Direccin General de Educacin

Tecnolgica Industrial
Centro de Bachillerato Tecnolgico
Industrial Y De Servicios No. 82

Laboratorio de anlisis clnicos

Glucosa oxidasa/ peroxidasa
Arellano Gutirrez Alex Rodrigo
Garcia Gutirrez Jocelyn
Prez Quinto Alix Andrea
Materia: Realiza anlisis citoqumicos.
QFB. Rodrigo Suarez Ros
Semestre: IV

Grupo: L

Taxco de Alarcn Guerrero a 26 de mayo de

2016.

Introduccin.
Glucosa.
La glucosa es un monosacrido con frmula molecular C6H12O6. Es una hexosa,
es decir, contiene 6 tomos de carbono, y es una aldosa, esto es, el
grupo carbonilo est en el extremo de la molcula (es un grupo aldehdo). Es una
forma de azcar que se encuentra libre en las frutas y en la miel. Su rendimiento
energtico es de 3,75 kilocaloras por cada gramo en condiciones estndar. Es
un ismero de la fructosa, con diferente posicin relativa de los grupos -OH y =O.
La aldohexosa glucosa posee dos enantimeros, si bien la D-glucosa es
predominante en la naturaleza. En terminologa de la industria alimentaria suele
denominarse dextrosa (trmino procedente de glucosa dextrorrotatoria)3 a este
compuesto.
Glucosa oxidasa
La enzima glucosa oxidasa (GOx) (EC 1.1.3.4) es una oxidorreductasa que
cataliza la oxidacin de la glucosa para formarperxido de hidrgeno y D-glucono-lactona. En las clulas contribuye a degradar los azcares hacia
sus metabolitos.
La glucosa oxidasa es ampliamente utilizada para la determinacin y
cuantificacin de glucosa libre en los fluidos biolgicos, tales como sangre y orina,
en materia prima vegetal y en la industria de los alimentos. Tiene adems muchas
aplicaciones
en biotecnologa,
y
se
utiliza
para
la
fabricacin
de biosensores sensibles a glucosa.1 Usualmente se extrae de Aspergillus niger.

El anlisis de glucosa en sangre mide la cantidad de glucosa (el tipo de azcar

ms importante en el cuerpo) en una muestra de sangre.
La glucosa es la principal fuente de energa del organismo. Nuestros cuerpos
descomponen los alimentos en glucosa y otros nutrientes, que posteriormente son
absorbidos por el torrente sanguneo en el tracto gastrointestinal. Los niveles de
glucosa en sangre aumentan despus de haber ingerido alimentos y
desencadenan la produccin de una hormona denominada "insulina" en el
pncreas, la cual se libera en el torrente sanguneo.
La insulina acta como una llave que abre las puertas de las clulas y permite la
entrada de la glucosa. Sin insulina, la glucosa no puede penetrar en las clulas y
permanece en el flujo sanguneo. Como consecuencia, los niveles de azcar en
sangre son mayores de lo normal.
Un alto nivel de azcar en sangre (hiperglucemia) es un motivo de preocupacin
ya que, de no tratarse, puede causar problemas de salud tanto a corto plazo (sed
insaciable, necesidad frecuente de orinar y cansancio) como a largo plazo (daos
de los rganos internos y nerviosos). Un nivel de azcar en sangre muy bajo es
tambin preocupante ya que suele causar sntomas como transpiracin, temblores
y mareos.
La diabetes es la causa ms comn del aumento anormal del azcar en la sangre.
La gente que sufre de diabetes no puede generar o responder a la insulina
correctamente. Esto significa que deben controlar muy de cerca los niveles de
glucosa y seguir el plan que le indica el mdico para controlar su enfermedad, el
cual incluye dieta, medicamentos (como inyecciones de insulina) y ejercicio fsico
para mantener el azcar en sangre dentro de un nivel normal.
Fundamento terico.
La glucosa presente en la muestra origina, segn las reacciones acopladas
descritas a continuacin, un complejo coloreado que se cuantifica por
espectrofotometra.

Materiales y mtodos.
Material.

Muestras: Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estndar. El

suero o plasma deben separarse de los elementos celulares lo antes
posible para evitar la glucolisis. La adicin de fluoruro sdico a la muestra
de sangre previene la glucolisis. La glucosa en suero o plasma es estable 5
das a 2-8C. Los anticoagulantes como la heparina, EDTA, oxalato o
fluoruro no interfieren.
Analizador, espectrofotmetro o fotmetro para lecturas a 500 20 nm
Reactivo: Fosfatos 100 mmol/L, fenol 5 mmol/L, glucosa oxidasa > 10
U/mL, peroxidasa > 1 U/mL, 4-aminoantipirina 0,4 mmol/L, pH 7,5 S.
Patrn de Glucosa/Urea/Creatinina. Glucosa 100 mg/dL (5,55 mmol/L), urea
50 mg/dL, creatinina 2 mg/dL. Patrn primario acuoso
Pipetas
Cubetas
Tubos de ensaye

Mtodo.
Preparacin: Su mdico le dir si debe realizar algn tipo de preparacin especial
para este anlisis. A veces, los nios deben ayunar (no ingerir ningn alimento o
bebida unas 8 horas antes de la prueba). Esto es lo que se conoce como "anlisis
de azcar en sangre en ayunes". Otras veces, los mdicos querrn medir los
niveles de azcar en la sangre en ciertos momentos, como por ejemplo despus
de una comida.
1. Atemperar el Reactivo a temperatura ambiente.
2. Pipetear en tubos de ensayo:

3. Agitar bien e incubar los tubos durante 10 minutos a temperatura ambiente

(16-25C) o durante 5 minutos a 37C.
4. Leer la absorbancia (A) del Patrn y de la Muestra a 500 nm frente al
Blanco. El color es estable durante al menos 2 horas.

Clculos
La concentracin de glucosa en la muestra se calcula a partir de la siguiente
frmula general: Si se utiliza para calibrar el Patrn de Glucosa suministrado:

Valores de referencia.

Estos valores se dan nicamente a ttulo orientativo; es recomendable que cada

laboratorio establezca sus propios intervalos de referencia.
Resultados.

Estudio: Determinacin de Glucosa Oxidasa.

Nombre del paciente: Daeli Aleman.
Edad: 18 aos.
Fecha: 23 de Mayo del 2016
Resultado: 99.22 mg/dl

Absorbancia:

Estndar: 0.270nm
Muestra: 0.268nm
0.268 nm 0.270 nm 100 mg/dl=99.22 mg/dl

Anlisis de los resultados

El valor de referencia de nios y adultos se encuentra entre 70-105 mg/dl, lo
que significa que nuestra paciente se encuentra en niveles normales de
glucosa.

Conclusin.
El anlisis de glucosa en sangre se solicita para medir la cantidad de azcar
presente en la sangre. Se puede llevar a cabo como parte de un examen fsico de
rutina, para detectar la diabetes tipo 1 y tipo 2, identificar la existencia de diabetes
gestacional durante el embarazo (los niveles altos de glucosa pueden afectar la
salud de la madre y del beb).
Los anlisis de glucosa (tanto los de autocontrol en el hogar como los que se
hacen en el consultorio del mdico) en una persona con diabetes son una parte
importante de un buen plan de control de la enfermedad.
Visin del equipo.
Fue una prctica sencilla, pero con la que debemos tener mucho cuidado debido a
que podemos entregar un resultado alterado, por lo cual debemos seguir paso a
paso el procedimiento de esta prueba para entregar un resultado exacto y
confiable.
Bibliografa.
http://kidshealth.org/es/parents/test-glucose-esp.html#
https://prezi.com/xyznpxwcci8e/determinacion-y-analisis-de-glucosa-ensangre-por-espectrof/
http://es.slideshare.net/PauloGranda10/determinacin-de-glucosa-ensangre
http://www.biolinker.com.ar/productos/PDF_BIO/11538%20Glucosa.pdf