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ISSN: 0378-1844
interciencia@ivic.ve
Asociación Interciencia
Venezuela
RESUMEN
El melón (Cucumis melo L.) pertenece a la familia de las Cu- a combatir estos problemas. Se han realizado esfuerzos para
curbitáceas, posee una amplia diversidad morfológica y es una crear plantas transgénicas a partir de muchas variedades de me-
de las especies más importantes económicamente en el mundo. lón utilizando embriones somáticos, semillas, cotiledones, tubo
Además de ser una excelente fuente de nutrientes tales como car- polínico, hojas y yemas o nudos cotiledonarios mediante Agro-
bohidratos, ácidos orgánicos, minerales y vitaminas, es posible bacterium tumefaciens, A. rhizogenes, biobalística e inoculación
cultivarlo durante gran parte del año. Por otro lado, crece en directa, para mejorar la calidad postcosecha del fruto, conferir
regiones tanto tropicales como subtropicales; dando un amplio tolerancia a factores abióticos como salinidad y estrés hídrico,
margen a los países productores para mantener el abastecimien- así como resistencia a factores bióticos como virus y fitopatóge-
to del producto durante todo el año. Sin embargo, los produc- nos. Como resultado, se han creado varias plantas transgénicas
tores de melón se enfrentan con problemas ocasionados princi- expresando diferentes características fenotípicas deseables. En
palmente por insectos, bacterias, virus y hongos. Estrategias bio- este trabajo se compila y analiza la información disponible sobre
tecnológicas como la transformación genética de plantas pueden el mejoramiento genético de melón, haciendo énfasis en el desa-
mejorar la tolerancia del melón a estreses bióticos que afectan rrollo de las estrategias utilizadas de manipulación genética con
a la producción, a través de la inserción de genes que ayudan el objetivo de introducir características de interés agronómico.
l mejoramiento genéti- cambios dependían de la variación ge- cesamiento del producto, arquitectura
co ha estado presente nética disponible en las poblaciones de la planta, producción de compuestos
desde que se originó la naturales y de la estabilidad de los nutricionales, y tolerancia a factores
agricultura hace alrededor de 10000 mismos a través de varias generaciones bióticos y abióticos, entre otros (Hod-
años, cuando los seres humanos encon- (Chrispeels y Sadava, 2003). Desde su son, 2005).
traron en el sedentarismo su nueva inicio, el mejoramiento de cultivos ha El desarrollo de las
forma de vida; lo cual generó la nece- buscado responder a requerimientos de técnicas derivadas de la tecnología del
sidad de utilizar nuevos métodos para producción, tales como el manejo de ADN recombinante permite la intro-
abastecerse de alimentos. Así fue plagas y enfermedades, rendimiento y ducción de genes de especies no rela-
cuando el hombre empezó a cruzar calidad del producto cosechado, res- cionadas filogenéticamente; es decir,
plantas y animales para que aportaran puesta a la aplicación de agroquímicos, permite superar las distancias entre los
ciertas características deseadas; los características adecuadas para el pro- acervos genéticos, manifestadas en ba-
PALABRAS CLAVE / Biotecnología / Embriogénesis / Ingeniería Genética / Mejoramiento Genético / Melón / Organogénesis /
Recibido: 24/10/2012. Modificado: 14/03/2013. Aceptado: 25/03/2013.
(continúa)
Medio y condiciones
Tiempo de Medio Tiempo en Medio elongación Tiempo Tiempo Referencia
Cultivar Explante de enraizamiento
desarrollo regeneración (MR) MR (ME) en ME en Men
(Men)
Snake Cotiledones 7 días MS 4 sem Yalcin-Mendi
melon BA 1,0mg·l‑1 et al.,
46KSU IAA 0,25mg·l‑1 2010
Agar 0,75%
Sacarosa 3%
Líneas Nudos MS MS MS (50%) Zhang
hibridas cotiledonarios Agar 0,8% BA 0,5mg·l‑1 Sacarosa 3% et al.
CM15, Sacarosa 3% Sacarosa 3% Agar 0,8% 2011
CM23 BA 1,5mg·l‑1 Agar 0,8%
IAA 0,5mg·l‑1 Fotoperiodo 16h, 25°C
Védrantis Hojas 13 días MS MS 2-3 sem MS Chovelon
BAP 0,2mg·l‑1 BAP 0,2mg·l‑1 Agar 0,8% et al.,
Cotiledones 4 días 2iP 0,2mg·l‑1 GA3 0,1mg·l‑1 Sacarosa 3% 2011
Sacarosa 3% Agar 0,8%
Agar 0,7% Sacarosa 3% Fotoperiodo 16h, 26-28 °C
Cantaluope, Nudos 7 días MS MS MS Ren et al.,
Heneydew cotiledonarios BA 1mg·l‑1 BA 0,01mg·l‑1 Sacarosa 30g·l‑1 2012
ABA 0,26mg·l‑1 Sacarosa 30g·l‑1 Agar 8g·l‑1
IAA 0,8mg·l‑1 Agar 8g·l‑1
Sacarosa 30g·l‑1
Agar 7g·l‑1
MS: medio Murashige and Skoog (1962), sem: semanas, IAA: ácido indol acético, BAP: bencil aminopurina, NAA: ácido naftalenacético, BA:
bencil adenina, 2iP: 2-isopentenil adenina, CuSO4: sulfato de cobre, ABA: ácido absícico, E20: medio E20 (Sauton, 1987), IBA: ácido indolbutíri-
co, B5: medio B5 (Gamborg, 1968), MES: buffer ácido 2-(N-morfolino) etanosulfónico.
Çürük et al. (2005) re- SPS1 en el plásmido PBI121 para trans- raíz, semillas, tallos y polen, siendo la
portaron la transformación genética de formar cotiledones de melón línea M01- transformación genética mediada por A.
los cultivares `Kirkagac 637´ y `Noi Ya- 3 y así suprimir la expresión de la en- tumefaciens y los cotiledones, la meto-
rok´, mediante Agrobacterium utilizan- zima sacarosa fosfato sintasa. Hao et dología y el tipo de tejido más utiliza-
do la cepa EHA105 conteniendo el plás- al. (2011) reportan una metodología dos respectivamente, en los protocolos
mido pME504 con los genes de selec- donde se logra la introducción del con- reportados. En este trabajo de revisión,
ción nptII, bar y uidA, probando diver- tructo en antisentido del gen ACC oxi- ~92% de los eventos de transformación
sos medios y concentraciones de dasa bajo el promotor CaMV35S (libre aquí compilados se realizaron utilizan-
kanamicina. Un trabajo similar fué rea- de marcador de selección) vía introduc- do A. tumefaciens y el 78% de los mis-
lizado por Rhimi et al. (2007) con el ción directa al tubo polínico de melón mos utilizaron cotiledones como ex-
cultivar `Maazoun´ utilizando la cepa cultivar `Hetao´. Chovelon et al. (2011) plante. Más aún, la mayoría de las ca-
GV3101. Nuñez-Palenius et al. (2007) y lograron la transformación de cotiledo- racterísticas manipuladas en los ensayos
Castelblanque et al. (2008) probaron las nes y hojas jóvenes del cultivar `Ve- de transformación genética en melón
cepas de Agrobacterium ABI, AGI-1 y drantis´ utilizando las cepas de A. tu- han sido el mejoramiento en la calidad
AGL0, EHA101 y EHA105 en las varie- mefaciens GV2260, AGL-1, con el plás- y la resistencia a virus. Sin embargo, es
dades de melón `Galia´, `piel de sapo´, mido pBI101 y la cepa LBA4404 con muy claro que todavía es necesario es-
`Vedrantais´ y `PI 161375´, para deter- pBI121. Ambos plásmidos incluyendo el tablecer las condiciones óptimas de
minar el mayor porcentaje de regenera- gen reportero uid A y el de resistencia transformación genética para cada culti-
ción y transformación. En otro estudio, npt II bajo el promotor CaMV35S. Ren var de melón. Lo anterior debido a que
Chovelon et al. (2008) probaron dife- et al. (2012) utilizaron las cepas de A. de 14 reportes al respecto aquí mencio-
rentes tipos de tejidos (hipocotilo y co- tumefaciens EHA105 y LBA4404 con el nados, el 42% se refieren al estableci-
tiledón) de las variedades `Vedrantais´ y vector pCNL56 que incluyen los genes miento de las condiciones óptimas de
`Paul´ con Agrobacterium cepa C58 ex- marcadores nptII y uidA bajo el promo- transformación utilizando vectores o
presando el plásmido pBI101, que inclu- tor del CaMV35S para transformar coti- plásmidos conteniendo únicamente ge-
ye los genes uidA y nptII. Yu et al. ledones de melón líneas `F39´ y `150´ y nes marcadores de selección y/o repor-
(2008) clonaron el gen MAD en antisen- establecer los protocolos de transforma- teros (sin transgen). En la Tabla II se
tido en el vector pBI121 y fue introdu- ción. Rodríguez et al. (2012) generaron listan una serie de distintas condiciones
cido vía directa a cotiledones de melón líneas transgénicas de melón BGV-130 reportadas para la transformación gené-
línea M01-3 utilizando la cepa utilizando hipocotilos y la cepa de A. tica de Cucumis melo L, a partir del
LBA4404 de A. tumefaciens. Wu et al. tumefaciens EHA105 y la estrategia de 2007 a la fecha.
(2009) obtuvieron plantas transgénicas RNA de interferencia para silenciar al
de cv `Silver light´ resistentes al virus gen Cm-elF4E y generar resistencia vi- Resistencia a Virus
del mosaico amarillo del calabacín me- ral.
diante la agroinfección de cotiledones En resúmen, y conside- El primer ensayo de re-
utilizando la cepa LBA4404 contenien- rando lo reportado por Nuñez-Palenius sistencia a virus en cultivares de melón
do el vector pBI2CP3´UTR. Tian et al. et al. (2008), son 47 el número de pro- fue realizado por Yoshioka et al.
(2010) utilizaron la cepa de A. tume- tocolos de transformación genética a (1992), seguido de los trabajos publica-
fciens LBA4404 conteniendo el gen partir de cotiledones, pecíolos, hojas, dos por Fang y Grumet (1993), Gonsal-
ves et al. (1994), Clough y Ham, (1995) et al. (2001) lograron desarrollar la re- plantas transgénicas de cv `Silver light´
y Fuchs et al. (1997). Esta información sistencia contra el virus mosaico de la resistente al virus del mosaico amarillo
ha sido compilada y analizada por Nu- sandia y virus del mosaico amarillo del del calabacín mediante Agrobacterium
ñez Palenius et al. (2008). calabacín a los cultivares `US patent cepa LBA4404 y Rodríguez Hernández
Posteriormente, Kottea- 442´ y `US patent 259´ vía Agrobacte- et al. (2012) obtuvieron plantas transgé-
rachi et al. (2000) trabajaron con el cv rium utilizando el plásmido pBRL3754. nicas con el gen Cm-elF4E silenciado
`Thai Jumbo´ para inducir la resistencia Yalcin-Mendi et al. (2004) confirieron mediante la técnica del RNAi, las cua-
contra el virus de la mancha anular de resistencia contra virus del mosaico les mostraron resistencia a la infección
la papaya (PRV; Papaya Ringspot Vi- amarillo del calabacín a un cultivar ya con los virus amarillo de pepino
rus) mediante el co-cultivo por tres días resistente a cepas 0 y 1 de Fusarium (CVYV), virus de la mancha necrótica
con Agrobacterium conteniendo el plás- oxysporum f. sp. melonis a Cucumis de melón (MNSV), virus de mosaico de
mido pSAI039 que lleva los genes nptII, melo var. inodorus cv `Kirkagaed 637´. sandía Morrocan (MWMV) y virus del
gus y nib (resistencia a PRV). Huttner Además, Wu et al. (2009) obtuvieron mosaico amarillo de calabaza (ZYMV)
The melon (Cucumis melo L.) belongs to the Cucurbitaceae transgenic plants from different melon cultivars using somatic
family, shows a large morphological variation and it is one of embryos, seeds, cotyledons, polinic tube, leaf and buds or coty-
the most important species from the economic point of view. ledonary leaves in early stages of development using Agrobac-
Besides being a rich source of nutrients such as carbohydrates, terium tumefaciens, A. rhizogenes, particle bombardment and
organic acids, minerals and vitamins, it can be grown through- direct inoculation, with the goal to improve the postharvest
out the year. It grows in tropical and subtropical regions, giv- quality, develop tolerance to abiotic stresses like salinity and
ing a wide margin to producing countries to maintain an ad- dehydration, and resistance to biotic stresses such as viruses
equate supply all the year. However, melon producers have to and phytopathogens. As a result, several transgenic plants have
deal with yield reductions due to the attack of insects, bacte- been created showing different desirable phenotypic character-
rias, virus and fungi. Biotechnological strategies such as ge- istics. In this paper the available information about genetic im-
netic transformation can improve the tolerance of this crop to provement of melon is reviewed and analyzed, focusing on the
biotic stresses by the insertion of genes that help in the struggle different strategies of genetic manipulation that had been uti-
against these problems. Efforts have been carried out to create lized with the aim to introduce agronomic important traits.
O melão (Cucumis melo L.) pertence à família das Cucurbi- Tem-se realizado esforços para criar plantas transgênicas a
táceas, possui uma ampla diversidade morfológica e é uma das partir de muitas variedades de melão utilizando embriões so-
espécies mais importantes economicamente no mundo. Além de máticos, sementes, cotilédones, tubo polínico, folhas e gemas
ser uma excelente fonte de nutrientes tais como carboidratos, ou nós cotiledonares mediante Agrobacterium tumefaciens, A.
ácidos orgânicos, minerais e vitaminas, é possível cultivá-lo du- rhizogenes, biobalística e inoculação direta, para melhorar a
rante grande parte do ano. Por outro lado, cresce em regiões qualidade pós-colheita do fruto, conferir tolerância a fatores
tanto tropicais como subtropicais; dando uma ampla margem abióticos como salinidade e estresse hídrico, assim como resis-
aos países produtores para manter o abastecimento do produto tência a fatores bióticos como vírus e fitopatógenos. Como re-
durante todo o ano. No entanto, os produtores de melão se en- sultado, se tem criado varias plantas transgênicas expressando
frentam com problemas ocasionados principalmente por insetos, diferentes características fenotípicas desejáveis. Neste trabalho
bactérias, vírus e fungos. Estratégias biotecnológicas como a se compila e analisa a informação disponível sobre o melhora-
transformação genética de plantas podem melhorar a tolerância mento genético do melão, fazendo ênfases no desenvolvimento
do melão a estresses bióticos que afetam à produção, a través das estratégias utilizadas de manipulação genética com o obje-
da inserção de genes que ajudam a combater estes problemas. tivo de introduzir características de interesse agronômico.