INFORME N°1-ANÁLISIS INSTRUMENTAL II

CROMATOGRAFÍA DE GASES (GC)

Integrantes: Sara Molina-1004233410, María Camila Pujimuy-1122782028

Introducción:
La cromatografía de gases (GC) es una técnica analítica común que se utiliza para separar,
identificar, analizar y cuantificar compuestos volátiles y semivolátiles de una mezcla. Esta
técnica se basa en las diferencias en la interacción de los componentes de la muestra con
una fase estacionaria y una fase móvil mientras atraviesan una columna cromatográfica.
Dicha fase móvil, utiliza un gas inerte que arrastra los diferentes componentes de la muestra
por la columna cromatográfica donde son separados por la combinación de diversos
procesos de interacciones físicas y/o químicas entre los componentes de la muestra y la fase
estacionaria.
Su aplicación se extiende ampliamente en laboratorios de investigación y en la industria muy
destacada por su eficiencia.
El presente informe de laboratorio muestra los resultados obtenidos del análisis
cromatográfico de una muestra de colesterol desconocida para hallar su concentración
mediante una curva de calibración.

Características técnicas de la metodología empleada para la determinación del colesterol

Para el análisis del colesterol empleando la técnica de cromatografía de gases se utilizó una
columna capilar que por lo general son de Rtx-5, compuesta por 5% de difenil y 95% de
dimetil polisiloxano la cual es ligeramente polar y se usa principalmente para el análisis de
hidrocarburos aromáticos y muestras ambientales.
En los detectores una de las características mas importantes son la resistencia mecánica,
resistencia química, seguridad en el caso de utilizar gases, etc. Muchos son los factores que
pueden afectar las diversas características del detector y la señal, alternado la magnitud y
la calidad de la misma en sus tres etapas de generación, elaboración y manifestación.
La columna puede influir sobre el detector en dos aspectos: contaminación del gas portador
por la fase estacionaria y fluctuaciones en el caudal de dicho gas debidas al arrastre de la
fase estacionaria por la fase móvil. Por otro lado, resulta conveniente para la detección que
la columna no tenga una longitud excesiva.
Para el análisis cualitativo que sirve para realizar la identificación de los componentes de la
muestra, se procede frecuentemente a comparar el cromatograma obtenido con los de
compuestos conocidos y puros, existiendo varias formas de efectuar tal comparación y
confirmar la presencia de un componente. Cuando en una mezcla se sospecha que un
componente ya identificado corresponde a un pico dado se añade a la muestra problema
algo de componente puro, y se realiza un cromatograma. Si en este registro obtenido
aparece el pico del componente aumentado en su dimensión, entonces se ha acertado en
la predicción, si aparece un nuevo pico, la predicción es errónea.
Y por último el análisis cuantitativo en el presente trabajo se empleó un estándar externo
de colesterol. Un estándar externo es el que analiza separadamente de la réplica
desconocida que se está ensayando. Una serie de tales estándares contienen distintas
concentraciones conocidas de analito, junto a la matriz que es similar o idéntica a la de la
muestra. Los estándares externos pueden usarse para calibrar un procedimiento de medida,
cuando los componentes de la matriz, incluyendo los reactivos que se requieren en el
preparado, no causan interferencias. También pueden usarse para calibrar un análisis en el
que el analista tiene suficiente control sobre las condiciones como para que la contribución
producida por los interferentes sobre las medidas puedan mantenerse constante; así puede
realizarse la oportuna corrección del error determinado por el interferente.

Curva de calibración
 y = 901,03x - 5289,1
Area vs concentración R² = 0,9997
90000
80000
70000
60000
50000
Area

40000
30000
20000
10000
0
0 20 40 60 80 100 120
Concentración

Cantidad de la muestra analizada:

Análisis de datos
Al construir la curva de calibración esta presento un coeficiente de correlación de 0,9997, el
cual se considera apropiado, ya que indica que el método tiene una buena linealidad, es
confiable y aceptable lo que explica bien la relación entre el área del pico de colesterol y su
concentración. Aunque se debe tener en cuenta que la información que proporciona el
coeficiente de correlación (R) es limitada y no justifica por si sola la linealidad, siendo el
coeficiente de determinación (𝑅 2 )el que aporta una mayor significación estadística, ya que
expresa la proporción de la variación total de Y. El coeficiente de determinación para la curva
de calibración del colesterol es de 0,9996.
El limite de detección y el limite de cuantificación se calcularon a partir de la curva de
calibración uno con un valor de 146,72 y otro con 376,311 los cuales son muy buenos ya
que no afectan determinaciones elevadas de colesterol en alimentos con alto contenido del
mismo.
A partir de este conjunto de datos obtenidos se infiere que los datos son precisos y que el
método es reproducible, aun para concentraciones elevadas, ya que se obtuvieron %C/v
menores al 1% lo que indica bien el grado de concordancia entre ensayos individuales
cuando el método se aplica repetidamente.

Conclusiones

• La estandarización realizada a la técnica de cromatografía de gases, aporta una

herramienta de análisis con la cual se pueden obtener resultados confiables,
reproducibles y repetibles, la cual es necesaria en el eje cafetero y en la universidad
tecnológica de Pereira para realizar investigaciones y análisis de colesterol en
alimentos.

• El método para determinar colesterol por cromatografía de gases presentó muy

buenos resultados durante la verificación, expresando así que los datos obtenidos
durante la determinación y la estandarización eran buenos, y que el método era
exacto, confiable, preciso y reproducible.

Referencias bibliográficas
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