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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

ELABORADO POR: CAROLINA HOYOS VELASQUEZ BACTERIOLOGA COOPERATIVA COOMAN

LABORATORIO CLINICO EMPRESA SOCIAL DEL ERSTADO HOSPITAL SAN RAFAEL DE YOLOMBO YOLOMBO 2008

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ACIDO URICO

1. Metodo Análisis enzimático colorimétrico por ácido urico con factor aclarante de lípidos (LCF) (PAP) 2. Fundamento Determinación del Acido Urico por la reacción con la uricasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona por la acción catalítica de la peroxidasa con ácido 3,5-dicloro-2-hydroxybenzenesulfónico (DCHBS) y 4-aminofenazona (PAP) para producir un complejo rojo-violeta de quinonemina como indicador. 3. Muestras Suero o plasma con heparina o EDTA, orina. Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. 4. Condiciones del paciente Para determinación en suero. Antes: • Explicar el procedimiento al paciente. • Llevar estrictamente los siguientes puntos. • Suspender la medicación de drogas como: alopurinol, salicilatos, fenilbutazona, calmantes o analgésicos, ácido ascórbico (vitamina C), buscapina, diuréticos de la trazida, tioles libres, purinas metiladas, ácido homogentístico y altas cantidades de glucosa. • Dos días antes del examen evitar ejercicios violentos.

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24 horas antes del examen, el paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas, mariscos y frijoles ya que contienen altos contenidos de purina. 48 horas antes de la venoclisis suspender el consumo de alcohol. Durante: Recoger 5 - 7 ml de sangre venosa en un tubo de tapón rojo. • Retomar nuevamente la ingesta de cualquier medicamento que pueda alterar los resultados. Después: • Aplicar presión en el sitio de punción. Para determinación en Orina: • Orina de 24 horas, teniendo en cuenta las indicaciones anteriores. Nota Las muestras lipémicas generalmente generan turbidez en la mezcla del reactivo con la muestra, lo que lleva a resultados elevados falsos. El LCF aclara completamente la turbidez causada por muestras lipémicas. Los valores en sangre total varían con la proporción de células en la sangre debido a que las células también contienen muchas más sustancias que interfieren en la reacción. 5. Condición de la muestra La sangre debe recogerse en tubos limpios, libres de metales pesados, ya que estos y los cianuros son inhibidores enzimáticos. La prueba no se ve influenciada por valores hasta 100mg/dl de hemoglobina o por valores de bilirrubina hasta 20mg/dl. La estabilidad de la muestra es: Temperatura ambiente  3 días Refrigerado  2 - 8°C por 5 días. Congelado  20°C, seis meses. En orina de 24 horas con preservativos y a temperatura ambiente → 2 días. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: 520nm, Hg 546 nm. Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20 - 25 °C ó 37°C Medir: frente a blanco de reactivos

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7. Tecnica Pipetear: Blanco Estándar Muestra Blanco ---------Muestra ------25λ Estándar ------25λ Solución Reactiva 1000λ 1000λ 1000λ Mezclar, incubar a 20-25°C durante 20-50 minutos, leer las extinciones frente a blanco de reactivos. Límite de dilución 15 mg/dl, con concentraciones superiores diluir la muestra 1 + 1 con solución de cloruro sódico al 0.9% y repetir la determinación, el resultado multiplicarlo por 2. 8. Valores de referencia Hombres: 3.7 - 7.0 mg/dl. Mujeres: 2.4 - 5.7 mg/dl. 9. Interferentes de la prueba El ácido ascórbico en concentraciones terapéuticas no interfiere en la prueba, pero en cantidades excesivas puede dar resultados elevados. Sustancias químicas con efecto antiuricosúrico. Acido etacrínico, furosemida, diuréticos de la benzotiacida. Sustancias que inhiben competitivamente la secreción tubular del urato. El p- aminohipurato, lactato, acetoacetato y B. hidroxibutírico. Por otra parte, ciertos fármacos como los salicilatos, fenilbutazona entre otros, inhiben la secreción de ácido úrico a dosis bajas, pero causan un efecto urosúrico intenso a dosis altas, debido a que estos fármacos pueden inhibir reabsorción tubular a niveles altos. El exceso del lactato también se asocia con la hiperuricemia en los casos de ejercicio fuerte y toxemia del embarazo.

Notas El etanol altera el metabolismo del ácido úrico aumentando la producción de urato y por la supresión de la excreción renal de ácido úrico. Esta última es el resultado

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 10. • Evaluación permanente de resultados. La hiperuricemia tiene también una relación positiva con la hiperlipidemia. pues los valores altos son diagnóstico de “gota”. que inhibe competitivamente la secreción tubular renal del urato. • Almacenamiento adecuado de los cartuchos reactivos. Es de mucha importancia la determinación de ácido úrico. Nefropatía y a menudo nefrolitiasis. por ejemplo carnes.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. En los pacientes hipertensos la reducción del flujo sanguíneo renal y el aumento de la resistencia vascular pueden ser responsables de la disminución de la fracción de filtración del urato. Correlacion clinico patologica Numerosas enfermedades. El aumento del ácido úrico es mucho más frecuente y clínicamente más significativo que su disminución. vísceras y levaduras producen una hiperuricemia leve. cambios bioquímicos e incluso factores sociales y de comportamiento se asocian a modificaciones de la concentración de ácido úrico en el plasma. Entre las etiologías más comunes de hiperuricemia se cuentan el fallo renal. Control de calidad • Cada vez que se determine ácido úrico correr con las muestras un estándar acuoso y dos suero control liofilizado. obesidad. • Asegurarse que la lectura del blanco esté dentro del rango permitido. la cetoácidosis. La gota es un trastorno del metabolismo de purinas o de la excreción renal de ácido úrico caracterizado por: Hiperuricemia. Precipitación de urato monosódico en forma de depósitos (tofos) por todo el cuerpo. alteraciones fisiológicas. . excepto por el SNC. Las reservas de ácido úrico pueden superar los 30 g. el exceso de lactato y el uso de diuréticos. • Adecuada extracción y manipulación de muestras límites aceptables en los controles. aterosclerosis. diabetes mellitus. aunque presenta predilecciones por articulaciones. La ingestión de alimentos ricos en purinas. Ataques clínicos recidivantes de artritis. tejido subcutáneo y bolsas sinoviales.0 Página 5 de 83 del exceso de lactato producido por la oxidación del etanol a acetaldehído. hipertensión.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . ya que esto puede aumentar la concentración de proteínas.0 Página 6 de 83 Se han identificado dos defectos enzimáticos ligados al cromosoma sexual como etiología de la gota primaria: Una deficiencia de (H 6 PRT) hipoxantin guanin . 3. ALBUMINA 1. Fundamento. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentracion de albumina en la muestra. 5. despues de abierto debe evitarse la contaminación. El uso del torniquete no ha de execeder los 30 segundos. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 8 horas y durante este periódo no hacer esfuerzoz corporales intensos. anticoagulantes o agua destilada aumentan los valores. . Metodo Prueba fotometrica colorimetrica para Albumina Metodo BCG 2. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones de la muestra No usar plasma heparinizado porque se puede alterar el valor. El verde de bromocresol forma con la albumina en buffer de citrata un complejo coloreado.fosfato La presencia de amonio en cualquiera de los reactivos. Estable 1 mes a 2-8 grados y 1 semana entre 15 y 25 grados 4. Patron de albúmina y el RGT son estables hasta la fecha de vencimiento cuando se almacenan de 2 a 25 grados centigrados.fosforrobosil transferasa. Una hiperactividad de fosforribosil . Muestras Suero ó plasma con EDTA ó heparina.

Hay 3 factores que pueden disminuir su concentración: . Interferencias La prueba no es influenciada por valores de Bilirrubina hasta 20mg/d. Leer la absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco de reactivo.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.8 – 5. 9.0 ml Mezclar bien y dejar los tubos durante 5 minutos a temperatura ambiente.0 Página 7 de 83 6. ABS muestra ____________ X 4 g/dl albúmina ABS patrón 8.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Hemoglobina (1 g/L). 7. La reacción de la albúmina con el verde de bromocresol es inmediata.0 ml muestra ---10 ul 1. 578 nm 1 cm 20 a 25 frente a blanco de reactivo por serie. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Hg 546 nm.0 ml patrón 10 ul ---1. Correlacion clinicopatologica. por lo que es conveniente no demorar la lectura. El color es estable durante al menos 30 minutos. Valores normales 3. Otras proteinas reaccionan lentamente. 10. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Patrón albúmina Muestra Reactivo blanco ---------1.1 g/dl en hombres y mujeres.

Otras: Trastornos pulmonares. albúminuria persistente. 3) Por carencia de materia prima como en la hipoalimentacion. El proceso de aglutinación provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentración de uALB de la muestra. 2. (hemorragias. 2) Por síntesis defectuosa como ocurre en la mayor parte de las hepatopatías. 4. Fundamento Las partículas de látex con anticuerpos anti-albúmina humana.0 Página 8 de 83 1) Pérdidas cuantiosas o frecuentes. La manifestacion clínica mas llamativa es el edema. 3. Edemas carenciales. y se debe ajustar su pH a 7. Anemia persistente Neoplasia nefrosis lipoidea. paracentesis. Condiciones de la muestra La orina debe ser lo más fresca posible. 5. son aglutinadas por uALB presente en la muestra del paciente. Es estable por 7 días cuando se le añade azida sódica para prevenir posibles contaminaciones. y por comparación conocida se puede determinar el contenido de uALB en la muestra ensayada. MICROALBUMINURIA 1.0 con NaOH/HCl 1 mol/L.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Muestra Orina fresca.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Metodo de determinacion Longitud de onda: 540 nm (530-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 37°C Medición: frente a agua destilada . Metodo Prueba de turbidimetría para la cuantificación de microalbúmina en orina humana. catabolismo excesivo).

Interferencias No interfieren valores de Glucosa 2 g/L. Correlacion diagnostica Se define la microalbúmina como la tasa de excresión de albúmina en orina entre 20 y 200 ug/min. Valores de referencia Hasta 15 mg/L 8. hemoglobina 10g/L. 7. esta aun por debajo de la concentración considerada como una proteinuria convencional. La microalbuminuria es un marcador del riesgo de la nefropatía diabética.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 7 ul Mezclar y leer la absorbancia frente a agua destilada y leer a los dor minutos después y se multiplica el valor por la concentración del calibrador.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. así como de alteraciones cardiovasculares en pacientes que sufren diabetes mellitus insulinodependientes o bien insulina no-dependiente. . La urea > de 1g/L y bilirrubina > 10mg/dl interfieren. creatinina 3 g/L.0 Página 9 de 83 6. siendo superior al valor normal. concentración que.

0 Página 10 de 83 .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

hígado y medula ósea). La bilirrubina total del suero incluye la bilirrubina libre o no conjugada (reacción indirecta) y una pequeña cantidad de bilirrubina conjugada o de reacción directa. que acaban conduciéndola a los conductos hepáticos. Un 5% de los citocromos citoplasmáticos y mitocondriales hepáticos. fosfolípidos. Hem hem oxigenasa Biliverdina Biliverdina reductasa Bilirrubina.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . y el otro porcentaje de los eritrocitos defectuosos destruidos en la medula ósea antes de ser liberados. La bilirrubina conjugada se excreta después por las células hepáticas hacia los canalicemos intrahepáticos. Generalidades La bilis se forma en el hígado y presenta muchos componentes.0 Página 11 de 83 BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA. La orina normalmente contiene una pequeña cantidad de urobilinógeno. incluyendo sales biliares. El metabolismo de la bilirrubina proviene en un 80% de la descomposición de los hematíes envejecidos en el sistema retículo endotelial (bazo. es útil para evaluar la extensión y el progreso de la ictericia. La hemoglobina es liberada desde los hematíes y descompuesta en moléculas de Heme y globina.glucoronil .transferasa. colesterol. conjugación catalizada por la enzima Bilirrubin . el conducto biliar común y el intestino. esta solo aparece cuando la concentración en plasma se encuentra aumentada y siempre es de bilirrubina conjugada. bicarbonato. agua y bilirrubina. El riñón no excreta bilirrubina no conjugada puesto que es insoluble en agua y en general se encuentra unida a la albúmina. . El examen de la orina para los pigmentos biliares (bilirrubina) y urobilinógeno se emplea en la investigación de la ictericia. pero no de bilirrubina. hasta las células hepáticas en donde es conjugada con el ácido glucoronico. El heme es catabolizado después para formar biliverdina que se transforma en bilirrubina.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El nivel de la bilirrubina serica total. por tanto no atraviesa la membrana glomerular. Esta forma de bilirrubina se denomina no conjugada (indirecta) que es transportada en el plasma en forma libre unida a la albúmina.

Proteger la muestra de sangre de la luz brillante. Debe procesarse la muestra el mismo día. mientras que la otra hay que adicionarle alcohol. de que parte de la bilirrubina reacciona directamente con el reactivo de Erlich. ya que en caso contrario los resultados de la prueba podrían ser inexactos. 5. llevadas a cabo por Van Den Berg en 1913.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. . La absorbancia de este color a 546 nm es directamente proporcional a la concentración de bilirrubina en la muestra. 4. Evitar muestras hemolizadas.0 Página 12 de 83 La designación de Bilirrubina como directa e indirecta deriva de observaciones. Muestra Suero o Plasma con heparina. y deben estar protegidas de la luz. Metodo Método modificado de Jendrassik/Gróf. Bilirrubina total = bilirrubina directa + bilirrubina indirecta. Condiciones de la muestra No agitar el tubo. La muestra es estable por 3 días a una temperatura de 2 a 8 grados. 3. 2. Fundamento La Bilirrubina reacciona con al ácido sulfanílico diazotado (DSA) formando un color rojo. alajada de la luz.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . El uso de torniquete no debe prolongarse más de 30 segundos. Los glucoronidos de la bilirrubina solubles en agua reaccionan directamente con DSA mientras la bilirrubina indirecta conjugada con albumina reacciona sólo en la presencia de un acelerador. Mencionar en el volante del laboratorio cualquier fármaco que pudiera afectar los resultados de la prueba. Condiciones del paciente Reposo de 15 minutos antes de la toma de muestra. El ayuno prolongado produce aumento de bilirrubina ya que parte de esta se almacena en el tejido adiposo y al suceder la lipolisis se libera y sale a la circulación. 1. Ayuno de ocho horas.

. Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente exactamente por 5 minutos.. Tecnica Bilirrubina total Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min. Leer la absorbancia de la muestra frente al blanco.. Bilirrubina directa Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Muestra 1 ml 1 gota Reactivo DBR Reactivo DNR Mezclar cuidadosamente e Incubar por 2 minutos.0 Página 13 de 83 6.. Muestra 1 ml 1 gota 546 nm 1 cm 20 a 25 grados C frente a blanco de muestra.. Leer la absorbancia frente al blanco.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1..EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . . Reactivo TBR Reactivo TNR Mezclar cuidadosamente e incubar por 5 minutos. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7.

Valores de referencia Bilirrubina total: 0. Linealidad La prueba es lineal hasta 25 mg/dl. diluir la muestra 1 + 4 con solución fisiológica y repetir la prueba. Entre los fármacos que reducen los niveles de bilirrubina total se incluyen barbitúricos.2 . Para obtener la concentración de la Bilirrubian indirecta se resta o establece la diferencia de la concentración de la Bilirrubina total y Bilirrubina directa. Entre los fármacos que pueden causar niveles aumentados de bilirrubina total se incluyen: Esteroides. 10. anticonceptivos orales.1 . cafeína. causada por niveles sanguíneos de bilirrubina anormalmente altos.20. 9. Interferentes La exposición prolongada (más de 1 hora) a la luz solar directa o artificial puede causar disminución de la bilirrubina en un 50%. antibióticos (Eritromicina).0. el color amarillo se aprecia cuando la bilirrubina serica total . diuréticos.0 Página 14 de 83 8. Correlacion diagnostica La determinación de bilirrubina total es útil para evaluar la extensión y progreso de la ictericia en problemas hepatocelulares. penicilinas y salicilatos (dosis elevadas).0 umol/l.1 . etc. La ictericia es una coloración amarillenta de los tejidos corporales (piel. Bilirrubina directa: 0.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.5 umol/l. antipalúdicos.12.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .1. La hemólisis de la sangre y la lipemia pueden producir resultados erróneos. salicilatos y vitamina A.1 .0.5. Bilirrubina indirecta = B. membranas mucosas y escleróticas).17.0 mg/dl o 5.3 mg/dl o 1. ácido ascórbico.4 . si la concentración es mayor de 25 mg/dl. directa.0 umol/l. obstructivos y prehepáticos. total .8 mg/dl o 3. Multiplicar el resultado por 5. anabolizantes. El almacenamiento no es conveniente. Bilirrubina total en el recién nacido: 1 a 12 mg/dl ó 17. 11. Estabilidad No es muy estable. Bilirrubina indirecta: 0. se altera rápidamente con la luz. por lo tanto.7 .1 umol/l.B. si se necesita debe refrigerarse por pocos días (3 días a 2-8 °C) protegida de la luz.1 . debe procesarce la muestra lo más rápido posible. morfina.

tumores metastásicos etc.5 mg/dl. enfermedad drepanocitica. Causas:  Obstrucción intrahepática: debido a obstrucción por fármacos. indirecta o estar normal y la bilirrubina total aumentada. En general hay bilirrubinuria. Causas: Shock por hipoxia. Síndrome de Cliger . La ictericia se debe a un defecto en el metabolismo o la excreción normales de bilirrubina.  Síndrome de Gilbert  Recién Nacidos. Hepatitis viral. .  Cirrosis por alcohol. Causas: Metabolismo aumentado del Heme: esferocitosis hereditaria.  Hiperbilirrubinemia por derivación.Najjan I y II. Cirrosis. etc.0 Página 15 de 83 supera los 2. hormonas esteroideas. Ictericia pre – hepatica Hay aumento de la bilirrubina indirecta. Ictericia hepatocelular Hay aumento mayor de la bilirrubina directa y puede haber aumentos menores de B. Ictericia post .  Destrucción prematura de eritrocitos defectuosos.hepatica o colestasica Hay aumento de bilirrubina directa y se presenta Bilirrubinuria. defecto que puede ocurrir en cualquier fase del metabolismo de la bilirrubina desde su formación hasta su excreción intestinal. policitemia. alcohol y tóxica. virica o alcohólica. cirrosis biliar primaria. hepatitis aguda. Insuficiencia cardiaca congestiva. talasemia intoxicación por plomo.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . atresia de conductos. No hay bilirrubinuria. Eritropoyesis ineficaz acelerada: Anemia megaloblástica.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

0 Página 16 de 83  Colestasis extrahepática o quirúrgica: debido a carcinoma en conducto. . cálculos biliares. páncreas o ampolla de Vater. Nota La bilirrubina directa diferencia la ictericia Pre-hepática de la hepatocelular y obstructiva y la bilirrubina indirecta hace la diferenciación entre la hepatocelular obstructiva y las Pre-hepáticas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. vesícula biliar. por edema en la cabeza del páncreas.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Los lípidos totales están compuestos por: colesterol libre.0 Página 17 de 83 PERFIL LIPIDICO MINIMO Generalidades de lipidos Los lípidos constituyen la principal reserva energética de los seres vivos y también forman parte de la membrana celular y regulan la actividad de la célula y tejidos. Transportado principalmente por LDL. El aspecto del suero no indica que el paciente este normal. Triglicéridos HDL colesterol VLDL colesterol: se evalúa mediante la formula trigliceridos/5. se encuentran en el plasma como lipoproteínas. Todos estos lípidos con excepción de los ácidos grasos que están ligados a la albúmina. Perfil lipidico minimo El dato del colesterol total y los triglicéridos da una información global de los lípidos que circulan en el organismo. En el estudio del perfil lipídico mínimo se deben tener en cuenta los siguientes parámetros: Aspecto del suero: se realiza la prueba en frío en caso de obtener sueros lechosos. esteres de colesterol. El colesterol total del cuerpo: comprende el colesterol libre y esterificado. se coloca el suero durante 12 horas en refrigeración (4ºC) esto con el objeto de ayudar a clasificar las trigliceridemias así:  Capa cremosa en la superficie y nadante transparente. pero sí se requiere tener un concepto claro de cómo están incidiendo los lípidos en el aparato circulatorio. porque valores de colesterol aumentados no producen ninguna turbidez. 70% esterificado.  Capa cremosa en la superficie y nadante turbio significa triglicéridos exógenos y endógenos (quilomicrones y VLDL).EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . LDL colesterol: se determina con la formula de Friedewald . se debe tener un estudio fraccionado de las lipoproteínas que es lo que se conoce como perfil lipídico. 30% libre. Aspecto uniformemente lechoso significa presencia de triglicéridos endógenos (VLDL). IDL y VLDL. fosfolípidos y ácidos grasos libres. significa presencia de triglicéridos exógenos (quilomicrones). HDL. triglicéridos. cuando estos son < 400 mg/ml.

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.(VLDL C + HDL C ). Interpretacion del perfil lipidico mínimo Lípido mg/dl Colesterol Total LDL Colesterol HDL hombres HDL mujeres Trigliceridos Indice arterial: Deseable <200 <130 >35 >45 <200 Hombres <=5 Mujeres <=4.5 Riesgo potencial 200-239 130-159 25-35 40-45 >200 Riesgo alto >=240 >=160 <25 <40 >200 Estas cifras nos indican que la arteriosclerosis se esta verificando en forma normal. Cifras superiores establecen un alto riesgo de enfermedad coronaria.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 18 de 83 LDL C = CT. Indice arterial se determina mediante la formula CT/HDLC ö LDLC/ HDLc. .

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Fundamento El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba. 6. 3. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm.0 Página 19 de 83 COLESTEROL TOTAL 1. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. para evitar la redistribución del Colesterol entre las diversas lipoproteínas. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para colesterol con factor aclarante de lípidos (LCF) CHOD-PAP 2. Condiciones del paciente Esta prueba no necesita de ayuno pero como generalmente se realiza con el resto del perfil lipídico. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. 4. Medición: frente a blanco de reactivo. Separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción. El indicador es la quinonemina formada por el peróxido de hidrógeno y 4aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa. . Anotar cualquier fármaco que pueda modificar los valores de Colesterol. 5. Muestra Suero o plasma con heparina o EDTA. se deben seguir los requerimientos que para este se indiquen. Extraer 5-10 ml de sangre en un tubo seco.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

Neomicina (oral). Colchicina. Adrenalina. Corticosteroides.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . o 5 minutos a 37 grados C. Evitar el contacto con los reactivos ya que son muy corrosivos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. bloqueadores beta-adrenérgicos. sulfamidas. Colestipol. Vitamina D. ni de Bilirrubina menor a 5 mg/dl. Hay fármacos que elevan los niveles de Colesterol como: Hormona adrenocorticotrópica. Notas El test no se afecta con valores de hemoglobina inferiores a 200 mg/dl. incubar 10 minutos a 20 ó 25 grados. Valores de referencia Varían con la edad y el laboratorio.200 mg/dl < 220 mg/dl Sospechoso mayor de 220 Elevado mayor de 260 9. Diuréticos tiacídicos. Allopurinol. Interferencias La Ovariectomía aumenta los niveles de Colesterol. Isoniacida. Esteroides anabólicos. 8. . Tecnica Pipetear Blanco ---------1000 µl Estándar ---10 µl ---1000 µl Muestra ------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Rvo Color Mezclar. Nitratos. Captopril. Liotironina (Cytomel). Lovastatina (Mevacor). Niaciana.0 Página 20 de 83 7. Eritromicina. Quelantes de las sales biliares. RECIEN NACIDOS LACTANTES NIÑOS ADULTOS/ ANCIANOS 53 – 135 mg/dl 70 – 175 mg/dl 120. Hay otros que disminuyen los valores como: Andrógenos. Anticonceptivos orales.

10. Correlacion diagnostica  Niveles sospechosos: 220 mg/dl ó 5. Anemia hemolítica. Xantomatosis. Desnutrición. Cirrosis biliar.7 mmol/l  Niveles superiores: 300 mg/dl Necesitan tratamiento. Hipotiroidismo. Hipertiroidismo. 1 + 2 y repetir la determinación. Niveles disminuidos en: Sepsis.7 mmol/l  Niveles elevados: 260 mg/dl ó 6. Mala absorción. Linealidad El test es lineal hasta una concentración de Colesterol de 750 mg/dl (19. multiplicar el resultado por 3. Colestasis hepática. aterosclerosis. . Para la técnica se debe montar un control Normal y uno Patológico. Control de calidad Hacer control periódico a equipos y reactivos para evitar resultados falsos positivos ó falsos negativos. generando resultados falsamente elevados 9. Diabetes Mellitus descontrolada. Síndrome nefrótico. Medicación hipocolesterolemiante. Anemia perniciosa. Enfermedad hepática.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.9%). Estrés.3 mmol/l). Resultados anormales Niveles aumentados en: Hipercolesterolemia. Hipertensión. Infarto de miocardio. Para concentraciones mayores diluir la muestra con solución salina al (0. Dieta rica en Colesterol. Hiperlipemias.0 Página 21 de 83 Muestras lipémicas usualmente generan turbidez en la muestra que se va a analizar. embarazo.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . nefrósis.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 6. en la mayoría de las personas la lipemia posprandial interfiere con muchos de los métodos analíticos. 2. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. HDL es estable en la muestra de suero durante 7 días a 4ºC o durante 4 meses a –20ºC. el sobrenadante contiene las HDL que se van a determinar. Despúes de centrifugar. Medición: frente a blanco de reactivo . Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. 3. Metodo Colesterol precipitnte.0 Página 22 de 83 COLESTEROL HDL 1. Debe señalarse que si bien la falta de ayuno no afecta los niveles de HDLc sanguíneo. Muestra Suero o plasma con anticoagulante EDTA o heparina. Condiciones del paciente Ayuno de 12-14 horas previas a la extracción de sangre. 5. Fundamento Los quilomicrones. 4. VLDL y LDL se precipitan por adición de ácido fosfotúngstico y cloruro de magnesio. Abstenerse de no ingerir alcohol por 72 horas antes de la toma de la muestra (no es necesario).ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones de la muestra La muestra debe separarse del coagulo dentro de las dos horas de la extracción y conservarse a 4ºC a menos que se analice de inmediato.

En las muestras con un contenido de triglicéridos altos se pueden presentar precipitaciones incompletas de las lipoproteínas o flotación por parte de las mismas sobre él liquido. observando un sobrenadante turbio. Tecnica A. Determinación Agua destilada Estándar Sobrenadante Reactivo de color Blanco 100 ul ------1ml Estándar 100 ul ---1ml Problema ---100 ul 1ml Mezclar.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . separar el sobrenadante claro del precipitado dentro de 1 hora y determinar la concentración del colesterol HDL con el reactivo de Colesterol total.9% y se repite la precipitación de la muesta diluida. Centrifugar por 2 minutos a 10000 rpm ó 10 minutos a 4000 rpm.0 Página 23 de 83 7. Leer la absorbancia de la muestra y el estándar frente al blanco de reactivo antes de una hora. . en ese caso. Despúes de centrifugar. se hace una dilución 1: 1 con solución cloruro de sodio al 0. Notas El sobrenadante debe ser claro. incubar por 10 minutos a temperatura ambiente.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Precipitación pipetear muestra precipitante Macro 500 ul 1000 ul Micro 200 ul 500 ul Mezclar bien. B. El ácido ascórbico disminuye los valores. Limite de dilución 310 mg/dl. incubar todos los tubos a temperatura ambiente por 10 minutos ó a 37ºC por 5 minutos. El resultado se multiplica por dos.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Resultados Anormales. deficiencia de LPL 1 con afectación del metabolismo de quilomicrones y VLDL. para evitar la arteriosclerosis prematura. sedentarismo. deficiencia familiar de Apo I y Apo II. Se observa en: mayor producción de Apo I y Apo II y actividad física fuerte. Niveles disminuidos de HDL correlacionan con riesgo aumentado de enfermedad cardiocirculatoria. Niveles aumentados de HDL correlacionan con disminución en el desarrollo de enfermedad cardiocirculatoria. hipertriglicéridemia. .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. siendo esta la mejor forma de luchar contra este mecanismo fisiológico. obesidad. Valores de referencia Mujeres > 45mg/dl Hombres > 35mg/dl 9. Correlacion diagnostica La HDL contrarresta la acción nociva que puede tener la LDL sobre nuestro organismo.0 Página 24 de 83 8. La LDL juega un papel muy importante en el funcionamiento arterial y por esto debemos tratar que el organismo tenga estrictamente la cantidad necesaria que requieren sus funciones. al evitar la arteriosclerosis excesiva porque remueve y elimina a través de la bilis cantidades considerables de LDL en forma de ácidos biliares y esteroides neutros. complementada con un nivel de HDL lo más elevado posible.

Condiciones del paciente El ayuno debe ser entre 12 y 14 horas. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para triglicéridos con factor aclarante de lípidos. que consiste en . Los volúmenes de la reacción sugeridos se pueden modificar sin ningún cambio en los cálculos. Fundamento Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasa. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. la temperatura de 25ºC permite la liberación de glicerol de los fosfolipídos y produce un incremento aparente del valor de los Triglicéridos. GPO-PAP 2. Antes de procesar la muestra se debe observar y anotar el aspecto del suero ya que si este está lechoso. El indicador es Quinineimina formada a partir de peróxido de hidrógeno. Muestra Suero o plasma heparinizado o palsma con EDTA 4. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba. metabólitos y una serie de fármacos de uso común NO interfieren con el método. Extraer 5-10 ml de sangre en tubo seco y separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción. se le debe hacer la prueba en frío. 5. 4aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. No hacer ejercicio fuerte antes de la prueba. Los Triglicéridos permanecen estables 3 días a 4ºC.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 3. No consumir grandes cantidades de Carbohidratos y grasas 48 horas antes de la prueba. Es importante describir el aspecto del suero.0 Página 25 de 83 TRIGLICERIDOS 1. Notas La lipemia. la hemólisis hasta 10 mg/dl ó 170 mmol/l. para evitar la redistribución de los Triglicéridos entre las diferentes lipoproteínas.

6. 8. Estabilidad de la reacción 1 hora. 25 ó 37 grados C Medición: frente a blanco de reactivo 7. con solución salina al 0. repetir la determinación y multiplicar el resultado por 6. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20. Los Triglicéridos no permanecen en el suero a 25ºC. a 4ºC son estables por 3 días. leer con Blanco de reactivo. Para concentración superior diluir la muestra 1+5. Tecnica Pipetear: Blanco ------------1000 µl Estándar ---10 µl ------1000 µl Muestra ------10 µl ---1000 µl Control ---------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Control Reactivo Mezclar.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.3 mmol/l) de Triglicéridos. Valores de referencia EDAD 0 – 5 años 6 – 11 años 2 – 15 años 16 – 19 años Adultos / ancianos HOMBRES 30 – 86 mg/dl 31 – 108 mg/dl 36 – 138 mg/dl 40 – 163 mg/dl 40 – 160 mg/dl MUJERES 32 – 99 mg/dl 35 – 114 mg/dl 41 – 138 mg/dl 40 – 128 mg/dl 25 – 135 mg/dl . e incubar por 10 minutos a 25ºC o por 5 minutos a 37 grados C. Metodo de determinacion Longitud de onda: 500 nm. debido a que fácilmente se libera el glicerol.0 Página 26 de 83 colocarlo en la nevera por 12 horas.9%.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Linealidad El método es lineal hasta 1000 mg/dl (11. luego de las cuales se observa las características que presenta el nadante y el sobrenadante.

por lo tanto cuando esto sucede las LDL no se deben reportar. Diabetes mal controlada. Niveles disminuidos en: Síndrome de mala absorción.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 10. Enfermedad con almacenamiento de glucógeno. . Síndrome nefrótico. Asparraginasa. Embarazo. Interferencias Elevando los valores Colestiramina. Riesgo de enfermedad coronaria y vascular. Nota: Los trigliceridos elevados afectan el cálculo de las LDL.0 Página 27 de 83 9. Cirrosis alcohólica. Desnutrición. Estrógenos y anticonceptivos orales. Correlacion diagnostica Niveles aumentados en: Hiperlipemias.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Hipotiroidismo. Clofibrato y colestipol. Hipertiroidismo. Hipertensión. Dieta rica en carbohidratos. Infarto de miocardio. Disminuyendo los valores Acido ascórbico.

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CREATININA

Generalidades Sus aumentos suelen ser proporcionales con respecto a los de la urea, aun cuando en general son más tardíos. Tiene particular interés diagnostico y pronóstico en los siguientes casos:  Nefropatías: Cuando en una insuficiencia renal con uremia, se observan cifras superiores a 5mg/100ml, él pronostico es fatal a corto plazo. Esto solo sucede en las fases avanzadas, ya que en las precoces, dada la facilidad de eliminación de la creatinina solo aumentan el ácido úrico y la úrea. En las nefritis agudas generalmente no hay elevación; en los casos en que existe (40%) es un cambio reversible y de escaso valor pronostico. En las nefrósis por tóxicos (Hg y Ag.) es donde se observan mayores elevaciones; en la insuficiencia cardiaca avanzada puede originarse una retención discreta o moderada de creatinina aunque no exista verdadera nefropatía.  En obstrucciones urinarias (Afecciones de próstata, vejiga, uréter, etc.) y en la anuria refleja (cálculos uretrales), se producen así mismo elevaciones marcadas de creatinina incluso 30 mg o más, igualmente reversibles con la reparación de la obstrucción.  En el gigantismo y acromegalia se observan discretas elevaciones. Cada 24 horas se transforma un 2% de creatina en creatinina. La cantidad de creatinina por unidad de masa muscular es constante y por lo tanto la degradación espontanea es constante. Como resultado de este fenómeno la concentración plasmatica de creatinina es estable y varia en menos de 10% diario en individuos normales. 1. Metodo Reacción de Jaffe Prueba fotométrica colorimértica para mediciones de punto final desproteinización.

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2. Fundamento La creatinina en solución alcalina forma un complejo coloreado rojo-naranja con ácido picrico. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la creatinina en la muestra. 3. Muestra Suero o plasma heparinizado u orina 4. Condiciones del paciente La muestra de sangre no requiere ayuno previo ya que la excreción de creatinina depende muy levemente de la alimentación y de la diuresis. Por lo menos 8 horas antes del examen no realizar esfuerzos corporales intensos. 5. Condiciones de la muestra La muestra de suero para creatinina es inestable a temperatura ambiente, refrigerada de 2 – 4 ºC por 24 horas. Congelada a –20 ºC es estable por 6 meses La creatinina puede ser determinada en cualquier líquido biológico, pero las muestras mas usadas son suero, plasma y orina. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 546 nm (500-550 nm) 1 cm 25° C frente a blanco de reactivo

7. Tecnica Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ

Solución Trabajo Estándar Suero

Mezclar y poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia a los 30 segundos y a los 90 segundos. A2-A1= Creatinina

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8. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Mujeres Hombres 0.5 – 1.0 mg/dl. 0.7 – 1.2 mg/dl.

Estos valores están influenciados por el sexo (siendo menor en la mujer), masa muscular del individuo. 9. Interferentes de la muestra y la reaccion • Interferentes positivos: Acido ascórbico, piruvato, acetona, ácido acetoacético, levulosa, glucosa, ácido úrico, proteínas, barbitúricos y antibióticos de la cefalosporina. Las temperaturas altas y los prolongados tiempos de reacción (> a 5 minutos), aumentan esta interferencia. El piruvato, acetona, ácido acético, aminoácidos y proteínas o cualquier compuesto con un grupo metilo o metileno activo, introduce errores debido a su acoplamiento con el picrato por un mecanismo análogo al de la creatinina; todos estos compuestos pueden producir sustancias coloreadas que aumentan la absorbancia en la reacción del complejo coloreado. La bilirrubina y otros productos de degradación de la Hb, causan una interferencia negativa probablemente por su oxidación en medio básico fuerte a compuestos incoloros, dando como resultado una disminución de la absorbancia, lo que se interpreta como una menor concentración de creatinina. Esta interferencia negativa se observa con frecuencia en el análisis cinético de la creatinina. 10. Correlacion diagonstica El nivel de creatinina en suero depende de 2 factores: La velocidad de producción. La velocidad de filtración. Dado que la fuente de creatinina serica es la creatina muscular y la fosfocreatina, una mayor cantidad de masa muscular produce un aumento de la creatinina serica. Los valores de creatinina exhiben una respuesta escasa o nula a las modificaciones dietéticas o a las alteraciones del equilibrio electrolitico.

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La concentración de creatinina en sangre, como la de la urea, se aumenta con el descenso de la función renal y el principal empleo de la determinación de creatinina serica esta en la evaluación de la función renal. En nefritis crónica cuando la concentración de BUN esta muy por encima de 50 mg/dl, el aumento de la creatinina es proporcional y las concentraciones de creatinina mayores a 5 mg/dl se consideran de importancia diagnostica grave. Niveles disminuidos se encuentran en la distrofia muscular. Notas La especificidad de la reacción depende del pH, temperatura y tiempo. Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse del fotómetro, sin que se alteren los resultados finales. El ácido pícrico es tóxico. Evite la inhalación, ingestión y contacto con la piel, lavar enseguida con polietilenglicol 400, con abundante agua.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . que la concentración de dicha sustancia aislada en sangre o en orina.  Guardar refrigerada y en frasco bien tapado.0 Página 32 de 83 DEPURACION DE CREATININA Generalidades Es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. Valores de referencia: Hombres: 98 – 156 ml/minuto Mujeres: 95 – 160 ml/minuto Limite de dilución: 500 mg/dl 2. Técnica para la orina: Diluir 1:100 con Solución Salina 0. 1.9%. Condiciones del paciente La muestra de sangre debe obtenerse durante el periodo de recolección de la orina. 8 ó 12 horas. el mismo procedimiento de creatinina en suero. té y café durante las 24 horas anteriores a la recolección.  Para la recolección de la orina el paciente debe fijar una hora cero. La relación entre la concentración de una sustancia en orina y sangre es el mejor índice de función renal. inclusive la muestra del tiempo fijado para la recolección.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.  Debe seguir tomando agua. porque nos da información de cómo esta la filtración glomerular. Muestra Técnica para el suero. para asegurar un volumen urinario de 1 ml por minuto cuando menos.  El paciente debe abstenerse de ingerir carne. generalmente 24 horas aunque es posible reducirlo a 4. El control cronológico de la recolección de las muestras es esencial para la realización correcta de la prueba. . La depuración de la creatinina endògena es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva.  Marcar en el frasco la hora de iniciación de la recolección. siempre y cuando los resultados se interpreten en forma comparativa y no absoluta. Descartar la orina de esa hora y a partir de entonces recoger todo el volumen de orina. La muestra de orina se recoge durante un periodo determinado.

La concentración de creatinina debe determinarse antes de las 24 horas de recogida la muestra.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La muestra de orina debe refrigerarse o agregarse un inhibidor bacteriano. 3. Tecnica Pipetear: Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ Solución Trabajo Estándar Orina diluida Dilución de la orina * Hacer una dilución de la orina de 1: 50. además producen creatininasas que destruyen la creatinina.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 33 de 83  Interrumpir toda terapia diurética. Metodo de determinacion Longitud de onda: 546 nm (500-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25° C Medición: frente a blanco de reactivo 5. Calculo Creatinina en Orina* ________________ Creatinina en suero x Volumen (ml) _________ 1140 (Constante) . ya que los gérmenes producen variación en el pH promoviéndose así la conversión de creatinina en creatina. la cual no puede medirse por la reacción de Jaffé. el resultado se multiplica por 50. Condiciones de la muestra Muestra de suero libre de hemólisis fuerte y de ictericia (ya que una ligera hemólisis no afecta la determinación). 4. 10 ml de orina + 490 ml de agua destilada.

0.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Interferencias Los mismos de la guía anterior.2 mg/dl. sin que se alteren los resultados finales. ejercicio fuerte durante la prueba. Entre las causas de error están: mal cronometrado o recogida inadecuada de la muestra de orina. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Creatinina en orina Depuración de Creatinina: Mujeres Hombres Mujeres 0. por lo que el verdadero valor de filtración glomerular esta por debajo de la depuración de la creatinina. 75 – 115 ml/min.0 Página 34 de 83 6.9 – 1. . Notas Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse proporcionalmente según las necesidades del fotómetro. 1900 mg/24 h.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .4 mg/dl. 16 – 22 mg/Kg peso/24 h 85 – 125 ml/min. 8. que seria una fuente de error negativa. Correlacion diagnostica En enfermedades renales avanzadas la excreción urinaria de creatinina excede a la velocidad de filtración glomerular a causa de la secreción tubular. 21 – 26 mg/Kg peso/24 h Hombres 7.8 – 1. lo cual aumenta los niveles urinarios. la hidratación inadecuada del paciente.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . . En las personas obesas la depuración esta alterada por lo tanto se hace necesario la corrección. y crónica. disminuciones se observan en pielonefritis crónica e hipertensión. en niños y personas de baja estatura por esto se hace necesario realizar la corrección del valor obtenido.N. la depuración es menor que la filtración.0 Página 35 de 83 El filtrado glomerular disminuye notablemente en G.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. ligeras La filtración glomerular normal es en un adulto de 125 ml/min.73/A para obtener el valor real de la depuración en estos pacientes. multiplicando el resultado por 1. La depuración de creatinina disminuye en personas de edad. podemos concluir que esta sustancia es reabsorbida. Si la depuración plasmatica de una sustancia es mayor que la filtración glomerular debe interpretarse como que esta sustancia es secretada por el túbulo y si por el contrario.A.

La liberación de glucosa por el hepatocito mediante un mecanismo que se acelera al disminuir la glicemia sanguínea. Gluconeogenesis: Formación de glucosa a partir de otro sustrato diferente al glucógeno ejemplo: aminoácidos. La glucosa sanguínea proviene de dos fuentes: La más importante es la absorción intestinal de glucosa alimenticia que normalmente puede llevar los valores sanguíneos de glucosa hasta 138 -140 mg/dl. músculo en mayor proporción y también leucocitos.0 Página 36 de 83 GLICEMIA Generalidades Glucemia o glicemia: Este término se refiere a la presencia de la glucosa en sangre.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 1. . Metodo Prueba enzimática colorimétrica por glucosa. en el tejido nervioso en muy poca cantidad). Metodo con desproteinización. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de la peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo-violeta usando la quinonemina como indicador. Fundamento La glucosa de determina despúes de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. Glucolisis: Llevar la glucosa-6-fosfato hasta piruvato para producir acétyl Co A (ciclo de krebs). GOD-PAP. Glucogenolisis: Movimiento de glucógeno almacenado para producir glucosa-6fosfato.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 2. Glucogenesis: Formación de glucógeno (hígado.

M. de hidratos de carbono. Condiciones del paciente No se requiere preparación dietética especial. No presenta glucosuria positiva antes de dar la carga de glucosa. 6. La estabilidad de la muestra es de 8 horas.0 Página 37 de 83 3. No realizar ejercicio antes o durante la prueba. Leer la absorbancia de la muestra y el patrón contra el blanco de reactivo.25°C por 10 minutos ó 5 minutos a 37°C.) 160-180 mg/dl. COLOR Blanco ---------1000λ Patron ---10λ ---1000λ Muestra ------10λ 1000λ 500 nm 546 nm 1 cm 20. 5. . Ayuno de diez a doce horas. Umbral renal (T. Muestra Sangre total.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . a menos que el paciente consuma diariamente menos de 150grs. suero o plasma 4. 25 ó 37 °C frente a blanco de reactivo Mezclar. No tomar café. En el momento de la toma de la muestra el paciente debe estar sentado erguido. Condiciones de la muestra La separación del suero debe hacerse dentro de los 20 o 30 minutos de la extracción. incube a temperatura de 20 . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. ni haber fumado antes o durante la prueba. Tecnica Pipetear: BLANCO PATRON MUESTRA RVO.

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Carga de glucosa Niños: 1. Nota El tiempo máximo para ingerir la carga de glucosa oral es de 5 minutos. a partir de los cuales se empezara tomar los tiempos para la toma de las muestras asi: Gestantes 1-2 y 3 horas. descartando aquellos pacientes que presentan fluctuaciones en el límite superior de la concetracion plásmatica normal. cuando se sospecha una diabetes a pesar de la ausencia de hiperglicemia en ayunas o sistomática. de dextrosa en 300 ml.) tiene como finalidad la de descartar o de diagnósticar una diabetes mellitus tipo 2 (D. por ejemplo en aquellos paciente que presentar trastornos clínicos .T.O. La prueba de tolerancia oral a la glucosa (P.G.199 Niño 130 – 139 140 – 199 9.G.tipo 2.T. 100 gr.O. A la glucosa Adulto 115 . Valores de referencia Criterios de diagnóstico para DM por PTOG Normal Ayunas P. En los pacientes asintomáticos el diagnóstico de DM se establece cuando se cumplen los criterios diagnósticos de los valores de glicemia recomendado por diferentes asociaciones o grupos de estudio de diabetes asï: National diabetes data group Basal >= a 140 mg/dl en dos ocasiones consecutivas sea en adultos o en niños.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . que pueden no entrañar los riesgos asociados a la DM. Adulto < 115 < 140 Niño < 130 < 140 Diabetes mellitus Adulto >= 140 >= 200 Niño >= 140 >= 200 Intol. Utilizar métodos de laboratorio previamente estandarizados y sueros control Diagnostico de diabetes mellitus El principal objetivo de diagnóstico es la indentificación de pacientes con riesgo de hiperglicemia sintomática de cetoacidosis diabetica (CAD) o coma hiperosmolarno no cetónico (CHNC) o de complicaciones clínicas tardías.T. Para la P.). no Gestantes 2 horas postcarga.M.de agua.G.O.0 Página 38 de 83 8.139 140 .75 gr de dextrosa por kilogra la prueba tamiz consiste en administrar la carga de dextrosa y tomar una muestra después de una hora post-ingesta.

renales o del S. Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl.T. enfermedades cardiovasculares o vasculares Cerebrales agudas. sudoración. Nicotinico. desmayos o palidéz durante la realización de la prueba.T. ac.G. No se debe realizar la P.O.. 2. por lo menos dos valores deben ser > = 200 mg/dl. tampoco pacientes tratados con fármacos que alteren la prueba de tolerancia oral a la glucosa (tiazidas.T.G.O.G. Los criterios diagnósticos por P. Valores normales Después de un ayuno de 10 a 12 horas los valores de glicemia deben estar ubicados entre 70-110 mg/dl (según el método utilizado).T. anticonceptivos orales que contengan estrógenos sintéticos).C. pero en muchos casos la intolerencia a la glucosa no progresa. enfermedades endocrinas que deterioren la tolerancia a la glucosa o enfermedades hepáticas. Adultos: dos horas y en cualquier otro momento de la P. Los pacientes con intolerencia a la glucosa pueden presentar mayor riesgo de hiperglicemia en ayunas o sintomatica.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . vómito. o puede también revertir a la normalidad..ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. solo son válidos para individuos sanos que no presentan infecciones.0 Página 39 de 83 que pudieran deberse a una DM no diagnósticada ejemplo: polineuropatía. Niños: asintomaticos deben ser mas estricto en diagnóstico por P. tanto en niños como en adultos..G.T. debe repetirse para corroborar el diagnóstico de DM. Los sintomas clásicos incluyen poliuria.(dado el mayor riesgo de un exceso de diagnóstico de DM). a los pacientes que presenten naúseas.O.O. Ayunas se define como la no ingesta calórica al menos por 8 horas.. sintomas de diabetes. acompañados de una glicemia a cualquier hora mayor o igual a 200 mg/dl.G. décima edición).N.T. En la P..O. La P. . (Guillermo Farias quimica clínica.O. *Criterios diagnosticos reportados por el comite de expertos en el diagnostico y clasificacion de diabetes mellitus. polidipsia y pérdida de peso. glucocorticoides.G. Los valores de glicemia posprandial pueden ir hasta 160 mg/dl. etc. retinopatía y nefropatia.

debe ser confirmado subsecuentemente por una glicemia en ayunas ≥ a 126 mg/dl. una glicemia 2 horas postcarga ≥ a 200 mg/dl. 2 horas poscarga. la razón para ello es la perdida de la primera fase de secreción de insulina a partir de esta cifra. El comité no recomienda la utilización de los niveles de hemoglobina glicada para el diagnostico de la diabetes. De acuerdo a los nuevos criterios solo se tiene en cuenta los valores a las 2 horas. por el momento solo continua como prueba para el control y no para el diagnostico. las pruebas utilizadas para ella no estan estandarizadas. Diagnostico de hipoglicemia Depende si el paciente presenta manifestaciones del sistema nervioso central (S. si bien los niveles de hemoglobina glicada presentan una distribución similar a la glicemia. Las categorias para la glicemia en ayunas quedan establecidas de esta foma: * Glicemia normal: Menor a 110 mg/dl. se han establecido en 110 mg/dl. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 200 mg/dl.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . estos criterios deben ser confirmados por otra prueba realizada un día diferente. síntomas con una glicemia al azar > de 200 mg/dl. Por ejemplo. Para la prueba de tolerancia a la glucosa. * Hiperglicemia en ayunas: Entre 110 mg/dl y 126 mg/dl. Se han establecido tres criterios para el diagnostico de diabetes. hora y media y a las dos horas.C) inexplicadas o sintomas adrenergicos inexplicables.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. cada uno de ellos debe ser confirmado con una prueba posterior. por lo cual asignar un valor diagnostico es difícil. En la ausencia de hiperglicemia inequívoca con descompensación aguda.N. Para ello se utiliza 75 gramos de glucosa anhidra disueltos en 300 cc de agua. Dos horas poscarga durante una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) mayor o igual a 200 mg/dl. o una glicemia al azar ≥ a 200 mg/dl. son: * Glucemia normal: Menor de 140 mg/dl. Los valores normales para la glicemia en ayunas. .0 Página 40 de 83 3. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 126 mg/dl. * Disminución de la tolerancia a la glucosa: Entre 140 mg/dl y 200 mg/dl. 2 horas poscarga. La prueba de tolerancia utilizaba valores a la hora. las categorias.

si se obtiene un valor anormalmente bajo. confirman el diagnóstico de hipoglicemia de ayuno o inducida por fármacos.N.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .C. tras un aumento de glucosa.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.G . El diagnóstico debe completarse con valoraciones de insulina proinsulina y peptido C y también la busqueda de drogas que puedan estar ocasionando la hipoglicemia (insulina alcohol. menor de 45mg/dl en la mujer. propanolol etc. La mejoría inmediata de los sintomas del S. Por lo general una glucosa plásmatica anormalmente baja se define menor de 50mg/dl en el varón.0 Página 41 de 83 En ambos casos para el diagnóstico se requiere valores plásmaticos anormalmente bajos. sulfas que producen un 50% de las hipoglicemias. y en lactante y niños menor de 40mg/dl .O. se perfunde glucosa de inmediato. El paciente con deterioro de la conciencia o crisis convulsiva debe efectuarse la glucosa con tirilla y gota de sangre obtenida al colocar un aguja para iniciar la perfusión de líquido.180 mg/dl sugieren la realización de una P.T. (Se pueden encontrar valores menores de los expuestos en un ayuno de 72 horas).G. los cuales se corrigen al aumentar la glucosa sanguínea.) Criterios diagnosticos para diabetes gestacional Ayunas >= 105 mg/dl 1 hora >= 190 mg/dl 2 horas >= 165 mg/dl 3 horas >= 145 mg/dl Normal: Hasta 135 mg/dl.M.. Otros fármacos como salicilatos. Valores de glicemia > 180 mg/dl en más de una oportunidad son diagnósticos de D. de 3 horas con una carga de dextrosa de 100 gramos. Anormales: Valores de glicemia entre 135 .

2. La prueba ha sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima límite. La disminución de la absorbancia es proporcional a la concentración de urea dentro de los intervalos de tiempo dados.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 42 de 83 UREA 1. Condiciones del paciente 24 horas antes de tomar la muestra. El amonio producido en esta reacción se combina con 2oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato-deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. 3. por lo tanto debe analizarse pocas horas despúes de recogida o conservarse en refrigeración. ha sido diseñada para ser realizada preferiblemente en analizadores. . Condiciones de la muestra Por acción bacteriana se puede perder la urea. Ya que la prueba cinética es muy rápida. Sueros lipémicos causan turbidez en la solución final. orina diluida 1:1000 con agua destilada. el paciente debe llevar una dieta pobre en proteínas y 12 horas de ayuno total.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 4. Muestra Suero o plasma. 5. Fundamento La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir amonio y dióxido de carbono. Metodo Metodo completamente enzimático para determinación cinética de urea. GLDH.

Tecnica Pipetear Blanco ------1ml Patrón ---10 ul 1ml Muestra 10 ul ---1ml Muestra Patrón Reactivo Mezcle. Metodo de determinación Logitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 340 nm.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. lea la absorbancia de la muestra y el estandar despúes de 30 segundos y lea nuevamente al minuto. 334 nm. la muestra y la solución 1 deben pipetear en el fondo de los tubos de ensayo y mezclarse cuidadosamente.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . El patrón. . Valores de referencia Suero 10-55 mg/dl 1. 30°C ó 37°C Lectura contra blanco de reactivo 7. 3 mmo1/1) de urea para suero o plasma y 200 g/L (330 mmol/L) para la orina. 365 nm 1 cm 25°C. calcule la diferencia 8. 1 mmo1/1 Orina 20-35 mg/24 horas 333-583 mmo1/24 horas El método es lineal hasta 200 mg/dl (33. Para concentraciones más altas mezclar un volumen de la muestra con un volumen igual de agua destilada. 7-9. repetir el ensayo y multiplicar el resultado por dos.0 Página 43 de 83 6.

glucosa hasta 500 mg/dl y ácido ascórbico hasta 30 mg/dl. el nitrógeno no proteico y la creatinina están elevados y los niveles sanguíneos de estas sustancias se emplean como índice de la gravedad de la uremia. . sacudidas musculares. Gota Crónica y en todas aquellas entidades donde el volumen del filtrado glomerular se ha reducido una quinta parte de lo normal. La anemia es un carácter prominente en la uremia crónica porque está deprimida la eritropoyesis. nefritis aguada. bilirrubina hasta 60 mg/dl.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 44 de 83 9. Determinacion de nitrogeno ureico El nitrogeno ureico se saca de dividir el valor de la urea por un factor que es 2. Correlacion diagnostica La urea se encuentra aumentada por encima de los valores normales en caso de insuficiencia renal u obstrucción de vías urinarias. Cuando existe uremia los síntomas incluyen letargo. triglicéridos hasta 2000 mg/dl.14.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . náusea y vómito. El nitrógeno uréico de la sangre. deterioro mental y confusión. TBC renal. Interferencias La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl. Los valores de la urea pueden disminuirse en alteraciones hereditarias de la síntesis de urea o cuando existe una ingesta inadecuada de proteínas. anorexia. convulsiones y coma. o una enfermedad hepática grave. 10.

aporta la nutricion celular. Metodo Prueba colorimétrica fotométrica para proteínas totales (Biuret) 2. 4. Muestras. La cifra normal de las proteinas totales del suero está comprendida entre 6 y 8 mg/ ml encontrándose de 1 gramo menos en los pacientes que guardan cama por mas de dos semanas las proteínas totales están integradas por la fracción albúmina y bla fraccion globulina. cobre. hierro. La absorbancia de este complejo es proporcional a la concentración de proteínas en la muestra. Condiciones del paciente La muestra ha de tomarse con 8 horas de ayuno.PROTEINAS TOTALES Generalidades. Fundamento Los iones cúpricos con las proteínas y peptidas en solución alcalina forman un complejo púrpura. vitaminas liposolubles. 3. transporta los lipidos originando los compuesos que se denominan. Los anticoagulantes quelantes interfieren. La fracción globulina se sintetiza especialmente en las células plasmáticas y tienen como misión principal fabricar anticuerpos. Estable 8 dias a 2-8 C. de donde se origianan el nombre de inmunoglobulinas. El uso de torniquete no ha exceder los 30 segundos. Evitar todo esfuerzo corporal intenso por lo menos 8 horas antes de la toma de la muestra. El ejercicio causa aumento de la concentración de proteínas en un 6 a 12%. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero en aproximadamente 0. La priemera regula la presión osmótica coloidal de la sangre. . Suero y plasma heparinizado. lipo-proteínas y sirve de medio de transporte a multitud de elemntos como esteroides. 1. interviene en el equilibrio ácido-básico.5 g/dl.

0 ml Muestra --------10 ul 1. Metodo de determincion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 6.0 ml 340 nm. Interferentes La hemoglobina (0. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Agua destilada Patrón proteina Muestra Reactivo 10 ul ------1. . La presencia de dextrano (utilizado como expansor del plasma) ocasiona una floculación de la mezcla de reacción que puede separarse por centrifugación sin que afecte los resultados. lea la absorbancia de la muestra y estándar despúes de 30 segundos y lea exactamente al minuto despúes calcule la diferencia y multiplique por 80.2 g/L). La bilirrubina (15 mg/dl) La lipemia moderada no interfiere. Valores de referencia Suero: 65 – 80 g/L Plasma: 68 –83 g/L 8.5. 334 nm ó 365 nm 1 cm 25°C. 30°C ó 37°C frente a blanco de reactivo Mezcle. ABS Muestra ____________ X 80= mg/dL proteína ABS Patrón 7.0 ml Patrón ----10 ul ----1.

sudoracion excesiva. Neoplasias. diarreas profusas. De la cifra total que integran las proteínas. Edemas carenciales. Se obtienen falsas hiperproteinemias. quemaduras.5 y 5. fistulas digestivas etc. Las cifras bajas generalmene corresponden a malnutricion.9. Corelacion clinicopatologica Cuando hay hemoconcentración por shock. tambien puede estar disminuida en: Nefrosis lipoidea. . entre 3.5 y 3g/ml a la globulina. Anemia persistente.5 g/ml corresponden a la albúmina y entre 1. Afecciones hépaticas crónicas. vómitos.

Estable 8 dias. En caso de orinas muy turbias es conveniente centrifugarlas. 1. cantidad no detectable por los sistemas habituales para dosificarla. 2. pero su dosificacion periódoca si valora el progreso o regresión de la lesión. Condiciones de la muestra Se debe recoger orina de 24 horas u orina ocasional. medir el volumen y conservarla a 2-8 C.PROTEINURIA Generalidades. Fundamento. aumento de la filtración glomerular o alteraciónes en la composicion proteíca que la hace filtrar más facilmente. Metodo Metodo colorimétrico cuantitativo para determinación de proteínas en orina y líquido cefalorraquideo. 3. La albúmina constituye entre un 60 y un 90 % de la prteína excretada y el resto está por globulinas principalmente globulina Alfa. es la cantidad de proteína excretada por la orina. La cantidad no permite valorar la gravedad de la afección. Recoger la orina. 4. orina ocasional ó líquido cefalorraquideo. Orina de 24 horas. 150/24 horas. reabsorción tubular disminuida. Muestras. Tiene como mecanismo el aumento de la permeabilidad de las membranas glomerulares. La proteina presente en la muestra reacciona en medio ácido con el complejo Rojo rojo de pirogalol y el molibdato originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectofotometria.1 y Alfa –2. . Es el indicador más importante de enfermedad renal complementado con el sedimento microscópico. Tambien conocida como albúminuria. Normalmente es de 40 a 80 mg con límite máximo.

Tecnica Blanco ------1 ml patron 20 ul ---1 ml muestra ---20 ul 1 ml 580 nm.. Valores de referencia Orina de 24 horas 30 – 140 mg/24 h (hasta 160mg/24h en mujeres embarazadas) Orina ocasional 25 mg/dl Líquido cefalorraquideo 15 – 45 mg/dl (en adultos de más de 60 años se extiende a 60 mg/dl) 8. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medicion: 6. 600 nm ó 620 nm 1 cm 37 °C frente a blanco de reactivo Patron Muestra reactivo Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37 °C leer la absorbancia contra el blanco Calculos: Proteinas de 24 horas: Muestra Patron x volumen x 100 Muestra Patron x 100 Proteina en orina ocasional: Proteínas en líquido cefalorraquideo: Muestra Patron x 100 7. Los conservantes para orina como ácido clorhídrico. . Algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la reacción.5. ácido benzoíco o timol pueden causar resultados falsamente disminuidos. Interferencias La hemolisis puede ser causa de resultados falsamente aumentados tanto en orina como en LCR.

la fiebre. el embarazo. como en la disfunción glomerular. como ocurre en la meningitis bacteriana. . viral o de otros origenes. El LCR es útil para evaluar la permeabilidad de la barrera hematoencefálica en muchas enfermedades inflamatorias o infecciosas del SNC. hipotermia. La determinación de proteínas es importante en la detección de patologías renales. Correlacion diagnostica Hay condiciones fisiológicas o benignas deonde se puede observar un aumento en la excresión urinaria de proteínas como el ejercicio violento.9.

Las transaminasas son enzimas que catalizan las reacciones de transferencia de grupos aminos de un aminoácido a un cetoácido.TRANSAMINASAS Generalidades El hígado contiene un gran numero de enzimas. Existen dos tipos de transaminasas. se van a diferenciar por su movilidad elctroforética. que esta constituida por dos isoenzimas. la GPT se puede encontrar en plasma. músculo esquelético pero en mayor concentración en el Hígado. estas enzimas están localizadas particularmente en el hígado. es decir. las transaminasas (GOT ó ASAT Y GPT ó ALAT) y la CGT (gamaglutamiltranspeptidasa o γGT). una citoplasmática y otra mitocondrial. La GPT es un enzima que también se encuentra en riñón. En los eritrocitos se encuentra la GOT soluble y en los leucocitos y reticulocitos están los dos tipos enzimáticos. en tanto que la GOT es una enzima binocular. pH óptimo de acción. de todas ellas las de mayor importancia clínica son la fosfatasa alcalina (Pa). y en eritrocitos pero en bajas concentraciones. la GPT es una enzima exclusivamente citoplasmática. corazón. corazón. propiedades cinéticas e inmunológicas y a.a. la transaminasa glutamicopirúvica ó Alaninoaminotranferasa y la transaminasa glutamicooxaloacética ó Aspartatoaminotransferasa . para la síntesis de aminoácidos distintos a los originales. LCR. . que la componen. etc. orina.

Fundamento Metodo cinético para la determinación de la actividad de ASAT o GOT de acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Muestra Suero o plama con heparina o EDTA.ASPARTATO AMINOTRASFERASA (GOT) 1. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. Sin activación por piridoxalfosfato. 334 nm 1 cm 25. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. Metodo Prueba liquiUV 2. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 340 nm. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. 30 ó 37°C frente a aire . 3. 4. 5. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado.

El oxalato inhibe la actividad de la enzima. Valores de referencia 25 ºC 18 U/L 15 U/L 30 ºC 25 U/L 21 U/L 37 ºC 37 U/L 31 U/L Hombres hasta Mujeres hasta 9.1ml mas 0. 10. en estos casos también se debe diluir. el grado del aumento es proporcional a la .7. Linealidad En caso de sobrepasar la linealidad diluir 0. En casos de baja absorbancia es debido a que por ser una reacción enzimática se consume el NADH en la incubación.9ml de solución salina y multiplicar por 10. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos 8. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. no se debe usar como anticoagulante. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. en las próximas 6-12h después de la oclusión de una arteria coronaria. Correlacion diagnostica Los valores aumentados de esta enzima suceden cuando hay muerte en las células del miocardio (infarto al miocardio).

osea que una lesión grande puede hacer elevar los valores >200 unidades. ictericias obstructivas. Los aumentos moderados se observan en las etapas finales de la cirrosis. los valores máximos se ven en al cabo de 48h y recupera sus valores normales de 3-5 días. .magnitud del daño. Las cifras de GOT también se ven aumentadas en lesiones agudas de las células hepáticas como en las hepatitis virales y lesiones por intoxicación con fármacos o tóxicos como tetracloruro de carbono.

340 nm. La transformación simultánea de NADH en NAD va seguida por una disminución de la absorbancia a 340nm. Metodo Prueba liquiUV para alanina aminotransferasa. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparina. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. el ácido pirúvico producido por la enzima a partir de alanina y ácido alfacetoglutarato se transforma en ácido láctico por efecto de la deshidrogenasa láctica. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 30 ó 37°C frente a aire . Fundamento Es un método cinético para la determinación de la actividad de la GPT de acuerdo con las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC sin activación por piridoxalfosfato. 3.ALANINA AMINOTRANSFERASA (GPT) 1. 2. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. 4. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. Los métodos para la medición de GPT son muy semejantes a los de la GOT. 5. 334 nm 1 cm 25.

La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia.095% evitar contacto con mucosas y piel. no se debe usar como anticoagulante. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos Linealidad Hasta 154mmol/L o 9gm/L (según el Kit utilizado). Si sobrepasa la linealidad diluir 1 + 10 y multiplicar por 11 8.7. 9. Valores de referencia 25ºC 5-23U/L 5-19U/L 30ºC 7-32U/L 7-26U/L 37ºC 9-43U/L 9-36U/L Hombres hasta Mujeres hasta Precauciones El Buffer/sustrato esta compuesto con sodio de azida 0. .

10. CHE y GPT que son hepatoespecificas. El análisis de estas dos enzimas es de útil ayuda para detectar daño a nivel del hígado y determinar una hepatitis ya sea viral o por tóxicos como drogas. un buen trabajo organizado. en colestasis intra-hepática los niveles de GOT y GPT son análogos a los de la ictericia post-hepática. un buen lavado del material y no dejar de lado el uso de los controles. en contraste con la cirrosis hepática que se elevan poco las GOT y disminuyen las GPT. En la hepatitis viral se observa una elevación de ambas enzimas. Los valores de La GPT. y la determinación de la fosfatasa alcalina son los de mayor utilidad para el diagnóstico de las hepatitis. En la ictericia hepática (hepatocelular) y la post-hepática se utilizan la GOT y GPT para diferenciarlas. lo que nos puede ayudar a diagnosticar un infarto del miocardio teniendo muy en cuenta no llegar a confundirse con una hepatitis viral ya que en estas también aumentan. a veces es mayor el aumento que la de la GOT. por esta razón se considera más específica la GPT en patologías del hígado. En la post-hepáptica es difícil encontrar valores superiores a 200U/L. Los niveles sericos de GPT se encuentran considerablemente aumentados en las lesiones agudas de las células hepáticas. Nota Gran parte del éxito de obtener buenos resultados en este tipo de determinaciones enzimáticas esta en el correcto manejo del tiempo a la hora de la lectura (pues las enzimas actuaran hasta consumir el substrato). La determinación de la GOT y GPT se encuentran aumentadas en las insuficiencias cardiacas y como consecuencia del estasis Hepático. pero esto se debe posiblemente al daño del hepatocito secundario por alteración en la circulación. se debe analizar todos los datos clínicos posibles para hacer un buen diagnostico y reconfirmar con enzimas como γGT. si la insuficiencia es aguda se pueden elevar los valores de 1000 a varios miles U/L. . Correlacion diagnostica Las cifras de GPT pueden estar también ligeramente aumentadas en el infarto al miocardio. los valores elevados de estas tres enzimas son característicos de las hepatitis agudas y enfermedades necrotizantes del hígado en contraste con la elevación de la fosfatasa alcalina y disminución de GOT y GPT que nos da indicios de una ictericia obstructiva. GOT.

2-cloro-4-nitrofenilmaltotriósido. . tejido adiposo. intestino. trompas de falopio. cerebro. hígado. glucógeno y sus productos parcialmente hidrolizados. La liberación de 2-cloro-4-nitrofenol del substrato y el resultante incremento de absorbancia por minuto es directamente proporcional a la actividad de la amilasa en la muestra.4-glucan-4-glucanohidrolasa. bazo y corazón. pulmón. semen. sangre. riñón.Amilasa suele estar presente en el páncreas ( 200 mg/kg ) glándulas salivales.amilasa es una endoenzima que se denominaasí porque todos los productos de la hidrólisis tienen la configuración (α) en el C1 de la unidad de la glucosa reductora. 3. 2.AMILASA GENERALIDADES Las amilasas son enzimas contenidas en la secreción pancreática las cuales catalizan la hidrólisis de los polisacáridos tales como : El almidón. La α . Muestra Suero o plasma heparinizado. Actua sobre las uniones 1-4 de las cadenas rectas del almidón y también sobre las uniones 1-6 glucosídicas de las cadenas ramificadas como las de amilopeptina y glicógeno. Fundamento La prueba colorimétrica utiliza un nuevo substrato. heces. Metodo Prueba colorimétrica para amilasa alfa-1. Este substrato reacciona directamente con la amilasa y no requiere de enzimas de restricción. orina. amilopeptina. orina No hay pérdida de la actividad en 5 días a 4°C. 1. leche. músculo. La α .

Si la determinación excede el valor diluir la muestra con 500 ul de solución salina y 100 ul de muestra y multiplicar por 6. 8. Leer la absorbancia a los 1. Tecnica Temperatura Muestra reactivo factor 25°C 20 ul 1000 ul 9864 37°C 10 ul 1000 ul 24820 Hg 405 nm. plasma Orina espontánea Orina 24 horas 25°C 120 U/l 600 U/l 450 U/24h 37°C 220 U/l 1000 U/l 900 U/24h IFCC 28-100 U/l <460 U/l <410 U/l . Condiciones del paciente No requiere ayuno. Condiciones de la muestra Puede utilizarse plasma heparinizado. Valores de referencia Temperatura Suero. 2 y 3 minutos Y multiplicar por el factor correspondiente. Evitar la utilización del torniquete por más de 30 segundos. 5. Metodo de determinación Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Se recomienda el uso de pipetas automáticas para la medición de las soluciones para evitar la contaminación de las mezclas con saliva.4. 6. No utilizar citrato. oxalato o EDTA porque inhiben la actividad de la enzima. 400 nm ó 410 nm 1 cm 25 °C ó 37°C frente a agua destilada Mezclar bien incubar por un minuto a la temperatura deseada.

10. Correlacion diagnostica Los nivele elevados en el suero son siempre transitorios. En la pancreatitis aguda. se libera una gran cantidad de amilasay se produce una hiperamilasemia.9. obteniendo niveles normales al 3 día. Corresponden a episodios agudos y sólo duran 3 días. dato útil para su diagnóstico. . aumenta los niveles de amilasa. dato que se debe tener en cuenta cuando se dosifica en pacientes con posible pancreatitis aguda y han recibido este analgésico. Interferencias La aplicación de morfina produce contracción del esfinter de Oddi y eleva los niveles hasta 900 unidades. pero en la orina persisten hasta por 10 días. Cuando hay ruptura del embarazo ectópico. La úlcera péptica perforada. sus niveles aumentan en las primeras 24 a 36 horas.

comprendida entre 35 y 250 unidades. La dosificación urinaria a veces es más ventajosa que la hemática pues el suero solo se eleva durante unas 72 horas y en la orina persiste por varios días. insuficiencia renal y pancreatitis crónica.AMILASURIA En condiciones normales se elimina una cantidad de amilasa por la orina. Este factor hay que tenerlo en cuenta y valorar el tiempo que ha durado la recolección. También se eleva en la parotiditis y litiasis parotidea y marcada disminución en su eliminación en el carcinoma pancreático. con cifras estremas en las 24 horas de 835 a 6150 unidades. .

los valores obtenidos en plasma y suero siempre son iguales 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 405 nm 1 cm 37°C frente a vacio . Condiciones de la muestra Puede trabajarse con plasma. Debe permanecer en reposos 15 minutos antes de la toma de la muestra. 3. El ejercicio puede alterar el resultado. Muestra Suero o plasma Es estable al menos por 7 días a una temperatura de 2 a 8 °C. La utilización de EDTA inhibe la reacción. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de formación del 4-nitrofenol. 5. pero este no debe contener floruros ni oxalatos. 4.FOSFATASA ALCALINA 1. El mejor anticoagulante es la heparina. Fundamento La fosfatasa alcalina cataliza en medio alcalino la transferencia del grupó fosfato del 4-nitrofenilfosfato al 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP). medido a 405 nm. liberando 4-nitrofenol. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno minimo de 8 horas. Metodo Metodo espectofotómetro con tampon AMP 2.

fracturas en consoliación y en metastasis óseas. EDTA. Valores de referencia Adultos: 26 – 117 U/l 9. en el abseso hepático. Las muestras hemolizadas interfieren por la fosfatasa alcalina eritrocitaria. hiperparatiroidismo. enfermedad de Paget. sus niveles aumentan.7. También aumentan en la ictericia. raquitismo. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 20 ul Leer la absorbancia inicial y efectuar lecturas cada minuto por 3 minutos y promediar los resultados y multiplicar por el factor 2764. por eso cuando el crecimiento disminuye sus niveles bajan a cifras similares al del adulto. Interferencias Los anticoagulantes como el floruro. Cuando hay deficiencia de vitamina D. Correlacion diagnostica Se origina principalmete en los huesos y en el higado. oxalato y citrato interfieren en la reacción. por lo tnto esta bien establecida su relación con la formación osea. 8. . 10.

CALCIO 1. Fundamento El calcio en medio neutro. Condiciones del paciente No requiere ayuno. 3.6-disulfo-2. Orina efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio. La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de calcio existente en la muestra. Condiciones de la muestra Debe ser separado lo antes posible de los hematíes. Antes de la recogida adicionar al contenedor 10 ml de ácido nítrico al 50% Diluir la orina ½ en agua destilada para el análisis y multiplicar por dos.7-naftalenen-bis (azo)-dibenzenarsónico).8-dihidroxi-3. forma un complejo de color azul con arsenazo III (ácido 1. No usar oxalato o EDTA como anticoagulante ya que interfieren en la determinación de calcio. Metodo Determinación cuantitativa para calcio 2. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 650 nm 1 cm 37°C frente a agua destilada . 5. Muestra Suero o plasma 4.

5 mg/dl 10 . Correlacion diagnostica El calcio es el mineral más abundante e importante del cuerpo humano.12 mg/dl 8. 8.1 –2.0 – 13 mg/dl 2. pseudohipoparatiroidismo. La mayoria de las causas de hipercalcemia son debidas a enfermedades oncológicas. tirotoxicosis e hiperparatiroidismo. deficit de vitamina D. osteoporosis. Trazas de los mismos. El color es estable como minimo una hora. sarcosidosis. intoxicación por vitamina D. si se utiliza material de vidrio debera lavarse con ácido nítrico diluido con agua destilada. Valores de referencia Suero o plasma: Adultos Niños Recién nacidos Orina: Adultos Niños 9. 8. La mayoria de los detergentes destinados al uso del laboratorio contienen agentes quelantes. mal nutrición o mala absorción. aumento de la retención renal. 10. Interferencias Se recomienda utilizar material de plástico. el 99% se halla en los huesos.5 – 3 mmol/l 2. invalidan la determinación.5 – 10. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul Estándar Muestra reactivo Mezclar e incubar 2 minutos.2 mmol/l 50 – 300 mg/24h 80 –160 mg/24h .7.6 mmol/l 2.0 – 3. Niveles bajos de calcio pueden atribuirse ahipoparatiroidismo. Una disminución de los niveles de albúmina causa una disminución del calcio en suero.

Metodo Metodo colorimétrico – calmagita. 2. Diluida 1:10 con agua destilada acidificada hasta 3. Condiciones de la muestra Utilizar material limpio 6. La intensidad del color es proporcional a la concentración de magnesio. Muestra Suero o plasma heparinizado Orina.4 con HCL. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul 520 nm 1 cm 25 °C frente a blanco de reactivo. 4. Condiciones del paciente No requiere ayuno 5.MAGNESIO 1. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 3. Fundamento El magnesio forma un complejo de color púrpura al reaccionar con la calmagita en medio alcalino. Estándar Muestra reactivo .

Mezclar e incubar por 5 minutos La coloración es estable por 30 minutos. hipertiroidismo. 8. tratamiento insulínico del coma diabetico. Correlacion diagnostica La hipomagnesemia implica manifestaciones similares a la hipocalcemia. Niveles bajos son propios de trastornos gastrointestinales con malaabsorción. pielonefritis entre otros. tratamientos con diuréticos. perdida anormal de líquidos. 5 mg/dl 9. Valores de referencia 1. . glomerulonefritis.6 – 2. Los niveles altos implican una depresión del sistema nervioso central y la excitabilidad neuromuscular.

Condiciones de la muestra No se debe usar plasma. La absorbancia de este complejo leido en Uvcercano es directamente proporcional a la concentración de fósforo. 3.. 5.FOSFORO 1. Tecnica blanco ---------1000 ul estándar ---10 ul ---1000 ul muestra ------10 ul 1000 ul 340 nm. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Los anticoagulantes pueden causar resultados falsamente bajos. Condiciones del paciente No requiere ayuno. Muestra Suero. Metodo Análisis fotométrico UV para la determinación de fosforo. Hg 334 nm 1 cm 20. 4. 6.. Fundamento El fosforo reacciona con molibdato en un medio fuertemente ácido para la formación de un complejo. 2.25°C frente a blanco de reactivo Blanco Estándar muestra reactivo .

la cual controla la excreción urinaria y su movilización osea por medio de la vitamina D.5 – 5. fracturas evolutivas y la enfermedad de Addison.0 mg/dl 9.Mezclar e incubar por lo menos 1 minuto a temperatura ambiente. . hipoparatiroidismo.0 mg/dl 4. Sueros lipémicos o hemolízados no deben ser usados.0 – 7. 10. 8. La contaminación del material de vidrio es la mayor fuente de error en este análisis. Por lo tanto se recomienda material de plástico. Las valores bajos se encuentran en el raquitismo. Valores de referencia Adultos Niños: 2. la acromegalia. Los valores elevados se encuentran en la insuficiencia renal crónica. Interferencias Muestras ictéricas y lipémicas requieren un blanco de muestra. osteomalacia. Leer la absorbancia de la muestra frente a blanco de reactivo antes de 1 hora. Correlacion diagnostica Esta regulado por la hormona paratiroidea. infecciones de flora cocoide gram negativa en su forma septicémica y en la hipervitaminosis D.

2. Método estándar modificado de acuerdo con las recomendaciones del cómite ECCLS. y muy poca se encuentra en el miocardio y el cerebro (CK).CREATINCINASA (Ck) Generalidades. empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. En el infarto de miocardio sus unidades se elevan entre 3 y 6 horas. . 4. La concentración catalítica se determina. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. Tiene su máxima concentración entre las 24 y 48 horas. Metodo Prueba líquida UV activada por NAC creatin kinasa. Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. apartir de la velocidad de formación del NADPH. medido a 340 nm. empezando a descender despúes de dicho tiempo. para retornar a la normalidad entre 3 y 6 dias despúes. 3. Muestra Suero o plasma heparinizado o con EDTA. obteniéndose creatina y ATP. despúes de iniciado. 1. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK. Normalmente los músculos estriados tienen una alta concentración. Fundamento La cratina quinasa (CK) cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina. lentamente.

Poner el cronómetro en marcha.5. 340 nm o Hg 334 nm 1 cm 25. Insertarla en el portacubetas termotizado. 30 ó 37°C contra aire Muestra Reactivo 37°C 25 ul 1000 ul Mezclar y transferir de inmediato a una cubeta. 25°C ó 30°C 50 ul 1000 ul durante unos Hg 365 nm. Comprobar que las diferencias entre absorbancias sean sensiblemente iguales. 6. A los 3 minutos. se deducen las siguientes fórmulas para calcular la concentración catalítica: Macro: Micro: A/min x 4127 = U/L A/min x 3333 = U/L . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Condiciones de la muestra La muestra de suero o plasma para Creatina quinasa es estable al menos 7 días a 2-8 Centigrados. Considerando que el coeficiente de absorción molar del NADPH a 340 nm es 6300. anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto durante tres minutos. Calculos. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio. Tecnica Precalentar el reactivo de trabajo a la temperatura ambiente minutos.

e intervenciones quirurjicas elevan sus cifras ligeramente.8. Interferencias La hemólisis 10. Correlacion diagnostica Se encuentra elevada en la distrofia muscular progresiva. Traumatismos musculares. Valores de referencia Temperatura de reaccion 25 °C 30 °C 37 °C Hombres U/l 10-80 15-125 24-195 Mujeres U/l 10-70 15-110 24-170 9. El valor cliníco está en una elevación manifiesta y su relación con el CK-MB y las otras enzimas que se alteran en el infarto. . por aplicación de inyecciones y relajantes musculares.

CK-BB. inhibiendo la actividad enzimática de esta subunidad B. Cardíaco y lo hace progresivamente según su extensión y evolución clínica. Estudios electroforeticos demostraron que tiene dos cadenas M y B . tejido nervioso.CREATINCINASA FRACCION MB Generalidades. que toman el nombre según el sitio donde predomina. La CK-MB predomina en el miocardio y sus niveles se elevan cuando existe proceso necrótico del músculo cardíaco. representa la actividad de la izoenzima CK-MB. Fundamento La prueba se basa en una determinación enzimática de CK acompañada de un método de inmunoinhibición. reconociendose 3 isoenzimas. La CK-MB aumenta notablemente en el infarto. CK-MB. la combinación de las cadenas origina la CK-MB. Debido a que la concentración de CK-BB en circulación es mínima. Musculo esqueletico Cerebro Miocardio CK-MM. la actividad remanentre multiplicado por el factor 2. Un anticuerpo es incoroporado al reactivo el cual se une especificamente a la subunidad M. Metodo Prueba Humazym M-test Método por inmunoinhibición para CK-MB. . Tanto la enzima original CK como su isoenzima CK-MB. Muestra Suero. recuperándose los valores normales entre las 24 y 72 horas. se elevan desde las 3 hasta las 6 horas post-infarto. o plasma heparinizado o con EDTA. las concentraciones máximas son a las 12-24 horas. la cadena M deriva su nombre del músculo esquelético y la B de Brain ( cerebro ).

La CK-MB en suero es estable al menos 7 dias a 2-8 C. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. Si es superior. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Tecnica muestra Reactivo 40 ul 1000 ul Hg 334 nm. 30°C ó 37 °C contra aire. 340 nm. HG 365 nm 1 cm 25°C. Calcular la diferencia y multiplicar por el factor 8254. Valores de referencia 25 °C CK total hombres mujeres CK-MB >80 U/l >70 U/l >10 U/l 30°C >130 U/l >110 U/l >16 U/l 37°C >195 U/l >170 U/l >25 U/l La actividad CK-MB esta en un rango entre 6 y 25 % de la actividad de la CK total. diluir el suero con NaCl 150 mmol/L. Mezcle e incube por 10 minutos a temperatura ambiente lea la abosorbancia y luego lea exactamente a los 5 minutos. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK-MB Condiciones de la muestra La Concentracion de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L.Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. .

Esta aumenta notablemente en los infartos cardiácos.Correlacion diagnostica Presta una gran utilidad en los casos en que la CK se encuentra notablemente aumentada por causas ajenas al infarto y la CK-MB esta dentro de los límites normales. .

Metodo Prueba líquida para deshidrogenasa láctica. Tecnica 25°C ó 30°C 20 ul 1000 ul 37°C 10 ul 1000 ul Hg 334 nm. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. 340 nm. 3. Fundamento Método modificado basado en las recomendaciones del SCE. 4. 5. 2. HG 365 nm 1 cm 25°C. por pérdida de la actividad. 2 y 3 minutos hacer un promedio y multiplicar por el factor 16345 . 30°C ó 37 °C contra aire. muestra reactivo Mezclar y leer la absorbancia después de 1 minuto y leer luego a los 1. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparinizado. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. Seperar el suero antes de los 30 minutos.LACTATO DESHIDROGENASA (LDH) 1. Condiciones de la muestra No se recomienda congelar la muestra. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 6.

Valores de referencia temperatura adultos hombres mujeres Niños 12meses 25°C 120-240 U/l 30°C 160-320 U/l 37°C 225-450U/l IFCC <243 <244 Hasta 500 U/l 9. Interferencias El oxalato y el citrato interfieren en la reacción. .8. 10. permaneciendo elevada hasta por 8 ó 14 días. Correlacion diagnostica En el infarto al miocardio sus niveles se aumentan entre las 24 ó 48 horas y tiene su máxima concentración a los 2 ó 4 días.

Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. Muestra Suero o plasma 4. la troponina humana I se une al conjugado anti-cTnl-colorante para formar un inmunocomplejo. 3. 5. 2. Condiciones de la muestra Las muestras que contienen partículas de turbidez pueden dar resultados inconsistentes. para demostrar el correcto funcionamiento. Seperar el suero antes de los 30 minutos. El exceso de conjugado reacciona en la línea de control formando una segunda línea rojo-violeta de control C. Fundamento La prueba emplea un conjugado de anticuerpo monoclonal anti cTnl y colorante en fase móvil. Tecnica Lleve el test a temperatura ambiente Dispense 2 gotas de la muestra enla ventana S. y anticuerpos anti-ratón IgG (cabra) en la línea de control. . 6. anticueropos anti-cTnl (ratón). Muestras lipémicas o hemolíticas no deben ser procesadas. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos.TROPONINA 1. el cual se liga a los anticuerpos anti-cTnl en la línea de prueba y produce una línea de prueba rojo-violeta(T). Como la muestra fluye por la almohadilla absorbente. fijados en la línea de prueba. Metodo Prueba inmunocromatográfica en un paso para la detección de la troponina I cardíaca humana en el suero o plasma.

. No lea después de 15 minutos para evitar errores. Las muestras positivas desarrollan una línea de prueba T en los primeros minutos. Lea los resultados a los 15 minutos. Interferencia La prueba no puede determinar niveles inferiores a 0. El resultado negativo no excluye la posibilidad de un infarto al miocardio. 7.Evite la formación de búrbujas en la ventana. Debe considerarse repetir la prueba después de 12 horas de iniciado el dolor.5 ng/ml de troponina I. Valores de referencia Negativo Positivo 8.

. Fundamento La formación de glicohemoglobina ocurre irreversible y progresivamente en los eritrocitos a través de los 120 días de vida normal de estas células. 5. Metodo Método rápido de separación por resina de intercambio iónico. Condiciones del paciente Ayuno de 8 horas. Muestra Sangre total con EDTA. Dado que la concentración de glicohemoglobina en el eritrocito refleja el nivel promedio de glucosa en la sangre de las 4 a 6 semanas anteriores y es estable por la vida de los eritrocitos. 2. la medición es proporciona una prueba de gran valor para evaluar el control a largo plazo de los pacientes diabéticos. 3. Condiciones de la muestra No debe utilizarse muestras hemolizadas para no alterar el resultado. 4. 6.HEMOGLOBINA GLICOSILADA 1. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 415 nm ó Hg 405 nm 1 cm 25°C frente a agua destilada.

%HbA1 4.5 – 7. Tecnica Etapa de hemólisis Reactivo lisante 500 ul Mezclar e incubar por 5 min Determinación de HbA1 Pipetear 100 ul de hemolisado Tapar a 1 cm aproximadamente Mezclar por 5 min Leer la absorbancia Determinación de Hb total Pipetear 20 ul de hemolisado Mezclar cuidadosamente Leer la absorbancia HbA1= F X HbA1 muestra Hb total 8. Valores de referencia pacientes Metabolismo normal Diabéticos descontrolados 9.0 % >8.5% Muestra 100 ul 15°C ó 25°C reactivo 5 ml de agua destilada .7. Correlacion diagnostica La dosificación de la hemoglobina glicosilada es importante en un diabético como la glucosa.

Elaboró Carolina Hoyos Velásquez Cargo: Bacterióloga FECHA: XXXXXXXXXXXX Revisó XXXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Aprobó XXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXX .BIBLIOGRAFIA • • Manual de quimica clinica. Colegio mayor de Antioquia Insertos de las técnicas.

FECHA NOMBRE DE QUIEN LEE EL MANUAL FIRMA CARGO .

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