Manual de prácticas de Parasitología

Práctica N° 2

Diagnóstico de protozoosis intestinales:

Entamoeba histolytica y Giardia lamblia
Vinculación con el programa asignatura:

Unidad II: Protozoosis de transmisión directa o indirecta.

1.1 El parásito como agente causal.
1.2 Ciclo biológico.
3.2 Mecanismos de transmisión.
5.0 Diagnóstico
5.2 Exámenes auxiliares de laboratorio clínico

I. Introducción:

Para un diagnóstico correcto de Para conservar una muestra de

las parasitosis intestinales es heces formadas, puede hacerse a
necesario demostrar la presencia temperatura ambiente si se
del parásito (frecuentemente procesa inmediatamente; si no es
mediante análisis de las heces) en posible su procesamiento
cualquiera de las fases de su ciclo inmediato, puede refrigerarse de
de vida, por lo que la muestra de 24 a 48 horas.
heces deberá ser tomada Si la muestra es diarreica,
correctamente en tiempo y forma, líquida o mucosanguinolenta,
lo que garantizará su hallazgo en deberá procesarse durante las dos
el laboratorio. primeras horas posteriores a su
Se deben de considerar recolección; nunca refrigerar.
algunos factores que pueden En el caso de no poder
interferir en el diagnóstico: a) procesarse en los tiempos
muestras viejas o conservadas señalados, se debe adicionar a la
inadecuadamente. b) la ingestión muestra soluciones fijadoras en
de medicamentos previa a la proporción de 1:3 (tres partes de
colecta de heces. fijador por una muestra).
La materia fecal se debe Se recomiendan los siguientes
depositar en un frasco de boca fijadores:
ancha evitando su contacto con
orina u otro contaminante. La Para muestras formadas:
cantidad de heces necesaria para - Formol 10%
el análisis es equivalente a dos
cucharadas soperas (2g). El frasco Para muestras diarreicas:
debe rotularse con el nombre del - Alcohol polivinílico (PVA)
paciente, fecha, tipo de examen - Mertiolate-yodo-formol
solicitado y número secuencial de (MYF)
muestra.

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La cantidad de muestras a
estudiar deberá ser en mínimo de tres
(una menor cantidad podría arrojar
datos no confiables); cabe recalcar la
importancia de una buena recolección
y manejo de la muestra para que el
diagnóstico tenga mayores
probabilidades de ser certero y
confiable. Para lactantes se
recomienda la utilización de cucharilla
rectal.
Existen una gran variedad de
métodos utilizados para la
demostración de los parásitos
intestinales (ver cuadro 1); la elección
del método adecuado dependerá de
la sospecha clínica y de la
consistencia de la materia fecal.
Los exámenes utilizados con
mayor frecuencia son: 1) el Directo
en fresco; y 2) los de concentración
destacando entre estos últimos los de
flotación de Faust y de Ritchie.
Por ser de los más comunes y
ofrecer buenos resultados en esta
práctica se utilizarán las técnicas
Directo en Fresco y la de Flotación
con sulfato de cinc (ZnSO4) de Faust.
La concentración más útil del
sulfato de cinc para lograr la flotación
de los elementos parasitarios más
comunes es la que tiene una densidad
de 1:180 (aproximadamente de
33%). Sawitz, (1942) determinó el
peso específico de algunas formas
parasitarias: el de Entamoeba
histolytica es de 1:065; Entamoeba
coli, 1:070; Giardia duodenalis, 1:060;
Chilo,mastix mesnili, 1:175; huevo de
Ancylostoma duodenale, 1:055;
huevo de Trichuris trichiura, 1:150;
huevos de Ascaris lumbricoides, entre
1:110 y 1:200 dependiendo del tipo.
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Se comprenderá entonces que
la concentración 1:180 de sulfato de
cinc es suficiente para hacer flotar la
mayoría de las formas parasitarias
que por obviedad se hundirían en
agua pura.
El examen directo en fresco es
el más sencillo y económico y se
recomienda para la demostración de
trofozoitos de protozoarios en
muestras diarreicas, líquidas o
mucosanguinolentas. Los exámenes
de concentración son recomendados
para la búsqueda de quistes, huevos y
larvas en heces pastosas.
Entamoebosis por
Entamoeba histolytica.
La entamoebosis por Entamoeba
histolytica es una protozoosis que se
presenta con mucha frecuencia en
regiones tropicales, asociada a malos
hábitos alimenticios y a higiene
inadecuada, casi siempre relacionada
a estratos económicos bajos.
Su frecuencia oscila entre el
13% y el 47% en México y se calcula
que a nivel mundial el porcentaje de
infección es del 10%.
Clínicamente la enfermedad
puede presentarse en dos formas:
intestinal y extraintestinal. La
sintomatología dependerá del sitio de
localización.
En el caso de localización intestinal
puede ser asintomática; sintomática
sin evidencia de invasión tisular; y
sintomática con evidencia de invasión
tisular. Los síntomas van desde una
diarrea simple hasta aquella con
moco, sangre, disentería y dolor
abdominal, constipación, diarrea
eventual, dolor abdominal ocasional y
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trastornos gastrointestinales hemaglutinación indirecta (HAI),

inespecíficos. ELISA, etc.
El absceso hepático es la más El ultrasonido, la gammagrafía
común de las localizaciones hepática, la tomografía axial
extraintestinales de le entamoebosis computarizada (TAC), y la resonancia
y presenta las siguientes magnética (RM), son métodos de
manifestaciones clínicas: fiebre, dolor gabinete excelentes para la detección
y masa palpable en hipocondrio del absceso hepático amibiano.
derecho, dificultad respiratoria,
hipodinamia, hiporexia. Giardosis por Giardia lamblia.
Para el diagnóstico de
esta parasitosis se aplican diversas La Giardiosis es la parasitosis
técnicas de laboratorio: el análisis en intestinal producida por el protozoario
fresco de heces o bien, técnicas de Giardia lamblia que se aloja en el
concentración facilitan el hallazgo de duodeno y yeyuno, ocasionando
trofozoitos y quistes de E. histolytica desde solo expulsión asintomática de
en el intestino. Es importante quistes, hasta síndrome de mala
establecer la diferencia entre las absorción intestinal.
amibas patógenas y las no patógenas La Giardiosis es cosmopolita, y
como Entamoeba dispar y Entamoeba en México se le consideraba hasta
coli. Solo se podrá afirmar que fines del siglo XX el parásito intestinal
estamos frente a la forma parasitaria, más frecuente; tiene un gran impacto
es decir Entamoeba histolytica al en el nivel pediátrico. La severidad
observar los trofozoitos eritrófagos con que se presenta en pacientes
propios de éste parásito agamaglobulinémicos demuestra la
conjuntándose con los datos clínicos importancia del sistema inmune.
correspondientes. El diagnóstico se basa en la
En el caso de la entamoebosis presentación clínica que ofrezca el
extraintestinal, particularmente en paciente, y la confirmación se realiza
localización hepática se recomienda en el laboratorio mediante la
observar las siguientes observación microscópica de
consideraciones: la biometría trofozoitos y quistes en heces.
hemática suele ser inespecífica, las En cualquier caso, las muestras se
pruebas de función hepática muestran deben analizar primero en examen
prolongación del tiempo de la directo con Lugol y luego, bajo el
protrombina; la albúmina se método de concentración por
encuentra disminuida. flotación con sulfato de zinc. Para
Mediante detección serológica ambas técnicas se recomienda el
de anticuerpos se puede establecer el estudio de tres muestras fecales
diagnóstico etiológico con una alta consecutivas.
confiabilidad. Las técnicas más Existen otros métodos,
utilizadas para esto son complementarios o alternativos,
inmunoelectroforesis (IEF), algunos de ellos invasivos y
traumáticos por lo que su utilización

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queda a criterio del médico: sonda El inmunodiagnóstico es una

duodenal, biopsia intestinal y alternativa o complemento importante
radiología intestinal. Recientemente que permite lograr la detección de
se ha utilizado con bastante éxito la antígenos o anticuerpos mediante el
cápsula duodenal de Beal-Crosby ya ELISA, inmunoblot, etc.; es de gran
que es altamente sensible y no ayuda en estudios epidemiológicos ya
traumático. que los anticuerpos persisten por
meses o años.

II. Objetivos.

1. Que el alumno aprenda los procedimientos correctos de obtención

y manejo de heces para estudios parasitoscópicos.
2. Que el alumno comprenda las razones y fundamentos de la
utilización de las técnicas de concentración y del examen directo
en fresco.
3. Con ayuda del instructor, el alumno realizará los métodos de
laboratorio existentes para el diagnóstico de la entamoebosis y de
la giardiosis.
4. Al finalizar la sesión, el alumno será capaz de reconocer
microscópicamente las características de quistes y trofozoitos de E.
histolytica así como los de Giardia lamblia.

III. Materiales:

- Laminillas permanentes de ambos parásitos.

- Microscopio estándar.
- Aceite de inmersión.

IV. Método:

1. Coloque las preparaciones permanentes en el microscopio.

2. Observe primeramente con el objetivo de 10X; una vez localizados
quistes y trofozoitos, cambiar al objetivo de 40X y posteriormente al de
100X.

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V. Resultados:

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VI. Conclusiones:

VII. Cuestionario:

1. ¿Por qué se recomienda en los exámenes coproparasitoscópicos el estudio

de tres muestras seriadas de materia fecal?

2. ¿Cuál es el examen de laboratorio de elección para la búsqueda de

trofozoitos?, ¿cuál para encontrar quistes, huevos y larvas? Fundamente su
respuesta.

3. Mencione las características citoplasmáticas que acaba de observar en E.

histolytica.

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4. ¿Cuál es la única manera de identificar al microscopio a Entamoeba

histolytica diferenciándolo de otros protozoarios no patógenos?

5. Mencione las características morfológicas de Giardia lamblia útiles para su

diagnóstico microscópico.

6. ¿A qué se debe que la giardiosis tenga una alta frecuencia y prevalencia en

niños y no así en adultos?

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