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ASIGNATURA : BASES MOLECULARES Y CELULARES DE LA MEDICINA II

CICLO : II
SEMESTRE ACADÉMICO : 2020-II
UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA
“Dr. Wilfredo Erwin Gardini Tuesta”

ACREDITADA POR SINEACE


RE ACREDITADA INTERNACIONALMENTE POR RIEV

BASES MOLECULARES Y CELULARES DE LA


MEDICINA II

DOCENTES RESPONSABLES DE LA ASIGNATURA


SEDE LIMA : NÉLIDA MARÍN HUACHACA
FILIAL ICA : ELVIS PERALTA ROLDAN
FILIAL CHINCHA : JOSÉ ANTEZANA

DOCENTE EXPOSITOR : ELVIS PERALTA ROLDAN


• SEMANA 15
• PRACTICA
• PCR
• Aplicación en el diagnóstico del COVID-19
• .

La prueba para la detección del coronavirus (SARS-CoV-2) por PCR (prueba molecular)es una
prueba de laboratorio que puede identificar el virus que provoca el COVID-19 (coronavirus)
en las secreciones de la parte superior de la garganta por detrás de la nariz (exudado
nasofaríngeo) y en la garganta posterior a la boca (orofaríngeo). Se realiza con un hisopo.

La comunidad médica considera la detección del coronavirus por PCR como el estándar de
oro.
La prueba molecular, también conocida como la prueba PCR, es una prueba de diagnóstico
que detecta el material genético del virus que causa el COVID-19 usando una técnica de
laboratorio llamada reacción en cadena de la polimerasa (PCR).
La PCR (prueba molecular)
Es una técnica de laboratorio comúnmente usada en biología
molecular para generar una gran cantidad de copias de ADN
mediante un proceso llamado "amplificación".
La amplificación exponencial mediante PCR en transcripción
reversa supone una técnica altamente sensible.
Es decir, que puede detectar un número de copias de ARN muy
bajo, o, en términos simples, es eficaz encontrando las infecciones
Tipo de muestra requerida
• El personal de laboratorio deberá obtener dos muestras: una por la nariz y otra por la
boca. La primera será por el tracto respiratorio superior, al introducir un primer hisopo por
la cavidad nasal realizando movimientos rotatorios haciendo presión sobre las paredes
de la fosa nasal.
• Introduciremos un segundo hisopo por la boca obteniendo la muestra de la faringe
posterior. El personal del laboratorio colocará hisopos en un medio de transporte viral.
La prueba molecular es considerada altamente precisa. Para el caso de la PCR con una muestra
obtenida de la manera adecuada la sensibilidad de la prueba es mayor al 99%. La sensibilidad
describe qué tan bien una prueba puede detectar la enfermedad en personas infectadas.

La especificidad de la prueba es cercana al 100%. La especificidad describe qué tan bien una
prueba puede identificar que no existe la enfermedad en personas no infectadas. Es decir, ante
un resultado positivo es altamente probable que el paciente esté contagiado.
se basa en las
características de
estabilidad al calor de
una enzima polimerasa

La PCR, cuyo uso es


común y rutinario en
los laboratorios de
Microbiología de
hospitales, centros
de investigación y
universidades

Al realizar una prueba de


diagnóstico mediante PCR, lo que
permite detectar es un fragmento
del material genético de un
patógeno o microorganismo.
1. Las muestras llegan al laboratorio
Todas las muestras llegan en un triple contenedor para evitar
derrames.
El personal del laboratorio recepciona las muestras en la zona
de pre analítica y las distribuye en los equipos de
automatización.
2. Se inactiva el virus
• En la mayoría de las muestras biológicas destinadas a la detección del
SARS-CoV-2 es necesario inactivar el virus antes de procesarlo. Si no es
preciso hacerlo, las muestras pasan directamente a los termocicladores,
unas máquinas que realizan de manera automática todo el proceso. Para
inactivar al virus se expone a la muestra a una temperatura de 96 grados
durante un periodo de tiempo de unos 10-15 minutos (si se dejara más
tiempo del conveniente se mataría el virus y no se podría analizar)
3.Se extrae el material genético

• Una vez inactivado el virus, las muestras se llevan al laboratorio


molecular, donde se extrae el material genético (ARN) de la muestra
para su análisis.

• Este proceso se puede hacer de forma manual (durante unos 25


minutos) o automática (a través de los termocicladores), si el virus ya
viene inactivado de origen. “Actualmente hay medios de recogida de
muestras que ya contienen un inactivador y permitan pasar directamente
a la extracción.
4. El equipo de pre analítica distribuye las
muestras en los equipos
• La técnica molecular PCR es laboriosa, y por tanto lenta. Una vez introducidas
manualmente las muestras biológicas en los termocicladores, que contienen sus
propios reactivos, se produce la reacción en cadena de la polimerasa, conocida
como PCR por sus siglas en inglés (polymerase chain reaction).

• El objetivo es obtener un gran número de copias del material genético -


sometiendo a la muestra a distintas temperaturas- para amplificar fragmentos de
este ARN y de este modo detectar de un modo más sencillo la presencia del
virus. Cuando la reacción es positiva significa que hay presencia de virus en la
muestra y por tanto la persona está infectada.
5. Se interpretan los resultados
Figura. Los intervalos de tiempo estimados y las tasas de detección viral se basan en datos de varios informes publicados.
Debido a la variabilidad en los valores entre los estudios, los intervalos de tiempo estimados deben considerarse
aproximaciones y la probabilidad de detección de infección por SARS-CoV-2 se presenta de forma cualitativa. a. La
detección solo ocurre si los pacientes reciben un seguimiento proactivo desde el momento de la exposición. b. Es más
probable que registre un resultado negativo que positivo de PCR de hisopo nasofaríngeo.
https://www.youtube.com/watch?v=ThG_02miq-4
REVISTA

• https://scielo.conicyt.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0716
-10182020000300276&lng=es&nrm=iso&tlng=es

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