LABORATORIO Nº 3.

TÍNCIONES Y MORFOLOGÍA BACTERIANA

OBJETIVOS:
1. Adquirir experiencia en la preparación de extensiones de bacterias para realizar
tinciones.
2. Practicar técnicas de tinciones simples y compuestas en el reconocimiento de estructuras
bacterianas de interés.
3. Manejar correctamente el microscopio en la identificación de las diferentes morfologías
bacterianas.

INTRODUCCIÓN.
Las Tinciones son técnicas muy útiles en Microbiología que permiten mejorar el contraste
de una imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias que
usualmente se utilizan en biología para resaltar estructuras en tejidos.
Las tinciones pueden clasificarse dependiendo de la condición del tejido en in vivo (tinción
supravital) y in vitro (células que han sido removidas de su contexto biológico); también se
pueden clasificar dependiendo de la cantidad de tintes que se empleen en: simples o
compuestas, las simples están basadas en la utilización de un solo tinte con el cual podemos
evaluar solamente morfología. Las tinciones compuestas o especiales están constituidas por
dos o más tintes o reactivos y sirven para clasificar las bacterias u observar características
especiales.
Con las tinciones el médico tiene una herramienta útil y rápida para anticiparse a un
diagnóstico etiológico definitivo.

Clasificación de las bacterias según su forma y agrupación

Las bacterias se pueden clasificar según su morfología individual en cocos, bacilos y
espirilos, según su morfología de agrupación en racimos (Staphylos), cadenas (Streptos), en
pares (diplos) y tétradas.

Cocos o micrococos: Incluyen las bacterias en tamaño variable, cuya forma es esférica u
ovoide y generalmente son aerobios estrictos. Algunas veces estas bacterias tienden a
agruparse. Cuando se presentan asociadas dos bacterias reciben el nombre de diplococos
como por ejemplo el diplococo Neisseria gonorrhoeae que es el agente causal de la
gonorrea, el Pneumococo que es el responsable de la neumonía infecciosa, etc.
Bacilos: Son bacterias que tienen forma de bastoncillo, se pueden encontrar en grupos de
dos denominados diplobacilos, o en cadenas similares a las que presentan los cocos que se
les llama estreptobacilos
El género más representativo de esta morfología lleva el nombre de Bacillus, el cual se
caracteriza por la formación de endosporas.
Espirilos: Son bacterias bacilares, helicoidales con movilidad flagelar, que se clasifican
dentro de las Gram negativas. Para su clasificación taxonómica se utilizan criterios como la
forma de la célula, el tamaño, la flagelación y las relaciones simbióticas entre otras.
Espiropiquetas: Son bacterias filiformes, flexibles, muy largas, que presentan forma de
espiral con diez o más vueltas. En algunas ocasiones con un flagelo en cada extremo (como
por ejemplo el espirilo responsable de la sífilis: Treponema). Habitualmente se hallan en
ambientes acuáticos o en el cuerpo de animales.

Figura 2: morfología de las bacterias de células individual y por agrupación.

MATERIALES:

 Portaobjetos
 Solución salina
 Cultivos de bacterias (Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis, Klebsiella pneumoniae,
Escherichia coli)
 Tintes para las diferentes tinciones (Tinción Gram)
PROCEDIMIENTO.
Parte 1: Tinción Simple
1. Escoja el tinte con el que va a teñir.
2. Coloque la placa sobre la gradilla de tinción y proceda a cubrir la placa de tinte, espere
un minuto y lave con abundante agua.
3. Deje la placa escurriendo sobre papel toalla o seque con poca presión para evitar que se
salga preparado.

ANALIZA Y COMPRENDE
1. ¿Qué utilidad tienen las tinciones simples?
El primero, permite magnificar el tamaño y estructuras de los microorganismos para que sean
visibles al ojo humano y la segunda, permiten hacer visibles a los objetos microscópicos y
transparentes, revelar su forma y tamaño, así como hacer evidente la presencia de estructuras
internas y externas.

2. Investigue algunas tinciones compuestas.

Tinción de Gram: Esta tinción es un procedimiento de gran utilidad empleado en los laboratorios
donde se manejan pruebas microbiológicas. Es defi nida como una tinción diferencial, ya que
utiliza dos colorantes y clasifi ca a las bacterias en dos grandes grupos: bacterias Gram negativas y
bacterias Gram positivas.
Tinción de Wright: La tinción de Wright es una técnica que se emplea generalmente para la
diferenciación de elementos celulares de la sangre y es clasifi cada como una tinción
policromática, dado que puede teñir compuestos ácidos o básicos presentes en una célula.
Tinción de Ziehl-Neelsen: La tinción de Ziehl-Neelsen es la técnica comúnmente usada en el
diagnóstico rutinario de tuberculosis.22,23 Es una técnica rápida, fácil y de bajo costo,24 lo que
permite que se pueda realizar en casi cualquier laboratorio clínico.
Tinción negativa: La tinción negativa fue desarrollada originalmente para microscopia de luz con
el fi n de rodear y delinear las bacterias no teñidas u otros materiales biológicos.

3. ¿Qué utilidad tiene conocer la morfología de una bacteria?

Permite, entre otras cosas, evaluar la calidad de la muestra y es útil en la observación de la
presencia de bacterias, disposición y su movilidad, así como la existencia de estructuras no
bacterianas como levaduras, micelios de hongos filamentosos, otros parásitos y células.

4. ¿Qué son flagelos perítricos, monotricos, anfítricos y atricos?

flagelos perítricos: bacterias que poseen muchos flagelos rodeando su contorno.
Flagelos monotricos: bacterias que poseen un solo flagelo
Flagelos anfítricos: tienen un solo flagelo en cada uno de los dos extremos opuestos (un solo
flagelo opera a la vez, permitiendo a la bacteria revertir rápidamente el movimiento cambiando el
flagelo que está activo).

BIBLIOGRAFÍA

 Prescott, L.; Harley, J.; Klein, D. 2004. Microbiología. Quinta edición. McGraw-Hill-
Interamericana, España.1240 pp.