cuantificación de microalbúmina en orina humana. y por comparación conocida se puede determinar el contenido de uALB en la muestra ensayada. Metodo de determinacion Longitud de onda: 540 nm (530-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 37°C Medición: frente a agua destilada .0 con NaOH/HCl 1 mol/L. 4. 2.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . así como de alteraciones cardiovasculares en pacientes que sufren diabetes mellitus insulinodependientes o bien insulina no-dependiente. esta aun por debajo de la concentración considerada como una proteinuria convencional. 7.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. hemoglobina 10g/L. La urea > de 1g/L y bilirrubina > 10mg/dl interfieren. La microalbuminuria es un marcador del riesgo de la nefropatía diabética. creatinina 3 g/L. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 7 ul Mezclar y leer la absorbancia frente a agua destilada y leer a los dor minutos después y se multiplica el valor por la concentración del calibrador. Valores de referencia Hasta 15 mg/L 8. siendo superior al valor normal. . concentración que. Correlacion diagnostica Se define la microalbúmina como la tasa de excresión de albúmina en orina entre 20 y 200 ug/min.0 Página 9 de 83 6. Interferencias No interfieren valores de Glucosa 2 g/L.

0 Página 10 de 83 .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

El heme es catabolizado después para formar biliverdina que se transforma en bilirrubina. hasta las células hepáticas en donde es conjugada con el ácido glucoronico. por tanto no atraviesa la membrana glomerular. el conducto biliar común y el intestino. .glucoronil . Generalidades La bilis se forma en el hígado y presenta muchos componentes. fosfolípidos. pero no de bilirrubina. El metabolismo de la bilirrubina proviene en un 80% de la descomposición de los hematíes envejecidos en el sistema retículo endotelial (bazo. La orina normalmente contiene una pequeña cantidad de urobilinógeno. El examen de la orina para los pigmentos biliares (bilirrubina) y urobilinógeno se emplea en la investigación de la ictericia. Esta forma de bilirrubina se denomina no conjugada (indirecta) que es transportada en el plasma en forma libre unida a la albúmina. hígado y medula ósea).ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Hem hem oxigenasa Biliverdina Biliverdina reductasa Bilirrubina. La bilirrubina conjugada se excreta después por las células hepáticas hacia los canalicemos intrahepáticos.transferasa. incluyendo sales biliares. El nivel de la bilirrubina serica total. El riñón no excreta bilirrubina no conjugada puesto que es insoluble en agua y en general se encuentra unida a la albúmina.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La bilirrubina total del suero incluye la bilirrubina libre o no conjugada (reacción indirecta) y una pequeña cantidad de bilirrubina conjugada o de reacción directa. agua y bilirrubina. que acaban conduciéndola a los conductos hepáticos. Un 5% de los citocromos citoplasmáticos y mitocondriales hepáticos. conjugación catalizada por la enzima Bilirrubin . y el otro porcentaje de los eritrocitos defectuosos destruidos en la medula ósea antes de ser liberados. bicarbonato. es útil para evaluar la extensión y el progreso de la ictericia.0 Página 11 de 83 BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA. esta solo aparece cuando la concentración en plasma se encuentra aumentada y siempre es de bilirrubina conjugada. La hemoglobina es liberada desde los hematíes y descompuesta en moléculas de Heme y globina. colesterol.

Condiciones de la muestra No agitar el tubo. 2. La muestra es estable por 3 días a una temperatura de 2 a 8 grados. Condiciones del paciente Reposo de 15 minutos antes de la toma de muestra. ya que en caso contrario los resultados de la prueba podrían ser inexactos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 1. Fundamento La Bilirrubina reacciona con al ácido sulfanílico diazotado (DSA) formando un color rojo. Proteger la muestra de sangre de la luz brillante. . Muestra Suero o Plasma con heparina. de que parte de la bilirrubina reacciona directamente con el reactivo de Erlich. 5. Debe procesarse la muestra el mismo día.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 4. Metodo Método modificado de Jendrassik/Gróf. La absorbancia de este color a 546 nm es directamente proporcional a la concentración de bilirrubina en la muestra.0 Página 12 de 83 La designación de Bilirrubina como directa e indirecta deriva de observaciones. Los glucoronidos de la bilirrubina solubles en agua reaccionan directamente con DSA mientras la bilirrubina indirecta conjugada con albumina reacciona sólo en la presencia de un acelerador. llevadas a cabo por Van Den Berg en 1913. mientras que la otra hay que adicionarle alcohol. alajada de la luz. y deben estar protegidas de la luz. El uso de torniquete no debe prolongarse más de 30 segundos. Mencionar en el volante del laboratorio cualquier fármaco que pudiera afectar los resultados de la prueba. El ayuno prolongado produce aumento de bilirrubina ya que parte de esta se almacena en el tejido adiposo y al suceder la lipolisis se libera y sale a la circulación. 3. Evitar muestras hemolizadas. Bilirrubina total = bilirrubina directa + bilirrubina indirecta. Ayuno de ocho horas.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ ...ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. . Muestra 1 ml 1 gota 546 nm 1 cm 20 a 25 grados C frente a blanco de muestra. Muestra 1 ml 1 gota Reactivo DBR Reactivo DNR Mezclar cuidadosamente e Incubar por 2 minutos...0 Página 13 de 83 6.. Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente exactamente por 5 minutos. Leer la absorbancia frente al blanco. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7.. Bilirrubina directa Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Reactivo TBR Reactivo TNR Mezclar cuidadosamente e incubar por 5 minutos. Leer la absorbancia de la muestra frente al blanco. Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min. Tecnica Bilirrubina total Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml .

1 umol/l.0 umol/l. cafeína. 9. Entre los fármacos que pueden causar niveles aumentados de bilirrubina total se incluyen: Esteroides.0 umol/l. antibióticos (Eritromicina). Bilirrubina total en el recién nacido: 1 a 12 mg/dl ó 17. etc. Valores de referencia Bilirrubina total: 0. obstructivos y prehepáticos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La hemólisis de la sangre y la lipemia pueden producir resultados erróneos. Multiplicar el resultado por 5. Linealidad La prueba es lineal hasta 25 mg/dl. anticonceptivos orales. se altera rápidamente con la luz. Estabilidad No es muy estable. La ictericia es una coloración amarillenta de los tejidos corporales (piel.5 umol/l. causada por niveles sanguíneos de bilirrubina anormalmente altos.17. Bilirrubina indirecta = B. si la concentración es mayor de 25 mg/dl.12. diuréticos. total .3 mg/dl o 1. Correlacion diagnostica La determinación de bilirrubina total es útil para evaluar la extensión y progreso de la ictericia en problemas hepatocelulares. Interferentes La exposición prolongada (más de 1 hora) a la luz solar directa o artificial puede causar disminución de la bilirrubina en un 50%. anabolizantes.8 mg/dl o 3. Bilirrubina indirecta: 0.4 .1. membranas mucosas y escleróticas).1 . diluir la muestra 1 + 4 con solución fisiológica y repetir la prueba.5. penicilinas y salicilatos (dosis elevadas). ácido ascórbico. Para obtener la concentración de la Bilirrubian indirecta se resta o establece la diferencia de la concentración de la Bilirrubina total y Bilirrubina directa.1 .7 . Bilirrubina directa: 0. El almacenamiento no es conveniente. Entre los fármacos que reducen los niveles de bilirrubina total se incluyen barbitúricos. salicilatos y vitamina A.0 Página 14 de 83 8.0.0. por lo tanto.20. morfina.2 . debe procesarce la muestra lo más rápido posible.0 mg/dl o 5. 10. si se necesita debe refrigerarse por pocos días (3 días a 2-8 °C) protegida de la luz.1 .1 . antipalúdicos. directa. 11.B.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. el color amarillo se aprecia cuando la bilirrubina serica total .

alcohol y tóxica. Causas:  Obstrucción intrahepática: debido a obstrucción por fármacos. Insuficiencia cardiaca congestiva.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Ictericia post . Síndrome de Cliger . virica o alcohólica.  Cirrosis por alcohol. Ictericia pre – hepatica Hay aumento de la bilirrubina indirecta. Causas: Metabolismo aumentado del Heme: esferocitosis hereditaria.hepatica o colestasica Hay aumento de bilirrubina directa y se presenta Bilirrubinuria. tumores metastásicos etc. indirecta o estar normal y la bilirrubina total aumentada. policitemia. Eritropoyesis ineficaz acelerada: Anemia megaloblástica. Cirrosis. atresia de conductos. hepatitis aguda. defecto que puede ocurrir en cualquier fase del metabolismo de la bilirrubina desde su formación hasta su excreción intestinal. Ictericia hepatocelular Hay aumento mayor de la bilirrubina directa y puede haber aumentos menores de B. hormonas esteroideas. .Najjan I y II. La ictericia se debe a un defecto en el metabolismo o la excreción normales de bilirrubina. No hay bilirrubinuria. Hepatitis viral. talasemia intoxicación por plomo. etc. En general hay bilirrubinuria. cirrosis biliar primaria. enfermedad drepanocitica.  Destrucción prematura de eritrocitos defectuosos.  Hiperbilirrubinemia por derivación.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .5 mg/dl.  Síndrome de Gilbert  Recién Nacidos.0 Página 15 de 83 supera los 2. Causas: Shock por hipoxia.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . páncreas o ampolla de Vater. vesícula biliar. Nota La bilirrubina directa diferencia la ictericia Pre-hepática de la hepatocelular y obstructiva y la bilirrubina indirecta hace la diferenciación entre la hepatocelular obstructiva y las Pre-hepáticas.0 Página 16 de 83  Colestasis extrahepática o quirúrgica: debido a carcinoma en conducto. por edema en la cabeza del páncreas. .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. cálculos biliares.

triglicéridos. Aspecto uniformemente lechoso significa presencia de triglicéridos endógenos (VLDL). Todos estos lípidos con excepción de los ácidos grasos que están ligados a la albúmina. Triglicéridos HDL colesterol VLDL colesterol: se evalúa mediante la formula trigliceridos/5. pero sí se requiere tener un concepto claro de cómo están incidiendo los lípidos en el aparato circulatorio. En el estudio del perfil lipídico mínimo se deben tener en cuenta los siguientes parámetros: Aspecto del suero: se realiza la prueba en frío en caso de obtener sueros lechosos. fosfolípidos y ácidos grasos libres.0 Página 17 de 83 PERFIL LIPIDICO MINIMO Generalidades de lipidos Los lípidos constituyen la principal reserva energética de los seres vivos y también forman parte de la membrana celular y regulan la actividad de la célula y tejidos. porque valores de colesterol aumentados no producen ninguna turbidez. Perfil lipidico minimo El dato del colesterol total y los triglicéridos da una información global de los lípidos que circulan en el organismo. 30% libre. se debe tener un estudio fraccionado de las lipoproteínas que es lo que se conoce como perfil lipídico.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Transportado principalmente por LDL. se encuentran en el plasma como lipoproteínas. HDL. esteres de colesterol. cuando estos son < 400 mg/ml. El aspecto del suero no indica que el paciente este normal. se coloca el suero durante 12 horas en refrigeración (4ºC) esto con el objeto de ayudar a clasificar las trigliceridemias así:  Capa cremosa en la superficie y nadante transparente.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . IDL y VLDL. 70% esterificado.  Capa cremosa en la superficie y nadante turbio significa triglicéridos exógenos y endógenos (quilomicrones y VLDL). significa presencia de triglicéridos exógenos (quilomicrones). El colesterol total del cuerpo: comprende el colesterol libre y esterificado. LDL colesterol: se determina con la formula de Friedewald . Los lípidos totales están compuestos por: colesterol libre.

Cifras superiores establecen un alto riesgo de enfermedad coronaria. Interpretacion del perfil lipidico mínimo Lípido mg/dl Colesterol Total LDL Colesterol HDL hombres HDL mujeres Trigliceridos Indice arterial: Deseable <200 <130 >35 >45 <200 Hombres <=5 Mujeres <=4. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 18 de 83 LDL C = CT. Indice arterial se determina mediante la formula CT/HDLC ö LDLC/ HDLc.(VLDL C + HDL C ).ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.5 Riesgo potencial 200-239 130-159 25-35 40-45 >200 Riesgo alto >=240 >=160 <25 <40 >200 Estas cifras nos indican que la arteriosclerosis se esta verificando en forma normal.

Fundamento El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación. Medición: frente a blanco de reactivo. 4. 5. Extraer 5-10 ml de sangre en un tubo seco. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. 6. se deben seguir los requerimientos que para este se indiquen. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. El indicador es la quinonemina formada por el peróxido de hidrógeno y 4aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa. 3. para evitar la redistribución del Colesterol entre las diversas lipoproteínas.0 Página 19 de 83 COLESTEROL TOTAL 1. Anotar cualquier fármaco que pueda modificar los valores de Colesterol. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para colesterol con factor aclarante de lípidos (LCF) CHOD-PAP 2. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. Separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Muestra Suero o plasma con heparina o EDTA. Condiciones del paciente Esta prueba no necesita de ayuno pero como generalmente se realiza con el resto del perfil lipídico.

Interferencias La Ovariectomía aumenta los niveles de Colesterol. 8. Nitratos.200 mg/dl < 220 mg/dl Sospechoso mayor de 220 Elevado mayor de 260 9. Corticosteroides. Colchicina. Eritromicina. Hay otros que disminuyen los valores como: Andrógenos. Vitamina D.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Notas El test no se afecta con valores de hemoglobina inferiores a 200 mg/dl. .0 Página 20 de 83 7. Evitar el contacto con los reactivos ya que son muy corrosivos. incubar 10 minutos a 20 ó 25 grados. Quelantes de las sales biliares. Captopril. ni de Bilirrubina menor a 5 mg/dl. Adrenalina. Colestipol. Allopurinol. Liotironina (Cytomel). Diuréticos tiacídicos. Valores de referencia Varían con la edad y el laboratorio. Niaciana. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. Esteroides anabólicos. RECIEN NACIDOS LACTANTES NIÑOS ADULTOS/ ANCIANOS 53 – 135 mg/dl 70 – 175 mg/dl 120. Lovastatina (Mevacor). Anticonceptivos orales. Isoniacida.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. o 5 minutos a 37 grados C. Hay fármacos que elevan los niveles de Colesterol como: Hormona adrenocorticotrópica. Tecnica Pipetear Blanco ---------1000 µl Estándar ---10 µl ---1000 µl Muestra ------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Rvo Color Mezclar. sulfamidas. Neomicina (oral). bloqueadores beta-adrenérgicos.

Diabetes Mellitus descontrolada.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Anemia hemolítica. .0 Página 21 de 83 Muestras lipémicas usualmente generan turbidez en la muestra que se va a analizar. Mala absorción. Estrés. generando resultados falsamente elevados 9. Hipertensión. multiplicar el resultado por 3. Hipotiroidismo. Colestasis hepática.3 mmol/l). Para la técnica se debe montar un control Normal y uno Patológico. Cirrosis biliar. Para concentraciones mayores diluir la muestra con solución salina al (0. embarazo. Desnutrición. Dieta rica en Colesterol. Resultados anormales Niveles aumentados en: Hipercolesterolemia.7 mmol/l  Niveles superiores: 300 mg/dl Necesitan tratamiento. Medicación hipocolesterolemiante. Enfermedad hepática.9%). Linealidad El test es lineal hasta una concentración de Colesterol de 750 mg/dl (19. Síndrome nefrótico. Correlacion diagnostica  Niveles sospechosos: 220 mg/dl ó 5.7 mmol/l  Niveles elevados: 260 mg/dl ó 6. Niveles disminuidos en: Sepsis. Hiperlipemias. Anemia perniciosa. Infarto de miocardio. 10. nefrósis. Control de calidad Hacer control periódico a equipos y reactivos para evitar resultados falsos positivos ó falsos negativos. Hipertiroidismo. Xantomatosis. 1 + 2 y repetir la determinación. aterosclerosis.

5. VLDL y LDL se precipitan por adición de ácido fosfotúngstico y cloruro de magnesio. Fundamento Los quilomicrones. Despúes de centrifugar. Condiciones del paciente Ayuno de 12-14 horas previas a la extracción de sangre. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. Medición: frente a blanco de reactivo . Debe señalarse que si bien la falta de ayuno no afecta los niveles de HDLc sanguíneo. Metodo Colesterol precipitnte.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones de la muestra La muestra debe separarse del coagulo dentro de las dos horas de la extracción y conservarse a 4ºC a menos que se analice de inmediato. en la mayoría de las personas la lipemia posprandial interfiere con muchos de los métodos analíticos. 4. 2. 6.0 Página 22 de 83 COLESTEROL HDL 1. Abstenerse de no ingerir alcohol por 72 horas antes de la toma de la muestra (no es necesario). Muestra Suero o plasma con anticoagulante EDTA o heparina. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. el sobrenadante contiene las HDL que se van a determinar. 3. HDL es estable en la muestra de suero durante 7 días a 4ºC o durante 4 meses a –20ºC.

. B. en ese caso. Limite de dilución 310 mg/dl.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Centrifugar por 2 minutos a 10000 rpm ó 10 minutos a 4000 rpm. incubar todos los tubos a temperatura ambiente por 10 minutos ó a 37ºC por 5 minutos. separar el sobrenadante claro del precipitado dentro de 1 hora y determinar la concentración del colesterol HDL con el reactivo de Colesterol total. El ácido ascórbico disminuye los valores. incubar por 10 minutos a temperatura ambiente. se hace una dilución 1: 1 con solución cloruro de sodio al 0. Precipitación pipetear muestra precipitante Macro 500 ul 1000 ul Micro 200 ul 500 ul Mezclar bien. observando un sobrenadante turbio. Notas El sobrenadante debe ser claro. Determinación Agua destilada Estándar Sobrenadante Reactivo de color Blanco 100 ul ------1ml Estándar 100 ul ---1ml Problema ---100 ul 1ml Mezclar. Leer la absorbancia de la muestra y el estándar frente al blanco de reactivo antes de una hora.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Despúes de centrifugar. En las muestras con un contenido de triglicéridos altos se pueden presentar precipitaciones incompletas de las lipoproteínas o flotación por parte de las mismas sobre él liquido.0 Página 23 de 83 7. Tecnica A. El resultado se multiplica por dos.9% y se repite la precipitación de la muesta diluida.

para evitar la arteriosclerosis prematura. La LDL juega un papel muy importante en el funcionamiento arterial y por esto debemos tratar que el organismo tenga estrictamente la cantidad necesaria que requieren sus funciones. Valores de referencia Mujeres > 45mg/dl Hombres > 35mg/dl 9. deficiencia de LPL 1 con afectación del metabolismo de quilomicrones y VLDL. complementada con un nivel de HDL lo más elevado posible. Se observa en: mayor producción de Apo I y Apo II y actividad física fuerte. obesidad.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. al evitar la arteriosclerosis excesiva porque remueve y elimina a través de la bilis cantidades considerables de LDL en forma de ácidos biliares y esteroides neutros. hipertriglicéridemia. Correlacion diagnostica La HDL contrarresta la acción nociva que puede tener la LDL sobre nuestro organismo.0 Página 24 de 83 8. siendo esta la mejor forma de luchar contra este mecanismo fisiológico. Niveles disminuidos de HDL correlacionan con riesgo aumentado de enfermedad cardiocirculatoria. Resultados Anormales. . sedentarismo. deficiencia familiar de Apo I y Apo II. Niveles aumentados de HDL correlacionan con disminución en el desarrollo de enfermedad cardiocirculatoria.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. Fundamento Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasa.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba. No consumir grandes cantidades de Carbohidratos y grasas 48 horas antes de la prueba. la temperatura de 25ºC permite la liberación de glicerol de los fosfolipídos y produce un incremento aparente del valor de los Triglicéridos. GPO-PAP 2. 4aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa. El indicador es Quinineimina formada a partir de peróxido de hidrógeno. No hacer ejercicio fuerte antes de la prueba. Es importante describir el aspecto del suero. 3. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para triglicéridos con factor aclarante de lípidos. Los volúmenes de la reacción sugeridos se pueden modificar sin ningún cambio en los cálculos. Los Triglicéridos permanecen estables 3 días a 4ºC. Muestra Suero o plasma heparinizado o palsma con EDTA 4. se le debe hacer la prueba en frío. 5. que consiste en .0 Página 25 de 83 TRIGLICERIDOS 1. Antes de procesar la muestra se debe observar y anotar el aspecto del suero ya que si este está lechoso. metabólitos y una serie de fármacos de uso común NO interfieren con el método. Notas La lipemia. la hemólisis hasta 10 mg/dl ó 170 mmol/l. para evitar la redistribución de los Triglicéridos entre las diferentes lipoproteínas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones del paciente El ayuno debe ser entre 12 y 14 horas. Extraer 5-10 ml de sangre en tubo seco y separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción.

3 mmol/l) de Triglicéridos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Estabilidad de la reacción 1 hora. repetir la determinación y multiplicar el resultado por 6.9%. e incubar por 10 minutos a 25ºC o por 5 minutos a 37 grados C. con solución salina al 0. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20. Tecnica Pipetear: Blanco ------------1000 µl Estándar ---10 µl ------1000 µl Muestra ------10 µl ---1000 µl Control ---------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Control Reactivo Mezclar. 25 ó 37 grados C Medición: frente a blanco de reactivo 7. 6. leer con Blanco de reactivo. Metodo de determinacion Longitud de onda: 500 nm. 8. Los Triglicéridos no permanecen en el suero a 25ºC. Para concentración superior diluir la muestra 1+5. Valores de referencia EDAD 0 – 5 años 6 – 11 años 2 – 15 años 16 – 19 años Adultos / ancianos HOMBRES 30 – 86 mg/dl 31 – 108 mg/dl 36 – 138 mg/dl 40 – 163 mg/dl 40 – 160 mg/dl MUJERES 32 – 99 mg/dl 35 – 114 mg/dl 41 – 138 mg/dl 40 – 128 mg/dl 25 – 135 mg/dl .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . a 4ºC son estables por 3 días. luego de las cuales se observa las características que presenta el nadante y el sobrenadante. debido a que fácilmente se libera el glicerol.0 Página 26 de 83 colocarlo en la nevera por 12 horas. Linealidad El método es lineal hasta 1000 mg/dl (11.

Correlacion diagnostica Niveles aumentados en: Hiperlipemias. Infarto de miocardio. Enfermedad con almacenamiento de glucógeno. Disminuyendo los valores Acido ascórbico. Riesgo de enfermedad coronaria y vascular. Nota: Los trigliceridos elevados afectan el cálculo de las LDL. Síndrome nefrótico. Hipertensión. 10. Asparraginasa. Diabetes mal controlada. Estrógenos y anticonceptivos orales. Clofibrato y colestipol. Interferencias Elevando los valores Colestiramina. Embarazo. Hipertiroidismo. Niveles disminuidos en: Síndrome de mala absorción.0 Página 27 de 83 9. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Desnutrición. Hipotiroidismo.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. por lo tanto cuando esto sucede las LDL no se deben reportar. Dieta rica en carbohidratos. Cirrosis alcohólica.

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CREATININA

Generalidades Sus aumentos suelen ser proporcionales con respecto a los de la urea, aun cuando en general son más tardíos. Tiene particular interés diagnostico y pronóstico en los siguientes casos:  Nefropatías: Cuando en una insuficiencia renal con uremia, se observan cifras superiores a 5mg/100ml, él pronostico es fatal a corto plazo. Esto solo sucede en las fases avanzadas, ya que en las precoces, dada la facilidad de eliminación de la creatinina solo aumentan el ácido úrico y la úrea. En las nefritis agudas generalmente no hay elevación; en los casos en que existe (40%) es un cambio reversible y de escaso valor pronostico. En las nefrósis por tóxicos (Hg y Ag.) es donde se observan mayores elevaciones; en la insuficiencia cardiaca avanzada puede originarse una retención discreta o moderada de creatinina aunque no exista verdadera nefropatía.  En obstrucciones urinarias (Afecciones de próstata, vejiga, uréter, etc.) y en la anuria refleja (cálculos uretrales), se producen así mismo elevaciones marcadas de creatinina incluso 30 mg o más, igualmente reversibles con la reparación de la obstrucción.  En el gigantismo y acromegalia se observan discretas elevaciones. Cada 24 horas se transforma un 2% de creatina en creatinina. La cantidad de creatinina por unidad de masa muscular es constante y por lo tanto la degradación espontanea es constante. Como resultado de este fenómeno la concentración plasmatica de creatinina es estable y varia en menos de 10% diario en individuos normales. 1. Metodo Reacción de Jaffe Prueba fotométrica colorimértica para mediciones de punto final desproteinización.

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2. Fundamento La creatinina en solución alcalina forma un complejo coloreado rojo-naranja con ácido picrico. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la creatinina en la muestra. 3. Muestra Suero o plasma heparinizado u orina 4. Condiciones del paciente La muestra de sangre no requiere ayuno previo ya que la excreción de creatinina depende muy levemente de la alimentación y de la diuresis. Por lo menos 8 horas antes del examen no realizar esfuerzos corporales intensos. 5. Condiciones de la muestra La muestra de suero para creatinina es inestable a temperatura ambiente, refrigerada de 2 – 4 ºC por 24 horas. Congelada a –20 ºC es estable por 6 meses La creatinina puede ser determinada en cualquier líquido biológico, pero las muestras mas usadas son suero, plasma y orina. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 546 nm (500-550 nm) 1 cm 25° C frente a blanco de reactivo

7. Tecnica Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ

Solución Trabajo Estándar Suero

Mezclar y poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia a los 30 segundos y a los 90 segundos. A2-A1= Creatinina

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8. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Mujeres Hombres 0.5 – 1.0 mg/dl. 0.7 – 1.2 mg/dl.

Estos valores están influenciados por el sexo (siendo menor en la mujer), masa muscular del individuo. 9. Interferentes de la muestra y la reaccion • Interferentes positivos: Acido ascórbico, piruvato, acetona, ácido acetoacético, levulosa, glucosa, ácido úrico, proteínas, barbitúricos y antibióticos de la cefalosporina. Las temperaturas altas y los prolongados tiempos de reacción (> a 5 minutos), aumentan esta interferencia. El piruvato, acetona, ácido acético, aminoácidos y proteínas o cualquier compuesto con un grupo metilo o metileno activo, introduce errores debido a su acoplamiento con el picrato por un mecanismo análogo al de la creatinina; todos estos compuestos pueden producir sustancias coloreadas que aumentan la absorbancia en la reacción del complejo coloreado. La bilirrubina y otros productos de degradación de la Hb, causan una interferencia negativa probablemente por su oxidación en medio básico fuerte a compuestos incoloros, dando como resultado una disminución de la absorbancia, lo que se interpreta como una menor concentración de creatinina. Esta interferencia negativa se observa con frecuencia en el análisis cinético de la creatinina. 10. Correlacion diagonstica El nivel de creatinina en suero depende de 2 factores: La velocidad de producción. La velocidad de filtración. Dado que la fuente de creatinina serica es la creatina muscular y la fosfocreatina, una mayor cantidad de masa muscular produce un aumento de la creatinina serica. Los valores de creatinina exhiben una respuesta escasa o nula a las modificaciones dietéticas o a las alteraciones del equilibrio electrolitico.

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La concentración de creatinina en sangre, como la de la urea, se aumenta con el descenso de la función renal y el principal empleo de la determinación de creatinina serica esta en la evaluación de la función renal. En nefritis crónica cuando la concentración de BUN esta muy por encima de 50 mg/dl, el aumento de la creatinina es proporcional y las concentraciones de creatinina mayores a 5 mg/dl se consideran de importancia diagnostica grave. Niveles disminuidos se encuentran en la distrofia muscular. Notas La especificidad de la reacción depende del pH, temperatura y tiempo. Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse del fotómetro, sin que se alteren los resultados finales. El ácido pícrico es tóxico. Evite la inhalación, ingestión y contacto con la piel, lavar enseguida con polietilenglicol 400, con abundante agua.

9%. Condiciones del paciente La muestra de sangre debe obtenerse durante el periodo de recolección de la orina. generalmente 24 horas aunque es posible reducirlo a 4.  Debe seguir tomando agua.  Para la recolección de la orina el paciente debe fijar una hora cero.  Marcar en el frasco la hora de iniciación de la recolección. La depuración de la creatinina endògena es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. Muestra Técnica para el suero. Técnica para la orina: Diluir 1:100 con Solución Salina 0. té y café durante las 24 horas anteriores a la recolección.0 Página 32 de 83 DEPURACION DE CREATININA Generalidades Es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. La relación entre la concentración de una sustancia en orina y sangre es el mejor índice de función renal. . para asegurar un volumen urinario de 1 ml por minuto cuando menos. que la concentración de dicha sustancia aislada en sangre o en orina. 8 ó 12 horas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. inclusive la muestra del tiempo fijado para la recolección. 1.  El paciente debe abstenerse de ingerir carne. porque nos da información de cómo esta la filtración glomerular. El control cronológico de la recolección de las muestras es esencial para la realización correcta de la prueba.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . el mismo procedimiento de creatinina en suero. Valores de referencia: Hombres: 98 – 156 ml/minuto Mujeres: 95 – 160 ml/minuto Limite de dilución: 500 mg/dl 2. siempre y cuando los resultados se interpreten en forma comparativa y no absoluta.  Guardar refrigerada y en frasco bien tapado. Descartar la orina de esa hora y a partir de entonces recoger todo el volumen de orina. La muestra de orina se recoge durante un periodo determinado.

Tecnica Pipetear: Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ Solución Trabajo Estándar Orina diluida Dilución de la orina * Hacer una dilución de la orina de 1: 50. Metodo de determinacion Longitud de onda: 546 nm (500-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25° C Medición: frente a blanco de reactivo 5. la cual no puede medirse por la reacción de Jaffé.0 Página 33 de 83  Interrumpir toda terapia diurética. 10 ml de orina + 490 ml de agua destilada. ya que los gérmenes producen variación en el pH promoviéndose así la conversión de creatinina en creatina. Condiciones de la muestra Muestra de suero libre de hemólisis fuerte y de ictericia (ya que una ligera hemólisis no afecta la determinación). 4. 3.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . el resultado se multiplica por 50. La muestra de orina debe refrigerarse o agregarse un inhibidor bacteriano. además producen creatininasas que destruyen la creatinina. Calculo Creatinina en Orina* ________________ Creatinina en suero x Volumen (ml) _________ 1140 (Constante) . La concentración de creatinina debe determinarse antes de las 24 horas de recogida la muestra.

16 – 22 mg/Kg peso/24 h 85 – 125 ml/min. sin que se alteren los resultados finales.2 mg/dl.8 – 1.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Interferencias Los mismos de la guía anterior.4 mg/dl. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Creatinina en orina Depuración de Creatinina: Mujeres Hombres Mujeres 0. Notas Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse proporcionalmente según las necesidades del fotómetro. .9 – 1. lo cual aumenta los niveles urinarios. 8. que seria una fuente de error negativa. 0. Correlacion diagnostica En enfermedades renales avanzadas la excreción urinaria de creatinina excede a la velocidad de filtración glomerular a causa de la secreción tubular. 75 – 115 ml/min.0 Página 34 de 83 6. la hidratación inadecuada del paciente. Entre las causas de error están: mal cronometrado o recogida inadecuada de la muestra de orina. 21 – 26 mg/Kg peso/24 h Hombres 7. 1900 mg/24 h. ejercicio fuerte durante la prueba. por lo que el verdadero valor de filtración glomerular esta por debajo de la depuración de la creatinina.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

A. y crónica. en niños y personas de baja estatura por esto se hace necesario realizar la corrección del valor obtenido. En las personas obesas la depuración esta alterada por lo tanto se hace necesario la corrección. la depuración es menor que la filtración.73/A para obtener el valor real de la depuración en estos pacientes. Si la depuración plasmatica de una sustancia es mayor que la filtración glomerular debe interpretarse como que esta sustancia es secretada por el túbulo y si por el contrario. La depuración de creatinina disminuye en personas de edad. podemos concluir que esta sustancia es reabsorbida.N.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . . disminuciones se observan en pielonefritis crónica e hipertensión.0 Página 35 de 83 El filtrado glomerular disminuye notablemente en G. ligeras La filtración glomerular normal es en un adulto de 125 ml/min. multiplicando el resultado por 1.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

Metodo Prueba enzimática colorimétrica por glucosa. La liberación de glucosa por el hepatocito mediante un mecanismo que se acelera al disminuir la glicemia sanguínea. 1. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de la peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo-violeta usando la quinonemina como indicador.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 36 de 83 GLICEMIA Generalidades Glucemia o glicemia: Este término se refiere a la presencia de la glucosa en sangre. 2. músculo en mayor proporción y también leucocitos. Glucogenolisis: Movimiento de glucógeno almacenado para producir glucosa-6fosfato. GOD-PAP. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Glucogenesis: Formación de glucógeno (hígado. Fundamento La glucosa de determina despúes de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. en el tejido nervioso en muy poca cantidad). Metodo con desproteinización. Gluconeogenesis: Formación de glucosa a partir de otro sustrato diferente al glucógeno ejemplo: aminoácidos. La glucosa sanguínea proviene de dos fuentes: La más importante es la absorción intestinal de glucosa alimenticia que normalmente puede llevar los valores sanguíneos de glucosa hasta 138 -140 mg/dl. Glucolisis: Llevar la glucosa-6-fosfato hasta piruvato para producir acétyl Co A (ciclo de krebs).

de hidratos de carbono. Muestra Sangre total. incube a temperatura de 20 . No tomar café. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. No realizar ejercicio antes o durante la prueba. ni haber fumado antes o durante la prueba. Condiciones de la muestra La separación del suero debe hacerse dentro de los 20 o 30 minutos de la extracción. COLOR Blanco ---------1000λ Patron ---10λ ---1000λ Muestra ------10λ 1000λ 500 nm 546 nm 1 cm 20. En el momento de la toma de la muestra el paciente debe estar sentado erguido.M.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Umbral renal (T. . Tecnica Pipetear: BLANCO PATRON MUESTRA RVO. Leer la absorbancia de la muestra y el patrón contra el blanco de reactivo. La estabilidad de la muestra es de 8 horas. No presenta glucosuria positiva antes de dar la carga de glucosa.0 Página 37 de 83 3. 6. Ayuno de diez a doce horas. 25 ó 37 °C frente a blanco de reactivo Mezclar. a menos que el paciente consuma diariamente menos de 150grs. 5. suero o plasma 4.) 160-180 mg/dl.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .25°C por 10 minutos ó 5 minutos a 37°C. Condiciones del paciente No se requiere preparación dietética especial.

0 Página 38 de 83 8.M. Nota El tiempo máximo para ingerir la carga de glucosa oral es de 5 minutos.). descartando aquellos pacientes que presentan fluctuaciones en el límite superior de la concetracion plásmatica normal.G.O. Utilizar métodos de laboratorio previamente estandarizados y sueros control Diagnostico de diabetes mellitus El principal objetivo de diagnóstico es la indentificación de pacientes con riesgo de hiperglicemia sintomática de cetoacidosis diabetica (CAD) o coma hiperosmolarno no cetónico (CHNC) o de complicaciones clínicas tardías.199 Niño 130 – 139 140 – 199 9. Carga de glucosa Niños: 1. La prueba de tolerancia oral a la glucosa (P. Valores de referencia Criterios de diagnóstico para DM por PTOG Normal Ayunas P.T. 100 gr.139 140 .O.O.) tiene como finalidad la de descartar o de diagnósticar una diabetes mellitus tipo 2 (D. Para la P. A la glucosa Adulto 115 .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. cuando se sospecha una diabetes a pesar de la ausencia de hiperglicemia en ayunas o sistomática. por ejemplo en aquellos paciente que presentar trastornos clínicos . no Gestantes 2 horas postcarga. a partir de los cuales se empezara tomar los tiempos para la toma de las muestras asi: Gestantes 1-2 y 3 horas.de agua.T. En los pacientes asintomáticos el diagnóstico de DM se establece cuando se cumplen los criterios diagnósticos de los valores de glicemia recomendado por diferentes asociaciones o grupos de estudio de diabetes asï: National diabetes data group Basal >= a 140 mg/dl en dos ocasiones consecutivas sea en adultos o en niños.tipo 2. de dextrosa en 300 ml.75 gr de dextrosa por kilogra la prueba tamiz consiste en administrar la carga de dextrosa y tomar una muestra después de una hora post-ingesta. que pueden no entrañar los riesgos asociados a la DM.G.T.G. Adulto < 115 < 140 Niño < 130 < 140 Diabetes mellitus Adulto >= 140 >= 200 Niño >= 140 >= 200 Intol.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

T. retinopatía y nefropatia. 2. etc.G. Adultos: dos horas y en cualquier otro momento de la P. anticonceptivos orales que contengan estrógenos sintéticos). Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl. Nicotinico.. (Guillermo Farias quimica clínica. debe repetirse para corroborar el diagnóstico de DM. En la P. vómito.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.G. ac. acompañados de una glicemia a cualquier hora mayor o igual a 200 mg/dl. sudoración.T.. No se debe realizar la P.. sintomas de diabetes. Niños: asintomaticos deben ser mas estricto en diagnóstico por P. *Criterios diagnosticos reportados por el comite de expertos en el diagnostico y clasificacion de diabetes mellitus.O. enfermedades cardiovasculares o vasculares Cerebrales agudas.. o puede también revertir a la normalidad.0 Página 39 de 83 que pudieran deberse a una DM no diagnósticada ejemplo: polineuropatía.O. Los valores de glicemia posprandial pueden ir hasta 160 mg/dl. Los criterios diagnósticos por P. polidipsia y pérdida de peso.O. a los pacientes que presenten naúseas. solo son válidos para individuos sanos que no presentan infecciones.T.T.O. renales o del S.T.(dado el mayor riesgo de un exceso de diagnóstico de DM).G. Valores normales Después de un ayuno de 10 a 12 horas los valores de glicemia deben estar ubicados entre 70-110 mg/dl (según el método utilizado).O.. décima edición). enfermedades endocrinas que deterioren la tolerancia a la glucosa o enfermedades hepáticas.N.G. pero en muchos casos la intolerencia a la glucosa no progresa. Los sintomas clásicos incluyen poliuria. La P. . por lo menos dos valores deben ser > = 200 mg/dl. desmayos o palidéz durante la realización de la prueba.G. Los pacientes con intolerencia a la glucosa pueden presentar mayor riesgo de hiperglicemia en ayunas o sintomatica.C.O.G. tampoco pacientes tratados con fármacos que alteren la prueba de tolerancia oral a la glucosa (tiazidas. glucocorticoides. Ayunas se define como la no ingesta calórica al menos por 8 horas.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . tanto en niños como en adultos.T.

De acuerdo a los nuevos criterios solo se tiene en cuenta los valores a las 2 horas. por lo cual asignar un valor diagnostico es difícil. las pruebas utilizadas para ella no estan estandarizadas. por el momento solo continua como prueba para el control y no para el diagnostico. . Los valores normales para la glicemia en ayunas. síntomas con una glicemia al azar > de 200 mg/dl. * Disminución de la tolerancia a la glucosa: Entre 140 mg/dl y 200 mg/dl.0 Página 40 de 83 3. estos criterios deben ser confirmados por otra prueba realizada un día diferente.N. la razón para ello es la perdida de la primera fase de secreción de insulina a partir de esta cifra. El comité no recomienda la utilización de los niveles de hemoglobina glicada para el diagnostico de la diabetes. las categorias. En la ausencia de hiperglicemia inequívoca con descompensación aguda. son: * Glucemia normal: Menor de 140 mg/dl. si bien los niveles de hemoglobina glicada presentan una distribución similar a la glicemia. Para la prueba de tolerancia a la glucosa. cada uno de ellos debe ser confirmado con una prueba posterior. hora y media y a las dos horas. debe ser confirmado subsecuentemente por una glicemia en ayunas ≥ a 126 mg/dl. Las categorias para la glicemia en ayunas quedan establecidas de esta foma: * Glicemia normal: Menor a 110 mg/dl. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 200 mg/dl. o una glicemia al azar ≥ a 200 mg/dl.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Dos horas poscarga durante una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) mayor o igual a 200 mg/dl. 2 horas poscarga. * Hiperglicemia en ayunas: Entre 110 mg/dl y 126 mg/dl. Se han establecido tres criterios para el diagnostico de diabetes. Por ejemplo. La prueba de tolerancia utilizaba valores a la hora. una glicemia 2 horas postcarga ≥ a 200 mg/dl. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 126 mg/dl. se han establecido en 110 mg/dl.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Para ello se utiliza 75 gramos de glucosa anhidra disueltos en 300 cc de agua.C) inexplicadas o sintomas adrenergicos inexplicables. 2 horas poscarga. Diagnostico de hipoglicemia Depende si el paciente presenta manifestaciones del sistema nervioso central (S.

G . Otros fármacos como salicilatos.) Criterios diagnosticos para diabetes gestacional Ayunas >= 105 mg/dl 1 hora >= 190 mg/dl 2 horas >= 165 mg/dl 3 horas >= 145 mg/dl Normal: Hasta 135 mg/dl. propanolol etc. El paciente con deterioro de la conciencia o crisis convulsiva debe efectuarse la glucosa con tirilla y gota de sangre obtenida al colocar un aguja para iniciar la perfusión de líquido. y en lactante y niños menor de 40mg/dl . tras un aumento de glucosa.M.T.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . menor de 45mg/dl en la mujer.N. los cuales se corrigen al aumentar la glucosa sanguínea. Valores de glicemia > 180 mg/dl en más de una oportunidad son diagnósticos de D. sulfas que producen un 50% de las hipoglicemias. confirman el diagnóstico de hipoglicemia de ayuno o inducida por fármacos. si se obtiene un valor anormalmente bajo. Anormales: Valores de glicemia entre 135 .180 mg/dl sugieren la realización de una P.0 Página 41 de 83 En ambos casos para el diagnóstico se requiere valores plásmaticos anormalmente bajos.G. Por lo general una glucosa plásmatica anormalmente baja se define menor de 50mg/dl en el varón. se perfunde glucosa de inmediato.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.O.C. El diagnóstico debe completarse con valoraciones de insulina proinsulina y peptido C y también la busqueda de drogas que puedan estar ocasionando la hipoglicemia (insulina alcohol. de 3 horas con una carga de dextrosa de 100 gramos. (Se pueden encontrar valores menores de los expuestos en un ayuno de 72 horas).. La mejoría inmediata de los sintomas del S.

3.0 Página 42 de 83 UREA 1. La disminución de la absorbancia es proporcional a la concentración de urea dentro de los intervalos de tiempo dados. El amonio producido en esta reacción se combina con 2oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato-deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. . Condiciones del paciente 24 horas antes de tomar la muestra. ha sido diseñada para ser realizada preferiblemente en analizadores. Ya que la prueba cinética es muy rápida. 2. Metodo Metodo completamente enzimático para determinación cinética de urea. orina diluida 1:1000 con agua destilada. Fundamento La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir amonio y dióxido de carbono. 4. Condiciones de la muestra Por acción bacteriana se puede perder la urea. 5.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. La prueba ha sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima límite. el paciente debe llevar una dieta pobre en proteínas y 12 horas de ayuno total. Muestra Suero o plasma. por lo tanto debe analizarse pocas horas despúes de recogida o conservarse en refrigeración.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Sueros lipémicos causan turbidez en la solución final. GLDH.

Para concentraciones más altas mezclar un volumen de la muestra con un volumen igual de agua destilada.0 Página 43 de 83 6. Metodo de determinación Logitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 340 nm. calcule la diferencia 8. lea la absorbancia de la muestra y el estandar despúes de 30 segundos y lea nuevamente al minuto. 30°C ó 37°C Lectura contra blanco de reactivo 7. 3 mmo1/1) de urea para suero o plasma y 200 g/L (330 mmol/L) para la orina. El patrón. 1 mmo1/1 Orina 20-35 mg/24 horas 333-583 mmo1/24 horas El método es lineal hasta 200 mg/dl (33. . 7-9.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Valores de referencia Suero 10-55 mg/dl 1. repetir el ensayo y multiplicar el resultado por dos. 365 nm 1 cm 25°C. 334 nm. la muestra y la solución 1 deben pipetear en el fondo de los tubos de ensayo y mezclarse cuidadosamente.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Tecnica Pipetear Blanco ------1ml Patrón ---10 ul 1ml Muestra 10 ul ---1ml Muestra Patrón Reactivo Mezcle.

convulsiones y coma. deterioro mental y confusión.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . náusea y vómito. TBC renal. glucosa hasta 500 mg/dl y ácido ascórbico hasta 30 mg/dl.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Los valores de la urea pueden disminuirse en alteraciones hereditarias de la síntesis de urea o cuando existe una ingesta inadecuada de proteínas. Gota Crónica y en todas aquellas entidades donde el volumen del filtrado glomerular se ha reducido una quinta parte de lo normal. El nitrógeno uréico de la sangre. La anemia es un carácter prominente en la uremia crónica porque está deprimida la eritropoyesis. anorexia. nefritis aguada. 10. o una enfermedad hepática grave. bilirrubina hasta 60 mg/dl. triglicéridos hasta 2000 mg/dl. sacudidas musculares. Interferencias La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl.0 Página 44 de 83 9. Determinacion de nitrogeno ureico El nitrogeno ureico se saca de dividir el valor de la urea por un factor que es 2. .14. el nitrógeno no proteico y la creatinina están elevados y los niveles sanguíneos de estas sustancias se emplean como índice de la gravedad de la uremia. Cuando existe uremia los síntomas incluyen letargo. Correlacion diagnostica La urea se encuentra aumentada por encima de los valores normales en caso de insuficiencia renal u obstrucción de vías urinarias.

La cifra normal de las proteinas totales del suero está comprendida entre 6 y 8 mg/ ml encontrándose de 1 gramo menos en los pacientes que guardan cama por mas de dos semanas las proteínas totales están integradas por la fracción albúmina y bla fraccion globulina. Fundamento Los iones cúpricos con las proteínas y peptidas en solución alcalina forman un complejo púrpura. Estable 8 dias a 2-8 C.PROTEINAS TOTALES Generalidades. aporta la nutricion celular. . La absorbancia de este complejo es proporcional a la concentración de proteínas en la muestra. La fracción globulina se sintetiza especialmente en las células plasmáticas y tienen como misión principal fabricar anticuerpos. hierro. Evitar todo esfuerzo corporal intenso por lo menos 8 horas antes de la toma de la muestra. El uso de torniquete no ha exceder los 30 segundos. lipo-proteínas y sirve de medio de transporte a multitud de elemntos como esteroides. transporta los lipidos originando los compuesos que se denominan. 4. Metodo Prueba colorimétrica fotométrica para proteínas totales (Biuret) 2. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero en aproximadamente 0. El ejercicio causa aumento de la concentración de proteínas en un 6 a 12%. 1. Suero y plasma heparinizado. interviene en el equilibrio ácido-básico. Condiciones del paciente La muestra ha de tomarse con 8 horas de ayuno. de donde se origianan el nombre de inmunoglobulinas. La priemera regula la presión osmótica coloidal de la sangre. cobre. Los anticoagulantes quelantes interfieren. Muestras.5 g/dl. 3. vitaminas liposolubles.

0 ml Patrón ----10 ul ----1. . ABS Muestra ____________ X 80= mg/dL proteína ABS Patrón 7.5. Interferentes La hemoglobina (0. lea la absorbancia de la muestra y estándar despúes de 30 segundos y lea exactamente al minuto despúes calcule la diferencia y multiplique por 80.0 ml Muestra --------10 ul 1. La presencia de dextrano (utilizado como expansor del plasma) ocasiona una floculación de la mezcla de reacción que puede separarse por centrifugación sin que afecte los resultados. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Agua destilada Patrón proteina Muestra Reactivo 10 ul ------1. Valores de referencia Suero: 65 – 80 g/L Plasma: 68 –83 g/L 8.0 ml 340 nm. La bilirrubina (15 mg/dl) La lipemia moderada no interfiere.2 g/L). 30°C ó 37°C frente a blanco de reactivo Mezcle. Metodo de determincion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 6. 334 nm ó 365 nm 1 cm 25°C.

Afecciones hépaticas crónicas. Se obtienen falsas hiperproteinemias. tambien puede estar disminuida en: Nefrosis lipoidea. sudoracion excesiva.5 y 5. Corelacion clinicopatologica Cuando hay hemoconcentración por shock.9. Neoplasias.5 g/ml corresponden a la albúmina y entre 1. entre 3. Edemas carenciales. vómitos. . fistulas digestivas etc. diarreas profusas. Las cifras bajas generalmene corresponden a malnutricion.5 y 3g/ml a la globulina. Anemia persistente. quemaduras. De la cifra total que integran las proteínas.

PROTEINURIA Generalidades. aumento de la filtración glomerular o alteraciónes en la composicion proteíca que la hace filtrar más facilmente. La cantidad no permite valorar la gravedad de la afección.1 y Alfa –2. Tiene como mecanismo el aumento de la permeabilidad de las membranas glomerulares. Recoger la orina. Metodo Metodo colorimétrico cuantitativo para determinación de proteínas en orina y líquido cefalorraquideo. 3. 150/24 horas. Condiciones de la muestra Se debe recoger orina de 24 horas u orina ocasional. Orina de 24 horas. . Es el indicador más importante de enfermedad renal complementado con el sedimento microscópico. orina ocasional ó líquido cefalorraquideo. 4. reabsorción tubular disminuida. 1. 2. medir el volumen y conservarla a 2-8 C. pero su dosificacion periódoca si valora el progreso o regresión de la lesión. cantidad no detectable por los sistemas habituales para dosificarla. Muestras. La albúmina constituye entre un 60 y un 90 % de la prteína excretada y el resto está por globulinas principalmente globulina Alfa. Tambien conocida como albúminuria. es la cantidad de proteína excretada por la orina. En caso de orinas muy turbias es conveniente centrifugarlas. Normalmente es de 40 a 80 mg con límite máximo. La proteina presente en la muestra reacciona en medio ácido con el complejo Rojo rojo de pirogalol y el molibdato originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectofotometria. Estable 8 dias. Fundamento.

5. Valores de referencia Orina de 24 horas 30 – 140 mg/24 h (hasta 160mg/24h en mujeres embarazadas) Orina ocasional 25 mg/dl Líquido cefalorraquideo 15 – 45 mg/dl (en adultos de más de 60 años se extiende a 60 mg/dl) 8. Los conservantes para orina como ácido clorhídrico.. 600 nm ó 620 nm 1 cm 37 °C frente a blanco de reactivo Patron Muestra reactivo Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37 °C leer la absorbancia contra el blanco Calculos: Proteinas de 24 horas: Muestra Patron x volumen x 100 Muestra Patron x 100 Proteina en orina ocasional: Proteínas en líquido cefalorraquideo: Muestra Patron x 100 7. Interferencias La hemolisis puede ser causa de resultados falsamente aumentados tanto en orina como en LCR. . Tecnica Blanco ------1 ml patron 20 ul ---1 ml muestra ---20 ul 1 ml 580 nm. Algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la reacción. ácido benzoíco o timol pueden causar resultados falsamente disminuidos. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medicion: 6.

la fiebre. El LCR es útil para evaluar la permeabilidad de la barrera hematoencefálica en muchas enfermedades inflamatorias o infecciosas del SNC. hipotermia. Correlacion diagnostica Hay condiciones fisiológicas o benignas deonde se puede observar un aumento en la excresión urinaria de proteínas como el ejercicio violento. viral o de otros origenes.9. como ocurre en la meningitis bacteriana. . como en la disfunción glomerular. el embarazo. La determinación de proteínas es importante en la detección de patologías renales.

es decir. las transaminasas (GOT ó ASAT Y GPT ó ALAT) y la CGT (gamaglutamiltranspeptidasa o γGT). una citoplasmática y otra mitocondrial.a. que esta constituida por dos isoenzimas. . LCR. y en eritrocitos pero en bajas concentraciones.TRANSAMINASAS Generalidades El hígado contiene un gran numero de enzimas. propiedades cinéticas e inmunológicas y a. la transaminasa glutamicopirúvica ó Alaninoaminotranferasa y la transaminasa glutamicooxaloacética ó Aspartatoaminotransferasa . la GPT se puede encontrar en plasma. que la componen. En los eritrocitos se encuentra la GOT soluble y en los leucocitos y reticulocitos están los dos tipos enzimáticos. estas enzimas están localizadas particularmente en el hígado. etc. corazón. orina. corazón. para la síntesis de aminoácidos distintos a los originales. de todas ellas las de mayor importancia clínica son la fosfatasa alcalina (Pa). en tanto que la GOT es una enzima binocular. músculo esquelético pero en mayor concentración en el Hígado. La GPT es un enzima que también se encuentra en riñón. Las transaminasas son enzimas que catalizan las reacciones de transferencia de grupos aminos de un aminoácido a un cetoácido. Existen dos tipos de transaminasas. la GPT es una enzima exclusivamente citoplasmática. pH óptimo de acción. se van a diferenciar por su movilidad elctroforética.

Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. 3.ASPARTATO AMINOTRASFERASA (GOT) 1. 30 ó 37°C frente a aire . Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. Metodo Prueba liquiUV 2. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 334 nm 1 cm 25. 340 nm. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. 5. Sin activación por piridoxalfosfato. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Muestra Suero o plama con heparina o EDTA. 4. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. Fundamento Metodo cinético para la determinación de la actividad de ASAT o GOT de acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC.

Correlacion diagnostica Los valores aumentados de esta enzima suceden cuando hay muerte en las células del miocardio (infarto al miocardio). Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. en estos casos también se debe diluir. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos 8. Valores de referencia 25 ºC 18 U/L 15 U/L 30 ºC 25 U/L 21 U/L 37 ºC 37 U/L 31 U/L Hombres hasta Mujeres hasta 9.7. 10. Linealidad En caso de sobrepasar la linealidad diluir 0.9ml de solución salina y multiplicar por 10. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. en las próximas 6-12h después de la oclusión de una arteria coronaria. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia.1ml mas 0. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. En casos de baja absorbancia es debido a que por ser una reacción enzimática se consume el NADH en la incubación. el grado del aumento es proporcional a la . no se debe usar como anticoagulante.

magnitud del daño. ictericias obstructivas. Los aumentos moderados se observan en las etapas finales de la cirrosis. osea que una lesión grande puede hacer elevar los valores >200 unidades. . los valores máximos se ven en al cabo de 48h y recupera sus valores normales de 3-5 días. Las cifras de GOT también se ven aumentadas en lesiones agudas de las células hepáticas como en las hepatitis virales y lesiones por intoxicación con fármacos o tóxicos como tetracloruro de carbono.

La transformación simultánea de NADH en NAD va seguida por una disminución de la absorbancia a 340nm. Metodo Prueba liquiUV para alanina aminotransferasa. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparina. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 3. 334 nm 1 cm 25.ALANINA AMINOTRANSFERASA (GPT) 1. 4. Los métodos para la medición de GPT son muy semejantes a los de la GOT. el ácido pirúvico producido por la enzima a partir de alanina y ácido alfacetoglutarato se transforma en ácido láctico por efecto de la deshidrogenasa láctica. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 340 nm. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. 5. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. 30 ó 37°C frente a aire . Fundamento Es un método cinético para la determinación de la actividad de la GPT de acuerdo con las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC sin activación por piridoxalfosfato. 2.

Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos Linealidad Hasta 154mmol/L o 9gm/L (según el Kit utilizado). no se debe usar como anticoagulante.7.095% evitar contacto con mucosas y piel. Valores de referencia 25ºC 5-23U/L 5-19U/L 30ºC 7-32U/L 7-26U/L 37ºC 9-43U/L 9-36U/L Hombres hasta Mujeres hasta Precauciones El Buffer/sustrato esta compuesto con sodio de azida 0. 9. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. . Si sobrepasa la linealidad diluir 1 + 10 y multiplicar por 11 8.

10. Correlacion diagnostica Las cifras de GPT pueden estar también ligeramente aumentadas en el infarto al miocardio. Los niveles sericos de GPT se encuentran considerablemente aumentados en las lesiones agudas de las células hepáticas. GOT. La determinación de la GOT y GPT se encuentran aumentadas en las insuficiencias cardiacas y como consecuencia del estasis Hepático. En la post-hepáptica es difícil encontrar valores superiores a 200U/L. si la insuficiencia es aguda se pueden elevar los valores de 1000 a varios miles U/L. se debe analizar todos los datos clínicos posibles para hacer un buen diagnostico y reconfirmar con enzimas como γGT. por esta razón se considera más específica la GPT en patologías del hígado. en contraste con la cirrosis hepática que se elevan poco las GOT y disminuyen las GPT. un buen trabajo organizado. Nota Gran parte del éxito de obtener buenos resultados en este tipo de determinaciones enzimáticas esta en el correcto manejo del tiempo a la hora de la lectura (pues las enzimas actuaran hasta consumir el substrato). . un buen lavado del material y no dejar de lado el uso de los controles. los valores elevados de estas tres enzimas son característicos de las hepatitis agudas y enfermedades necrotizantes del hígado en contraste con la elevación de la fosfatasa alcalina y disminución de GOT y GPT que nos da indicios de una ictericia obstructiva. en colestasis intra-hepática los niveles de GOT y GPT son análogos a los de la ictericia post-hepática. lo que nos puede ayudar a diagnosticar un infarto del miocardio teniendo muy en cuenta no llegar a confundirse con una hepatitis viral ya que en estas también aumentan. CHE y GPT que son hepatoespecificas. Los valores de La GPT. En la ictericia hepática (hepatocelular) y la post-hepática se utilizan la GOT y GPT para diferenciarlas. y la determinación de la fosfatasa alcalina son los de mayor utilidad para el diagnóstico de las hepatitis. El análisis de estas dos enzimas es de útil ayuda para detectar daño a nivel del hígado y determinar una hepatitis ya sea viral o por tóxicos como drogas. En la hepatitis viral se observa una elevación de ambas enzimas. a veces es mayor el aumento que la de la GOT. pero esto se debe posiblemente al daño del hepatocito secundario por alteración en la circulación.

2. glucógeno y sus productos parcialmente hidrolizados. . Metodo Prueba colorimétrica para amilasa alfa-1. Actua sobre las uniones 1-4 de las cadenas rectas del almidón y también sobre las uniones 1-6 glucosídicas de las cadenas ramificadas como las de amilopeptina y glicógeno. heces. Muestra Suero o plasma heparinizado.amilasa es una endoenzima que se denominaasí porque todos los productos de la hidrólisis tienen la configuración (α) en el C1 de la unidad de la glucosa reductora. intestino. La α . pulmón. cerebro.4-glucan-4-glucanohidrolasa. orina No hay pérdida de la actividad en 5 días a 4°C. bazo y corazón. leche. Este substrato reacciona directamente con la amilasa y no requiere de enzimas de restricción. semen. riñón.AMILASA GENERALIDADES Las amilasas son enzimas contenidas en la secreción pancreática las cuales catalizan la hidrólisis de los polisacáridos tales como : El almidón.Amilasa suele estar presente en el páncreas ( 200 mg/kg ) glándulas salivales. tejido adiposo. hígado. orina. 3. La α . La liberación de 2-cloro-4-nitrofenol del substrato y el resultante incremento de absorbancia por minuto es directamente proporcional a la actividad de la amilasa en la muestra. amilopeptina. trompas de falopio. 2-cloro-4-nitrofenilmaltotriósido. Fundamento La prueba colorimétrica utiliza un nuevo substrato. sangre. músculo. 1.

Condiciones del paciente No requiere ayuno. 5. 2 y 3 minutos Y multiplicar por el factor correspondiente. Tecnica Temperatura Muestra reactivo factor 25°C 20 ul 1000 ul 9864 37°C 10 ul 1000 ul 24820 Hg 405 nm. plasma Orina espontánea Orina 24 horas 25°C 120 U/l 600 U/l 450 U/24h 37°C 220 U/l 1000 U/l 900 U/24h IFCC 28-100 U/l <460 U/l <410 U/l . Si la determinación excede el valor diluir la muestra con 500 ul de solución salina y 100 ul de muestra y multiplicar por 6. Leer la absorbancia a los 1. Valores de referencia Temperatura Suero. Se recomienda el uso de pipetas automáticas para la medición de las soluciones para evitar la contaminación de las mezclas con saliva. oxalato o EDTA porque inhiben la actividad de la enzima. Metodo de determinación Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Condiciones de la muestra Puede utilizarse plasma heparinizado.4. 400 nm ó 410 nm 1 cm 25 °C ó 37°C frente a agua destilada Mezclar bien incubar por un minuto a la temperatura deseada. Evitar la utilización del torniquete por más de 30 segundos. 6. 8. No utilizar citrato.

10. dato que se debe tener en cuenta cuando se dosifica en pacientes con posible pancreatitis aguda y han recibido este analgésico. Cuando hay ruptura del embarazo ectópico. Interferencias La aplicación de morfina produce contracción del esfinter de Oddi y eleva los niveles hasta 900 unidades. La úlcera péptica perforada. aumenta los niveles de amilasa. Correlacion diagnostica Los nivele elevados en el suero son siempre transitorios. En la pancreatitis aguda.9. sus niveles aumentan en las primeras 24 a 36 horas. . Corresponden a episodios agudos y sólo duran 3 días. obteniendo niveles normales al 3 día. pero en la orina persisten hasta por 10 días. se libera una gran cantidad de amilasay se produce una hiperamilasemia. dato útil para su diagnóstico.

. También se eleva en la parotiditis y litiasis parotidea y marcada disminución en su eliminación en el carcinoma pancreático.AMILASURIA En condiciones normales se elimina una cantidad de amilasa por la orina. insuficiencia renal y pancreatitis crónica. La dosificación urinaria a veces es más ventajosa que la hemática pues el suero solo se eleva durante unas 72 horas y en la orina persiste por varios días. Este factor hay que tenerlo en cuenta y valorar el tiempo que ha durado la recolección. comprendida entre 35 y 250 unidades. con cifras estremas en las 24 horas de 835 a 6150 unidades.

5. los valores obtenidos en plasma y suero siempre son iguales 6. 4. liberando 4-nitrofenol. El mejor anticoagulante es la heparina. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 405 nm 1 cm 37°C frente a vacio . Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno minimo de 8 horas. 3. Metodo Metodo espectofotómetro con tampon AMP 2. Condiciones de la muestra Puede trabajarse con plasma. Fundamento La fosfatasa alcalina cataliza en medio alcalino la transferencia del grupó fosfato del 4-nitrofenilfosfato al 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP). El ejercicio puede alterar el resultado. pero este no debe contener floruros ni oxalatos. La utilización de EDTA inhibe la reacción. Debe permanecer en reposos 15 minutos antes de la toma de la muestra. Muestra Suero o plasma Es estable al menos por 7 días a una temperatura de 2 a 8 °C. medido a 405 nm.FOSFATASA ALCALINA 1. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de formación del 4-nitrofenol.

fracturas en consoliación y en metastasis óseas.7. 10. en el abseso hepático. enfermedad de Paget. Las muestras hemolizadas interfieren por la fosfatasa alcalina eritrocitaria. También aumentan en la ictericia. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 20 ul Leer la absorbancia inicial y efectuar lecturas cada minuto por 3 minutos y promediar los resultados y multiplicar por el factor 2764. 8. Correlacion diagnostica Se origina principalmete en los huesos y en el higado. por lo tnto esta bien establecida su relación con la formación osea. por eso cuando el crecimiento disminuye sus niveles bajan a cifras similares al del adulto. . raquitismo. Interferencias Los anticoagulantes como el floruro. oxalato y citrato interfieren en la reacción. Cuando hay deficiencia de vitamina D. Valores de referencia Adultos: 26 – 117 U/l 9. sus niveles aumentan. EDTA. hiperparatiroidismo.

Orina efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio. Fundamento El calcio en medio neutro. No usar oxalato o EDTA como anticoagulante ya que interfieren en la determinación de calcio. 6.8-dihidroxi-3.7-naftalenen-bis (azo)-dibenzenarsónico). Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 650 nm 1 cm 37°C frente a agua destilada . Metodo Determinación cuantitativa para calcio 2. 3.CALCIO 1. 5. Muestra Suero o plasma 4. Condiciones de la muestra Debe ser separado lo antes posible de los hematíes. Condiciones del paciente No requiere ayuno. forma un complejo de color azul con arsenazo III (ácido 1. Antes de la recogida adicionar al contenedor 10 ml de ácido nítrico al 50% Diluir la orina ½ en agua destilada para el análisis y multiplicar por dos. La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de calcio existente en la muestra.6-disulfo-2.

10.5 – 10. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. La mayoria de los detergentes destinados al uso del laboratorio contienen agentes quelantes.6 mmol/l 2. 8. Interferencias Se recomienda utilizar material de plástico. osteoporosis.1 –2.5 mg/dl 10 . Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul Estándar Muestra reactivo Mezclar e incubar 2 minutos. Trazas de los mismos.12 mg/dl 8. Niveles bajos de calcio pueden atribuirse ahipoparatiroidismo. El color es estable como minimo una hora. invalidan la determinación. si se utiliza material de vidrio debera lavarse con ácido nítrico diluido con agua destilada. mal nutrición o mala absorción.0 – 13 mg/dl 2.7. el 99% se halla en los huesos.2 mmol/l 50 – 300 mg/24h 80 –160 mg/24h . deficit de vitamina D. pseudohipoparatiroidismo. Una disminución de los niveles de albúmina causa una disminución del calcio en suero. La mayoria de las causas de hipercalcemia son debidas a enfermedades oncológicas.0 – 3. Valores de referencia Suero o plasma: Adultos Niños Recién nacidos Orina: Adultos Niños 9. tirotoxicosis e hiperparatiroidismo. sarcosidosis. aumento de la retención renal. intoxicación por vitamina D. 8. Correlacion diagnostica El calcio es el mineral más abundante e importante del cuerpo humano.5 – 3 mmol/l 2.

Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 4. 2. La intensidad del color es proporcional a la concentración de magnesio. Fundamento El magnesio forma un complejo de color púrpura al reaccionar con la calmagita en medio alcalino. Estándar Muestra reactivo . 3. Condiciones de la muestra Utilizar material limpio 6. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul 520 nm 1 cm 25 °C frente a blanco de reactivo. Muestra Suero o plasma heparinizado Orina.MAGNESIO 1.4 con HCL. Condiciones del paciente No requiere ayuno 5. Diluida 1:10 con agua destilada acidificada hasta 3. Metodo Metodo colorimétrico – calmagita.

tratamiento insulínico del coma diabetico. Niveles bajos son propios de trastornos gastrointestinales con malaabsorción.6 – 2. hipertiroidismo. Correlacion diagnostica La hipomagnesemia implica manifestaciones similares a la hipocalcemia.Mezclar e incubar por 5 minutos La coloración es estable por 30 minutos. Los niveles altos implican una depresión del sistema nervioso central y la excitabilidad neuromuscular. pielonefritis entre otros. 8. perdida anormal de líquidos. . 5 mg/dl 9. Valores de referencia 1. tratamientos con diuréticos. glomerulonefritis.

. 5.25°C frente a blanco de reactivo Blanco Estándar muestra reactivo . Condiciones del paciente No requiere ayuno. 3. Condiciones de la muestra No se debe usar plasma. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Fundamento El fosforo reacciona con molibdato en un medio fuertemente ácido para la formación de un complejo. 6. 2.. Hg 334 nm 1 cm 20. La absorbancia de este complejo leido en Uvcercano es directamente proporcional a la concentración de fósforo. Metodo Análisis fotométrico UV para la determinación de fosforo. Tecnica blanco ---------1000 ul estándar ---10 ul ---1000 ul muestra ------10 ul 1000 ul 340 nm. 4. Los anticoagulantes pueden causar resultados falsamente bajos. Muestra Suero.FOSFORO 1.

Leer la absorbancia de la muestra frente a blanco de reactivo antes de 1 hora. 8. Por lo tanto se recomienda material de plástico. Interferencias Muestras ictéricas y lipémicas requieren un blanco de muestra. Correlacion diagnostica Esta regulado por la hormona paratiroidea.0 – 7. Valores de referencia Adultos Niños: 2. La contaminación del material de vidrio es la mayor fuente de error en este análisis.5 – 5. fracturas evolutivas y la enfermedad de Addison.0 mg/dl 9. hipoparatiroidismo. . la cual controla la excreción urinaria y su movilización osea por medio de la vitamina D. Las valores bajos se encuentran en el raquitismo.Mezclar e incubar por lo menos 1 minuto a temperatura ambiente. Sueros lipémicos o hemolízados no deben ser usados. osteomalacia. 10. Los valores elevados se encuentran en la insuficiencia renal crónica.0 mg/dl 4. infecciones de flora cocoide gram negativa en su forma septicémica y en la hipervitaminosis D. la acromegalia.

. 4. lentamente. Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. Tiene su máxima concentración entre las 24 y 48 horas. 3.CREATINCINASA (Ck) Generalidades. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK. 2. medido a 340 nm. empezando a descender despúes de dicho tiempo. Fundamento La cratina quinasa (CK) cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina. Muestra Suero o plasma heparinizado o con EDTA. despúes de iniciado. para retornar a la normalidad entre 3 y 6 dias despúes. Método estándar modificado de acuerdo con las recomendaciones del cómite ECCLS. y muy poca se encuentra en el miocardio y el cerebro (CK). 1. empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. En el infarto de miocardio sus unidades se elevan entre 3 y 6 horas. obteniéndose creatina y ATP. La concentración catalítica se determina. Normalmente los músculos estriados tienen una alta concentración. Metodo Prueba líquida UV activada por NAC creatin kinasa. apartir de la velocidad de formación del NADPH.

se deducen las siguientes fórmulas para calcular la concentración catalítica: Macro: Micro: A/min x 4127 = U/L A/min x 3333 = U/L . Comprobar que las diferencias entre absorbancias sean sensiblemente iguales. Tecnica Precalentar el reactivo de trabajo a la temperatura ambiente minutos. Condiciones de la muestra La muestra de suero o plasma para Creatina quinasa es estable al menos 7 días a 2-8 Centigrados. A los 3 minutos. Insertarla en el portacubetas termotizado. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto durante tres minutos. 340 nm o Hg 334 nm 1 cm 25. Considerando que el coeficiente de absorción molar del NADPH a 340 nm es 6300. 25°C ó 30°C 50 ul 1000 ul durante unos Hg 365 nm. 30 ó 37°C contra aire Muestra Reactivo 37°C 25 ul 1000 ul Mezclar y transferir de inmediato a una cubeta. Calculos. Poner el cronómetro en marcha.5. 6.

. por aplicación de inyecciones y relajantes musculares. Correlacion diagnostica Se encuentra elevada en la distrofia muscular progresiva. Interferencias La hemólisis 10. e intervenciones quirurjicas elevan sus cifras ligeramente. Valores de referencia Temperatura de reaccion 25 °C 30 °C 37 °C Hombres U/l 10-80 15-125 24-195 Mujeres U/l 10-70 15-110 24-170 9. Traumatismos musculares. El valor cliníco está en una elevación manifiesta y su relación con el CK-MB y las otras enzimas que se alteran en el infarto.8.

Debido a que la concentración de CK-BB en circulación es mínima. o plasma heparinizado o con EDTA. reconociendose 3 isoenzimas. La CK-MB predomina en el miocardio y sus niveles se elevan cuando existe proceso necrótico del músculo cardíaco. las concentraciones máximas son a las 12-24 horas. la combinación de las cadenas origina la CK-MB. Metodo Prueba Humazym M-test Método por inmunoinhibición para CK-MB. recuperándose los valores normales entre las 24 y 72 horas. Cardíaco y lo hace progresivamente según su extensión y evolución clínica. . Tanto la enzima original CK como su isoenzima CK-MB. se elevan desde las 3 hasta las 6 horas post-infarto. Un anticuerpo es incoroporado al reactivo el cual se une especificamente a la subunidad M. CK-BB. Estudios electroforeticos demostraron que tiene dos cadenas M y B . Fundamento La prueba se basa en una determinación enzimática de CK acompañada de un método de inmunoinhibición. inhibiendo la actividad enzimática de esta subunidad B.CREATINCINASA FRACCION MB Generalidades. tejido nervioso. la cadena M deriva su nombre del músculo esquelético y la B de Brain ( cerebro ). CK-MB. Muestra Suero. Musculo esqueletico Cerebro Miocardio CK-MM. representa la actividad de la izoenzima CK-MB. la actividad remanentre multiplicado por el factor 2. La CK-MB aumenta notablemente en el infarto. que toman el nombre según el sitio donde predomina.

Si es superior. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Tecnica muestra Reactivo 40 ul 1000 ul Hg 334 nm. 30°C ó 37 °C contra aire. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK-MB Condiciones de la muestra La Concentracion de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L. Calcular la diferencia y multiplicar por el factor 8254. HG 365 nm 1 cm 25°C. diluir el suero con NaCl 150 mmol/L. . La CK-MB en suero es estable al menos 7 dias a 2-8 C. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. Mezcle e incube por 10 minutos a temperatura ambiente lea la abosorbancia y luego lea exactamente a los 5 minutos.Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. Valores de referencia 25 °C CK total hombres mujeres CK-MB >80 U/l >70 U/l >10 U/l 30°C >130 U/l >110 U/l >16 U/l 37°C >195 U/l >170 U/l >25 U/l La actividad CK-MB esta en un rango entre 6 y 25 % de la actividad de la CK total. 340 nm.

Correlacion diagnostica Presta una gran utilidad en los casos en que la CK se encuentra notablemente aumentada por causas ajenas al infarto y la CK-MB esta dentro de los límites normales. Esta aumenta notablemente en los infartos cardiácos. .

LACTATO DESHIDROGENASA (LDH) 1. 340 nm. Seperar el suero antes de los 30 minutos. 30°C ó 37 °C contra aire. HG 365 nm 1 cm 25°C. Metodo Prueba líquida para deshidrogenasa láctica. Tecnica 25°C ó 30°C 20 ul 1000 ul 37°C 10 ul 1000 ul Hg 334 nm. 2 y 3 minutos hacer un promedio y multiplicar por el factor 16345 . Fundamento Método modificado basado en las recomendaciones del SCE. muestra reactivo Mezclar y leer la absorbancia después de 1 minuto y leer luego a los 1. por pérdida de la actividad. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 2. 3. Condiciones de la muestra No se recomienda congelar la muestra. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparinizado. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. 5. 4. 6.

Interferencias El oxalato y el citrato interfieren en la reacción. permaneciendo elevada hasta por 8 ó 14 días.8. Correlacion diagnostica En el infarto al miocardio sus niveles se aumentan entre las 24 ó 48 horas y tiene su máxima concentración a los 2 ó 4 días. Valores de referencia temperatura adultos hombres mujeres Niños 12meses 25°C 120-240 U/l 30°C 160-320 U/l 37°C 225-450U/l IFCC <243 <244 Hasta 500 U/l 9. 10. .

5. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. .TROPONINA 1. Fundamento La prueba emplea un conjugado de anticuerpo monoclonal anti cTnl y colorante en fase móvil. 2. Como la muestra fluye por la almohadilla absorbente. Seperar el suero antes de los 30 minutos. 6. Tecnica Lleve el test a temperatura ambiente Dispense 2 gotas de la muestra enla ventana S. para demostrar el correcto funcionamiento. Condiciones de la muestra Las muestras que contienen partículas de turbidez pueden dar resultados inconsistentes. El exceso de conjugado reacciona en la línea de control formando una segunda línea rojo-violeta de control C. Muestras lipémicas o hemolíticas no deben ser procesadas. Muestra Suero o plasma 4. 3. y anticuerpos anti-ratón IgG (cabra) en la línea de control. fijados en la línea de prueba. la troponina humana I se une al conjugado anti-cTnl-colorante para formar un inmunocomplejo. el cual se liga a los anticuerpos anti-cTnl en la línea de prueba y produce una línea de prueba rojo-violeta(T). anticueropos anti-cTnl (ratón). Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. Metodo Prueba inmunocromatográfica en un paso para la detección de la troponina I cardíaca humana en el suero o plasma.

Valores de referencia Negativo Positivo 8. Debe considerarse repetir la prueba después de 12 horas de iniciado el dolor.5 ng/ml de troponina I. 7. Interferencia La prueba no puede determinar niveles inferiores a 0. Las muestras positivas desarrollan una línea de prueba T en los primeros minutos.Evite la formación de búrbujas en la ventana. El resultado negativo no excluye la posibilidad de un infarto al miocardio. . Lea los resultados a los 15 minutos. No lea después de 15 minutos para evitar errores.

Muestra Sangre total con EDTA. Dado que la concentración de glicohemoglobina en el eritrocito refleja el nivel promedio de glucosa en la sangre de las 4 a 6 semanas anteriores y es estable por la vida de los eritrocitos. la medición es proporciona una prueba de gran valor para evaluar el control a largo plazo de los pacientes diabéticos. 4. Condiciones de la muestra No debe utilizarse muestras hemolizadas para no alterar el resultado. 2. Fundamento La formación de glicohemoglobina ocurre irreversible y progresivamente en los eritrocitos a través de los 120 días de vida normal de estas células. . 3. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 415 nm ó Hg 405 nm 1 cm 25°C frente a agua destilada.HEMOGLOBINA GLICOSILADA 1. Condiciones del paciente Ayuno de 8 horas. 5. Metodo Método rápido de separación por resina de intercambio iónico.

%HbA1 4.5% Muestra 100 ul 15°C ó 25°C reactivo 5 ml de agua destilada .5 – 7.7. Valores de referencia pacientes Metabolismo normal Diabéticos descontrolados 9. Correlacion diagnostica La dosificación de la hemoglobina glicosilada es importante en un diabético como la glucosa. Tecnica Etapa de hemólisis Reactivo lisante 500 ul Mezclar e incubar por 5 min Determinación de HbA1 Pipetear 100 ul de hemolisado Tapar a 1 cm aproximadamente Mezclar por 5 min Leer la absorbancia Determinación de Hb total Pipetear 20 ul de hemolisado Mezclar cuidadosamente Leer la absorbancia HbA1= F X HbA1 muestra Hb total 8.0 % >8.

BIBLIOGRAFIA • • Manual de quimica clinica. Colegio mayor de Antioquia Insertos de las técnicas. Elaboró Carolina Hoyos Velásquez Cargo: Bacterióloga FECHA: XXXXXXXXXXXX Revisó XXXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Aprobó XXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXX .

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