TÉCNICAS BÁSICAS DE MICROBIOLOGÍA Y BIOQUÍMICA

Alumno: Mario Hernández Sánchez Fecha: 12/2/2022

Toma de muestra para el control de la contaminación

ambiental, de superficies y de manipuladores.
 OBJETIVO:
Observar los diferentes hongos/bacterias que crecen en las placas

 MATERIAL:
Placas Petri Agar de Sabouraud
Placas Rodac bilis-verde brillante
Hisopos Estériles Baid Parker
PCA (plate count agar) Solución salina Estéril

 MEDIOS:
Agar de Sabouraud Baid Parker
Bilis-verde brillante PCA (Plate count agar)

 PROCEDIMIENTO:
1.-Control microbiológico del aire por sedimentación en placa:
o Pesar la cantidad del medio adecuado para preparar entre 40ml y 50ml por
placa, disolver en agua destilada, calentar hasta la completa disolución y
autoclavar a 121ºC durante 15min. Finalizado el proceso, verter en sendas
placas cuando el medio alcance unos 50ºC.
o Destapar las placas en 3 lugares diferentes de Guadalajara durante 30min cada
una.
o Tapar las placas e incubar durante 72horas a 31ºC.
o Contar el nº total de colonias crecidas. La superficie es la delimitada por la
placa. El resultado se expresa en ufc/(cm2xhoras).

2.-Control microbiológico de superficies (Técnica de hisopo):

o Preparar las placas con PCA.
o Humedecer el hisopo con una solución salina y frotar varias veces sobre la
superficie que vamos a utilizar.
o Introducir el Hisopo en un tubo con 10ml de la solución salina durante 15min.
o Con el asa de Digralsky, sembrar en la superficie 0,1ml de la suspensión
o Incubar las placas en posición invertida durante 72horas a 31ºC
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o Contar el nº de colonias en las placas que contengan entre 30 y 300 colonias.

Hacer la medida aritmética y multiplicar por el inverso de la disolución y por el
inverso de inoculo. Expresar el resultado en ufc/cm2.

3.-Control microbiológico de superficies (Técnica con placa Rodac):

o Verter el medio PCA en las placas de manera que sobresalga del borde de la placa
para facilitar el contacto con la superficie que se va a examinar.
o Presionar suavemente la placa sobre la superficie elegida.
o Cerrar e invertir la placa para su incubación durante 72horas a 31ºC.
o Contar el nº de colonias que han crecido y expresar el resultado en ufc/cm2

4.- Control microbiológico de manipuladores (Contacto con placa Petri):

o Pesar, disolver y esterilizar los medios de cultivo Bilis-Verde y Baid Parker a razón
de una placa por cada medio. Verter en placa y esperar a que solidifique.
o Colocar los dedos (sin lavar) por una parte de la superficie de una placa con Bilis-
Verde.
o Desinfectar las manos y volver a pasar los dedos por la otra parte de la placa.
o Tomar con un hisopo estéril una muestra de las fosas nasales y sembrar sobre la
placa con Baid Parker.
 CÁLCULOS:
1.-Calculos de Sabouraud y PCA:

2.-Calculos de Bilis-Verde brillante y Baid Parker:

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 RESULTADOS:
1.-Control microbiológico del aire por sedimentación:
o Placas con PCA:

o Placas con Sabourdaud:

2.-Control microbiológico de superficies (Técnica del Hisopo):

Hay un total de 155 ufc/cm2 en la

placa, donde el Hisopo fue pasado
por una silla.
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3.- Control microbiológico de superficies (Contacto con placa Rodac):

La muestra se obtuvo de un
urinario y se puede observar
que hay 0,2 ufc/cm2.

4.- Control microbiológico de manipuladores (Contacto con placa Petri):

En la zona derecha de la placa se

colocaron los dedos sin limpiar y se puede
observar un pequeño crecimiento de
bacterias.

En la zona izquierda de la placa se

colocaron los dedos desinfectados y
lavados con jabón, por eso se puede
observar un rastro del jabón

En la placa del hisopo que

hemos pasado por nuestras
fosas nasales se puede
observar levemente un
crecimiento bacteriano.
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Agar en Superficie
Bacteri Saccharo Aspergill Bacilus Peniciliu Penicili Fusariu Fusariu
a myces as niger m di um m m
Cerevisia color gaminari
e con
Forma Puntifor Irregular Irregula Irregular Circula Rizoide Rizoide
me r r
Borde Entero Ondulad Filamen Ondulad Ondula Filament Filament
o toso o do oso oso
Elevaci Convexo Elevado Convex Convexa Elevad Convexa Elevado
on a o y
elevada
Superfi Lisa Aterciop Mucosa Aterciop Polvori Aterciop
Aterciop
cie elada elada enta elada elado
Color Rosa Verde Rosa Bordes Borde Blanco y
Blnco y
oscuro blancos blanco rosa gris
y centro y
verde centro
verde
Luz Transluci Opaca Translu Transluci Translu Transluci Transluci
Transm da cida da cida da do
itida
Luz Brillante Opaca Brillant Opaca Opaca Opaca Opaco
Refleja e
da

 CONCLUSIONES Y OBSERVACIONES:
1.-Control microbiológico del aire por sedimentación:
En las placas con PCA deben crecer bacterias, pero en nuestro caso también han crecido
hongos. En las placas con Sabouraud han crecido hongos y levadoras

2.-Control microbiológico de superficies (Técnica del Hisopo):

En la placa con la técnica del hisopo han crecido un total de 155 ufc/cm2, lo cual entra
en el rango (30 a 300) de colonias que se pueden contar.

3.- Control microbiológico de superficies (Contacto con placa Rodac):

La placa Rodac se paso por un urinario, pero no se presentan muchas colonias, se han
contado un total de 0,2 ufc/cm2, lo cual no entra e el rango de colonias.

4.- Control microbiológico de manipuladores (Contacto con placa Petri):

En la placa donde se posaron los dedos se observa un leve crecimiento de bacterias
que podría ser Salmonella. Mientras que en la placa del hisopo se puede observar
levemente unas bacterias que podrían ser Staphylococcus aureus.