HOJA DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA

Tema: Análisis glucosa. colorimétrico enzimático

Objetivos:

Objetivo general

 Calcular la cantidad de glucosa en el suero sanguíneo utilizando el método GOD-

PAP/TRINDER.

Objetivos específicos

 Emplear de manera adecuada las técnicas destinadas a evaluar la concentración de

glucosa en el suero sanguíneo.

 Identificar distintas patologías a través de las variaciones en los resultados de la

concentración de glucosa en el suero sanguíneo.

Reactivos y Materiales:
EQUIPOS, MATERIALES Y OTROS IMPLEMENTOS
Analizador de química sanguínea Tubos de ensayo
Baño María Gradillas para tubos de ensayo
Algodón Pipetas Automáticas
Torniquetes Jeringuillas 5 cc
Alcohol antiséptico Centrifuga

Marco teórico:
La cuantificación precisa de la concentración de glucosa en suero sanguíneo es esencial para

el diagnóstico y monitoreo de trastornos metabólicos, especialmente en el contexto de

enfermedades como la diabetes. Uno de los métodos más confiables y ampliamente utilizados

para este propósito es el análisis colorimétrico enzimático de la glucosa, basado en reacciones

específicas que permiten una medición cuantitativa. El método colorimétrico enzimático utiliza

la enzima glucosa oxidasa para catalizar la oxidación de la glucosa a ácido glucurónico y

peróxido de hidrógeno. A su vez, el peróxido de hidrógeno reacciona con una segunda enzima,

la peroxidasa, generando un compuesto coloreado, típicamente quinoneimina, cuya intensidad

se correlaciona con la concentración de glucosa presente. (1)

La medición de la concentración de glucosa se realiza mediante un espectrofotómetro que

cuantifica la absorbancia del compuesto coloreado a una longitud de onda específica. La

intensidad de la absorbancia está directamente relacionada con la concentración de glucosa

presente en la muestra. (1,2)

Este método se utiliza ampliamente en el ámbito clínico para el monitoreo de enfermedades

como la diabetes, donde el control preciso de los niveles de glucosa es crucial. Además, la

variación en los resultados obtenidos puede proporcionar indicios valiosos sobre la presencia

de ciertas patologías, permitiendo una rápida identificación y tratamiento. (2)

Gráfico:

Figura 1
Centrifugación de las muestras de
sangre
Figura 2
Obtención del suero

Figura 3
Preparación de la muestra aplicando el
reactivo correspondiente

Figura 4

Colocación de las muestras a baño María

 Figura 5
Muestra en el espectrofotómetro

Procedimiento:

a. Extraer una muestra de sangre mediante una jeringuilla de 3 cc.

b. Permitir que la muestra repose durante 15 minutos a temperatura ambiente o durante

10 minutos en un Baño María.

c. Someter la muestra a centrifugación durante 5 minutos para separar el suero.

d. Preparar el blanco, el estándar y la muestra

 Incubar los tubos destinados al blanco, estándar y muestra durante 10 minutos

a 37 °C.

 Dejar reposar a temperatura ambiente durante 5 minutos.

 Medir en el espectrofotómetro a una longitud de onda de 505 nm.

 Cálculos y Resultados:

∆ 𝐴 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
Concentración de glucosa=100 x ∆ 𝐴 𝑆𝑇𝐷

0.350
Concentración de glucosa= 100 x 0.272

Concentración de glucosa= 128 mg/dl

Observaciones:

La concentración de glucosa medida en 128 mg/dL mediante el método colorimétrico

enzimático indica la cantidad de glucosa presente en la muestra de suero sanguíneo analizada.

Esta cifra se encuentra dentro de un rango considerado normal para los niveles de glucosa en

sangre en adultos en ayunas. Sin embargo, la interpretación precisa de este resultado dependerá

de diversos factores, como el contexto clínico del individuo y los objetivos específicos del

análisis. Se sugiere comparar este valor con los rangos de referencia establecidos por las pautas

médicas para evaluar si se encuentra en niveles normales o si podría indicar alguna condición

médica, como la diabetes. Además, es crucial considerar otros factores clínicos y realizar un

análisis integral para obtener una evaluación más completa de la salud metabólica del

individuo.

Conclusiones:

En conclusión, el método colorimétrico enzimático destinado al análisis de glucosa en suero

sanguíneo se posiciona como una herramienta clínica indispensable, resaltando por su

exactitud, velocidad y aplicaciones relevantes en el diagnóstico y seguimiento de afecciones

como la diabetes. La creación de una curva de calibración y la corrección del blanco son etapas

fundamentales para la interpretación precisa de los resultados, permitiendo una evaluación

cuantitativa confiable de las concentraciones de glucosa. La simplicidad de su procedimiento

y su capacidad para identificar variaciones incluso en niveles bajos de glucosa respaldan su

importancia en entornos clínicos, facilitando la obtención de información puntual y precisa

para la atención médica.

Integrantes:

 Guanoluisa Acero María Rashel

 Lemache Maigualema Erick Alexander

 Telenchana Medranda Jennifer Andrea

 Yaucán Buñay Claudio Fred

Fecha: 14-01-2024

Cuestionario

1. Qué pruebas se incluyen en el Perfil Glicémico, ¿cuáles son los valores de

referencia de cada uno de ellos en pacientes geriátricos, neonatos, pediátricos,

adultos hombres y mujeres?

El perfil glicémico, comprende varias pruebas para evaluar los niveles de glucosa en

sangre. Los valores de referencia pueden variar según la edad y el sexo. A continuación, se

mencionan algunas pruebas comunes incluidas en el perfil glicémico y rangos de referencia

aproximados. (3)
 Glucosa en Ayunas (GA):

 Rango Normal:

 Adultos: 70-100 mg/dL.

 Geriátricos: Similar a adultos.

 Neonatos y pediátricos: Varía según la edad.

Prueba de Hemoglobina A1c (HbA1c):

 Rango Normal:

 Adultos: Menos del 5.7%.

 Geriátricos: Puede ser ligeramente más alto.

 Neonatos y pediátricos: No se utiliza rutinariamente.

Prueba de Tolerancia a la Glucosa Oral (TTGO):

 Rango Normal:

 2 horas después de 75g de glucosa:

 Menos de 140 mg/dL.

Glucosa Posprandial (2 horas después de comer):

 Rango Normal:

 Menos de 140 mg/dL.

2. ¿Qué es la hemoglobina glucosilada, en qué casos se realiza cuáles son sus valores

de referencia?

La hemoglobina glucosilada, también conocida como hemoglobina A1c o HbA1c, es

una forma de hemoglobina que se forma cuando la glucosa en la sangre se une de

manera irreversible a la hemoglobina. Esta unión refleja el promedio de los niveles de

glucosa en sangre durante un período de aproximadamente 2 a 3 meses, ya que es el

tiempo de vida promedio de los glóbulos rojos. (4)

 Casos en los que se realiza la prueba:

Diagnóstico y Monitoreo de Diabetes: La prueba de HbA1c se realiza para diagnosticar

la diabetes y evaluar el control glucémico en personas con diabetes tipo 1 y tipo 2. (4)

Evaluación del Tratamiento: Se utiliza para evaluar la eficacia de los cambios en la

medicación o el estilo de vida en el control del azúcar en sangre. (4)

Valores de Referencia:

 Rango Normal: Menos del 5.7%.

 Prediabetes: 5.7% a 6.4%.

 Diabetes: 6.5% o más.

3. Es posible realizar el hemoglucotest en todo tipo de pacientes SI o No?, Justifique

su respuesta.

El hemoglucotest, se puede realizar en la mayoría de los pacientes, pero existen

consideraciones y situaciones específicas que pueden influir en su aplicabilidad. (5)

 Adultos y Niños: La prueba de glucosa en sangre capilar se puede realizar en

adultos y niños para evaluar los niveles de glucosa en sangre. (5)

 Pacientes con Diabetes: Es una herramienta fundamental para el monitoreo

regular de los niveles de glucosa en personas con diabetes, permitiendo ajustes

rápidos en la gestión del tratamiento. (5)

 Embarazadas con Diabetes Gestacional: También se utiliza en mujeres

embarazadas para controlar los niveles de glucosa, especialmente en casos de

diabetes gestacional. (5)

 Consideraciones:

 Condiciones Médicas Específicas: Puede haber condiciones médicas

específicas que limiten la capacidad de algunos pacientes para someterse a

esta prueba, como ciertos trastornos de la sangre o de la piel en el sitio de

punción. (5)

 Incapacidad para Manejar el Dispositivo: Algunos pacientes, como

aquellos con discapacidades cognitivas o problemas de destreza manual,

pueden tener dificultades para realizar la prueba por sí mismos. (5)

 Necesidad de Coordinación: La capacidad del paciente para seguir las

instrucciones y cooperar es esencial para obtener resultados precisos. (5)

En general, el hemoglucotest es una herramienta valiosa para medir los niveles de

glucosa en sangre y se puede realizar en una variedad de pacientes. Sin embargo, la

evaluación de la idoneidad de la prueba debe basarse en las circunstancias específicas

de cada individuo y debe ser supervisada por un profesional de la salud. La precisión

y fiabilidad de los resultados dependen en gran medida de la técnica adecuada y la

cooperación del paciente. (5)

4. En qué consiste la prueba de tolerancia de glucosa, en qué casos se realiza?

La prueba de tolerancia a la glucosa oral (PTGO) es un examen que evalúa la

capacidad del cuerpo para manejar la glucosa después de la ingestión de una cantidad

específica de glucosa. Esta prueba mide cómo el organismo procesa el azúcar y es útil

para diagnosticar trastornos relacionados con la regulación del azúcar en sangre, como

la diabetes y la prediabetes. (6)

Procedimiento de la Prueba de Tolerancia a la Glucosa Oral:

o Preparación: El paciente debe ayunar durante al menos 8 horas antes de la

prueba. Es común realizar la prueba por la mañana después de un ayuno

nocturno. (6)

o Toma de Muestra en Ayunas: Se toma una muestra de sangre en ayunas para

medir el nivel de glucosa basal. (6)

o Ingesta de Glucosa: Luego, el paciente consume una solución de glucosa con

una concentración específica de azúcar (generalmente 75 gramos) en un corto

período de tiempo. (6)

o Muestras de Sangre Posteriores: Se toman muestras de sangre en intervalos

específicos, generalmente a los 30, 60, 90 y 120 minutos después de la ingesta

de glucosa. (6)

o Análisis de las Muestras: Cada muestra de sangre se analiza para medir los

niveles de glucosa. La respuesta del cuerpo a la carga de glucosa ayuda a

determinar cómo se maneja el azúcar en sangre. (6)

Casos en los que se Realiza la Prueba de Tolerancia a la Glucosa Oral:

 Diagnóstico de Diabetes: Se realiza para diagnosticar la diabetes si los

niveles de glucosa en sangre en ayunas son normales pero la glucosa después

de la ingesta de glucosa es elevada. (7)

 Diagnóstico de Prediabetes: Puede ayudar a identificar la prediabetes, una

condición en la que los niveles de glucosa son más altos de lo normal pero no

lo suficientemente altos como para diagnosticar diabetes. (7)

 Evaluación de Resistencia a la Insulina: También se utiliza para evaluar la

resistencia a la insulina, una condición en la cual el cuerpo no utiliza

eficazmente la insulina para procesar la glucosa. (7)

 Seguimiento de Tratamientos: En algunos casos, se realiza para evaluar la

eficacia de tratamientos o cambios en el estilo de vida en personas con

diabetes o prediabetes. (7)

Referencia Bibliográfica

1. Guardia V, Kevin C. Determinación de niveles de glicemia [Internet]. UNIVERSIDAD

NACIONAL DE TRUJILLO. 2014 [citado 2024]. Disponible en:

https://dspace.unitru.edu.pe/server/api/core/bitstreams/98a43cd3-ccde-4db2-b913-

8add347ca069/content

2. Lesmes F. Determinacion DE LA Concentracion DE Glucosa POR UN Metodo

Enzimatico Colorimetrico [Internet]. Universidad de Córdoba Colombia. 2020 [citado

2024]. Disponible en: https://www.studocu.com/co/document/universidad-de-cordoba-

colombia/bioquimica/practica-n8-determinacion-de-la-concentracion-de-glucosa-por-

un-metodo-enzimatico-colorimetrico/13585241

3. Asociación Americana de Diabetes. Guía de Práctica Clínica Nacional sobre

Prevención, Diagnóstico y Tratamiento de la Diabetes Mellitus Tipo 2 (DM2)

[Internet]. IntraMed. 2023 [citado 2024]. Disponible en:

https://bancos.salud.gob.ar/sites/default/files/2021-01/guia-nacional-practica-clinica-

diabetes-mellitius-tipo2_version-abreviada.pdf

4. Pinheiro P. ¿QUÉ ES LA PRUEBA DE HEMOGLOBINA GLICOSILADA?

[Internet]. Mdsaude.com. 2023 [citado 2024]. Disponible en:

https://www.mdsaude.com/es/endocrinologia-es/hemoglobina-glicosilada/
5. Cuentas F. El Hemoglucotest [Internet]. Scribd. 2015 [citado 2024]. Disponible en:

https://es.scribd.com/document/290714506/El-Hemoglucotest

6. Cárdenas J, Arroyo L. Prueba de tolerancia oral a la glucosa modificada en puérperas

como diagnóstico retrospectivo de diabetes gestacional [Internet]. Anales de la Facultad

de Medicina. 2004 [citado el 13 de enero de 2024]. Disponible en:

http://www.scielo.org.pe/pdf/afm/v65n1/a02v65n1.pdf

7. Alfaro PA-T, Olmos R, Gatica J, Nauto S. Test de Tolerancia a la Glucosa para

diagnóstico de Diabetes Mellitus tipo 2 y sus estadios previos, experiencia de un Centro

de Salud Primaria de Chile. Estudio preliminar [Internet]. Rev Cient Cienc Méd. 2012

[citado 2024]. Disponible en: http://file:///C:/Users/Usuario/Downloads/v15n1_a05.pdf