Escuela N° 4-062 “Prof. J. B.

Albornoz de Cortes”

AREA TECNICA – QUÍMICA ANALÍTICA INSTRUMENTAL

Prof. Carlos Rossetti

TRABAJO PRACTICO N° 6
DETERMINACION DE INDICE DE POLIFENOLES TOTALES

 OBJETIVOS:
Determinar índice de refracción de polifenoles en vinos, cervezas y sidras.
Preparar soluciones. Realizar los cálculos pertinentes para determinar el IPT de las muestras asignados.

 MARCO TEORICO:
La técnica se basa en la actividad óptica específica del anillo fenólico, en el sector ultravioleta del espectro, en
extracto de los hollejos. Los polifenoles totales se estiman como índice de polifenoles totales (IPT) a través de la
medición espectrofotométrica a una longitud de onda de 280 nm.
Se considera que los vinos jóvenes con valores de este índice o IPT, menores a 30 unidades de absorbancia (u.A.)
tienen poca capacidad de envejecimiento (Zoecklein et al., 1995), los vinos tintos con suficiente concentración
fenólica para permitir su envejecimiento, suelen tener valores mayores de 40 u.A. y los vinos tintos Premium
jóvenes entre 45 y 65 u.A. Durante el primer año, la disminución normal de la absorbancia a 280 nm es del 10 al
20%.

Cálculo de índice IPT:

IPT= A*100

Ref.: Análisis 16 del Manual de análisis del INV – Técnicas de Robello (EVDB)

 ANÁLISIS DE LABORATORIO - PRÁCTICA

 MATERIALES GENERALES:
 Espectrofotómetro UV (PES)
 Cubetas de cuarzo de 1 cm de paso óptico, para lectura en espectrofotómetro
 Jeringa y porta filtro plástico con membrana de porosidad 0,45 μm (diámetro 2,5 cm)

 MATERIALES POR COMISIÓN:  REACTIVOS:

 2 Vasos de precipitados de 50ml  Agua destilada
 2 matraz de 25ml  Vino tinto y blanco, cerveza rubia, roja y negra,
 1 Pipeta DA de 1ml, de 5 ml y de 25 ml sidra brut y sec
 1 Pipeta graduada de 5 ml con Propipeta  Papel absorbente
 1 Piceta  Papel de filtro 0,45 μm (diámetro 2,5 cm)
 Pipetero  Alcohol etílico 96°
 Micropipeta de 10 a 100 L

 MÉTODO
Encender el espectrofotómetro UV-VIS, a 280 nm, 30 minutos antes de la lectura para estabilizar la lámpara de
deuterio (D2).
Preparación de la muestra:
- Diluir 1:100 la muestra asignada con agua destilada, volumen a preparar 50ml
- Filtrar 2 ml de la muestra diluida, con filtro plástico con membrana de celulosa de porosidad 0,45 μm y
colocarlo en la cubeta.
- Calibrar, (utilizar para el blanco lectura) otra cubeta con agua destilada.
- Colocar la muestra en una cubeta de cuarzo de 1 cm de paso óptico y leer en espectrofotómetro a una
longitud de onda de 280 nm.
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Prof. Carlos Rossetti

 TÉCNICA
1. Calibración en Blanco: Asignamos el cero del espectrofotómetro utilizando agua destilada.
2. Muestra 1 (Vino tinto industrial): preparar la disolución según la técnica indicada. Realizar lectura a 280 nm
de longitud de onda y registrar.
3. Muestra 2 (Vino blanco industrial): preparar la disolución según la técnica indicada. Realizar lectura a 280
nm de longitud de onda y registrar.
4. Muestra 3 (Vino tinto artesanal): preparar la disolución según la técnica indicada. Realizar lectura a 280 nm
de longitud de onda y registrar.
5. Muestra 4 (Cerveza rubia industrial): preparar la disolución según la técnica indicada. Realizar lectura a 280
nm de longitud de onda y registrar.
6. Muestra 5 (Cerveza roja industrial): preparar la disolución según la técnica indicada. Realizar lectura a 280
nm de longitud de onda y registrar.
7. Muestra 6 (Cerveza negra industrial): preparar la disolución según la técnica indicada. Realizar lectura a 280
nm de longitud de onda y registrar.
8. Muestra 8 (Sidra brut industrial): preparar la disolución según la técnica indicada. Realizar lectura a 280 nm
de longitud de onda y registrar.
9. Muestra 9 (Sidra Sec industrial): preparar la disolución según la técnica indicada. Realizar lectura a 280 nm
de longitud de onda y registrar.
10. Elaborar informe de la práctica donde consten los siguientes aspectos:
10.1 Pasos realizados para preparar una solución, técnica y calibración del PES.
10.2 Elaborar una Tabla comparativa con los datos obtenidos con cada muestra y el valor IPT obtenido.
10.3 Presentar el informe para la próxima clase.