EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ - ANTIOQUIA

MANUAL DE QUIMICA CLINICA

Código: Versión: 1.0
Página 1 de 83

MANUAL DE QUIMICA CLINICA

ELABORADO POR: CAROLINA HOYOS VELASQUEZ BACTERIOLOGA COOPERATIVA COOMAN

LABORATORIO CLINICO EMPRESA SOCIAL DEL ERSTADO HOSPITAL SAN RAFAEL DE YOLOMBO YOLOMBO 2008

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ - ANTIOQUIA
MANUAL DE QUIMICA CLINICA

Código: Versión: 1.0
Página 2 de 83

ACIDO URICO

1. Metodo Análisis enzimático colorimétrico por ácido urico con factor aclarante de lípidos (LCF) (PAP) 2. Fundamento Determinación del Acido Urico por la reacción con la uricasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona por la acción catalítica de la peroxidasa con ácido 3,5-dicloro-2-hydroxybenzenesulfónico (DCHBS) y 4-aminofenazona (PAP) para producir un complejo rojo-violeta de quinonemina como indicador. 3. Muestras Suero o plasma con heparina o EDTA, orina. Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. 4. Condiciones del paciente Para determinación en suero. Antes: • Explicar el procedimiento al paciente. • Llevar estrictamente los siguientes puntos. • Suspender la medicación de drogas como: alopurinol, salicilatos, fenilbutazona, calmantes o analgésicos, ácido ascórbico (vitamina C), buscapina, diuréticos de la trazida, tioles libres, purinas metiladas, ácido homogentístico y altas cantidades de glucosa. • Dos días antes del examen evitar ejercicios violentos.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ - ANTIOQUIA
MANUAL DE QUIMICA CLINICA

Código: Versión: 1.0
Página 3 de 83

24 horas antes del examen, el paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas, mariscos y frijoles ya que contienen altos contenidos de purina. 48 horas antes de la venoclisis suspender el consumo de alcohol. Durante: Recoger 5 - 7 ml de sangre venosa en un tubo de tapón rojo. • Retomar nuevamente la ingesta de cualquier medicamento que pueda alterar los resultados. Después: • Aplicar presión en el sitio de punción. Para determinación en Orina: • Orina de 24 horas, teniendo en cuenta las indicaciones anteriores. Nota Las muestras lipémicas generalmente generan turbidez en la mezcla del reactivo con la muestra, lo que lleva a resultados elevados falsos. El LCF aclara completamente la turbidez causada por muestras lipémicas. Los valores en sangre total varían con la proporción de células en la sangre debido a que las células también contienen muchas más sustancias que interfieren en la reacción. 5. Condición de la muestra La sangre debe recogerse en tubos limpios, libres de metales pesados, ya que estos y los cianuros son inhibidores enzimáticos. La prueba no se ve influenciada por valores hasta 100mg/dl de hemoglobina o por valores de bilirrubina hasta 20mg/dl. La estabilidad de la muestra es: Temperatura ambiente  3 días Refrigerado  2 - 8°C por 5 días. Congelado  20°C, seis meses. En orina de 24 horas con preservativos y a temperatura ambiente → 2 días. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: 520nm, Hg 546 nm. Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20 - 25 °C ó 37°C Medir: frente a blanco de reactivos

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ - ANTIOQUIA
MANUAL DE QUIMICA CLINICA

Código: Versión: 1.0
Página 4 de 83

7. Tecnica Pipetear: Blanco Estándar Muestra Blanco ---------Muestra ------25λ Estándar ------25λ Solución Reactiva 1000λ 1000λ 1000λ Mezclar, incubar a 20-25°C durante 20-50 minutos, leer las extinciones frente a blanco de reactivos. Límite de dilución 15 mg/dl, con concentraciones superiores diluir la muestra 1 + 1 con solución de cloruro sódico al 0.9% y repetir la determinación, el resultado multiplicarlo por 2. 8. Valores de referencia Hombres: 3.7 - 7.0 mg/dl. Mujeres: 2.4 - 5.7 mg/dl. 9. Interferentes de la prueba El ácido ascórbico en concentraciones terapéuticas no interfiere en la prueba, pero en cantidades excesivas puede dar resultados elevados. Sustancias químicas con efecto antiuricosúrico. Acido etacrínico, furosemida, diuréticos de la benzotiacida. Sustancias que inhiben competitivamente la secreción tubular del urato. El p- aminohipurato, lactato, acetoacetato y B. hidroxibutírico. Por otra parte, ciertos fármacos como los salicilatos, fenilbutazona entre otros, inhiben la secreción de ácido úrico a dosis bajas, pero causan un efecto urosúrico intenso a dosis altas, debido a que estos fármacos pueden inhibir reabsorción tubular a niveles altos. El exceso del lactato también se asocia con la hiperuricemia en los casos de ejercicio fuerte y toxemia del embarazo.

Notas El etanol altera el metabolismo del ácido úrico aumentando la producción de urato y por la supresión de la excreción renal de ácido úrico. Esta última es el resultado

aterosclerosis. Las reservas de ácido úrico pueden superar los 30 g. Control de calidad • Cada vez que se determine ácido úrico correr con las muestras un estándar acuoso y dos suero control liofilizado. Correlacion clinico patologica Numerosas enfermedades. el exceso de lactato y el uso de diuréticos. . Nefropatía y a menudo nefrolitiasis.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Precipitación de urato monosódico en forma de depósitos (tofos) por todo el cuerpo.0 Página 5 de 83 del exceso de lactato producido por la oxidación del etanol a acetaldehído. por ejemplo carnes. cambios bioquímicos e incluso factores sociales y de comportamiento se asocian a modificaciones de la concentración de ácido úrico en el plasma. • Adecuada extracción y manipulación de muestras límites aceptables en los controles. Es de mucha importancia la determinación de ácido úrico. En los pacientes hipertensos la reducción del flujo sanguíneo renal y el aumento de la resistencia vascular pueden ser responsables de la disminución de la fracción de filtración del urato. excepto por el SNC. alteraciones fisiológicas. La ingestión de alimentos ricos en purinas. diabetes mellitus. El aumento del ácido úrico es mucho más frecuente y clínicamente más significativo que su disminución. La hiperuricemia tiene también una relación positiva con la hiperlipidemia. Ataques clínicos recidivantes de artritis. tejido subcutáneo y bolsas sinoviales. obesidad. la cetoácidosis. Entre las etiologías más comunes de hiperuricemia se cuentan el fallo renal. vísceras y levaduras producen una hiperuricemia leve. • Evaluación permanente de resultados. • Asegurarse que la lectura del blanco esté dentro del rango permitido. que inhibe competitivamente la secreción tubular renal del urato. 10. pues los valores altos son diagnóstico de “gota”. La gota es un trastorno del metabolismo de purinas o de la excreción renal de ácido úrico caracterizado por: Hiperuricemia.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . hipertensión. aunque presenta predilecciones por articulaciones. • Almacenamiento adecuado de los cartuchos reactivos.

Fundamento. Estable 1 mes a 2-8 grados y 1 semana entre 15 y 25 grados 4. despues de abierto debe evitarse la contaminación.fosforrobosil transferasa. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentracion de albumina en la muestra.fosfato La presencia de amonio en cualquiera de los reactivos. ya que esto puede aumentar la concentración de proteínas. 3.0 Página 6 de 83 Se han identificado dos defectos enzimáticos ligados al cromosoma sexual como etiología de la gota primaria: Una deficiencia de (H 6 PRT) hipoxantin guanin . Patron de albúmina y el RGT son estables hasta la fecha de vencimiento cuando se almacenan de 2 a 25 grados centigrados.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . ALBUMINA 1. anticoagulantes o agua destilada aumentan los valores. Una hiperactividad de fosforribosil . Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 8 horas y durante este periódo no hacer esfuerzoz corporales intensos. Condiciones de la muestra No usar plasma heparinizado porque se puede alterar el valor. . El verde de bromocresol forma con la albumina en buffer de citrata un complejo coloreado.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero. El uso del torniquete no ha de execeder los 30 segundos. 5. Metodo Prueba fotometrica colorimetrica para Albumina Metodo BCG 2. Muestras Suero ó plasma con EDTA ó heparina.

578 nm 1 cm 20 a 25 frente a blanco de reactivo por serie. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Hg 546 nm.0 Página 7 de 83 6. por lo que es conveniente no demorar la lectura.1 g/dl en hombres y mujeres. Valores normales 3. 7. Hemoglobina (1 g/L). Leer la absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco de reactivo.0 ml muestra ---10 ul 1.0 ml patrón 10 ul ---1. La reacción de la albúmina con el verde de bromocresol es inmediata. 9. El color es estable durante al menos 30 minutos. ABS muestra ____________ X 4 g/dl albúmina ABS patrón 8. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Patrón albúmina Muestra Reactivo blanco ---------1. Hay 3 factores que pueden disminuir su concentración: .0 ml Mezclar bien y dejar los tubos durante 5 minutos a temperatura ambiente. 10. Interferencias La prueba no es influenciada por valores de Bilirrubina hasta 20mg/d.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Otras proteinas reaccionan lentamente.8 – 5. Correlacion clinicopatologica.

El proceso de aglutinación provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentración de uALB de la muestra.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 2. Es estable por 7 días cuando se le añade azida sódica para prevenir posibles contaminaciones.0 Página 8 de 83 1) Pérdidas cuantiosas o frecuentes. 3) Por carencia de materia prima como en la hipoalimentacion. 3. La manifestacion clínica mas llamativa es el edema. son aglutinadas por uALB presente en la muestra del paciente. 5.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Metodo de determinacion Longitud de onda: 540 nm (530-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 37°C Medición: frente a agua destilada . albúminuria persistente. paracentesis. Edemas carenciales. y se debe ajustar su pH a 7. catabolismo excesivo). (hemorragias. Muestra Orina fresca. Fundamento Las partículas de látex con anticuerpos anti-albúmina humana. Otras: Trastornos pulmonares. 2) Por síntesis defectuosa como ocurre en la mayor parte de las hepatopatías.0 con NaOH/HCl 1 mol/L. Condiciones de la muestra La orina debe ser lo más fresca posible. y por comparación conocida se puede determinar el contenido de uALB en la muestra ensayada. MICROALBUMINURIA 1. Metodo Prueba de turbidimetría para la cuantificación de microalbúmina en orina humana. Anemia persistente Neoplasia nefrosis lipoidea. 4.

concentración que. así como de alteraciones cardiovasculares en pacientes que sufren diabetes mellitus insulinodependientes o bien insulina no-dependiente. Valores de referencia Hasta 15 mg/L 8.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . hemoglobina 10g/L. Interferencias No interfieren valores de Glucosa 2 g/L. La urea > de 1g/L y bilirrubina > 10mg/dl interfieren. siendo superior al valor normal.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. . esta aun por debajo de la concentración considerada como una proteinuria convencional. creatinina 3 g/L. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 7 ul Mezclar y leer la absorbancia frente a agua destilada y leer a los dor minutos después y se multiplica el valor por la concentración del calibrador. 7.0 Página 9 de 83 6. Correlacion diagnostica Se define la microalbúmina como la tasa de excresión de albúmina en orina entre 20 y 200 ug/min. La microalbuminuria es un marcador del riesgo de la nefropatía diabética.

0 Página 10 de 83 .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

La orina normalmente contiene una pequeña cantidad de urobilinógeno. Hem hem oxigenasa Biliverdina Biliverdina reductasa Bilirrubina. pero no de bilirrubina. Un 5% de los citocromos citoplasmáticos y mitocondriales hepáticos.0 Página 11 de 83 BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA. Generalidades La bilis se forma en el hígado y presenta muchos componentes. hígado y medula ósea). El nivel de la bilirrubina serica total. conjugación catalizada por la enzima Bilirrubin .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . colesterol. El riñón no excreta bilirrubina no conjugada puesto que es insoluble en agua y en general se encuentra unida a la albúmina. El metabolismo de la bilirrubina proviene en un 80% de la descomposición de los hematíes envejecidos en el sistema retículo endotelial (bazo.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El heme es catabolizado después para formar biliverdina que se transforma en bilirrubina. agua y bilirrubina. La bilirrubina total del suero incluye la bilirrubina libre o no conjugada (reacción indirecta) y una pequeña cantidad de bilirrubina conjugada o de reacción directa. bicarbonato. es útil para evaluar la extensión y el progreso de la ictericia. La bilirrubina conjugada se excreta después por las células hepáticas hacia los canalicemos intrahepáticos. El examen de la orina para los pigmentos biliares (bilirrubina) y urobilinógeno se emplea en la investigación de la ictericia. hasta las células hepáticas en donde es conjugada con el ácido glucoronico. que acaban conduciéndola a los conductos hepáticos. el conducto biliar común y el intestino.transferasa. La hemoglobina es liberada desde los hematíes y descompuesta en moléculas de Heme y globina. esta solo aparece cuando la concentración en plasma se encuentra aumentada y siempre es de bilirrubina conjugada. y el otro porcentaje de los eritrocitos defectuosos destruidos en la medula ósea antes de ser liberados. fosfolípidos. incluyendo sales biliares. por tanto no atraviesa la membrana glomerular. Esta forma de bilirrubina se denomina no conjugada (indirecta) que es transportada en el plasma en forma libre unida a la albúmina.glucoronil . .

Debe procesarse la muestra el mismo día. Muestra Suero o Plasma con heparina. de que parte de la bilirrubina reacciona directamente con el reactivo de Erlich. Evitar muestras hemolizadas. Fundamento La Bilirrubina reacciona con al ácido sulfanílico diazotado (DSA) formando un color rojo. alajada de la luz. 4. El uso de torniquete no debe prolongarse más de 30 segundos. Condiciones de la muestra No agitar el tubo. Metodo Método modificado de Jendrassik/Gróf.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La absorbancia de este color a 546 nm es directamente proporcional a la concentración de bilirrubina en la muestra.0 Página 12 de 83 La designación de Bilirrubina como directa e indirecta deriva de observaciones. llevadas a cabo por Van Den Berg en 1913. Bilirrubina total = bilirrubina directa + bilirrubina indirecta. y deben estar protegidas de la luz. 3. Condiciones del paciente Reposo de 15 minutos antes de la toma de muestra. . 5. El ayuno prolongado produce aumento de bilirrubina ya que parte de esta se almacena en el tejido adiposo y al suceder la lipolisis se libera y sale a la circulación. Ayuno de ocho horas. 1. Los glucoronidos de la bilirrubina solubles en agua reaccionan directamente con DSA mientras la bilirrubina indirecta conjugada con albumina reacciona sólo en la presencia de un acelerador. Mencionar en el volante del laboratorio cualquier fármaco que pudiera afectar los resultados de la prueba. 2. ya que en caso contrario los resultados de la prueba podrían ser inexactos. Proteger la muestra de sangre de la luz brillante. mientras que la otra hay que adicionarle alcohol. La muestra es estable por 3 días a una temperatura de 2 a 8 grados.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

Leer la absorbancia de la muestra frente al blanco.. Muestra 1 ml 1 gota Reactivo DBR Reactivo DNR Mezclar cuidadosamente e Incubar por 2 minutos..0 Página 13 de 83 6. Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente exactamente por 5 minutos. Leer la absorbancia frente al blanco.. Muestra 1 ml 1 gota 546 nm 1 cm 20 a 25 grados C frente a blanco de muestra. .. Reactivo TBR Reactivo TNR Mezclar cuidadosamente e incubar por 5 minutos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7... Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min. Tecnica Bilirrubina total Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Bilirrubina directa Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

si la concentración es mayor de 25 mg/dl. salicilatos y vitamina A.1 .20.12. La ictericia es una coloración amarillenta de los tejidos corporales (piel.1 . obstructivos y prehepáticos. si se necesita debe refrigerarse por pocos días (3 días a 2-8 °C) protegida de la luz.B. Correlacion diagnostica La determinación de bilirrubina total es útil para evaluar la extensión y progreso de la ictericia en problemas hepatocelulares. etc.0 mg/dl o 5. debe procesarce la muestra lo más rápido posible.1. Bilirrubina indirecta: 0.2 . cafeína.0 Página 14 de 83 8.0. Linealidad La prueba es lineal hasta 25 mg/dl.8 mg/dl o 3. Estabilidad No es muy estable. diuréticos. por lo tanto. diluir la muestra 1 + 4 con solución fisiológica y repetir la prueba. antibióticos (Eritromicina). total .3 mg/dl o 1.1 . causada por niveles sanguíneos de bilirrubina anormalmente altos. Entre los fármacos que pueden causar niveles aumentados de bilirrubina total se incluyen: Esteroides. 10. antipalúdicos.0 umol/l. directa. ácido ascórbico. anticonceptivos orales.1 umol/l. 11.0 umol/l. el color amarillo se aprecia cuando la bilirrubina serica total . Bilirrubina directa: 0. morfina. penicilinas y salicilatos (dosis elevadas). Multiplicar el resultado por 5. El almacenamiento no es conveniente. se altera rápidamente con la luz.5 umol/l. Bilirrubina indirecta = B.1 . Bilirrubina total en el recién nacido: 1 a 12 mg/dl ó 17. Para obtener la concentración de la Bilirrubian indirecta se resta o establece la diferencia de la concentración de la Bilirrubina total y Bilirrubina directa. Valores de referencia Bilirrubina total: 0. membranas mucosas y escleróticas). 9.5.4 . anabolizantes.17.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. La hemólisis de la sangre y la lipemia pueden producir resultados erróneos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .7 . Entre los fármacos que reducen los niveles de bilirrubina total se incluyen barbitúricos. Interferentes La exposición prolongada (más de 1 hora) a la luz solar directa o artificial puede causar disminución de la bilirrubina en un 50%.0.

Ictericia post .  Destrucción prematura de eritrocitos defectuosos. atresia de conductos. talasemia intoxicación por plomo. No hay bilirrubinuria. Insuficiencia cardiaca congestiva. Causas:  Obstrucción intrahepática: debido a obstrucción por fármacos.  Síndrome de Gilbert  Recién Nacidos. Ictericia pre – hepatica Hay aumento de la bilirrubina indirecta. indirecta o estar normal y la bilirrubina total aumentada. enfermedad drepanocitica. . Cirrosis. defecto que puede ocurrir en cualquier fase del metabolismo de la bilirrubina desde su formación hasta su excreción intestinal. virica o alcohólica. Causas: Shock por hipoxia. hepatitis aguda. Síndrome de Cliger .0 Página 15 de 83 supera los 2. policitemia. Hepatitis viral. etc.  Hiperbilirrubinemia por derivación.hepatica o colestasica Hay aumento de bilirrubina directa y se presenta Bilirrubinuria. Ictericia hepatocelular Hay aumento mayor de la bilirrubina directa y puede haber aumentos menores de B.Najjan I y II.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. La ictericia se debe a un defecto en el metabolismo o la excreción normales de bilirrubina. hormonas esteroideas.5 mg/dl. alcohol y tóxica.  Cirrosis por alcohol.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Eritropoyesis ineficaz acelerada: Anemia megaloblástica. Causas: Metabolismo aumentado del Heme: esferocitosis hereditaria. En general hay bilirrubinuria. cirrosis biliar primaria. tumores metastásicos etc.

por edema en la cabeza del páncreas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . vesícula biliar.0 Página 16 de 83  Colestasis extrahepática o quirúrgica: debido a carcinoma en conducto. páncreas o ampolla de Vater. . cálculos biliares. Nota La bilirrubina directa diferencia la ictericia Pre-hepática de la hepatocelular y obstructiva y la bilirrubina indirecta hace la diferenciación entre la hepatocelular obstructiva y las Pre-hepáticas.

pero sí se requiere tener un concepto claro de cómo están incidiendo los lípidos en el aparato circulatorio. HDL. En el estudio del perfil lipídico mínimo se deben tener en cuenta los siguientes parámetros: Aspecto del suero: se realiza la prueba en frío en caso de obtener sueros lechosos. triglicéridos. fosfolípidos y ácidos grasos libres. se encuentran en el plasma como lipoproteínas. Triglicéridos HDL colesterol VLDL colesterol: se evalúa mediante la formula trigliceridos/5. cuando estos son < 400 mg/ml.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . se debe tener un estudio fraccionado de las lipoproteínas que es lo que se conoce como perfil lipídico. Transportado principalmente por LDL. esteres de colesterol.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 17 de 83 PERFIL LIPIDICO MINIMO Generalidades de lipidos Los lípidos constituyen la principal reserva energética de los seres vivos y también forman parte de la membrana celular y regulan la actividad de la célula y tejidos. Todos estos lípidos con excepción de los ácidos grasos que están ligados a la albúmina. Perfil lipidico minimo El dato del colesterol total y los triglicéridos da una información global de los lípidos que circulan en el organismo. El colesterol total del cuerpo: comprende el colesterol libre y esterificado. 30% libre. Aspecto uniformemente lechoso significa presencia de triglicéridos endógenos (VLDL). El aspecto del suero no indica que el paciente este normal. significa presencia de triglicéridos exógenos (quilomicrones). 70% esterificado. se coloca el suero durante 12 horas en refrigeración (4ºC) esto con el objeto de ayudar a clasificar las trigliceridemias así:  Capa cremosa en la superficie y nadante transparente. LDL colesterol: se determina con la formula de Friedewald . IDL y VLDL. Los lípidos totales están compuestos por: colesterol libre. porque valores de colesterol aumentados no producen ninguna turbidez.  Capa cremosa en la superficie y nadante turbio significa triglicéridos exógenos y endógenos (quilomicrones y VLDL).

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Interpretacion del perfil lipidico mínimo Lípido mg/dl Colesterol Total LDL Colesterol HDL hombres HDL mujeres Trigliceridos Indice arterial: Deseable <200 <130 >35 >45 <200 Hombres <=5 Mujeres <=4.0 Página 18 de 83 LDL C = CT. Cifras superiores establecen un alto riesgo de enfermedad coronaria. Indice arterial se determina mediante la formula CT/HDLC ö LDLC/ HDLc.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .(VLDL C + HDL C ). .5 Riesgo potencial 200-239 130-159 25-35 40-45 >200 Riesgo alto >=240 >=160 <25 <40 >200 Estas cifras nos indican que la arteriosclerosis se esta verificando en forma normal.

5. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. se deben seguir los requerimientos que para este se indiquen. Extraer 5-10 ml de sangre en un tubo seco. 6. . 4. Medición: frente a blanco de reactivo. Anotar cualquier fármaco que pueda modificar los valores de Colesterol.0 Página 19 de 83 COLESTEROL TOTAL 1. Separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción. 3. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. Fundamento El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para colesterol con factor aclarante de lípidos (LCF) CHOD-PAP 2. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. El indicador es la quinonemina formada por el peróxido de hidrógeno y 4aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa. para evitar la redistribución del Colesterol entre las diversas lipoproteínas. Muestra Suero o plasma con heparina o EDTA.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Condiciones del paciente Esta prueba no necesita de ayuno pero como generalmente se realiza con el resto del perfil lipídico. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba.

8. Tecnica Pipetear Blanco ---------1000 µl Estándar ---10 µl ---1000 µl Muestra ------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Rvo Color Mezclar. Evitar el contacto con los reactivos ya que son muy corrosivos. bloqueadores beta-adrenérgicos. Hay fármacos que elevan los niveles de Colesterol como: Hormona adrenocorticotrópica. Colestipol. Quelantes de las sales biliares.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Nitratos. o 5 minutos a 37 grados C. Allopurinol. Adrenalina. ni de Bilirrubina menor a 5 mg/dl. Corticosteroides. sulfamidas.200 mg/dl < 220 mg/dl Sospechoso mayor de 220 Elevado mayor de 260 9. Niaciana. incubar 10 minutos a 20 ó 25 grados. Notas El test no se afecta con valores de hemoglobina inferiores a 200 mg/dl. Diuréticos tiacídicos. . Lovastatina (Mevacor). Anticonceptivos orales. Eritromicina. Colchicina. RECIEN NACIDOS LACTANTES NIÑOS ADULTOS/ ANCIANOS 53 – 135 mg/dl 70 – 175 mg/dl 120. Esteroides anabólicos. Interferencias La Ovariectomía aumenta los niveles de Colesterol. Vitamina D.0 Página 20 de 83 7. Captopril. Valores de referencia Varían con la edad y el laboratorio. Neomicina (oral). Hay otros que disminuyen los valores como: Andrógenos. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. Isoniacida. Liotironina (Cytomel).

Estrés. Diabetes Mellitus descontrolada. Hiperlipemias. Enfermedad hepática. nefrósis. . Para concentraciones mayores diluir la muestra con solución salina al (0. Correlacion diagnostica  Niveles sospechosos: 220 mg/dl ó 5. Para la técnica se debe montar un control Normal y uno Patológico.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 10.7 mmol/l  Niveles superiores: 300 mg/dl Necesitan tratamiento. Hipertensión. Hipotiroidismo. Control de calidad Hacer control periódico a equipos y reactivos para evitar resultados falsos positivos ó falsos negativos. Medicación hipocolesterolemiante. Colestasis hepática. Síndrome nefrótico. multiplicar el resultado por 3. Cirrosis biliar. 1 + 2 y repetir la determinación. Dieta rica en Colesterol.9%). aterosclerosis. Niveles disminuidos en: Sepsis. Anemia hemolítica. Xantomatosis.7 mmol/l  Niveles elevados: 260 mg/dl ó 6.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Infarto de miocardio.0 Página 21 de 83 Muestras lipémicas usualmente generan turbidez en la muestra que se va a analizar. Desnutrición. embarazo. Anemia perniciosa. Resultados anormales Niveles aumentados en: Hipercolesterolemia. Mala absorción. generando resultados falsamente elevados 9. Hipertiroidismo. Linealidad El test es lineal hasta una concentración de Colesterol de 750 mg/dl (19.3 mmol/l).

Medición: frente a blanco de reactivo . 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. 4. Fundamento Los quilomicrones. Condiciones de la muestra La muestra debe separarse del coagulo dentro de las dos horas de la extracción y conservarse a 4ºC a menos que se analice de inmediato. el sobrenadante contiene las HDL que se van a determinar. Abstenerse de no ingerir alcohol por 72 horas antes de la toma de la muestra (no es necesario). VLDL y LDL se precipitan por adición de ácido fosfotúngstico y cloruro de magnesio. HDL es estable en la muestra de suero durante 7 días a 4ºC o durante 4 meses a –20ºC. Debe señalarse que si bien la falta de ayuno no afecta los niveles de HDLc sanguíneo.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones del paciente Ayuno de 12-14 horas previas a la extracción de sangre.0 Página 22 de 83 COLESTEROL HDL 1. en la mayoría de las personas la lipemia posprandial interfiere con muchos de los métodos analíticos. Metodo Colesterol precipitnte.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 2. 3. Muestra Suero o plasma con anticoagulante EDTA o heparina. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. 5. Despúes de centrifugar. 6.

El ácido ascórbico disminuye los valores. Notas El sobrenadante debe ser claro. .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El resultado se multiplica por dos. incubar por 10 minutos a temperatura ambiente. Precipitación pipetear muestra precipitante Macro 500 ul 1000 ul Micro 200 ul 500 ul Mezclar bien. observando un sobrenadante turbio. Leer la absorbancia de la muestra y el estándar frente al blanco de reactivo antes de una hora. se hace una dilución 1: 1 con solución cloruro de sodio al 0.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 23 de 83 7. B. Despúes de centrifugar. Tecnica A. Limite de dilución 310 mg/dl. Determinación Agua destilada Estándar Sobrenadante Reactivo de color Blanco 100 ul ------1ml Estándar 100 ul ---1ml Problema ---100 ul 1ml Mezclar. en ese caso. En las muestras con un contenido de triglicéridos altos se pueden presentar precipitaciones incompletas de las lipoproteínas o flotación por parte de las mismas sobre él liquido. Centrifugar por 2 minutos a 10000 rpm ó 10 minutos a 4000 rpm. separar el sobrenadante claro del precipitado dentro de 1 hora y determinar la concentración del colesterol HDL con el reactivo de Colesterol total.9% y se repite la precipitación de la muesta diluida. incubar todos los tubos a temperatura ambiente por 10 minutos ó a 37ºC por 5 minutos.

hipertriglicéridemia. Valores de referencia Mujeres > 45mg/dl Hombres > 35mg/dl 9. Se observa en: mayor producción de Apo I y Apo II y actividad física fuerte. . sedentarismo. La LDL juega un papel muy importante en el funcionamiento arterial y por esto debemos tratar que el organismo tenga estrictamente la cantidad necesaria que requieren sus funciones. deficiencia familiar de Apo I y Apo II. Correlacion diagnostica La HDL contrarresta la acción nociva que puede tener la LDL sobre nuestro organismo. Resultados Anormales. deficiencia de LPL 1 con afectación del metabolismo de quilomicrones y VLDL. Niveles aumentados de HDL correlacionan con disminución en el desarrollo de enfermedad cardiocirculatoria. complementada con un nivel de HDL lo más elevado posible. para evitar la arteriosclerosis prematura. Niveles disminuidos de HDL correlacionan con riesgo aumentado de enfermedad cardiocirculatoria.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 24 de 83 8. obesidad. al evitar la arteriosclerosis excesiva porque remueve y elimina a través de la bilis cantidades considerables de LDL en forma de ácidos biliares y esteroides neutros. siendo esta la mejor forma de luchar contra este mecanismo fisiológico.

Notas La lipemia. Es importante describir el aspecto del suero. Extraer 5-10 ml de sangre en tubo seco y separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción. la hemólisis hasta 10 mg/dl ó 170 mmol/l. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para triglicéridos con factor aclarante de lípidos. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba. Los Triglicéridos permanecen estables 3 días a 4ºC. 4aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa. 3. 5. Los volúmenes de la reacción sugeridos se pueden modificar sin ningún cambio en los cálculos.0 Página 25 de 83 TRIGLICERIDOS 1. la temperatura de 25ºC permite la liberación de glicerol de los fosfolipídos y produce un incremento aparente del valor de los Triglicéridos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. metabólitos y una serie de fármacos de uso común NO interfieren con el método. El indicador es Quinineimina formada a partir de peróxido de hidrógeno.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . que consiste en . No hacer ejercicio fuerte antes de la prueba. Condiciones del paciente El ayuno debe ser entre 12 y 14 horas. para evitar la redistribución de los Triglicéridos entre las diferentes lipoproteínas. No consumir grandes cantidades de Carbohidratos y grasas 48 horas antes de la prueba. Muestra Suero o plasma heparinizado o palsma con EDTA 4. Fundamento Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasa. GPO-PAP 2. Antes de procesar la muestra se debe observar y anotar el aspecto del suero ya que si este está lechoso. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. se le debe hacer la prueba en frío.

25 ó 37 grados C Medición: frente a blanco de reactivo 7. Los Triglicéridos no permanecen en el suero a 25ºC. Linealidad El método es lineal hasta 1000 mg/dl (11. Tecnica Pipetear: Blanco ------------1000 µl Estándar ---10 µl ------1000 µl Muestra ------10 µl ---1000 µl Control ---------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Control Reactivo Mezclar. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20. e incubar por 10 minutos a 25ºC o por 5 minutos a 37 grados C. Valores de referencia EDAD 0 – 5 años 6 – 11 años 2 – 15 años 16 – 19 años Adultos / ancianos HOMBRES 30 – 86 mg/dl 31 – 108 mg/dl 36 – 138 mg/dl 40 – 163 mg/dl 40 – 160 mg/dl MUJERES 32 – 99 mg/dl 35 – 114 mg/dl 41 – 138 mg/dl 40 – 128 mg/dl 25 – 135 mg/dl .0 Página 26 de 83 colocarlo en la nevera por 12 horas.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Estabilidad de la reacción 1 hora. luego de las cuales se observa las características que presenta el nadante y el sobrenadante. Metodo de determinacion Longitud de onda: 500 nm. 6. con solución salina al 0. repetir la determinación y multiplicar el resultado por 6. 8.9%. leer con Blanco de reactivo.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Para concentración superior diluir la muestra 1+5.3 mmol/l) de Triglicéridos. debido a que fácilmente se libera el glicerol. a 4ºC son estables por 3 días.

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Estrógenos y anticonceptivos orales. Disminuyendo los valores Acido ascórbico. Cirrosis alcohólica. Infarto de miocardio. Síndrome nefrótico. Interferencias Elevando los valores Colestiramina. Nota: Los trigliceridos elevados afectan el cálculo de las LDL. por lo tanto cuando esto sucede las LDL no se deben reportar. Niveles disminuidos en: Síndrome de mala absorción. 10. Embarazo. Clofibrato y colestipol. Enfermedad con almacenamiento de glucógeno. Desnutrición. Correlacion diagnostica Niveles aumentados en: Hiperlipemias. Diabetes mal controlada. Dieta rica en carbohidratos. Hipertiroidismo. Asparraginasa. Hipotiroidismo. Riesgo de enfermedad coronaria y vascular.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . .0 Página 27 de 83 9. Hipertensión.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ - ANTIOQUIA
MANUAL DE QUIMICA CLINICA

Código: Versión: 1.0
Página 28 de 83

CREATININA

Generalidades Sus aumentos suelen ser proporcionales con respecto a los de la urea, aun cuando en general son más tardíos. Tiene particular interés diagnostico y pronóstico en los siguientes casos:  Nefropatías: Cuando en una insuficiencia renal con uremia, se observan cifras superiores a 5mg/100ml, él pronostico es fatal a corto plazo. Esto solo sucede en las fases avanzadas, ya que en las precoces, dada la facilidad de eliminación de la creatinina solo aumentan el ácido úrico y la úrea. En las nefritis agudas generalmente no hay elevación; en los casos en que existe (40%) es un cambio reversible y de escaso valor pronostico. En las nefrósis por tóxicos (Hg y Ag.) es donde se observan mayores elevaciones; en la insuficiencia cardiaca avanzada puede originarse una retención discreta o moderada de creatinina aunque no exista verdadera nefropatía.  En obstrucciones urinarias (Afecciones de próstata, vejiga, uréter, etc.) y en la anuria refleja (cálculos uretrales), se producen así mismo elevaciones marcadas de creatinina incluso 30 mg o más, igualmente reversibles con la reparación de la obstrucción.  En el gigantismo y acromegalia se observan discretas elevaciones. Cada 24 horas se transforma un 2% de creatina en creatinina. La cantidad de creatinina por unidad de masa muscular es constante y por lo tanto la degradación espontanea es constante. Como resultado de este fenómeno la concentración plasmatica de creatinina es estable y varia en menos de 10% diario en individuos normales. 1. Metodo Reacción de Jaffe Prueba fotométrica colorimértica para mediciones de punto final desproteinización.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ - ANTIOQUIA
MANUAL DE QUIMICA CLINICA

Código: Versión: 1.0
Página 29 de 83

2. Fundamento La creatinina en solución alcalina forma un complejo coloreado rojo-naranja con ácido picrico. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la creatinina en la muestra. 3. Muestra Suero o plasma heparinizado u orina 4. Condiciones del paciente La muestra de sangre no requiere ayuno previo ya que la excreción de creatinina depende muy levemente de la alimentación y de la diuresis. Por lo menos 8 horas antes del examen no realizar esfuerzos corporales intensos. 5. Condiciones de la muestra La muestra de suero para creatinina es inestable a temperatura ambiente, refrigerada de 2 – 4 ºC por 24 horas. Congelada a –20 ºC es estable por 6 meses La creatinina puede ser determinada en cualquier líquido biológico, pero las muestras mas usadas son suero, plasma y orina. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 546 nm (500-550 nm) 1 cm 25° C frente a blanco de reactivo

7. Tecnica Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ

Solución Trabajo Estándar Suero

Mezclar y poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia a los 30 segundos y a los 90 segundos. A2-A1= Creatinina

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ - ANTIOQUIA
MANUAL DE QUIMICA CLINICA

Código: Versión: 1.0
Página 30 de 83

8. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Mujeres Hombres 0.5 – 1.0 mg/dl. 0.7 – 1.2 mg/dl.

Estos valores están influenciados por el sexo (siendo menor en la mujer), masa muscular del individuo. 9. Interferentes de la muestra y la reaccion • Interferentes positivos: Acido ascórbico, piruvato, acetona, ácido acetoacético, levulosa, glucosa, ácido úrico, proteínas, barbitúricos y antibióticos de la cefalosporina. Las temperaturas altas y los prolongados tiempos de reacción (> a 5 minutos), aumentan esta interferencia. El piruvato, acetona, ácido acético, aminoácidos y proteínas o cualquier compuesto con un grupo metilo o metileno activo, introduce errores debido a su acoplamiento con el picrato por un mecanismo análogo al de la creatinina; todos estos compuestos pueden producir sustancias coloreadas que aumentan la absorbancia en la reacción del complejo coloreado. La bilirrubina y otros productos de degradación de la Hb, causan una interferencia negativa probablemente por su oxidación en medio básico fuerte a compuestos incoloros, dando como resultado una disminución de la absorbancia, lo que se interpreta como una menor concentración de creatinina. Esta interferencia negativa se observa con frecuencia en el análisis cinético de la creatinina. 10. Correlacion diagonstica El nivel de creatinina en suero depende de 2 factores: La velocidad de producción. La velocidad de filtración. Dado que la fuente de creatinina serica es la creatina muscular y la fosfocreatina, una mayor cantidad de masa muscular produce un aumento de la creatinina serica. Los valores de creatinina exhiben una respuesta escasa o nula a las modificaciones dietéticas o a las alteraciones del equilibrio electrolitico.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ - ANTIOQUIA
MANUAL DE QUIMICA CLINICA

Código: Versión: 1.0
Página 31 de 83

La concentración de creatinina en sangre, como la de la urea, se aumenta con el descenso de la función renal y el principal empleo de la determinación de creatinina serica esta en la evaluación de la función renal. En nefritis crónica cuando la concentración de BUN esta muy por encima de 50 mg/dl, el aumento de la creatinina es proporcional y las concentraciones de creatinina mayores a 5 mg/dl se consideran de importancia diagnostica grave. Niveles disminuidos se encuentran en la distrofia muscular. Notas La especificidad de la reacción depende del pH, temperatura y tiempo. Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse del fotómetro, sin que se alteren los resultados finales. El ácido pícrico es tóxico. Evite la inhalación, ingestión y contacto con la piel, lavar enseguida con polietilenglicol 400, con abundante agua.

Valores de referencia: Hombres: 98 – 156 ml/minuto Mujeres: 95 – 160 ml/minuto Limite de dilución: 500 mg/dl 2. La relación entre la concentración de una sustancia en orina y sangre es el mejor índice de función renal.  Marcar en el frasco la hora de iniciación de la recolección. La muestra de orina se recoge durante un periodo determinado. Descartar la orina de esa hora y a partir de entonces recoger todo el volumen de orina.  El paciente debe abstenerse de ingerir carne. 1. Muestra Técnica para el suero. que la concentración de dicha sustancia aislada en sangre o en orina. siempre y cuando los resultados se interpreten en forma comparativa y no absoluta.9%. El control cronológico de la recolección de las muestras es esencial para la realización correcta de la prueba. el mismo procedimiento de creatinina en suero.  Guardar refrigerada y en frasco bien tapado.  Para la recolección de la orina el paciente debe fijar una hora cero. Condiciones del paciente La muestra de sangre debe obtenerse durante el periodo de recolección de la orina. . té y café durante las 24 horas anteriores a la recolección. La depuración de la creatinina endògena es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 32 de 83 DEPURACION DE CREATININA Generalidades Es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. generalmente 24 horas aunque es posible reducirlo a 4. Técnica para la orina: Diluir 1:100 con Solución Salina 0. inclusive la muestra del tiempo fijado para la recolección.  Debe seguir tomando agua. 8 ó 12 horas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. porque nos da información de cómo esta la filtración glomerular. para asegurar un volumen urinario de 1 ml por minuto cuando menos.

además producen creatininasas que destruyen la creatinina. Metodo de determinacion Longitud de onda: 546 nm (500-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25° C Medición: frente a blanco de reactivo 5.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 33 de 83  Interrumpir toda terapia diurética. ya que los gérmenes producen variación en el pH promoviéndose así la conversión de creatinina en creatina. La concentración de creatinina debe determinarse antes de las 24 horas de recogida la muestra. el resultado se multiplica por 50. la cual no puede medirse por la reacción de Jaffé. 10 ml de orina + 490 ml de agua destilada. 3. Condiciones de la muestra Muestra de suero libre de hemólisis fuerte y de ictericia (ya que una ligera hemólisis no afecta la determinación). La muestra de orina debe refrigerarse o agregarse un inhibidor bacteriano. 4. Calculo Creatinina en Orina* ________________ Creatinina en suero x Volumen (ml) _________ 1140 (Constante) . Tecnica Pipetear: Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ Solución Trabajo Estándar Orina diluida Dilución de la orina * Hacer una dilución de la orina de 1: 50.

Correlacion diagnostica En enfermedades renales avanzadas la excreción urinaria de creatinina excede a la velocidad de filtración glomerular a causa de la secreción tubular.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 0. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Creatinina en orina Depuración de Creatinina: Mujeres Hombres Mujeres 0.4 mg/dl.0 Página 34 de 83 6. 16 – 22 mg/Kg peso/24 h 85 – 125 ml/min. 21 – 26 mg/Kg peso/24 h Hombres 7.8 – 1.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. que seria una fuente de error negativa. lo cual aumenta los niveles urinarios. 1900 mg/24 h. 8.9 – 1. Entre las causas de error están: mal cronometrado o recogida inadecuada de la muestra de orina. la hidratación inadecuada del paciente.2 mg/dl. Interferencias Los mismos de la guía anterior. 75 – 115 ml/min. . por lo que el verdadero valor de filtración glomerular esta por debajo de la depuración de la creatinina. Notas Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse proporcionalmente según las necesidades del fotómetro. sin que se alteren los resultados finales. ejercicio fuerte durante la prueba.

podemos concluir que esta sustancia es reabsorbida. disminuciones se observan en pielonefritis crónica e hipertensión. y crónica. La depuración de creatinina disminuye en personas de edad.A.73/A para obtener el valor real de la depuración en estos pacientes. en niños y personas de baja estatura por esto se hace necesario realizar la corrección del valor obtenido.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . multiplicando el resultado por 1.N.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Si la depuración plasmatica de una sustancia es mayor que la filtración glomerular debe interpretarse como que esta sustancia es secretada por el túbulo y si por el contrario. En las personas obesas la depuración esta alterada por lo tanto se hace necesario la corrección.0 Página 35 de 83 El filtrado glomerular disminuye notablemente en G. ligeras La filtración glomerular normal es en un adulto de 125 ml/min. . la depuración es menor que la filtración.

Glucogenolisis: Movimiento de glucógeno almacenado para producir glucosa-6fosfato.0 Página 36 de 83 GLICEMIA Generalidades Glucemia o glicemia: Este término se refiere a la presencia de la glucosa en sangre. GOD-PAP. músculo en mayor proporción y también leucocitos. Fundamento La glucosa de determina despúes de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. . en el tejido nervioso en muy poca cantidad). Metodo con desproteinización. 1. Metodo Prueba enzimática colorimétrica por glucosa. La glucosa sanguínea proviene de dos fuentes: La más importante es la absorción intestinal de glucosa alimenticia que normalmente puede llevar los valores sanguíneos de glucosa hasta 138 -140 mg/dl. Glucolisis: Llevar la glucosa-6-fosfato hasta piruvato para producir acétyl Co A (ciclo de krebs).ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Glucogenesis: Formación de glucógeno (hígado. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de la peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo-violeta usando la quinonemina como indicador.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La liberación de glucosa por el hepatocito mediante un mecanismo que se acelera al disminuir la glicemia sanguínea. Gluconeogenesis: Formación de glucosa a partir de otro sustrato diferente al glucógeno ejemplo: aminoácidos. 2.

ni haber fumado antes o durante la prueba. 6. Leer la absorbancia de la muestra y el patrón contra el blanco de reactivo. No presenta glucosuria positiva antes de dar la carga de glucosa. Tecnica Pipetear: BLANCO PATRON MUESTRA RVO. Ayuno de diez a doce horas. de hidratos de carbono.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. . Condiciones del paciente No se requiere preparación dietética especial.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .) 160-180 mg/dl. La estabilidad de la muestra es de 8 horas. 5.25°C por 10 minutos ó 5 minutos a 37°C. En el momento de la toma de la muestra el paciente debe estar sentado erguido. No tomar café. COLOR Blanco ---------1000λ Patron ---10λ ---1000λ Muestra ------10λ 1000λ 500 nm 546 nm 1 cm 20. a menos que el paciente consuma diariamente menos de 150grs. Muestra Sangre total. Condiciones de la muestra La separación del suero debe hacerse dentro de los 20 o 30 minutos de la extracción.0 Página 37 de 83 3. 25 ó 37 °C frente a blanco de reactivo Mezclar. suero o plasma 4. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. incube a temperatura de 20 .M. Umbral renal (T. No realizar ejercicio antes o durante la prueba.

Carga de glucosa Niños: 1.T. Nota El tiempo máximo para ingerir la carga de glucosa oral es de 5 minutos.G. por ejemplo en aquellos paciente que presentar trastornos clínicos .M. Adulto < 115 < 140 Niño < 130 < 140 Diabetes mellitus Adulto >= 140 >= 200 Niño >= 140 >= 200 Intol.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La prueba de tolerancia oral a la glucosa (P.75 gr de dextrosa por kilogra la prueba tamiz consiste en administrar la carga de dextrosa y tomar una muestra después de una hora post-ingesta.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.) tiene como finalidad la de descartar o de diagnósticar una diabetes mellitus tipo 2 (D.tipo 2. Para la P. Valores de referencia Criterios de diagnóstico para DM por PTOG Normal Ayunas P. 100 gr.).G. descartando aquellos pacientes que presentan fluctuaciones en el límite superior de la concetracion plásmatica normal. no Gestantes 2 horas postcarga. En los pacientes asintomáticos el diagnóstico de DM se establece cuando se cumplen los criterios diagnósticos de los valores de glicemia recomendado por diferentes asociaciones o grupos de estudio de diabetes asï: National diabetes data group Basal >= a 140 mg/dl en dos ocasiones consecutivas sea en adultos o en niños.T. Utilizar métodos de laboratorio previamente estandarizados y sueros control Diagnostico de diabetes mellitus El principal objetivo de diagnóstico es la indentificación de pacientes con riesgo de hiperglicemia sintomática de cetoacidosis diabetica (CAD) o coma hiperosmolarno no cetónico (CHNC) o de complicaciones clínicas tardías. que pueden no entrañar los riesgos asociados a la DM.de agua. a partir de los cuales se empezara tomar los tiempos para la toma de las muestras asi: Gestantes 1-2 y 3 horas.O. A la glucosa Adulto 115 . cuando se sospecha una diabetes a pesar de la ausencia de hiperglicemia en ayunas o sistomática.199 Niño 130 – 139 140 – 199 9.O.G.139 140 .T. de dextrosa en 300 ml.O.0 Página 38 de 83 8.

T. etc. retinopatía y nefropatia.O. a los pacientes que presenten naúseas.. Nicotinico.G. . La P.N.O.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .T. *Criterios diagnosticos reportados por el comite de expertos en el diagnostico y clasificacion de diabetes mellitus. desmayos o palidéz durante la realización de la prueba. pero en muchos casos la intolerencia a la glucosa no progresa. enfermedades endocrinas que deterioren la tolerancia a la glucosa o enfermedades hepáticas.G. glucocorticoides. Los valores de glicemia posprandial pueden ir hasta 160 mg/dl.G. por lo menos dos valores deben ser > = 200 mg/dl. Los criterios diagnósticos por P. sudoración. Niños: asintomaticos deben ser mas estricto en diagnóstico por P. tanto en niños como en adultos. ac. tampoco pacientes tratados con fármacos que alteren la prueba de tolerancia oral a la glucosa (tiazidas.O.G. vómito.. Ayunas se define como la no ingesta calórica al menos por 8 horas. Los pacientes con intolerencia a la glucosa pueden presentar mayor riesgo de hiperglicemia en ayunas o sintomatica. Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl.C. No se debe realizar la P. Los sintomas clásicos incluyen poliuria. En la P...ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. (Guillermo Farias quimica clínica. solo son válidos para individuos sanos que no presentan infecciones. 2.T. acompañados de una glicemia a cualquier hora mayor o igual a 200 mg/dl.O. décima edición). polidipsia y pérdida de peso.T.G. debe repetirse para corroborar el diagnóstico de DM.O.G. anticonceptivos orales que contengan estrógenos sintéticos).T.. o puede también revertir a la normalidad.0 Página 39 de 83 que pudieran deberse a una DM no diagnósticada ejemplo: polineuropatía.T. Adultos: dos horas y en cualquier otro momento de la P. renales o del S. Valores normales Después de un ayuno de 10 a 12 horas los valores de glicemia deben estar ubicados entre 70-110 mg/dl (según el método utilizado). sintomas de diabetes.O.(dado el mayor riesgo de un exceso de diagnóstico de DM). enfermedades cardiovasculares o vasculares Cerebrales agudas.

cada uno de ellos debe ser confirmado con una prueba posterior. estos criterios deben ser confirmados por otra prueba realizada un día diferente. si bien los niveles de hemoglobina glicada presentan una distribución similar a la glicemia. Los valores normales para la glicemia en ayunas. son: * Glucemia normal: Menor de 140 mg/dl.0 Página 40 de 83 3. * Hiperglicemia en ayunas: Entre 110 mg/dl y 126 mg/dl. .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 126 mg/dl. debe ser confirmado subsecuentemente por una glicemia en ayunas ≥ a 126 mg/dl. El comité no recomienda la utilización de los niveles de hemoglobina glicada para el diagnostico de la diabetes. * Disminución de la tolerancia a la glucosa: Entre 140 mg/dl y 200 mg/dl. las categorias.C) inexplicadas o sintomas adrenergicos inexplicables. 2 horas poscarga. síntomas con una glicemia al azar > de 200 mg/dl. o una glicemia al azar ≥ a 200 mg/dl. Las categorias para la glicemia en ayunas quedan establecidas de esta foma: * Glicemia normal: Menor a 110 mg/dl. 2 horas poscarga. Se han establecido tres criterios para el diagnostico de diabetes. por lo cual asignar un valor diagnostico es difícil. Dos horas poscarga durante una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) mayor o igual a 200 mg/dl. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 200 mg/dl. por el momento solo continua como prueba para el control y no para el diagnostico. En la ausencia de hiperglicemia inequívoca con descompensación aguda. Por ejemplo. Diagnostico de hipoglicemia Depende si el paciente presenta manifestaciones del sistema nervioso central (S. la razón para ello es la perdida de la primera fase de secreción de insulina a partir de esta cifra. una glicemia 2 horas postcarga ≥ a 200 mg/dl. Para la prueba de tolerancia a la glucosa.N. hora y media y a las dos horas. De acuerdo a los nuevos criterios solo se tiene en cuenta los valores a las 2 horas.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Para ello se utiliza 75 gramos de glucosa anhidra disueltos en 300 cc de agua. las pruebas utilizadas para ella no estan estandarizadas. se han establecido en 110 mg/dl. La prueba de tolerancia utilizaba valores a la hora.

de 3 horas con una carga de dextrosa de 100 gramos. Por lo general una glucosa plásmatica anormalmente baja se define menor de 50mg/dl en el varón. menor de 45mg/dl en la mujer. Valores de glicemia > 180 mg/dl en más de una oportunidad son diagnósticos de D. propanolol etc.C. tras un aumento de glucosa. los cuales se corrigen al aumentar la glucosa sanguínea.G. se perfunde glucosa de inmediato. si se obtiene un valor anormalmente bajo.. Otros fármacos como salicilatos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. sulfas que producen un 50% de las hipoglicemias. Anormales: Valores de glicemia entre 135 . El diagnóstico debe completarse con valoraciones de insulina proinsulina y peptido C y también la busqueda de drogas que puedan estar ocasionando la hipoglicemia (insulina alcohol.G .0 Página 41 de 83 En ambos casos para el diagnóstico se requiere valores plásmaticos anormalmente bajos. confirman el diagnóstico de hipoglicemia de ayuno o inducida por fármacos.T. La mejoría inmediata de los sintomas del S. (Se pueden encontrar valores menores de los expuestos en un ayuno de 72 horas).M. El paciente con deterioro de la conciencia o crisis convulsiva debe efectuarse la glucosa con tirilla y gota de sangre obtenida al colocar un aguja para iniciar la perfusión de líquido.N.O.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .) Criterios diagnosticos para diabetes gestacional Ayunas >= 105 mg/dl 1 hora >= 190 mg/dl 2 horas >= 165 mg/dl 3 horas >= 145 mg/dl Normal: Hasta 135 mg/dl.180 mg/dl sugieren la realización de una P. y en lactante y niños menor de 40mg/dl .

Sueros lipémicos causan turbidez en la solución final. ha sido diseñada para ser realizada preferiblemente en analizadores. 4. GLDH.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Metodo Metodo completamente enzimático para determinación cinética de urea. Ya que la prueba cinética es muy rápida. El amonio producido en esta reacción se combina con 2oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato-deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones del paciente 24 horas antes de tomar la muestra. Condiciones de la muestra Por acción bacteriana se puede perder la urea. orina diluida 1:1000 con agua destilada. por lo tanto debe analizarse pocas horas despúes de recogida o conservarse en refrigeración. Fundamento La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir amonio y dióxido de carbono. el paciente debe llevar una dieta pobre en proteínas y 12 horas de ayuno total. 3. . 2. La disminución de la absorbancia es proporcional a la concentración de urea dentro de los intervalos de tiempo dados. La prueba ha sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima límite. 5. Muestra Suero o plasma.0 Página 42 de 83 UREA 1.

repetir el ensayo y multiplicar el resultado por dos. 365 nm 1 cm 25°C. . 30°C ó 37°C Lectura contra blanco de reactivo 7. 1 mmo1/1 Orina 20-35 mg/24 horas 333-583 mmo1/24 horas El método es lineal hasta 200 mg/dl (33. lea la absorbancia de la muestra y el estandar despúes de 30 segundos y lea nuevamente al minuto. 3 mmo1/1) de urea para suero o plasma y 200 g/L (330 mmol/L) para la orina.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Tecnica Pipetear Blanco ------1ml Patrón ---10 ul 1ml Muestra 10 ul ---1ml Muestra Patrón Reactivo Mezcle. Valores de referencia Suero 10-55 mg/dl 1. Para concentraciones más altas mezclar un volumen de la muestra con un volumen igual de agua destilada.0 Página 43 de 83 6. 7-9. calcule la diferencia 8. 334 nm. Metodo de determinación Logitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 340 nm. El patrón.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . la muestra y la solución 1 deben pipetear en el fondo de los tubos de ensayo y mezclarse cuidadosamente.

TBC renal.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Determinacion de nitrogeno ureico El nitrogeno ureico se saca de dividir el valor de la urea por un factor que es 2.0 Página 44 de 83 9. nefritis aguada. náusea y vómito. Gota Crónica y en todas aquellas entidades donde el volumen del filtrado glomerular se ha reducido una quinta parte de lo normal. triglicéridos hasta 2000 mg/dl. convulsiones y coma.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El nitrógeno uréico de la sangre. bilirrubina hasta 60 mg/dl. La anemia es un carácter prominente en la uremia crónica porque está deprimida la eritropoyesis. glucosa hasta 500 mg/dl y ácido ascórbico hasta 30 mg/dl. . deterioro mental y confusión. Interferencias La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl. Correlacion diagnostica La urea se encuentra aumentada por encima de los valores normales en caso de insuficiencia renal u obstrucción de vías urinarias. anorexia. o una enfermedad hepática grave. Los valores de la urea pueden disminuirse en alteraciones hereditarias de la síntesis de urea o cuando existe una ingesta inadecuada de proteínas. el nitrógeno no proteico y la creatinina están elevados y los niveles sanguíneos de estas sustancias se emplean como índice de la gravedad de la uremia. Cuando existe uremia los síntomas incluyen letargo. 10.14. sacudidas musculares.

lipo-proteínas y sirve de medio de transporte a multitud de elemntos como esteroides. interviene en el equilibrio ácido-básico. Condiciones del paciente La muestra ha de tomarse con 8 horas de ayuno. aporta la nutricion celular. de donde se origianan el nombre de inmunoglobulinas. El uso de torniquete no ha exceder los 30 segundos. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero en aproximadamente 0. Evitar todo esfuerzo corporal intenso por lo menos 8 horas antes de la toma de la muestra. Estable 8 dias a 2-8 C. Muestras. Metodo Prueba colorimétrica fotométrica para proteínas totales (Biuret) 2. La fracción globulina se sintetiza especialmente en las células plasmáticas y tienen como misión principal fabricar anticuerpos. 1. Fundamento Los iones cúpricos con las proteínas y peptidas en solución alcalina forman un complejo púrpura. 4. vitaminas liposolubles. La priemera regula la presión osmótica coloidal de la sangre.PROTEINAS TOTALES Generalidades. El ejercicio causa aumento de la concentración de proteínas en un 6 a 12%.5 g/dl. Suero y plasma heparinizado. transporta los lipidos originando los compuesos que se denominan. . hierro. 3. cobre. La absorbancia de este complejo es proporcional a la concentración de proteínas en la muestra. Los anticoagulantes quelantes interfieren. La cifra normal de las proteinas totales del suero está comprendida entre 6 y 8 mg/ ml encontrándose de 1 gramo menos en los pacientes que guardan cama por mas de dos semanas las proteínas totales están integradas por la fracción albúmina y bla fraccion globulina.

Valores de referencia Suero: 65 – 80 g/L Plasma: 68 –83 g/L 8. 334 nm ó 365 nm 1 cm 25°C.0 ml 340 nm. 30°C ó 37°C frente a blanco de reactivo Mezcle.0 ml Patrón ----10 ul ----1. Metodo de determincion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 6.2 g/L).0 ml Muestra --------10 ul 1. Interferentes La hemoglobina (0. ABS Muestra ____________ X 80= mg/dL proteína ABS Patrón 7.5. La presencia de dextrano (utilizado como expansor del plasma) ocasiona una floculación de la mezcla de reacción que puede separarse por centrifugación sin que afecte los resultados. lea la absorbancia de la muestra y estándar despúes de 30 segundos y lea exactamente al minuto despúes calcule la diferencia y multiplique por 80. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Agua destilada Patrón proteina Muestra Reactivo 10 ul ------1. . La bilirrubina (15 mg/dl) La lipemia moderada no interfiere.

fistulas digestivas etc. tambien puede estar disminuida en: Nefrosis lipoidea. diarreas profusas. entre 3. Las cifras bajas generalmene corresponden a malnutricion.5 y 3g/ml a la globulina. Neoplasias.5 g/ml corresponden a la albúmina y entre 1. Se obtienen falsas hiperproteinemias. Anemia persistente.9. .5 y 5. De la cifra total que integran las proteínas. Afecciones hépaticas crónicas. sudoracion excesiva. Corelacion clinicopatologica Cuando hay hemoconcentración por shock. Edemas carenciales. quemaduras. vómitos.

La cantidad no permite valorar la gravedad de la afección. reabsorción tubular disminuida. orina ocasional ó líquido cefalorraquideo. Metodo Metodo colorimétrico cuantitativo para determinación de proteínas en orina y líquido cefalorraquideo. 3. 1. Condiciones de la muestra Se debe recoger orina de 24 horas u orina ocasional. Es el indicador más importante de enfermedad renal complementado con el sedimento microscópico. 2. Fundamento. 4. 150/24 horas. . En caso de orinas muy turbias es conveniente centrifugarlas. es la cantidad de proteína excretada por la orina. Estable 8 dias. pero su dosificacion periódoca si valora el progreso o regresión de la lesión. Muestras. medir el volumen y conservarla a 2-8 C. Tiene como mecanismo el aumento de la permeabilidad de las membranas glomerulares. Tambien conocida como albúminuria.1 y Alfa –2.PROTEINURIA Generalidades. Normalmente es de 40 a 80 mg con límite máximo. La proteina presente en la muestra reacciona en medio ácido con el complejo Rojo rojo de pirogalol y el molibdato originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectofotometria. La albúmina constituye entre un 60 y un 90 % de la prteína excretada y el resto está por globulinas principalmente globulina Alfa. Recoger la orina. aumento de la filtración glomerular o alteraciónes en la composicion proteíca que la hace filtrar más facilmente. cantidad no detectable por los sistemas habituales para dosificarla. Orina de 24 horas.

ácido benzoíco o timol pueden causar resultados falsamente disminuidos. Los conservantes para orina como ácido clorhídrico. .5.. Valores de referencia Orina de 24 horas 30 – 140 mg/24 h (hasta 160mg/24h en mujeres embarazadas) Orina ocasional 25 mg/dl Líquido cefalorraquideo 15 – 45 mg/dl (en adultos de más de 60 años se extiende a 60 mg/dl) 8. Interferencias La hemolisis puede ser causa de resultados falsamente aumentados tanto en orina como en LCR. Tecnica Blanco ------1 ml patron 20 ul ---1 ml muestra ---20 ul 1 ml 580 nm. 600 nm ó 620 nm 1 cm 37 °C frente a blanco de reactivo Patron Muestra reactivo Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37 °C leer la absorbancia contra el blanco Calculos: Proteinas de 24 horas: Muestra Patron x volumen x 100 Muestra Patron x 100 Proteina en orina ocasional: Proteínas en líquido cefalorraquideo: Muestra Patron x 100 7. Algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la reacción. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medicion: 6.

hipotermia.9. Correlacion diagnostica Hay condiciones fisiológicas o benignas deonde se puede observar un aumento en la excresión urinaria de proteínas como el ejercicio violento. viral o de otros origenes. la fiebre. como en la disfunción glomerular. El LCR es útil para evaluar la permeabilidad de la barrera hematoencefálica en muchas enfermedades inflamatorias o infecciosas del SNC. como ocurre en la meningitis bacteriana. La determinación de proteínas es importante en la detección de patologías renales. . el embarazo.

La GPT es un enzima que también se encuentra en riñón. que esta constituida por dos isoenzimas. orina. la GPT es una enzima exclusivamente citoplasmática. Existen dos tipos de transaminasas. . es decir. para la síntesis de aminoácidos distintos a los originales. Las transaminasas son enzimas que catalizan las reacciones de transferencia de grupos aminos de un aminoácido a un cetoácido. En los eritrocitos se encuentra la GOT soluble y en los leucocitos y reticulocitos están los dos tipos enzimáticos. etc. una citoplasmática y otra mitocondrial. y en eritrocitos pero en bajas concentraciones.TRANSAMINASAS Generalidades El hígado contiene un gran numero de enzimas. LCR. en tanto que la GOT es una enzima binocular. la transaminasa glutamicopirúvica ó Alaninoaminotranferasa y la transaminasa glutamicooxaloacética ó Aspartatoaminotransferasa . estas enzimas están localizadas particularmente en el hígado. corazón. la GPT se puede encontrar en plasma.a. corazón. que la componen. de todas ellas las de mayor importancia clínica son la fosfatasa alcalina (Pa). músculo esquelético pero en mayor concentración en el Hígado. se van a diferenciar por su movilidad elctroforética. las transaminasas (GOT ó ASAT Y GPT ó ALAT) y la CGT (gamaglutamiltranspeptidasa o γGT). propiedades cinéticas e inmunológicas y a. pH óptimo de acción.

Muestra Suero o plama con heparina o EDTA. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. 334 nm 1 cm 25. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. 340 nm. Metodo Prueba liquiUV 2. 30 ó 37°C frente a aire . 5. 3. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Fundamento Metodo cinético para la determinación de la actividad de ASAT o GOT de acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Sin activación por piridoxalfosfato.ASPARTATO AMINOTRASFERASA (GOT) 1. 4. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado.

7. no se debe usar como anticoagulante. En casos de baja absorbancia es debido a que por ser una reacción enzimática se consume el NADH en la incubación. 10. Linealidad En caso de sobrepasar la linealidad diluir 0. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. el grado del aumento es proporcional a la .9ml de solución salina y multiplicar por 10. Valores de referencia 25 ºC 18 U/L 15 U/L 30 ºC 25 U/L 21 U/L 37 ºC 37 U/L 31 U/L Hombres hasta Mujeres hasta 9. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. en las próximas 6-12h después de la oclusión de una arteria coronaria. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos 8. Correlacion diagnostica Los valores aumentados de esta enzima suceden cuando hay muerte en las células del miocardio (infarto al miocardio). en estos casos también se debe diluir.1ml mas 0.

Las cifras de GOT también se ven aumentadas en lesiones agudas de las células hepáticas como en las hepatitis virales y lesiones por intoxicación con fármacos o tóxicos como tetracloruro de carbono. Los aumentos moderados se observan en las etapas finales de la cirrosis. ictericias obstructivas. . los valores máximos se ven en al cabo de 48h y recupera sus valores normales de 3-5 días. osea que una lesión grande puede hacer elevar los valores >200 unidades.magnitud del daño.

Los métodos para la medición de GPT son muy semejantes a los de la GOT. 340 nm. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparina. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. 5. el ácido pirúvico producido por la enzima a partir de alanina y ácido alfacetoglutarato se transforma en ácido láctico por efecto de la deshidrogenasa láctica. Metodo Prueba liquiUV para alanina aminotransferasa. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. 3. 2. 334 nm 1 cm 25. 4. 30 ó 37°C frente a aire . Fundamento Es un método cinético para la determinación de la actividad de la GPT de acuerdo con las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC sin activación por piridoxalfosfato.ALANINA AMINOTRANSFERASA (GPT) 1. La transformación simultánea de NADH en NAD va seguida por una disminución de la absorbancia a 340nm. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado.

. Valores de referencia 25ºC 5-23U/L 5-19U/L 30ºC 7-32U/L 7-26U/L 37ºC 9-43U/L 9-36U/L Hombres hasta Mujeres hasta Precauciones El Buffer/sustrato esta compuesto con sodio de azida 0. Si sobrepasa la linealidad diluir 1 + 10 y multiplicar por 11 8. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática.095% evitar contacto con mucosas y piel. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos Linealidad Hasta 154mmol/L o 9gm/L (según el Kit utilizado). 9. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia.7. no se debe usar como anticoagulante.

GOT. pero esto se debe posiblemente al daño del hepatocito secundario por alteración en la circulación. El análisis de estas dos enzimas es de útil ayuda para detectar daño a nivel del hígado y determinar una hepatitis ya sea viral o por tóxicos como drogas. Los valores de La GPT. si la insuficiencia es aguda se pueden elevar los valores de 1000 a varios miles U/L. . En la ictericia hepática (hepatocelular) y la post-hepática se utilizan la GOT y GPT para diferenciarlas. por esta razón se considera más específica la GPT en patologías del hígado. Los niveles sericos de GPT se encuentran considerablemente aumentados en las lesiones agudas de las células hepáticas. Correlacion diagnostica Las cifras de GPT pueden estar también ligeramente aumentadas en el infarto al miocardio. y la determinación de la fosfatasa alcalina son los de mayor utilidad para el diagnóstico de las hepatitis. los valores elevados de estas tres enzimas son característicos de las hepatitis agudas y enfermedades necrotizantes del hígado en contraste con la elevación de la fosfatasa alcalina y disminución de GOT y GPT que nos da indicios de una ictericia obstructiva. un buen lavado del material y no dejar de lado el uso de los controles. En la hepatitis viral se observa una elevación de ambas enzimas. en contraste con la cirrosis hepática que se elevan poco las GOT y disminuyen las GPT.10. se debe analizar todos los datos clínicos posibles para hacer un buen diagnostico y reconfirmar con enzimas como γGT. a veces es mayor el aumento que la de la GOT. Nota Gran parte del éxito de obtener buenos resultados en este tipo de determinaciones enzimáticas esta en el correcto manejo del tiempo a la hora de la lectura (pues las enzimas actuaran hasta consumir el substrato). La determinación de la GOT y GPT se encuentran aumentadas en las insuficiencias cardiacas y como consecuencia del estasis Hepático. un buen trabajo organizado. lo que nos puede ayudar a diagnosticar un infarto del miocardio teniendo muy en cuenta no llegar a confundirse con una hepatitis viral ya que en estas también aumentan. CHE y GPT que son hepatoespecificas. En la post-hepáptica es difícil encontrar valores superiores a 200U/L. en colestasis intra-hepática los niveles de GOT y GPT son análogos a los de la ictericia post-hepática.

semen. 3.Amilasa suele estar presente en el páncreas ( 200 mg/kg ) glándulas salivales. 2. amilopeptina. glucógeno y sus productos parcialmente hidrolizados. 1. orina.4-glucan-4-glucanohidrolasa. Muestra Suero o plasma heparinizado. hígado. . orina No hay pérdida de la actividad en 5 días a 4°C.AMILASA GENERALIDADES Las amilasas son enzimas contenidas en la secreción pancreática las cuales catalizan la hidrólisis de los polisacáridos tales como : El almidón. trompas de falopio. Este substrato reacciona directamente con la amilasa y no requiere de enzimas de restricción. 2-cloro-4-nitrofenilmaltotriósido. cerebro. Fundamento La prueba colorimétrica utiliza un nuevo substrato. La α . Metodo Prueba colorimétrica para amilasa alfa-1. leche. bazo y corazón.amilasa es una endoenzima que se denominaasí porque todos los productos de la hidrólisis tienen la configuración (α) en el C1 de la unidad de la glucosa reductora. músculo. riñón. tejido adiposo. pulmón. heces. La α . sangre. Actua sobre las uniones 1-4 de las cadenas rectas del almidón y también sobre las uniones 1-6 glucosídicas de las cadenas ramificadas como las de amilopeptina y glicógeno. intestino. La liberación de 2-cloro-4-nitrofenol del substrato y el resultante incremento de absorbancia por minuto es directamente proporcional a la actividad de la amilasa en la muestra.

Condiciones de la muestra Puede utilizarse plasma heparinizado. 6. Metodo de determinación Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Evitar la utilización del torniquete por más de 30 segundos. oxalato o EDTA porque inhiben la actividad de la enzima. No utilizar citrato. plasma Orina espontánea Orina 24 horas 25°C 120 U/l 600 U/l 450 U/24h 37°C 220 U/l 1000 U/l 900 U/24h IFCC 28-100 U/l <460 U/l <410 U/l .4. Leer la absorbancia a los 1. 400 nm ó 410 nm 1 cm 25 °C ó 37°C frente a agua destilada Mezclar bien incubar por un minuto a la temperatura deseada. Tecnica Temperatura Muestra reactivo factor 25°C 20 ul 1000 ul 9864 37°C 10 ul 1000 ul 24820 Hg 405 nm. 5. Se recomienda el uso de pipetas automáticas para la medición de las soluciones para evitar la contaminación de las mezclas con saliva. Condiciones del paciente No requiere ayuno. Valores de referencia Temperatura Suero. 2 y 3 minutos Y multiplicar por el factor correspondiente. Si la determinación excede el valor diluir la muestra con 500 ul de solución salina y 100 ul de muestra y multiplicar por 6. 8.

En la pancreatitis aguda. . La úlcera péptica perforada. Correlacion diagnostica Los nivele elevados en el suero son siempre transitorios. dato que se debe tener en cuenta cuando se dosifica en pacientes con posible pancreatitis aguda y han recibido este analgésico. pero en la orina persisten hasta por 10 días. aumenta los niveles de amilasa. dato útil para su diagnóstico.9. Interferencias La aplicación de morfina produce contracción del esfinter de Oddi y eleva los niveles hasta 900 unidades. obteniendo niveles normales al 3 día. Cuando hay ruptura del embarazo ectópico. se libera una gran cantidad de amilasay se produce una hiperamilasemia. 10. sus niveles aumentan en las primeras 24 a 36 horas. Corresponden a episodios agudos y sólo duran 3 días.

insuficiencia renal y pancreatitis crónica. La dosificación urinaria a veces es más ventajosa que la hemática pues el suero solo se eleva durante unas 72 horas y en la orina persiste por varios días. con cifras estremas en las 24 horas de 835 a 6150 unidades. También se eleva en la parotiditis y litiasis parotidea y marcada disminución en su eliminación en el carcinoma pancreático. .AMILASURIA En condiciones normales se elimina una cantidad de amilasa por la orina. Este factor hay que tenerlo en cuenta y valorar el tiempo que ha durado la recolección. comprendida entre 35 y 250 unidades.

La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de formación del 4-nitrofenol. Muestra Suero o plasma Es estable al menos por 7 días a una temperatura de 2 a 8 °C. Condiciones de la muestra Puede trabajarse con plasma. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno minimo de 8 horas. 3. La utilización de EDTA inhibe la reacción. 4. los valores obtenidos en plasma y suero siempre son iguales 6. liberando 4-nitrofenol. Debe permanecer en reposos 15 minutos antes de la toma de la muestra. pero este no debe contener floruros ni oxalatos.FOSFATASA ALCALINA 1. Fundamento La fosfatasa alcalina cataliza en medio alcalino la transferencia del grupó fosfato del 4-nitrofenilfosfato al 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP). 5. medido a 405 nm. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 405 nm 1 cm 37°C frente a vacio . El ejercicio puede alterar el resultado. Metodo Metodo espectofotómetro con tampon AMP 2. El mejor anticoagulante es la heparina.

También aumentan en la ictericia. . EDTA. hiperparatiroidismo. Correlacion diagnostica Se origina principalmete en los huesos y en el higado. sus niveles aumentan. Valores de referencia Adultos: 26 – 117 U/l 9. Las muestras hemolizadas interfieren por la fosfatasa alcalina eritrocitaria.7. Cuando hay deficiencia de vitamina D. fracturas en consoliación y en metastasis óseas. por eso cuando el crecimiento disminuye sus niveles bajan a cifras similares al del adulto. raquitismo. en el abseso hepático. 8. oxalato y citrato interfieren en la reacción. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 20 ul Leer la absorbancia inicial y efectuar lecturas cada minuto por 3 minutos y promediar los resultados y multiplicar por el factor 2764. 10. por lo tnto esta bien establecida su relación con la formación osea. Interferencias Los anticoagulantes como el floruro. enfermedad de Paget.

Fundamento El calcio en medio neutro. forma un complejo de color azul con arsenazo III (ácido 1. No usar oxalato o EDTA como anticoagulante ya que interfieren en la determinación de calcio.8-dihidroxi-3.6-disulfo-2. Muestra Suero o plasma 4. Condiciones de la muestra Debe ser separado lo antes posible de los hematíes. Antes de la recogida adicionar al contenedor 10 ml de ácido nítrico al 50% Diluir la orina ½ en agua destilada para el análisis y multiplicar por dos.CALCIO 1. 5. Orina efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio.7-naftalenen-bis (azo)-dibenzenarsónico). 3. 6. La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de calcio existente en la muestra. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 650 nm 1 cm 37°C frente a agua destilada . Condiciones del paciente No requiere ayuno. Metodo Determinación cuantitativa para calcio 2.

La mayoria de los detergentes destinados al uso del laboratorio contienen agentes quelantes. 10.5 – 10. 8. tirotoxicosis e hiperparatiroidismo. mal nutrición o mala absorción. Interferencias Se recomienda utilizar material de plástico. El color es estable como minimo una hora. Niveles bajos de calcio pueden atribuirse ahipoparatiroidismo. aumento de la retención renal. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul Estándar Muestra reactivo Mezclar e incubar 2 minutos. Valores de referencia Suero o plasma: Adultos Niños Recién nacidos Orina: Adultos Niños 9.6 mmol/l 2. Una disminución de los niveles de albúmina causa una disminución del calcio en suero. sarcosidosis.0 – 13 mg/dl 2. osteoporosis. La mayoria de las causas de hipercalcemia son debidas a enfermedades oncológicas.7. Correlacion diagnostica El calcio es el mineral más abundante e importante del cuerpo humano.5 mg/dl 10 . 8. el 99% se halla en los huesos.12 mg/dl 8.2 mmol/l 50 – 300 mg/24h 80 –160 mg/24h . intoxicación por vitamina D. deficit de vitamina D.0 – 3.1 –2. pseudohipoparatiroidismo. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. invalidan la determinación. si se utiliza material de vidrio debera lavarse con ácido nítrico diluido con agua destilada.5 – 3 mmol/l 2. Trazas de los mismos.

4 con HCL. 3. Estándar Muestra reactivo . Diluida 1:10 con agua destilada acidificada hasta 3. Metodo Metodo colorimétrico – calmagita. La intensidad del color es proporcional a la concentración de magnesio. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Muestra Suero o plasma heparinizado Orina. Condiciones del paciente No requiere ayuno 5. Fundamento El magnesio forma un complejo de color púrpura al reaccionar con la calmagita en medio alcalino. 2. 4. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul 520 nm 1 cm 25 °C frente a blanco de reactivo. Condiciones de la muestra Utilizar material limpio 6.MAGNESIO 1.

6 – 2. tratamiento insulínico del coma diabetico. 8. tratamientos con diuréticos. glomerulonefritis. perdida anormal de líquidos. hipertiroidismo. Valores de referencia 1. . Niveles bajos son propios de trastornos gastrointestinales con malaabsorción. pielonefritis entre otros. Correlacion diagnostica La hipomagnesemia implica manifestaciones similares a la hipocalcemia. 5 mg/dl 9.Mezclar e incubar por 5 minutos La coloración es estable por 30 minutos. Los niveles altos implican una depresión del sistema nervioso central y la excitabilidad neuromuscular.

25°C frente a blanco de reactivo Blanco Estándar muestra reactivo . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 3. Condiciones de la muestra No se debe usar plasma. 6. Condiciones del paciente No requiere ayuno. 4. Muestra Suero. Metodo Análisis fotométrico UV para la determinación de fosforo..FOSFORO 1. Hg 334 nm 1 cm 20. Los anticoagulantes pueden causar resultados falsamente bajos. Fundamento El fosforo reacciona con molibdato en un medio fuertemente ácido para la formación de un complejo. 2.. Tecnica blanco ---------1000 ul estándar ---10 ul ---1000 ul muestra ------10 ul 1000 ul 340 nm. La absorbancia de este complejo leido en Uvcercano es directamente proporcional a la concentración de fósforo. 5.

Leer la absorbancia de la muestra frente a blanco de reactivo antes de 1 hora. Los valores elevados se encuentran en la insuficiencia renal crónica. la acromegalia. Interferencias Muestras ictéricas y lipémicas requieren un blanco de muestra. la cual controla la excreción urinaria y su movilización osea por medio de la vitamina D. fracturas evolutivas y la enfermedad de Addison.0 mg/dl 9. osteomalacia. Por lo tanto se recomienda material de plástico.Mezclar e incubar por lo menos 1 minuto a temperatura ambiente. . infecciones de flora cocoide gram negativa en su forma septicémica y en la hipervitaminosis D. Valores de referencia Adultos Niños: 2. hipoparatiroidismo.5 – 5.0 mg/dl 4. Sueros lipémicos o hemolízados no deben ser usados. La contaminación del material de vidrio es la mayor fuente de error en este análisis. Correlacion diagnostica Esta regulado por la hormona paratiroidea. Las valores bajos se encuentran en el raquitismo.0 – 7. 10. 8.

lentamente. Tiene su máxima concentración entre las 24 y 48 horas.CREATINCINASA (Ck) Generalidades. Normalmente los músculos estriados tienen una alta concentración. Muestra Suero o plasma heparinizado o con EDTA. empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. 1. En el infarto de miocardio sus unidades se elevan entre 3 y 6 horas. despúes de iniciado. 4. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK. Metodo Prueba líquida UV activada por NAC creatin kinasa. medido a 340 nm. . La concentración catalítica se determina. 2. Método estándar modificado de acuerdo con las recomendaciones del cómite ECCLS. y muy poca se encuentra en el miocardio y el cerebro (CK). apartir de la velocidad de formación del NADPH. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. Fundamento La cratina quinasa (CK) cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina. empezando a descender despúes de dicho tiempo. obteniéndose creatina y ATP. para retornar a la normalidad entre 3 y 6 dias despúes. 3.

340 nm o Hg 334 nm 1 cm 25. Condiciones de la muestra La muestra de suero o plasma para Creatina quinasa es estable al menos 7 días a 2-8 Centigrados. Tecnica Precalentar el reactivo de trabajo a la temperatura ambiente minutos.5. 25°C ó 30°C 50 ul 1000 ul durante unos Hg 365 nm. 30 ó 37°C contra aire Muestra Reactivo 37°C 25 ul 1000 ul Mezclar y transferir de inmediato a una cubeta. A los 3 minutos. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio. Poner el cronómetro en marcha. anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto durante tres minutos. Insertarla en el portacubetas termotizado. Comprobar que las diferencias entre absorbancias sean sensiblemente iguales. Calculos. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Considerando que el coeficiente de absorción molar del NADPH a 340 nm es 6300. se deducen las siguientes fórmulas para calcular la concentración catalítica: Macro: Micro: A/min x 4127 = U/L A/min x 3333 = U/L . 6.

Correlacion diagnostica Se encuentra elevada en la distrofia muscular progresiva. Interferencias La hemólisis 10. Traumatismos musculares. e intervenciones quirurjicas elevan sus cifras ligeramente. . por aplicación de inyecciones y relajantes musculares.8. El valor cliníco está en una elevación manifiesta y su relación con el CK-MB y las otras enzimas que se alteran en el infarto. Valores de referencia Temperatura de reaccion 25 °C 30 °C 37 °C Hombres U/l 10-80 15-125 24-195 Mujeres U/l 10-70 15-110 24-170 9.

Un anticuerpo es incoroporado al reactivo el cual se une especificamente a la subunidad M. Estudios electroforeticos demostraron que tiene dos cadenas M y B . o plasma heparinizado o con EDTA. CK-BB. representa la actividad de la izoenzima CK-MB. Tanto la enzima original CK como su isoenzima CK-MB.CREATINCINASA FRACCION MB Generalidades. Cardíaco y lo hace progresivamente según su extensión y evolución clínica. inhibiendo la actividad enzimática de esta subunidad B. la actividad remanentre multiplicado por el factor 2. La CK-MB aumenta notablemente en el infarto. Debido a que la concentración de CK-BB en circulación es mínima. La CK-MB predomina en el miocardio y sus niveles se elevan cuando existe proceso necrótico del músculo cardíaco. CK-MB. Fundamento La prueba se basa en una determinación enzimática de CK acompañada de un método de inmunoinhibición. Metodo Prueba Humazym M-test Método por inmunoinhibición para CK-MB. se elevan desde las 3 hasta las 6 horas post-infarto. tejido nervioso. recuperándose los valores normales entre las 24 y 72 horas. Musculo esqueletico Cerebro Miocardio CK-MM. Muestra Suero. las concentraciones máximas son a las 12-24 horas. la combinación de las cadenas origina la CK-MB. . reconociendose 3 isoenzimas. que toman el nombre según el sitio donde predomina. la cadena M deriva su nombre del músculo esquelético y la B de Brain ( cerebro ).

Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. Si es superior. diluir el suero con NaCl 150 mmol/L. 30°C ó 37 °C contra aire. . Valores de referencia 25 °C CK total hombres mujeres CK-MB >80 U/l >70 U/l >10 U/l 30°C >130 U/l >110 U/l >16 U/l 37°C >195 U/l >170 U/l >25 U/l La actividad CK-MB esta en un rango entre 6 y 25 % de la actividad de la CK total. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Tecnica muestra Reactivo 40 ul 1000 ul Hg 334 nm. Mezcle e incube por 10 minutos a temperatura ambiente lea la abosorbancia y luego lea exactamente a los 5 minutos. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK-MB Condiciones de la muestra La Concentracion de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L. HG 365 nm 1 cm 25°C. La CK-MB en suero es estable al menos 7 dias a 2-8 C. 340 nm. Calcular la diferencia y multiplicar por el factor 8254.

Esta aumenta notablemente en los infartos cardiácos. .Correlacion diagnostica Presta una gran utilidad en los casos en que la CK se encuentra notablemente aumentada por causas ajenas al infarto y la CK-MB esta dentro de los límites normales.

Condiciones de la muestra No se recomienda congelar la muestra. 6. 340 nm.LACTATO DESHIDROGENASA (LDH) 1. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparinizado. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. Fundamento Método modificado basado en las recomendaciones del SCE. Seperar el suero antes de los 30 minutos. por pérdida de la actividad. Metodo Prueba líquida para deshidrogenasa láctica. 5. 4. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. HG 365 nm 1 cm 25°C. muestra reactivo Mezclar y leer la absorbancia después de 1 minuto y leer luego a los 1. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. 3. 2. 30°C ó 37 °C contra aire. Tecnica 25°C ó 30°C 20 ul 1000 ul 37°C 10 ul 1000 ul Hg 334 nm. 2 y 3 minutos hacer un promedio y multiplicar por el factor 16345 .

10. Interferencias El oxalato y el citrato interfieren en la reacción. Valores de referencia temperatura adultos hombres mujeres Niños 12meses 25°C 120-240 U/l 30°C 160-320 U/l 37°C 225-450U/l IFCC <243 <244 Hasta 500 U/l 9. permaneciendo elevada hasta por 8 ó 14 días. .8. Correlacion diagnostica En el infarto al miocardio sus niveles se aumentan entre las 24 ó 48 horas y tiene su máxima concentración a los 2 ó 4 días.

para demostrar el correcto funcionamiento. Como la muestra fluye por la almohadilla absorbente. Seperar el suero antes de los 30 minutos. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas.TROPONINA 1. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. el cual se liga a los anticuerpos anti-cTnl en la línea de prueba y produce una línea de prueba rojo-violeta(T). Muestra Suero o plasma 4. Tecnica Lleve el test a temperatura ambiente Dispense 2 gotas de la muestra enla ventana S. la troponina humana I se une al conjugado anti-cTnl-colorante para formar un inmunocomplejo. Fundamento La prueba emplea un conjugado de anticuerpo monoclonal anti cTnl y colorante en fase móvil. 3. anticueropos anti-cTnl (ratón). 6. Muestras lipémicas o hemolíticas no deben ser procesadas. Condiciones de la muestra Las muestras que contienen partículas de turbidez pueden dar resultados inconsistentes. 2. . fijados en la línea de prueba. 5. El exceso de conjugado reacciona en la línea de control formando una segunda línea rojo-violeta de control C. y anticuerpos anti-ratón IgG (cabra) en la línea de control. Metodo Prueba inmunocromatográfica en un paso para la detección de la troponina I cardíaca humana en el suero o plasma.

Valores de referencia Negativo Positivo 8. No lea después de 15 minutos para evitar errores. 7.5 ng/ml de troponina I. Lea los resultados a los 15 minutos. Las muestras positivas desarrollan una línea de prueba T en los primeros minutos. El resultado negativo no excluye la posibilidad de un infarto al miocardio.Evite la formación de búrbujas en la ventana. Debe considerarse repetir la prueba después de 12 horas de iniciado el dolor. . Interferencia La prueba no puede determinar niveles inferiores a 0.

Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 415 nm ó Hg 405 nm 1 cm 25°C frente a agua destilada. Dado que la concentración de glicohemoglobina en el eritrocito refleja el nivel promedio de glucosa en la sangre de las 4 a 6 semanas anteriores y es estable por la vida de los eritrocitos. 4. 2. Fundamento La formación de glicohemoglobina ocurre irreversible y progresivamente en los eritrocitos a través de los 120 días de vida normal de estas células. la medición es proporciona una prueba de gran valor para evaluar el control a largo plazo de los pacientes diabéticos. Condiciones de la muestra No debe utilizarse muestras hemolizadas para no alterar el resultado. 6.HEMOGLOBINA GLICOSILADA 1. . 3. Condiciones del paciente Ayuno de 8 horas. Metodo Método rápido de separación por resina de intercambio iónico. Muestra Sangre total con EDTA. 5.

Tecnica Etapa de hemólisis Reactivo lisante 500 ul Mezclar e incubar por 5 min Determinación de HbA1 Pipetear 100 ul de hemolisado Tapar a 1 cm aproximadamente Mezclar por 5 min Leer la absorbancia Determinación de Hb total Pipetear 20 ul de hemolisado Mezclar cuidadosamente Leer la absorbancia HbA1= F X HbA1 muestra Hb total 8. Correlacion diagnostica La dosificación de la hemoglobina glicosilada es importante en un diabético como la glucosa.5 – 7. Valores de referencia pacientes Metabolismo normal Diabéticos descontrolados 9.7.0 % >8. %HbA1 4.5% Muestra 100 ul 15°C ó 25°C reactivo 5 ml de agua destilada .

BIBLIOGRAFIA • • Manual de quimica clinica. Elaboró Carolina Hoyos Velásquez Cargo: Bacterióloga FECHA: XXXXXXXXXXXX Revisó XXXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Aprobó XXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXX . Colegio mayor de Antioquia Insertos de las técnicas.

FECHA NOMBRE DE QUIEN LEE EL MANUAL FIRMA CARGO .

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful