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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

ELABORADO POR: CAROLINA HOYOS VELASQUEZ BACTERIOLOGA COOPERATIVA COOMAN

LABORATORIO CLINICO EMPRESA SOCIAL DEL ERSTADO HOSPITAL SAN RAFAEL DE YOLOMBO YOLOMBO 2008

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ACIDO URICO

1. Metodo Análisis enzimático colorimétrico por ácido urico con factor aclarante de lípidos (LCF) (PAP) 2. Fundamento Determinación del Acido Urico por la reacción con la uricasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona por la acción catalítica de la peroxidasa con ácido 3,5-dicloro-2-hydroxybenzenesulfónico (DCHBS) y 4-aminofenazona (PAP) para producir un complejo rojo-violeta de quinonemina como indicador. 3. Muestras Suero o plasma con heparina o EDTA, orina. Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. 4. Condiciones del paciente Para determinación en suero. Antes: • Explicar el procedimiento al paciente. • Llevar estrictamente los siguientes puntos. • Suspender la medicación de drogas como: alopurinol, salicilatos, fenilbutazona, calmantes o analgésicos, ácido ascórbico (vitamina C), buscapina, diuréticos de la trazida, tioles libres, purinas metiladas, ácido homogentístico y altas cantidades de glucosa. • Dos días antes del examen evitar ejercicios violentos.

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24 horas antes del examen, el paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas, mariscos y frijoles ya que contienen altos contenidos de purina. 48 horas antes de la venoclisis suspender el consumo de alcohol. Durante: Recoger 5 - 7 ml de sangre venosa en un tubo de tapón rojo. • Retomar nuevamente la ingesta de cualquier medicamento que pueda alterar los resultados. Después: • Aplicar presión en el sitio de punción. Para determinación en Orina: • Orina de 24 horas, teniendo en cuenta las indicaciones anteriores. Nota Las muestras lipémicas generalmente generan turbidez en la mezcla del reactivo con la muestra, lo que lleva a resultados elevados falsos. El LCF aclara completamente la turbidez causada por muestras lipémicas. Los valores en sangre total varían con la proporción de células en la sangre debido a que las células también contienen muchas más sustancias que interfieren en la reacción. 5. Condición de la muestra La sangre debe recogerse en tubos limpios, libres de metales pesados, ya que estos y los cianuros son inhibidores enzimáticos. La prueba no se ve influenciada por valores hasta 100mg/dl de hemoglobina o por valores de bilirrubina hasta 20mg/dl. La estabilidad de la muestra es: Temperatura ambiente  3 días Refrigerado  2 - 8°C por 5 días. Congelado  20°C, seis meses. En orina de 24 horas con preservativos y a temperatura ambiente → 2 días. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: 520nm, Hg 546 nm. Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20 - 25 °C ó 37°C Medir: frente a blanco de reactivos

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7. Tecnica Pipetear: Blanco Estándar Muestra Blanco ---------Muestra ------25λ Estándar ------25λ Solución Reactiva 1000λ 1000λ 1000λ Mezclar, incubar a 20-25°C durante 20-50 minutos, leer las extinciones frente a blanco de reactivos. Límite de dilución 15 mg/dl, con concentraciones superiores diluir la muestra 1 + 1 con solución de cloruro sódico al 0.9% y repetir la determinación, el resultado multiplicarlo por 2. 8. Valores de referencia Hombres: 3.7 - 7.0 mg/dl. Mujeres: 2.4 - 5.7 mg/dl. 9. Interferentes de la prueba El ácido ascórbico en concentraciones terapéuticas no interfiere en la prueba, pero en cantidades excesivas puede dar resultados elevados. Sustancias químicas con efecto antiuricosúrico. Acido etacrínico, furosemida, diuréticos de la benzotiacida. Sustancias que inhiben competitivamente la secreción tubular del urato. El p- aminohipurato, lactato, acetoacetato y B. hidroxibutírico. Por otra parte, ciertos fármacos como los salicilatos, fenilbutazona entre otros, inhiben la secreción de ácido úrico a dosis bajas, pero causan un efecto urosúrico intenso a dosis altas, debido a que estos fármacos pueden inhibir reabsorción tubular a niveles altos. El exceso del lactato también se asocia con la hiperuricemia en los casos de ejercicio fuerte y toxemia del embarazo.

Notas El etanol altera el metabolismo del ácido úrico aumentando la producción de urato y por la supresión de la excreción renal de ácido úrico. Esta última es el resultado

La gota es un trastorno del metabolismo de purinas o de la excreción renal de ácido úrico caracterizado por: Hiperuricemia. El aumento del ácido úrico es mucho más frecuente y clínicamente más significativo que su disminución. hipertensión. Ataques clínicos recidivantes de artritis. La ingestión de alimentos ricos en purinas. vísceras y levaduras producen una hiperuricemia leve. Entre las etiologías más comunes de hiperuricemia se cuentan el fallo renal.0 Página 5 de 83 del exceso de lactato producido por la oxidación del etanol a acetaldehído. En los pacientes hipertensos la reducción del flujo sanguíneo renal y el aumento de la resistencia vascular pueden ser responsables de la disminución de la fracción de filtración del urato. 10. cambios bioquímicos e incluso factores sociales y de comportamiento se asocian a modificaciones de la concentración de ácido úrico en el plasma. aunque presenta predilecciones por articulaciones. Control de calidad • Cada vez que se determine ácido úrico correr con las muestras un estándar acuoso y dos suero control liofilizado. aterosclerosis. • Evaluación permanente de resultados. obesidad. Precipitación de urato monosódico en forma de depósitos (tofos) por todo el cuerpo. . alteraciones fisiológicas. por ejemplo carnes. excepto por el SNC. Correlacion clinico patologica Numerosas enfermedades.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . la cetoácidosis. • Almacenamiento adecuado de los cartuchos reactivos. Las reservas de ácido úrico pueden superar los 30 g. Nefropatía y a menudo nefrolitiasis. diabetes mellitus. La hiperuricemia tiene también una relación positiva con la hiperlipidemia. que inhibe competitivamente la secreción tubular renal del urato. pues los valores altos son diagnóstico de “gota”. el exceso de lactato y el uso de diuréticos. Es de mucha importancia la determinación de ácido úrico. • Adecuada extracción y manipulación de muestras límites aceptables en los controles. tejido subcutáneo y bolsas sinoviales.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. • Asegurarse que la lectura del blanco esté dentro del rango permitido.

El uso del torniquete no ha de execeder los 30 segundos. Una hiperactividad de fosforribosil . ya que esto puede aumentar la concentración de proteínas. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero. 5. anticoagulantes o agua destilada aumentan los valores.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Muestras Suero ó plasma con EDTA ó heparina. Fundamento. despues de abierto debe evitarse la contaminación. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentracion de albumina en la muestra. Metodo Prueba fotometrica colorimetrica para Albumina Metodo BCG 2.fosforrobosil transferasa. Patron de albúmina y el RGT son estables hasta la fecha de vencimiento cuando se almacenan de 2 a 25 grados centigrados. El verde de bromocresol forma con la albumina en buffer de citrata un complejo coloreado. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 8 horas y durante este periódo no hacer esfuerzoz corporales intensos. .fosfato La presencia de amonio en cualquiera de los reactivos. Estable 1 mes a 2-8 grados y 1 semana entre 15 y 25 grados 4.0 Página 6 de 83 Se han identificado dos defectos enzimáticos ligados al cromosoma sexual como etiología de la gota primaria: Una deficiencia de (H 6 PRT) hipoxantin guanin . ALBUMINA 1.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones de la muestra No usar plasma heparinizado porque se puede alterar el valor. 3.

ABS muestra ____________ X 4 g/dl albúmina ABS patrón 8. 10. El color es estable durante al menos 30 minutos.8 – 5.1 g/dl en hombres y mujeres.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Interferencias La prueba no es influenciada por valores de Bilirrubina hasta 20mg/d. Hemoglobina (1 g/L). La reacción de la albúmina con el verde de bromocresol es inmediata. Otras proteinas reaccionan lentamente. Valores normales 3. 9.0 ml patrón 10 ul ---1. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Hg 546 nm. 7. Hay 3 factores que pueden disminuir su concentración: . Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Patrón albúmina Muestra Reactivo blanco ---------1. Correlacion clinicopatologica. 578 nm 1 cm 20 a 25 frente a blanco de reactivo por serie. por lo que es conveniente no demorar la lectura.0 ml muestra ---10 ul 1.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 7 de 83 6. Leer la absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco de reactivo.0 ml Mezclar bien y dejar los tubos durante 5 minutos a temperatura ambiente.

El proceso de aglutinación provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentración de uALB de la muestra. 2) Por síntesis defectuosa como ocurre en la mayor parte de las hepatopatías. son aglutinadas por uALB presente en la muestra del paciente. y se debe ajustar su pH a 7. Es estable por 7 días cuando se le añade azida sódica para prevenir posibles contaminaciones. La manifestacion clínica mas llamativa es el edema.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Muestra Orina fresca. 4. albúminuria persistente. paracentesis. 3. 2. Edemas carenciales.0 Página 8 de 83 1) Pérdidas cuantiosas o frecuentes. Fundamento Las partículas de látex con anticuerpos anti-albúmina humana. Anemia persistente Neoplasia nefrosis lipoidea. MICROALBUMINURIA 1. Metodo de determinacion Longitud de onda: 540 nm (530-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 37°C Medición: frente a agua destilada . y por comparación conocida se puede determinar el contenido de uALB en la muestra ensayada. Condiciones de la muestra La orina debe ser lo más fresca posible. catabolismo excesivo). Metodo Prueba de turbidimetría para la cuantificación de microalbúmina en orina humana. Otras: Trastornos pulmonares. 3) Por carencia de materia prima como en la hipoalimentacion.0 con NaOH/HCl 1 mol/L. (hemorragias. 5.

. así como de alteraciones cardiovasculares en pacientes que sufren diabetes mellitus insulinodependientes o bien insulina no-dependiente. Valores de referencia Hasta 15 mg/L 8. La urea > de 1g/L y bilirrubina > 10mg/dl interfieren. siendo superior al valor normal.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 7 ul Mezclar y leer la absorbancia frente a agua destilada y leer a los dor minutos después y se multiplica el valor por la concentración del calibrador. La microalbuminuria es un marcador del riesgo de la nefropatía diabética. hemoglobina 10g/L. 7. Interferencias No interfieren valores de Glucosa 2 g/L. esta aun por debajo de la concentración considerada como una proteinuria convencional.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. creatinina 3 g/L.0 Página 9 de 83 6. concentración que. Correlacion diagnostica Se define la microalbúmina como la tasa de excresión de albúmina en orina entre 20 y 200 ug/min.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 10 de 83 .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

hasta las células hepáticas en donde es conjugada con el ácido glucoronico. el conducto biliar común y el intestino. pero no de bilirrubina.transferasa.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El riñón no excreta bilirrubina no conjugada puesto que es insoluble en agua y en general se encuentra unida a la albúmina. Esta forma de bilirrubina se denomina no conjugada (indirecta) que es transportada en el plasma en forma libre unida a la albúmina. . hígado y medula ósea). La orina normalmente contiene una pequeña cantidad de urobilinógeno. Hem hem oxigenasa Biliverdina Biliverdina reductasa Bilirrubina.0 Página 11 de 83 BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA. incluyendo sales biliares. bicarbonato. que acaban conduciéndola a los conductos hepáticos. esta solo aparece cuando la concentración en plasma se encuentra aumentada y siempre es de bilirrubina conjugada. y el otro porcentaje de los eritrocitos defectuosos destruidos en la medula ósea antes de ser liberados.glucoronil .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . El nivel de la bilirrubina serica total. El heme es catabolizado después para formar biliverdina que se transforma en bilirrubina. por tanto no atraviesa la membrana glomerular. El examen de la orina para los pigmentos biliares (bilirrubina) y urobilinógeno se emplea en la investigación de la ictericia. es útil para evaluar la extensión y el progreso de la ictericia. El metabolismo de la bilirrubina proviene en un 80% de la descomposición de los hematíes envejecidos en el sistema retículo endotelial (bazo. La bilirrubina conjugada se excreta después por las células hepáticas hacia los canalicemos intrahepáticos. La hemoglobina es liberada desde los hematíes y descompuesta en moléculas de Heme y globina. La bilirrubina total del suero incluye la bilirrubina libre o no conjugada (reacción indirecta) y una pequeña cantidad de bilirrubina conjugada o de reacción directa. Un 5% de los citocromos citoplasmáticos y mitocondriales hepáticos. fosfolípidos. colesterol. agua y bilirrubina. conjugación catalizada por la enzima Bilirrubin . Generalidades La bilis se forma en el hígado y presenta muchos componentes.

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Bilirrubina total = bilirrubina directa + bilirrubina indirecta. Mencionar en el volante del laboratorio cualquier fármaco que pudiera afectar los resultados de la prueba. ya que en caso contrario los resultados de la prueba podrían ser inexactos. Los glucoronidos de la bilirrubina solubles en agua reaccionan directamente con DSA mientras la bilirrubina indirecta conjugada con albumina reacciona sólo en la presencia de un acelerador. alajada de la luz. Evitar muestras hemolizadas. Metodo Método modificado de Jendrassik/Gróf. Condiciones del paciente Reposo de 15 minutos antes de la toma de muestra. 5. Proteger la muestra de sangre de la luz brillante. La muestra es estable por 3 días a una temperatura de 2 a 8 grados. y deben estar protegidas de la luz. La absorbancia de este color a 546 nm es directamente proporcional a la concentración de bilirrubina en la muestra. 1. de que parte de la bilirrubina reacciona directamente con el reactivo de Erlich.0 Página 12 de 83 La designación de Bilirrubina como directa e indirecta deriva de observaciones. Condiciones de la muestra No agitar el tubo. . 2. Fundamento La Bilirrubina reacciona con al ácido sulfanílico diazotado (DSA) formando un color rojo. El ayuno prolongado produce aumento de bilirrubina ya que parte de esta se almacena en el tejido adiposo y al suceder la lipolisis se libera y sale a la circulación. 3.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Muestra Suero o Plasma con heparina. Debe procesarse la muestra el mismo día. El uso de torniquete no debe prolongarse más de 30 segundos. Ayuno de ocho horas. llevadas a cabo por Van Den Berg en 1913. mientras que la otra hay que adicionarle alcohol. 4.

... Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min. Muestra 1 ml 1 gota 546 nm 1 cm 20 a 25 grados C frente a blanco de muestra.. Reactivo TBR Reactivo TNR Mezclar cuidadosamente e incubar por 5 minutos. Tecnica Bilirrubina total Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente exactamente por 5 minutos.0 Página 13 de 83 6.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Leer la absorbancia frente al blanco.. Leer la absorbancia de la muestra frente al blanco. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Bilirrubina directa Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Muestra 1 ml 1 gota Reactivo DBR Reactivo DNR Mezclar cuidadosamente e Incubar por 2 minutos..

La ictericia es una coloración amarillenta de los tejidos corporales (piel. Entre los fármacos que reducen los niveles de bilirrubina total se incluyen barbitúricos.20. diluir la muestra 1 + 4 con solución fisiológica y repetir la prueba. salicilatos y vitamina A. Correlacion diagnostica La determinación de bilirrubina total es útil para evaluar la extensión y progreso de la ictericia en problemas hepatocelulares.0 Página 14 de 83 8. se altera rápidamente con la luz. Estabilidad No es muy estable. membranas mucosas y escleróticas). etc.0. Bilirrubina indirecta: 0. Interferentes La exposición prolongada (más de 1 hora) a la luz solar directa o artificial puede causar disminución de la bilirrubina en un 50%. El almacenamiento no es conveniente.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .1. total . directa. Bilirrubina directa: 0.0 umol/l. La hemólisis de la sangre y la lipemia pueden producir resultados erróneos. Bilirrubina indirecta = B. penicilinas y salicilatos (dosis elevadas). Para obtener la concentración de la Bilirrubian indirecta se resta o establece la diferencia de la concentración de la Bilirrubina total y Bilirrubina directa. Bilirrubina total en el recién nacido: 1 a 12 mg/dl ó 17. el color amarillo se aprecia cuando la bilirrubina serica total .1 .0 umol/l. anabolizantes.2 . 10.12.0. Entre los fármacos que pueden causar niveles aumentados de bilirrubina total se incluyen: Esteroides. causada por niveles sanguíneos de bilirrubina anormalmente altos. Multiplicar el resultado por 5. 9. diuréticos. si la concentración es mayor de 25 mg/dl. Linealidad La prueba es lineal hasta 25 mg/dl. si se necesita debe refrigerarse por pocos días (3 días a 2-8 °C) protegida de la luz. ácido ascórbico. antibióticos (Eritromicina). debe procesarce la muestra lo más rápido posible. por lo tanto.1 umol/l. cafeína.5. morfina.0 mg/dl o 5.B.5 umol/l. 11.4 .1 . antipalúdicos. obstructivos y prehepáticos.1 . anticonceptivos orales.1 . Valores de referencia Bilirrubina total: 0.3 mg/dl o 1.7 .8 mg/dl o 3.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.17.

En general hay bilirrubinuria.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La ictericia se debe a un defecto en el metabolismo o la excreción normales de bilirrubina.Najjan I y II.  Cirrosis por alcohol. indirecta o estar normal y la bilirrubina total aumentada. talasemia intoxicación por plomo. Eritropoyesis ineficaz acelerada: Anemia megaloblástica. Causas: Metabolismo aumentado del Heme: esferocitosis hereditaria. tumores metastásicos etc. Causas:  Obstrucción intrahepática: debido a obstrucción por fármacos. Hepatitis viral. alcohol y tóxica. Causas: Shock por hipoxia.  Hiperbilirrubinemia por derivación. virica o alcohólica. Ictericia hepatocelular Hay aumento mayor de la bilirrubina directa y puede haber aumentos menores de B.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.  Síndrome de Gilbert  Recién Nacidos. No hay bilirrubinuria. Cirrosis. policitemia.  Destrucción prematura de eritrocitos defectuosos.5 mg/dl.hepatica o colestasica Hay aumento de bilirrubina directa y se presenta Bilirrubinuria. defecto que puede ocurrir en cualquier fase del metabolismo de la bilirrubina desde su formación hasta su excreción intestinal. enfermedad drepanocitica. atresia de conductos. Insuficiencia cardiaca congestiva. Ictericia pre – hepatica Hay aumento de la bilirrubina indirecta. Síndrome de Cliger . hepatitis aguda. cirrosis biliar primaria. hormonas esteroideas. . etc. Ictericia post .0 Página 15 de 83 supera los 2.

0 Página 16 de 83  Colestasis extrahepática o quirúrgica: debido a carcinoma en conducto. Nota La bilirrubina directa diferencia la ictericia Pre-hepática de la hepatocelular y obstructiva y la bilirrubina indirecta hace la diferenciación entre la hepatocelular obstructiva y las Pre-hepáticas. por edema en la cabeza del páncreas. . cálculos biliares. páncreas o ampolla de Vater. vesícula biliar.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

70% esterificado. triglicéridos. cuando estos son < 400 mg/ml. HDL. Aspecto uniformemente lechoso significa presencia de triglicéridos endógenos (VLDL). se encuentran en el plasma como lipoproteínas.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 30% libre. Triglicéridos HDL colesterol VLDL colesterol: se evalúa mediante la formula trigliceridos/5. fosfolípidos y ácidos grasos libres. esteres de colesterol. IDL y VLDL. Transportado principalmente por LDL. Perfil lipidico minimo El dato del colesterol total y los triglicéridos da una información global de los lípidos que circulan en el organismo. Los lípidos totales están compuestos por: colesterol libre. se debe tener un estudio fraccionado de las lipoproteínas que es lo que se conoce como perfil lipídico. porque valores de colesterol aumentados no producen ninguna turbidez. pero sí se requiere tener un concepto claro de cómo están incidiendo los lípidos en el aparato circulatorio.0 Página 17 de 83 PERFIL LIPIDICO MINIMO Generalidades de lipidos Los lípidos constituyen la principal reserva energética de los seres vivos y también forman parte de la membrana celular y regulan la actividad de la célula y tejidos. significa presencia de triglicéridos exógenos (quilomicrones). En el estudio del perfil lipídico mínimo se deben tener en cuenta los siguientes parámetros: Aspecto del suero: se realiza la prueba en frío en caso de obtener sueros lechosos. El colesterol total del cuerpo: comprende el colesterol libre y esterificado. El aspecto del suero no indica que el paciente este normal. LDL colesterol: se determina con la formula de Friedewald . se coloca el suero durante 12 horas en refrigeración (4ºC) esto con el objeto de ayudar a clasificar las trigliceridemias así:  Capa cremosa en la superficie y nadante transparente.  Capa cremosa en la superficie y nadante turbio significa triglicéridos exógenos y endógenos (quilomicrones y VLDL). Todos estos lípidos con excepción de los ácidos grasos que están ligados a la albúmina.

(VLDL C + HDL C ). Indice arterial se determina mediante la formula CT/HDLC ö LDLC/ HDLc. Interpretacion del perfil lipidico mínimo Lípido mg/dl Colesterol Total LDL Colesterol HDL hombres HDL mujeres Trigliceridos Indice arterial: Deseable <200 <130 >35 >45 <200 Hombres <=5 Mujeres <=4.0 Página 18 de 83 LDL C = CT.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Cifras superiores establecen un alto riesgo de enfermedad coronaria.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.5 Riesgo potencial 200-239 130-159 25-35 40-45 >200 Riesgo alto >=240 >=160 <25 <40 >200 Estas cifras nos indican que la arteriosclerosis se esta verificando en forma normal. .

Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba.0 Página 19 de 83 COLESTEROL TOTAL 1. Anotar cualquier fármaco que pueda modificar los valores de Colesterol. Separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 3. Condiciones del paciente Esta prueba no necesita de ayuno pero como generalmente se realiza con el resto del perfil lipídico. 6. El indicador es la quinonemina formada por el peróxido de hidrógeno y 4aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 5. Extraer 5-10 ml de sangre en un tubo seco. Medición: frente a blanco de reactivo. para evitar la redistribución del Colesterol entre las diversas lipoproteínas. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. 4. . se deben seguir los requerimientos que para este se indiquen. Muestra Suero o plasma con heparina o EDTA. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para colesterol con factor aclarante de lípidos (LCF) CHOD-PAP 2. Fundamento El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación.

bloqueadores beta-adrenérgicos. Colchicina.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Quelantes de las sales biliares.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Eritromicina. Captopril. Notas El test no se afecta con valores de hemoglobina inferiores a 200 mg/dl. 8. Corticosteroides. Niaciana. Isoniacida. ni de Bilirrubina menor a 5 mg/dl. Colestipol. Adrenalina. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. RECIEN NACIDOS LACTANTES NIÑOS ADULTOS/ ANCIANOS 53 – 135 mg/dl 70 – 175 mg/dl 120. incubar 10 minutos a 20 ó 25 grados. Vitamina D. Anticonceptivos orales. Diuréticos tiacídicos. Nitratos. Lovastatina (Mevacor). Esteroides anabólicos. Allopurinol. Neomicina (oral). Evitar el contacto con los reactivos ya que son muy corrosivos. sulfamidas. Interferencias La Ovariectomía aumenta los niveles de Colesterol. Hay fármacos que elevan los niveles de Colesterol como: Hormona adrenocorticotrópica. Liotironina (Cytomel).0 Página 20 de 83 7. Valores de referencia Varían con la edad y el laboratorio. o 5 minutos a 37 grados C. Hay otros que disminuyen los valores como: Andrógenos. Tecnica Pipetear Blanco ---------1000 µl Estándar ---10 µl ---1000 µl Muestra ------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Rvo Color Mezclar. .200 mg/dl < 220 mg/dl Sospechoso mayor de 220 Elevado mayor de 260 9.

generando resultados falsamente elevados 9. multiplicar el resultado por 3. Hiperlipemias. Síndrome nefrótico. Estrés. Linealidad El test es lineal hasta una concentración de Colesterol de 750 mg/dl (19. Hipertiroidismo. Desnutrición. Mala absorción. Cirrosis biliar.7 mmol/l  Niveles superiores: 300 mg/dl Necesitan tratamiento. 10. Dieta rica en Colesterol.0 Página 21 de 83 Muestras lipémicas usualmente generan turbidez en la muestra que se va a analizar. Resultados anormales Niveles aumentados en: Hipercolesterolemia.3 mmol/l). nefrósis. Control de calidad Hacer control periódico a equipos y reactivos para evitar resultados falsos positivos ó falsos negativos. Enfermedad hepática. Infarto de miocardio. Correlacion diagnostica  Niveles sospechosos: 220 mg/dl ó 5. Para la técnica se debe montar un control Normal y uno Patológico. Para concentraciones mayores diluir la muestra con solución salina al (0. Anemia perniciosa. Medicación hipocolesterolemiante. Hipertensión. Diabetes Mellitus descontrolada. Colestasis hepática. . embarazo. Hipotiroidismo.9%).7 mmol/l  Niveles elevados: 260 mg/dl ó 6. aterosclerosis. Xantomatosis. Niveles disminuidos en: Sepsis. 1 + 2 y repetir la determinación. Anemia hemolítica.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

5. 6. el sobrenadante contiene las HDL que se van a determinar. Muestra Suero o plasma con anticoagulante EDTA o heparina. Abstenerse de no ingerir alcohol por 72 horas antes de la toma de la muestra (no es necesario). 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. HDL es estable en la muestra de suero durante 7 días a 4ºC o durante 4 meses a –20ºC. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. 4.0 Página 22 de 83 COLESTEROL HDL 1. 3. en la mayoría de las personas la lipemia posprandial interfiere con muchos de los métodos analíticos. 2. Condiciones del paciente Ayuno de 12-14 horas previas a la extracción de sangre. Debe señalarse que si bien la falta de ayuno no afecta los niveles de HDLc sanguíneo. Despúes de centrifugar.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. VLDL y LDL se precipitan por adición de ácido fosfotúngstico y cloruro de magnesio. Metodo Colesterol precipitnte. Fundamento Los quilomicrones.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Medición: frente a blanco de reactivo . Condiciones de la muestra La muestra debe separarse del coagulo dentro de las dos horas de la extracción y conservarse a 4ºC a menos que se analice de inmediato.

9% y se repite la precipitación de la muesta diluida. Tecnica A. incubar por 10 minutos a temperatura ambiente.0 Página 23 de 83 7. En las muestras con un contenido de triglicéridos altos se pueden presentar precipitaciones incompletas de las lipoproteínas o flotación por parte de las mismas sobre él liquido. en ese caso. . Despúes de centrifugar. Leer la absorbancia de la muestra y el estándar frente al blanco de reactivo antes de una hora. separar el sobrenadante claro del precipitado dentro de 1 hora y determinar la concentración del colesterol HDL con el reactivo de Colesterol total. Centrifugar por 2 minutos a 10000 rpm ó 10 minutos a 4000 rpm. El ácido ascórbico disminuye los valores. Limite de dilución 310 mg/dl.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Notas El sobrenadante debe ser claro. El resultado se multiplica por dos. observando un sobrenadante turbio. se hace una dilución 1: 1 con solución cloruro de sodio al 0.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Determinación Agua destilada Estándar Sobrenadante Reactivo de color Blanco 100 ul ------1ml Estándar 100 ul ---1ml Problema ---100 ul 1ml Mezclar. Precipitación pipetear muestra precipitante Macro 500 ul 1000 ul Micro 200 ul 500 ul Mezclar bien. incubar todos los tubos a temperatura ambiente por 10 minutos ó a 37ºC por 5 minutos. B.

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Correlacion diagnostica La HDL contrarresta la acción nociva que puede tener la LDL sobre nuestro organismo. deficiencia familiar de Apo I y Apo II. Valores de referencia Mujeres > 45mg/dl Hombres > 35mg/dl 9.0 Página 24 de 83 8. Se observa en: mayor producción de Apo I y Apo II y actividad física fuerte. al evitar la arteriosclerosis excesiva porque remueve y elimina a través de la bilis cantidades considerables de LDL en forma de ácidos biliares y esteroides neutros. hipertriglicéridemia. Niveles disminuidos de HDL correlacionan con riesgo aumentado de enfermedad cardiocirculatoria. obesidad. complementada con un nivel de HDL lo más elevado posible. sedentarismo. Niveles aumentados de HDL correlacionan con disminución en el desarrollo de enfermedad cardiocirculatoria. siendo esta la mejor forma de luchar contra este mecanismo fisiológico. deficiencia de LPL 1 con afectación del metabolismo de quilomicrones y VLDL. Resultados Anormales. La LDL juega un papel muy importante en el funcionamiento arterial y por esto debemos tratar que el organismo tenga estrictamente la cantidad necesaria que requieren sus funciones. para evitar la arteriosclerosis prematura. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

Muestra Suero o plasma heparinizado o palsma con EDTA 4. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba. Extraer 5-10 ml de sangre en tubo seco y separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción. No consumir grandes cantidades de Carbohidratos y grasas 48 horas antes de la prueba. la hemólisis hasta 10 mg/dl ó 170 mmol/l. Los Triglicéridos permanecen estables 3 días a 4ºC.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. se le debe hacer la prueba en frío. Condiciones del paciente El ayuno debe ser entre 12 y 14 horas.0 Página 25 de 83 TRIGLICERIDOS 1. Es importante describir el aspecto del suero. para evitar la redistribución de los Triglicéridos entre las diferentes lipoproteínas. que consiste en . Antes de procesar la muestra se debe observar y anotar el aspecto del suero ya que si este está lechoso. Notas La lipemia. la temperatura de 25ºC permite la liberación de glicerol de los fosfolipídos y produce un incremento aparente del valor de los Triglicéridos. 5. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para triglicéridos con factor aclarante de lípidos. 4aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa. Fundamento Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasa. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. El indicador es Quinineimina formada a partir de peróxido de hidrógeno. 3. GPO-PAP 2. No hacer ejercicio fuerte antes de la prueba. metabólitos y una serie de fármacos de uso común NO interfieren con el método. Los volúmenes de la reacción sugeridos se pueden modificar sin ningún cambio en los cálculos.

leer con Blanco de reactivo.3 mmol/l) de Triglicéridos. Tecnica Pipetear: Blanco ------------1000 µl Estándar ---10 µl ------1000 µl Muestra ------10 µl ---1000 µl Control ---------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Control Reactivo Mezclar. luego de las cuales se observa las características que presenta el nadante y el sobrenadante. 25 ó 37 grados C Medición: frente a blanco de reactivo 7.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Linealidad El método es lineal hasta 1000 mg/dl (11. Metodo de determinacion Longitud de onda: 500 nm. 8. e incubar por 10 minutos a 25ºC o por 5 minutos a 37 grados C. Los Triglicéridos no permanecen en el suero a 25ºC. repetir la determinación y multiplicar el resultado por 6.0 Página 26 de 83 colocarlo en la nevera por 12 horas. Estabilidad de la reacción 1 hora. a 4ºC son estables por 3 días. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20. 6. debido a que fácilmente se libera el glicerol.9%. Para concentración superior diluir la muestra 1+5. Valores de referencia EDAD 0 – 5 años 6 – 11 años 2 – 15 años 16 – 19 años Adultos / ancianos HOMBRES 30 – 86 mg/dl 31 – 108 mg/dl 36 – 138 mg/dl 40 – 163 mg/dl 40 – 160 mg/dl MUJERES 32 – 99 mg/dl 35 – 114 mg/dl 41 – 138 mg/dl 40 – 128 mg/dl 25 – 135 mg/dl . con solución salina al 0.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

Correlacion diagnostica Niveles aumentados en: Hiperlipemias. Clofibrato y colestipol. Desnutrición.0 Página 27 de 83 9. Nota: Los trigliceridos elevados afectan el cálculo de las LDL.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Estrógenos y anticonceptivos orales. Interferencias Elevando los valores Colestiramina. Hipertensión. Cirrosis alcohólica. 10. Riesgo de enfermedad coronaria y vascular. Diabetes mal controlada. por lo tanto cuando esto sucede las LDL no se deben reportar. Dieta rica en carbohidratos. Disminuyendo los valores Acido ascórbico. Asparraginasa. Niveles disminuidos en: Síndrome de mala absorción. Hipotiroidismo. Embarazo. Hipertiroidismo. . Enfermedad con almacenamiento de glucógeno. Infarto de miocardio. Síndrome nefrótico.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

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CREATININA

Generalidades Sus aumentos suelen ser proporcionales con respecto a los de la urea, aun cuando en general son más tardíos. Tiene particular interés diagnostico y pronóstico en los siguientes casos:  Nefropatías: Cuando en una insuficiencia renal con uremia, se observan cifras superiores a 5mg/100ml, él pronostico es fatal a corto plazo. Esto solo sucede en las fases avanzadas, ya que en las precoces, dada la facilidad de eliminación de la creatinina solo aumentan el ácido úrico y la úrea. En las nefritis agudas generalmente no hay elevación; en los casos en que existe (40%) es un cambio reversible y de escaso valor pronostico. En las nefrósis por tóxicos (Hg y Ag.) es donde se observan mayores elevaciones; en la insuficiencia cardiaca avanzada puede originarse una retención discreta o moderada de creatinina aunque no exista verdadera nefropatía.  En obstrucciones urinarias (Afecciones de próstata, vejiga, uréter, etc.) y en la anuria refleja (cálculos uretrales), se producen así mismo elevaciones marcadas de creatinina incluso 30 mg o más, igualmente reversibles con la reparación de la obstrucción.  En el gigantismo y acromegalia se observan discretas elevaciones. Cada 24 horas se transforma un 2% de creatina en creatinina. La cantidad de creatinina por unidad de masa muscular es constante y por lo tanto la degradación espontanea es constante. Como resultado de este fenómeno la concentración plasmatica de creatinina es estable y varia en menos de 10% diario en individuos normales. 1. Metodo Reacción de Jaffe Prueba fotométrica colorimértica para mediciones de punto final desproteinización.

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2. Fundamento La creatinina en solución alcalina forma un complejo coloreado rojo-naranja con ácido picrico. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la creatinina en la muestra. 3. Muestra Suero o plasma heparinizado u orina 4. Condiciones del paciente La muestra de sangre no requiere ayuno previo ya que la excreción de creatinina depende muy levemente de la alimentación y de la diuresis. Por lo menos 8 horas antes del examen no realizar esfuerzos corporales intensos. 5. Condiciones de la muestra La muestra de suero para creatinina es inestable a temperatura ambiente, refrigerada de 2 – 4 ºC por 24 horas. Congelada a –20 ºC es estable por 6 meses La creatinina puede ser determinada en cualquier líquido biológico, pero las muestras mas usadas son suero, plasma y orina. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 546 nm (500-550 nm) 1 cm 25° C frente a blanco de reactivo

7. Tecnica Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ

Solución Trabajo Estándar Suero

Mezclar y poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia a los 30 segundos y a los 90 segundos. A2-A1= Creatinina

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8. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Mujeres Hombres 0.5 – 1.0 mg/dl. 0.7 – 1.2 mg/dl.

Estos valores están influenciados por el sexo (siendo menor en la mujer), masa muscular del individuo. 9. Interferentes de la muestra y la reaccion • Interferentes positivos: Acido ascórbico, piruvato, acetona, ácido acetoacético, levulosa, glucosa, ácido úrico, proteínas, barbitúricos y antibióticos de la cefalosporina. Las temperaturas altas y los prolongados tiempos de reacción (> a 5 minutos), aumentan esta interferencia. El piruvato, acetona, ácido acético, aminoácidos y proteínas o cualquier compuesto con un grupo metilo o metileno activo, introduce errores debido a su acoplamiento con el picrato por un mecanismo análogo al de la creatinina; todos estos compuestos pueden producir sustancias coloreadas que aumentan la absorbancia en la reacción del complejo coloreado. La bilirrubina y otros productos de degradación de la Hb, causan una interferencia negativa probablemente por su oxidación en medio básico fuerte a compuestos incoloros, dando como resultado una disminución de la absorbancia, lo que se interpreta como una menor concentración de creatinina. Esta interferencia negativa se observa con frecuencia en el análisis cinético de la creatinina. 10. Correlacion diagonstica El nivel de creatinina en suero depende de 2 factores: La velocidad de producción. La velocidad de filtración. Dado que la fuente de creatinina serica es la creatina muscular y la fosfocreatina, una mayor cantidad de masa muscular produce un aumento de la creatinina serica. Los valores de creatinina exhiben una respuesta escasa o nula a las modificaciones dietéticas o a las alteraciones del equilibrio electrolitico.

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La concentración de creatinina en sangre, como la de la urea, se aumenta con el descenso de la función renal y el principal empleo de la determinación de creatinina serica esta en la evaluación de la función renal. En nefritis crónica cuando la concentración de BUN esta muy por encima de 50 mg/dl, el aumento de la creatinina es proporcional y las concentraciones de creatinina mayores a 5 mg/dl se consideran de importancia diagnostica grave. Niveles disminuidos se encuentran en la distrofia muscular. Notas La especificidad de la reacción depende del pH, temperatura y tiempo. Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse del fotómetro, sin que se alteren los resultados finales. El ácido pícrico es tóxico. Evite la inhalación, ingestión y contacto con la piel, lavar enseguida con polietilenglicol 400, con abundante agua.

el mismo procedimiento de creatinina en suero. .  El paciente debe abstenerse de ingerir carne. generalmente 24 horas aunque es posible reducirlo a 4.  Guardar refrigerada y en frasco bien tapado. inclusive la muestra del tiempo fijado para la recolección.  Para la recolección de la orina el paciente debe fijar una hora cero. La depuración de la creatinina endògena es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. porque nos da información de cómo esta la filtración glomerular. La relación entre la concentración de una sustancia en orina y sangre es el mejor índice de función renal. Valores de referencia: Hombres: 98 – 156 ml/minuto Mujeres: 95 – 160 ml/minuto Limite de dilución: 500 mg/dl 2. La muestra de orina se recoge durante un periodo determinado. 1.0 Página 32 de 83 DEPURACION DE CREATININA Generalidades Es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. 8 ó 12 horas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. té y café durante las 24 horas anteriores a la recolección. para asegurar un volumen urinario de 1 ml por minuto cuando menos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . El control cronológico de la recolección de las muestras es esencial para la realización correcta de la prueba. Descartar la orina de esa hora y a partir de entonces recoger todo el volumen de orina. Técnica para la orina: Diluir 1:100 con Solución Salina 0. Muestra Técnica para el suero.  Marcar en el frasco la hora de iniciación de la recolección. siempre y cuando los resultados se interpreten en forma comparativa y no absoluta. Condiciones del paciente La muestra de sangre debe obtenerse durante el periodo de recolección de la orina. que la concentración de dicha sustancia aislada en sangre o en orina.  Debe seguir tomando agua.9%.

3.0 Página 33 de 83  Interrumpir toda terapia diurética. la cual no puede medirse por la reacción de Jaffé. el resultado se multiplica por 50. 10 ml de orina + 490 ml de agua destilada. Condiciones de la muestra Muestra de suero libre de hemólisis fuerte y de ictericia (ya que una ligera hemólisis no afecta la determinación). además producen creatininasas que destruyen la creatinina. La concentración de creatinina debe determinarse antes de las 24 horas de recogida la muestra. La muestra de orina debe refrigerarse o agregarse un inhibidor bacteriano. Calculo Creatinina en Orina* ________________ Creatinina en suero x Volumen (ml) _________ 1140 (Constante) .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 4. ya que los gérmenes producen variación en el pH promoviéndose así la conversión de creatinina en creatina.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Tecnica Pipetear: Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ Solución Trabajo Estándar Orina diluida Dilución de la orina * Hacer una dilución de la orina de 1: 50. Metodo de determinacion Longitud de onda: 546 nm (500-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25° C Medición: frente a blanco de reactivo 5.

ejercicio fuerte durante la prueba.0 Página 34 de 83 6. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Creatinina en orina Depuración de Creatinina: Mujeres Hombres Mujeres 0. lo cual aumenta los niveles urinarios. Notas Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse proporcionalmente según las necesidades del fotómetro. Correlacion diagnostica En enfermedades renales avanzadas la excreción urinaria de creatinina excede a la velocidad de filtración glomerular a causa de la secreción tubular. Interferencias Los mismos de la guía anterior.8 – 1. la hidratación inadecuada del paciente. que seria una fuente de error negativa.4 mg/dl.2 mg/dl. 16 – 22 mg/Kg peso/24 h 85 – 125 ml/min. 1900 mg/24 h. 8. 21 – 26 mg/Kg peso/24 h Hombres 7. sin que se alteren los resultados finales. 0. . por lo que el verdadero valor de filtración glomerular esta por debajo de la depuración de la creatinina.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.9 – 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 75 – 115 ml/min. Entre las causas de error están: mal cronometrado o recogida inadecuada de la muestra de orina.

La depuración de creatinina disminuye en personas de edad. disminuciones se observan en pielonefritis crónica e hipertensión.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.A. la depuración es menor que la filtración.73/A para obtener el valor real de la depuración en estos pacientes. . y crónica. multiplicando el resultado por 1. Si la depuración plasmatica de una sustancia es mayor que la filtración glomerular debe interpretarse como que esta sustancia es secretada por el túbulo y si por el contrario.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . en niños y personas de baja estatura por esto se hace necesario realizar la corrección del valor obtenido.N.0 Página 35 de 83 El filtrado glomerular disminuye notablemente en G. En las personas obesas la depuración esta alterada por lo tanto se hace necesario la corrección. ligeras La filtración glomerular normal es en un adulto de 125 ml/min. podemos concluir que esta sustancia es reabsorbida.

La glucosa sanguínea proviene de dos fuentes: La más importante es la absorción intestinal de glucosa alimenticia que normalmente puede llevar los valores sanguíneos de glucosa hasta 138 -140 mg/dl. Glucogenesis: Formación de glucógeno (hígado. 2. Glucogenolisis: Movimiento de glucógeno almacenado para producir glucosa-6fosfato.0 Página 36 de 83 GLICEMIA Generalidades Glucemia o glicemia: Este término se refiere a la presencia de la glucosa en sangre. músculo en mayor proporción y también leucocitos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Metodo con desproteinización.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 1. Gluconeogenesis: Formación de glucosa a partir de otro sustrato diferente al glucógeno ejemplo: aminoácidos. GOD-PAP. en el tejido nervioso en muy poca cantidad). . El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de la peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo-violeta usando la quinonemina como indicador. La liberación de glucosa por el hepatocito mediante un mecanismo que se acelera al disminuir la glicemia sanguínea. Glucolisis: Llevar la glucosa-6-fosfato hasta piruvato para producir acétyl Co A (ciclo de krebs). Fundamento La glucosa de determina despúes de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. Metodo Prueba enzimática colorimétrica por glucosa.

Umbral renal (T. Tecnica Pipetear: BLANCO PATRON MUESTRA RVO. suero o plasma 4. incube a temperatura de 20 . Condiciones de la muestra La separación del suero debe hacerse dentro de los 20 o 30 minutos de la extracción. de hidratos de carbono. Condiciones del paciente No se requiere preparación dietética especial. Muestra Sangre total. No realizar ejercicio antes o durante la prueba. 25 ó 37 °C frente a blanco de reactivo Mezclar.M. No tomar café.25°C por 10 minutos ó 5 minutos a 37°C. a menos que el paciente consuma diariamente menos de 150grs. COLOR Blanco ---------1000λ Patron ---10λ ---1000λ Muestra ------10λ 1000λ 500 nm 546 nm 1 cm 20. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 6. La estabilidad de la muestra es de 8 horas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. En el momento de la toma de la muestra el paciente debe estar sentado erguido.0 Página 37 de 83 3. .) 160-180 mg/dl. Leer la absorbancia de la muestra y el patrón contra el blanco de reactivo.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . No presenta glucosuria positiva antes de dar la carga de glucosa. Ayuno de diez a doce horas. ni haber fumado antes o durante la prueba. 5.

O. Nota El tiempo máximo para ingerir la carga de glucosa oral es de 5 minutos. Para la P. Adulto < 115 < 140 Niño < 130 < 140 Diabetes mellitus Adulto >= 140 >= 200 Niño >= 140 >= 200 Intol.) tiene como finalidad la de descartar o de diagnósticar una diabetes mellitus tipo 2 (D. que pueden no entrañar los riesgos asociados a la DM.G.).0 Página 38 de 83 8.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . por ejemplo en aquellos paciente que presentar trastornos clínicos . Utilizar métodos de laboratorio previamente estandarizados y sueros control Diagnostico de diabetes mellitus El principal objetivo de diagnóstico es la indentificación de pacientes con riesgo de hiperglicemia sintomática de cetoacidosis diabetica (CAD) o coma hiperosmolarno no cetónico (CHNC) o de complicaciones clínicas tardías. 100 gr. En los pacientes asintomáticos el diagnóstico de DM se establece cuando se cumplen los criterios diagnósticos de los valores de glicemia recomendado por diferentes asociaciones o grupos de estudio de diabetes asï: National diabetes data group Basal >= a 140 mg/dl en dos ocasiones consecutivas sea en adultos o en niños.75 gr de dextrosa por kilogra la prueba tamiz consiste en administrar la carga de dextrosa y tomar una muestra después de una hora post-ingesta. de dextrosa en 300 ml.T.T. cuando se sospecha una diabetes a pesar de la ausencia de hiperglicemia en ayunas o sistomática.O. descartando aquellos pacientes que presentan fluctuaciones en el límite superior de la concetracion plásmatica normal.139 140 . a partir de los cuales se empezara tomar los tiempos para la toma de las muestras asi: Gestantes 1-2 y 3 horas.199 Niño 130 – 139 140 – 199 9.T.G. La prueba de tolerancia oral a la glucosa (P.de agua.O. no Gestantes 2 horas postcarga. A la glucosa Adulto 115 .tipo 2. Valores de referencia Criterios de diagnóstico para DM por PTOG Normal Ayunas P. Carga de glucosa Niños: 1.G.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.M.

G. renales o del S.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . ac. .N.O.T. o puede también revertir a la normalidad. La P. *Criterios diagnosticos reportados por el comite de expertos en el diagnostico y clasificacion de diabetes mellitus.G. polidipsia y pérdida de peso.G.0 Página 39 de 83 que pudieran deberse a una DM no diagnósticada ejemplo: polineuropatía. Valores normales Después de un ayuno de 10 a 12 horas los valores de glicemia deben estar ubicados entre 70-110 mg/dl (según el método utilizado).O. No se debe realizar la P. vómito. enfermedades endocrinas que deterioren la tolerancia a la glucosa o enfermedades hepáticas. Los valores de glicemia posprandial pueden ir hasta 160 mg/dl. Los criterios diagnósticos por P.T. Ayunas se define como la no ingesta calórica al menos por 8 horas. sudoración.G. En la P. Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl. tanto en niños como en adultos. desmayos o palidéz durante la realización de la prueba. solo son válidos para individuos sanos que no presentan infecciones. retinopatía y nefropatia. etc.G.. Adultos: dos horas y en cualquier otro momento de la P.O.. Nicotinico.. (Guillermo Farias quimica clínica. a los pacientes que presenten naúseas.T.T. debe repetirse para corroborar el diagnóstico de DM..ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. por lo menos dos valores deben ser > = 200 mg/dl.T. décima edición). acompañados de una glicemia a cualquier hora mayor o igual a 200 mg/dl.O. 2. enfermedades cardiovasculares o vasculares Cerebrales agudas.. tampoco pacientes tratados con fármacos que alteren la prueba de tolerancia oral a la glucosa (tiazidas. Los pacientes con intolerencia a la glucosa pueden presentar mayor riesgo de hiperglicemia en ayunas o sintomatica.(dado el mayor riesgo de un exceso de diagnóstico de DM).O.G. sintomas de diabetes.C.T. anticonceptivos orales que contengan estrógenos sintéticos). pero en muchos casos la intolerencia a la glucosa no progresa. glucocorticoides. Niños: asintomaticos deben ser mas estricto en diagnóstico por P. Los sintomas clásicos incluyen poliuria.O.

Para ello se utiliza 75 gramos de glucosa anhidra disueltos en 300 cc de agua. cada uno de ellos debe ser confirmado con una prueba posterior. Dos horas poscarga durante una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) mayor o igual a 200 mg/dl. por lo cual asignar un valor diagnostico es difícil. la razón para ello es la perdida de la primera fase de secreción de insulina a partir de esta cifra. debe ser confirmado subsecuentemente por una glicemia en ayunas ≥ a 126 mg/dl. estos criterios deben ser confirmados por otra prueba realizada un día diferente. las categorias. * Hiperglicemia en ayunas: Entre 110 mg/dl y 126 mg/dl.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . por el momento solo continua como prueba para el control y no para el diagnostico. las pruebas utilizadas para ella no estan estandarizadas.0 Página 40 de 83 3. La prueba de tolerancia utilizaba valores a la hora. En la ausencia de hiperglicemia inequívoca con descompensación aguda. son: * Glucemia normal: Menor de 140 mg/dl. hora y media y a las dos horas. una glicemia 2 horas postcarga ≥ a 200 mg/dl. * Disminución de la tolerancia a la glucosa: Entre 140 mg/dl y 200 mg/dl. síntomas con una glicemia al azar > de 200 mg/dl. Se han establecido tres criterios para el diagnostico de diabetes. se han establecido en 110 mg/dl. Diagnostico de hipoglicemia Depende si el paciente presenta manifestaciones del sistema nervioso central (S. . si bien los niveles de hemoglobina glicada presentan una distribución similar a la glicemia. 2 horas poscarga. Por ejemplo. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 200 mg/dl.N. Los valores normales para la glicemia en ayunas.C) inexplicadas o sintomas adrenergicos inexplicables.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Las categorias para la glicemia en ayunas quedan establecidas de esta foma: * Glicemia normal: Menor a 110 mg/dl. o una glicemia al azar ≥ a 200 mg/dl. De acuerdo a los nuevos criterios solo se tiene en cuenta los valores a las 2 horas. 2 horas poscarga. El comité no recomienda la utilización de los niveles de hemoglobina glicada para el diagnostico de la diabetes. Para la prueba de tolerancia a la glucosa. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 126 mg/dl.

Valores de glicemia > 180 mg/dl en más de una oportunidad son diagnósticos de D. La mejoría inmediata de los sintomas del S. El diagnóstico debe completarse con valoraciones de insulina proinsulina y peptido C y también la busqueda de drogas que puedan estar ocasionando la hipoglicemia (insulina alcohol. si se obtiene un valor anormalmente bajo. menor de 45mg/dl en la mujer.C. confirman el diagnóstico de hipoglicemia de ayuno o inducida por fármacos.N.) Criterios diagnosticos para diabetes gestacional Ayunas >= 105 mg/dl 1 hora >= 190 mg/dl 2 horas >= 165 mg/dl 3 horas >= 145 mg/dl Normal: Hasta 135 mg/dl. se perfunde glucosa de inmediato. de 3 horas con una carga de dextrosa de 100 gramos. (Se pueden encontrar valores menores de los expuestos en un ayuno de 72 horas).EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ ..180 mg/dl sugieren la realización de una P. y en lactante y niños menor de 40mg/dl . Por lo general una glucosa plásmatica anormalmente baja se define menor de 50mg/dl en el varón. Anormales: Valores de glicemia entre 135 .O.0 Página 41 de 83 En ambos casos para el diagnóstico se requiere valores plásmaticos anormalmente bajos.M. propanolol etc.G .G. sulfas que producen un 50% de las hipoglicemias. Otros fármacos como salicilatos. tras un aumento de glucosa. El paciente con deterioro de la conciencia o crisis convulsiva debe efectuarse la glucosa con tirilla y gota de sangre obtenida al colocar un aguja para iniciar la perfusión de líquido. los cuales se corrigen al aumentar la glucosa sanguínea.T.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

Sueros lipémicos causan turbidez en la solución final. orina diluida 1:1000 con agua destilada. . Metodo Metodo completamente enzimático para determinación cinética de urea. el paciente debe llevar una dieta pobre en proteínas y 12 horas de ayuno total. La prueba ha sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima límite. GLDH. Fundamento La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir amonio y dióxido de carbono. Muestra Suero o plasma.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El amonio producido en esta reacción se combina con 2oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato-deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. 4. 5. Condiciones de la muestra Por acción bacteriana se puede perder la urea. Ya que la prueba cinética es muy rápida. 2.0 Página 42 de 83 UREA 1. 3. por lo tanto debe analizarse pocas horas despúes de recogida o conservarse en refrigeración. La disminución de la absorbancia es proporcional a la concentración de urea dentro de los intervalos de tiempo dados.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . ha sido diseñada para ser realizada preferiblemente en analizadores. Condiciones del paciente 24 horas antes de tomar la muestra.

0 Página 43 de 83 6. Valores de referencia Suero 10-55 mg/dl 1. 365 nm 1 cm 25°C. repetir el ensayo y multiplicar el resultado por dos. El patrón.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Tecnica Pipetear Blanco ------1ml Patrón ---10 ul 1ml Muestra 10 ul ---1ml Muestra Patrón Reactivo Mezcle. 3 mmo1/1) de urea para suero o plasma y 200 g/L (330 mmol/L) para la orina. Metodo de determinación Logitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 340 nm. 1 mmo1/1 Orina 20-35 mg/24 horas 333-583 mmo1/24 horas El método es lineal hasta 200 mg/dl (33. calcule la diferencia 8. 334 nm. 7-9. . 30°C ó 37°C Lectura contra blanco de reactivo 7. la muestra y la solución 1 deben pipetear en el fondo de los tubos de ensayo y mezclarse cuidadosamente. Para concentraciones más altas mezclar un volumen de la muestra con un volumen igual de agua destilada. lea la absorbancia de la muestra y el estandar despúes de 30 segundos y lea nuevamente al minuto.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . . 10. Los valores de la urea pueden disminuirse en alteraciones hereditarias de la síntesis de urea o cuando existe una ingesta inadecuada de proteínas. triglicéridos hasta 2000 mg/dl. bilirrubina hasta 60 mg/dl. Determinacion de nitrogeno ureico El nitrogeno ureico se saca de dividir el valor de la urea por un factor que es 2. deterioro mental y confusión. Interferencias La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. el nitrógeno no proteico y la creatinina están elevados y los niveles sanguíneos de estas sustancias se emplean como índice de la gravedad de la uremia. Gota Crónica y en todas aquellas entidades donde el volumen del filtrado glomerular se ha reducido una quinta parte de lo normal. sacudidas musculares. Cuando existe uremia los síntomas incluyen letargo. náusea y vómito. La anemia es un carácter prominente en la uremia crónica porque está deprimida la eritropoyesis. anorexia. Correlacion diagnostica La urea se encuentra aumentada por encima de los valores normales en caso de insuficiencia renal u obstrucción de vías urinarias.0 Página 44 de 83 9.14. El nitrógeno uréico de la sangre. nefritis aguada. o una enfermedad hepática grave. TBC renal. glucosa hasta 500 mg/dl y ácido ascórbico hasta 30 mg/dl. convulsiones y coma.

cobre. interviene en el equilibrio ácido-básico. Evitar todo esfuerzo corporal intenso por lo menos 8 horas antes de la toma de la muestra. Condiciones del paciente La muestra ha de tomarse con 8 horas de ayuno. vitaminas liposolubles.5 g/dl. Fundamento Los iones cúpricos con las proteínas y peptidas en solución alcalina forman un complejo púrpura. . 4. La priemera regula la presión osmótica coloidal de la sangre. Los anticoagulantes quelantes interfieren. Metodo Prueba colorimétrica fotométrica para proteínas totales (Biuret) 2. Muestras. transporta los lipidos originando los compuesos que se denominan. El uso de torniquete no ha exceder los 30 segundos. de donde se origianan el nombre de inmunoglobulinas. 3. Estable 8 dias a 2-8 C. El ejercicio causa aumento de la concentración de proteínas en un 6 a 12%. Suero y plasma heparinizado. aporta la nutricion celular. lipo-proteínas y sirve de medio de transporte a multitud de elemntos como esteroides. La cifra normal de las proteinas totales del suero está comprendida entre 6 y 8 mg/ ml encontrándose de 1 gramo menos en los pacientes que guardan cama por mas de dos semanas las proteínas totales están integradas por la fracción albúmina y bla fraccion globulina. La fracción globulina se sintetiza especialmente en las células plasmáticas y tienen como misión principal fabricar anticuerpos. 1. La absorbancia de este complejo es proporcional a la concentración de proteínas en la muestra. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero en aproximadamente 0.PROTEINAS TOTALES Generalidades. hierro.

lea la absorbancia de la muestra y estándar despúes de 30 segundos y lea exactamente al minuto despúes calcule la diferencia y multiplique por 80.0 ml Muestra --------10 ul 1. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Agua destilada Patrón proteina Muestra Reactivo 10 ul ------1.0 ml Patrón ----10 ul ----1. 334 nm ó 365 nm 1 cm 25°C.2 g/L).0 ml 340 nm. . La presencia de dextrano (utilizado como expansor del plasma) ocasiona una floculación de la mezcla de reacción que puede separarse por centrifugación sin que afecte los resultados. Interferentes La hemoglobina (0.5. La bilirrubina (15 mg/dl) La lipemia moderada no interfiere. 30°C ó 37°C frente a blanco de reactivo Mezcle. ABS Muestra ____________ X 80= mg/dL proteína ABS Patrón 7. Valores de referencia Suero: 65 – 80 g/L Plasma: 68 –83 g/L 8. Metodo de determincion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 6.

Se obtienen falsas hiperproteinemias. diarreas profusas. vómitos. Afecciones hépaticas crónicas. Anemia persistente.5 g/ml corresponden a la albúmina y entre 1. De la cifra total que integran las proteínas. tambien puede estar disminuida en: Nefrosis lipoidea. sudoracion excesiva. Las cifras bajas generalmene corresponden a malnutricion. Neoplasias. quemaduras. fistulas digestivas etc. . entre 3.9.5 y 3g/ml a la globulina. Corelacion clinicopatologica Cuando hay hemoconcentración por shock.5 y 5. Edemas carenciales.

PROTEINURIA Generalidades. Tambien conocida como albúminuria. La cantidad no permite valorar la gravedad de la afección. cantidad no detectable por los sistemas habituales para dosificarla. Recoger la orina. 2. 3. La proteina presente en la muestra reacciona en medio ácido con el complejo Rojo rojo de pirogalol y el molibdato originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectofotometria. Metodo Metodo colorimétrico cuantitativo para determinación de proteínas en orina y líquido cefalorraquideo. 4. pero su dosificacion periódoca si valora el progreso o regresión de la lesión. . reabsorción tubular disminuida. Es el indicador más importante de enfermedad renal complementado con el sedimento microscópico. Fundamento. 1. Normalmente es de 40 a 80 mg con límite máximo. Tiene como mecanismo el aumento de la permeabilidad de las membranas glomerulares. Orina de 24 horas. Condiciones de la muestra Se debe recoger orina de 24 horas u orina ocasional. Estable 8 dias.1 y Alfa –2. medir el volumen y conservarla a 2-8 C. orina ocasional ó líquido cefalorraquideo. 150/24 horas. es la cantidad de proteína excretada por la orina. Muestras. En caso de orinas muy turbias es conveniente centrifugarlas. aumento de la filtración glomerular o alteraciónes en la composicion proteíca que la hace filtrar más facilmente. La albúmina constituye entre un 60 y un 90 % de la prteína excretada y el resto está por globulinas principalmente globulina Alfa.

600 nm ó 620 nm 1 cm 37 °C frente a blanco de reactivo Patron Muestra reactivo Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37 °C leer la absorbancia contra el blanco Calculos: Proteinas de 24 horas: Muestra Patron x volumen x 100 Muestra Patron x 100 Proteina en orina ocasional: Proteínas en líquido cefalorraquideo: Muestra Patron x 100 7.5. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medicion: 6. Valores de referencia Orina de 24 horas 30 – 140 mg/24 h (hasta 160mg/24h en mujeres embarazadas) Orina ocasional 25 mg/dl Líquido cefalorraquideo 15 – 45 mg/dl (en adultos de más de 60 años se extiende a 60 mg/dl) 8. Interferencias La hemolisis puede ser causa de resultados falsamente aumentados tanto en orina como en LCR. Los conservantes para orina como ácido clorhídrico. ácido benzoíco o timol pueden causar resultados falsamente disminuidos. Algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la reacción. .. Tecnica Blanco ------1 ml patron 20 ul ---1 ml muestra ---20 ul 1 ml 580 nm.

la fiebre. como en la disfunción glomerular. . el embarazo. El LCR es útil para evaluar la permeabilidad de la barrera hematoencefálica en muchas enfermedades inflamatorias o infecciosas del SNC. Correlacion diagnostica Hay condiciones fisiológicas o benignas deonde se puede observar un aumento en la excresión urinaria de proteínas como el ejercicio violento. como ocurre en la meningitis bacteriana. La determinación de proteínas es importante en la detección de patologías renales. viral o de otros origenes. hipotermia.9.

En los eritrocitos se encuentra la GOT soluble y en los leucocitos y reticulocitos están los dos tipos enzimáticos. y en eritrocitos pero en bajas concentraciones. orina. LCR. etc.a. Existen dos tipos de transaminasas. que la componen. en tanto que la GOT es una enzima binocular. corazón. la GPT es una enzima exclusivamente citoplasmática. la GPT se puede encontrar en plasma. pH óptimo de acción. que esta constituida por dos isoenzimas. La GPT es un enzima que también se encuentra en riñón. una citoplasmática y otra mitocondrial. . corazón.TRANSAMINASAS Generalidades El hígado contiene un gran numero de enzimas. propiedades cinéticas e inmunológicas y a. es decir. las transaminasas (GOT ó ASAT Y GPT ó ALAT) y la CGT (gamaglutamiltranspeptidasa o γGT). de todas ellas las de mayor importancia clínica son la fosfatasa alcalina (Pa). músculo esquelético pero en mayor concentración en el Hígado. estas enzimas están localizadas particularmente en el hígado. la transaminasa glutamicopirúvica ó Alaninoaminotranferasa y la transaminasa glutamicooxaloacética ó Aspartatoaminotransferasa . para la síntesis de aminoácidos distintos a los originales. se van a diferenciar por su movilidad elctroforética. Las transaminasas son enzimas que catalizan las reacciones de transferencia de grupos aminos de un aminoácido a un cetoácido.

5. Fundamento Metodo cinético para la determinación de la actividad de ASAT o GOT de acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC. 30 ó 37°C frente a aire . 340 nm. Sin activación por piridoxalfosfato.ASPARTATO AMINOTRASFERASA (GOT) 1. 334 nm 1 cm 25. 3. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Metodo Prueba liquiUV 2. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. 4. Muestra Suero o plama con heparina o EDTA. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado.

10. Correlacion diagnostica Los valores aumentados de esta enzima suceden cuando hay muerte en las células del miocardio (infarto al miocardio). En casos de baja absorbancia es debido a que por ser una reacción enzimática se consume el NADH en la incubación. Linealidad En caso de sobrepasar la linealidad diluir 0. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. no se debe usar como anticoagulante. Valores de referencia 25 ºC 18 U/L 15 U/L 30 ºC 25 U/L 21 U/L 37 ºC 37 U/L 31 U/L Hombres hasta Mujeres hasta 9. El oxalato inhibe la actividad de la enzima.7. en estos casos también se debe diluir.9ml de solución salina y multiplicar por 10. el grado del aumento es proporcional a la . Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos 8. en las próximas 6-12h después de la oclusión de una arteria coronaria.1ml mas 0.

los valores máximos se ven en al cabo de 48h y recupera sus valores normales de 3-5 días. Las cifras de GOT también se ven aumentadas en lesiones agudas de las células hepáticas como en las hepatitis virales y lesiones por intoxicación con fármacos o tóxicos como tetracloruro de carbono. Los aumentos moderados se observan en las etapas finales de la cirrosis. osea que una lesión grande puede hacer elevar los valores >200 unidades. ictericias obstructivas.magnitud del daño. .

Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. Los métodos para la medición de GPT son muy semejantes a los de la GOT. La transformación simultánea de NADH en NAD va seguida por una disminución de la absorbancia a 340nm. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 340 nm. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparina. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. 334 nm 1 cm 25. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6.ALANINA AMINOTRANSFERASA (GPT) 1. Metodo Prueba liquiUV para alanina aminotransferasa. 2. 3. 30 ó 37°C frente a aire . 4. el ácido pirúvico producido por la enzima a partir de alanina y ácido alfacetoglutarato se transforma en ácido láctico por efecto de la deshidrogenasa láctica. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 5. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. Fundamento Es un método cinético para la determinación de la actividad de la GPT de acuerdo con las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC sin activación por piridoxalfosfato.

Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. 9.095% evitar contacto con mucosas y piel. Valores de referencia 25ºC 5-23U/L 5-19U/L 30ºC 7-32U/L 7-26U/L 37ºC 9-43U/L 9-36U/L Hombres hasta Mujeres hasta Precauciones El Buffer/sustrato esta compuesto con sodio de azida 0. no se debe usar como anticoagulante.7. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos Linealidad Hasta 154mmol/L o 9gm/L (según el Kit utilizado). Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. . Si sobrepasa la linealidad diluir 1 + 10 y multiplicar por 11 8.

pero esto se debe posiblemente al daño del hepatocito secundario por alteración en la circulación. .10. CHE y GPT que son hepatoespecificas. un buen lavado del material y no dejar de lado el uso de los controles. El análisis de estas dos enzimas es de útil ayuda para detectar daño a nivel del hígado y determinar una hepatitis ya sea viral o por tóxicos como drogas. los valores elevados de estas tres enzimas son característicos de las hepatitis agudas y enfermedades necrotizantes del hígado en contraste con la elevación de la fosfatasa alcalina y disminución de GOT y GPT que nos da indicios de una ictericia obstructiva. por esta razón se considera más específica la GPT en patologías del hígado. Los niveles sericos de GPT se encuentran considerablemente aumentados en las lesiones agudas de las células hepáticas. lo que nos puede ayudar a diagnosticar un infarto del miocardio teniendo muy en cuenta no llegar a confundirse con una hepatitis viral ya que en estas también aumentan. si la insuficiencia es aguda se pueden elevar los valores de 1000 a varios miles U/L. en colestasis intra-hepática los niveles de GOT y GPT son análogos a los de la ictericia post-hepática. Correlacion diagnostica Las cifras de GPT pueden estar también ligeramente aumentadas en el infarto al miocardio. se debe analizar todos los datos clínicos posibles para hacer un buen diagnostico y reconfirmar con enzimas como γGT. a veces es mayor el aumento que la de la GOT. En la ictericia hepática (hepatocelular) y la post-hepática se utilizan la GOT y GPT para diferenciarlas. GOT. En la post-hepáptica es difícil encontrar valores superiores a 200U/L. Los valores de La GPT. Nota Gran parte del éxito de obtener buenos resultados en este tipo de determinaciones enzimáticas esta en el correcto manejo del tiempo a la hora de la lectura (pues las enzimas actuaran hasta consumir el substrato). en contraste con la cirrosis hepática que se elevan poco las GOT y disminuyen las GPT. un buen trabajo organizado. La determinación de la GOT y GPT se encuentran aumentadas en las insuficiencias cardiacas y como consecuencia del estasis Hepático. En la hepatitis viral se observa una elevación de ambas enzimas. y la determinación de la fosfatasa alcalina son los de mayor utilidad para el diagnóstico de las hepatitis.

intestino. heces. cerebro. 2-cloro-4-nitrofenilmaltotriósido. trompas de falopio. 3. La α . pulmón. leche. 2. glucógeno y sus productos parcialmente hidrolizados.Amilasa suele estar presente en el páncreas ( 200 mg/kg ) glándulas salivales. orina No hay pérdida de la actividad en 5 días a 4°C. 1. La liberación de 2-cloro-4-nitrofenol del substrato y el resultante incremento de absorbancia por minuto es directamente proporcional a la actividad de la amilasa en la muestra. La α . sangre. Este substrato reacciona directamente con la amilasa y no requiere de enzimas de restricción. riñón. amilopeptina. tejido adiposo. . orina.AMILASA GENERALIDADES Las amilasas son enzimas contenidas en la secreción pancreática las cuales catalizan la hidrólisis de los polisacáridos tales como : El almidón. músculo. Metodo Prueba colorimétrica para amilasa alfa-1.4-glucan-4-glucanohidrolasa. hígado.amilasa es una endoenzima que se denominaasí porque todos los productos de la hidrólisis tienen la configuración (α) en el C1 de la unidad de la glucosa reductora. Fundamento La prueba colorimétrica utiliza un nuevo substrato. Actua sobre las uniones 1-4 de las cadenas rectas del almidón y también sobre las uniones 1-6 glucosídicas de las cadenas ramificadas como las de amilopeptina y glicógeno. bazo y corazón. Muestra Suero o plasma heparinizado. semen.

Evitar la utilización del torniquete por más de 30 segundos. Valores de referencia Temperatura Suero. 6. 5. Se recomienda el uso de pipetas automáticas para la medición de las soluciones para evitar la contaminación de las mezclas con saliva. Leer la absorbancia a los 1. Si la determinación excede el valor diluir la muestra con 500 ul de solución salina y 100 ul de muestra y multiplicar por 6. plasma Orina espontánea Orina 24 horas 25°C 120 U/l 600 U/l 450 U/24h 37°C 220 U/l 1000 U/l 900 U/24h IFCC 28-100 U/l <460 U/l <410 U/l . Condiciones de la muestra Puede utilizarse plasma heparinizado. 400 nm ó 410 nm 1 cm 25 °C ó 37°C frente a agua destilada Mezclar bien incubar por un minuto a la temperatura deseada. 8. oxalato o EDTA porque inhiben la actividad de la enzima. Tecnica Temperatura Muestra reactivo factor 25°C 20 ul 1000 ul 9864 37°C 10 ul 1000 ul 24820 Hg 405 nm. Metodo de determinación Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7.4. No utilizar citrato. Condiciones del paciente No requiere ayuno. 2 y 3 minutos Y multiplicar por el factor correspondiente.

9. se libera una gran cantidad de amilasay se produce una hiperamilasemia. Corresponden a episodios agudos y sólo duran 3 días. aumenta los niveles de amilasa. La úlcera péptica perforada. Correlacion diagnostica Los nivele elevados en el suero son siempre transitorios. obteniendo niveles normales al 3 día. pero en la orina persisten hasta por 10 días. Cuando hay ruptura del embarazo ectópico. Interferencias La aplicación de morfina produce contracción del esfinter de Oddi y eleva los niveles hasta 900 unidades. dato útil para su diagnóstico. En la pancreatitis aguda. . 10. sus niveles aumentan en las primeras 24 a 36 horas. dato que se debe tener en cuenta cuando se dosifica en pacientes con posible pancreatitis aguda y han recibido este analgésico.

AMILASURIA En condiciones normales se elimina una cantidad de amilasa por la orina. Este factor hay que tenerlo en cuenta y valorar el tiempo que ha durado la recolección. comprendida entre 35 y 250 unidades. con cifras estremas en las 24 horas de 835 a 6150 unidades. . La dosificación urinaria a veces es más ventajosa que la hemática pues el suero solo se eleva durante unas 72 horas y en la orina persiste por varios días. insuficiencia renal y pancreatitis crónica. También se eleva en la parotiditis y litiasis parotidea y marcada disminución en su eliminación en el carcinoma pancreático.

Muestra Suero o plasma Es estable al menos por 7 días a una temperatura de 2 a 8 °C. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 405 nm 1 cm 37°C frente a vacio . Debe permanecer en reposos 15 minutos antes de la toma de la muestra. 4. Metodo Metodo espectofotómetro con tampon AMP 2. Condiciones de la muestra Puede trabajarse con plasma. 5. La utilización de EDTA inhibe la reacción. El mejor anticoagulante es la heparina. El ejercicio puede alterar el resultado. Fundamento La fosfatasa alcalina cataliza en medio alcalino la transferencia del grupó fosfato del 4-nitrofenilfosfato al 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP). 3. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de formación del 4-nitrofenol. medido a 405 nm. pero este no debe contener floruros ni oxalatos.FOSFATASA ALCALINA 1. los valores obtenidos en plasma y suero siempre son iguales 6. liberando 4-nitrofenol. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno minimo de 8 horas.

sus niveles aumentan.7. Correlacion diagnostica Se origina principalmete en los huesos y en el higado. Cuando hay deficiencia de vitamina D. Las muestras hemolizadas interfieren por la fosfatasa alcalina eritrocitaria. por eso cuando el crecimiento disminuye sus niveles bajan a cifras similares al del adulto. 8. raquitismo. También aumentan en la ictericia. 10. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 20 ul Leer la absorbancia inicial y efectuar lecturas cada minuto por 3 minutos y promediar los resultados y multiplicar por el factor 2764. enfermedad de Paget. Interferencias Los anticoagulantes como el floruro. fracturas en consoliación y en metastasis óseas. EDTA. . por lo tnto esta bien establecida su relación con la formación osea. oxalato y citrato interfieren en la reacción. Valores de referencia Adultos: 26 – 117 U/l 9. en el abseso hepático. hiperparatiroidismo.

forma un complejo de color azul con arsenazo III (ácido 1. Muestra Suero o plasma 4. Fundamento El calcio en medio neutro. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 650 nm 1 cm 37°C frente a agua destilada .7-naftalenen-bis (azo)-dibenzenarsónico). Condiciones de la muestra Debe ser separado lo antes posible de los hematíes. 5. Condiciones del paciente No requiere ayuno.CALCIO 1. No usar oxalato o EDTA como anticoagulante ya que interfieren en la determinación de calcio. 3.8-dihidroxi-3. Metodo Determinación cuantitativa para calcio 2. Antes de la recogida adicionar al contenedor 10 ml de ácido nítrico al 50% Diluir la orina ½ en agua destilada para el análisis y multiplicar por dos. 6. La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de calcio existente en la muestra. Orina efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio.6-disulfo-2.

sarcosidosis.2 mmol/l 50 – 300 mg/24h 80 –160 mg/24h . Trazas de los mismos.6 mmol/l 2.5 mg/dl 10 . La mayoria de los detergentes destinados al uso del laboratorio contienen agentes quelantes. mal nutrición o mala absorción. El color es estable como minimo una hora.5 – 3 mmol/l 2. el 99% se halla en los huesos. Una disminución de los niveles de albúmina causa una disminución del calcio en suero. si se utiliza material de vidrio debera lavarse con ácido nítrico diluido con agua destilada. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. 8. invalidan la determinación. deficit de vitamina D. pseudohipoparatiroidismo. osteoporosis. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul Estándar Muestra reactivo Mezclar e incubar 2 minutos. intoxicación por vitamina D.7.5 – 10. 10. Niveles bajos de calcio pueden atribuirse ahipoparatiroidismo. 8.1 –2. Correlacion diagnostica El calcio es el mineral más abundante e importante del cuerpo humano. Interferencias Se recomienda utilizar material de plástico. aumento de la retención renal.12 mg/dl 8.0 – 3.0 – 13 mg/dl 2. La mayoria de las causas de hipercalcemia son debidas a enfermedades oncológicas. Valores de referencia Suero o plasma: Adultos Niños Recién nacidos Orina: Adultos Niños 9. tirotoxicosis e hiperparatiroidismo.

La intensidad del color es proporcional a la concentración de magnesio.MAGNESIO 1. Estándar Muestra reactivo .4 con HCL. Condiciones del paciente No requiere ayuno 5. Fundamento El magnesio forma un complejo de color púrpura al reaccionar con la calmagita en medio alcalino. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul 520 nm 1 cm 25 °C frente a blanco de reactivo. 3. Diluida 1:10 con agua destilada acidificada hasta 3. Condiciones de la muestra Utilizar material limpio 6. 2. Muestra Suero o plasma heparinizado Orina. 4. Metodo Metodo colorimétrico – calmagita.

tratamiento insulínico del coma diabetico. hipertiroidismo.Mezclar e incubar por 5 minutos La coloración es estable por 30 minutos. tratamientos con diuréticos. pielonefritis entre otros. Correlacion diagnostica La hipomagnesemia implica manifestaciones similares a la hipocalcemia. 5 mg/dl 9. . Los niveles altos implican una depresión del sistema nervioso central y la excitabilidad neuromuscular. 8. Valores de referencia 1. perdida anormal de líquidos. glomerulonefritis. Niveles bajos son propios de trastornos gastrointestinales con malaabsorción.6 – 2.

.. La absorbancia de este complejo leido en Uvcercano es directamente proporcional a la concentración de fósforo.25°C frente a blanco de reactivo Blanco Estándar muestra reactivo . 6. Muestra Suero. Los anticoagulantes pueden causar resultados falsamente bajos. Condiciones del paciente No requiere ayuno.FOSFORO 1. Condiciones de la muestra No se debe usar plasma. 3. Fundamento El fosforo reacciona con molibdato en un medio fuertemente ácido para la formación de un complejo. Tecnica blanco ---------1000 ul estándar ---10 ul ---1000 ul muestra ------10 ul 1000 ul 340 nm. 4. Metodo Análisis fotométrico UV para la determinación de fosforo. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 2. 5. Hg 334 nm 1 cm 20.

0 mg/dl 9.0 – 7. la acromegalia. infecciones de flora cocoide gram negativa en su forma septicémica y en la hipervitaminosis D. . Sueros lipémicos o hemolízados no deben ser usados. 8. La contaminación del material de vidrio es la mayor fuente de error en este análisis. Correlacion diagnostica Esta regulado por la hormona paratiroidea. Por lo tanto se recomienda material de plástico. Los valores elevados se encuentran en la insuficiencia renal crónica. Valores de referencia Adultos Niños: 2. fracturas evolutivas y la enfermedad de Addison. hipoparatiroidismo. Leer la absorbancia de la muestra frente a blanco de reactivo antes de 1 hora.5 – 5. Interferencias Muestras ictéricas y lipémicas requieren un blanco de muestra.Mezclar e incubar por lo menos 1 minuto a temperatura ambiente. osteomalacia. 10.0 mg/dl 4. la cual controla la excreción urinaria y su movilización osea por medio de la vitamina D. Las valores bajos se encuentran en el raquitismo.

Fundamento La cratina quinasa (CK) cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina. Método estándar modificado de acuerdo con las recomendaciones del cómite ECCLS. obteniéndose creatina y ATP. La concentración catalítica se determina. Normalmente los músculos estriados tienen una alta concentración. En el infarto de miocardio sus unidades se elevan entre 3 y 6 horas. Metodo Prueba líquida UV activada por NAC creatin kinasa. medido a 340 nm. 4. Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK. Muestra Suero o plasma heparinizado o con EDTA. para retornar a la normalidad entre 3 y 6 dias despúes. . 1. lentamente. empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. Tiene su máxima concentración entre las 24 y 48 horas. apartir de la velocidad de formación del NADPH. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. despúes de iniciado.CREATINCINASA (Ck) Generalidades. y muy poca se encuentra en el miocardio y el cerebro (CK). 3. 2. empezando a descender despúes de dicho tiempo.

Condiciones de la muestra La muestra de suero o plasma para Creatina quinasa es estable al menos 7 días a 2-8 Centigrados. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio. 25°C ó 30°C 50 ul 1000 ul durante unos Hg 365 nm. se deducen las siguientes fórmulas para calcular la concentración catalítica: Macro: Micro: A/min x 4127 = U/L A/min x 3333 = U/L . Comprobar que las diferencias entre absorbancias sean sensiblemente iguales. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 340 nm o Hg 334 nm 1 cm 25. A los 3 minutos. Poner el cronómetro en marcha. Calculos. anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto durante tres minutos.5. 30 ó 37°C contra aire Muestra Reactivo 37°C 25 ul 1000 ul Mezclar y transferir de inmediato a una cubeta. Considerando que el coeficiente de absorción molar del NADPH a 340 nm es 6300. Insertarla en el portacubetas termotizado. Tecnica Precalentar el reactivo de trabajo a la temperatura ambiente minutos.

por aplicación de inyecciones y relajantes musculares. Correlacion diagnostica Se encuentra elevada en la distrofia muscular progresiva. Valores de referencia Temperatura de reaccion 25 °C 30 °C 37 °C Hombres U/l 10-80 15-125 24-195 Mujeres U/l 10-70 15-110 24-170 9. e intervenciones quirurjicas elevan sus cifras ligeramente. Traumatismos musculares. El valor cliníco está en una elevación manifiesta y su relación con el CK-MB y las otras enzimas que se alteran en el infarto. . Interferencias La hemólisis 10.8.

Fundamento La prueba se basa en una determinación enzimática de CK acompañada de un método de inmunoinhibición. la actividad remanentre multiplicado por el factor 2. Musculo esqueletico Cerebro Miocardio CK-MM. Un anticuerpo es incoroporado al reactivo el cual se une especificamente a la subunidad M. que toman el nombre según el sitio donde predomina. representa la actividad de la izoenzima CK-MB. Metodo Prueba Humazym M-test Método por inmunoinhibición para CK-MB. tejido nervioso.CREATINCINASA FRACCION MB Generalidades. . recuperándose los valores normales entre las 24 y 72 horas. o plasma heparinizado o con EDTA. la combinación de las cadenas origina la CK-MB. inhibiendo la actividad enzimática de esta subunidad B. Estudios electroforeticos demostraron que tiene dos cadenas M y B . Debido a que la concentración de CK-BB en circulación es mínima. CK-BB. las concentraciones máximas son a las 12-24 horas. Cardíaco y lo hace progresivamente según su extensión y evolución clínica. CK-MB. La CK-MB aumenta notablemente en el infarto. Muestra Suero. la cadena M deriva su nombre del músculo esquelético y la B de Brain ( cerebro ). se elevan desde las 3 hasta las 6 horas post-infarto. reconociendose 3 isoenzimas. La CK-MB predomina en el miocardio y sus niveles se elevan cuando existe proceso necrótico del músculo cardíaco. Tanto la enzima original CK como su isoenzima CK-MB.

30°C ó 37 °C contra aire. HG 365 nm 1 cm 25°C.Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. Si es superior. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Tecnica muestra Reactivo 40 ul 1000 ul Hg 334 nm. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK-MB Condiciones de la muestra La Concentracion de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L. La CK-MB en suero es estable al menos 7 dias a 2-8 C. 340 nm. Calcular la diferencia y multiplicar por el factor 8254. . diluir el suero con NaCl 150 mmol/L. Valores de referencia 25 °C CK total hombres mujeres CK-MB >80 U/l >70 U/l >10 U/l 30°C >130 U/l >110 U/l >16 U/l 37°C >195 U/l >170 U/l >25 U/l La actividad CK-MB esta en un rango entre 6 y 25 % de la actividad de la CK total. Mezcle e incube por 10 minutos a temperatura ambiente lea la abosorbancia y luego lea exactamente a los 5 minutos. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma.

.Correlacion diagnostica Presta una gran utilidad en los casos en que la CK se encuentra notablemente aumentada por causas ajenas al infarto y la CK-MB esta dentro de los límites normales. Esta aumenta notablemente en los infartos cardiácos.

El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. 2. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. por pérdida de la actividad. 2 y 3 minutos hacer un promedio y multiplicar por el factor 16345 . Condiciones de la muestra No se recomienda congelar la muestra. Seperar el suero antes de los 30 minutos. muestra reactivo Mezclar y leer la absorbancia después de 1 minuto y leer luego a los 1. 4. 3. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparinizado. 30°C ó 37 °C contra aire. Fundamento Método modificado basado en las recomendaciones del SCE.LACTATO DESHIDROGENASA (LDH) 1. HG 365 nm 1 cm 25°C. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 5. 340 nm. 6. Tecnica 25°C ó 30°C 20 ul 1000 ul 37°C 10 ul 1000 ul Hg 334 nm. Metodo Prueba líquida para deshidrogenasa láctica.

10. Valores de referencia temperatura adultos hombres mujeres Niños 12meses 25°C 120-240 U/l 30°C 160-320 U/l 37°C 225-450U/l IFCC <243 <244 Hasta 500 U/l 9.8. Correlacion diagnostica En el infarto al miocardio sus niveles se aumentan entre las 24 ó 48 horas y tiene su máxima concentración a los 2 ó 4 días. Interferencias El oxalato y el citrato interfieren en la reacción. . permaneciendo elevada hasta por 8 ó 14 días.

El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. y anticuerpos anti-ratón IgG (cabra) en la línea de control. Muestra Suero o plasma 4.TROPONINA 1. Fundamento La prueba emplea un conjugado de anticuerpo monoclonal anti cTnl y colorante en fase móvil. Seperar el suero antes de los 30 minutos. . 3. 2. 5. Tecnica Lleve el test a temperatura ambiente Dispense 2 gotas de la muestra enla ventana S. fijados en la línea de prueba. El exceso de conjugado reacciona en la línea de control formando una segunda línea rojo-violeta de control C. Condiciones de la muestra Las muestras que contienen partículas de turbidez pueden dar resultados inconsistentes. para demostrar el correcto funcionamiento. 6. Metodo Prueba inmunocromatográfica en un paso para la detección de la troponina I cardíaca humana en el suero o plasma. Como la muestra fluye por la almohadilla absorbente. anticueropos anti-cTnl (ratón). el cual se liga a los anticuerpos anti-cTnl en la línea de prueba y produce una línea de prueba rojo-violeta(T). Muestras lipémicas o hemolíticas no deben ser procesadas. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. la troponina humana I se une al conjugado anti-cTnl-colorante para formar un inmunocomplejo.

7. Lea los resultados a los 15 minutos. Valores de referencia Negativo Positivo 8. El resultado negativo no excluye la posibilidad de un infarto al miocardio.Evite la formación de búrbujas en la ventana. Interferencia La prueba no puede determinar niveles inferiores a 0. No lea después de 15 minutos para evitar errores. Las muestras positivas desarrollan una línea de prueba T en los primeros minutos. . Debe considerarse repetir la prueba después de 12 horas de iniciado el dolor.5 ng/ml de troponina I.

Condiciones del paciente Ayuno de 8 horas. Muestra Sangre total con EDTA. 2. Dado que la concentración de glicohemoglobina en el eritrocito refleja el nivel promedio de glucosa en la sangre de las 4 a 6 semanas anteriores y es estable por la vida de los eritrocitos. la medición es proporciona una prueba de gran valor para evaluar el control a largo plazo de los pacientes diabéticos. 5. Metodo Método rápido de separación por resina de intercambio iónico. 6. Condiciones de la muestra No debe utilizarse muestras hemolizadas para no alterar el resultado. 3. Fundamento La formación de glicohemoglobina ocurre irreversible y progresivamente en los eritrocitos a través de los 120 días de vida normal de estas células. 4. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 415 nm ó Hg 405 nm 1 cm 25°C frente a agua destilada. .HEMOGLOBINA GLICOSILADA 1.

0 % >8. Valores de referencia pacientes Metabolismo normal Diabéticos descontrolados 9. Tecnica Etapa de hemólisis Reactivo lisante 500 ul Mezclar e incubar por 5 min Determinación de HbA1 Pipetear 100 ul de hemolisado Tapar a 1 cm aproximadamente Mezclar por 5 min Leer la absorbancia Determinación de Hb total Pipetear 20 ul de hemolisado Mezclar cuidadosamente Leer la absorbancia HbA1= F X HbA1 muestra Hb total 8.5 – 7.5% Muestra 100 ul 15°C ó 25°C reactivo 5 ml de agua destilada .7. Correlacion diagnostica La dosificación de la hemoglobina glicosilada es importante en un diabético como la glucosa. %HbA1 4.

Elaboró Carolina Hoyos Velásquez Cargo: Bacterióloga FECHA: XXXXXXXXXXXX Revisó XXXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Aprobó XXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXX .BIBLIOGRAFIA • • Manual de quimica clinica. Colegio mayor de Antioquia Insertos de las técnicas.

FECHA NOMBRE DE QUIEN LEE EL MANUAL FIRMA CARGO .

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