 BACTERIAS

 La mayoría son mesófilas:

 Microorganismos temperatura óptima 37°C
unicelulares

 Rápida velocidad de
crecimiento: desarrollan
en 24 horas

 Tienen diferentes formas y

 Su tamaño varía entre 0,5 agrupaciones
y 5 μm
 Se inocularán en medio de cultivo BHI (Infusión cerebro corazón), tanto
líquido, semisólido, inclinado y en placa de agar.

 Es un medio rico en nutrientes, adecuado para el cultivo de una amplia

variedad de bacterias exigentes, como estreptococos, meningococos y
neumococos, hongos y levaduras.

Caldo BHI Agar BHI

Infusión de cerebro
Infusión de corazón
Peptona de gelatina
Cloruro de sodio
Fosfato disódico de hidrógeno
Dextrosa
Infusión de cerebro y corazón
Digerido péptico de tejido animal
Digerido pancreático de caseína
Cloruro de sodio
Fosfato disódico de hidrógeno
Glucosa
Agar
o Diagrama de trabajo:

Frotis fijo
Rotular todos los tubos y
placas

Preparar e
incubar
todo a
37°C/24h.
 ACTINOBACTERIAS  Bacterias filamentosas parecidas a
 Son mesófilas: desarrollan los hongos: antes actinomicetos
entre 25–30° C

 La mayoría son
aerobias

Streptomyces sp. Streptomyces sp.

 Velocidad de
crecimiento lenta:
 Son heterótrofas
desarrollan en 2 a 7
días, mínimo 5.
 Se inoculará en medio de cultivo YPMD, en placa de agar únicamente.

 Medio utilizado para mantenimiento y propagación de levaduras.

También adecuado para el cultivo de bacterias filamentosas.

Agar YPMD
Extracto de Levadura
Peptona de carne
Extracto de malta
Dextrosa
Agar
o Diagrama de trabajo:

Incubar a 28°C/5-7 días

Cultivo de
actinobacteria
Inocular por
estría continua
Rotular en agar YPMD
adecuadamente
la caja de Petri.
 LEVADURAS

 Microorganismos
unicelulares de forma  Mesófilas: 28-30°C
ovoide o alargadas.

 Su tamaño oscila
entre 2 y 10 micras de
ancho y entre 4 y 50
Saccharomyces cerevisiae
 Importantes en la micras de largo.
fermentación de  Son facultativas y
carbohidratos. desarrollan en 2 o 3 días.
 Se inoculará en medio de cultivo Sabouraud, en placa de agar únicamente.

 Medio utilizado para cultivo de levaduras y hongos al que se le pueden

agregar antibióticos para inhibir el desarrollo bacteriano.

Agar Sabouraud
Dextrosa
Peptona
Agar
pH final: 5.6 ± 0.2
o Diagrama de trabajo:

Incubar a 28°C/48-72h
Cultivo de
levadura
Inocular por
cuadrante
Rotular radial en agar
adecuadamente Sabouraud
la caja de Petri.
 Características Microscópicas de
Bacterias, Actinobacterias y Levaduras
De una colonia aislada se realiza un frotis fijo:

 Bacterias Tinción de Gram: identificar forma,

agrupación y características de su
 Actinobacterias membrana.

Tinción simple : ver forma, tamaño e

 Levaduras
identificar la presencia de blastoconidias.
 Características Macroscópicas de Bacterias,
Actinobacterias y Levaduras
o Medios líquidos (en bacterias):

 Patrón de desarrollo característico de acuerdo a los requerimientos de oxígeno.

 ¿Hay película?
 ¿Hay turbidez en todo el caldo?
 ¿Hay sedimento?
 Requerimientos de Oxígeno:

1. Aerobios estrictos
4. Microaerófilos
2. Anaerobios estrictos
5. Aerotolerantes
3. Facultativos
Aerobios estrictos Anaerobio Facultativos

Microaerófilo Aerotolerante
o Medios semisólidos (en bacterias):

a) Requerimientos de Oxígeno:

 Aerobio, si desarrolla
hasta arriba del tubo

 Si desarrolla más abajo, no le

gusta tanto el oxígeno
 b) Movilidad:

 Si el μo se mueve, desarrollará
alrededor de la picadura

 Si no se mueve lo hará solo

en la picadura

Facultativo Facultativo Facultativo Microaerófilo Facultativo Facultativo Facultativo Facultativo

Inmóvil Móvil Inmóvil Móvil Móvil Inmóvil Móvil Inmóvil
o Medios sólidos inclinados-pico de flauta (en bacterias):

 Estría ondulada: es donde hay más desarrollo.

 Estría recta:
o Medios sólidos en placa-cajas de Petri (en bacterias):

Se deben revisar las técnicas de inoculación:

 Estriado continuo: en la parte baja se deberían ver colonias aisladas.

 Cuadrante simple: el primer cuadrante es el más saturado y debe ir
disminuyendo en los demás. No debo pasarme al cuadrante de a
lado.
 Cuadrante radial: el inóculo se debe ir agotando.
o Placas de agar (en bacterias, actinobacterias y levaduras):
 Características de las colonias:
a) Textura: butirácea (brillo) o seca.
b) Color: blanco, rojo, amarillo, etc. indicando si la colonia es la
colorida o el pigmento difunde al medio de cultivo.

Pigmento no soluble: la colonia es colorida.

Pigmento hidrosoluble: el color difunde al medio.

Microccocus luteus

Pseudomonas aeruginosa Serratia marcescens

c) Elevación:

d) Forma:
e) Bordes:
 Colonias medianas brillosas, color rosa
(pigmento no difunde al medio),
mucoides, borde entero, convexas y
circulares.

Providencia stuartii

Colonias medianas brillosas, color blanco

(pigmento no difunde al medio), umbonadas,
borde entero y circulares.

Alcaligenes faecalis
 Colonias grandes grises (pigmento no
difunde al medio), secas, opacas,
elevadas, irregulares y borde ondulado.

Bacillus sp

Colonias pequeñas blancas (pigmento no

soluble), brillosas, elevadas, circulares
con borde entero.

Staphylococcus epidermidis
 Colonias grandes blanquecinas
(pigmento no soluble), brillosas,
irregulares y rizoides.

Clostridium sporogenes

Colonias medianas blancas (pigmento

no soluble), brillosas, convexas y
circulares con bordes enteros.

Corynebacterium xerosis
Factores que afectan la producción de pigmentos

 Efecto de la edad del cultivo:

24 h Serratia marcescens 48 h
 Efecto de la temperatura de incubación :

37°C Serratia marcescens 28°C

Actinobacterias:

Colonias rugosas, duras, se les dicen

“cerebrósidas”. Algunas tienen olor a
tierra. Después de tiempo pueden
producir micelio aéreo donde se
producen esporas.

Productoras de antibióticos como

estreptomicina (S. griseus);
eritromicina (S. erythreus); tetraciclina
(S. rimosus); neomicina (S. fradiae).
Streptomyces griseus
 Levaduras:

Rhodotorula mucilaginosa

Sacharomyces cereviciae

Debido a esto, se describen

de la misma forma que las
Las levaduras dan colonias
de las bacterias.
cremosas similares a las
bacterianas.
Candida albicans