UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE QUIMICA E INGENIERIA QUÍMICA

ESCUELA DE INGENIERIA QUIMICA

BIOLOGÍA PARA CIENCIAS E INGENIERÍA

Práctica N° 03:
BIOMOLÉCULAS – IDENTIFICACIÓN DE PROTEÍNAS Y LÍPIDOS
DOCENTES:
Prof. Carlos Gamarra Chávez
Prof. Roger Anibal Gamboa Ruiz

INTEGRANTES:
Diaz Salazar Kevin Emiliano
Rondinel Aldana Renato Gabriel
De la cruz Goñi Fabrizzio
Lope Mescco Enrique Walter
Tello Garay Edison Alex
SECCION:
2
GRUPO:
3
 ÍNDICE

I. INTRODUCCIÓN…………………………………………………………………….pág. 3

II. ANALICE Y COMPLETE SEGÚN LAS ACTIVIDADES DESARROLLADAS

DURANTE LA PRÁCTICA………………………………………………………….pág. 3

a) Actividad 1: Identificación de proteínas.

b) Actividad 2: Identificación de lípidos.

III. RESUELVE EL SIGUIENTE CUESTIONARIO………………………………….pág. 5

IV. BIBLIOGRAFIA CONSULTADA………………………………………………......pág. 6

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I. INTRODUCCIÓN

La identificación de proteínas y lípidos es un procedimiento esencial en la bioquímica, ya que

permite determinar la presencia y cantidad de estas moléculas en diferentes tipos de muestras
biológicas. Uno de los métodos más comunes de identificar proteínas es mediante:

 El reactivo de Biuret se utiliza para identificar la presencia de proteínas en una

muestra. Dicho reactivo contiene cobre la cual genera un complejo violeta que es
característico de la presencia de proteínas.
 El reactivo de Ninhidrina se utiliza para identificar la presencia de aminoácidos libres
en una muestra, se forma un complejo coloreado de color violeta que es utilizado para
cuantificar la cantidad de aminoácidos presentes en la muestra.
 El reactivo de Sudan III se utiliza para identificar la presencia de lípidos en una
muestra, la cual permite resaltar la presencia de lípidos en la muestra con un color de
rojo intenso.

II. ANALICE Y COMPLETE SEGÚN LAS ACTIVIDADES

DESARROLLADAS DURANTE LA PRÁCTICA
a) Actividad 1: Identificación de proteínas.
-Complete la tabla con los resultados obtenidos en clase.

N° Reacción Muestra Aspecto inicial Aspecto Final

Ovoalbúmina

1 Ninhidrina

H2O

Procedimiento:

 En 2 tubos de ensayo se colocó muestras de ovoalbúmina y agua destilada como

muestra patrón, respectivamente, cada una con 1 ml.

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  Luego, se le agregó a cada ensayo dos gotas Ninhidrina al 0.2%.
 Por último, se llevó al mechero para calentar la reacción.

Fundamento:

 Tenemos que tener en cuenta que las proteínas biológicas compuestas de α-

aminoácidos, estas tienen grupos amino ( NH 2) y carboxílicos (COOH ). Estas
reaccionan por condensación para formar el enlace peptídico.
 Este test es la reacción de aminoácidos y proteínas reaccionan con grupo −NH 2 libre,
cuando este grupo libre reacciona con la ninhidrina, se forma un complejo azul
intenso.

Observación:

 Como se puede ver en la imagen de la experiencia, se obtuvo como resultado un color

rosado, que de acuerdo a la literatura esta debería cambiar a un color azul. Por lo
tanto, lo más probable sería la concentración de la ovoalbúmina o el tiempo guardado
de la proteína, ya que bien sabemos estas se desnaturalizan. Estas serían unas de las
causas que no se muestra una coloración azul, pero se nota la presencia de cambio de
coloración y podemos afirmar que el test si ha funcionado.

b) Actividad 2: Identificación de lípidos

N° Reacción Muestra Aspecto inicial Aspecto Final

Aceite

2 Sudán III

H2O

Procedimiento:

 En 2 tubos de ensayo se colocó muestras de aceite y agua destilada como muestra

patrón, respectivamente, cada una con 1 ml.

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  Luego, se le agregó a cada ensayo dos gotas Sudam III
 Por último, se agita suavemente hasta que logre reaccionar

Fundamento:

 El reactivo de Sudan III es un compuesto químico utilizado como tinte y para la

identificación de lípidos en muestras biológicas y alimentos.
 Se basa en la afinidad de los grupos hidrofóbicos de los lípidos por los colorantes
hidrofóbicos presentes en el reactivo, es una amina aromática que contiene un grupo
sulfónico (-SO3H) y un grupo amino (-NH2) en su estructura. En solución acuosa, esto
da lugar a una solución de aniones sulfonato (-SO3^-) y cationes de aminas (+NH3).
 Así, la presencia de lípidos en una muestra se puede identificar mediante la aplicación
del reactivo de Sudan III. Esta coloración rojiza se considera una indicación cualitativa
de la presencia de lípidos, y se puede utilizar para la identificación y cuantificación de
lípidos en una variedad de muestras biológicas y alimentos.

Observación:

 Después de agitar suavemente se produce variaciones de coloración con el tiempo la

cual se obtuvo como resultado un color rojo rosado concluyendo la existencia de
lípidos.

III. RESUELVE EL SIGUIENTE CUESTIONARIO

- Investigue sobre la identificación de proteínas con el reactivo de Biuret e indique

brevemente el fundamento químico de la reacción de Biuret.

El reactivo de Biuret se utiliza para la identificación de proteínas en una muestra. El

fundamento químico de la reacción de Biuret radica en la capacidad de las proteínas
para formar complejos coloreados con el reactivo.
El reactivo de Biuret contiene una solución alcalina de sulfato de cobre (II) (CuSO₄) y
una pequeña cantidad de hidróxido de sodio (NaOH). Cuando se añade este reactivo
a una solución que contiene proteínas, se produce una reacción entre los grupos
amida (NH₂) presentes en los aminoácidos que componen las proteínas y el CuSO₄
alcalino.
En esta reacción, los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el cobre (II)
presente en el reactivo, formando un complejo de coordinación entre los grupos
amida y el cobre. Este complejo forma un precipitado coloreado de color violeta
intenso.
La presencia de este color violeta en la muestra indica la presencia de proteínas, ya
que los enlaces peptídicos están presentes únicamente en las proteínas y no en otros
compuestos.

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-Investigue sobre la identificación de lípidos con Sudan III e indique brevemente el
fundamento químico de la prueba de Sudan III.

La prueba de Sudan III es un método utilizado para la identificación de lípidos,

específicamente grasas y aceites, en muestras biológicas o soluciones. El fundamento
químico de esta prueba se basa en la solubilidad de los lípidos en disolventes
orgánicos y su capacidad para absorber ciertos colorantes liposolubles, como el
Sudan III.
El Sudan III es un colorante liposoluble que se disuelve en disolventes orgánicos, pero
no en agua. Cuando se realiza la prueba de Sudan III, se mezcla la muestra que se
desea analizar con el Sudan III. Si hay lípidos presentes en la muestra, se producirá
una coloración intensa en forma de una capa rojo-anaranjada en la interfaz entre la
fase acuosa y la fase orgánica.
Esta coloración se debe a la afinidad del colorante Sudan III por los lípidos. Los lípidos
no polares, como los triglicéridos, los fosfolípidos y los esteroides, interactúan con las
moléculas del Sudan III y forman un complejo liposoluble, que exhibe un color rojo
intenso.
El resultado positivo de la prueba de Sudan III indica la presencia de lípidos en la
muestra analizada.

-Investigue sobre la emulsión de lípidos ocurridos dentro de los seres vivos

La emulsión de lípidos es un proceso que ocurre dentro de los seres vivos,

especialmente en el sistema digestivo, donde los lípidos se descomponen y dispersan
en pequeñas gotas para facilitar su digestión y absorción. La emulsión de lípidos es un
paso crucial para la digestión eficiente de los lípidos, ya que aumenta
significativamente el área superficial disponible para la acción de las enzimas
lipolíticas.
El proceso de emulsión de lípidos generalmente implica la acción mecánica de las
sales biliares, como los ácidos biliares, que se liberan en el intestino delgado. Estas
sales biliares interactúan con los lípidos, formando micelas, que son pequeñas
estructuras esféricas en las que los lípidos se dispersan en el medio acuoso.
La formación de micelas ayuda a aumentar la exposición de los lípidos a las enzimas
digestivas, como las lipasas, facilitando así su descomposición en ácidos grasos y
monoglicéridos que pueden ser absorbidos por las células intestinales.

IV. BIBLIOGRAFÍA CONSULTADA

 Reviews C. Lehninger principles of biochemistry. 6a ed. La Vergne, TN,

Estados Unidos de América: Cram101; 2017.
 Mahan LK, Raymond JL, Escott-Stump S. Krause’s food & the nutrition care
process - E-book. 13a ed. Saunders; 2013.
 Sapkota A. Ninhydrin test- definition, principle, procedure, result, uses
[Internet]. Microbe Notes. Sagar Aryal; 2022 [citado el 21 de mayo de 2023].
Disponible en: https://microbenotes.com/ninhydrin-test/

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 Qualitative analysis of Proteins (theory): Class 12 : Chemistry : Amrita online
lab [Internet]. Edu.in. [citado el 21 de mayo de 2023]. Disponible en:
https://amrita.olabs.edu.in/?sub=73&brch=8&sim=140&cnt=1