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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

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  • ACIDO URICO
  • 3. Muestras
  • Nota
  • 5. Condición de la muestra
  • 6. Metodo de determinacion
  • 10. Control de calidad
  • Correlacion clinico patologica
  • ALBUMINA
  • 2. Fundamento
  • 7. Tecnica
  • 8. Valores normales
  • 9. Interferencias
  • 10. Correlacion clinicopatologica
  • Otras:
  • MICROALBUMINURIA
  • 4. Condiciones de la muestra
  • 5. Metodo de determinacion
  • 6. Tecnica
  • 7. Valores de referencia
  • 8. Interferencias
  • Correlacion diagnostica
  • BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA
  • Generalidades
  • Bilirrubina total
  • Bilirrubina directa
  • 8. Valores de referencia
  • 9. Interferentes
  • 10. Estabilidad
  • 11. Linealidad
  • Ictericia pre – hepatica
  • Causas:
  • Ictericia hepatocelular
  • Ictericia post - hepatica o colestasica
  • PERFIL LIPIDICO MINIMO
  • Generalidades de lipidos
  • Perfil lipidico minimo
  • Interpretacion del perfil lipidico mínimo
  • COLESTEROL TOTAL
  • 9. Linealidad
  • Resultados anormales
  • COLESTEROL HDL
  • 9. Correlacion diagnostica
  • Resultados Anormales
  • TRIGLICERIDOS
  • 1. Metodo
  • 2. Fundamento
  • 3. Muestra
  • 4. Condiciones del paciente
  • 5. Condiciones de la muestra
  • Notas
  • Linealidad
  • 10. Correlacion diagnostica
  • Nota:
  • CREATININA
  • 9. Interferentes de la muestra y la reaccion
  • 10. Correlacion diagonstica
  • DEPURACION DE CREATININA
  • 1. Muestra
  • 2. Condiciones del paciente
  • 3. Condiciones de la muestra
  • 4. Metodo de determinacion
  • 5. Tecnica
  • Dilución de la orina *
  • Calculo
  • 6. Valores de referencia
  • 7. Interferencias
  • 8. Correlacion diagnostica
  • GLICEMIA
  • 9. Carga de glucosa
  • Diagnostico de diabetes mellitus
  • National diabetes data group
  • Valores normales
  • Diagnostico de hipoglicemia
  • Criterios diagnosticos para diabetes gestacional
  • UREA
  • 3. Muestra
  • 6. Metodo de determinación
  • Determinacion de nitrogeno ureico
  • PROTEINAS TOTALES
  • Generalidades
  • 3. Muestras
  • 5. Metodo de determincion
  • 8. Interferentes
  • 9. Corelacion clinicopatologica
  • PROTEINURIA
  • TRANSAMINASAS
  • ASPARTATO AMINOTRASFERASA (GOT)
  • ALANINA AMINOTRANSFERASA (GPT)
  • Precauciones
  • AMILASA
  • GENERALIDADES
  • 10. Interferencias
  • AMILASURIA
  • FOSFATASA ALCALINA
  • CALCIO
  • MAGNESIO
  • FOSFORO
  • CREATINCINASA (Ck)
  • Calculos
  • CREATINCINASA FRACCION MB
  • Metodo
  • Fundamento
  • Muestra
  • Condiciones del paciente
  • Condiciones de la muestra
  • Metodo de determinacion
  • Tecnica
  • Valores de referencia
  • LACTATO DESHIDROGENASA (LDH)
  • TROPONINA
  • 8. Interferencia
  • HEMOGLOBINA GLICOSILADA
  • Etapa de hemólisis
  • Determinación de HbA1
  • Determinación de Hb total
  • BIBLIOGRAFIA
  • FECHA NOMBRE DE QUIEN LEE
  • EL MANUAL FIRMA CARGO

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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

ELABORADO POR: CAROLINA HOYOS VELASQUEZ BACTERIOLOGA COOPERATIVA COOMAN

LABORATORIO CLINICO EMPRESA SOCIAL DEL ERSTADO HOSPITAL SAN RAFAEL DE YOLOMBO YOLOMBO 2008

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ACIDO URICO

1. Metodo Análisis enzimático colorimétrico por ácido urico con factor aclarante de lípidos (LCF) (PAP) 2. Fundamento Determinación del Acido Urico por la reacción con la uricasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona por la acción catalítica de la peroxidasa con ácido 3,5-dicloro-2-hydroxybenzenesulfónico (DCHBS) y 4-aminofenazona (PAP) para producir un complejo rojo-violeta de quinonemina como indicador. 3. Muestras Suero o plasma con heparina o EDTA, orina. Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. 4. Condiciones del paciente Para determinación en suero. Antes: • Explicar el procedimiento al paciente. • Llevar estrictamente los siguientes puntos. • Suspender la medicación de drogas como: alopurinol, salicilatos, fenilbutazona, calmantes o analgésicos, ácido ascórbico (vitamina C), buscapina, diuréticos de la trazida, tioles libres, purinas metiladas, ácido homogentístico y altas cantidades de glucosa. • Dos días antes del examen evitar ejercicios violentos.

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24 horas antes del examen, el paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas, mariscos y frijoles ya que contienen altos contenidos de purina. 48 horas antes de la venoclisis suspender el consumo de alcohol. Durante: Recoger 5 - 7 ml de sangre venosa en un tubo de tapón rojo. • Retomar nuevamente la ingesta de cualquier medicamento que pueda alterar los resultados. Después: • Aplicar presión en el sitio de punción. Para determinación en Orina: • Orina de 24 horas, teniendo en cuenta las indicaciones anteriores. Nota Las muestras lipémicas generalmente generan turbidez en la mezcla del reactivo con la muestra, lo que lleva a resultados elevados falsos. El LCF aclara completamente la turbidez causada por muestras lipémicas. Los valores en sangre total varían con la proporción de células en la sangre debido a que las células también contienen muchas más sustancias que interfieren en la reacción. 5. Condición de la muestra La sangre debe recogerse en tubos limpios, libres de metales pesados, ya que estos y los cianuros son inhibidores enzimáticos. La prueba no se ve influenciada por valores hasta 100mg/dl de hemoglobina o por valores de bilirrubina hasta 20mg/dl. La estabilidad de la muestra es: Temperatura ambiente  3 días Refrigerado  2 - 8°C por 5 días. Congelado  20°C, seis meses. En orina de 24 horas con preservativos y a temperatura ambiente → 2 días. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: 520nm, Hg 546 nm. Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20 - 25 °C ó 37°C Medir: frente a blanco de reactivos

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7. Tecnica Pipetear: Blanco Estándar Muestra Blanco ---------Muestra ------25λ Estándar ------25λ Solución Reactiva 1000λ 1000λ 1000λ Mezclar, incubar a 20-25°C durante 20-50 minutos, leer las extinciones frente a blanco de reactivos. Límite de dilución 15 mg/dl, con concentraciones superiores diluir la muestra 1 + 1 con solución de cloruro sódico al 0.9% y repetir la determinación, el resultado multiplicarlo por 2. 8. Valores de referencia Hombres: 3.7 - 7.0 mg/dl. Mujeres: 2.4 - 5.7 mg/dl. 9. Interferentes de la prueba El ácido ascórbico en concentraciones terapéuticas no interfiere en la prueba, pero en cantidades excesivas puede dar resultados elevados. Sustancias químicas con efecto antiuricosúrico. Acido etacrínico, furosemida, diuréticos de la benzotiacida. Sustancias que inhiben competitivamente la secreción tubular del urato. El p- aminohipurato, lactato, acetoacetato y B. hidroxibutírico. Por otra parte, ciertos fármacos como los salicilatos, fenilbutazona entre otros, inhiben la secreción de ácido úrico a dosis bajas, pero causan un efecto urosúrico intenso a dosis altas, debido a que estos fármacos pueden inhibir reabsorción tubular a niveles altos. El exceso del lactato también se asocia con la hiperuricemia en los casos de ejercicio fuerte y toxemia del embarazo.

Notas El etanol altera el metabolismo del ácido úrico aumentando la producción de urato y por la supresión de la excreción renal de ácido úrico. Esta última es el resultado

alteraciones fisiológicas. excepto por el SNC.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Entre las etiologías más comunes de hiperuricemia se cuentan el fallo renal. diabetes mellitus. aterosclerosis. el exceso de lactato y el uso de diuréticos. • Asegurarse que la lectura del blanco esté dentro del rango permitido. pues los valores altos son diagnóstico de “gota”. • Almacenamiento adecuado de los cartuchos reactivos. Correlacion clinico patologica Numerosas enfermedades. que inhibe competitivamente la secreción tubular renal del urato. por ejemplo carnes.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Nefropatía y a menudo nefrolitiasis. El aumento del ácido úrico es mucho más frecuente y clínicamente más significativo que su disminución. hipertensión. obesidad. tejido subcutáneo y bolsas sinoviales. En los pacientes hipertensos la reducción del flujo sanguíneo renal y el aumento de la resistencia vascular pueden ser responsables de la disminución de la fracción de filtración del urato. . vísceras y levaduras producen una hiperuricemia leve. La hiperuricemia tiene también una relación positiva con la hiperlipidemia. la cetoácidosis. Precipitación de urato monosódico en forma de depósitos (tofos) por todo el cuerpo. aunque presenta predilecciones por articulaciones. La gota es un trastorno del metabolismo de purinas o de la excreción renal de ácido úrico caracterizado por: Hiperuricemia. • Evaluación permanente de resultados. Las reservas de ácido úrico pueden superar los 30 g. Es de mucha importancia la determinación de ácido úrico. Control de calidad • Cada vez que se determine ácido úrico correr con las muestras un estándar acuoso y dos suero control liofilizado. Ataques clínicos recidivantes de artritis. • Adecuada extracción y manipulación de muestras límites aceptables en los controles. cambios bioquímicos e incluso factores sociales y de comportamiento se asocian a modificaciones de la concentración de ácido úrico en el plasma. 10.0 Página 5 de 83 del exceso de lactato producido por la oxidación del etanol a acetaldehído. La ingestión de alimentos ricos en purinas.

3.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 8 horas y durante este periódo no hacer esfuerzoz corporales intensos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Condiciones de la muestra No usar plasma heparinizado porque se puede alterar el valor. El verde de bromocresol forma con la albumina en buffer de citrata un complejo coloreado. anticoagulantes o agua destilada aumentan los valores. ALBUMINA 1. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentracion de albumina en la muestra.0 Página 6 de 83 Se han identificado dos defectos enzimáticos ligados al cromosoma sexual como etiología de la gota primaria: Una deficiencia de (H 6 PRT) hipoxantin guanin . 5. Una hiperactividad de fosforribosil . . Metodo Prueba fotometrica colorimetrica para Albumina Metodo BCG 2.fosfato La presencia de amonio en cualquiera de los reactivos. despues de abierto debe evitarse la contaminación. Muestras Suero ó plasma con EDTA ó heparina.fosforrobosil transferasa. El uso del torniquete no ha de execeder los 30 segundos. Estable 1 mes a 2-8 grados y 1 semana entre 15 y 25 grados 4. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero. Fundamento. Patron de albúmina y el RGT son estables hasta la fecha de vencimiento cuando se almacenan de 2 a 25 grados centigrados. ya que esto puede aumentar la concentración de proteínas.

por lo que es conveniente no demorar la lectura.0 Página 7 de 83 6. 7. Otras proteinas reaccionan lentamente. 10. El color es estable durante al menos 30 minutos. La reacción de la albúmina con el verde de bromocresol es inmediata.1 g/dl en hombres y mujeres. Leer la absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco de reactivo.0 ml Mezclar bien y dejar los tubos durante 5 minutos a temperatura ambiente. Hay 3 factores que pueden disminuir su concentración: .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Patrón albúmina Muestra Reactivo blanco ---------1. Correlacion clinicopatologica. ABS muestra ____________ X 4 g/dl albúmina ABS patrón 8. Hemoglobina (1 g/L). Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Hg 546 nm.0 ml muestra ---10 ul 1.8 – 5. 9. Valores normales 3. Interferencias La prueba no es influenciada por valores de Bilirrubina hasta 20mg/d. 578 nm 1 cm 20 a 25 frente a blanco de reactivo por serie.0 ml patrón 10 ul ---1.

0 con NaOH/HCl 1 mol/L.0 Página 8 de 83 1) Pérdidas cuantiosas o frecuentes. Condiciones de la muestra La orina debe ser lo más fresca posible. Anemia persistente Neoplasia nefrosis lipoidea. Metodo de determinacion Longitud de onda: 540 nm (530-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 37°C Medición: frente a agua destilada . Muestra Orina fresca. Fundamento Las partículas de látex con anticuerpos anti-albúmina humana. 5. y se debe ajustar su pH a 7. 4. La manifestacion clínica mas llamativa es el edema. 2) Por síntesis defectuosa como ocurre en la mayor parte de las hepatopatías. paracentesis. Edemas carenciales. MICROALBUMINURIA 1.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El proceso de aglutinación provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentración de uALB de la muestra. 3) Por carencia de materia prima como en la hipoalimentacion.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . albúminuria persistente. Otras: Trastornos pulmonares. 3. 2. son aglutinadas por uALB presente en la muestra del paciente. Metodo Prueba de turbidimetría para la cuantificación de microalbúmina en orina humana. y por comparación conocida se puede determinar el contenido de uALB en la muestra ensayada. (hemorragias. Es estable por 7 días cuando se le añade azida sódica para prevenir posibles contaminaciones. catabolismo excesivo).

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Correlacion diagnostica Se define la microalbúmina como la tasa de excresión de albúmina en orina entre 20 y 200 ug/min.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . concentración que. . Interferencias No interfieren valores de Glucosa 2 g/L. hemoglobina 10g/L. siendo superior al valor normal.0 Página 9 de 83 6. Valores de referencia Hasta 15 mg/L 8. esta aun por debajo de la concentración considerada como una proteinuria convencional. 7. La urea > de 1g/L y bilirrubina > 10mg/dl interfieren. creatinina 3 g/L. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 7 ul Mezclar y leer la absorbancia frente a agua destilada y leer a los dor minutos después y se multiplica el valor por la concentración del calibrador. La microalbuminuria es un marcador del riesgo de la nefropatía diabética. así como de alteraciones cardiovasculares en pacientes que sufren diabetes mellitus insulinodependientes o bien insulina no-dependiente.

0 Página 10 de 83 .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

El metabolismo de la bilirrubina proviene en un 80% de la descomposición de los hematíes envejecidos en el sistema retículo endotelial (bazo. hasta las células hepáticas en donde es conjugada con el ácido glucoronico. La orina normalmente contiene una pequeña cantidad de urobilinógeno. Esta forma de bilirrubina se denomina no conjugada (indirecta) que es transportada en el plasma en forma libre unida a la albúmina. conjugación catalizada por la enzima Bilirrubin . Hem hem oxigenasa Biliverdina Biliverdina reductasa Bilirrubina.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . esta solo aparece cuando la concentración en plasma se encuentra aumentada y siempre es de bilirrubina conjugada. El heme es catabolizado después para formar biliverdina que se transforma en bilirrubina. . por tanto no atraviesa la membrana glomerular. La hemoglobina es liberada desde los hematíes y descompuesta en moléculas de Heme y globina. hígado y medula ósea). agua y bilirrubina. incluyendo sales biliares. La bilirrubina conjugada se excreta después por las células hepáticas hacia los canalicemos intrahepáticos. colesterol.transferasa. El examen de la orina para los pigmentos biliares (bilirrubina) y urobilinógeno se emplea en la investigación de la ictericia. Generalidades La bilis se forma en el hígado y presenta muchos componentes. el conducto biliar común y el intestino. bicarbonato. fosfolípidos. El nivel de la bilirrubina serica total. que acaban conduciéndola a los conductos hepáticos. Un 5% de los citocromos citoplasmáticos y mitocondriales hepáticos.0 Página 11 de 83 BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA. y el otro porcentaje de los eritrocitos defectuosos destruidos en la medula ósea antes de ser liberados.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. es útil para evaluar la extensión y el progreso de la ictericia.glucoronil . El riñón no excreta bilirrubina no conjugada puesto que es insoluble en agua y en general se encuentra unida a la albúmina. pero no de bilirrubina. La bilirrubina total del suero incluye la bilirrubina libre o no conjugada (reacción indirecta) y una pequeña cantidad de bilirrubina conjugada o de reacción directa.

0 Página 12 de 83 La designación de Bilirrubina como directa e indirecta deriva de observaciones. Debe procesarse la muestra el mismo día. Metodo Método modificado de Jendrassik/Gróf. de que parte de la bilirrubina reacciona directamente con el reactivo de Erlich. ya que en caso contrario los resultados de la prueba podrían ser inexactos. Condiciones de la muestra No agitar el tubo. Fundamento La Bilirrubina reacciona con al ácido sulfanílico diazotado (DSA) formando un color rojo. llevadas a cabo por Van Den Berg en 1913. Los glucoronidos de la bilirrubina solubles en agua reaccionan directamente con DSA mientras la bilirrubina indirecta conjugada con albumina reacciona sólo en la presencia de un acelerador. 4.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Bilirrubina total = bilirrubina directa + bilirrubina indirecta. 5. 2. El ayuno prolongado produce aumento de bilirrubina ya que parte de esta se almacena en el tejido adiposo y al suceder la lipolisis se libera y sale a la circulación. Evitar muestras hemolizadas. Condiciones del paciente Reposo de 15 minutos antes de la toma de muestra. mientras que la otra hay que adicionarle alcohol. Muestra Suero o Plasma con heparina. La muestra es estable por 3 días a una temperatura de 2 a 8 grados. La absorbancia de este color a 546 nm es directamente proporcional a la concentración de bilirrubina en la muestra. y deben estar protegidas de la luz. . 1. 3. Proteger la muestra de sangre de la luz brillante. El uso de torniquete no debe prolongarse más de 30 segundos. alajada de la luz. Ayuno de ocho horas.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Mencionar en el volante del laboratorio cualquier fármaco que pudiera afectar los resultados de la prueba.

Bilirrubina directa Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Leer la absorbancia frente al blanco.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 13 de 83 6. Reactivo TBR Reactivo TNR Mezclar cuidadosamente e incubar por 5 minutos. Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente exactamente por 5 minutos. Leer la absorbancia de la muestra frente al blanco... Muestra 1 ml 1 gota 546 nm 1 cm 20 a 25 grados C frente a blanco de muestra... Muestra 1 ml 1 gota Reactivo DBR Reactivo DNR Mezclar cuidadosamente e Incubar por 2 minutos. Tecnica Bilirrubina total Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml .. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7.. Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min.

cafeína.17.1 umol/l. Multiplicar el resultado por 5. El almacenamiento no es conveniente. salicilatos y vitamina A. obstructivos y prehepáticos.B. por lo tanto.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. se altera rápidamente con la luz. Entre los fármacos que pueden causar niveles aumentados de bilirrubina total se incluyen: Esteroides. etc.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 11. La ictericia es una coloración amarillenta de los tejidos corporales (piel.5.0.0 umol/l.1 . anticonceptivos orales. 10.4 . Entre los fármacos que reducen los niveles de bilirrubina total se incluyen barbitúricos. ácido ascórbico. morfina.1 . 9. penicilinas y salicilatos (dosis elevadas).1 . Estabilidad No es muy estable. si la concentración es mayor de 25 mg/dl.2 . Para obtener la concentración de la Bilirrubian indirecta se resta o establece la diferencia de la concentración de la Bilirrubina total y Bilirrubina directa.1. antipalúdicos. si se necesita debe refrigerarse por pocos días (3 días a 2-8 °C) protegida de la luz.0 Página 14 de 83 8. Bilirrubina total en el recién nacido: 1 a 12 mg/dl ó 17. el color amarillo se aprecia cuando la bilirrubina serica total . antibióticos (Eritromicina).7 . Bilirrubina indirecta = B. Valores de referencia Bilirrubina total: 0.0 mg/dl o 5. La hemólisis de la sangre y la lipemia pueden producir resultados erróneos. Interferentes La exposición prolongada (más de 1 hora) a la luz solar directa o artificial puede causar disminución de la bilirrubina en un 50%. membranas mucosas y escleróticas).12. Correlacion diagnostica La determinación de bilirrubina total es útil para evaluar la extensión y progreso de la ictericia en problemas hepatocelulares.20. debe procesarce la muestra lo más rápido posible. total . Bilirrubina indirecta: 0.1 . Bilirrubina directa: 0.8 mg/dl o 3.3 mg/dl o 1.0 umol/l. diluir la muestra 1 + 4 con solución fisiológica y repetir la prueba. diuréticos.0.5 umol/l. anabolizantes. Linealidad La prueba es lineal hasta 25 mg/dl. causada por niveles sanguíneos de bilirrubina anormalmente altos. directa.

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 15 de 83 supera los 2. hepatitis aguda. etc.  Cirrosis por alcohol. defecto que puede ocurrir en cualquier fase del metabolismo de la bilirrubina desde su formación hasta su excreción intestinal. . indirecta o estar normal y la bilirrubina total aumentada. Síndrome de Cliger . Insuficiencia cardiaca congestiva. En general hay bilirrubinuria. policitemia. Causas:  Obstrucción intrahepática: debido a obstrucción por fármacos. Ictericia post . No hay bilirrubinuria.  Hiperbilirrubinemia por derivación. Ictericia pre – hepatica Hay aumento de la bilirrubina indirecta. alcohol y tóxica. La ictericia se debe a un defecto en el metabolismo o la excreción normales de bilirrubina. Cirrosis. Causas: Metabolismo aumentado del Heme: esferocitosis hereditaria. talasemia intoxicación por plomo. hormonas esteroideas.hepatica o colestasica Hay aumento de bilirrubina directa y se presenta Bilirrubinuria.  Destrucción prematura de eritrocitos defectuosos. cirrosis biliar primaria. Ictericia hepatocelular Hay aumento mayor de la bilirrubina directa y puede haber aumentos menores de B. virica o alcohólica. atresia de conductos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . tumores metastásicos etc. Eritropoyesis ineficaz acelerada: Anemia megaloblástica.5 mg/dl. enfermedad drepanocitica.Najjan I y II. Hepatitis viral. Causas: Shock por hipoxia.  Síndrome de Gilbert  Recién Nacidos.

por edema en la cabeza del páncreas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. cálculos biliares. . páncreas o ampolla de Vater.0 Página 16 de 83  Colestasis extrahepática o quirúrgica: debido a carcinoma en conducto.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Nota La bilirrubina directa diferencia la ictericia Pre-hepática de la hepatocelular y obstructiva y la bilirrubina indirecta hace la diferenciación entre la hepatocelular obstructiva y las Pre-hepáticas. vesícula biliar.

se encuentran en el plasma como lipoproteínas.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . se debe tener un estudio fraccionado de las lipoproteínas que es lo que se conoce como perfil lipídico. LDL colesterol: se determina con la formula de Friedewald . se coloca el suero durante 12 horas en refrigeración (4ºC) esto con el objeto de ayudar a clasificar las trigliceridemias así:  Capa cremosa en la superficie y nadante transparente. Todos estos lípidos con excepción de los ácidos grasos que están ligados a la albúmina.0 Página 17 de 83 PERFIL LIPIDICO MINIMO Generalidades de lipidos Los lípidos constituyen la principal reserva energética de los seres vivos y también forman parte de la membrana celular y regulan la actividad de la célula y tejidos. significa presencia de triglicéridos exógenos (quilomicrones). Triglicéridos HDL colesterol VLDL colesterol: se evalúa mediante la formula trigliceridos/5. Los lípidos totales están compuestos por: colesterol libre. El aspecto del suero no indica que el paciente este normal. cuando estos son < 400 mg/ml.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 30% libre. triglicéridos. 70% esterificado. pero sí se requiere tener un concepto claro de cómo están incidiendo los lípidos en el aparato circulatorio. fosfolípidos y ácidos grasos libres. HDL. Perfil lipidico minimo El dato del colesterol total y los triglicéridos da una información global de los lípidos que circulan en el organismo. IDL y VLDL. En el estudio del perfil lipídico mínimo se deben tener en cuenta los siguientes parámetros: Aspecto del suero: se realiza la prueba en frío en caso de obtener sueros lechosos.  Capa cremosa en la superficie y nadante turbio significa triglicéridos exógenos y endógenos (quilomicrones y VLDL). porque valores de colesterol aumentados no producen ninguna turbidez. El colesterol total del cuerpo: comprende el colesterol libre y esterificado. Transportado principalmente por LDL. esteres de colesterol. Aspecto uniformemente lechoso significa presencia de triglicéridos endógenos (VLDL).

Indice arterial se determina mediante la formula CT/HDLC ö LDLC/ HDLc.5 Riesgo potencial 200-239 130-159 25-35 40-45 >200 Riesgo alto >=240 >=160 <25 <40 >200 Estas cifras nos indican que la arteriosclerosis se esta verificando en forma normal.0 Página 18 de 83 LDL C = CT. Interpretacion del perfil lipidico mínimo Lípido mg/dl Colesterol Total LDL Colesterol HDL hombres HDL mujeres Trigliceridos Indice arterial: Deseable <200 <130 >35 >45 <200 Hombres <=5 Mujeres <=4.(VLDL C + HDL C ). Cifras superiores establecen un alto riesgo de enfermedad coronaria.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

0 Página 19 de 83 COLESTEROL TOTAL 1. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Condiciones del paciente Esta prueba no necesita de ayuno pero como generalmente se realiza con el resto del perfil lipídico. Anotar cualquier fármaco que pueda modificar los valores de Colesterol. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. 6. se deben seguir los requerimientos que para este se indiquen. Fundamento El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación. Separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción. . para evitar la redistribución del Colesterol entre las diversas lipoproteínas. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. Medición: frente a blanco de reactivo. El indicador es la quinonemina formada por el peróxido de hidrógeno y 4aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 4. Extraer 5-10 ml de sangre en un tubo seco. Muestra Suero o plasma con heparina o EDTA. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para colesterol con factor aclarante de lípidos (LCF) CHOD-PAP 2. 5. 3.

ni de Bilirrubina menor a 5 mg/dl.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Anticonceptivos orales. Esteroides anabólicos. Corticosteroides. o 5 minutos a 37 grados C. Diuréticos tiacídicos. Notas El test no se afecta con valores de hemoglobina inferiores a 200 mg/dl. Valores de referencia Varían con la edad y el laboratorio. Lovastatina (Mevacor). RECIEN NACIDOS LACTANTES NIÑOS ADULTOS/ ANCIANOS 53 – 135 mg/dl 70 – 175 mg/dl 120. Hay otros que disminuyen los valores como: Andrógenos. Isoniacida. Hay fármacos que elevan los niveles de Colesterol como: Hormona adrenocorticotrópica. Niaciana. Colestipol.0 Página 20 de 83 7. Liotironina (Cytomel). Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. Nitratos. Adrenalina. . Eritromicina.200 mg/dl < 220 mg/dl Sospechoso mayor de 220 Elevado mayor de 260 9. Vitamina D. bloqueadores beta-adrenérgicos. Interferencias La Ovariectomía aumenta los niveles de Colesterol. Quelantes de las sales biliares. Captopril. Neomicina (oral).EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . sulfamidas. Colchicina. 8. Evitar el contacto con los reactivos ya que son muy corrosivos. incubar 10 minutos a 20 ó 25 grados. Tecnica Pipetear Blanco ---------1000 µl Estándar ---10 µl ---1000 µl Muestra ------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Rvo Color Mezclar. Allopurinol.

embarazo. Estrés. multiplicar el resultado por 3. Para la técnica se debe montar un control Normal y uno Patológico.0 Página 21 de 83 Muestras lipémicas usualmente generan turbidez en la muestra que se va a analizar. Colestasis hepática. Mala absorción. 10.3 mmol/l). Resultados anormales Niveles aumentados en: Hipercolesterolemia. nefrósis. Medicación hipocolesterolemiante. Cirrosis biliar. Para concentraciones mayores diluir la muestra con solución salina al (0. aterosclerosis. Control de calidad Hacer control periódico a equipos y reactivos para evitar resultados falsos positivos ó falsos negativos. Hipertiroidismo. Anemia perniciosa.7 mmol/l  Niveles elevados: 260 mg/dl ó 6. Síndrome nefrótico.9%). Diabetes Mellitus descontrolada. Hipertensión. Xantomatosis.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Hipotiroidismo. .7 mmol/l  Niveles superiores: 300 mg/dl Necesitan tratamiento. Enfermedad hepática. Niveles disminuidos en: Sepsis. Dieta rica en Colesterol. 1 + 2 y repetir la determinación. Linealidad El test es lineal hasta una concentración de Colesterol de 750 mg/dl (19. generando resultados falsamente elevados 9.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Hiperlipemias. Correlacion diagnostica  Niveles sospechosos: 220 mg/dl ó 5. Infarto de miocardio. Anemia hemolítica. Desnutrición.

3. Fundamento Los quilomicrones. el sobrenadante contiene las HDL que se van a determinar. Abstenerse de no ingerir alcohol por 72 horas antes de la toma de la muestra (no es necesario). VLDL y LDL se precipitan por adición de ácido fosfotúngstico y cloruro de magnesio. en la mayoría de las personas la lipemia posprandial interfiere con muchos de los métodos analíticos. HDL es estable en la muestra de suero durante 7 días a 4ºC o durante 4 meses a –20ºC. 6. Despúes de centrifugar.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 22 de 83 COLESTEROL HDL 1. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. Muestra Suero o plasma con anticoagulante EDTA o heparina. 2. 5. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. Medición: frente a blanco de reactivo . Condiciones de la muestra La muestra debe separarse del coagulo dentro de las dos horas de la extracción y conservarse a 4ºC a menos que se analice de inmediato. Metodo Colesterol precipitnte. 4.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Condiciones del paciente Ayuno de 12-14 horas previas a la extracción de sangre. Debe señalarse que si bien la falta de ayuno no afecta los niveles de HDLc sanguíneo.

9% y se repite la precipitación de la muesta diluida. Precipitación pipetear muestra precipitante Macro 500 ul 1000 ul Micro 200 ul 500 ul Mezclar bien.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Notas El sobrenadante debe ser claro. B. . Limite de dilución 310 mg/dl. en ese caso. separar el sobrenadante claro del precipitado dentro de 1 hora y determinar la concentración del colesterol HDL con el reactivo de Colesterol total. Leer la absorbancia de la muestra y el estándar frente al blanco de reactivo antes de una hora. observando un sobrenadante turbio. El ácido ascórbico disminuye los valores. incubar por 10 minutos a temperatura ambiente. incubar todos los tubos a temperatura ambiente por 10 minutos ó a 37ºC por 5 minutos. Determinación Agua destilada Estándar Sobrenadante Reactivo de color Blanco 100 ul ------1ml Estándar 100 ul ---1ml Problema ---100 ul 1ml Mezclar. Centrifugar por 2 minutos a 10000 rpm ó 10 minutos a 4000 rpm. En las muestras con un contenido de triglicéridos altos se pueden presentar precipitaciones incompletas de las lipoproteínas o flotación por parte de las mismas sobre él liquido. Tecnica A. El resultado se multiplica por dos. se hace una dilución 1: 1 con solución cloruro de sodio al 0. Despúes de centrifugar.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 23 de 83 7.

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. complementada con un nivel de HDL lo más elevado posible. al evitar la arteriosclerosis excesiva porque remueve y elimina a través de la bilis cantidades considerables de LDL en forma de ácidos biliares y esteroides neutros. deficiencia de LPL 1 con afectación del metabolismo de quilomicrones y VLDL. Correlacion diagnostica La HDL contrarresta la acción nociva que puede tener la LDL sobre nuestro organismo. Resultados Anormales. siendo esta la mejor forma de luchar contra este mecanismo fisiológico. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Valores de referencia Mujeres > 45mg/dl Hombres > 35mg/dl 9. para evitar la arteriosclerosis prematura. obesidad. Niveles aumentados de HDL correlacionan con disminución en el desarrollo de enfermedad cardiocirculatoria. Niveles disminuidos de HDL correlacionan con riesgo aumentado de enfermedad cardiocirculatoria. deficiencia familiar de Apo I y Apo II. La LDL juega un papel muy importante en el funcionamiento arterial y por esto debemos tratar que el organismo tenga estrictamente la cantidad necesaria que requieren sus funciones.0 Página 24 de 83 8. Se observa en: mayor producción de Apo I y Apo II y actividad física fuerte. sedentarismo. hipertriglicéridemia.

Es importante describir el aspecto del suero. que consiste en . No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba. Fundamento Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasa. Notas La lipemia. El indicador es Quinineimina formada a partir de peróxido de hidrógeno. GPO-PAP 2.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. metabólitos y una serie de fármacos de uso común NO interfieren con el método. se le debe hacer la prueba en frío. No hacer ejercicio fuerte antes de la prueba.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Los Triglicéridos permanecen estables 3 días a 4ºC. Muestra Suero o plasma heparinizado o palsma con EDTA 4. 4aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa. No consumir grandes cantidades de Carbohidratos y grasas 48 horas antes de la prueba. la temperatura de 25ºC permite la liberación de glicerol de los fosfolipídos y produce un incremento aparente del valor de los Triglicéridos. la hemólisis hasta 10 mg/dl ó 170 mmol/l. Los volúmenes de la reacción sugeridos se pueden modificar sin ningún cambio en los cálculos. Antes de procesar la muestra se debe observar y anotar el aspecto del suero ya que si este está lechoso. Extraer 5-10 ml de sangre en tubo seco y separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción. 5. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para triglicéridos con factor aclarante de lípidos. 3. para evitar la redistribución de los Triglicéridos entre las diferentes lipoproteínas. Condiciones del paciente El ayuno debe ser entre 12 y 14 horas.0 Página 25 de 83 TRIGLICERIDOS 1.

3 mmol/l) de Triglicéridos. repetir la determinación y multiplicar el resultado por 6.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Tecnica Pipetear: Blanco ------------1000 µl Estándar ---10 µl ------1000 µl Muestra ------10 µl ---1000 µl Control ---------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Control Reactivo Mezclar. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20. con solución salina al 0.9%. luego de las cuales se observa las características que presenta el nadante y el sobrenadante. Valores de referencia EDAD 0 – 5 años 6 – 11 años 2 – 15 años 16 – 19 años Adultos / ancianos HOMBRES 30 – 86 mg/dl 31 – 108 mg/dl 36 – 138 mg/dl 40 – 163 mg/dl 40 – 160 mg/dl MUJERES 32 – 99 mg/dl 35 – 114 mg/dl 41 – 138 mg/dl 40 – 128 mg/dl 25 – 135 mg/dl . Linealidad El método es lineal hasta 1000 mg/dl (11. Metodo de determinacion Longitud de onda: 500 nm. 6. 8. Los Triglicéridos no permanecen en el suero a 25ºC.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. e incubar por 10 minutos a 25ºC o por 5 minutos a 37 grados C. Estabilidad de la reacción 1 hora. a 4ºC son estables por 3 días. leer con Blanco de reactivo. 25 ó 37 grados C Medición: frente a blanco de reactivo 7.0 Página 26 de 83 colocarlo en la nevera por 12 horas. Para concentración superior diluir la muestra 1+5. debido a que fácilmente se libera el glicerol.

por lo tanto cuando esto sucede las LDL no se deben reportar. Hipotiroidismo. Nota: Los trigliceridos elevados afectan el cálculo de las LDL. Dieta rica en carbohidratos. Clofibrato y colestipol. Correlacion diagnostica Niveles aumentados en: Hiperlipemias. . Desnutrición. Diabetes mal controlada. Hipertiroidismo. Disminuyendo los valores Acido ascórbico. Hipertensión. Estrógenos y anticonceptivos orales.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Niveles disminuidos en: Síndrome de mala absorción. Infarto de miocardio. Síndrome nefrótico.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Interferencias Elevando los valores Colestiramina. Asparraginasa. Enfermedad con almacenamiento de glucógeno. Cirrosis alcohólica. Embarazo. Riesgo de enfermedad coronaria y vascular. 10.0 Página 27 de 83 9.

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CREATININA

Generalidades Sus aumentos suelen ser proporcionales con respecto a los de la urea, aun cuando en general son más tardíos. Tiene particular interés diagnostico y pronóstico en los siguientes casos:  Nefropatías: Cuando en una insuficiencia renal con uremia, se observan cifras superiores a 5mg/100ml, él pronostico es fatal a corto plazo. Esto solo sucede en las fases avanzadas, ya que en las precoces, dada la facilidad de eliminación de la creatinina solo aumentan el ácido úrico y la úrea. En las nefritis agudas generalmente no hay elevación; en los casos en que existe (40%) es un cambio reversible y de escaso valor pronostico. En las nefrósis por tóxicos (Hg y Ag.) es donde se observan mayores elevaciones; en la insuficiencia cardiaca avanzada puede originarse una retención discreta o moderada de creatinina aunque no exista verdadera nefropatía.  En obstrucciones urinarias (Afecciones de próstata, vejiga, uréter, etc.) y en la anuria refleja (cálculos uretrales), se producen así mismo elevaciones marcadas de creatinina incluso 30 mg o más, igualmente reversibles con la reparación de la obstrucción.  En el gigantismo y acromegalia se observan discretas elevaciones. Cada 24 horas se transforma un 2% de creatina en creatinina. La cantidad de creatinina por unidad de masa muscular es constante y por lo tanto la degradación espontanea es constante. Como resultado de este fenómeno la concentración plasmatica de creatinina es estable y varia en menos de 10% diario en individuos normales. 1. Metodo Reacción de Jaffe Prueba fotométrica colorimértica para mediciones de punto final desproteinización.

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2. Fundamento La creatinina en solución alcalina forma un complejo coloreado rojo-naranja con ácido picrico. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la creatinina en la muestra. 3. Muestra Suero o plasma heparinizado u orina 4. Condiciones del paciente La muestra de sangre no requiere ayuno previo ya que la excreción de creatinina depende muy levemente de la alimentación y de la diuresis. Por lo menos 8 horas antes del examen no realizar esfuerzos corporales intensos. 5. Condiciones de la muestra La muestra de suero para creatinina es inestable a temperatura ambiente, refrigerada de 2 – 4 ºC por 24 horas. Congelada a –20 ºC es estable por 6 meses La creatinina puede ser determinada en cualquier líquido biológico, pero las muestras mas usadas son suero, plasma y orina. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 546 nm (500-550 nm) 1 cm 25° C frente a blanco de reactivo

7. Tecnica Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ

Solución Trabajo Estándar Suero

Mezclar y poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia a los 30 segundos y a los 90 segundos. A2-A1= Creatinina

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8. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Mujeres Hombres 0.5 – 1.0 mg/dl. 0.7 – 1.2 mg/dl.

Estos valores están influenciados por el sexo (siendo menor en la mujer), masa muscular del individuo. 9. Interferentes de la muestra y la reaccion • Interferentes positivos: Acido ascórbico, piruvato, acetona, ácido acetoacético, levulosa, glucosa, ácido úrico, proteínas, barbitúricos y antibióticos de la cefalosporina. Las temperaturas altas y los prolongados tiempos de reacción (> a 5 minutos), aumentan esta interferencia. El piruvato, acetona, ácido acético, aminoácidos y proteínas o cualquier compuesto con un grupo metilo o metileno activo, introduce errores debido a su acoplamiento con el picrato por un mecanismo análogo al de la creatinina; todos estos compuestos pueden producir sustancias coloreadas que aumentan la absorbancia en la reacción del complejo coloreado. La bilirrubina y otros productos de degradación de la Hb, causan una interferencia negativa probablemente por su oxidación en medio básico fuerte a compuestos incoloros, dando como resultado una disminución de la absorbancia, lo que se interpreta como una menor concentración de creatinina. Esta interferencia negativa se observa con frecuencia en el análisis cinético de la creatinina. 10. Correlacion diagonstica El nivel de creatinina en suero depende de 2 factores: La velocidad de producción. La velocidad de filtración. Dado que la fuente de creatinina serica es la creatina muscular y la fosfocreatina, una mayor cantidad de masa muscular produce un aumento de la creatinina serica. Los valores de creatinina exhiben una respuesta escasa o nula a las modificaciones dietéticas o a las alteraciones del equilibrio electrolitico.

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La concentración de creatinina en sangre, como la de la urea, se aumenta con el descenso de la función renal y el principal empleo de la determinación de creatinina serica esta en la evaluación de la función renal. En nefritis crónica cuando la concentración de BUN esta muy por encima de 50 mg/dl, el aumento de la creatinina es proporcional y las concentraciones de creatinina mayores a 5 mg/dl se consideran de importancia diagnostica grave. Niveles disminuidos se encuentran en la distrofia muscular. Notas La especificidad de la reacción depende del pH, temperatura y tiempo. Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse del fotómetro, sin que se alteren los resultados finales. El ácido pícrico es tóxico. Evite la inhalación, ingestión y contacto con la piel, lavar enseguida con polietilenglicol 400, con abundante agua.

que la concentración de dicha sustancia aislada en sangre o en orina.  El paciente debe abstenerse de ingerir carne.  Marcar en el frasco la hora de iniciación de la recolección. Técnica para la orina: Diluir 1:100 con Solución Salina 0.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . . té y café durante las 24 horas anteriores a la recolección. porque nos da información de cómo esta la filtración glomerular.9%. El control cronológico de la recolección de las muestras es esencial para la realización correcta de la prueba. para asegurar un volumen urinario de 1 ml por minuto cuando menos. siempre y cuando los resultados se interpreten en forma comparativa y no absoluta.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.  Para la recolección de la orina el paciente debe fijar una hora cero. Descartar la orina de esa hora y a partir de entonces recoger todo el volumen de orina.  Guardar refrigerada y en frasco bien tapado. Valores de referencia: Hombres: 98 – 156 ml/minuto Mujeres: 95 – 160 ml/minuto Limite de dilución: 500 mg/dl 2. La depuración de la creatinina endògena es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. inclusive la muestra del tiempo fijado para la recolección. generalmente 24 horas aunque es posible reducirlo a 4. 1. el mismo procedimiento de creatinina en suero. Muestra Técnica para el suero.  Debe seguir tomando agua.0 Página 32 de 83 DEPURACION DE CREATININA Generalidades Es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. La relación entre la concentración de una sustancia en orina y sangre es el mejor índice de función renal. 8 ó 12 horas. Condiciones del paciente La muestra de sangre debe obtenerse durante el periodo de recolección de la orina. La muestra de orina se recoge durante un periodo determinado.

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Metodo de determinacion Longitud de onda: 546 nm (500-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25° C Medición: frente a blanco de reactivo 5. La concentración de creatinina debe determinarse antes de las 24 horas de recogida la muestra.0 Página 33 de 83  Interrumpir toda terapia diurética. 10 ml de orina + 490 ml de agua destilada. el resultado se multiplica por 50. Tecnica Pipetear: Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ Solución Trabajo Estándar Orina diluida Dilución de la orina * Hacer una dilución de la orina de 1: 50. la cual no puede medirse por la reacción de Jaffé. La muestra de orina debe refrigerarse o agregarse un inhibidor bacteriano. 3.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. además producen creatininasas que destruyen la creatinina. ya que los gérmenes producen variación en el pH promoviéndose así la conversión de creatinina en creatina. Condiciones de la muestra Muestra de suero libre de hemólisis fuerte y de ictericia (ya que una ligera hemólisis no afecta la determinación). Calculo Creatinina en Orina* ________________ Creatinina en suero x Volumen (ml) _________ 1140 (Constante) . 4.

1900 mg/24 h. por lo que el verdadero valor de filtración glomerular esta por debajo de la depuración de la creatinina.8 – 1. 21 – 26 mg/Kg peso/24 h Hombres 7.2 mg/dl. Entre las causas de error están: mal cronometrado o recogida inadecuada de la muestra de orina. 16 – 22 mg/Kg peso/24 h 85 – 125 ml/min. la hidratación inadecuada del paciente.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 8.0 Página 34 de 83 6. 75 – 115 ml/min. 0.9 – 1. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Creatinina en orina Depuración de Creatinina: Mujeres Hombres Mujeres 0. ejercicio fuerte durante la prueba. Correlacion diagnostica En enfermedades renales avanzadas la excreción urinaria de creatinina excede a la velocidad de filtración glomerular a causa de la secreción tubular. que seria una fuente de error negativa.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. lo cual aumenta los niveles urinarios.4 mg/dl. Interferencias Los mismos de la guía anterior. Notas Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse proporcionalmente según las necesidades del fotómetro. sin que se alteren los resultados finales. .

Si la depuración plasmatica de una sustancia es mayor que la filtración glomerular debe interpretarse como que esta sustancia es secretada por el túbulo y si por el contrario. disminuciones se observan en pielonefritis crónica e hipertensión.A.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.73/A para obtener el valor real de la depuración en estos pacientes. multiplicando el resultado por 1. ligeras La filtración glomerular normal es en un adulto de 125 ml/min.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 35 de 83 El filtrado glomerular disminuye notablemente en G. y crónica. La depuración de creatinina disminuye en personas de edad. podemos concluir que esta sustancia es reabsorbida.N. la depuración es menor que la filtración. En las personas obesas la depuración esta alterada por lo tanto se hace necesario la corrección. en niños y personas de baja estatura por esto se hace necesario realizar la corrección del valor obtenido. .

0 Página 36 de 83 GLICEMIA Generalidades Glucemia o glicemia: Este término se refiere a la presencia de la glucosa en sangre.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 1. Gluconeogenesis: Formación de glucosa a partir de otro sustrato diferente al glucógeno ejemplo: aminoácidos. Fundamento La glucosa de determina despúes de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. La glucosa sanguínea proviene de dos fuentes: La más importante es la absorción intestinal de glucosa alimenticia que normalmente puede llevar los valores sanguíneos de glucosa hasta 138 -140 mg/dl. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de la peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo-violeta usando la quinonemina como indicador. Metodo Prueba enzimática colorimétrica por glucosa.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Metodo con desproteinización. Glucolisis: Llevar la glucosa-6-fosfato hasta piruvato para producir acétyl Co A (ciclo de krebs). GOD-PAP. Glucogenesis: Formación de glucógeno (hígado. Glucogenolisis: Movimiento de glucógeno almacenado para producir glucosa-6fosfato. músculo en mayor proporción y también leucocitos. . en el tejido nervioso en muy poca cantidad). 2. La liberación de glucosa por el hepatocito mediante un mecanismo que se acelera al disminuir la glicemia sanguínea.

6.0 Página 37 de 83 3. Ayuno de diez a doce horas. a menos que el paciente consuma diariamente menos de 150grs. . Tecnica Pipetear: BLANCO PATRON MUESTRA RVO. COLOR Blanco ---------1000λ Patron ---10λ ---1000λ Muestra ------10λ 1000λ 500 nm 546 nm 1 cm 20. No presenta glucosuria positiva antes de dar la carga de glucosa.) 160-180 mg/dl. suero o plasma 4. La estabilidad de la muestra es de 8 horas. de hidratos de carbono. ni haber fumado antes o durante la prueba.M. Condiciones de la muestra La separación del suero debe hacerse dentro de los 20 o 30 minutos de la extracción.25°C por 10 minutos ó 5 minutos a 37°C. 5. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Umbral renal (T. En el momento de la toma de la muestra el paciente debe estar sentado erguido. No tomar café.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Muestra Sangre total. Condiciones del paciente No se requiere preparación dietética especial. 25 ó 37 °C frente a blanco de reactivo Mezclar. incube a temperatura de 20 .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. No realizar ejercicio antes o durante la prueba. Leer la absorbancia de la muestra y el patrón contra el blanco de reactivo.

de agua.) tiene como finalidad la de descartar o de diagnósticar una diabetes mellitus tipo 2 (D.O.O. En los pacientes asintomáticos el diagnóstico de DM se establece cuando se cumplen los criterios diagnósticos de los valores de glicemia recomendado por diferentes asociaciones o grupos de estudio de diabetes asï: National diabetes data group Basal >= a 140 mg/dl en dos ocasiones consecutivas sea en adultos o en niños.G. Para la P. Valores de referencia Criterios de diagnóstico para DM por PTOG Normal Ayunas P. a partir de los cuales se empezara tomar los tiempos para la toma de las muestras asi: Gestantes 1-2 y 3 horas.T. que pueden no entrañar los riesgos asociados a la DM.).0 Página 38 de 83 8. por ejemplo en aquellos paciente que presentar trastornos clínicos . Utilizar métodos de laboratorio previamente estandarizados y sueros control Diagnostico de diabetes mellitus El principal objetivo de diagnóstico es la indentificación de pacientes con riesgo de hiperglicemia sintomática de cetoacidosis diabetica (CAD) o coma hiperosmolarno no cetónico (CHNC) o de complicaciones clínicas tardías. Carga de glucosa Niños: 1. La prueba de tolerancia oral a la glucosa (P.75 gr de dextrosa por kilogra la prueba tamiz consiste en administrar la carga de dextrosa y tomar una muestra después de una hora post-ingesta.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . no Gestantes 2 horas postcarga.M.199 Niño 130 – 139 140 – 199 9. Adulto < 115 < 140 Niño < 130 < 140 Diabetes mellitus Adulto >= 140 >= 200 Niño >= 140 >= 200 Intol. de dextrosa en 300 ml.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. A la glucosa Adulto 115 .tipo 2.O. descartando aquellos pacientes que presentan fluctuaciones en el límite superior de la concetracion plásmatica normal.T.G. Nota El tiempo máximo para ingerir la carga de glucosa oral es de 5 minutos. 100 gr.G.T.139 140 . cuando se sospecha una diabetes a pesar de la ausencia de hiperglicemia en ayunas o sistomática.

.. enfermedades cardiovasculares o vasculares Cerebrales agudas. anticonceptivos orales que contengan estrógenos sintéticos). por lo menos dos valores deben ser > = 200 mg/dl.G. Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl. sintomas de diabetes.. renales o del S.T.O. desmayos o palidéz durante la realización de la prueba. Nicotinico.G. Los criterios diagnósticos por P. .T.N. En la P. 2. tanto en niños como en adultos. Ayunas se define como la no ingesta calórica al menos por 8 horas. tampoco pacientes tratados con fármacos que alteren la prueba de tolerancia oral a la glucosa (tiazidas. a los pacientes que presenten naúseas.T.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .T.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.T.O. vómito. retinopatía y nefropatia.0 Página 39 de 83 que pudieran deberse a una DM no diagnósticada ejemplo: polineuropatía. polidipsia y pérdida de peso.G. glucocorticoides.G. décima edición).C. Valores normales Después de un ayuno de 10 a 12 horas los valores de glicemia deben estar ubicados entre 70-110 mg/dl (según el método utilizado).O. debe repetirse para corroborar el diagnóstico de DM. etc. acompañados de una glicemia a cualquier hora mayor o igual a 200 mg/dl. No se debe realizar la P. Niños: asintomaticos deben ser mas estricto en diagnóstico por P.O. Los valores de glicemia posprandial pueden ir hasta 160 mg/dl. Los pacientes con intolerencia a la glucosa pueden presentar mayor riesgo de hiperglicemia en ayunas o sintomatica. sudoración.T.G.(dado el mayor riesgo de un exceso de diagnóstico de DM).G. *Criterios diagnosticos reportados por el comite de expertos en el diagnostico y clasificacion de diabetes mellitus. enfermedades endocrinas que deterioren la tolerancia a la glucosa o enfermedades hepáticas. Adultos: dos horas y en cualquier otro momento de la P. (Guillermo Farias quimica clínica.. ac.O. Los sintomas clásicos incluyen poliuria.O.. solo son válidos para individuos sanos que no presentan infecciones. pero en muchos casos la intolerencia a la glucosa no progresa. La P. o puede también revertir a la normalidad.

una glicemia 2 horas postcarga ≥ a 200 mg/dl. Los valores normales para la glicemia en ayunas. Por ejemplo.0 Página 40 de 83 3. síntomas con una glicemia al azar > de 200 mg/dl. * Hiperglicemia en ayunas: Entre 110 mg/dl y 126 mg/dl. cada uno de ellos debe ser confirmado con una prueba posterior. Diagnostico de hipoglicemia Depende si el paciente presenta manifestaciones del sistema nervioso central (S. Para la prueba de tolerancia a la glucosa. De acuerdo a los nuevos criterios solo se tiene en cuenta los valores a las 2 horas. o una glicemia al azar ≥ a 200 mg/dl. son: * Glucemia normal: Menor de 140 mg/dl. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 126 mg/dl. Se han establecido tres criterios para el diagnostico de diabetes.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . las categorias. se han establecido en 110 mg/dl. estos criterios deben ser confirmados por otra prueba realizada un día diferente. debe ser confirmado subsecuentemente por una glicemia en ayunas ≥ a 126 mg/dl. * Disminución de la tolerancia a la glucosa: Entre 140 mg/dl y 200 mg/dl. las pruebas utilizadas para ella no estan estandarizadas. En la ausencia de hiperglicemia inequívoca con descompensación aguda. Para ello se utiliza 75 gramos de glucosa anhidra disueltos en 300 cc de agua. Dos horas poscarga durante una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) mayor o igual a 200 mg/dl. 2 horas poscarga. La prueba de tolerancia utilizaba valores a la hora. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 200 mg/dl. Las categorias para la glicemia en ayunas quedan establecidas de esta foma: * Glicemia normal: Menor a 110 mg/dl. El comité no recomienda la utilización de los niveles de hemoglobina glicada para el diagnostico de la diabetes.C) inexplicadas o sintomas adrenergicos inexplicables. si bien los niveles de hemoglobina glicada presentan una distribución similar a la glicemia. por lo cual asignar un valor diagnostico es difícil. la razón para ello es la perdida de la primera fase de secreción de insulina a partir de esta cifra.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. . por el momento solo continua como prueba para el control y no para el diagnostico.N. hora y media y a las dos horas. 2 horas poscarga.

(Se pueden encontrar valores menores de los expuestos en un ayuno de 72 horas).G.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.T.N.0 Página 41 de 83 En ambos casos para el diagnóstico se requiere valores plásmaticos anormalmente bajos. Por lo general una glucosa plásmatica anormalmente baja se define menor de 50mg/dl en el varón. confirman el diagnóstico de hipoglicemia de ayuno o inducida por fármacos. El paciente con deterioro de la conciencia o crisis convulsiva debe efectuarse la glucosa con tirilla y gota de sangre obtenida al colocar un aguja para iniciar la perfusión de líquido.) Criterios diagnosticos para diabetes gestacional Ayunas >= 105 mg/dl 1 hora >= 190 mg/dl 2 horas >= 165 mg/dl 3 horas >= 145 mg/dl Normal: Hasta 135 mg/dl. menor de 45mg/dl en la mujer. sulfas que producen un 50% de las hipoglicemias. Otros fármacos como salicilatos. los cuales se corrigen al aumentar la glucosa sanguínea.G . El diagnóstico debe completarse con valoraciones de insulina proinsulina y peptido C y también la busqueda de drogas que puedan estar ocasionando la hipoglicemia (insulina alcohol.O. La mejoría inmediata de los sintomas del S. se perfunde glucosa de inmediato. Anormales: Valores de glicemia entre 135 .C.. tras un aumento de glucosa. y en lactante y niños menor de 40mg/dl . propanolol etc.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . de 3 horas con una carga de dextrosa de 100 gramos. si se obtiene un valor anormalmente bajo. Valores de glicemia > 180 mg/dl en más de una oportunidad son diagnósticos de D.180 mg/dl sugieren la realización de una P.M.

4. La disminución de la absorbancia es proporcional a la concentración de urea dentro de los intervalos de tiempo dados. ha sido diseñada para ser realizada preferiblemente en analizadores.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La prueba ha sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima límite. orina diluida 1:1000 con agua destilada. Ya que la prueba cinética es muy rápida. por lo tanto debe analizarse pocas horas despúes de recogida o conservarse en refrigeración. Sueros lipémicos causan turbidez en la solución final. 3. Muestra Suero o plasma. El amonio producido en esta reacción se combina con 2oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato-deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. Fundamento La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir amonio y dióxido de carbono. Condiciones del paciente 24 horas antes de tomar la muestra. 2. 5. Metodo Metodo completamente enzimático para determinación cinética de urea. Condiciones de la muestra Por acción bacteriana se puede perder la urea. . el paciente debe llevar una dieta pobre en proteínas y 12 horas de ayuno total.0 Página 42 de 83 UREA 1. GLDH.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

repetir el ensayo y multiplicar el resultado por dos. lea la absorbancia de la muestra y el estandar despúes de 30 segundos y lea nuevamente al minuto.0 Página 43 de 83 6. la muestra y la solución 1 deben pipetear en el fondo de los tubos de ensayo y mezclarse cuidadosamente. 3 mmo1/1) de urea para suero o plasma y 200 g/L (330 mmol/L) para la orina.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. calcule la diferencia 8.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 30°C ó 37°C Lectura contra blanco de reactivo 7. Tecnica Pipetear Blanco ------1ml Patrón ---10 ul 1ml Muestra 10 ul ---1ml Muestra Patrón Reactivo Mezcle. . El patrón. Valores de referencia Suero 10-55 mg/dl 1. 334 nm. Metodo de determinación Logitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 340 nm. Para concentraciones más altas mezclar un volumen de la muestra con un volumen igual de agua destilada. 1 mmo1/1 Orina 20-35 mg/24 horas 333-583 mmo1/24 horas El método es lineal hasta 200 mg/dl (33. 365 nm 1 cm 25°C. 7-9.

Cuando existe uremia los síntomas incluyen letargo.14. convulsiones y coma. TBC renal. La anemia es un carácter prominente en la uremia crónica porque está deprimida la eritropoyesis.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Gota Crónica y en todas aquellas entidades donde el volumen del filtrado glomerular se ha reducido una quinta parte de lo normal. anorexia. nefritis aguada. Correlacion diagnostica La urea se encuentra aumentada por encima de los valores normales en caso de insuficiencia renal u obstrucción de vías urinarias. náusea y vómito. Determinacion de nitrogeno ureico El nitrogeno ureico se saca de dividir el valor de la urea por un factor que es 2. deterioro mental y confusión. o una enfermedad hepática grave.0 Página 44 de 83 9. . El nitrógeno uréico de la sangre. glucosa hasta 500 mg/dl y ácido ascórbico hasta 30 mg/dl. Interferencias La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . el nitrógeno no proteico y la creatinina están elevados y los niveles sanguíneos de estas sustancias se emplean como índice de la gravedad de la uremia. bilirrubina hasta 60 mg/dl. 10. triglicéridos hasta 2000 mg/dl. Los valores de la urea pueden disminuirse en alteraciones hereditarias de la síntesis de urea o cuando existe una ingesta inadecuada de proteínas. sacudidas musculares.

4. transporta los lipidos originando los compuesos que se denominan. 3. hierro. Estable 8 dias a 2-8 C. Suero y plasma heparinizado.5 g/dl. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero en aproximadamente 0. El ejercicio causa aumento de la concentración de proteínas en un 6 a 12%. Evitar todo esfuerzo corporal intenso por lo menos 8 horas antes de la toma de la muestra. cobre. aporta la nutricion celular. de donde se origianan el nombre de inmunoglobulinas. Condiciones del paciente La muestra ha de tomarse con 8 horas de ayuno. El uso de torniquete no ha exceder los 30 segundos. Fundamento Los iones cúpricos con las proteínas y peptidas en solución alcalina forman un complejo púrpura. . La fracción globulina se sintetiza especialmente en las células plasmáticas y tienen como misión principal fabricar anticuerpos. vitaminas liposolubles. Metodo Prueba colorimétrica fotométrica para proteínas totales (Biuret) 2. lipo-proteínas y sirve de medio de transporte a multitud de elemntos como esteroides. Los anticoagulantes quelantes interfieren. La absorbancia de este complejo es proporcional a la concentración de proteínas en la muestra. La cifra normal de las proteinas totales del suero está comprendida entre 6 y 8 mg/ ml encontrándose de 1 gramo menos en los pacientes que guardan cama por mas de dos semanas las proteínas totales están integradas por la fracción albúmina y bla fraccion globulina. interviene en el equilibrio ácido-básico. Muestras. La priemera regula la presión osmótica coloidal de la sangre. 1.PROTEINAS TOTALES Generalidades.

Metodo de determincion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 6.0 ml 340 nm. 334 nm ó 365 nm 1 cm 25°C.0 ml Patrón ----10 ul ----1. lea la absorbancia de la muestra y estándar despúes de 30 segundos y lea exactamente al minuto despúes calcule la diferencia y multiplique por 80. 30°C ó 37°C frente a blanco de reactivo Mezcle. .5. Interferentes La hemoglobina (0. Valores de referencia Suero: 65 – 80 g/L Plasma: 68 –83 g/L 8. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Agua destilada Patrón proteina Muestra Reactivo 10 ul ------1. La presencia de dextrano (utilizado como expansor del plasma) ocasiona una floculación de la mezcla de reacción que puede separarse por centrifugación sin que afecte los resultados. ABS Muestra ____________ X 80= mg/dL proteína ABS Patrón 7.0 ml Muestra --------10 ul 1. La bilirrubina (15 mg/dl) La lipemia moderada no interfiere.2 g/L).

9.5 y 5. . De la cifra total que integran las proteínas. quemaduras. tambien puede estar disminuida en: Nefrosis lipoidea. vómitos. fistulas digestivas etc. sudoracion excesiva. diarreas profusas. Corelacion clinicopatologica Cuando hay hemoconcentración por shock. Se obtienen falsas hiperproteinemias.5 y 3g/ml a la globulina. Afecciones hépaticas crónicas. Neoplasias. Las cifras bajas generalmene corresponden a malnutricion. Anemia persistente.5 g/ml corresponden a la albúmina y entre 1. entre 3. Edemas carenciales.

En caso de orinas muy turbias es conveniente centrifugarlas. Estable 8 dias.1 y Alfa –2. aumento de la filtración glomerular o alteraciónes en la composicion proteíca que la hace filtrar más facilmente. . Recoger la orina. 1. La proteina presente en la muestra reacciona en medio ácido con el complejo Rojo rojo de pirogalol y el molibdato originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectofotometria. Tambien conocida como albúminuria. es la cantidad de proteína excretada por la orina. 4. Normalmente es de 40 a 80 mg con límite máximo. Fundamento. Orina de 24 horas. 150/24 horas. medir el volumen y conservarla a 2-8 C. 2. Muestras. pero su dosificacion periódoca si valora el progreso o regresión de la lesión.PROTEINURIA Generalidades. reabsorción tubular disminuida. Condiciones de la muestra Se debe recoger orina de 24 horas u orina ocasional. La cantidad no permite valorar la gravedad de la afección. La albúmina constituye entre un 60 y un 90 % de la prteína excretada y el resto está por globulinas principalmente globulina Alfa. Es el indicador más importante de enfermedad renal complementado con el sedimento microscópico. cantidad no detectable por los sistemas habituales para dosificarla. orina ocasional ó líquido cefalorraquideo. Metodo Metodo colorimétrico cuantitativo para determinación de proteínas en orina y líquido cefalorraquideo. Tiene como mecanismo el aumento de la permeabilidad de las membranas glomerulares. 3.

5. Algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la reacción. 600 nm ó 620 nm 1 cm 37 °C frente a blanco de reactivo Patron Muestra reactivo Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37 °C leer la absorbancia contra el blanco Calculos: Proteinas de 24 horas: Muestra Patron x volumen x 100 Muestra Patron x 100 Proteina en orina ocasional: Proteínas en líquido cefalorraquideo: Muestra Patron x 100 7. Valores de referencia Orina de 24 horas 30 – 140 mg/24 h (hasta 160mg/24h en mujeres embarazadas) Orina ocasional 25 mg/dl Líquido cefalorraquideo 15 – 45 mg/dl (en adultos de más de 60 años se extiende a 60 mg/dl) 8. .. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medicion: 6. Interferencias La hemolisis puede ser causa de resultados falsamente aumentados tanto en orina como en LCR. Tecnica Blanco ------1 ml patron 20 ul ---1 ml muestra ---20 ul 1 ml 580 nm. ácido benzoíco o timol pueden causar resultados falsamente disminuidos. Los conservantes para orina como ácido clorhídrico.

La determinación de proteínas es importante en la detección de patologías renales. como ocurre en la meningitis bacteriana. El LCR es útil para evaluar la permeabilidad de la barrera hematoencefálica en muchas enfermedades inflamatorias o infecciosas del SNC. la fiebre. viral o de otros origenes. .9. como en la disfunción glomerular. el embarazo. hipotermia. Correlacion diagnostica Hay condiciones fisiológicas o benignas deonde se puede observar un aumento en la excresión urinaria de proteínas como el ejercicio violento.

se van a diferenciar por su movilidad elctroforética. que la componen. es decir. . y en eritrocitos pero en bajas concentraciones. LCR.TRANSAMINASAS Generalidades El hígado contiene un gran numero de enzimas. corazón. la transaminasa glutamicopirúvica ó Alaninoaminotranferasa y la transaminasa glutamicooxaloacética ó Aspartatoaminotransferasa . Existen dos tipos de transaminasas. propiedades cinéticas e inmunológicas y a. músculo esquelético pero en mayor concentración en el Hígado.a. etc. orina. la GPT se puede encontrar en plasma. La GPT es un enzima que también se encuentra en riñón. corazón. En los eritrocitos se encuentra la GOT soluble y en los leucocitos y reticulocitos están los dos tipos enzimáticos. la GPT es una enzima exclusivamente citoplasmática. de todas ellas las de mayor importancia clínica son la fosfatasa alcalina (Pa). estas enzimas están localizadas particularmente en el hígado. Las transaminasas son enzimas que catalizan las reacciones de transferencia de grupos aminos de un aminoácido a un cetoácido. que esta constituida por dos isoenzimas. en tanto que la GOT es una enzima binocular. una citoplasmática y otra mitocondrial. pH óptimo de acción. para la síntesis de aminoácidos distintos a los originales. las transaminasas (GOT ó ASAT Y GPT ó ALAT) y la CGT (gamaglutamiltranspeptidasa o γGT).

340 nm. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina.ASPARTATO AMINOTRASFERASA (GOT) 1. 5. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. 4. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. 30 ó 37°C frente a aire . 3. 334 nm 1 cm 25. Sin activación por piridoxalfosfato. Fundamento Metodo cinético para la determinación de la actividad de ASAT o GOT de acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Muestra Suero o plama con heparina o EDTA. Metodo Prueba liquiUV 2.

Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. en las próximas 6-12h después de la oclusión de una arteria coronaria. el grado del aumento es proporcional a la . La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. en estos casos también se debe diluir. Correlacion diagnostica Los valores aumentados de esta enzima suceden cuando hay muerte en las células del miocardio (infarto al miocardio). Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos 8. Linealidad En caso de sobrepasar la linealidad diluir 0. En casos de baja absorbancia es debido a que por ser una reacción enzimática se consume el NADH en la incubación. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. 10.9ml de solución salina y multiplicar por 10.1ml mas 0. Valores de referencia 25 ºC 18 U/L 15 U/L 30 ºC 25 U/L 21 U/L 37 ºC 37 U/L 31 U/L Hombres hasta Mujeres hasta 9. no se debe usar como anticoagulante.7.

los valores máximos se ven en al cabo de 48h y recupera sus valores normales de 3-5 días. ictericias obstructivas.magnitud del daño. . osea que una lesión grande puede hacer elevar los valores >200 unidades. Los aumentos moderados se observan en las etapas finales de la cirrosis. Las cifras de GOT también se ven aumentadas en lesiones agudas de las células hepáticas como en las hepatitis virales y lesiones por intoxicación con fármacos o tóxicos como tetracloruro de carbono.

340 nm. 30 ó 37°C frente a aire . Muestra Suero o plasma con EDTA o heparina. 334 nm 1 cm 25. Metodo Prueba liquiUV para alanina aminotransferasa. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. 3. 2. 5. el ácido pirúvico producido por la enzima a partir de alanina y ácido alfacetoglutarato se transforma en ácido láctico por efecto de la deshidrogenasa láctica. Fundamento Es un método cinético para la determinación de la actividad de la GPT de acuerdo con las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC sin activación por piridoxalfosfato. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Los métodos para la medición de GPT son muy semejantes a los de la GOT. La transformación simultánea de NADH en NAD va seguida por una disminución de la absorbancia a 340nm. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina.ALANINA AMINOTRANSFERASA (GPT) 1. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas. 4.

Si sobrepasa la linealidad diluir 1 + 10 y multiplicar por 11 8.095% evitar contacto con mucosas y piel. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos Linealidad Hasta 154mmol/L o 9gm/L (según el Kit utilizado). Valores de referencia 25ºC 5-23U/L 5-19U/L 30ºC 7-32U/L 7-26U/L 37ºC 9-43U/L 9-36U/L Hombres hasta Mujeres hasta Precauciones El Buffer/sustrato esta compuesto con sodio de azida 0. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. 9. . no se debe usar como anticoagulante. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática.7. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra.

por esta razón se considera más específica la GPT en patologías del hígado. Los valores de La GPT. y la determinación de la fosfatasa alcalina son los de mayor utilidad para el diagnóstico de las hepatitis. En la post-hepáptica es difícil encontrar valores superiores a 200U/L. un buen lavado del material y no dejar de lado el uso de los controles. En la hepatitis viral se observa una elevación de ambas enzimas. La determinación de la GOT y GPT se encuentran aumentadas en las insuficiencias cardiacas y como consecuencia del estasis Hepático. en colestasis intra-hepática los niveles de GOT y GPT son análogos a los de la ictericia post-hepática. en contraste con la cirrosis hepática que se elevan poco las GOT y disminuyen las GPT. GOT. pero esto se debe posiblemente al daño del hepatocito secundario por alteración en la circulación. Correlacion diagnostica Las cifras de GPT pueden estar también ligeramente aumentadas en el infarto al miocardio. . En la ictericia hepática (hepatocelular) y la post-hepática se utilizan la GOT y GPT para diferenciarlas. a veces es mayor el aumento que la de la GOT. un buen trabajo organizado. si la insuficiencia es aguda se pueden elevar los valores de 1000 a varios miles U/L. Los niveles sericos de GPT se encuentran considerablemente aumentados en las lesiones agudas de las células hepáticas. Nota Gran parte del éxito de obtener buenos resultados en este tipo de determinaciones enzimáticas esta en el correcto manejo del tiempo a la hora de la lectura (pues las enzimas actuaran hasta consumir el substrato).10. lo que nos puede ayudar a diagnosticar un infarto del miocardio teniendo muy en cuenta no llegar a confundirse con una hepatitis viral ya que en estas también aumentan. se debe analizar todos los datos clínicos posibles para hacer un buen diagnostico y reconfirmar con enzimas como γGT. El análisis de estas dos enzimas es de útil ayuda para detectar daño a nivel del hígado y determinar una hepatitis ya sea viral o por tóxicos como drogas. los valores elevados de estas tres enzimas son característicos de las hepatitis agudas y enfermedades necrotizantes del hígado en contraste con la elevación de la fosfatasa alcalina y disminución de GOT y GPT que nos da indicios de una ictericia obstructiva. CHE y GPT que son hepatoespecificas.

bazo y corazón. hígado. heces. glucógeno y sus productos parcialmente hidrolizados. sangre.amilasa es una endoenzima que se denominaasí porque todos los productos de la hidrólisis tienen la configuración (α) en el C1 de la unidad de la glucosa reductora. orina. cerebro. 2. La α . trompas de falopio. La liberación de 2-cloro-4-nitrofenol del substrato y el resultante incremento de absorbancia por minuto es directamente proporcional a la actividad de la amilasa en la muestra. Fundamento La prueba colorimétrica utiliza un nuevo substrato. Metodo Prueba colorimétrica para amilasa alfa-1. Muestra Suero o plasma heparinizado. Actua sobre las uniones 1-4 de las cadenas rectas del almidón y también sobre las uniones 1-6 glucosídicas de las cadenas ramificadas como las de amilopeptina y glicógeno. leche.Amilasa suele estar presente en el páncreas ( 200 mg/kg ) glándulas salivales. semen. amilopeptina. intestino. 1. músculo.AMILASA GENERALIDADES Las amilasas son enzimas contenidas en la secreción pancreática las cuales catalizan la hidrólisis de los polisacáridos tales como : El almidón. orina No hay pérdida de la actividad en 5 días a 4°C.4-glucan-4-glucanohidrolasa. Este substrato reacciona directamente con la amilasa y no requiere de enzimas de restricción. 3. . La α . tejido adiposo. riñón. pulmón. 2-cloro-4-nitrofenilmaltotriósido.

5. Tecnica Temperatura Muestra reactivo factor 25°C 20 ul 1000 ul 9864 37°C 10 ul 1000 ul 24820 Hg 405 nm. Leer la absorbancia a los 1. 400 nm ó 410 nm 1 cm 25 °C ó 37°C frente a agua destilada Mezclar bien incubar por un minuto a la temperatura deseada. plasma Orina espontánea Orina 24 horas 25°C 120 U/l 600 U/l 450 U/24h 37°C 220 U/l 1000 U/l 900 U/24h IFCC 28-100 U/l <460 U/l <410 U/l . 8. 2 y 3 minutos Y multiplicar por el factor correspondiente. Si la determinación excede el valor diluir la muestra con 500 ul de solución salina y 100 ul de muestra y multiplicar por 6. oxalato o EDTA porque inhiben la actividad de la enzima. No utilizar citrato. Condiciones del paciente No requiere ayuno.4. Se recomienda el uso de pipetas automáticas para la medición de las soluciones para evitar la contaminación de las mezclas con saliva. Evitar la utilización del torniquete por más de 30 segundos. Metodo de determinación Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Valores de referencia Temperatura Suero. Condiciones de la muestra Puede utilizarse plasma heparinizado. 6.

se libera una gran cantidad de amilasay se produce una hiperamilasemia. dato útil para su diagnóstico.9. . En la pancreatitis aguda. Cuando hay ruptura del embarazo ectópico. aumenta los niveles de amilasa. obteniendo niveles normales al 3 día. La úlcera péptica perforada. pero en la orina persisten hasta por 10 días. dato que se debe tener en cuenta cuando se dosifica en pacientes con posible pancreatitis aguda y han recibido este analgésico. 10. Interferencias La aplicación de morfina produce contracción del esfinter de Oddi y eleva los niveles hasta 900 unidades. Corresponden a episodios agudos y sólo duran 3 días. sus niveles aumentan en las primeras 24 a 36 horas. Correlacion diagnostica Los nivele elevados en el suero son siempre transitorios.

La dosificación urinaria a veces es más ventajosa que la hemática pues el suero solo se eleva durante unas 72 horas y en la orina persiste por varios días.AMILASURIA En condiciones normales se elimina una cantidad de amilasa por la orina. También se eleva en la parotiditis y litiasis parotidea y marcada disminución en su eliminación en el carcinoma pancreático. comprendida entre 35 y 250 unidades. Este factor hay que tenerlo en cuenta y valorar el tiempo que ha durado la recolección. insuficiencia renal y pancreatitis crónica. . con cifras estremas en las 24 horas de 835 a 6150 unidades.

Fundamento La fosfatasa alcalina cataliza en medio alcalino la transferencia del grupó fosfato del 4-nitrofenilfosfato al 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP). El mejor anticoagulante es la heparina. Condiciones de la muestra Puede trabajarse con plasma. pero este no debe contener floruros ni oxalatos. 5. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 405 nm 1 cm 37°C frente a vacio . La utilización de EDTA inhibe la reacción. 3. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno minimo de 8 horas. los valores obtenidos en plasma y suero siempre son iguales 6. Muestra Suero o plasma Es estable al menos por 7 días a una temperatura de 2 a 8 °C.FOSFATASA ALCALINA 1. medido a 405 nm. Metodo Metodo espectofotómetro con tampon AMP 2. 4. El ejercicio puede alterar el resultado. Debe permanecer en reposos 15 minutos antes de la toma de la muestra. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de formación del 4-nitrofenol. liberando 4-nitrofenol.

También aumentan en la ictericia.7. Interferencias Los anticoagulantes como el floruro. raquitismo. enfermedad de Paget. EDTA. por lo tnto esta bien establecida su relación con la formación osea. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 20 ul Leer la absorbancia inicial y efectuar lecturas cada minuto por 3 minutos y promediar los resultados y multiplicar por el factor 2764. Las muestras hemolizadas interfieren por la fosfatasa alcalina eritrocitaria. Correlacion diagnostica Se origina principalmete en los huesos y en el higado. hiperparatiroidismo. fracturas en consoliación y en metastasis óseas. por eso cuando el crecimiento disminuye sus niveles bajan a cifras similares al del adulto. sus niveles aumentan. 8. Valores de referencia Adultos: 26 – 117 U/l 9. Cuando hay deficiencia de vitamina D. . oxalato y citrato interfieren en la reacción. en el abseso hepático. 10.

La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de calcio existente en la muestra. 3. 5. forma un complejo de color azul con arsenazo III (ácido 1. Condiciones del paciente No requiere ayuno.CALCIO 1. Orina efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 650 nm 1 cm 37°C frente a agua destilada . Metodo Determinación cuantitativa para calcio 2. No usar oxalato o EDTA como anticoagulante ya que interfieren en la determinación de calcio. Muestra Suero o plasma 4.7-naftalenen-bis (azo)-dibenzenarsónico). Antes de la recogida adicionar al contenedor 10 ml de ácido nítrico al 50% Diluir la orina ½ en agua destilada para el análisis y multiplicar por dos. Fundamento El calcio en medio neutro.8-dihidroxi-3.6-disulfo-2. 6. Condiciones de la muestra Debe ser separado lo antes posible de los hematíes.

0 – 3. intoxicación por vitamina D.5 – 10. Una disminución de los niveles de albúmina causa una disminución del calcio en suero. aumento de la retención renal. Correlacion diagnostica El calcio es el mineral más abundante e importante del cuerpo humano. Interferencias Se recomienda utilizar material de plástico. La mayoria de las causas de hipercalcemia son debidas a enfermedades oncológicas.12 mg/dl 8. pseudohipoparatiroidismo. 10. mal nutrición o mala absorción. El color es estable como minimo una hora. Valores de referencia Suero o plasma: Adultos Niños Recién nacidos Orina: Adultos Niños 9. si se utiliza material de vidrio debera lavarse con ácido nítrico diluido con agua destilada.0 – 13 mg/dl 2.5 – 3 mmol/l 2. el 99% se halla en los huesos.2 mmol/l 50 – 300 mg/24h 80 –160 mg/24h . 8. Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. La mayoria de los detergentes destinados al uso del laboratorio contienen agentes quelantes. osteoporosis. invalidan la determinación.1 –2. tirotoxicosis e hiperparatiroidismo. 8. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul Estándar Muestra reactivo Mezclar e incubar 2 minutos. Niveles bajos de calcio pueden atribuirse ahipoparatiroidismo. deficit de vitamina D. Trazas de los mismos.6 mmol/l 2.5 mg/dl 10 . sarcosidosis.7.

4 con HCL. Condiciones de la muestra Utilizar material limpio 6.MAGNESIO 1. Diluida 1:10 con agua destilada acidificada hasta 3. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 2. 3. 4. Estándar Muestra reactivo . Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul 520 nm 1 cm 25 °C frente a blanco de reactivo. La intensidad del color es proporcional a la concentración de magnesio. Metodo Metodo colorimétrico – calmagita. Fundamento El magnesio forma un complejo de color púrpura al reaccionar con la calmagita en medio alcalino. Condiciones del paciente No requiere ayuno 5. Muestra Suero o plasma heparinizado Orina.

glomerulonefritis. Los niveles altos implican una depresión del sistema nervioso central y la excitabilidad neuromuscular.6 – 2. 8. . tratamiento insulínico del coma diabetico. Niveles bajos son propios de trastornos gastrointestinales con malaabsorción. hipertiroidismo. perdida anormal de líquidos. tratamientos con diuréticos. Valores de referencia 1. Correlacion diagnostica La hipomagnesemia implica manifestaciones similares a la hipocalcemia.Mezclar e incubar por 5 minutos La coloración es estable por 30 minutos. pielonefritis entre otros. 5 mg/dl 9.

2.25°C frente a blanco de reactivo Blanco Estándar muestra reactivo . Muestra Suero. Metodo Análisis fotométrico UV para la determinación de fosforo. Condiciones del paciente No requiere ayuno. Fundamento El fosforo reacciona con molibdato en un medio fuertemente ácido para la formación de un complejo. Hg 334 nm 1 cm 20. Tecnica blanco ---------1000 ul estándar ---10 ul ---1000 ul muestra ------10 ul 1000 ul 340 nm. 6. La absorbancia de este complejo leido en Uvcercano es directamente proporcional a la concentración de fósforo... 4. Condiciones de la muestra No se debe usar plasma.FOSFORO 1. Los anticoagulantes pueden causar resultados falsamente bajos. 5. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 3.

Interferencias Muestras ictéricas y lipémicas requieren un blanco de muestra. Las valores bajos se encuentran en el raquitismo. Por lo tanto se recomienda material de plástico. la acromegalia. Leer la absorbancia de la muestra frente a blanco de reactivo antes de 1 hora.0 mg/dl 4. 10. hipoparatiroidismo. fracturas evolutivas y la enfermedad de Addison.5 – 5. 8.0 – 7.Mezclar e incubar por lo menos 1 minuto a temperatura ambiente.0 mg/dl 9. Los valores elevados se encuentran en la insuficiencia renal crónica. . Correlacion diagnostica Esta regulado por la hormona paratiroidea. osteomalacia. la cual controla la excreción urinaria y su movilización osea por medio de la vitamina D. La contaminación del material de vidrio es la mayor fuente de error en este análisis. Valores de referencia Adultos Niños: 2. Sueros lipémicos o hemolízados no deben ser usados. infecciones de flora cocoide gram negativa en su forma septicémica y en la hipervitaminosis D.

La concentración catalítica se determina. En el infarto de miocardio sus unidades se elevan entre 3 y 6 horas. Tiene su máxima concentración entre las 24 y 48 horas. . 2. empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. despúes de iniciado. empezando a descender despúes de dicho tiempo. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. Fundamento La cratina quinasa (CK) cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina. Normalmente los músculos estriados tienen una alta concentración. Método estándar modificado de acuerdo con las recomendaciones del cómite ECCLS. 4. apartir de la velocidad de formación del NADPH. y muy poca se encuentra en el miocardio y el cerebro (CK). En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK. obteniéndose creatina y ATP. Muestra Suero o plasma heparinizado o con EDTA. Metodo Prueba líquida UV activada por NAC creatin kinasa. Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. 3. medido a 340 nm. 1.CREATINCINASA (Ck) Generalidades. para retornar a la normalidad entre 3 y 6 dias despúes. lentamente.

30 ó 37°C contra aire Muestra Reactivo 37°C 25 ul 1000 ul Mezclar y transferir de inmediato a una cubeta. 25°C ó 30°C 50 ul 1000 ul durante unos Hg 365 nm. se deducen las siguientes fórmulas para calcular la concentración catalítica: Macro: Micro: A/min x 4127 = U/L A/min x 3333 = U/L . Poner el cronómetro en marcha. Condiciones de la muestra La muestra de suero o plasma para Creatina quinasa es estable al menos 7 días a 2-8 Centigrados. Comprobar que las diferencias entre absorbancias sean sensiblemente iguales. 6. Tecnica Precalentar el reactivo de trabajo a la temperatura ambiente minutos. A los 3 minutos. Insertarla en el portacubetas termotizado. Considerando que el coeficiente de absorción molar del NADPH a 340 nm es 6300. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 340 nm o Hg 334 nm 1 cm 25. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio. Calculos.5. anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto durante tres minutos.

e intervenciones quirurjicas elevan sus cifras ligeramente. Valores de referencia Temperatura de reaccion 25 °C 30 °C 37 °C Hombres U/l 10-80 15-125 24-195 Mujeres U/l 10-70 15-110 24-170 9. por aplicación de inyecciones y relajantes musculares. Correlacion diagnostica Se encuentra elevada en la distrofia muscular progresiva.8. . Traumatismos musculares. El valor cliníco está en una elevación manifiesta y su relación con el CK-MB y las otras enzimas que se alteran en el infarto. Interferencias La hemólisis 10.

Debido a que la concentración de CK-BB en circulación es mínima. reconociendose 3 isoenzimas. tejido nervioso. o plasma heparinizado o con EDTA. la cadena M deriva su nombre del músculo esquelético y la B de Brain ( cerebro ). . las concentraciones máximas son a las 12-24 horas. Un anticuerpo es incoroporado al reactivo el cual se une especificamente a la subunidad M. Muestra Suero. Musculo esqueletico Cerebro Miocardio CK-MM. CK-BB. representa la actividad de la izoenzima CK-MB. La CK-MB aumenta notablemente en el infarto. CK-MB. se elevan desde las 3 hasta las 6 horas post-infarto. la actividad remanentre multiplicado por el factor 2.CREATINCINASA FRACCION MB Generalidades. inhibiendo la actividad enzimática de esta subunidad B. la combinación de las cadenas origina la CK-MB. Tanto la enzima original CK como su isoenzima CK-MB. Estudios electroforeticos demostraron que tiene dos cadenas M y B . Metodo Prueba Humazym M-test Método por inmunoinhibición para CK-MB. recuperándose los valores normales entre las 24 y 72 horas. que toman el nombre según el sitio donde predomina. Cardíaco y lo hace progresivamente según su extensión y evolución clínica. La CK-MB predomina en el miocardio y sus niveles se elevan cuando existe proceso necrótico del músculo cardíaco. Fundamento La prueba se basa en una determinación enzimática de CK acompañada de un método de inmunoinhibición.

porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. Calcular la diferencia y multiplicar por el factor 8254. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK-MB Condiciones de la muestra La Concentracion de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L. 30°C ó 37 °C contra aire. 340 nm. Valores de referencia 25 °C CK total hombres mujeres CK-MB >80 U/l >70 U/l >10 U/l 30°C >130 U/l >110 U/l >16 U/l 37°C >195 U/l >170 U/l >25 U/l La actividad CK-MB esta en un rango entre 6 y 25 % de la actividad de la CK total. La CK-MB en suero es estable al menos 7 dias a 2-8 C. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Tecnica muestra Reactivo 40 ul 1000 ul Hg 334 nm.Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. HG 365 nm 1 cm 25°C. Si es superior. Mezcle e incube por 10 minutos a temperatura ambiente lea la abosorbancia y luego lea exactamente a los 5 minutos. . diluir el suero con NaCl 150 mmol/L.

. Esta aumenta notablemente en los infartos cardiácos.Correlacion diagnostica Presta una gran utilidad en los casos en que la CK se encuentra notablemente aumentada por causas ajenas al infarto y la CK-MB esta dentro de los límites normales.

3. muestra reactivo Mezclar y leer la absorbancia después de 1 minuto y leer luego a los 1. Tecnica 25°C ó 30°C 20 ul 1000 ul 37°C 10 ul 1000 ul Hg 334 nm. 4. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. 6. Metodo Prueba líquida para deshidrogenasa láctica. 5. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. 2 y 3 minutos hacer un promedio y multiplicar por el factor 16345 . HG 365 nm 1 cm 25°C. 340 nm. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparinizado. Fundamento Método modificado basado en las recomendaciones del SCE.LACTATO DESHIDROGENASA (LDH) 1. por pérdida de la actividad. Seperar el suero antes de los 30 minutos. 30°C ó 37 °C contra aire. Condiciones de la muestra No se recomienda congelar la muestra. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. 2.

Valores de referencia temperatura adultos hombres mujeres Niños 12meses 25°C 120-240 U/l 30°C 160-320 U/l 37°C 225-450U/l IFCC <243 <244 Hasta 500 U/l 9. . Interferencias El oxalato y el citrato interfieren en la reacción. 10.8. permaneciendo elevada hasta por 8 ó 14 días. Correlacion diagnostica En el infarto al miocardio sus niveles se aumentan entre las 24 ó 48 horas y tiene su máxima concentración a los 2 ó 4 días.

y anticuerpos anti-ratón IgG (cabra) en la línea de control. Tecnica Lleve el test a temperatura ambiente Dispense 2 gotas de la muestra enla ventana S. Condiciones de la muestra Las muestras que contienen partículas de turbidez pueden dar resultados inconsistentes. Fundamento La prueba emplea un conjugado de anticuerpo monoclonal anti cTnl y colorante en fase móvil. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. Muestra Suero o plasma 4. 2. 3. Como la muestra fluye por la almohadilla absorbente. la troponina humana I se une al conjugado anti-cTnl-colorante para formar un inmunocomplejo. 5. Metodo Prueba inmunocromatográfica en un paso para la detección de la troponina I cardíaca humana en el suero o plasma. el cual se liga a los anticuerpos anti-cTnl en la línea de prueba y produce una línea de prueba rojo-violeta(T). El exceso de conjugado reacciona en la línea de control formando una segunda línea rojo-violeta de control C. para demostrar el correcto funcionamiento. 6. anticueropos anti-cTnl (ratón). . fijados en la línea de prueba. Seperar el suero antes de los 30 minutos.TROPONINA 1. Muestras lipémicas o hemolíticas no deben ser procesadas. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas.

Las muestras positivas desarrollan una línea de prueba T en los primeros minutos. . 7. El resultado negativo no excluye la posibilidad de un infarto al miocardio.Evite la formación de búrbujas en la ventana. No lea después de 15 minutos para evitar errores. Interferencia La prueba no puede determinar niveles inferiores a 0.5 ng/ml de troponina I. Lea los resultados a los 15 minutos. Valores de referencia Negativo Positivo 8. Debe considerarse repetir la prueba después de 12 horas de iniciado el dolor.

3. 6. Condiciones de la muestra No debe utilizarse muestras hemolizadas para no alterar el resultado. 5.HEMOGLOBINA GLICOSILADA 1. Condiciones del paciente Ayuno de 8 horas. Dado que la concentración de glicohemoglobina en el eritrocito refleja el nivel promedio de glucosa en la sangre de las 4 a 6 semanas anteriores y es estable por la vida de los eritrocitos. . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 415 nm ó Hg 405 nm 1 cm 25°C frente a agua destilada. Fundamento La formación de glicohemoglobina ocurre irreversible y progresivamente en los eritrocitos a través de los 120 días de vida normal de estas células. 2. Metodo Método rápido de separación por resina de intercambio iónico. Muestra Sangre total con EDTA. 4. la medición es proporciona una prueba de gran valor para evaluar el control a largo plazo de los pacientes diabéticos.

%HbA1 4. Tecnica Etapa de hemólisis Reactivo lisante 500 ul Mezclar e incubar por 5 min Determinación de HbA1 Pipetear 100 ul de hemolisado Tapar a 1 cm aproximadamente Mezclar por 5 min Leer la absorbancia Determinación de Hb total Pipetear 20 ul de hemolisado Mezclar cuidadosamente Leer la absorbancia HbA1= F X HbA1 muestra Hb total 8.7. Correlacion diagnostica La dosificación de la hemoglobina glicosilada es importante en un diabético como la glucosa.0 % >8.5 – 7.5% Muestra 100 ul 15°C ó 25°C reactivo 5 ml de agua destilada . Valores de referencia pacientes Metabolismo normal Diabéticos descontrolados 9.

BIBLIOGRAFIA • • Manual de quimica clinica. Elaboró Carolina Hoyos Velásquez Cargo: Bacterióloga FECHA: XXXXXXXXXXXX Revisó XXXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Aprobó XXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXX . Colegio mayor de Antioquia Insertos de las técnicas.

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