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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

ELABORADO POR: CAROLINA HOYOS VELASQUEZ BACTERIOLOGA COOPERATIVA COOMAN

LABORATORIO CLINICO EMPRESA SOCIAL DEL ERSTADO HOSPITAL SAN RAFAEL DE YOLOMBO YOLOMBO 2008

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ACIDO URICO

1. Metodo Análisis enzimático colorimétrico por ácido urico con factor aclarante de lípidos (LCF) (PAP) 2. Fundamento Determinación del Acido Urico por la reacción con la uricasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona por la acción catalítica de la peroxidasa con ácido 3,5-dicloro-2-hydroxybenzenesulfónico (DCHBS) y 4-aminofenazona (PAP) para producir un complejo rojo-violeta de quinonemina como indicador. 3. Muestras Suero o plasma con heparina o EDTA, orina. Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. 4. Condiciones del paciente Para determinación en suero. Antes: • Explicar el procedimiento al paciente. • Llevar estrictamente los siguientes puntos. • Suspender la medicación de drogas como: alopurinol, salicilatos, fenilbutazona, calmantes o analgésicos, ácido ascórbico (vitamina C), buscapina, diuréticos de la trazida, tioles libres, purinas metiladas, ácido homogentístico y altas cantidades de glucosa. • Dos días antes del examen evitar ejercicios violentos.

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24 horas antes del examen, el paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas, mariscos y frijoles ya que contienen altos contenidos de purina. 48 horas antes de la venoclisis suspender el consumo de alcohol. Durante: Recoger 5 - 7 ml de sangre venosa en un tubo de tapón rojo. • Retomar nuevamente la ingesta de cualquier medicamento que pueda alterar los resultados. Después: • Aplicar presión en el sitio de punción. Para determinación en Orina: • Orina de 24 horas, teniendo en cuenta las indicaciones anteriores. Nota Las muestras lipémicas generalmente generan turbidez en la mezcla del reactivo con la muestra, lo que lleva a resultados elevados falsos. El LCF aclara completamente la turbidez causada por muestras lipémicas. Los valores en sangre total varían con la proporción de células en la sangre debido a que las células también contienen muchas más sustancias que interfieren en la reacción. 5. Condición de la muestra La sangre debe recogerse en tubos limpios, libres de metales pesados, ya que estos y los cianuros son inhibidores enzimáticos. La prueba no se ve influenciada por valores hasta 100mg/dl de hemoglobina o por valores de bilirrubina hasta 20mg/dl. La estabilidad de la muestra es: Temperatura ambiente  3 días Refrigerado  2 - 8°C por 5 días. Congelado  20°C, seis meses. En orina de 24 horas con preservativos y a temperatura ambiente → 2 días. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: 520nm, Hg 546 nm. Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20 - 25 °C ó 37°C Medir: frente a blanco de reactivos

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7. Tecnica Pipetear: Blanco Estándar Muestra Blanco ---------Muestra ------25λ Estándar ------25λ Solución Reactiva 1000λ 1000λ 1000λ Mezclar, incubar a 20-25°C durante 20-50 minutos, leer las extinciones frente a blanco de reactivos. Límite de dilución 15 mg/dl, con concentraciones superiores diluir la muestra 1 + 1 con solución de cloruro sódico al 0.9% y repetir la determinación, el resultado multiplicarlo por 2. 8. Valores de referencia Hombres: 3.7 - 7.0 mg/dl. Mujeres: 2.4 - 5.7 mg/dl. 9. Interferentes de la prueba El ácido ascórbico en concentraciones terapéuticas no interfiere en la prueba, pero en cantidades excesivas puede dar resultados elevados. Sustancias químicas con efecto antiuricosúrico. Acido etacrínico, furosemida, diuréticos de la benzotiacida. Sustancias que inhiben competitivamente la secreción tubular del urato. El p- aminohipurato, lactato, acetoacetato y B. hidroxibutírico. Por otra parte, ciertos fármacos como los salicilatos, fenilbutazona entre otros, inhiben la secreción de ácido úrico a dosis bajas, pero causan un efecto urosúrico intenso a dosis altas, debido a que estos fármacos pueden inhibir reabsorción tubular a niveles altos. El exceso del lactato también se asocia con la hiperuricemia en los casos de ejercicio fuerte y toxemia del embarazo.

Notas El etanol altera el metabolismo del ácido úrico aumentando la producción de urato y por la supresión de la excreción renal de ácido úrico. Esta última es el resultado

cambios bioquímicos e incluso factores sociales y de comportamiento se asocian a modificaciones de la concentración de ácido úrico en el plasma. alteraciones fisiológicas. En los pacientes hipertensos la reducción del flujo sanguíneo renal y el aumento de la resistencia vascular pueden ser responsables de la disminución de la fracción de filtración del urato. Correlacion clinico patologica Numerosas enfermedades.0 Página 5 de 83 del exceso de lactato producido por la oxidación del etanol a acetaldehído. • Almacenamiento adecuado de los cartuchos reactivos. Las reservas de ácido úrico pueden superar los 30 g. La ingestión de alimentos ricos en purinas. excepto por el SNC. El aumento del ácido úrico es mucho más frecuente y clínicamente más significativo que su disminución. La hiperuricemia tiene también una relación positiva con la hiperlipidemia.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . el exceso de lactato y el uso de diuréticos. • Adecuada extracción y manipulación de muestras límites aceptables en los controles. Es de mucha importancia la determinación de ácido úrico. Nefropatía y a menudo nefrolitiasis. hipertensión. vísceras y levaduras producen una hiperuricemia leve. 10. . tejido subcutáneo y bolsas sinoviales. que inhibe competitivamente la secreción tubular renal del urato. la cetoácidosis. Control de calidad • Cada vez que se determine ácido úrico correr con las muestras un estándar acuoso y dos suero control liofilizado.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. por ejemplo carnes. Ataques clínicos recidivantes de artritis. aunque presenta predilecciones por articulaciones. obesidad. pues los valores altos son diagnóstico de “gota”. • Asegurarse que la lectura del blanco esté dentro del rango permitido. Entre las etiologías más comunes de hiperuricemia se cuentan el fallo renal. La gota es un trastorno del metabolismo de purinas o de la excreción renal de ácido úrico caracterizado por: Hiperuricemia. diabetes mellitus. • Evaluación permanente de resultados. Precipitación de urato monosódico en forma de depósitos (tofos) por todo el cuerpo. aterosclerosis.

El uso del torniquete no ha de execeder los 30 segundos. Fundamento.0 Página 6 de 83 Se han identificado dos defectos enzimáticos ligados al cromosoma sexual como etiología de la gota primaria: Una deficiencia de (H 6 PRT) hipoxantin guanin .fosfato La presencia de amonio en cualquiera de los reactivos. Una hiperactividad de fosforribosil . 5. despues de abierto debe evitarse la contaminación.fosforrobosil transferasa. Condiciones de la muestra No usar plasma heparinizado porque se puede alterar el valor. . anticoagulantes o agua destilada aumentan los valores. Muestras Suero ó plasma con EDTA ó heparina. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentracion de albumina en la muestra. ya que esto puede aumentar la concentración de proteínas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 3. Metodo Prueba fotometrica colorimetrica para Albumina Metodo BCG 2. Patron de albúmina y el RGT son estables hasta la fecha de vencimiento cuando se almacenan de 2 a 25 grados centigrados. Estable 1 mes a 2-8 grados y 1 semana entre 15 y 25 grados 4. El verde de bromocresol forma con la albumina en buffer de citrata un complejo coloreado. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 8 horas y durante este periódo no hacer esfuerzoz corporales intensos. ALBUMINA 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero.

Interferencias La prueba no es influenciada por valores de Bilirrubina hasta 20mg/d.0 Página 7 de 83 6. El color es estable durante al menos 30 minutos. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Hg 546 nm. Hay 3 factores que pueden disminuir su concentración: . Correlacion clinicopatologica. Otras proteinas reaccionan lentamente. La reacción de la albúmina con el verde de bromocresol es inmediata.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Hemoglobina (1 g/L).8 – 5. 7. Leer la absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco de reactivo. 9. ABS muestra ____________ X 4 g/dl albúmina ABS patrón 8.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 ml muestra ---10 ul 1. por lo que es conveniente no demorar la lectura. 10.1 g/dl en hombres y mujeres.0 ml patrón 10 ul ---1. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Patrón albúmina Muestra Reactivo blanco ---------1. 578 nm 1 cm 20 a 25 frente a blanco de reactivo por serie. Valores normales 3.0 ml Mezclar bien y dejar los tubos durante 5 minutos a temperatura ambiente.

albúminuria persistente. Muestra Orina fresca. Anemia persistente Neoplasia nefrosis lipoidea. catabolismo excesivo).0 Página 8 de 83 1) Pérdidas cuantiosas o frecuentes. (hemorragias. Fundamento Las partículas de látex con anticuerpos anti-albúmina humana. Otras: Trastornos pulmonares.0 con NaOH/HCl 1 mol/L. Metodo Prueba de turbidimetría para la cuantificación de microalbúmina en orina humana. 4. 3.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Es estable por 7 días cuando se le añade azida sódica para prevenir posibles contaminaciones. Condiciones de la muestra La orina debe ser lo más fresca posible. Metodo de determinacion Longitud de onda: 540 nm (530-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 37°C Medición: frente a agua destilada . y se debe ajustar su pH a 7. El proceso de aglutinación provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentración de uALB de la muestra. paracentesis. 2. La manifestacion clínica mas llamativa es el edema. y por comparación conocida se puede determinar el contenido de uALB en la muestra ensayada. Edemas carenciales. 5. 3) Por carencia de materia prima como en la hipoalimentacion. son aglutinadas por uALB presente en la muestra del paciente.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . MICROALBUMINURIA 1. 2) Por síntesis defectuosa como ocurre en la mayor parte de las hepatopatías.

Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 7 ul Mezclar y leer la absorbancia frente a agua destilada y leer a los dor minutos después y se multiplica el valor por la concentración del calibrador.0 Página 9 de 83 6. La urea > de 1g/L y bilirrubina > 10mg/dl interfieren.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Interferencias No interfieren valores de Glucosa 2 g/L. siendo superior al valor normal. creatinina 3 g/L. esta aun por debajo de la concentración considerada como una proteinuria convencional. Valores de referencia Hasta 15 mg/L 8.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 7. concentración que. . así como de alteraciones cardiovasculares en pacientes que sufren diabetes mellitus insulinodependientes o bien insulina no-dependiente. Correlacion diagnostica Se define la microalbúmina como la tasa de excresión de albúmina en orina entre 20 y 200 ug/min. La microalbuminuria es un marcador del riesgo de la nefropatía diabética. hemoglobina 10g/L.

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 10 de 83 .

El metabolismo de la bilirrubina proviene en un 80% de la descomposición de los hematíes envejecidos en el sistema retículo endotelial (bazo. hígado y medula ósea). y el otro porcentaje de los eritrocitos defectuosos destruidos en la medula ósea antes de ser liberados. que acaban conduciéndola a los conductos hepáticos. incluyendo sales biliares. agua y bilirrubina. fosfolípidos.glucoronil . Hem hem oxigenasa Biliverdina Biliverdina reductasa Bilirrubina. conjugación catalizada por la enzima Bilirrubin . por tanto no atraviesa la membrana glomerular. La bilirrubina total del suero incluye la bilirrubina libre o no conjugada (reacción indirecta) y una pequeña cantidad de bilirrubina conjugada o de reacción directa. La hemoglobina es liberada desde los hematíes y descompuesta en moléculas de Heme y globina.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Un 5% de los citocromos citoplasmáticos y mitocondriales hepáticos. colesterol. La bilirrubina conjugada se excreta después por las células hepáticas hacia los canalicemos intrahepáticos. La orina normalmente contiene una pequeña cantidad de urobilinógeno. el conducto biliar común y el intestino. . pero no de bilirrubina. Generalidades La bilis se forma en el hígado y presenta muchos componentes. El riñón no excreta bilirrubina no conjugada puesto que es insoluble en agua y en general se encuentra unida a la albúmina. es útil para evaluar la extensión y el progreso de la ictericia. El heme es catabolizado después para formar biliverdina que se transforma en bilirrubina. bicarbonato.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .transferasa. Esta forma de bilirrubina se denomina no conjugada (indirecta) que es transportada en el plasma en forma libre unida a la albúmina. hasta las células hepáticas en donde es conjugada con el ácido glucoronico. El nivel de la bilirrubina serica total.0 Página 11 de 83 BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA. El examen de la orina para los pigmentos biliares (bilirrubina) y urobilinógeno se emplea en la investigación de la ictericia. esta solo aparece cuando la concentración en plasma se encuentra aumentada y siempre es de bilirrubina conjugada.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Los glucoronidos de la bilirrubina solubles en agua reaccionan directamente con DSA mientras la bilirrubina indirecta conjugada con albumina reacciona sólo en la presencia de un acelerador. Ayuno de ocho horas. 4. Debe procesarse la muestra el mismo día. mientras que la otra hay que adicionarle alcohol. La muestra es estable por 3 días a una temperatura de 2 a 8 grados. Proteger la muestra de sangre de la luz brillante. 3. El uso de torniquete no debe prolongarse más de 30 segundos. La absorbancia de este color a 546 nm es directamente proporcional a la concentración de bilirrubina en la muestra. Muestra Suero o Plasma con heparina. 2. Condiciones del paciente Reposo de 15 minutos antes de la toma de muestra. Bilirrubina total = bilirrubina directa + bilirrubina indirecta. y deben estar protegidas de la luz. de que parte de la bilirrubina reacciona directamente con el reactivo de Erlich.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El ayuno prolongado produce aumento de bilirrubina ya que parte de esta se almacena en el tejido adiposo y al suceder la lipolisis se libera y sale a la circulación. Fundamento La Bilirrubina reacciona con al ácido sulfanílico diazotado (DSA) formando un color rojo. llevadas a cabo por Van Den Berg en 1913. Condiciones de la muestra No agitar el tubo. . alajada de la luz. 5. ya que en caso contrario los resultados de la prueba podrían ser inexactos. Mencionar en el volante del laboratorio cualquier fármaco que pudiera afectar los resultados de la prueba.0 Página 12 de 83 La designación de Bilirrubina como directa e indirecta deriva de observaciones. 1. Evitar muestras hemolizadas. Metodo Método modificado de Jendrassik/Gróf.

. Leer la absorbancia de la muestra frente al blanco. Reactivo TBR Reactivo TNR Mezclar cuidadosamente e incubar por 5 minutos. Leer la absorbancia frente al blanco.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min.. Tecnica Bilirrubina total Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Muestra 1 ml 1 gota 546 nm 1 cm 20 a 25 grados C frente a blanco de muestra. Bilirrubina directa Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente exactamente por 5 minutos.0 Página 13 de 83 6.. Muestra 1 ml 1 gota Reactivo DBR Reactivo DNR Mezclar cuidadosamente e Incubar por 2 minutos.....EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

salicilatos y vitamina A. si la concentración es mayor de 25 mg/dl.1.4 . debe procesarce la muestra lo más rápido posible.0 mg/dl o 5. La ictericia es una coloración amarillenta de los tejidos corporales (piel. Valores de referencia Bilirrubina total: 0. anabolizantes.0 umol/l.0 Página 14 de 83 8. ácido ascórbico.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Multiplicar el resultado por 5. Linealidad La prueba es lineal hasta 25 mg/dl.1 . cafeína. Entre los fármacos que pueden causar niveles aumentados de bilirrubina total se incluyen: Esteroides. diuréticos. Bilirrubina total en el recién nacido: 1 a 12 mg/dl ó 17.5. antibióticos (Eritromicina). Correlacion diagnostica La determinación de bilirrubina total es útil para evaluar la extensión y progreso de la ictericia en problemas hepatocelulares.8 mg/dl o 3.5 umol/l. causada por niveles sanguíneos de bilirrubina anormalmente altos.B. Bilirrubina indirecta: 0. membranas mucosas y escleróticas).12.2 . El almacenamiento no es conveniente. anticonceptivos orales. el color amarillo se aprecia cuando la bilirrubina serica total . antipalúdicos. Entre los fármacos que reducen los niveles de bilirrubina total se incluyen barbitúricos. Interferentes La exposición prolongada (más de 1 hora) a la luz solar directa o artificial puede causar disminución de la bilirrubina en un 50%. si se necesita debe refrigerarse por pocos días (3 días a 2-8 °C) protegida de la luz.1 . directa. 10.1 umol/l. etc.0 umol/l. diluir la muestra 1 + 4 con solución fisiológica y repetir la prueba. La hemólisis de la sangre y la lipemia pueden producir resultados erróneos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 11.3 mg/dl o 1. Bilirrubina directa: 0.0. por lo tanto. morfina.7 . Bilirrubina indirecta = B.17. obstructivos y prehepáticos.0.1 .20. 9. Estabilidad No es muy estable. total . se altera rápidamente con la luz. penicilinas y salicilatos (dosis elevadas). Para obtener la concentración de la Bilirrubian indirecta se resta o establece la diferencia de la concentración de la Bilirrubina total y Bilirrubina directa.1 .

virica o alcohólica. Síndrome de Cliger . defecto que puede ocurrir en cualquier fase del metabolismo de la bilirrubina desde su formación hasta su excreción intestinal. enfermedad drepanocitica. En general hay bilirrubinuria. La ictericia se debe a un defecto en el metabolismo o la excreción normales de bilirrubina.hepatica o colestasica Hay aumento de bilirrubina directa y se presenta Bilirrubinuria. tumores metastásicos etc.  Destrucción prematura de eritrocitos defectuosos. alcohol y tóxica. Eritropoyesis ineficaz acelerada: Anemia megaloblástica. . Hepatitis viral. Cirrosis. Ictericia post .  Cirrosis por alcohol. Causas: Shock por hipoxia. No hay bilirrubinuria. atresia de conductos. Ictericia pre – hepatica Hay aumento de la bilirrubina indirecta.  Síndrome de Gilbert  Recién Nacidos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . policitemia. Causas:  Obstrucción intrahepática: debido a obstrucción por fármacos. talasemia intoxicación por plomo. Causas: Metabolismo aumentado del Heme: esferocitosis hereditaria.Najjan I y II. Ictericia hepatocelular Hay aumento mayor de la bilirrubina directa y puede haber aumentos menores de B.  Hiperbilirrubinemia por derivación.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. cirrosis biliar primaria. hormonas esteroideas.0 Página 15 de 83 supera los 2. etc. Insuficiencia cardiaca congestiva.5 mg/dl. indirecta o estar normal y la bilirrubina total aumentada. hepatitis aguda.

. páncreas o ampolla de Vater.0 Página 16 de 83  Colestasis extrahepática o quirúrgica: debido a carcinoma en conducto.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. cálculos biliares.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Nota La bilirrubina directa diferencia la ictericia Pre-hepática de la hepatocelular y obstructiva y la bilirrubina indirecta hace la diferenciación entre la hepatocelular obstructiva y las Pre-hepáticas. por edema en la cabeza del páncreas. vesícula biliar.

esteres de colesterol. fosfolípidos y ácidos grasos libres. significa presencia de triglicéridos exógenos (quilomicrones). 70% esterificado. Perfil lipidico minimo El dato del colesterol total y los triglicéridos da una información global de los lípidos que circulan en el organismo.0 Página 17 de 83 PERFIL LIPIDICO MINIMO Generalidades de lipidos Los lípidos constituyen la principal reserva energética de los seres vivos y también forman parte de la membrana celular y regulan la actividad de la célula y tejidos. El aspecto del suero no indica que el paciente este normal. Aspecto uniformemente lechoso significa presencia de triglicéridos endógenos (VLDL). se coloca el suero durante 12 horas en refrigeración (4ºC) esto con el objeto de ayudar a clasificar las trigliceridemias así:  Capa cremosa en la superficie y nadante transparente. IDL y VLDL. El colesterol total del cuerpo: comprende el colesterol libre y esterificado.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Todos estos lípidos con excepción de los ácidos grasos que están ligados a la albúmina. se encuentran en el plasma como lipoproteínas. porque valores de colesterol aumentados no producen ninguna turbidez.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Triglicéridos HDL colesterol VLDL colesterol: se evalúa mediante la formula trigliceridos/5. 30% libre. Transportado principalmente por LDL. En el estudio del perfil lipídico mínimo se deben tener en cuenta los siguientes parámetros: Aspecto del suero: se realiza la prueba en frío en caso de obtener sueros lechosos. cuando estos son < 400 mg/ml. pero sí se requiere tener un concepto claro de cómo están incidiendo los lípidos en el aparato circulatorio. LDL colesterol: se determina con la formula de Friedewald . Los lípidos totales están compuestos por: colesterol libre. triglicéridos. se debe tener un estudio fraccionado de las lipoproteínas que es lo que se conoce como perfil lipídico.  Capa cremosa en la superficie y nadante turbio significa triglicéridos exógenos y endógenos (quilomicrones y VLDL). HDL.

Cifras superiores establecen un alto riesgo de enfermedad coronaria.(VLDL C + HDL C ). .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Interpretacion del perfil lipidico mínimo Lípido mg/dl Colesterol Total LDL Colesterol HDL hombres HDL mujeres Trigliceridos Indice arterial: Deseable <200 <130 >35 >45 <200 Hombres <=5 Mujeres <=4. Indice arterial se determina mediante la formula CT/HDLC ö LDLC/ HDLc.5 Riesgo potencial 200-239 130-159 25-35 40-45 >200 Riesgo alto >=240 >=160 <25 <40 >200 Estas cifras nos indican que la arteriosclerosis se esta verificando en forma normal.0 Página 18 de 83 LDL C = CT.

Condiciones del paciente Esta prueba no necesita de ayuno pero como generalmente se realiza con el resto del perfil lipídico. 5. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. . 6. 3.0 Página 19 de 83 COLESTEROL TOTAL 1. 4. El indicador es la quinonemina formada por el peróxido de hidrógeno y 4aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa. Extraer 5-10 ml de sangre en un tubo seco. Anotar cualquier fármaco que pueda modificar los valores de Colesterol. Medición: frente a blanco de reactivo.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . para evitar la redistribución del Colesterol entre las diversas lipoproteínas. Muestra Suero o plasma con heparina o EDTA. Fundamento El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para colesterol con factor aclarante de lípidos (LCF) CHOD-PAP 2. Separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción. se deben seguir los requerimientos que para este se indiquen.

Evitar el contacto con los reactivos ya que son muy corrosivos. ni de Bilirrubina menor a 5 mg/dl. incubar 10 minutos a 20 ó 25 grados. Tecnica Pipetear Blanco ---------1000 µl Estándar ---10 µl ---1000 µl Muestra ------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Rvo Color Mezclar. Notas El test no se afecta con valores de hemoglobina inferiores a 200 mg/dl. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. bloqueadores beta-adrenérgicos. Vitamina D.0 Página 20 de 83 7.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Eritromicina. Nitratos. Anticonceptivos orales. Valores de referencia Varían con la edad y el laboratorio. Neomicina (oral). Liotironina (Cytomel). RECIEN NACIDOS LACTANTES NIÑOS ADULTOS/ ANCIANOS 53 – 135 mg/dl 70 – 175 mg/dl 120.200 mg/dl < 220 mg/dl Sospechoso mayor de 220 Elevado mayor de 260 9. Diuréticos tiacídicos. Corticosteroides. o 5 minutos a 37 grados C. 8. Allopurinol. Lovastatina (Mevacor). Quelantes de las sales biliares. sulfamidas. Colestipol. Esteroides anabólicos. Niaciana. Adrenalina. Isoniacida. Interferencias La Ovariectomía aumenta los niveles de Colesterol. Hay fármacos que elevan los niveles de Colesterol como: Hormona adrenocorticotrópica. Hay otros que disminuyen los valores como: Andrógenos. . Captopril. Colchicina.

Hiperlipemias. Hipertensión. Medicación hipocolesterolemiante. multiplicar el resultado por 3. Control de calidad Hacer control periódico a equipos y reactivos para evitar resultados falsos positivos ó falsos negativos. Mala absorción. Para la técnica se debe montar un control Normal y uno Patológico.0 Página 21 de 83 Muestras lipémicas usualmente generan turbidez en la muestra que se va a analizar. Enfermedad hepática.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .9%). Linealidad El test es lineal hasta una concentración de Colesterol de 750 mg/dl (19. Anemia perniciosa. Hipotiroidismo. . Síndrome nefrótico. Anemia hemolítica. generando resultados falsamente elevados 9. Colestasis hepática. Xantomatosis. Para concentraciones mayores diluir la muestra con solución salina al (0. embarazo. Desnutrición. Resultados anormales Niveles aumentados en: Hipercolesterolemia.7 mmol/l  Niveles superiores: 300 mg/dl Necesitan tratamiento. Cirrosis biliar. Correlacion diagnostica  Niveles sospechosos: 220 mg/dl ó 5. Infarto de miocardio. 1 + 2 y repetir la determinación.7 mmol/l  Niveles elevados: 260 mg/dl ó 6. Estrés. Dieta rica en Colesterol.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Niveles disminuidos en: Sepsis. Diabetes Mellitus descontrolada. nefrósis. Hipertiroidismo. aterosclerosis.3 mmol/l). 10.

el sobrenadante contiene las HDL que se van a determinar.0 Página 22 de 83 COLESTEROL HDL 1. 3. 5. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. Despúes de centrifugar. Medición: frente a blanco de reactivo .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . en la mayoría de las personas la lipemia posprandial interfiere con muchos de los métodos analíticos. 6. Condiciones de la muestra La muestra debe separarse del coagulo dentro de las dos horas de la extracción y conservarse a 4ºC a menos que se analice de inmediato. Metodo Colesterol precipitnte. HDL es estable en la muestra de suero durante 7 días a 4ºC o durante 4 meses a –20ºC. Abstenerse de no ingerir alcohol por 72 horas antes de la toma de la muestra (no es necesario). Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. 2. 4. Debe señalarse que si bien la falta de ayuno no afecta los niveles de HDLc sanguíneo. Muestra Suero o plasma con anticoagulante EDTA o heparina. Condiciones del paciente Ayuno de 12-14 horas previas a la extracción de sangre.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Fundamento Los quilomicrones. VLDL y LDL se precipitan por adición de ácido fosfotúngstico y cloruro de magnesio.

0 Página 23 de 83 7. Limite de dilución 310 mg/dl. B. Precipitación pipetear muestra precipitante Macro 500 ul 1000 ul Micro 200 ul 500 ul Mezclar bien. observando un sobrenadante turbio. incubar todos los tubos a temperatura ambiente por 10 minutos ó a 37ºC por 5 minutos.9% y se repite la precipitación de la muesta diluida. Notas El sobrenadante debe ser claro. . Determinación Agua destilada Estándar Sobrenadante Reactivo de color Blanco 100 ul ------1ml Estándar 100 ul ---1ml Problema ---100 ul 1ml Mezclar. El ácido ascórbico disminuye los valores. En las muestras con un contenido de triglicéridos altos se pueden presentar precipitaciones incompletas de las lipoproteínas o flotación por parte de las mismas sobre él liquido. El resultado se multiplica por dos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. incubar por 10 minutos a temperatura ambiente. Despúes de centrifugar. Centrifugar por 2 minutos a 10000 rpm ó 10 minutos a 4000 rpm. separar el sobrenadante claro del precipitado dentro de 1 hora y determinar la concentración del colesterol HDL con el reactivo de Colesterol total. Tecnica A. Leer la absorbancia de la muestra y el estándar frente al blanco de reactivo antes de una hora.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . se hace una dilución 1: 1 con solución cloruro de sodio al 0. en ese caso.

Se observa en: mayor producción de Apo I y Apo II y actividad física fuerte. Niveles disminuidos de HDL correlacionan con riesgo aumentado de enfermedad cardiocirculatoria. sedentarismo. Valores de referencia Mujeres > 45mg/dl Hombres > 35mg/dl 9.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. complementada con un nivel de HDL lo más elevado posible. obesidad.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Niveles aumentados de HDL correlacionan con disminución en el desarrollo de enfermedad cardiocirculatoria. siendo esta la mejor forma de luchar contra este mecanismo fisiológico. Correlacion diagnostica La HDL contrarresta la acción nociva que puede tener la LDL sobre nuestro organismo. para evitar la arteriosclerosis prematura. La LDL juega un papel muy importante en el funcionamiento arterial y por esto debemos tratar que el organismo tenga estrictamente la cantidad necesaria que requieren sus funciones. deficiencia de LPL 1 con afectación del metabolismo de quilomicrones y VLDL. Resultados Anormales. . hipertriglicéridemia. al evitar la arteriosclerosis excesiva porque remueve y elimina a través de la bilis cantidades considerables de LDL en forma de ácidos biliares y esteroides neutros.0 Página 24 de 83 8. deficiencia familiar de Apo I y Apo II.

No hacer ejercicio fuerte antes de la prueba. Notas La lipemia. Los volúmenes de la reacción sugeridos se pueden modificar sin ningún cambio en los cálculos. la temperatura de 25ºC permite la liberación de glicerol de los fosfolipídos y produce un incremento aparente del valor de los Triglicéridos. Extraer 5-10 ml de sangre en tubo seco y separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción. 4aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa. 5. que consiste en . El indicador es Quinineimina formada a partir de peróxido de hidrógeno. la hemólisis hasta 10 mg/dl ó 170 mmol/l. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para triglicéridos con factor aclarante de lípidos. Muestra Suero o plasma heparinizado o palsma con EDTA 4.0 Página 25 de 83 TRIGLICERIDOS 1. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. para evitar la redistribución de los Triglicéridos entre las diferentes lipoproteínas. 3. Antes de procesar la muestra se debe observar y anotar el aspecto del suero ya que si este está lechoso. GPO-PAP 2. Condiciones del paciente El ayuno debe ser entre 12 y 14 horas. metabólitos y una serie de fármacos de uso común NO interfieren con el método. Es importante describir el aspecto del suero.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. No consumir grandes cantidades de Carbohidratos y grasas 48 horas antes de la prueba. Los Triglicéridos permanecen estables 3 días a 4ºC. se le debe hacer la prueba en frío. Fundamento Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasa.

con solución salina al 0. 6. luego de las cuales se observa las características que presenta el nadante y el sobrenadante. a 4ºC son estables por 3 días. Estabilidad de la reacción 1 hora. e incubar por 10 minutos a 25ºC o por 5 minutos a 37 grados C.9%.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Valores de referencia EDAD 0 – 5 años 6 – 11 años 2 – 15 años 16 – 19 años Adultos / ancianos HOMBRES 30 – 86 mg/dl 31 – 108 mg/dl 36 – 138 mg/dl 40 – 163 mg/dl 40 – 160 mg/dl MUJERES 32 – 99 mg/dl 35 – 114 mg/dl 41 – 138 mg/dl 40 – 128 mg/dl 25 – 135 mg/dl . Los Triglicéridos no permanecen en el suero a 25ºC. Metodo de determinacion Longitud de onda: 500 nm. debido a que fácilmente se libera el glicerol. Tecnica Pipetear: Blanco ------------1000 µl Estándar ---10 µl ------1000 µl Muestra ------10 µl ---1000 µl Control ---------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Control Reactivo Mezclar. 25 ó 37 grados C Medición: frente a blanco de reactivo 7. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20.0 Página 26 de 83 colocarlo en la nevera por 12 horas. 8. repetir la determinación y multiplicar el resultado por 6. Para concentración superior diluir la muestra 1+5. leer con Blanco de reactivo.3 mmol/l) de Triglicéridos. Linealidad El método es lineal hasta 1000 mg/dl (11.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

Nota: Los trigliceridos elevados afectan el cálculo de las LDL. por lo tanto cuando esto sucede las LDL no se deben reportar. 10. Desnutrición. Síndrome nefrótico.0 Página 27 de 83 9. Dieta rica en carbohidratos. Hipotiroidismo. Correlacion diagnostica Niveles aumentados en: Hiperlipemias. Niveles disminuidos en: Síndrome de mala absorción. Enfermedad con almacenamiento de glucógeno. Riesgo de enfermedad coronaria y vascular. Estrógenos y anticonceptivos orales. Hipertensión.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Infarto de miocardio. Cirrosis alcohólica. Disminuyendo los valores Acido ascórbico. Diabetes mal controlada. Interferencias Elevando los valores Colestiramina.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Asparraginasa. Hipertiroidismo. Clofibrato y colestipol. . Embarazo.

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CREATININA

Generalidades Sus aumentos suelen ser proporcionales con respecto a los de la urea, aun cuando en general son más tardíos. Tiene particular interés diagnostico y pronóstico en los siguientes casos:  Nefropatías: Cuando en una insuficiencia renal con uremia, se observan cifras superiores a 5mg/100ml, él pronostico es fatal a corto plazo. Esto solo sucede en las fases avanzadas, ya que en las precoces, dada la facilidad de eliminación de la creatinina solo aumentan el ácido úrico y la úrea. En las nefritis agudas generalmente no hay elevación; en los casos en que existe (40%) es un cambio reversible y de escaso valor pronostico. En las nefrósis por tóxicos (Hg y Ag.) es donde se observan mayores elevaciones; en la insuficiencia cardiaca avanzada puede originarse una retención discreta o moderada de creatinina aunque no exista verdadera nefropatía.  En obstrucciones urinarias (Afecciones de próstata, vejiga, uréter, etc.) y en la anuria refleja (cálculos uretrales), se producen así mismo elevaciones marcadas de creatinina incluso 30 mg o más, igualmente reversibles con la reparación de la obstrucción.  En el gigantismo y acromegalia se observan discretas elevaciones. Cada 24 horas se transforma un 2% de creatina en creatinina. La cantidad de creatinina por unidad de masa muscular es constante y por lo tanto la degradación espontanea es constante. Como resultado de este fenómeno la concentración plasmatica de creatinina es estable y varia en menos de 10% diario en individuos normales. 1. Metodo Reacción de Jaffe Prueba fotométrica colorimértica para mediciones de punto final desproteinización.

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2. Fundamento La creatinina en solución alcalina forma un complejo coloreado rojo-naranja con ácido picrico. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la creatinina en la muestra. 3. Muestra Suero o plasma heparinizado u orina 4. Condiciones del paciente La muestra de sangre no requiere ayuno previo ya que la excreción de creatinina depende muy levemente de la alimentación y de la diuresis. Por lo menos 8 horas antes del examen no realizar esfuerzos corporales intensos. 5. Condiciones de la muestra La muestra de suero para creatinina es inestable a temperatura ambiente, refrigerada de 2 – 4 ºC por 24 horas. Congelada a –20 ºC es estable por 6 meses La creatinina puede ser determinada en cualquier líquido biológico, pero las muestras mas usadas son suero, plasma y orina. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 546 nm (500-550 nm) 1 cm 25° C frente a blanco de reactivo

7. Tecnica Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ

Solución Trabajo Estándar Suero

Mezclar y poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia a los 30 segundos y a los 90 segundos. A2-A1= Creatinina

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8. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Mujeres Hombres 0.5 – 1.0 mg/dl. 0.7 – 1.2 mg/dl.

Estos valores están influenciados por el sexo (siendo menor en la mujer), masa muscular del individuo. 9. Interferentes de la muestra y la reaccion • Interferentes positivos: Acido ascórbico, piruvato, acetona, ácido acetoacético, levulosa, glucosa, ácido úrico, proteínas, barbitúricos y antibióticos de la cefalosporina. Las temperaturas altas y los prolongados tiempos de reacción (> a 5 minutos), aumentan esta interferencia. El piruvato, acetona, ácido acético, aminoácidos y proteínas o cualquier compuesto con un grupo metilo o metileno activo, introduce errores debido a su acoplamiento con el picrato por un mecanismo análogo al de la creatinina; todos estos compuestos pueden producir sustancias coloreadas que aumentan la absorbancia en la reacción del complejo coloreado. La bilirrubina y otros productos de degradación de la Hb, causan una interferencia negativa probablemente por su oxidación en medio básico fuerte a compuestos incoloros, dando como resultado una disminución de la absorbancia, lo que se interpreta como una menor concentración de creatinina. Esta interferencia negativa se observa con frecuencia en el análisis cinético de la creatinina. 10. Correlacion diagonstica El nivel de creatinina en suero depende de 2 factores: La velocidad de producción. La velocidad de filtración. Dado que la fuente de creatinina serica es la creatina muscular y la fosfocreatina, una mayor cantidad de masa muscular produce un aumento de la creatinina serica. Los valores de creatinina exhiben una respuesta escasa o nula a las modificaciones dietéticas o a las alteraciones del equilibrio electrolitico.

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La concentración de creatinina en sangre, como la de la urea, se aumenta con el descenso de la función renal y el principal empleo de la determinación de creatinina serica esta en la evaluación de la función renal. En nefritis crónica cuando la concentración de BUN esta muy por encima de 50 mg/dl, el aumento de la creatinina es proporcional y las concentraciones de creatinina mayores a 5 mg/dl se consideran de importancia diagnostica grave. Niveles disminuidos se encuentran en la distrofia muscular. Notas La especificidad de la reacción depende del pH, temperatura y tiempo. Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse del fotómetro, sin que se alteren los resultados finales. El ácido pícrico es tóxico. Evite la inhalación, ingestión y contacto con la piel, lavar enseguida con polietilenglicol 400, con abundante agua.

La depuración de la creatinina endògena es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. La relación entre la concentración de una sustancia en orina y sangre es el mejor índice de función renal. Condiciones del paciente La muestra de sangre debe obtenerse durante el periodo de recolección de la orina. 8 ó 12 horas.  Guardar refrigerada y en frasco bien tapado.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 1. para asegurar un volumen urinario de 1 ml por minuto cuando menos. Técnica para la orina: Diluir 1:100 con Solución Salina 0. generalmente 24 horas aunque es posible reducirlo a 4. El control cronológico de la recolección de las muestras es esencial para la realización correcta de la prueba. porque nos da información de cómo esta la filtración glomerular. inclusive la muestra del tiempo fijado para la recolección. siempre y cuando los resultados se interpreten en forma comparativa y no absoluta. té y café durante las 24 horas anteriores a la recolección. La muestra de orina se recoge durante un periodo determinado. Muestra Técnica para el suero. .  El paciente debe abstenerse de ingerir carne.0 Página 32 de 83 DEPURACION DE CREATININA Generalidades Es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva.  Para la recolección de la orina el paciente debe fijar una hora cero.  Marcar en el frasco la hora de iniciación de la recolección. el mismo procedimiento de creatinina en suero. Descartar la orina de esa hora y a partir de entonces recoger todo el volumen de orina. Valores de referencia: Hombres: 98 – 156 ml/minuto Mujeres: 95 – 160 ml/minuto Limite de dilución: 500 mg/dl 2.  Debe seguir tomando agua.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. que la concentración de dicha sustancia aislada en sangre o en orina.9%.

Metodo de determinacion Longitud de onda: 546 nm (500-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25° C Medición: frente a blanco de reactivo 5. 4. el resultado se multiplica por 50. además producen creatininasas que destruyen la creatinina. 3. ya que los gérmenes producen variación en el pH promoviéndose así la conversión de creatinina en creatina. La concentración de creatinina debe determinarse antes de las 24 horas de recogida la muestra.0 Página 33 de 83  Interrumpir toda terapia diurética. La muestra de orina debe refrigerarse o agregarse un inhibidor bacteriano.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones de la muestra Muestra de suero libre de hemólisis fuerte y de ictericia (ya que una ligera hemólisis no afecta la determinación). Tecnica Pipetear: Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ Solución Trabajo Estándar Orina diluida Dilución de la orina * Hacer una dilución de la orina de 1: 50. 10 ml de orina + 490 ml de agua destilada. Calculo Creatinina en Orina* ________________ Creatinina en suero x Volumen (ml) _________ 1140 (Constante) .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . la cual no puede medirse por la reacción de Jaffé.

16 – 22 mg/Kg peso/24 h 85 – 125 ml/min. Interferencias Los mismos de la guía anterior.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . lo cual aumenta los niveles urinarios. Entre las causas de error están: mal cronometrado o recogida inadecuada de la muestra de orina. por lo que el verdadero valor de filtración glomerular esta por debajo de la depuración de la creatinina.2 mg/dl.0 Página 34 de 83 6. Correlacion diagnostica En enfermedades renales avanzadas la excreción urinaria de creatinina excede a la velocidad de filtración glomerular a causa de la secreción tubular. Notas Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse proporcionalmente según las necesidades del fotómetro. 1900 mg/24 h. 8.9 – 1.4 mg/dl. 75 – 115 ml/min. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Creatinina en orina Depuración de Creatinina: Mujeres Hombres Mujeres 0. la hidratación inadecuada del paciente. 0.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. que seria una fuente de error negativa.8 – 1. sin que se alteren los resultados finales. 21 – 26 mg/Kg peso/24 h Hombres 7. . ejercicio fuerte durante la prueba.

disminuciones se observan en pielonefritis crónica e hipertensión.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. La depuración de creatinina disminuye en personas de edad.N. . la depuración es menor que la filtración. ligeras La filtración glomerular normal es en un adulto de 125 ml/min.A.0 Página 35 de 83 El filtrado glomerular disminuye notablemente en G. en niños y personas de baja estatura por esto se hace necesario realizar la corrección del valor obtenido. y crónica.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .73/A para obtener el valor real de la depuración en estos pacientes. En las personas obesas la depuración esta alterada por lo tanto se hace necesario la corrección. Si la depuración plasmatica de una sustancia es mayor que la filtración glomerular debe interpretarse como que esta sustancia es secretada por el túbulo y si por el contrario. podemos concluir que esta sustancia es reabsorbida. multiplicando el resultado por 1.

La liberación de glucosa por el hepatocito mediante un mecanismo que se acelera al disminuir la glicemia sanguínea. Glucolisis: Llevar la glucosa-6-fosfato hasta piruvato para producir acétyl Co A (ciclo de krebs). 2. Glucogenolisis: Movimiento de glucógeno almacenado para producir glucosa-6fosfato. músculo en mayor proporción y también leucocitos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . en el tejido nervioso en muy poca cantidad). 1. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de la peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo-violeta usando la quinonemina como indicador.0 Página 36 de 83 GLICEMIA Generalidades Glucemia o glicemia: Este término se refiere a la presencia de la glucosa en sangre. Fundamento La glucosa de determina despúes de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. Metodo con desproteinización. Glucogenesis: Formación de glucógeno (hígado. La glucosa sanguínea proviene de dos fuentes: La más importante es la absorción intestinal de glucosa alimenticia que normalmente puede llevar los valores sanguíneos de glucosa hasta 138 -140 mg/dl. Metodo Prueba enzimática colorimétrica por glucosa. Gluconeogenesis: Formación de glucosa a partir de otro sustrato diferente al glucógeno ejemplo: aminoácidos. GOD-PAP.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. .

Condiciones del paciente No se requiere preparación dietética especial. a menos que el paciente consuma diariamente menos de 150grs. No presenta glucosuria positiva antes de dar la carga de glucosa.) 160-180 mg/dl. Muestra Sangre total.M. No tomar café. 5. de hidratos de carbono. incube a temperatura de 20 . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. ni haber fumado antes o durante la prueba. . suero o plasma 4. Tecnica Pipetear: BLANCO PATRON MUESTRA RVO. En el momento de la toma de la muestra el paciente debe estar sentado erguido.25°C por 10 minutos ó 5 minutos a 37°C. COLOR Blanco ---------1000λ Patron ---10λ ---1000λ Muestra ------10λ 1000λ 500 nm 546 nm 1 cm 20. Condiciones de la muestra La separación del suero debe hacerse dentro de los 20 o 30 minutos de la extracción. 6. La estabilidad de la muestra es de 8 horas.0 Página 37 de 83 3. Umbral renal (T. Ayuno de diez a doce horas. No realizar ejercicio antes o durante la prueba. Leer la absorbancia de la muestra y el patrón contra el blanco de reactivo. 25 ó 37 °C frente a blanco de reactivo Mezclar.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

T.).O. de dextrosa en 300 ml. Nota El tiempo máximo para ingerir la carga de glucosa oral es de 5 minutos.T.G. 100 gr. La prueba de tolerancia oral a la glucosa (P.G.T. Utilizar métodos de laboratorio previamente estandarizados y sueros control Diagnostico de diabetes mellitus El principal objetivo de diagnóstico es la indentificación de pacientes con riesgo de hiperglicemia sintomática de cetoacidosis diabetica (CAD) o coma hiperosmolarno no cetónico (CHNC) o de complicaciones clínicas tardías.tipo 2. Adulto < 115 < 140 Niño < 130 < 140 Diabetes mellitus Adulto >= 140 >= 200 Niño >= 140 >= 200 Intol. no Gestantes 2 horas postcarga.G. Carga de glucosa Niños: 1. A la glucosa Adulto 115 . Valores de referencia Criterios de diagnóstico para DM por PTOG Normal Ayunas P.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. En los pacientes asintomáticos el diagnóstico de DM se establece cuando se cumplen los criterios diagnósticos de los valores de glicemia recomendado por diferentes asociaciones o grupos de estudio de diabetes asï: National diabetes data group Basal >= a 140 mg/dl en dos ocasiones consecutivas sea en adultos o en niños. descartando aquellos pacientes que presentan fluctuaciones en el límite superior de la concetracion plásmatica normal.O. a partir de los cuales se empezara tomar los tiempos para la toma de las muestras asi: Gestantes 1-2 y 3 horas.75 gr de dextrosa por kilogra la prueba tamiz consiste en administrar la carga de dextrosa y tomar una muestra después de una hora post-ingesta.199 Niño 130 – 139 140 – 199 9. cuando se sospecha una diabetes a pesar de la ausencia de hiperglicemia en ayunas o sistomática.O.139 140 .M. Para la P.) tiene como finalidad la de descartar o de diagnósticar una diabetes mellitus tipo 2 (D.0 Página 38 de 83 8. que pueden no entrañar los riesgos asociados a la DM. por ejemplo en aquellos paciente que presentar trastornos clínicos .de agua.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl.G. Los pacientes con intolerencia a la glucosa pueden presentar mayor riesgo de hiperglicemia en ayunas o sintomatica. enfermedades endocrinas que deterioren la tolerancia a la glucosa o enfermedades hepáticas. 2. sudoración.. retinopatía y nefropatia.O. Los valores de glicemia posprandial pueden ir hasta 160 mg/dl. décima edición). anticonceptivos orales que contengan estrógenos sintéticos).G.T. ac.G. acompañados de una glicemia a cualquier hora mayor o igual a 200 mg/dl. Los criterios diagnósticos por P.O.N. solo son válidos para individuos sanos que no presentan infecciones.T. *Criterios diagnosticos reportados por el comite de expertos en el diagnostico y clasificacion de diabetes mellitus. La P. debe repetirse para corroborar el diagnóstico de DM.G. vómito.O.0 Página 39 de 83 que pudieran deberse a una DM no diagnósticada ejemplo: polineuropatía. Ayunas se define como la no ingesta calórica al menos por 8 horas. . No se debe realizar la P.T. Los sintomas clásicos incluyen poliuria. Valores normales Después de un ayuno de 10 a 12 horas los valores de glicemia deben estar ubicados entre 70-110 mg/dl (según el método utilizado).G.O. tampoco pacientes tratados con fármacos que alteren la prueba de tolerancia oral a la glucosa (tiazidas. polidipsia y pérdida de peso.T.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .G. renales o del S. o puede también revertir a la normalidad. enfermedades cardiovasculares o vasculares Cerebrales agudas. (Guillermo Farias quimica clínica. desmayos o palidéz durante la realización de la prueba. En la P.. a los pacientes que presenten naúseas.O.T.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.C. sintomas de diabetes... tanto en niños como en adultos..(dado el mayor riesgo de un exceso de diagnóstico de DM). etc. Niños: asintomaticos deben ser mas estricto en diagnóstico por P.T.O. por lo menos dos valores deben ser > = 200 mg/dl. pero en muchos casos la intolerencia a la glucosa no progresa. glucocorticoides. Nicotinico. Adultos: dos horas y en cualquier otro momento de la P.

El comité no recomienda la utilización de los niveles de hemoglobina glicada para el diagnostico de la diabetes. si bien los niveles de hemoglobina glicada presentan una distribución similar a la glicemia. las pruebas utilizadas para ella no estan estandarizadas. Los valores normales para la glicemia en ayunas.0 Página 40 de 83 3. por lo cual asignar un valor diagnostico es difícil. . por el momento solo continua como prueba para el control y no para el diagnostico. son: * Glucemia normal: Menor de 140 mg/dl. Diagnostico de hipoglicemia Depende si el paciente presenta manifestaciones del sistema nervioso central (S. 2 horas poscarga. se han establecido en 110 mg/dl. Se han establecido tres criterios para el diagnostico de diabetes. debe ser confirmado subsecuentemente por una glicemia en ayunas ≥ a 126 mg/dl. En la ausencia de hiperglicemia inequívoca con descompensación aguda. o una glicemia al azar ≥ a 200 mg/dl. 2 horas poscarga. Dos horas poscarga durante una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) mayor o igual a 200 mg/dl. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 126 mg/dl. La prueba de tolerancia utilizaba valores a la hora. Para ello se utiliza 75 gramos de glucosa anhidra disueltos en 300 cc de agua. Para la prueba de tolerancia a la glucosa. cada uno de ellos debe ser confirmado con una prueba posterior.C) inexplicadas o sintomas adrenergicos inexplicables. De acuerdo a los nuevos criterios solo se tiene en cuenta los valores a las 2 horas. una glicemia 2 horas postcarga ≥ a 200 mg/dl.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.N. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 200 mg/dl. Por ejemplo. hora y media y a las dos horas. * Disminución de la tolerancia a la glucosa: Entre 140 mg/dl y 200 mg/dl. Las categorias para la glicemia en ayunas quedan establecidas de esta foma: * Glicemia normal: Menor a 110 mg/dl. la razón para ello es la perdida de la primera fase de secreción de insulina a partir de esta cifra. * Hiperglicemia en ayunas: Entre 110 mg/dl y 126 mg/dl. síntomas con una glicemia al azar > de 200 mg/dl. las categorias.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . estos criterios deben ser confirmados por otra prueba realizada un día diferente.

Por lo general una glucosa plásmatica anormalmente baja se define menor de 50mg/dl en el varón. menor de 45mg/dl en la mujer.0 Página 41 de 83 En ambos casos para el diagnóstico se requiere valores plásmaticos anormalmente bajos.180 mg/dl sugieren la realización de una P. si se obtiene un valor anormalmente bajo. La mejoría inmediata de los sintomas del S. y en lactante y niños menor de 40mg/dl . propanolol etc.O.) Criterios diagnosticos para diabetes gestacional Ayunas >= 105 mg/dl 1 hora >= 190 mg/dl 2 horas >= 165 mg/dl 3 horas >= 145 mg/dl Normal: Hasta 135 mg/dl.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.M. se perfunde glucosa de inmediato. confirman el diagnóstico de hipoglicemia de ayuno o inducida por fármacos. tras un aumento de glucosa. Valores de glicemia > 180 mg/dl en más de una oportunidad son diagnósticos de D. Otros fármacos como salicilatos. de 3 horas con una carga de dextrosa de 100 gramos. sulfas que producen un 50% de las hipoglicemias. El diagnóstico debe completarse con valoraciones de insulina proinsulina y peptido C y también la busqueda de drogas que puedan estar ocasionando la hipoglicemia (insulina alcohol.. Anormales: Valores de glicemia entre 135 . El paciente con deterioro de la conciencia o crisis convulsiva debe efectuarse la glucosa con tirilla y gota de sangre obtenida al colocar un aguja para iniciar la perfusión de líquido. los cuales se corrigen al aumentar la glucosa sanguínea. (Se pueden encontrar valores menores de los expuestos en un ayuno de 72 horas).EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .G .C.T.N.G.

5. 4.0 Página 42 de 83 UREA 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Condiciones de la muestra Por acción bacteriana se puede perder la urea. orina diluida 1:1000 con agua destilada. La disminución de la absorbancia es proporcional a la concentración de urea dentro de los intervalos de tiempo dados. 3. Ya que la prueba cinética es muy rápida. 2.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones del paciente 24 horas antes de tomar la muestra. El amonio producido en esta reacción se combina con 2oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato-deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. . por lo tanto debe analizarse pocas horas despúes de recogida o conservarse en refrigeración. ha sido diseñada para ser realizada preferiblemente en analizadores. GLDH. Muestra Suero o plasma. el paciente debe llevar una dieta pobre en proteínas y 12 horas de ayuno total. Sueros lipémicos causan turbidez en la solución final. Fundamento La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir amonio y dióxido de carbono. La prueba ha sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima límite. Metodo Metodo completamente enzimático para determinación cinética de urea.

calcule la diferencia 8. 334 nm. 3 mmo1/1) de urea para suero o plasma y 200 g/L (330 mmol/L) para la orina. Valores de referencia Suero 10-55 mg/dl 1. Metodo de determinación Logitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 340 nm.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . repetir el ensayo y multiplicar el resultado por dos. 365 nm 1 cm 25°C. la muestra y la solución 1 deben pipetear en el fondo de los tubos de ensayo y mezclarse cuidadosamente. 30°C ó 37°C Lectura contra blanco de reactivo 7. Tecnica Pipetear Blanco ------1ml Patrón ---10 ul 1ml Muestra 10 ul ---1ml Muestra Patrón Reactivo Mezcle. . 7-9. El patrón. lea la absorbancia de la muestra y el estandar despúes de 30 segundos y lea nuevamente al minuto. Para concentraciones más altas mezclar un volumen de la muestra con un volumen igual de agua destilada.0 Página 43 de 83 6. 1 mmo1/1 Orina 20-35 mg/24 horas 333-583 mmo1/24 horas El método es lineal hasta 200 mg/dl (33.

nefritis aguada. bilirrubina hasta 60 mg/dl. 10. Cuando existe uremia los síntomas incluyen letargo. Determinacion de nitrogeno ureico El nitrogeno ureico se saca de dividir el valor de la urea por un factor que es 2.14. Los valores de la urea pueden disminuirse en alteraciones hereditarias de la síntesis de urea o cuando existe una ingesta inadecuada de proteínas. TBC renal. deterioro mental y confusión. o una enfermedad hepática grave. Interferencias La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl. triglicéridos hasta 2000 mg/dl. La anemia es un carácter prominente en la uremia crónica porque está deprimida la eritropoyesis. náusea y vómito. Correlacion diagnostica La urea se encuentra aumentada por encima de los valores normales en caso de insuficiencia renal u obstrucción de vías urinarias. convulsiones y coma. sacudidas musculares. El nitrógeno uréico de la sangre. Gota Crónica y en todas aquellas entidades donde el volumen del filtrado glomerular se ha reducido una quinta parte de lo normal.0 Página 44 de 83 9. glucosa hasta 500 mg/dl y ácido ascórbico hasta 30 mg/dl. el nitrógeno no proteico y la creatinina están elevados y los niveles sanguíneos de estas sustancias se emplean como índice de la gravedad de la uremia. . anorexia.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

La absorbancia de este complejo es proporcional a la concentración de proteínas en la muestra. 1. Estable 8 dias a 2-8 C. La fracción globulina se sintetiza especialmente en las células plasmáticas y tienen como misión principal fabricar anticuerpos. La cifra normal de las proteinas totales del suero está comprendida entre 6 y 8 mg/ ml encontrándose de 1 gramo menos en los pacientes que guardan cama por mas de dos semanas las proteínas totales están integradas por la fracción albúmina y bla fraccion globulina. Muestras. La priemera regula la presión osmótica coloidal de la sangre. 3. de donde se origianan el nombre de inmunoglobulinas. El ejercicio causa aumento de la concentración de proteínas en un 6 a 12%. El uso de torniquete no ha exceder los 30 segundos. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero en aproximadamente 0. transporta los lipidos originando los compuesos que se denominan. vitaminas liposolubles. lipo-proteínas y sirve de medio de transporte a multitud de elemntos como esteroides. interviene en el equilibrio ácido-básico. Suero y plasma heparinizado. .PROTEINAS TOTALES Generalidades. Evitar todo esfuerzo corporal intenso por lo menos 8 horas antes de la toma de la muestra. Condiciones del paciente La muestra ha de tomarse con 8 horas de ayuno. 4. Metodo Prueba colorimétrica fotométrica para proteínas totales (Biuret) 2. Fundamento Los iones cúpricos con las proteínas y peptidas en solución alcalina forman un complejo púrpura. Los anticoagulantes quelantes interfieren. aporta la nutricion celular. hierro.5 g/dl. cobre.

0 ml Muestra --------10 ul 1.0 ml 340 nm. La presencia de dextrano (utilizado como expansor del plasma) ocasiona una floculación de la mezcla de reacción que puede separarse por centrifugación sin que afecte los resultados. Interferentes La hemoglobina (0. 30°C ó 37°C frente a blanco de reactivo Mezcle. 334 nm ó 365 nm 1 cm 25°C. . Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Agua destilada Patrón proteina Muestra Reactivo 10 ul ------1. ABS Muestra ____________ X 80= mg/dL proteína ABS Patrón 7.2 g/L).0 ml Patrón ----10 ul ----1. Metodo de determincion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 6. La bilirrubina (15 mg/dl) La lipemia moderada no interfiere. Valores de referencia Suero: 65 – 80 g/L Plasma: 68 –83 g/L 8. lea la absorbancia de la muestra y estándar despúes de 30 segundos y lea exactamente al minuto despúes calcule la diferencia y multiplique por 80.5.

diarreas profusas. De la cifra total que integran las proteínas. fistulas digestivas etc. .5 y 5.9. Las cifras bajas generalmene corresponden a malnutricion. entre 3. Neoplasias.5 y 3g/ml a la globulina. vómitos. sudoracion excesiva. Se obtienen falsas hiperproteinemias. Afecciones hépaticas crónicas. quemaduras.5 g/ml corresponden a la albúmina y entre 1. Anemia persistente. tambien puede estar disminuida en: Nefrosis lipoidea. Edemas carenciales. Corelacion clinicopatologica Cuando hay hemoconcentración por shock.

Estable 8 dias. reabsorción tubular disminuida. La proteina presente en la muestra reacciona en medio ácido con el complejo Rojo rojo de pirogalol y el molibdato originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectofotometria. aumento de la filtración glomerular o alteraciónes en la composicion proteíca que la hace filtrar más facilmente. orina ocasional ó líquido cefalorraquideo. En caso de orinas muy turbias es conveniente centrifugarlas. 2. Tiene como mecanismo el aumento de la permeabilidad de las membranas glomerulares. Normalmente es de 40 a 80 mg con límite máximo. . Recoger la orina. Tambien conocida como albúminuria. medir el volumen y conservarla a 2-8 C. 3. Orina de 24 horas. Muestras.1 y Alfa –2. La albúmina constituye entre un 60 y un 90 % de la prteína excretada y el resto está por globulinas principalmente globulina Alfa. es la cantidad de proteína excretada por la orina. Es el indicador más importante de enfermedad renal complementado con el sedimento microscópico. Metodo Metodo colorimétrico cuantitativo para determinación de proteínas en orina y líquido cefalorraquideo. pero su dosificacion periódoca si valora el progreso o regresión de la lesión. 4. Fundamento. Condiciones de la muestra Se debe recoger orina de 24 horas u orina ocasional.PROTEINURIA Generalidades. 150/24 horas. La cantidad no permite valorar la gravedad de la afección. 1. cantidad no detectable por los sistemas habituales para dosificarla.

Tecnica Blanco ------1 ml patron 20 ul ---1 ml muestra ---20 ul 1 ml 580 nm. . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medicion: 6. Algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la reacción.5. 600 nm ó 620 nm 1 cm 37 °C frente a blanco de reactivo Patron Muestra reactivo Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37 °C leer la absorbancia contra el blanco Calculos: Proteinas de 24 horas: Muestra Patron x volumen x 100 Muestra Patron x 100 Proteina en orina ocasional: Proteínas en líquido cefalorraquideo: Muestra Patron x 100 7. Los conservantes para orina como ácido clorhídrico. Interferencias La hemolisis puede ser causa de resultados falsamente aumentados tanto en orina como en LCR. Valores de referencia Orina de 24 horas 30 – 140 mg/24 h (hasta 160mg/24h en mujeres embarazadas) Orina ocasional 25 mg/dl Líquido cefalorraquideo 15 – 45 mg/dl (en adultos de más de 60 años se extiende a 60 mg/dl) 8. ácido benzoíco o timol pueden causar resultados falsamente disminuidos..

. el embarazo. La determinación de proteínas es importante en la detección de patologías renales. la fiebre. viral o de otros origenes.9. El LCR es útil para evaluar la permeabilidad de la barrera hematoencefálica en muchas enfermedades inflamatorias o infecciosas del SNC. Correlacion diagnostica Hay condiciones fisiológicas o benignas deonde se puede observar un aumento en la excresión urinaria de proteínas como el ejercicio violento. hipotermia. como en la disfunción glomerular. como ocurre en la meningitis bacteriana.

LCR. en tanto que la GOT es una enzima binocular. la GPT se puede encontrar en plasma. La GPT es un enzima que también se encuentra en riñón. es decir. En los eritrocitos se encuentra la GOT soluble y en los leucocitos y reticulocitos están los dos tipos enzimáticos. estas enzimas están localizadas particularmente en el hígado. corazón. orina. Las transaminasas son enzimas que catalizan las reacciones de transferencia de grupos aminos de un aminoácido a un cetoácido. la GPT es una enzima exclusivamente citoplasmática.TRANSAMINASAS Generalidades El hígado contiene un gran numero de enzimas. Existen dos tipos de transaminasas. de todas ellas las de mayor importancia clínica son la fosfatasa alcalina (Pa). propiedades cinéticas e inmunológicas y a. para la síntesis de aminoácidos distintos a los originales. las transaminasas (GOT ó ASAT Y GPT ó ALAT) y la CGT (gamaglutamiltranspeptidasa o γGT). la transaminasa glutamicopirúvica ó Alaninoaminotranferasa y la transaminasa glutamicooxaloacética ó Aspartatoaminotransferasa . músculo esquelético pero en mayor concentración en el Hígado. y en eritrocitos pero en bajas concentraciones. corazón. que esta constituida por dos isoenzimas. una citoplasmática y otra mitocondrial. se van a diferenciar por su movilidad elctroforética. que la componen.a. etc. pH óptimo de acción. .

Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. Fundamento Metodo cinético para la determinación de la actividad de ASAT o GOT de acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Metodo Prueba liquiUV 2. 340 nm.ASPARTATO AMINOTRASFERASA (GOT) 1. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. Muestra Suero o plama con heparina o EDTA. 334 nm 1 cm 25. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 4. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. 30 ó 37°C frente a aire . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. 3. Sin activación por piridoxalfosfato. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 5.

Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos 8.9ml de solución salina y multiplicar por 10. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. en estos casos también se debe diluir. En casos de baja absorbancia es debido a que por ser una reacción enzimática se consume el NADH en la incubación. en las próximas 6-12h después de la oclusión de una arteria coronaria. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. el grado del aumento es proporcional a la . no se debe usar como anticoagulante.1ml mas 0. Correlacion diagnostica Los valores aumentados de esta enzima suceden cuando hay muerte en las células del miocardio (infarto al miocardio). La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática.7. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. Linealidad En caso de sobrepasar la linealidad diluir 0. Valores de referencia 25 ºC 18 U/L 15 U/L 30 ºC 25 U/L 21 U/L 37 ºC 37 U/L 31 U/L Hombres hasta Mujeres hasta 9. 10.

Los aumentos moderados se observan en las etapas finales de la cirrosis. . ictericias obstructivas. Las cifras de GOT también se ven aumentadas en lesiones agudas de las células hepáticas como en las hepatitis virales y lesiones por intoxicación con fármacos o tóxicos como tetracloruro de carbono. los valores máximos se ven en al cabo de 48h y recupera sus valores normales de 3-5 días. osea que una lesión grande puede hacer elevar los valores >200 unidades.magnitud del daño.

Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. Metodo Prueba liquiUV para alanina aminotransferasa. La transformación simultánea de NADH en NAD va seguida por una disminución de la absorbancia a 340nm. el ácido pirúvico producido por la enzima a partir de alanina y ácido alfacetoglutarato se transforma en ácido láctico por efecto de la deshidrogenasa láctica. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. 30 ó 37°C frente a aire . 340 nm. 334 nm 1 cm 25. Los métodos para la medición de GPT son muy semejantes a los de la GOT.ALANINA AMINOTRANSFERASA (GPT) 1. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 5. 3. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparina. Fundamento Es un método cinético para la determinación de la actividad de la GPT de acuerdo con las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC sin activación por piridoxalfosfato. 4. 2.

9. no se debe usar como anticoagulante. Si sobrepasa la linealidad diluir 1 + 10 y multiplicar por 11 8. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. .095% evitar contacto con mucosas y piel. Valores de referencia 25ºC 5-23U/L 5-19U/L 30ºC 7-32U/L 7-26U/L 37ºC 9-43U/L 9-36U/L Hombres hasta Mujeres hasta Precauciones El Buffer/sustrato esta compuesto con sodio de azida 0.7. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos Linealidad Hasta 154mmol/L o 9gm/L (según el Kit utilizado). Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. El oxalato inhibe la actividad de la enzima.

en contraste con la cirrosis hepática que se elevan poco las GOT y disminuyen las GPT. y la determinación de la fosfatasa alcalina son los de mayor utilidad para el diagnóstico de las hepatitis. Los niveles sericos de GPT se encuentran considerablemente aumentados en las lesiones agudas de las células hepáticas. CHE y GPT que son hepatoespecificas. los valores elevados de estas tres enzimas son característicos de las hepatitis agudas y enfermedades necrotizantes del hígado en contraste con la elevación de la fosfatasa alcalina y disminución de GOT y GPT que nos da indicios de una ictericia obstructiva. a veces es mayor el aumento que la de la GOT. en colestasis intra-hepática los niveles de GOT y GPT son análogos a los de la ictericia post-hepática. GOT. pero esto se debe posiblemente al daño del hepatocito secundario por alteración en la circulación. por esta razón se considera más específica la GPT en patologías del hígado.10. Nota Gran parte del éxito de obtener buenos resultados en este tipo de determinaciones enzimáticas esta en el correcto manejo del tiempo a la hora de la lectura (pues las enzimas actuaran hasta consumir el substrato). un buen lavado del material y no dejar de lado el uso de los controles. lo que nos puede ayudar a diagnosticar un infarto del miocardio teniendo muy en cuenta no llegar a confundirse con una hepatitis viral ya que en estas también aumentan. si la insuficiencia es aguda se pueden elevar los valores de 1000 a varios miles U/L. En la hepatitis viral se observa una elevación de ambas enzimas. se debe analizar todos los datos clínicos posibles para hacer un buen diagnostico y reconfirmar con enzimas como γGT. Los valores de La GPT. La determinación de la GOT y GPT se encuentran aumentadas en las insuficiencias cardiacas y como consecuencia del estasis Hepático. un buen trabajo organizado. Correlacion diagnostica Las cifras de GPT pueden estar también ligeramente aumentadas en el infarto al miocardio. En la post-hepáptica es difícil encontrar valores superiores a 200U/L. El análisis de estas dos enzimas es de útil ayuda para detectar daño a nivel del hígado y determinar una hepatitis ya sea viral o por tóxicos como drogas. En la ictericia hepática (hepatocelular) y la post-hepática se utilizan la GOT y GPT para diferenciarlas. .

3. sangre. La α . heces. intestino. orina No hay pérdida de la actividad en 5 días a 4°C. 2-cloro-4-nitrofenilmaltotriósido. Fundamento La prueba colorimétrica utiliza un nuevo substrato. Actua sobre las uniones 1-4 de las cadenas rectas del almidón y también sobre las uniones 1-6 glucosídicas de las cadenas ramificadas como las de amilopeptina y glicógeno. tejido adiposo. 1. músculo.AMILASA GENERALIDADES Las amilasas son enzimas contenidas en la secreción pancreática las cuales catalizan la hidrólisis de los polisacáridos tales como : El almidón. pulmón.amilasa es una endoenzima que se denominaasí porque todos los productos de la hidrólisis tienen la configuración (α) en el C1 de la unidad de la glucosa reductora.4-glucan-4-glucanohidrolasa. Metodo Prueba colorimétrica para amilasa alfa-1. . 2. bazo y corazón. amilopeptina. Este substrato reacciona directamente con la amilasa y no requiere de enzimas de restricción. hígado. La liberación de 2-cloro-4-nitrofenol del substrato y el resultante incremento de absorbancia por minuto es directamente proporcional a la actividad de la amilasa en la muestra. leche. trompas de falopio.Amilasa suele estar presente en el páncreas ( 200 mg/kg ) glándulas salivales. Muestra Suero o plasma heparinizado. semen. cerebro. riñón. orina. La α . glucógeno y sus productos parcialmente hidrolizados.

No utilizar citrato. 6. Valores de referencia Temperatura Suero. 2 y 3 minutos Y multiplicar por el factor correspondiente. Evitar la utilización del torniquete por más de 30 segundos. 400 nm ó 410 nm 1 cm 25 °C ó 37°C frente a agua destilada Mezclar bien incubar por un minuto a la temperatura deseada. Leer la absorbancia a los 1. oxalato o EDTA porque inhiben la actividad de la enzima.4. Condiciones de la muestra Puede utilizarse plasma heparinizado. plasma Orina espontánea Orina 24 horas 25°C 120 U/l 600 U/l 450 U/24h 37°C 220 U/l 1000 U/l 900 U/24h IFCC 28-100 U/l <460 U/l <410 U/l . Metodo de determinación Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 5. 8. Tecnica Temperatura Muestra reactivo factor 25°C 20 ul 1000 ul 9864 37°C 10 ul 1000 ul 24820 Hg 405 nm. Si la determinación excede el valor diluir la muestra con 500 ul de solución salina y 100 ul de muestra y multiplicar por 6. Se recomienda el uso de pipetas automáticas para la medición de las soluciones para evitar la contaminación de las mezclas con saliva. Condiciones del paciente No requiere ayuno.

se libera una gran cantidad de amilasay se produce una hiperamilasemia. . obteniendo niveles normales al 3 día.9. En la pancreatitis aguda. sus niveles aumentan en las primeras 24 a 36 horas. aumenta los niveles de amilasa. dato que se debe tener en cuenta cuando se dosifica en pacientes con posible pancreatitis aguda y han recibido este analgésico. dato útil para su diagnóstico. pero en la orina persisten hasta por 10 días. Cuando hay ruptura del embarazo ectópico. La úlcera péptica perforada. Corresponden a episodios agudos y sólo duran 3 días. 10. Correlacion diagnostica Los nivele elevados en el suero son siempre transitorios. Interferencias La aplicación de morfina produce contracción del esfinter de Oddi y eleva los niveles hasta 900 unidades.

comprendida entre 35 y 250 unidades. Este factor hay que tenerlo en cuenta y valorar el tiempo que ha durado la recolección. La dosificación urinaria a veces es más ventajosa que la hemática pues el suero solo se eleva durante unas 72 horas y en la orina persiste por varios días.AMILASURIA En condiciones normales se elimina una cantidad de amilasa por la orina. con cifras estremas en las 24 horas de 835 a 6150 unidades. insuficiencia renal y pancreatitis crónica. También se eleva en la parotiditis y litiasis parotidea y marcada disminución en su eliminación en el carcinoma pancreático. .

Condiciones de la muestra Puede trabajarse con plasma. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de formación del 4-nitrofenol. 4. El mejor anticoagulante es la heparina. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 405 nm 1 cm 37°C frente a vacio . 3. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno minimo de 8 horas. 5. Muestra Suero o plasma Es estable al menos por 7 días a una temperatura de 2 a 8 °C. liberando 4-nitrofenol. La utilización de EDTA inhibe la reacción. los valores obtenidos en plasma y suero siempre son iguales 6. medido a 405 nm. Fundamento La fosfatasa alcalina cataliza en medio alcalino la transferencia del grupó fosfato del 4-nitrofenilfosfato al 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP). El ejercicio puede alterar el resultado.FOSFATASA ALCALINA 1. pero este no debe contener floruros ni oxalatos. Metodo Metodo espectofotómetro con tampon AMP 2. Debe permanecer en reposos 15 minutos antes de la toma de la muestra.

enfermedad de Paget. por eso cuando el crecimiento disminuye sus niveles bajan a cifras similares al del adulto. 10. raquitismo.7. Interferencias Los anticoagulantes como el floruro. Cuando hay deficiencia de vitamina D. fracturas en consoliación y en metastasis óseas. en el abseso hepático. 8. por lo tnto esta bien establecida su relación con la formación osea. sus niveles aumentan. Valores de referencia Adultos: 26 – 117 U/l 9. oxalato y citrato interfieren en la reacción. hiperparatiroidismo. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 20 ul Leer la absorbancia inicial y efectuar lecturas cada minuto por 3 minutos y promediar los resultados y multiplicar por el factor 2764. También aumentan en la ictericia. . Correlacion diagnostica Se origina principalmete en los huesos y en el higado. EDTA. Las muestras hemolizadas interfieren por la fosfatasa alcalina eritrocitaria.

Fundamento El calcio en medio neutro. 6. La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de calcio existente en la muestra. Metodo Determinación cuantitativa para calcio 2.8-dihidroxi-3.CALCIO 1. No usar oxalato o EDTA como anticoagulante ya que interfieren en la determinación de calcio. Condiciones de la muestra Debe ser separado lo antes posible de los hematíes. forma un complejo de color azul con arsenazo III (ácido 1. Muestra Suero o plasma 4. 3. Orina efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 650 nm 1 cm 37°C frente a agua destilada . Condiciones del paciente No requiere ayuno.6-disulfo-2. 5. Antes de la recogida adicionar al contenedor 10 ml de ácido nítrico al 50% Diluir la orina ½ en agua destilada para el análisis y multiplicar por dos.7-naftalenen-bis (azo)-dibenzenarsónico).

2 mmol/l 50 – 300 mg/24h 80 –160 mg/24h . Niveles bajos de calcio pueden atribuirse ahipoparatiroidismo. si se utiliza material de vidrio debera lavarse con ácido nítrico diluido con agua destilada. 10.0 – 3. Trazas de los mismos. aumento de la retención renal. deficit de vitamina D. intoxicación por vitamina D. osteoporosis.0 – 13 mg/dl 2. pseudohipoparatiroidismo.7. 8.5 mg/dl 10 . El color es estable como minimo una hora. Una disminución de los niveles de albúmina causa una disminución del calcio en suero. el 99% se halla en los huesos. La mayoria de los detergentes destinados al uso del laboratorio contienen agentes quelantes. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul Estándar Muestra reactivo Mezclar e incubar 2 minutos. 8. sarcosidosis. invalidan la determinación. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo.5 – 10.6 mmol/l 2. tirotoxicosis e hiperparatiroidismo.1 –2.5 – 3 mmol/l 2. mal nutrición o mala absorción. Correlacion diagnostica El calcio es el mineral más abundante e importante del cuerpo humano. Valores de referencia Suero o plasma: Adultos Niños Recién nacidos Orina: Adultos Niños 9. La mayoria de las causas de hipercalcemia son debidas a enfermedades oncológicas. Interferencias Se recomienda utilizar material de plástico.12 mg/dl 8.

4. Diluida 1:10 con agua destilada acidificada hasta 3. La intensidad del color es proporcional a la concentración de magnesio. Condiciones de la muestra Utilizar material limpio 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Estándar Muestra reactivo . Condiciones del paciente No requiere ayuno 5. Muestra Suero o plasma heparinizado Orina. 3. 2. Metodo Metodo colorimétrico – calmagita.MAGNESIO 1. Fundamento El magnesio forma un complejo de color púrpura al reaccionar con la calmagita en medio alcalino.4 con HCL. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul 520 nm 1 cm 25 °C frente a blanco de reactivo.

Valores de referencia 1. hipertiroidismo. Correlacion diagnostica La hipomagnesemia implica manifestaciones similares a la hipocalcemia. tratamiento insulínico del coma diabetico. pielonefritis entre otros. glomerulonefritis. Niveles bajos son propios de trastornos gastrointestinales con malaabsorción. . 5 mg/dl 9.Mezclar e incubar por 5 minutos La coloración es estable por 30 minutos.6 – 2. tratamientos con diuréticos. perdida anormal de líquidos. Los niveles altos implican una depresión del sistema nervioso central y la excitabilidad neuromuscular. 8.

Condiciones de la muestra No se debe usar plasma. 5. 4. 6.25°C frente a blanco de reactivo Blanco Estándar muestra reactivo .. Tecnica blanco ---------1000 ul estándar ---10 ul ---1000 ul muestra ------10 ul 1000 ul 340 nm. La absorbancia de este complejo leido en Uvcercano es directamente proporcional a la concentración de fósforo. Muestra Suero. 2. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Condiciones del paciente No requiere ayuno. Metodo Análisis fotométrico UV para la determinación de fosforo. Fundamento El fosforo reacciona con molibdato en un medio fuertemente ácido para la formación de un complejo. Hg 334 nm 1 cm 20.FOSFORO 1. 3. Los anticoagulantes pueden causar resultados falsamente bajos..

fracturas evolutivas y la enfermedad de Addison. La contaminación del material de vidrio es la mayor fuente de error en este análisis.0 mg/dl 4. osteomalacia. Correlacion diagnostica Esta regulado por la hormona paratiroidea. infecciones de flora cocoide gram negativa en su forma septicémica y en la hipervitaminosis D. Valores de referencia Adultos Niños: 2. Interferencias Muestras ictéricas y lipémicas requieren un blanco de muestra.0 mg/dl 9. la cual controla la excreción urinaria y su movilización osea por medio de la vitamina D. Leer la absorbancia de la muestra frente a blanco de reactivo antes de 1 hora. Los valores elevados se encuentran en la insuficiencia renal crónica. Sueros lipémicos o hemolízados no deben ser usados. 8.0 – 7. . Por lo tanto se recomienda material de plástico. Las valores bajos se encuentran en el raquitismo. hipoparatiroidismo. la acromegalia. 10.Mezclar e incubar por lo menos 1 minuto a temperatura ambiente.5 – 5.

obteniéndose creatina y ATP. Normalmente los músculos estriados tienen una alta concentración. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. medido a 340 nm. En el infarto de miocardio sus unidades se elevan entre 3 y 6 horas. 1. Tiene su máxima concentración entre las 24 y 48 horas. 4.CREATINCINASA (Ck) Generalidades. apartir de la velocidad de formación del NADPH. empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. . 3. La concentración catalítica se determina. empezando a descender despúes de dicho tiempo. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK. Fundamento La cratina quinasa (CK) cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina. para retornar a la normalidad entre 3 y 6 dias despúes. despúes de iniciado. 2. lentamente. Método estándar modificado de acuerdo con las recomendaciones del cómite ECCLS. Metodo Prueba líquida UV activada por NAC creatin kinasa. y muy poca se encuentra en el miocardio y el cerebro (CK). Muestra Suero o plasma heparinizado o con EDTA.

25°C ó 30°C 50 ul 1000 ul durante unos Hg 365 nm. Tecnica Precalentar el reactivo de trabajo a la temperatura ambiente minutos. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio. A los 3 minutos. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7.5. Poner el cronómetro en marcha. se deducen las siguientes fórmulas para calcular la concentración catalítica: Macro: Micro: A/min x 4127 = U/L A/min x 3333 = U/L . 6. 30 ó 37°C contra aire Muestra Reactivo 37°C 25 ul 1000 ul Mezclar y transferir de inmediato a una cubeta. Considerando que el coeficiente de absorción molar del NADPH a 340 nm es 6300. anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto durante tres minutos. Insertarla en el portacubetas termotizado. Calculos. 340 nm o Hg 334 nm 1 cm 25. Condiciones de la muestra La muestra de suero o plasma para Creatina quinasa es estable al menos 7 días a 2-8 Centigrados. Comprobar que las diferencias entre absorbancias sean sensiblemente iguales.

e intervenciones quirurjicas elevan sus cifras ligeramente.8. . Correlacion diagnostica Se encuentra elevada en la distrofia muscular progresiva. Valores de referencia Temperatura de reaccion 25 °C 30 °C 37 °C Hombres U/l 10-80 15-125 24-195 Mujeres U/l 10-70 15-110 24-170 9. Interferencias La hemólisis 10. por aplicación de inyecciones y relajantes musculares. Traumatismos musculares. El valor cliníco está en una elevación manifiesta y su relación con el CK-MB y las otras enzimas que se alteran en el infarto.

las concentraciones máximas son a las 12-24 horas. la combinación de las cadenas origina la CK-MB. Debido a que la concentración de CK-BB en circulación es mínima. recuperándose los valores normales entre las 24 y 72 horas. Musculo esqueletico Cerebro Miocardio CK-MM. . o plasma heparinizado o con EDTA. reconociendose 3 isoenzimas. Cardíaco y lo hace progresivamente según su extensión y evolución clínica. CK-BB. se elevan desde las 3 hasta las 6 horas post-infarto. Un anticuerpo es incoroporado al reactivo el cual se une especificamente a la subunidad M. Metodo Prueba Humazym M-test Método por inmunoinhibición para CK-MB. CK-MB. Muestra Suero. la cadena M deriva su nombre del músculo esquelético y la B de Brain ( cerebro ). Tanto la enzima original CK como su isoenzima CK-MB. Fundamento La prueba se basa en una determinación enzimática de CK acompañada de un método de inmunoinhibición. la actividad remanentre multiplicado por el factor 2.CREATINCINASA FRACCION MB Generalidades. La CK-MB predomina en el miocardio y sus niveles se elevan cuando existe proceso necrótico del músculo cardíaco. tejido nervioso. inhibiendo la actividad enzimática de esta subunidad B. La CK-MB aumenta notablemente en el infarto. representa la actividad de la izoenzima CK-MB. Estudios electroforeticos demostraron que tiene dos cadenas M y B . que toman el nombre según el sitio donde predomina.

Mezcle e incube por 10 minutos a temperatura ambiente lea la abosorbancia y luego lea exactamente a los 5 minutos. Calcular la diferencia y multiplicar por el factor 8254. diluir el suero con NaCl 150 mmol/L. Si es superior.Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. 30°C ó 37 °C contra aire. HG 365 nm 1 cm 25°C. La CK-MB en suero es estable al menos 7 dias a 2-8 C. 340 nm. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK-MB Condiciones de la muestra La Concentracion de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Tecnica muestra Reactivo 40 ul 1000 ul Hg 334 nm. Valores de referencia 25 °C CK total hombres mujeres CK-MB >80 U/l >70 U/l >10 U/l 30°C >130 U/l >110 U/l >16 U/l 37°C >195 U/l >170 U/l >25 U/l La actividad CK-MB esta en un rango entre 6 y 25 % de la actividad de la CK total.

Esta aumenta notablemente en los infartos cardiácos.Correlacion diagnostica Presta una gran utilidad en los casos en que la CK se encuentra notablemente aumentada por causas ajenas al infarto y la CK-MB esta dentro de los límites normales. .

muestra reactivo Mezclar y leer la absorbancia después de 1 minuto y leer luego a los 1. Seperar el suero antes de los 30 minutos. Tecnica 25°C ó 30°C 20 ul 1000 ul 37°C 10 ul 1000 ul Hg 334 nm. 3. 5. Condiciones de la muestra No se recomienda congelar la muestra. 30°C ó 37 °C contra aire. 340 nm. por pérdida de la actividad. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Metodo Prueba líquida para deshidrogenasa láctica. 6. 2 y 3 minutos hacer un promedio y multiplicar por el factor 16345 .LACTATO DESHIDROGENASA (LDH) 1. 4. HG 365 nm 1 cm 25°C. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparinizado. Fundamento Método modificado basado en las recomendaciones del SCE. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. 2.

10. permaneciendo elevada hasta por 8 ó 14 días. . Valores de referencia temperatura adultos hombres mujeres Niños 12meses 25°C 120-240 U/l 30°C 160-320 U/l 37°C 225-450U/l IFCC <243 <244 Hasta 500 U/l 9. Interferencias El oxalato y el citrato interfieren en la reacción. Correlacion diagnostica En el infarto al miocardio sus niveles se aumentan entre las 24 ó 48 horas y tiene su máxima concentración a los 2 ó 4 días.8.

Fundamento La prueba emplea un conjugado de anticuerpo monoclonal anti cTnl y colorante en fase móvil. Como la muestra fluye por la almohadilla absorbente. 2. y anticuerpos anti-ratón IgG (cabra) en la línea de control. Condiciones de la muestra Las muestras que contienen partículas de turbidez pueden dar resultados inconsistentes. fijados en la línea de prueba. . 6. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas.TROPONINA 1. Tecnica Lleve el test a temperatura ambiente Dispense 2 gotas de la muestra enla ventana S. la troponina humana I se une al conjugado anti-cTnl-colorante para formar un inmunocomplejo. 3. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. 5. el cual se liga a los anticuerpos anti-cTnl en la línea de prueba y produce una línea de prueba rojo-violeta(T). Muestra Suero o plasma 4. El exceso de conjugado reacciona en la línea de control formando una segunda línea rojo-violeta de control C. Metodo Prueba inmunocromatográfica en un paso para la detección de la troponina I cardíaca humana en el suero o plasma. para demostrar el correcto funcionamiento. Seperar el suero antes de los 30 minutos. anticueropos anti-cTnl (ratón). Muestras lipémicas o hemolíticas no deben ser procesadas.

El resultado negativo no excluye la posibilidad de un infarto al miocardio. . Valores de referencia Negativo Positivo 8. Lea los resultados a los 15 minutos.5 ng/ml de troponina I.Evite la formación de búrbujas en la ventana. Debe considerarse repetir la prueba después de 12 horas de iniciado el dolor. 7. Las muestras positivas desarrollan una línea de prueba T en los primeros minutos. No lea después de 15 minutos para evitar errores. Interferencia La prueba no puede determinar niveles inferiores a 0.

Fundamento La formación de glicohemoglobina ocurre irreversible y progresivamente en los eritrocitos a través de los 120 días de vida normal de estas células. Dado que la concentración de glicohemoglobina en el eritrocito refleja el nivel promedio de glucosa en la sangre de las 4 a 6 semanas anteriores y es estable por la vida de los eritrocitos. 5. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 415 nm ó Hg 405 nm 1 cm 25°C frente a agua destilada. Condiciones del paciente Ayuno de 8 horas. 2. 3. la medición es proporciona una prueba de gran valor para evaluar el control a largo plazo de los pacientes diabéticos.HEMOGLOBINA GLICOSILADA 1. . Muestra Sangre total con EDTA. 6. Metodo Método rápido de separación por resina de intercambio iónico. Condiciones de la muestra No debe utilizarse muestras hemolizadas para no alterar el resultado. 4.

0 % >8. Tecnica Etapa de hemólisis Reactivo lisante 500 ul Mezclar e incubar por 5 min Determinación de HbA1 Pipetear 100 ul de hemolisado Tapar a 1 cm aproximadamente Mezclar por 5 min Leer la absorbancia Determinación de Hb total Pipetear 20 ul de hemolisado Mezclar cuidadosamente Leer la absorbancia HbA1= F X HbA1 muestra Hb total 8.5% Muestra 100 ul 15°C ó 25°C reactivo 5 ml de agua destilada .5 – 7. Correlacion diagnostica La dosificación de la hemoglobina glicosilada es importante en un diabético como la glucosa. Valores de referencia pacientes Metabolismo normal Diabéticos descontrolados 9. %HbA1 4.7.

Colegio mayor de Antioquia Insertos de las técnicas.BIBLIOGRAFIA • • Manual de quimica clinica. Elaboró Carolina Hoyos Velásquez Cargo: Bacterióloga FECHA: XXXXXXXXXXXX Revisó XXXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Aprobó XXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXX .

FECHA NOMBRE DE QUIEN LEE EL MANUAL FIRMA CARGO .

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