La reacción en cadena de la polimerasa (RCP), conocida
como PCR por sus siglas que se encuentran en inglés (polymerase chain reaction), es una técnica de la biología molecular desarrollada en 1986 por Kary Mullis.Su objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mínimo; en teoría basta partir de una sola copia de ese fragmento original, o molde.
Esta técnica sirve para amplificar un fragmento de ADN;
su utilidad es que tras la amplificación resulta mucho más sencillo identificar, con una probabilidad muy alta, virus o bacterias causantes de una enfermedad, identificar personas (cadáveres) o hacer investigación científica sobre el ADN amplificado. IMPORTANCIA DE LA PRUEBA PCR
Esta técnica se fundamenta en la propiedad natural de
las ADN polimerasas para replicar hebras de ADN, para lo cual se emplean ciclos de altas y bajas temperaturas alternadas. Para separar las hebras de ADN recién formadas entre sí tras cada fase de replicación y, a continuación, dejar que las hebras de ADN vuelvan a unirse para poder duplicarlas nuevamente.
Por lo general, la PCR es una técnica común y
normalmente indispensable en laboratorios de investigación médica y biológica para una gran variedad de aplicaciones. Entre ellas se incluyen la clonación de ADN para la secuenciación, la filogenia basada en ADN, el análisis funcional de genes, el diagnóstico de trastornos hereditarios, la identificación de huellas genéticas (usada en técnicas forenses y test de paternidad) y la detección y diagnóstico de enfermedades infecciosas. CONCEPTOS DEL PCR
SENSIBILIDAD: se refiere a la cantidad mínima de ADN
necesaria para que se produzca la amplificación, es decir, para obtener una banda.
ESPECIFICIDAD: se refiere a la obtención de un solo
producto amplificado. Viene determinada por los oligos y la especificidad con la que se unen al ADN molde.
EFICIENCIA: se refiere a la amplificación máxima que se
puede obtener en un número determinado de ciclos.
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gina de preguntas frecuentes en www.sitioincreible.mx. PROCESO DE LA PRUEBA PCR
El ADN constituye nuestro material genético,
1 pero SARS-CoV-2 no contiene ADN de doble cadena, sino ARN, de una sola cadena. Como las pruebas de PCR solo pueden hacer copias de ADN, primero hay que convertir el ARN en ADN.
El ARN del virus que se extrae de la muestra se
2 purifica y se mezcla con una enzima llamada transcriptasa inversa, que convierte el ARN de una sola cadena en ADN de doble cadena. El ADN vírico se añade a un tubo de ensayo junto con cebadores —secciones cortas de ADN diseñadas para unirse al virus—, nucleótidos — los bloques de construcción que componen el ADN— y una enzima constructora del ADN. La máquina PCR calienta la mezcla. Esto hace 3 que el ADN de doble cadena se desenrede y el cebador pueda unirse al ADN a medida que se enfría, proporcionando un punto de partida para que la enzima constructora de ADN lo copie. Este proceso continúa a través de repetidos calentamientos y enfriamientos hasta que se han creado millones de copias del ADN.
Esto explica cómo la PCR amplifica el código
4 genético del virus, pero no cómo se detecta. Aquí es donde entran los colorantes fluorescentes, añadidos al tubo de ensayo mientras se copia el ADN. Se unen al ADN copiado, lo que aumenta su fluorescencia haciendo que emitan más luz, que permite confirmar la presencia del virus.
La fluorescencia aumenta a medida que se
5 producen más copias y, si cruza un cierto umbral, la prueba es positiva. Si el virus no estaba presente en la muestra, la prueba PCR no habrá hecho copias, por lo que el umbral de fluorescencia no se alcanzará y, en ese caso, la prueba será negativa. LIMITACIONES DEL PCR
Las pruebas de PCR son una forma bastante fiable de
comprobar la existencia de enfermedades infecciosas, sin embargo, también tienen limitaciones.
La primera es que llevan tiempo. Se necesitan unas
pocas horas obtener resultados. Esto implica un límite en la cantidad de pruebas que un solo laboratorio puede llevar a cabo en un día. ¿QUÉ ES EL SARS-COV-2?
Virus que causa una enfermedad respiratoria llamada
enfermedad por coronavirus de 2019 (COVID-19). El SARS-CoV-2 es un virus de la gran familia de los coronavirus, un tipo de virus que infecta a seres humanos y algunos animales.
La infección por el SARS-CoV-2 en las personas se
identificó por primera vez en 2019. Se piensa que este virus se transmite de una persona a otra en las gotitas que se dispersan cuando la persona infectada tose, estornuda o habla.
Es posible que también se transmita por tocar una
superficie con el virus y luego llevarse las manos a la boca, la nariz o los ojos, aunque esto es menos frecuente. Hay estudios de investigación en curso sobre el tratamiento de la COVID-19 y la prevención de la infección por el SARS-CoV-2.
También se llama coronavirus 2019-nCoV y coronavirus
del síndrome respiratorio agudo grave de tipo 2. ¿CÓMO SE PROPAGA?
El virus puede propagarse desde la boca o la nariz de una
persona infectada en forma de pequeñas partículas líquidas que expulsa cuando tose, estornuda, habla, canta o respira. Estas partículas pueden ser desde pequeños aerosoles hasta gotitas respiratorias más grandes.
Puedes contagiarte de COVID‑19 si respiras cerca de una
persona infectada o si tocas una superficie contaminada y, seguidamente, te tocas los ojos, la nariz o la boca. El virus se propaga más fácilmente en espacios interiores o en aglomeraciones de personas. ¿COMO LO PREVENIMOS?
Mantén una distancia de seguridad con otras
personas (de 1 metro como mínimo), aunque no parezca que estén enfermas. Utiliza mascarilla en público, especialmente en interiores o cuando no sea posible mantener el distanciamiento físico. Prioriza los espacios abiertos y con buena ventilación en lugar de los espacios cerrados. Si estás en interiores, abre una ventana. Lávate las manos con frecuencia. Usa agua y jabón o un desinfectante de manos a base de alcohol. Vacúnate cuando sea tu turno. Sigue las directrices sobre vacunación de las autoridades locales. Cuando tosas o estornudes, cúbrete la nariz y la boca con el codo flexionado o con un pañuelo. Si no te encuentras bien, quédate en casa.