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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

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MANUAL DE QUIMICA CLINICA

ELABORADO POR: CAROLINA HOYOS VELASQUEZ BACTERIOLOGA COOPERATIVA COOMAN

LABORATORIO CLINICO EMPRESA SOCIAL DEL ERSTADO HOSPITAL SAN RAFAEL DE YOLOMBO YOLOMBO 2008

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ACIDO URICO

1. Metodo Análisis enzimático colorimétrico por ácido urico con factor aclarante de lípidos (LCF) (PAP) 2. Fundamento Determinación del Acido Urico por la reacción con la uricasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona por la acción catalítica de la peroxidasa con ácido 3,5-dicloro-2-hydroxybenzenesulfónico (DCHBS) y 4-aminofenazona (PAP) para producir un complejo rojo-violeta de quinonemina como indicador. 3. Muestras Suero o plasma con heparina o EDTA, orina. Diluir la orina 1 + 10 con agua destilada. 4. Condiciones del paciente Para determinación en suero. Antes: • Explicar el procedimiento al paciente. • Llevar estrictamente los siguientes puntos. • Suspender la medicación de drogas como: alopurinol, salicilatos, fenilbutazona, calmantes o analgésicos, ácido ascórbico (vitamina C), buscapina, diuréticos de la trazida, tioles libres, purinas metiladas, ácido homogentístico y altas cantidades de glucosa. • Dos días antes del examen evitar ejercicios violentos.

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24 horas antes del examen, el paciente debe abstenerse de ingerir carnes rojas, mariscos y frijoles ya que contienen altos contenidos de purina. 48 horas antes de la venoclisis suspender el consumo de alcohol. Durante: Recoger 5 - 7 ml de sangre venosa en un tubo de tapón rojo. • Retomar nuevamente la ingesta de cualquier medicamento que pueda alterar los resultados. Después: • Aplicar presión en el sitio de punción. Para determinación en Orina: • Orina de 24 horas, teniendo en cuenta las indicaciones anteriores. Nota Las muestras lipémicas generalmente generan turbidez en la mezcla del reactivo con la muestra, lo que lleva a resultados elevados falsos. El LCF aclara completamente la turbidez causada por muestras lipémicas. Los valores en sangre total varían con la proporción de células en la sangre debido a que las células también contienen muchas más sustancias que interfieren en la reacción. 5. Condición de la muestra La sangre debe recogerse en tubos limpios, libres de metales pesados, ya que estos y los cianuros son inhibidores enzimáticos. La prueba no se ve influenciada por valores hasta 100mg/dl de hemoglobina o por valores de bilirrubina hasta 20mg/dl. La estabilidad de la muestra es: Temperatura ambiente  3 días Refrigerado  2 - 8°C por 5 días. Congelado  20°C, seis meses. En orina de 24 horas con preservativos y a temperatura ambiente → 2 días. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: 520nm, Hg 546 nm. Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20 - 25 °C ó 37°C Medir: frente a blanco de reactivos

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7. Tecnica Pipetear: Blanco Estándar Muestra Blanco ---------Muestra ------25λ Estándar ------25λ Solución Reactiva 1000λ 1000λ 1000λ Mezclar, incubar a 20-25°C durante 20-50 minutos, leer las extinciones frente a blanco de reactivos. Límite de dilución 15 mg/dl, con concentraciones superiores diluir la muestra 1 + 1 con solución de cloruro sódico al 0.9% y repetir la determinación, el resultado multiplicarlo por 2. 8. Valores de referencia Hombres: 3.7 - 7.0 mg/dl. Mujeres: 2.4 - 5.7 mg/dl. 9. Interferentes de la prueba El ácido ascórbico en concentraciones terapéuticas no interfiere en la prueba, pero en cantidades excesivas puede dar resultados elevados. Sustancias químicas con efecto antiuricosúrico. Acido etacrínico, furosemida, diuréticos de la benzotiacida. Sustancias que inhiben competitivamente la secreción tubular del urato. El p- aminohipurato, lactato, acetoacetato y B. hidroxibutírico. Por otra parte, ciertos fármacos como los salicilatos, fenilbutazona entre otros, inhiben la secreción de ácido úrico a dosis bajas, pero causan un efecto urosúrico intenso a dosis altas, debido a que estos fármacos pueden inhibir reabsorción tubular a niveles altos. El exceso del lactato también se asocia con la hiperuricemia en los casos de ejercicio fuerte y toxemia del embarazo.

Notas El etanol altera el metabolismo del ácido úrico aumentando la producción de urato y por la supresión de la excreción renal de ácido úrico. Esta última es el resultado

que inhibe competitivamente la secreción tubular renal del urato. Entre las etiologías más comunes de hiperuricemia se cuentan el fallo renal. • Evaluación permanente de resultados. Correlacion clinico patologica Numerosas enfermedades. • Almacenamiento adecuado de los cartuchos reactivos. • Asegurarse que la lectura del blanco esté dentro del rango permitido. el exceso de lactato y el uso de diuréticos.0 Página 5 de 83 del exceso de lactato producido por la oxidación del etanol a acetaldehído. Ataques clínicos recidivantes de artritis. la cetoácidosis. Precipitación de urato monosódico en forma de depósitos (tofos) por todo el cuerpo. aterosclerosis. . alteraciones fisiológicas. En los pacientes hipertensos la reducción del flujo sanguíneo renal y el aumento de la resistencia vascular pueden ser responsables de la disminución de la fracción de filtración del urato. obesidad. pues los valores altos son diagnóstico de “gota”. Las reservas de ácido úrico pueden superar los 30 g. diabetes mellitus. La hiperuricemia tiene también una relación positiva con la hiperlipidemia. hipertensión. aunque presenta predilecciones por articulaciones. Es de mucha importancia la determinación de ácido úrico. El aumento del ácido úrico es mucho más frecuente y clínicamente más significativo que su disminución. vísceras y levaduras producen una hiperuricemia leve. • Adecuada extracción y manipulación de muestras límites aceptables en los controles. excepto por el SNC. La ingestión de alimentos ricos en purinas. por ejemplo carnes. cambios bioquímicos e incluso factores sociales y de comportamiento se asocian a modificaciones de la concentración de ácido úrico en el plasma. 10. tejido subcutáneo y bolsas sinoviales.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Control de calidad • Cada vez que se determine ácido úrico correr con las muestras un estándar acuoso y dos suero control liofilizado. Nefropatía y a menudo nefrolitiasis. La gota es un trastorno del metabolismo de purinas o de la excreción renal de ácido úrico caracterizado por: Hiperuricemia.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

Patron de albúmina y el RGT son estables hasta la fecha de vencimiento cuando se almacenan de 2 a 25 grados centigrados. Muestras Suero ó plasma con EDTA ó heparina. El uso del torniquete no ha de execeder los 30 segundos. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la concentracion de albumina en la muestra.fosfato La presencia de amonio en cualquiera de los reactivos. Metodo Prueba fotometrica colorimetrica para Albumina Metodo BCG 2. Fundamento.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno de por lo menos 8 horas y durante este periódo no hacer esfuerzoz corporales intensos. ALBUMINA 1. Estable 1 mes a 2-8 grados y 1 semana entre 15 y 25 grados 4. El verde de bromocresol forma con la albumina en buffer de citrata un complejo coloreado. 5. Una hiperactividad de fosforribosil .0 Página 6 de 83 Se han identificado dos defectos enzimáticos ligados al cromosoma sexual como etiología de la gota primaria: Una deficiencia de (H 6 PRT) hipoxantin guanin . despues de abierto debe evitarse la contaminación.fosforrobosil transferasa. anticoagulantes o agua destilada aumentan los valores. ya que esto puede aumentar la concentración de proteínas.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 3. . su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero. Condiciones de la muestra No usar plasma heparinizado porque se puede alterar el valor.

Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Patrón albúmina Muestra Reactivo blanco ---------1.0 ml patrón 10 ul ---1. 10. Hay 3 factores que pueden disminuir su concentración: .0 Página 7 de 83 6.8 – 5.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 ml Mezclar bien y dejar los tubos durante 5 minutos a temperatura ambiente. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Hg 546 nm. 9.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Correlacion clinicopatologica. Leer la absorbancia del patrón y de la muestra frente al blanco de reactivo. ABS muestra ____________ X 4 g/dl albúmina ABS patrón 8. Interferencias La prueba no es influenciada por valores de Bilirrubina hasta 20mg/d. La reacción de la albúmina con el verde de bromocresol es inmediata. Otras proteinas reaccionan lentamente. El color es estable durante al menos 30 minutos.1 g/dl en hombres y mujeres. 578 nm 1 cm 20 a 25 frente a blanco de reactivo por serie. por lo que es conveniente no demorar la lectura.0 ml muestra ---10 ul 1. 7. Valores normales 3. Hemoglobina (1 g/L).

Condiciones de la muestra La orina debe ser lo más fresca posible.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. albúminuria persistente. son aglutinadas por uALB presente en la muestra del paciente. Metodo Prueba de turbidimetría para la cuantificación de microalbúmina en orina humana. Anemia persistente Neoplasia nefrosis lipoidea. (hemorragias.0 con NaOH/HCl 1 mol/L. 3. 4. 2) Por síntesis defectuosa como ocurre en la mayor parte de las hepatopatías. Fundamento Las partículas de látex con anticuerpos anti-albúmina humana. Muestra Orina fresca. y se debe ajustar su pH a 7.0 Página 8 de 83 1) Pérdidas cuantiosas o frecuentes. Metodo de determinacion Longitud de onda: 540 nm (530-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 37°C Medición: frente a agua destilada . Es estable por 7 días cuando se le añade azida sódica para prevenir posibles contaminaciones. MICROALBUMINURIA 1. catabolismo excesivo). y por comparación conocida se puede determinar el contenido de uALB en la muestra ensayada. 5. La manifestacion clínica mas llamativa es el edema. El proceso de aglutinación provoca un cambio de absorbancia proporcional a la concentración de uALB de la muestra. 3) Por carencia de materia prima como en la hipoalimentacion. Otras: Trastornos pulmonares. paracentesis. 2. Edemas carenciales.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. siendo superior al valor normal. concentración que. creatinina 3 g/L. esta aun por debajo de la concentración considerada como una proteinuria convencional. La urea > de 1g/L y bilirrubina > 10mg/dl interfieren. hemoglobina 10g/L. La microalbuminuria es un marcador del riesgo de la nefropatía diabética.0 Página 9 de 83 6. Valores de referencia Hasta 15 mg/L 8. . así como de alteraciones cardiovasculares en pacientes que sufren diabetes mellitus insulinodependientes o bien insulina no-dependiente. 7. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 7 ul Mezclar y leer la absorbancia frente a agua destilada y leer a los dor minutos después y se multiplica el valor por la concentración del calibrador. Correlacion diagnostica Se define la microalbúmina como la tasa de excresión de albúmina en orina entre 20 y 200 ug/min. Interferencias No interfieren valores de Glucosa 2 g/L.

0 Página 10 de 83 .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

El riñón no excreta bilirrubina no conjugada puesto que es insoluble en agua y en general se encuentra unida a la albúmina. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . conjugación catalizada por la enzima Bilirrubin . incluyendo sales biliares. que acaban conduciéndola a los conductos hepáticos. La orina normalmente contiene una pequeña cantidad de urobilinógeno. pero no de bilirrubina. La bilirrubina conjugada se excreta después por las células hepáticas hacia los canalicemos intrahepáticos.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El nivel de la bilirrubina serica total. hasta las células hepáticas en donde es conjugada con el ácido glucoronico. fosfolípidos. Hem hem oxigenasa Biliverdina Biliverdina reductasa Bilirrubina. por tanto no atraviesa la membrana glomerular. Esta forma de bilirrubina se denomina no conjugada (indirecta) que es transportada en el plasma en forma libre unida a la albúmina. Un 5% de los citocromos citoplasmáticos y mitocondriales hepáticos. bicarbonato. El heme es catabolizado después para formar biliverdina que se transforma en bilirrubina. La bilirrubina total del suero incluye la bilirrubina libre o no conjugada (reacción indirecta) y una pequeña cantidad de bilirrubina conjugada o de reacción directa. El examen de la orina para los pigmentos biliares (bilirrubina) y urobilinógeno se emplea en la investigación de la ictericia. hígado y medula ósea). y el otro porcentaje de los eritrocitos defectuosos destruidos en la medula ósea antes de ser liberados. El metabolismo de la bilirrubina proviene en un 80% de la descomposición de los hematíes envejecidos en el sistema retículo endotelial (bazo. agua y bilirrubina.0 Página 11 de 83 BILIRRUBINA TOTAL Y DIRECTA. es útil para evaluar la extensión y el progreso de la ictericia. esta solo aparece cuando la concentración en plasma se encuentra aumentada y siempre es de bilirrubina conjugada.glucoronil .transferasa. colesterol. el conducto biliar común y el intestino. Generalidades La bilis se forma en el hígado y presenta muchos componentes. La hemoglobina es liberada desde los hematíes y descompuesta en moléculas de Heme y globina.

Condiciones del paciente Reposo de 15 minutos antes de la toma de muestra. Muestra Suero o Plasma con heparina. Evitar muestras hemolizadas. La absorbancia de este color a 546 nm es directamente proporcional a la concentración de bilirrubina en la muestra. de que parte de la bilirrubina reacciona directamente con el reactivo de Erlich. 3. Mencionar en el volante del laboratorio cualquier fármaco que pudiera afectar los resultados de la prueba. . ya que en caso contrario los resultados de la prueba podrían ser inexactos. Fundamento La Bilirrubina reacciona con al ácido sulfanílico diazotado (DSA) formando un color rojo. 2. Bilirrubina total = bilirrubina directa + bilirrubina indirecta. llevadas a cabo por Van Den Berg en 1913. 5. Ayuno de ocho horas. 4. Los glucoronidos de la bilirrubina solubles en agua reaccionan directamente con DSA mientras la bilirrubina indirecta conjugada con albumina reacciona sólo en la presencia de un acelerador. Condiciones de la muestra No agitar el tubo. mientras que la otra hay que adicionarle alcohol.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. alajada de la luz. 1. y deben estar protegidas de la luz. Metodo Método modificado de Jendrassik/Gróf.0 Página 12 de 83 La designación de Bilirrubina como directa e indirecta deriva de observaciones. Debe procesarse la muestra el mismo día. El uso de torniquete no debe prolongarse más de 30 segundos. La muestra es estable por 3 días a una temperatura de 2 a 8 grados.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Proteger la muestra de sangre de la luz brillante. El ayuno prolongado produce aumento de bilirrubina ya que parte de esta se almacena en el tejido adiposo y al suceder la lipolisis se libera y sale a la circulación.

Muestra 1 ml 1 gota Reactivo DBR Reactivo DNR Mezclar cuidadosamente e Incubar por 2 minutos.. Leer la absorbancia frente al blanco. Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente de 10 a 30 min.. .. Bilirrubina directa Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Muestra 100 ul 100 ul Mezclar e incubar a temperatura ambiente exactamente por 5 minutos..ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Reactivo TBR Reactivo TNR Mezclar cuidadosamente e incubar por 5 minutos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ ..0 Página 13 de 83 6.. Muestra 1 ml 1 gota 546 nm 1 cm 20 a 25 grados C frente a blanco de muestra. Tecnica Bilirrubina total Pipetear en tubos oscuros o protegidos de la luz: Blanco 1 ml . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Leer la absorbancia de la muestra frente al blanco.

Valores de referencia Bilirrubina total: 0. causada por niveles sanguíneos de bilirrubina anormalmente altos. La ictericia es una coloración amarillenta de los tejidos corporales (piel. Bilirrubina indirecta = B. Entre los fármacos que pueden causar niveles aumentados de bilirrubina total se incluyen: Esteroides.5 umol/l. morfina. obstructivos y prehepáticos.0. La hemólisis de la sangre y la lipemia pueden producir resultados erróneos.1 . Interferentes La exposición prolongada (más de 1 hora) a la luz solar directa o artificial puede causar disminución de la bilirrubina en un 50%.8 mg/dl o 3. 11.5. penicilinas y salicilatos (dosis elevadas). Multiplicar el resultado por 5. Bilirrubina indirecta: 0. total .3 mg/dl o 1.1 .0.1 . Para obtener la concentración de la Bilirrubian indirecta se resta o establece la diferencia de la concentración de la Bilirrubina total y Bilirrubina directa. anabolizantes.1 . antibióticos (Eritromicina). cafeína. antipalúdicos.20. 10.0 umol/l. 9. El almacenamiento no es conveniente.0 Página 14 de 83 8. el color amarillo se aprecia cuando la bilirrubina serica total . si la concentración es mayor de 25 mg/dl. ácido ascórbico. Bilirrubina total en el recién nacido: 1 a 12 mg/dl ó 17. etc.17. membranas mucosas y escleróticas).1 umol/l.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. se altera rápidamente con la luz. salicilatos y vitamina A.2 .4 . diluir la muestra 1 + 4 con solución fisiológica y repetir la prueba. si se necesita debe refrigerarse por pocos días (3 días a 2-8 °C) protegida de la luz. Entre los fármacos que reducen los niveles de bilirrubina total se incluyen barbitúricos.1. directa. por lo tanto.7 . anticonceptivos orales. Bilirrubina directa: 0. diuréticos.0 mg/dl o 5.B.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Linealidad La prueba es lineal hasta 25 mg/dl. Correlacion diagnostica La determinación de bilirrubina total es útil para evaluar la extensión y progreso de la ictericia en problemas hepatocelulares.0 umol/l. Estabilidad No es muy estable. debe procesarce la muestra lo más rápido posible.12.

enfermedad drepanocitica. Cirrosis.Najjan I y II. hormonas esteroideas. talasemia intoxicación por plomo. policitemia.  Síndrome de Gilbert  Recién Nacidos. Síndrome de Cliger . etc. atresia de conductos. alcohol y tóxica.  Destrucción prematura de eritrocitos defectuosos. defecto que puede ocurrir en cualquier fase del metabolismo de la bilirrubina desde su formación hasta su excreción intestinal. Hepatitis viral. Ictericia pre – hepatica Hay aumento de la bilirrubina indirecta. Causas:  Obstrucción intrahepática: debido a obstrucción por fármacos. Ictericia post .5 mg/dl.  Hiperbilirrubinemia por derivación. Causas: Metabolismo aumentado del Heme: esferocitosis hereditaria. Eritropoyesis ineficaz acelerada: Anemia megaloblástica. hepatitis aguda. . En general hay bilirrubinuria. cirrosis biliar primaria. No hay bilirrubinuria. La ictericia se debe a un defecto en el metabolismo o la excreción normales de bilirrubina.  Cirrosis por alcohol. Insuficiencia cardiaca congestiva. Causas: Shock por hipoxia. Ictericia hepatocelular Hay aumento mayor de la bilirrubina directa y puede haber aumentos menores de B.hepatica o colestasica Hay aumento de bilirrubina directa y se presenta Bilirrubinuria.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 15 de 83 supera los 2. virica o alcohólica.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. tumores metastásicos etc. indirecta o estar normal y la bilirrubina total aumentada.

vesícula biliar. Nota La bilirrubina directa diferencia la ictericia Pre-hepática de la hepatocelular y obstructiva y la bilirrubina indirecta hace la diferenciación entre la hepatocelular obstructiva y las Pre-hepáticas. cálculos biliares.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . páncreas o ampolla de Vater.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 16 de 83  Colestasis extrahepática o quirúrgica: debido a carcinoma en conducto. . por edema en la cabeza del páncreas.

LDL colesterol: se determina con la formula de Friedewald . esteres de colesterol. fosfolípidos y ácidos grasos libres. IDL y VLDL. porque valores de colesterol aumentados no producen ninguna turbidez.0 Página 17 de 83 PERFIL LIPIDICO MINIMO Generalidades de lipidos Los lípidos constituyen la principal reserva energética de los seres vivos y también forman parte de la membrana celular y regulan la actividad de la célula y tejidos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . En el estudio del perfil lipídico mínimo se deben tener en cuenta los siguientes parámetros: Aspecto del suero: se realiza la prueba en frío en caso de obtener sueros lechosos. se encuentran en el plasma como lipoproteínas.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. significa presencia de triglicéridos exógenos (quilomicrones). se debe tener un estudio fraccionado de las lipoproteínas que es lo que se conoce como perfil lipídico. triglicéridos. Perfil lipidico minimo El dato del colesterol total y los triglicéridos da una información global de los lípidos que circulan en el organismo. El aspecto del suero no indica que el paciente este normal. HDL. El colesterol total del cuerpo: comprende el colesterol libre y esterificado. Triglicéridos HDL colesterol VLDL colesterol: se evalúa mediante la formula trigliceridos/5. 70% esterificado. Los lípidos totales están compuestos por: colesterol libre. se coloca el suero durante 12 horas en refrigeración (4ºC) esto con el objeto de ayudar a clasificar las trigliceridemias así:  Capa cremosa en la superficie y nadante transparente. pero sí se requiere tener un concepto claro de cómo están incidiendo los lípidos en el aparato circulatorio. cuando estos son < 400 mg/ml.  Capa cremosa en la superficie y nadante turbio significa triglicéridos exógenos y endógenos (quilomicrones y VLDL). 30% libre. Aspecto uniformemente lechoso significa presencia de triglicéridos endógenos (VLDL). Todos estos lípidos con excepción de los ácidos grasos que están ligados a la albúmina. Transportado principalmente por LDL.

Indice arterial se determina mediante la formula CT/HDLC ö LDLC/ HDLc.0 Página 18 de 83 LDL C = CT.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Cifras superiores establecen un alto riesgo de enfermedad coronaria. Interpretacion del perfil lipidico mínimo Lípido mg/dl Colesterol Total LDL Colesterol HDL hombres HDL mujeres Trigliceridos Indice arterial: Deseable <200 <130 >35 >45 <200 Hombres <=5 Mujeres <=4.5 Riesgo potencial 200-239 130-159 25-35 40-45 >200 Riesgo alto >=240 >=160 <25 <40 >200 Estas cifras nos indican que la arteriosclerosis se esta verificando en forma normal.(VLDL C + HDL C ).ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. .

. Medición: frente a blanco de reactivo. Fundamento El colesterol se determina después de la hidrólisis enzimática y la oxidación. Condiciones del paciente Esta prueba no necesita de ayuno pero como generalmente se realiza con el resto del perfil lipídico. Extraer 5-10 ml de sangre en un tubo seco.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. El indicador es la quinonemina formada por el peróxido de hidrógeno y 4aminoantipirina en presencia de fenol y peroxidasa. 3. Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para colesterol con factor aclarante de lípidos (LCF) CHOD-PAP 2. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. 6.0 Página 19 de 83 COLESTEROL TOTAL 1. Anotar cualquier fármaco que pueda modificar los valores de Colesterol. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba. para evitar la redistribución del Colesterol entre las diversas lipoproteínas. se deben seguir los requerimientos que para este se indiquen. 5. Separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Muestra Suero o plasma con heparina o EDTA. 4.

Corticosteroides. . Valores de referencia Varían con la edad y el laboratorio. Esteroides anabólicos. Allopurinol. Nitratos. Isoniacida. Diuréticos tiacídicos. Anticonceptivos orales. Notas El test no se afecta con valores de hemoglobina inferiores a 200 mg/dl. 8.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Adrenalina. Evitar el contacto con los reactivos ya que son muy corrosivos.200 mg/dl < 220 mg/dl Sospechoso mayor de 220 Elevado mayor de 260 9. RECIEN NACIDOS LACTANTES NIÑOS ADULTOS/ ANCIANOS 53 – 135 mg/dl 70 – 175 mg/dl 120. Colestipol.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 20 de 83 7. Colchicina. Neomicina (oral). Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. Vitamina D. Niaciana. incubar 10 minutos a 20 ó 25 grados. bloqueadores beta-adrenérgicos. Eritromicina. o 5 minutos a 37 grados C. Hay otros que disminuyen los valores como: Andrógenos. ni de Bilirrubina menor a 5 mg/dl. sulfamidas. Captopril. Tecnica Pipetear Blanco ---------1000 µl Estándar ---10 µl ---1000 µl Muestra ------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Rvo Color Mezclar. Hay fármacos que elevan los niveles de Colesterol como: Hormona adrenocorticotrópica. Quelantes de las sales biliares. Interferencias La Ovariectomía aumenta los niveles de Colesterol. Lovastatina (Mevacor). Liotironina (Cytomel).

Mala absorción.7 mmol/l  Niveles elevados: 260 mg/dl ó 6. Correlacion diagnostica  Niveles sospechosos: 220 mg/dl ó 5. Hipertensión. embarazo. Dieta rica en Colesterol. 10. multiplicar el resultado por 3. Linealidad El test es lineal hasta una concentración de Colesterol de 750 mg/dl (19.7 mmol/l  Niveles superiores: 300 mg/dl Necesitan tratamiento. Medicación hipocolesterolemiante. Niveles disminuidos en: Sepsis. Anemia hemolítica. 1 + 2 y repetir la determinación. Colestasis hepática.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Hipotiroidismo.3 mmol/l). nefrósis. Estrés. Hipertiroidismo. Para concentraciones mayores diluir la muestra con solución salina al (0. Control de calidad Hacer control periódico a equipos y reactivos para evitar resultados falsos positivos ó falsos negativos. Xantomatosis. Hiperlipemias. Desnutrición. Para la técnica se debe montar un control Normal y uno Patológico. generando resultados falsamente elevados 9. Anemia perniciosa.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Infarto de miocardio. Diabetes Mellitus descontrolada. Síndrome nefrótico. . Resultados anormales Niveles aumentados en: Hipercolesterolemia.9%). Enfermedad hepática. aterosclerosis. Cirrosis biliar.0 Página 21 de 83 Muestras lipémicas usualmente generan turbidez en la muestra que se va a analizar.

4. Condiciones del paciente Ayuno de 12-14 horas previas a la extracción de sangre. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25 ó 37 grados C. Condiciones de la muestra La muestra debe separarse del coagulo dentro de las dos horas de la extracción y conservarse a 4ºC a menos que se analice de inmediato. Abstenerse de no ingerir alcohol por 72 horas antes de la toma de la muestra (no es necesario). Despúes de centrifugar.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Medición: frente a blanco de reactivo .0 Página 22 de 83 COLESTEROL HDL 1. HDL es estable en la muestra de suero durante 7 días a 4ºC o durante 4 meses a –20ºC. Metodo de determinacion Longitud de onda 500 nm. 5. Muestra Suero o plasma con anticoagulante EDTA o heparina. 2. Metodo Colesterol precipitnte. en la mayoría de las personas la lipemia posprandial interfiere con muchos de los métodos analíticos. Fundamento Los quilomicrones. VLDL y LDL se precipitan por adición de ácido fosfotúngstico y cloruro de magnesio. 6. el sobrenadante contiene las HDL que se van a determinar. 3. Debe señalarse que si bien la falta de ayuno no afecta los niveles de HDLc sanguíneo.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.

separar el sobrenadante claro del precipitado dentro de 1 hora y determinar la concentración del colesterol HDL con el reactivo de Colesterol total. Notas El sobrenadante debe ser claro. Tecnica A.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. en ese caso. Despúes de centrifugar. B. Precipitación pipetear muestra precipitante Macro 500 ul 1000 ul Micro 200 ul 500 ul Mezclar bien. El resultado se multiplica por dos. . El ácido ascórbico disminuye los valores. se hace una dilución 1: 1 con solución cloruro de sodio al 0. En las muestras con un contenido de triglicéridos altos se pueden presentar precipitaciones incompletas de las lipoproteínas o flotación por parte de las mismas sobre él liquido. Centrifugar por 2 minutos a 10000 rpm ó 10 minutos a 4000 rpm. incubar todos los tubos a temperatura ambiente por 10 minutos ó a 37ºC por 5 minutos. Leer la absorbancia de la muestra y el estándar frente al blanco de reactivo antes de una hora.9% y se repite la precipitación de la muesta diluida.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .0 Página 23 de 83 7. Determinación Agua destilada Estándar Sobrenadante Reactivo de color Blanco 100 ul ------1ml Estándar 100 ul ---1ml Problema ---100 ul 1ml Mezclar. observando un sobrenadante turbio. Limite de dilución 310 mg/dl. incubar por 10 minutos a temperatura ambiente.

al evitar la arteriosclerosis excesiva porque remueve y elimina a través de la bilis cantidades considerables de LDL en forma de ácidos biliares y esteroides neutros. Niveles disminuidos de HDL correlacionan con riesgo aumentado de enfermedad cardiocirculatoria. Se observa en: mayor producción de Apo I y Apo II y actividad física fuerte. Valores de referencia Mujeres > 45mg/dl Hombres > 35mg/dl 9. Niveles aumentados de HDL correlacionan con disminución en el desarrollo de enfermedad cardiocirculatoria. La LDL juega un papel muy importante en el funcionamiento arterial y por esto debemos tratar que el organismo tenga estrictamente la cantidad necesaria que requieren sus funciones. siendo esta la mejor forma de luchar contra este mecanismo fisiológico. obesidad. para evitar la arteriosclerosis prematura. complementada con un nivel de HDL lo más elevado posible. sedentarismo. hipertriglicéridemia. deficiencia de LPL 1 con afectación del metabolismo de quilomicrones y VLDL.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Resultados Anormales. . Correlacion diagnostica La HDL contrarresta la acción nociva que puede tener la LDL sobre nuestro organismo. deficiencia familiar de Apo I y Apo II.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 24 de 83 8.

El indicador es Quinineimina formada a partir de peróxido de hidrógeno. Condiciones del paciente El ayuno debe ser entre 12 y 14 horas. metabólitos y una serie de fármacos de uso común NO interfieren con el método. Es importante describir el aspecto del suero. No se debe ingerir alcohol 24 horas antes de la prueba.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . No consumir grandes cantidades de Carbohidratos y grasas 48 horas antes de la prueba. Notas La lipemia. para evitar la redistribución de los Triglicéridos entre las diferentes lipoproteínas. la hemólisis hasta 10 mg/dl ó 170 mmol/l. Metodo Prueba enzimática colorimétrica para triglicéridos con factor aclarante de lípidos. 3. se le debe hacer la prueba en frío. que consiste en . Condiciones de la muestra La muestra ideal es suero ó plasma heparinizado ó con EDTA. Muestra Suero o plasma heparinizado o palsma con EDTA 4.0 Página 25 de 83 TRIGLICERIDOS 1. Los volúmenes de la reacción sugeridos se pueden modificar sin ningún cambio en los cálculos. Fundamento Los triglicéridos son determinados después de hidrólisis enzimática con lipasa. la temperatura de 25ºC permite la liberación de glicerol de los fosfolipídos y produce un incremento aparente del valor de los Triglicéridos. Los Triglicéridos permanecen estables 3 días a 4ºC. 5.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 4aminoantipirina y 4-chlorofenol bajo la influencia catalítica de peroxidasa. Antes de procesar la muestra se debe observar y anotar el aspecto del suero ya que si este está lechoso. GPO-PAP 2. No hacer ejercicio fuerte antes de la prueba. Extraer 5-10 ml de sangre en tubo seco y separar el suero de los glóbulos rojos en la media hora siguiente a la extracción.

leer con Blanco de reactivo.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. repetir la determinación y multiplicar el resultado por 6. Los Triglicéridos no permanecen en el suero a 25ºC. Metodo de determinacion Longitud de onda: 500 nm. 546 nm Paso de luz: 1 cm Temperatura: 20. e incubar por 10 minutos a 25ºC o por 5 minutos a 37 grados C. a 4ºC son estables por 3 días. 8. Valores de referencia EDAD 0 – 5 años 6 – 11 años 2 – 15 años 16 – 19 años Adultos / ancianos HOMBRES 30 – 86 mg/dl 31 – 108 mg/dl 36 – 138 mg/dl 40 – 163 mg/dl 40 – 160 mg/dl MUJERES 32 – 99 mg/dl 35 – 114 mg/dl 41 – 138 mg/dl 40 – 128 mg/dl 25 – 135 mg/dl . debido a que fácilmente se libera el glicerol. Tecnica Pipetear: Blanco ------------1000 µl Estándar ---10 µl ------1000 µl Muestra ------10 µl ---1000 µl Control ---------10 µl 1000 µl Blanco Estándar Muestra Control Reactivo Mezclar.9%.0 Página 26 de 83 colocarlo en la nevera por 12 horas.3 mmol/l) de Triglicéridos. 25 ó 37 grados C Medición: frente a blanco de reactivo 7. Para concentración superior diluir la muestra 1+5. con solución salina al 0. luego de las cuales se observa las características que presenta el nadante y el sobrenadante. Linealidad El método es lineal hasta 1000 mg/dl (11. Estabilidad de la reacción 1 hora.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 6.

Estrógenos y anticonceptivos orales.0 Página 27 de 83 9. por lo tanto cuando esto sucede las LDL no se deben reportar. Nota: Los trigliceridos elevados afectan el cálculo de las LDL. Hipertiroidismo. Cirrosis alcohólica. Asparraginasa. Síndrome nefrótico. Clofibrato y colestipol. Hipotiroidismo. Riesgo de enfermedad coronaria y vascular. Embarazo.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Interferencias Elevando los valores Colestiramina. 10. Hipertensión. Desnutrición. Dieta rica en carbohidratos. Diabetes mal controlada.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. . Niveles disminuidos en: Síndrome de mala absorción. Disminuyendo los valores Acido ascórbico. Correlacion diagnostica Niveles aumentados en: Hiperlipemias. Infarto de miocardio. Enfermedad con almacenamiento de glucógeno.

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CREATININA

Generalidades Sus aumentos suelen ser proporcionales con respecto a los de la urea, aun cuando en general son más tardíos. Tiene particular interés diagnostico y pronóstico en los siguientes casos:  Nefropatías: Cuando en una insuficiencia renal con uremia, se observan cifras superiores a 5mg/100ml, él pronostico es fatal a corto plazo. Esto solo sucede en las fases avanzadas, ya que en las precoces, dada la facilidad de eliminación de la creatinina solo aumentan el ácido úrico y la úrea. En las nefritis agudas generalmente no hay elevación; en los casos en que existe (40%) es un cambio reversible y de escaso valor pronostico. En las nefrósis por tóxicos (Hg y Ag.) es donde se observan mayores elevaciones; en la insuficiencia cardiaca avanzada puede originarse una retención discreta o moderada de creatinina aunque no exista verdadera nefropatía.  En obstrucciones urinarias (Afecciones de próstata, vejiga, uréter, etc.) y en la anuria refleja (cálculos uretrales), se producen así mismo elevaciones marcadas de creatinina incluso 30 mg o más, igualmente reversibles con la reparación de la obstrucción.  En el gigantismo y acromegalia se observan discretas elevaciones. Cada 24 horas se transforma un 2% de creatina en creatinina. La cantidad de creatinina por unidad de masa muscular es constante y por lo tanto la degradación espontanea es constante. Como resultado de este fenómeno la concentración plasmatica de creatinina es estable y varia en menos de 10% diario en individuos normales. 1. Metodo Reacción de Jaffe Prueba fotométrica colorimértica para mediciones de punto final desproteinización.

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2. Fundamento La creatinina en solución alcalina forma un complejo coloreado rojo-naranja con ácido picrico. La absorbancia de este complejo es directamente proporcional a la creatinina en la muestra. 3. Muestra Suero o plasma heparinizado u orina 4. Condiciones del paciente La muestra de sangre no requiere ayuno previo ya que la excreción de creatinina depende muy levemente de la alimentación y de la diuresis. Por lo menos 8 horas antes del examen no realizar esfuerzos corporales intensos. 5. Condiciones de la muestra La muestra de suero para creatinina es inestable a temperatura ambiente, refrigerada de 2 – 4 ºC por 24 horas. Congelada a –20 ºC es estable por 6 meses La creatinina puede ser determinada en cualquier líquido biológico, pero las muestras mas usadas son suero, plasma y orina. 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 546 nm (500-550 nm) 1 cm 25° C frente a blanco de reactivo

7. Tecnica Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ

Solución Trabajo Estándar Suero

Mezclar y poner en marcha el cronómetro y leer la absorbancia a los 30 segundos y a los 90 segundos. A2-A1= Creatinina

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8. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Mujeres Hombres 0.5 – 1.0 mg/dl. 0.7 – 1.2 mg/dl.

Estos valores están influenciados por el sexo (siendo menor en la mujer), masa muscular del individuo. 9. Interferentes de la muestra y la reaccion • Interferentes positivos: Acido ascórbico, piruvato, acetona, ácido acetoacético, levulosa, glucosa, ácido úrico, proteínas, barbitúricos y antibióticos de la cefalosporina. Las temperaturas altas y los prolongados tiempos de reacción (> a 5 minutos), aumentan esta interferencia. El piruvato, acetona, ácido acético, aminoácidos y proteínas o cualquier compuesto con un grupo metilo o metileno activo, introduce errores debido a su acoplamiento con el picrato por un mecanismo análogo al de la creatinina; todos estos compuestos pueden producir sustancias coloreadas que aumentan la absorbancia en la reacción del complejo coloreado. La bilirrubina y otros productos de degradación de la Hb, causan una interferencia negativa probablemente por su oxidación en medio básico fuerte a compuestos incoloros, dando como resultado una disminución de la absorbancia, lo que se interpreta como una menor concentración de creatinina. Esta interferencia negativa se observa con frecuencia en el análisis cinético de la creatinina. 10. Correlacion diagonstica El nivel de creatinina en suero depende de 2 factores: La velocidad de producción. La velocidad de filtración. Dado que la fuente de creatinina serica es la creatina muscular y la fosfocreatina, una mayor cantidad de masa muscular produce un aumento de la creatinina serica. Los valores de creatinina exhiben una respuesta escasa o nula a las modificaciones dietéticas o a las alteraciones del equilibrio electrolitico.

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La concentración de creatinina en sangre, como la de la urea, se aumenta con el descenso de la función renal y el principal empleo de la determinación de creatinina serica esta en la evaluación de la función renal. En nefritis crónica cuando la concentración de BUN esta muy por encima de 50 mg/dl, el aumento de la creatinina es proporcional y las concentraciones de creatinina mayores a 5 mg/dl se consideran de importancia diagnostica grave. Niveles disminuidos se encuentran en la distrofia muscular. Notas La especificidad de la reacción depende del pH, temperatura y tiempo. Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse del fotómetro, sin que se alteren los resultados finales. El ácido pícrico es tóxico. Evite la inhalación, ingestión y contacto con la piel, lavar enseguida con polietilenglicol 400, con abundante agua.

ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. siempre y cuando los resultados se interpreten en forma comparativa y no absoluta.9%. generalmente 24 horas aunque es posible reducirlo a 4. Técnica para la orina: Diluir 1:100 con Solución Salina 0. 1. 8 ó 12 horas. Valores de referencia: Hombres: 98 – 156 ml/minuto Mujeres: 95 – 160 ml/minuto Limite de dilución: 500 mg/dl 2.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . para asegurar un volumen urinario de 1 ml por minuto cuando menos. Descartar la orina de esa hora y a partir de entonces recoger todo el volumen de orina. que la concentración de dicha sustancia aislada en sangre o en orina.  Debe seguir tomando agua.  El paciente debe abstenerse de ingerir carne. La relación entre la concentración de una sustancia en orina y sangre es el mejor índice de función renal.0 Página 32 de 83 DEPURACION DE CREATININA Generalidades Es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. El control cronológico de la recolección de las muestras es esencial para la realización correcta de la prueba. inclusive la muestra del tiempo fijado para la recolección.  Guardar refrigerada y en frasco bien tapado. La depuración de la creatinina endògena es un método útil para seguir el progreso de una enfermedad renal evolutiva. Muestra Técnica para el suero. Condiciones del paciente La muestra de sangre debe obtenerse durante el periodo de recolección de la orina.  Para la recolección de la orina el paciente debe fijar una hora cero. porque nos da información de cómo esta la filtración glomerular. . el mismo procedimiento de creatinina en suero.  Marcar en el frasco la hora de iniciación de la recolección. té y café durante las 24 horas anteriores a la recolección. La muestra de orina se recoge durante un periodo determinado.

Condiciones de la muestra Muestra de suero libre de hemólisis fuerte y de ictericia (ya que una ligera hemólisis no afecta la determinación). Calculo Creatinina en Orina* ________________ Creatinina en suero x Volumen (ml) _________ 1140 (Constante) . 10 ml de orina + 490 ml de agua destilada. ya que los gérmenes producen variación en el pH promoviéndose así la conversión de creatinina en creatina. 4. La muestra de orina debe refrigerarse o agregarse un inhibidor bacteriano. Tecnica Pipetear: Estándar 500λ 50λ ---Muestra 500λ ---50λ Solución Trabajo Estándar Orina diluida Dilución de la orina * Hacer una dilución de la orina de 1: 50. el resultado se multiplica por 50. además producen creatininasas que destruyen la creatinina.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 33 de 83  Interrumpir toda terapia diurética. la cual no puede medirse por la reacción de Jaffé.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La concentración de creatinina debe determinarse antes de las 24 horas de recogida la muestra. Metodo de determinacion Longitud de onda: 546 nm (500-550 nm) Paso de luz: 1 cm Temperatura: 25° C Medición: frente a blanco de reactivo 5. 3.

por lo que el verdadero valor de filtración glomerular esta por debajo de la depuración de la creatinina. Notas Los volúmenes de reacción podrán aumentarse o disminuirse proporcionalmente según las necesidades del fotómetro. 75 – 115 ml/min. Correlacion diagnostica En enfermedades renales avanzadas la excreción urinaria de creatinina excede a la velocidad de filtración glomerular a causa de la secreción tubular.4 mg/dl. sin que se alteren los resultados finales. ejercicio fuerte durante la prueba.0 Página 34 de 83 6. 21 – 26 mg/Kg peso/24 h Hombres 7. 8. la hidratación inadecuada del paciente.8 – 1. Interferencias Los mismos de la guía anterior.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.2 mg/dl. 16 – 22 mg/Kg peso/24 h 85 – 125 ml/min. que seria una fuente de error negativa. Valores de referencia Creatinina en suero o plasma Creatinina en orina Depuración de Creatinina: Mujeres Hombres Mujeres 0.9 – 1. 0. lo cual aumenta los niveles urinarios. . Entre las causas de error están: mal cronometrado o recogida inadecuada de la muestra de orina.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 1900 mg/24 h.

. multiplicando el resultado por 1. podemos concluir que esta sustancia es reabsorbida. ligeras La filtración glomerular normal es en un adulto de 125 ml/min. y crónica. la depuración es menor que la filtración. disminuciones se observan en pielonefritis crónica e hipertensión.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .A. en niños y personas de baja estatura por esto se hace necesario realizar la corrección del valor obtenido.0 Página 35 de 83 El filtrado glomerular disminuye notablemente en G.N. Si la depuración plasmatica de una sustancia es mayor que la filtración glomerular debe interpretarse como que esta sustancia es secretada por el túbulo y si por el contrario. La depuración de creatinina disminuye en personas de edad. En las personas obesas la depuración esta alterada por lo tanto se hace necesario la corrección.73/A para obtener el valor real de la depuración en estos pacientes.

en el tejido nervioso en muy poca cantidad). . músculo en mayor proporción y también leucocitos.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . La glucosa sanguínea proviene de dos fuentes: La más importante es la absorción intestinal de glucosa alimenticia que normalmente puede llevar los valores sanguíneos de glucosa hasta 138 -140 mg/dl.0 Página 36 de 83 GLICEMIA Generalidades Glucemia o glicemia: Este término se refiere a la presencia de la glucosa en sangre. Metodo con desproteinización. Metodo Prueba enzimática colorimétrica por glucosa. 2. La liberación de glucosa por el hepatocito mediante un mecanismo que se acelera al disminuir la glicemia sanguínea. Gluconeogenesis: Formación de glucosa a partir de otro sustrato diferente al glucógeno ejemplo: aminoácidos. Fundamento La glucosa de determina despúes de la oxidación enzimática en presencia de glucosa oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo la catálisis de la peroxidasa con fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo-violeta usando la quinonemina como indicador.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. GOD-PAP. Glucogenolisis: Movimiento de glucógeno almacenado para producir glucosa-6fosfato. Glucolisis: Llevar la glucosa-6-fosfato hasta piruvato para producir acétyl Co A (ciclo de krebs). Glucogenesis: Formación de glucógeno (hígado. 1.

25°C por 10 minutos ó 5 minutos a 37°C. incube a temperatura de 20 . No tomar café. La estabilidad de la muestra es de 8 horas. . No realizar ejercicio antes o durante la prueba. En el momento de la toma de la muestra el paciente debe estar sentado erguido. Condiciones de la muestra La separación del suero debe hacerse dentro de los 20 o 30 minutos de la extracción. Tecnica Pipetear: BLANCO PATRON MUESTRA RVO. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. a menos que el paciente consuma diariamente menos de 150grs. Ayuno de diez a doce horas.0 Página 37 de 83 3. suero o plasma 4. No presenta glucosuria positiva antes de dar la carga de glucosa.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. 6. COLOR Blanco ---------1000λ Patron ---10λ ---1000λ Muestra ------10λ 1000λ 500 nm 546 nm 1 cm 20.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 25 ó 37 °C frente a blanco de reactivo Mezclar. Muestra Sangre total. Leer la absorbancia de la muestra y el patrón contra el blanco de reactivo. ni haber fumado antes o durante la prueba.) 160-180 mg/dl. Condiciones del paciente No se requiere preparación dietética especial.M. Umbral renal (T. de hidratos de carbono. 5.

G.O. a partir de los cuales se empezara tomar los tiempos para la toma de las muestras asi: Gestantes 1-2 y 3 horas. Carga de glucosa Niños: 1.G. que pueden no entrañar los riesgos asociados a la DM. Para la P. de dextrosa en 300 ml. por ejemplo en aquellos paciente que presentar trastornos clínicos .75 gr de dextrosa por kilogra la prueba tamiz consiste en administrar la carga de dextrosa y tomar una muestra después de una hora post-ingesta. En los pacientes asintomáticos el diagnóstico de DM se establece cuando se cumplen los criterios diagnósticos de los valores de glicemia recomendado por diferentes asociaciones o grupos de estudio de diabetes asï: National diabetes data group Basal >= a 140 mg/dl en dos ocasiones consecutivas sea en adultos o en niños. cuando se sospecha una diabetes a pesar de la ausencia de hiperglicemia en ayunas o sistomática. Adulto < 115 < 140 Niño < 130 < 140 Diabetes mellitus Adulto >= 140 >= 200 Niño >= 140 >= 200 Intol.T.G.de agua.O.).T.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . A la glucosa Adulto 115 . 100 gr. descartando aquellos pacientes que presentan fluctuaciones en el límite superior de la concetracion plásmatica normal. La prueba de tolerancia oral a la glucosa (P.139 140 .199 Niño 130 – 139 140 – 199 9.tipo 2.O. Valores de referencia Criterios de diagnóstico para DM por PTOG Normal Ayunas P.M. no Gestantes 2 horas postcarga.0 Página 38 de 83 8. Nota El tiempo máximo para ingerir la carga de glucosa oral es de 5 minutos.T. Utilizar métodos de laboratorio previamente estandarizados y sueros control Diagnostico de diabetes mellitus El principal objetivo de diagnóstico es la indentificación de pacientes con riesgo de hiperglicemia sintomática de cetoacidosis diabetica (CAD) o coma hiperosmolarno no cetónico (CHNC) o de complicaciones clínicas tardías.) tiene como finalidad la de descartar o de diagnósticar una diabetes mellitus tipo 2 (D.

sudoración. etc. Los sintomas clásicos incluyen poliuria.G. Los pacientes con intolerencia a la glucosa pueden presentar mayor riesgo de hiperglicemia en ayunas o sintomatica. enfermedades cardiovasculares o vasculares Cerebrales agudas. Ayunas se define como la no ingesta calórica al menos por 8 horas. sintomas de diabetes. (Guillermo Farias quimica clínica. o puede también revertir a la normalidad.. La P. anticonceptivos orales que contengan estrógenos sintéticos). renales o del S.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Los criterios diagnósticos por P. *Criterios diagnosticos reportados por el comite de expertos en el diagnostico y clasificacion de diabetes mellitus. 2.T.T. por lo menos dos valores deben ser > = 200 mg/dl.N. En la P. pero en muchos casos la intolerencia a la glucosa no progresa. tanto en niños como en adultos.O.0 Página 39 de 83 que pudieran deberse a una DM no diagnósticada ejemplo: polineuropatía. Glicemia en ayunas mayor o igual a 126 mg/dl. Valores normales Después de un ayuno de 10 a 12 horas los valores de glicemia deben estar ubicados entre 70-110 mg/dl (según el método utilizado).O. glucocorticoides.. Niños: asintomaticos deben ser mas estricto en diagnóstico por P.O.G. ac. retinopatía y nefropatia. desmayos o palidéz durante la realización de la prueba..G.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. No se debe realizar la P.T. Nicotinico. Adultos: dos horas y en cualquier otro momento de la P. debe repetirse para corroborar el diagnóstico de DM.C. décima edición)..T.G.T.G. solo son válidos para individuos sanos que no presentan infecciones.(dado el mayor riesgo de un exceso de diagnóstico de DM).G. enfermedades endocrinas que deterioren la tolerancia a la glucosa o enfermedades hepáticas. polidipsia y pérdida de peso.O.O.O. tampoco pacientes tratados con fármacos que alteren la prueba de tolerancia oral a la glucosa (tiazidas.. acompañados de una glicemia a cualquier hora mayor o igual a 200 mg/dl.T. vómito. a los pacientes que presenten naúseas. Los valores de glicemia posprandial pueden ir hasta 160 mg/dl. .

Para ello se utiliza 75 gramos de glucosa anhidra disueltos en 300 cc de agua.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . o una glicemia al azar ≥ a 200 mg/dl. La prueba de tolerancia utilizaba valores a la hora.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 200 mg/dl. 2 horas poscarga.0 Página 40 de 83 3. síntomas con una glicemia al azar > de 200 mg/dl. El comité no recomienda la utilización de los niveles de hemoglobina glicada para el diagnostico de la diabetes. por el momento solo continua como prueba para el control y no para el diagnostico. las categorias. Se han establecido tres criterios para el diagnostico de diabetes. se han establecido en 110 mg/dl. si bien los niveles de hemoglobina glicada presentan una distribución similar a la glicemia. debe ser confirmado subsecuentemente por una glicemia en ayunas ≥ a 126 mg/dl. una glicemia 2 horas postcarga ≥ a 200 mg/dl. son: * Glucemia normal: Menor de 140 mg/dl. En la ausencia de hiperglicemia inequívoca con descompensación aguda. las pruebas utilizadas para ella no estan estandarizadas. * Hiperglicemia en ayunas: Entre 110 mg/dl y 126 mg/dl. De acuerdo a los nuevos criterios solo se tiene en cuenta los valores a las 2 horas. . Diagnostico de hipoglicemia Depende si el paciente presenta manifestaciones del sistema nervioso central (S.N. hora y media y a las dos horas. 2 horas poscarga. cada uno de ellos debe ser confirmado con una prueba posterior.C) inexplicadas o sintomas adrenergicos inexplicables. * Diagnostico provisional de diabetes (debe ser confirmado): ≥ a 126 mg/dl. * Disminución de la tolerancia a la glucosa: Entre 140 mg/dl y 200 mg/dl. Las categorias para la glicemia en ayunas quedan establecidas de esta foma: * Glicemia normal: Menor a 110 mg/dl. estos criterios deben ser confirmados por otra prueba realizada un día diferente. Dos horas poscarga durante una prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) mayor o igual a 200 mg/dl. Para la prueba de tolerancia a la glucosa. la razón para ello es la perdida de la primera fase de secreción de insulina a partir de esta cifra. Por ejemplo. por lo cual asignar un valor diagnostico es difícil. Los valores normales para la glicemia en ayunas.

propanolol etc. Anormales: Valores de glicemia entre 135 . se perfunde glucosa de inmediato.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . si se obtiene un valor anormalmente bajo.0 Página 41 de 83 En ambos casos para el diagnóstico se requiere valores plásmaticos anormalmente bajos. Otros fármacos como salicilatos. tras un aumento de glucosa. y en lactante y niños menor de 40mg/dl .. confirman el diagnóstico de hipoglicemia de ayuno o inducida por fármacos.N. (Se pueden encontrar valores menores de los expuestos en un ayuno de 72 horas). El paciente con deterioro de la conciencia o crisis convulsiva debe efectuarse la glucosa con tirilla y gota de sangre obtenida al colocar un aguja para iniciar la perfusión de líquido.) Criterios diagnosticos para diabetes gestacional Ayunas >= 105 mg/dl 1 hora >= 190 mg/dl 2 horas >= 165 mg/dl 3 horas >= 145 mg/dl Normal: Hasta 135 mg/dl.T. Por lo general una glucosa plásmatica anormalmente baja se define menor de 50mg/dl en el varón.O.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.G. sulfas que producen un 50% de las hipoglicemias. El diagnóstico debe completarse con valoraciones de insulina proinsulina y peptido C y también la busqueda de drogas que puedan estar ocasionando la hipoglicemia (insulina alcohol. de 3 horas con una carga de dextrosa de 100 gramos.M. menor de 45mg/dl en la mujer. La mejoría inmediata de los sintomas del S.180 mg/dl sugieren la realización de una P. los cuales se corrigen al aumentar la glucosa sanguínea.G . Valores de glicemia > 180 mg/dl en más de una oportunidad son diagnósticos de D.C.

el paciente debe llevar una dieta pobre en proteínas y 12 horas de ayuno total. 2. orina diluida 1:1000 con agua destilada.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. Condiciones de la muestra Por acción bacteriana se puede perder la urea. por lo tanto debe analizarse pocas horas despúes de recogida o conservarse en refrigeración. ha sido diseñada para ser realizada preferiblemente en analizadores. 4. . La disminución de la absorbancia es proporcional a la concentración de urea dentro de los intervalos de tiempo dados. El amonio producido en esta reacción se combina con 2oxoglutarato y NADH en presencia de glutamato-deshidrogenasa (GLDH) para formar glutamato y NAD+. Ya que la prueba cinética es muy rápida. 5. Sueros lipémicos causan turbidez en la solución final.0 Página 42 de 83 UREA 1. 3. Fundamento La urea es hidrolizada en presencia de agua y ureasa para producir amonio y dióxido de carbono. Muestra Suero o plasma. GLDH. Condiciones del paciente 24 horas antes de tomar la muestra. La prueba ha sido mejorada de forma que la GLDH es la enzima límite. Metodo Metodo completamente enzimático para determinación cinética de urea.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ .

. 365 nm 1 cm 25°C. 7-9. 3 mmo1/1) de urea para suero o plasma y 200 g/L (330 mmol/L) para la orina. Valores de referencia Suero 10-55 mg/dl 1. Para concentraciones más altas mezclar un volumen de la muestra con un volumen igual de agua destilada. 1 mmo1/1 Orina 20-35 mg/24 horas 333-583 mmo1/24 horas El método es lineal hasta 200 mg/dl (33. la muestra y la solución 1 deben pipetear en el fondo de los tubos de ensayo y mezclarse cuidadosamente. El patrón. repetir el ensayo y multiplicar el resultado por dos. 30°C ó 37°C Lectura contra blanco de reactivo 7. Tecnica Pipetear Blanco ------1ml Patrón ---10 ul 1ml Muestra 10 ul ---1ml Muestra Patrón Reactivo Mezcle. calcule la diferencia 8.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1.0 Página 43 de 83 6. Metodo de determinación Logitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 340 nm. lea la absorbancia de la muestra y el estandar despúes de 30 segundos y lea nuevamente al minuto.EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . 334 nm.

La anemia es un carácter prominente en la uremia crónica porque está deprimida la eritropoyesis. bilirrubina hasta 60 mg/dl. glucosa hasta 500 mg/dl y ácido ascórbico hasta 30 mg/dl. sacudidas musculares. Determinacion de nitrogeno ureico El nitrogeno ureico se saca de dividir el valor de la urea por un factor que es 2. o una enfermedad hepática grave. 10. anorexia. Los valores de la urea pueden disminuirse en alteraciones hereditarias de la síntesis de urea o cuando existe una ingesta inadecuada de proteínas. Interferencias La prueba no es influenciada por hemoglobina hasta 500 mg/dl.ANTIOQUIA MANUAL DE QUIMICA CLINICA Código: Versión: 1. triglicéridos hasta 2000 mg/dl. El nitrógeno uréico de la sangre. TBC renal. .EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL SAN RAFAEL YOLOMBÓ . Gota Crónica y en todas aquellas entidades donde el volumen del filtrado glomerular se ha reducido una quinta parte de lo normal.0 Página 44 de 83 9. deterioro mental y confusión. nefritis aguada. náusea y vómito. el nitrógeno no proteico y la creatinina están elevados y los niveles sanguíneos de estas sustancias se emplean como índice de la gravedad de la uremia. convulsiones y coma. Cuando existe uremia los síntomas incluyen letargo.14. Correlacion diagnostica La urea se encuentra aumentada por encima de los valores normales en caso de insuficiencia renal u obstrucción de vías urinarias.

4. vitaminas liposolubles. Metodo Prueba colorimétrica fotométrica para proteínas totales (Biuret) 2. transporta los lipidos originando los compuesos que se denominan. aporta la nutricion celular.PROTEINAS TOTALES Generalidades. . Fundamento Los iones cúpricos con las proteínas y peptidas en solución alcalina forman un complejo púrpura. cobre. Evitar todo esfuerzo corporal intenso por lo menos 8 horas antes de la toma de la muestra. 1. de donde se origianan el nombre de inmunoglobulinas. su prolongación tiende a aumentar los niveles de proteínas en la muestra de suero en aproximadamente 0.5 g/dl. La absorbancia de este complejo es proporcional a la concentración de proteínas en la muestra. El uso de torniquete no ha exceder los 30 segundos. interviene en el equilibrio ácido-básico. Los anticoagulantes quelantes interfieren. La priemera regula la presión osmótica coloidal de la sangre. lipo-proteínas y sirve de medio de transporte a multitud de elemntos como esteroides. Estable 8 dias a 2-8 C. La fracción globulina se sintetiza especialmente en las células plasmáticas y tienen como misión principal fabricar anticuerpos. hierro. Suero y plasma heparinizado. Muestras. 3. Condiciones del paciente La muestra ha de tomarse con 8 horas de ayuno. El ejercicio causa aumento de la concentración de proteínas en un 6 a 12%. La cifra normal de las proteinas totales del suero está comprendida entre 6 y 8 mg/ ml encontrándose de 1 gramo menos en los pacientes que guardan cama por mas de dos semanas las proteínas totales están integradas por la fracción albúmina y bla fraccion globulina.

0 ml Muestra --------10 ul 1.0 ml 340 nm.2 g/L). La bilirrubina (15 mg/dl) La lipemia moderada no interfiere. La presencia de dextrano (utilizado como expansor del plasma) ocasiona una floculación de la mezcla de reacción que puede separarse por centrifugación sin que afecte los resultados. 30°C ó 37°C frente a blanco de reactivo Mezcle. 334 nm ó 365 nm 1 cm 25°C. ABS Muestra ____________ X 80= mg/dL proteína ABS Patrón 7. Interferentes La hemoglobina (0. lea la absorbancia de la muestra y estándar despúes de 30 segundos y lea exactamente al minuto despúes calcule la diferencia y multiplique por 80. . Metodo de determincion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 6. Valores de referencia Suero: 65 – 80 g/L Plasma: 68 –83 g/L 8.5. Tecnica Pipetear en tubos de ensayo: Blanco Agua destilada Patrón proteina Muestra Reactivo 10 ul ------1.0 ml Patrón ----10 ul ----1.

diarreas profusas.5 g/ml corresponden a la albúmina y entre 1.5 y 3g/ml a la globulina. quemaduras. Edemas carenciales. entre 3. Afecciones hépaticas crónicas. Corelacion clinicopatologica Cuando hay hemoconcentración por shock. sudoracion excesiva. Se obtienen falsas hiperproteinemias.9. vómitos. Las cifras bajas generalmene corresponden a malnutricion. tambien puede estar disminuida en: Nefrosis lipoidea. . De la cifra total que integran las proteínas. Neoplasias.5 y 5. Anemia persistente. fistulas digestivas etc.

. 3. reabsorción tubular disminuida. Recoger la orina. orina ocasional ó líquido cefalorraquideo. Orina de 24 horas. En caso de orinas muy turbias es conveniente centrifugarlas. medir el volumen y conservarla a 2-8 C. Fundamento. Es el indicador más importante de enfermedad renal complementado con el sedimento microscópico. Metodo Metodo colorimétrico cuantitativo para determinación de proteínas en orina y líquido cefalorraquideo. 2. aumento de la filtración glomerular o alteraciónes en la composicion proteíca que la hace filtrar más facilmente. La cantidad no permite valorar la gravedad de la afección. Condiciones de la muestra Se debe recoger orina de 24 horas u orina ocasional. Tambien conocida como albúminuria. 1.PROTEINURIA Generalidades. cantidad no detectable por los sistemas habituales para dosificarla. 150/24 horas. Normalmente es de 40 a 80 mg con límite máximo. Estable 8 dias. pero su dosificacion periódoca si valora el progreso o regresión de la lesión. Muestras. Tiene como mecanismo el aumento de la permeabilidad de las membranas glomerulares.1 y Alfa –2. La albúmina constituye entre un 60 y un 90 % de la prteína excretada y el resto está por globulinas principalmente globulina Alfa. es la cantidad de proteína excretada por la orina. La proteina presente en la muestra reacciona en medio ácido con el complejo Rojo rojo de pirogalol y el molibdato originando un complejo coloreado que se cuantifica por espectofotometria. 4.

Interferencias La hemolisis puede ser causa de resultados falsamente aumentados tanto en orina como en LCR.5. 600 nm ó 620 nm 1 cm 37 °C frente a blanco de reactivo Patron Muestra reactivo Mezclar e incubar durante 10 minutos a 37 °C leer la absorbancia contra el blanco Calculos: Proteinas de 24 horas: Muestra Patron x volumen x 100 Muestra Patron x 100 Proteina en orina ocasional: Proteínas en líquido cefalorraquideo: Muestra Patron x 100 7.. Los conservantes para orina como ácido clorhídrico. ácido benzoíco o timol pueden causar resultados falsamente disminuidos. Tecnica Blanco ------1 ml patron 20 ul ---1 ml muestra ---20 ul 1 ml 580 nm. Valores de referencia Orina de 24 horas 30 – 140 mg/24 h (hasta 160mg/24h en mujeres embarazadas) Orina ocasional 25 mg/dl Líquido cefalorraquideo 15 – 45 mg/dl (en adultos de más de 60 años se extiende a 60 mg/dl) 8. . Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medicion: 6. Algunas drogas o medicamentos pueden interferir en la reacción.

el embarazo. la fiebre.9. como en la disfunción glomerular. . viral o de otros origenes. Correlacion diagnostica Hay condiciones fisiológicas o benignas deonde se puede observar un aumento en la excresión urinaria de proteínas como el ejercicio violento. como ocurre en la meningitis bacteriana. El LCR es útil para evaluar la permeabilidad de la barrera hematoencefálica en muchas enfermedades inflamatorias o infecciosas del SNC. La determinación de proteínas es importante en la detección de patologías renales. hipotermia.

una citoplasmática y otra mitocondrial. LCR. la GPT se puede encontrar en plasma. la GPT es una enzima exclusivamente citoplasmática. Las transaminasas son enzimas que catalizan las reacciones de transferencia de grupos aminos de un aminoácido a un cetoácido. y en eritrocitos pero en bajas concentraciones. para la síntesis de aminoácidos distintos a los originales. estas enzimas están localizadas particularmente en el hígado. orina. corazón. corazón. músculo esquelético pero en mayor concentración en el Hígado. las transaminasas (GOT ó ASAT Y GPT ó ALAT) y la CGT (gamaglutamiltranspeptidasa o γGT).a. etc. pH óptimo de acción. la transaminasa glutamicopirúvica ó Alaninoaminotranferasa y la transaminasa glutamicooxaloacética ó Aspartatoaminotransferasa . de todas ellas las de mayor importancia clínica son la fosfatasa alcalina (Pa). que esta constituida por dos isoenzimas.TRANSAMINASAS Generalidades El hígado contiene un gran numero de enzimas. es decir. en tanto que la GOT es una enzima binocular. . que la componen. propiedades cinéticas e inmunológicas y a. se van a diferenciar por su movilidad elctroforética. En los eritrocitos se encuentra la GOT soluble y en los leucocitos y reticulocitos están los dos tipos enzimáticos. Existen dos tipos de transaminasas. La GPT es un enzima que también se encuentra en riñón.

334 nm 1 cm 25. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. Metodo Prueba liquiUV 2. Muestra Suero o plama con heparina o EDTA. 3. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. Fundamento Metodo cinético para la determinación de la actividad de ASAT o GOT de acuerdo a las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC. 340 nm. 5. 4. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas.ASPARTATO AMINOTRASFERASA (GOT) 1. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. 30 ó 37°C frente a aire . Sin activación por piridoxalfosfato. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado.

Correlacion diagnostica Los valores aumentados de esta enzima suceden cuando hay muerte en las células del miocardio (infarto al miocardio). Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia.7. en las próximas 6-12h después de la oclusión de una arteria coronaria.1ml mas 0. En casos de baja absorbancia es debido a que por ser una reacción enzimática se consume el NADH en la incubación. no se debe usar como anticoagulante. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra.9ml de solución salina y multiplicar por 10. Valores de referencia 25 ºC 18 U/L 15 U/L 30 ºC 25 U/L 21 U/L 37 ºC 37 U/L 31 U/L Hombres hasta Mujeres hasta 9. en estos casos también se debe diluir. 10. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos 8. el grado del aumento es proporcional a la . Linealidad En caso de sobrepasar la linealidad diluir 0.

osea que una lesión grande puede hacer elevar los valores >200 unidades. . Los aumentos moderados se observan en las etapas finales de la cirrosis.magnitud del daño. Las cifras de GOT también se ven aumentadas en lesiones agudas de las células hepáticas como en las hepatitis virales y lesiones por intoxicación con fármacos o tóxicos como tetracloruro de carbono. ictericias obstructivas. los valores máximos se ven en al cabo de 48h y recupera sus valores normales de 3-5 días.

ALANINA AMINOTRANSFERASA (GPT) 1. 5. Los sueros muy lipémicos o ictéricos tambien pueden alterar el resultado. La transformación simultánea de NADH en NAD va seguida por una disminución de la absorbancia a 340nm. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 365 nm. se debe tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. 3. 30 ó 37°C frente a aire . 2. 334 nm 1 cm 25. 4. el ácido pirúvico producido por la enzima a partir de alanina y ácido alfacetoglutarato se transforma en ácido láctico por efecto de la deshidrogenasa láctica. Condiciones de la muestra Sueros que pueden ser recolectados con EDTA o Heparina. Condiciones del paciente Tener en cuenta que los sueros hemolisados pueden alterar el resultado. Fundamento Es un método cinético para la determinación de la actividad de la GPT de acuerdo con las recomendaciones del panel de expertos de la IFCC sin activación por piridoxalfosfato. 340 nm. Se recomienda analizarlas después dé una hora de tomada la muestra 6. Los métodos para la medición de GPT son muy semejantes a los de la GOT. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparina. Metodo Prueba liquiUV para alanina aminotransferasa. Se debe tener un ayuno mínimo de 8 horas.

Si sobrepasa la linealidad diluir 1 + 10 y multiplicar por 11 8. La temperatura de incubación tiene gran importancia en la determinación enzimática por lo cual de se recomienda utilizar la de 37°C Cuando los valores de la GOT están aumentados se recomienda realizar un perfil para función cardíaca y hepática.095% evitar contacto con mucosas y piel. Valores de referencia 25ºC 5-23U/L 5-19U/L 30ºC 7-32U/L 7-26U/L 37ºC 9-43U/L 9-36U/L Hombres hasta Mujeres hasta Precauciones El Buffer/sustrato esta compuesto con sodio de azida 0. El oxalato inhibe la actividad de la enzima. Las muestras de plasma tienden a ser más turbias que las de suero por lo tanto pueden causar resultados erráticos en la absorbancia. .7. no se debe usar como anticoagulante. Tecnica Temperatura Muestra Reactivo de trabajo 25-30ºC 200λ 1000λ 37ºC 100λ 1000λ Mezclar y leer la absorbancia despúes de un minuto y leer exactamente al minuto a los 2 y los 3 y hacer los cálculos Linealidad Hasta 154mmol/L o 9gm/L (según el Kit utilizado). 9. Interferencias Se deben descartar la muestras hemolizadas porque la GOT puede aumentar la actividad de la muestra.

Los niveles sericos de GPT se encuentran considerablemente aumentados en las lesiones agudas de las células hepáticas. El análisis de estas dos enzimas es de útil ayuda para detectar daño a nivel del hígado y determinar una hepatitis ya sea viral o por tóxicos como drogas. CHE y GPT que son hepatoespecificas. Correlacion diagnostica Las cifras de GPT pueden estar también ligeramente aumentadas en el infarto al miocardio. GOT. en colestasis intra-hepática los niveles de GOT y GPT son análogos a los de la ictericia post-hepática. a veces es mayor el aumento que la de la GOT. En la ictericia hepática (hepatocelular) y la post-hepática se utilizan la GOT y GPT para diferenciarlas. un buen trabajo organizado. Los valores de La GPT. pero esto se debe posiblemente al daño del hepatocito secundario por alteración en la circulación. y la determinación de la fosfatasa alcalina son los de mayor utilidad para el diagnóstico de las hepatitis. La determinación de la GOT y GPT se encuentran aumentadas en las insuficiencias cardiacas y como consecuencia del estasis Hepático. los valores elevados de estas tres enzimas son característicos de las hepatitis agudas y enfermedades necrotizantes del hígado en contraste con la elevación de la fosfatasa alcalina y disminución de GOT y GPT que nos da indicios de una ictericia obstructiva. se debe analizar todos los datos clínicos posibles para hacer un buen diagnostico y reconfirmar con enzimas como γGT. . En la hepatitis viral se observa una elevación de ambas enzimas. En la post-hepáptica es difícil encontrar valores superiores a 200U/L.10. si la insuficiencia es aguda se pueden elevar los valores de 1000 a varios miles U/L. por esta razón se considera más específica la GPT en patologías del hígado. en contraste con la cirrosis hepática que se elevan poco las GOT y disminuyen las GPT. un buen lavado del material y no dejar de lado el uso de los controles. lo que nos puede ayudar a diagnosticar un infarto del miocardio teniendo muy en cuenta no llegar a confundirse con una hepatitis viral ya que en estas también aumentan. Nota Gran parte del éxito de obtener buenos resultados en este tipo de determinaciones enzimáticas esta en el correcto manejo del tiempo a la hora de la lectura (pues las enzimas actuaran hasta consumir el substrato).

La α . riñón. semen. sangre. 2. La α . hígado. intestino.4-glucan-4-glucanohidrolasa. Actua sobre las uniones 1-4 de las cadenas rectas del almidón y también sobre las uniones 1-6 glucosídicas de las cadenas ramificadas como las de amilopeptina y glicógeno. 2-cloro-4-nitrofenilmaltotriósido. bazo y corazón. heces. orina. Metodo Prueba colorimétrica para amilasa alfa-1.AMILASA GENERALIDADES Las amilasas son enzimas contenidas en la secreción pancreática las cuales catalizan la hidrólisis de los polisacáridos tales como : El almidón. pulmón. La liberación de 2-cloro-4-nitrofenol del substrato y el resultante incremento de absorbancia por minuto es directamente proporcional a la actividad de la amilasa en la muestra. . Fundamento La prueba colorimétrica utiliza un nuevo substrato. músculo. Muestra Suero o plasma heparinizado. amilopeptina. leche. 3.amilasa es una endoenzima que se denominaasí porque todos los productos de la hidrólisis tienen la configuración (α) en el C1 de la unidad de la glucosa reductora. cerebro. Este substrato reacciona directamente con la amilasa y no requiere de enzimas de restricción. glucógeno y sus productos parcialmente hidrolizados. orina No hay pérdida de la actividad en 5 días a 4°C.Amilasa suele estar presente en el páncreas ( 200 mg/kg ) glándulas salivales. trompas de falopio. 1. tejido adiposo.

plasma Orina espontánea Orina 24 horas 25°C 120 U/l 600 U/l 450 U/24h 37°C 220 U/l 1000 U/l 900 U/24h IFCC 28-100 U/l <460 U/l <410 U/l . 6. oxalato o EDTA porque inhiben la actividad de la enzima. 2 y 3 minutos Y multiplicar por el factor correspondiente. 400 nm ó 410 nm 1 cm 25 °C ó 37°C frente a agua destilada Mezclar bien incubar por un minuto a la temperatura deseada. Evitar la utilización del torniquete por más de 30 segundos. Metodo de determinación Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Tecnica Temperatura Muestra reactivo factor 25°C 20 ul 1000 ul 9864 37°C 10 ul 1000 ul 24820 Hg 405 nm. Condiciones de la muestra Puede utilizarse plasma heparinizado. Se recomienda el uso de pipetas automáticas para la medición de las soluciones para evitar la contaminación de las mezclas con saliva. 5. Condiciones del paciente No requiere ayuno. 8. No utilizar citrato. Valores de referencia Temperatura Suero.4. Leer la absorbancia a los 1. Si la determinación excede el valor diluir la muestra con 500 ul de solución salina y 100 ul de muestra y multiplicar por 6.

Correlacion diagnostica Los nivele elevados en el suero son siempre transitorios. . sus niveles aumentan en las primeras 24 a 36 horas.9. dato que se debe tener en cuenta cuando se dosifica en pacientes con posible pancreatitis aguda y han recibido este analgésico. Cuando hay ruptura del embarazo ectópico. La úlcera péptica perforada. dato útil para su diagnóstico. se libera una gran cantidad de amilasay se produce una hiperamilasemia. Interferencias La aplicación de morfina produce contracción del esfinter de Oddi y eleva los niveles hasta 900 unidades. obteniendo niveles normales al 3 día. 10. Corresponden a episodios agudos y sólo duran 3 días. En la pancreatitis aguda. pero en la orina persisten hasta por 10 días. aumenta los niveles de amilasa.

con cifras estremas en las 24 horas de 835 a 6150 unidades. . insuficiencia renal y pancreatitis crónica. Este factor hay que tenerlo en cuenta y valorar el tiempo que ha durado la recolección. La dosificación urinaria a veces es más ventajosa que la hemática pues el suero solo se eleva durante unas 72 horas y en la orina persiste por varios días. También se eleva en la parotiditis y litiasis parotidea y marcada disminución en su eliminación en el carcinoma pancreático.AMILASURIA En condiciones normales se elimina una cantidad de amilasa por la orina. comprendida entre 35 y 250 unidades.

El mejor anticoagulante es la heparina.FOSFATASA ALCALINA 1. Condiciones de la muestra Puede trabajarse con plasma. 4. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de formación del 4-nitrofenol. los valores obtenidos en plasma y suero siempre son iguales 6. Debe permanecer en reposos 15 minutos antes de la toma de la muestra. Condiciones del paciente El paciente debe tener un ayuno minimo de 8 horas. Fundamento La fosfatasa alcalina cataliza en medio alcalino la transferencia del grupó fosfato del 4-nitrofenilfosfato al 2-amino-2-metil-1-propanol (AMP). Metodo Metodo espectofotómetro con tampon AMP 2. 3. medido a 405 nm. liberando 4-nitrofenol. pero este no debe contener floruros ni oxalatos. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 405 nm 1 cm 37°C frente a vacio . El ejercicio puede alterar el resultado. 5. La utilización de EDTA inhibe la reacción. Muestra Suero o plasma Es estable al menos por 7 días a una temperatura de 2 a 8 °C.

en el abseso hepático. oxalato y citrato interfieren en la reacción. . raquitismo. Las muestras hemolizadas interfieren por la fosfatasa alcalina eritrocitaria. Interferencias Los anticoagulantes como el floruro. Tecnica Reactivo de trabajo muestra 1000 ul 20 ul Leer la absorbancia inicial y efectuar lecturas cada minuto por 3 minutos y promediar los resultados y multiplicar por el factor 2764.7. Correlacion diagnostica Se origina principalmete en los huesos y en el higado. enfermedad de Paget. hiperparatiroidismo. Valores de referencia Adultos: 26 – 117 U/l 9. por eso cuando el crecimiento disminuye sus niveles bajan a cifras similares al del adulto. sus niveles aumentan. También aumentan en la ictericia. 10. 8. fracturas en consoliación y en metastasis óseas. por lo tnto esta bien establecida su relación con la formación osea. Cuando hay deficiencia de vitamina D. EDTA.

CALCIO 1. Orina efectuar la recogida de orina de 24 horas en recipientes libres de calcio. Muestra Suero o plasma 4. 5. No usar oxalato o EDTA como anticoagulante ya que interfieren en la determinación de calcio. forma un complejo de color azul con arsenazo III (ácido 1. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 650 nm 1 cm 37°C frente a agua destilada . Condiciones de la muestra Debe ser separado lo antes posible de los hematíes. Antes de la recogida adicionar al contenedor 10 ml de ácido nítrico al 50% Diluir la orina ½ en agua destilada para el análisis y multiplicar por dos. 6. 3.6-disulfo-2.8-dihidroxi-3. La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de calcio existente en la muestra. Fundamento El calcio en medio neutro. Condiciones del paciente No requiere ayuno. Metodo Determinación cuantitativa para calcio 2.7-naftalenen-bis (azo)-dibenzenarsónico).

si se utiliza material de vidrio debera lavarse con ácido nítrico diluido con agua destilada. 10. el 99% se halla en los huesos. Valores de referencia Suero o plasma: Adultos Niños Recién nacidos Orina: Adultos Niños 9.12 mg/dl 8.2 mmol/l 50 – 300 mg/24h 80 –160 mg/24h . invalidan la determinación. intoxicación por vitamina D. mal nutrición o mala absorción.0 – 13 mg/dl 2.0 – 3.7.5 – 10. Interferencias Se recomienda utilizar material de plástico. tirotoxicosis e hiperparatiroidismo. El color es estable como minimo una hora. 8.5 – 3 mmol/l 2. La mayoria de las causas de hipercalcemia son debidas a enfermedades oncológicas.1 –2. pseudohipoparatiroidismo.6 mmol/l 2. Trazas de los mismos. La mayoria de los detergentes destinados al uso del laboratorio contienen agentes quelantes. 8. osteoporosis. Una disminución de los niveles de albúmina causa una disminución del calcio en suero. Niveles bajos de calcio pueden atribuirse ahipoparatiroidismo.5 mg/dl 10 . Leer la absorbancia frente a blanco de reactivo. Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul Estándar Muestra reactivo Mezclar e incubar 2 minutos. Correlacion diagnostica El calcio es el mineral más abundante e importante del cuerpo humano. aumento de la retención renal. deficit de vitamina D. sarcosidosis.

Tecnica blanco ----1000 ul estándar 10 ul --1000 ul muestra --10 ul 1000 ul 520 nm 1 cm 25 °C frente a blanco de reactivo. Estándar Muestra reactivo . 3.MAGNESIO 1. Condiciones del paciente No requiere ayuno 5. 4. Metodo Metodo colorimétrico – calmagita. Condiciones de la muestra Utilizar material limpio 6.4 con HCL. Muestra Suero o plasma heparinizado Orina. Diluida 1:10 con agua destilada acidificada hasta 3. 2. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. La intensidad del color es proporcional a la concentración de magnesio. Fundamento El magnesio forma un complejo de color púrpura al reaccionar con la calmagita en medio alcalino.

pielonefritis entre otros. 5 mg/dl 9. hipertiroidismo. tratamiento insulínico del coma diabetico. glomerulonefritis. Valores de referencia 1. 8. perdida anormal de líquidos. tratamientos con diuréticos. Correlacion diagnostica La hipomagnesemia implica manifestaciones similares a la hipocalcemia.Mezclar e incubar por 5 minutos La coloración es estable por 30 minutos. . Niveles bajos son propios de trastornos gastrointestinales con malaabsorción.6 – 2. Los niveles altos implican una depresión del sistema nervioso central y la excitabilidad neuromuscular.

Hg 334 nm 1 cm 20. Metodo Análisis fotométrico UV para la determinación de fosforo. Condiciones del paciente No requiere ayuno. Condiciones de la muestra No se debe usar plasma. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7.FOSFORO 1..25°C frente a blanco de reactivo Blanco Estándar muestra reactivo . 6. La absorbancia de este complejo leido en Uvcercano es directamente proporcional a la concentración de fósforo. 4. 3. Muestra Suero. 5. Fundamento El fosforo reacciona con molibdato en un medio fuertemente ácido para la formación de un complejo.. Los anticoagulantes pueden causar resultados falsamente bajos. Tecnica blanco ---------1000 ul estándar ---10 ul ---1000 ul muestra ------10 ul 1000 ul 340 nm. 2.

la cual controla la excreción urinaria y su movilización osea por medio de la vitamina D. osteomalacia. Interferencias Muestras ictéricas y lipémicas requieren un blanco de muestra. 8. Los valores elevados se encuentran en la insuficiencia renal crónica. Sueros lipémicos o hemolízados no deben ser usados. Leer la absorbancia de la muestra frente a blanco de reactivo antes de 1 hora.5 – 5. La contaminación del material de vidrio es la mayor fuente de error en este análisis. infecciones de flora cocoide gram negativa en su forma septicémica y en la hipervitaminosis D.Mezclar e incubar por lo menos 1 minuto a temperatura ambiente.0 – 7. hipoparatiroidismo.0 mg/dl 9. fracturas evolutivas y la enfermedad de Addison. Por lo tanto se recomienda material de plástico. Correlacion diagnostica Esta regulado por la hormona paratiroidea. 10. . Las valores bajos se encuentran en el raquitismo.0 mg/dl 4. la acromegalia. Valores de referencia Adultos Niños: 2.

y muy poca se encuentra en el miocardio y el cerebro (CK). Muestra Suero o plasma heparinizado o con EDTA. 3. Tiene su máxima concentración entre las 24 y 48 horas. 1. Fundamento La cratina quinasa (CK) cataliza la fosforilación del ADP por el fosfato de creatina. apartir de la velocidad de formación del NADPH. . Metodo Prueba líquida UV activada por NAC creatin kinasa. Método estándar modificado de acuerdo con las recomendaciones del cómite ECCLS.CREATINCINASA (Ck) Generalidades. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. empleando las reacciones acopladas de la hexoquinasa y glucosa-6-fosfato deshidrogenasa. empezando a descender despúes de dicho tiempo. En el infarto de miocardio sus unidades se elevan entre 3 y 6 horas. La concentración catalítica se determina. medido a 340 nm. despúes de iniciado. Normalmente los músculos estriados tienen una alta concentración. para retornar a la normalidad entre 3 y 6 dias despúes. obteniéndose creatina y ATP. lentamente. 4. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK. Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. 2.

5. anotar la absorbancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada minuto durante tres minutos. Calcular el incremento de absorbancia por minuto promedio. 340 nm o Hg 334 nm 1 cm 25. 6. Poner el cronómetro en marcha. Considerando que el coeficiente de absorción molar del NADPH a 340 nm es 6300. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Calculos. 30 ó 37°C contra aire Muestra Reactivo 37°C 25 ul 1000 ul Mezclar y transferir de inmediato a una cubeta. Insertarla en el portacubetas termotizado. Comprobar que las diferencias entre absorbancias sean sensiblemente iguales. Tecnica Precalentar el reactivo de trabajo a la temperatura ambiente minutos. A los 3 minutos. se deducen las siguientes fórmulas para calcular la concentración catalítica: Macro: Micro: A/min x 4127 = U/L A/min x 3333 = U/L . Condiciones de la muestra La muestra de suero o plasma para Creatina quinasa es estable al menos 7 días a 2-8 Centigrados. 25°C ó 30°C 50 ul 1000 ul durante unos Hg 365 nm.

El valor cliníco está en una elevación manifiesta y su relación con el CK-MB y las otras enzimas que se alteran en el infarto. . Traumatismos musculares. Correlacion diagnostica Se encuentra elevada en la distrofia muscular progresiva. por aplicación de inyecciones y relajantes musculares. Valores de referencia Temperatura de reaccion 25 °C 30 °C 37 °C Hombres U/l 10-80 15-125 24-195 Mujeres U/l 10-70 15-110 24-170 9.8. e intervenciones quirurjicas elevan sus cifras ligeramente. Interferencias La hemólisis 10.

Tanto la enzima original CK como su isoenzima CK-MB. o plasma heparinizado o con EDTA. recuperándose los valores normales entre las 24 y 72 horas. Muestra Suero. CK-BB. .CREATINCINASA FRACCION MB Generalidades. Cardíaco y lo hace progresivamente según su extensión y evolución clínica. La CK-MB predomina en el miocardio y sus niveles se elevan cuando existe proceso necrótico del músculo cardíaco. Metodo Prueba Humazym M-test Método por inmunoinhibición para CK-MB. se elevan desde las 3 hasta las 6 horas post-infarto. Estudios electroforeticos demostraron que tiene dos cadenas M y B . CK-MB. Debido a que la concentración de CK-BB en circulación es mínima. tejido nervioso. la combinación de las cadenas origina la CK-MB. La CK-MB aumenta notablemente en el infarto. que toman el nombre según el sitio donde predomina. Fundamento La prueba se basa en una determinación enzimática de CK acompañada de un método de inmunoinhibición. inhibiendo la actividad enzimática de esta subunidad B. la cadena M deriva su nombre del músculo esquelético y la B de Brain ( cerebro ). la actividad remanentre multiplicado por el factor 2. Un anticuerpo es incoroporado al reactivo el cual se une especificamente a la subunidad M. Musculo esqueletico Cerebro Miocardio CK-MM. las concentraciones máximas son a las 12-24 horas. reconociendose 3 isoenzimas. representa la actividad de la izoenzima CK-MB.

diluir el suero con NaCl 150 mmol/L. 30°C ó 37 °C contra aire. . HG 365 nm 1 cm 25°C. En el momento de la extracción evitar la contaminación con el líquido del tejido muscular que puede elevar los valores de la CK-MB Condiciones de la muestra La Concentracion de CK total en la muestra debe ser inferior o igual a 1000 U/L. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: Tecnica muestra Reactivo 40 ul 1000 ul Hg 334 nm. La CK-MB en suero es estable al menos 7 dias a 2-8 C. 340 nm.Condiciones del paciente Evitar actividad corporal intensa 48 horas antes de la extracción de la muestra. porque produce una considerable elevación de la concentración enzimática en plasma. Calcular la diferencia y multiplicar por el factor 8254. Mezcle e incube por 10 minutos a temperatura ambiente lea la abosorbancia y luego lea exactamente a los 5 minutos. Valores de referencia 25 °C CK total hombres mujeres CK-MB >80 U/l >70 U/l >10 U/l 30°C >130 U/l >110 U/l >16 U/l 37°C >195 U/l >170 U/l >25 U/l La actividad CK-MB esta en un rango entre 6 y 25 % de la actividad de la CK total. Si es superior.

. Esta aumenta notablemente en los infartos cardiácos.Correlacion diagnostica Presta una gran utilidad en los casos en que la CK se encuentra notablemente aumentada por causas ajenas al infarto y la CK-MB esta dentro de los límites normales.

5. 3. 30°C ó 37 °C contra aire. 2 y 3 minutos hacer un promedio y multiplicar por el factor 16345 . 340 nm. HG 365 nm 1 cm 25°C. 4. Metodo Prueba líquida para deshidrogenasa láctica. 6.LACTATO DESHIDROGENASA (LDH) 1. por pérdida de la actividad. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. 2. Condiciones de la muestra No se recomienda congelar la muestra. muestra reactivo Mezclar y leer la absorbancia después de 1 minuto y leer luego a los 1. Fundamento Método modificado basado en las recomendaciones del SCE. Muestra Suero o plasma con EDTA o heparinizado. Seperar el suero antes de los 30 minutos. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 7. Tecnica 25°C ó 30°C 20 ul 1000 ul 37°C 10 ul 1000 ul Hg 334 nm.

Correlacion diagnostica En el infarto al miocardio sus niveles se aumentan entre las 24 ó 48 horas y tiene su máxima concentración a los 2 ó 4 días.8. Valores de referencia temperatura adultos hombres mujeres Niños 12meses 25°C 120-240 U/l 30°C 160-320 U/l 37°C 225-450U/l IFCC <243 <244 Hasta 500 U/l 9. 10. . permaneciendo elevada hasta por 8 ó 14 días. Interferencias El oxalato y el citrato interfieren en la reacción.

Muestra Suero o plasma 4. para demostrar el correcto funcionamiento. Fundamento La prueba emplea un conjugado de anticuerpo monoclonal anti cTnl y colorante en fase móvil. Condiciones del paciente Extraer la sangre después de 8 horas de ayuno para evitar muestras lipémicas. 5. 2. y anticuerpos anti-ratón IgG (cabra) en la línea de control. Como la muestra fluye por la almohadilla absorbente. El uso de torniquete no se debe prolongar de 60 segundos. el cual se liga a los anticuerpos anti-cTnl en la línea de prueba y produce una línea de prueba rojo-violeta(T). Muestras lipémicas o hemolíticas no deben ser procesadas. la troponina humana I se une al conjugado anti-cTnl-colorante para formar un inmunocomplejo. . Seperar el suero antes de los 30 minutos. El exceso de conjugado reacciona en la línea de control formando una segunda línea rojo-violeta de control C. 3.TROPONINA 1. Tecnica Lleve el test a temperatura ambiente Dispense 2 gotas de la muestra enla ventana S. Metodo Prueba inmunocromatográfica en un paso para la detección de la troponina I cardíaca humana en el suero o plasma. Condiciones de la muestra Las muestras que contienen partículas de turbidez pueden dar resultados inconsistentes. anticueropos anti-cTnl (ratón). 6. fijados en la línea de prueba.

5 ng/ml de troponina I. No lea después de 15 minutos para evitar errores. . Lea los resultados a los 15 minutos. Debe considerarse repetir la prueba después de 12 horas de iniciado el dolor. 7. El resultado negativo no excluye la posibilidad de un infarto al miocardio.Evite la formación de búrbujas en la ventana. Valores de referencia Negativo Positivo 8. Interferencia La prueba no puede determinar niveles inferiores a 0. Las muestras positivas desarrollan una línea de prueba T en los primeros minutos.

Muestra Sangre total con EDTA. Condiciones del paciente Ayuno de 8 horas. 4. Condiciones de la muestra No debe utilizarse muestras hemolizadas para no alterar el resultado. 5. Metodo de determinacion Longitud de onda: Paso de luz: Temperatura: Medición: 415 nm ó Hg 405 nm 1 cm 25°C frente a agua destilada. . Dado que la concentración de glicohemoglobina en el eritrocito refleja el nivel promedio de glucosa en la sangre de las 4 a 6 semanas anteriores y es estable por la vida de los eritrocitos. Metodo Método rápido de separación por resina de intercambio iónico. 2. la medición es proporciona una prueba de gran valor para evaluar el control a largo plazo de los pacientes diabéticos. 6.HEMOGLOBINA GLICOSILADA 1. 3. Fundamento La formación de glicohemoglobina ocurre irreversible y progresivamente en los eritrocitos a través de los 120 días de vida normal de estas células.

0 % >8.5% Muestra 100 ul 15°C ó 25°C reactivo 5 ml de agua destilada .7. Valores de referencia pacientes Metabolismo normal Diabéticos descontrolados 9. %HbA1 4. Tecnica Etapa de hemólisis Reactivo lisante 500 ul Mezclar e incubar por 5 min Determinación de HbA1 Pipetear 100 ul de hemolisado Tapar a 1 cm aproximadamente Mezclar por 5 min Leer la absorbancia Determinación de Hb total Pipetear 20 ul de hemolisado Mezclar cuidadosamente Leer la absorbancia HbA1= F X HbA1 muestra Hb total 8.5 – 7. Correlacion diagnostica La dosificación de la hemoglobina glicosilada es importante en un diabético como la glucosa.

Colegio mayor de Antioquia Insertos de las técnicas.BIBLIOGRAFIA • • Manual de quimica clinica. Elaboró Carolina Hoyos Velásquez Cargo: Bacterióloga FECHA: XXXXXXXXXXXX Revisó XXXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Aprobó XXXXXXXXXXXXXXXXX Cargo: XXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXXXX Fecha: XXXXXXXXXXXX .

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