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ALCIDES CARRIÓN”
FACULTAD DE ODONTOLOGÍA
CURSO HISTOLOGÍA GENERAL Y
ESTOMATOLÓGICA
GUÍA DE PRÁCTICA
SOBRE:
UNIONES CELULARES
AUTOR:
Mg. Ricardo Wagner CABEZAS NIEVES
CONTENIDO Pág.
INDICE 2
INTRODUCCIÓN 3
DISPOSICIONES GENERALES A LOS ALUMNOS 4
OBJETIVOS 5
FUNDAMENTO TEORICO 5
INSTRUMENTOS y MATERIALES 17
PROCEDIMIENTOS 17
OSERVACIONES 25
CONCLUSIONES 25
RECOMENDACIONES 25
BIBLIOGRAFÍA 26
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INTRODUCCIÓN
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DISPOSICIONES GENERALES PARA LOS ALUMNOS
1. Presentarse a la hora exacta, fijada para la práctica de su grupo, de acuerdo a la
distribución horaria publicada con anterioridad. Habrán cinco minutos de
tolerancia, pasados los cuales, serán considerados FALTOS.
2. EL USO DE LENGUAJE SOEZ es causal de separación de la práctica y
calificación de CERO (00)
3. La permanencia en el Laboratorio es con su respectivo mandil o chaqueta, de no
tenerlo, tendrá que retirarse del laboratorio.
4. La asistencia es OBLIGATORIA; ya que no habrá EXAMEN PRACTICO
PARCIAL, es decir la calificación es en cada semana, la falta no justificada y
visada se le calificará con CERO (00) para esa semana, el límite de faltas está
estipulado en el silabo.
5. Deberá contar con su respectiva GUÍA DE PRÁCTICA. Deberá dibujar cada
una de las estructuras cito ó histológicas a observar en el desarrollo de las
mismas, a menor y mayor aumentos (10X y 40X); también con el desarrollo de
los cuestionarios elaborados para cada capítulo.
6. La Guía debe ser presentada debidamente al día, cada vez que lo solicite el
profesor. El no presentarla, equivale a obtener un calificativo de CERO (00).
7. Se realiza una evaluación de práctica a la semana, la cual debe ser rendida en la
fecha fijada para su respectivo grupo. NO HAY CAMBIOS DE GRUPOS UNA
VEZ INICIADA LAS PRACTICAS.
8. El sistema de calificación es de acuerdo a lo estipulado en el silabo del curso.
9. NO HAY EXAMEN SUSTITUTORIO, NI DE APLAZADO DE PRACTICAS.
10. No se permite abandonar el laboratorio, estando en pleno desarrollo de prácticas,
salvo permiso expreso del docente.
11. La INASISTENCIA DEBIDAMENTE JUSTIFICADA a uno de las prácticas,
debe ser evaluada por el profesor; quiénes determinarán la solución respectiva.
El plazo para presentar la justificación de inasistencia es de 48 horas después de
producida la falta.
12. Toda situación no contemplada en las presentes disposiciones, se resolverá en el
momento respectivo, por el docente.
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UNIONES CELULARES, TEJIDO EPITELIAL
I. OBJETIVOS:
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MICROSCOPIA DE LUZ.-
El microscopio de luz puede ser simple, si está constituida por un solo lente y es
compuesto, cuando posee dos o más lentes; pueden utilizar luz natural o incorporada
(eléctrica).
Existen varios tipos de microscopio de luz, entre los que mencionamos: de campo claro
y campo oscuro; el de contraste de fase, de fluorescencia, luz polarizada y el
estereoscópico.
Posee tres sistemas:
A) MECANICO: - Base o estativo - Brazo o columna
- Platina (con pinzas o carro) - Revólver
- Macro y Micrométricos -Cremallera
- Cabezal
B) OPTICO: - Condensador - Objetivos
- Prisma - Oculares
C) LUZ: - Fuente de luz - Riostato
- Filtros - Diafragma
MICROSCOPIA ELECTRONICA.-
El microscopio electrónico, denominado así por emplear electrones en su poder
de resolución para la observación ultraestructural celular o histológica. Gracias a este
invento, conocemos cómo son las diferentes organelas intracitoplasmáticas, los
diferentes tipos de uniones celulares, la bicapa lipídica que conforma la membrana
celular; las superficies epiteliales y sus modificaciones de acuerdo a la función que
realizan y , si se trata de microorganismos que invaden células o tejidos, su ubicación y
mecanismo lesional
Existen dos tipos de Microscopio Electrónico: El de Transmisión (MET) y el de
Barrido (MEB).
El MET, permite observar la ultraestructura interna tridimensional de un
espécimen. Su poder de resolución para especimenes biológicos es de 0.5 a 1.0 nm.
El MEB, permite el estudio de las superficies de cualquier espécimen, su poder
de resolución es de 10 á 20 nm. , con un aumento efectivo hasta de 50,000 diámetros.
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El resultado de estas visualizaciones con el ME, se obtienen en fotografías,
denominadas MICROELECTROFOTOGRAFIAS.
Desarrolle en hoja adicional la diferenciación entre el microscopio de luz y el
electrónico.
Interpretación de los cortes microscópicos.
La cualidad de una imagen dependerá no sólo de la capacidad de la lente para la
amplificación, sino también de su resolución, que es la capacidad para demostrar que
dos objetos definidos están separados por una distancia determinada. La calidad de una
lente dependerá de lo cerca que se aproxime su resolución al límite teórico de 0.25 µm,
que está determinado por la longitud de onda de la luz visible.
Existen diversos tipos de microscopios de luz, según el tipo de luz que emplean como
fuente luminosa y la manera en que la aprovechan. Sin embargo, la mayoría de los
estudiantes de histología deben reconocer sólo imágenes obtenidas de microscopia de
luz compuesta, microscopia de transmisión de electrones y microscopia de barrido de
electrones; por tanto, no se hablará de los otros tipos de microscopia.
Interpretación de los cortes microscópicos
Una de las capacidades histológicas más difícil, frustrante y consumidora de tiempo es
el aprender a interpretar la manera en que se vería en tres dimensiones la imagen de un
corte bidimensional. Si el lector se imagina una manguera de jardín ondulada y, a
continuación, efectúa los cortes delgados indicados en la figura 1-2e de esa manguera se
pondrá de manifiesto que el objeto tridimensional no se discierne de manera necesaria a
partir de cualquiera de las ilustraciones bidimensionales. Sin embargo, al ver todos los
cortes efectuados en la manguera ondulada, se puede reconstruir de manera mental la
imagen tridimensional correcta.
Procedimientos avanzados de identificación
Histoquímica
Se pueden localizar los constituyentes químicos específicos de los tejidos y las células
por métodos de histoquímica y citoquímica. Estos métodos se valen de la actividad
enzimática, la reactividad química y otros fenómenos fisicoquímicos relacionados con
el constituyente de interés. Las reacciones buscadas se vigilan a partir de la formación
de un precipitado insoluble que adopta cierto color. A menudo la histoquímica se
efectúa sobre tejidos congelados, y se puede aplicar tanto a la microscopia de luz como
a la microscopia electrónica.
Una reacción histoquímica frecuente recurre al reactivo de ácido peryódico de Schiff,
que forma un precipitado de color magenta con moléculas ricas en glucógeno y
carbohidratos. Con objeto de garantizar que la reacción sea específica para el
glucógeno, los cortes consecutivos se tratan con amilasa. Por tanto, los cortes que no se
han tratado con esta última manifiestan un depósito de color magenta, en tanto que los
tratados con amilasa carecerán de coloración en la misma región.
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Interpretación de las imágenes microscópicas:
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TECNICA HISTOLOGICA
Es el conjunto de procedimientos que se utilizan para el estudio microscópico de
células, tejidos ú órganos. Puede ser: “IN-VIVO” ó “POST-MORTEM”
ESTUDIO “IN-VIVO”:
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orgánicas, o fragmentos de tejidos de diferentes órganos obtenidos por Biopsias o
procedimientos quirúrgicos).
ESTUDIO “POST – MORTEM”:
Este examen requiere necesariamente, de la muerte de un ser vivo, para pode
obtener muestras de diferentes tejidos orgánicos, para su estudio microscópico. En el
caso de seres humanos fallecidos (cadáveres) al procedimiento se le denomina
NECROPSIA.
Las muestras de tejidos obtenidos in-vivo ó post-mortem, tienen un adecuado
procedimiento histológico, que se denomina PROCEDIMIENTO
HISTOTECNOLOGICO.
PROCEDIMIENTO HISTOTECNOLOGICO:
ARTEFACTO
Un artefacto se define como cualquier alteración indeseada introducida en una muestra
de tejido debido a las técnicas de procesamiento que se realizan para su observación.
Pueden ser espacios sin tejido, roturas, pliegues, colores anormales, precipitados,
burbujas de aire, etcétera. En algunas ocasiones son inevitables, pero en la mayoría de
los casos son consecuencia de un mal procesamiento histológico. Reconocer estas
alteraciones es esencial para una buena interpretación y diagnosis de la muestra,
especialmente si tratamos con muestras patológicas.
Los artefactos se pueden introducir en cualquier paso del proceso histológico, desde la
toma de la muestra hasta el montaje para su observación. Vamos a describir los
artefactos cronológicamente según el momento de la técnica histológica donde pueden
ser introducidos: obtención de la muestra, fijación, inclusión, corte, tinción y montaje.
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1) prevenir los fenómenos de autolisis y ataque bacteriano.
2) lograr que los tejidos o células sean lo más parecido posible al estado vivo y que,
idealmente, las pequeñas moléculas no se pierdan.
3) evitar que se produzcan cambios en el aspecto o volumen del material durante los
procesos subsecuentes.
4) permitir la claridad de tinción de las estructuras.
Aunque los efectos conservantes de algunas sustancias, tales como el mercurio y sus
sales,
ya se conocían desde la época de Hipócrates, no ha sido hasta mediado el siglo
diecinueve cuando se comenzó de forma sistemática su investigación. Gracias al
desarrollo industrial y al incremento de nuestros conocimientos de químico-física se ha
producido un importante avance en el conocimiento de nuevas sustancias y de su
mecanismo de acción. Las técnicas de fijación podemos dividirlas en físicas y químicas
2.- DESHIDRATACION: Consiste en someter al tejido a la acción de alcoholes de
menor a mayor grado, es decir, de 75º a 100º. La deshidratación pretende sustituir toda
el agua existen el los tejidos por alcoholes. Se procura hacerlo de la forma más delicada
posible, para evitar artefactos en la muestra, por lo que se
utilizan concentraciones crecientes de alcoholes.
3.- BAÑO DE PARAFINA: Se somete el tejido a la acción de parafina líquida para
darle mayor consistencia.
4.- INCLUSIÓN (Formación Del Bloque e Parafina): Se forma un bloque de parafina,
que contenga en uno de sus lados el tejido procesado.
5.- CORTE EN MICROTOMO: Después de tener sumamente sólido el bloque de
parafina, se somete a acción del Micrótomo, para obtención de cortes en micras (3 á 5
micras) que se extienden adecuadamente sobre una lámina portaobjeto, previamente
cubierta con albúmina para que se adhiera bien la muestra incluida en parafina.
6.- COLORACION: Extendida la muestra en el porta-objeto, se elimina la parafina con
acción del Xilol y se procede a colorear, con HEMATOXILINA-EOSINA, que es la
coloración fundamental para todo tejido y que tiene sus respectivos pasos o tiempos.
CITOLOGIA
Todos los organismos vivos tienen su unidad biológica y funcional, que es la
CELULA y que a su vez, está constituida por: Membrana citoplasmática, Citoplasma y
Núcleo, pero que además presenta diferentes formas.
ESTRUCTURA CELULAR:
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1.- MEMBRANA CITOPLASMATICA ó PLASMALEMA:
Considerada como una membrana limitante entre el interior y el exterior celular, es
asimétrica y dinámica. A la microscopía electrónica, se considera hoy en día que está
constituida por una capa bimolecular de fosfolípidos, en la que se intercalan unidades
globulares de proteína a intervalos variables para formar un mosaico con la capa de
lípidos (“modelo de mosaico fluido”) y que tiene zonas hidrófobas e hidrófilas.
Funciones: - Conserva la integridad célula
Regula el paso de sustancias del interior y del exterior (Difusión pasiva, difusión
facilitada,
Transporte activo, transporte pasivo).
Posee receptores, que permite reconocer antígenos, células extrañas y células alteradas.
Regula las interacciones celulares
Establece un sistema de transporte molecular específico.
Realiza la transducción de señales físicas y/o químicas en diversos procesos
intercelulares.
2.- CITOPLASMA:
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3.- NUCLEO:
Estructura redondeada o alargada (de acuerdo a la forma celular) por lo general es único
y en ocasiones múltiple. Está presente en todas las células, con excepción de los
eritrocitos maduros y las plaquetas. Es siempre basófilo, por el contenido de ácidos
nucleicos (ADN y ARN). Está formado por una envoltura o membrana nuclear y el
carioplasma ó nucleoplasma que contiene la cromatina nuclear nucléolo.
MATERIALES
Materiales.- Colores, regla, lapicero de colores rojo, azul, negro, compas
PROCEDIMIENTOS:
CITOLOGIA
LÁMINA 01
Muestra : encuentra las estructuras correspondientes
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Lamina 1
Reconoce la membrana plasmática y núcleo celular
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OBSERVACIONES:
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CONCLUSIONES:
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RECOMENDACIONES:
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BIBLIOGRAFÍA:
Fuentes Bibliográficas:
Fuentes Electrónicas:
1.http://bibliotecas.unr.edu.ar/muestra/medica_panamericana/9786077743019.
pdf
2. http://www.apoyo.usac.gt/Cavidad%20Bucal.pdf
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